一、枸杞子对老龄雄性大鼠血中睾酮浓度的影响（论文文献综述）
涂玥,倪光夏,万毅刚,黄煌,刘不悔,房其军,王美子,陈佳鑫,岳靓,李姿霖,CHONG Fee-lan[1]（2021）在《经典名方及其有效成分调节免疫衰老的作用机制研究进展》文中研究指明伴随着机体衰老,免疫系统会发生一系列变化。这一类衰老相关性免疫系统改变被称为"免疫衰老",其病变主要表现在细胞免疫上。研究表明,参与调节免疫衰老的免疫细胞包括固有免疫细胞和适应免疫细胞,前者包括"中性粒细胞、单核/巨噬细胞、髓样抑制细胞、树突状细胞及自然杀伤细胞"等,其作用机制涉及细胞数量、吞噬能力、趋化性、黏附力及Toll样受体（TLR）功能、抗原提呈能力、巨噬细胞极化、细胞毒性、迁移能力等;后者包括"T淋巴细胞和B淋巴细胞"等,其作用机制涉及细胞发育、增殖、分化能力、细胞数量、端粒酶活性、自身反应性抗体等。免疫衰老不仅是机体衰老的体现,更是中、西药物延缓衰老的重要靶标。近年来,国内外中医药学者相继发现一些经典名方（简称"经方"）及其有效成分,如独参汤及其有效成分人参叶总皂苷、生脉饮及其有效成分安五脂素、人参茎叶总皂苷等,能够靶向免疫细胞,干预其分子调控机制,进而发挥调节免疫衰老的作用。此外,经方调节免疫衰老还与自噬密切相关。"祛瘀生新法"代表性经方——大黄?虫丸能延缓D-半乳糖诱导的小鼠肾脏衰老,其作用机制不仅在于调节胸腺免疫细胞数量和活性,还能改善肾脏中自噬标志性蛋白和炎症性细胞因子的表达。因此,"基于免疫衰老的作用机制探究经方及其有效成分的干预效果"将会成为抗衰老药物研究和开发的新方向。
王晨[2]（2021）在《“化瘀解毒生精方”治疗精索静脉曲张性弱精子性不育症的临床研究》文中认为
陶爱恩,赵飞亚,钱金栿,段宝忠,夏从龙[3]（2021）在《黄精属植物治疗肾精亏虚相关疾病的本草学和药理作用与药效物质研究进展》文中研究表明黄精作为我国传统常用的补肾固精中药,主要含有多糖、皂苷和黄酮等成分,具有抗骨质疏松、抗类风湿、抗糖尿病、抗衰老、抗老年痴呆、抗脑血管性疾病、抗精神病、调血脂、免疫调节和治疗不孕不育等作用。通过系统地整理和分析该属植物治疗肾精亏虚相关疾病的本草学、药理作用和物质基础,以期为其功能性药物的研发提供参考。
朱昊如[4]（2020）在《基于衰老分子机制探讨脾虚证-补中益气汤相关的生物学基础》文中进行了进一步梳理基于“方证相关”理论剖析复杂方证关系是目前方剂学界面临的主要问题之一,而网络药理学为研究方证关系的现代内涵提供了新方法。中医学认为衰老与脾虚证关系密切,但目前脾虚与衰老关系的分子生物学研究几未有见,脾虚-衰老的分子机制尚不清楚。因此本研究基于方证相关理论,以补中益气汤与脾气虚证高度关联为逻辑依据,从衰老相立论,利用现代网络药理学方法探查补中益气汤分子药理网络;进一步根据该方的作用预测,在整体-系统-分子水平上,动态观察脾虚证模型演变过程中衰老相关病理生理及生物分子变化,以及补中益气汤的相关效用机制。论文分为文献综述和实验研究两部分。文献综述主要涉及近年“方证相关”的研究进展、脾虚证-衰老相关研究进展及补中益气汤现代研究进展三方面内容;实验研究主要包括脾虚证分子内涵与补中益气汤作用相关的网络药理学研究、脾虚证演变与衰老相关的探讨、以及从衰老探察脾虚证现代内涵及补中益气汤效用机制三部分。研究一脾虚证分子内涵与补中益气汤作用相关的网络药理学研究方法:利用TCMSP平台,分别检索补中益气汤组方药味（黄芪、白术、升麻、陈皮、柴胡、人参、甘草、当归、生姜、大枣）活性成分及其关联靶点,利用STRING平台建立靶点PPI网络并导入cytoscape,利用MCODE插件对PPI网络进行聚类来提取核心靶点簇后,使用ClueGO插件对核心靶点进行GO及KEGG富集,提取主要病/生理功能及生物分子信号通路。结果:①筛选得到补中益气汤活性成分143种,关联靶点162个,其中155个靶点之间存在PPI关系,聚类得到核心簇9个。②富集得到GO条目13组,包括NO生物合成、促进平滑肌细胞增殖等;富集得到KEGG条目12组,包括AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、松弛素信号通路等。结论:脾虚证-补中益气汤的关联机制内涵可能涉及由AGE-RAGE通路、IL-17通路及松弛素通路主导的,通过介导核转录因子NF-kB来调节促炎细胞因子分泌的炎性调节过程。研究二脾虚证演变与衰老相关的探讨方法:Wistar大鼠随机分为对照组与模型组,每组各18只。对照组常规饲养,模型组采用“游泳力竭+饥饱失常”法复制脾虚模型。各组大鼠:①隔日观察外观行为评分,每日称量摄食量,每周末观测体质量及粪便含水率。②于实验第2-4周末进行强迫负重游泳实验,测定负重游泳时长;实验第3、4周进行Morris水迷宫实验,测定定位航行实验逃避潜伏期和空间探索实验的游泳速度、潜伏期、平台穿梭次数、目标象限路程比及探索路线。③于实验第14、21、28d灌服D-木糖溶液后收集尿液,ELISA法测定尿D-木糖含量,计算D-木糖排泄率。于实验第15、22、29d随机分三批麻醉处杀:取脾脏、胸腺称重计算脏器指数;取血清,利用ELISA法测定GAS、MTL、AGEs、BDNF、VIP、IL-1β、IL-6、TNF-α水平,利用生化法测定CRP水平;取海马,利用ELISA法测定AGEs、Aβ1-40、Aβ1-42、glu、GABA、IL-1β、IL-6、TNF-α 水平。结果:较之于对照组,模型组大鼠:①a.实验第2-4周皮肤毛发、行为状态、活跃程度、睡眠状态积分显着升高（P<0.01）;第1-4周体质量、摄食量显着降低（P<0.01）;第3、4周粪便含水率升高（P<0.05）。b.实验第4周负重游泳时间显着降低（P<0.01）。c.实验第4周脾脏指数与胸腺指数显着降低（P<0.01）;第2-4周尿D-木糖排泄率显着降低（P<0.01）,血清VIP水平降低;第3、4周血清GAS水平降低;第4周血清MTL水平降低（P<0.05或0.01）。②a.实验第3、4周空间探索潜伏期升高、穿越平台次数减少、目标象限路程比降低（P<0.05）,探索路线呈随机策略。b.实验第2-4周海马GABA水平降低;第3、4周海马IL-1β水平显着升高;第4周海马Aβ140、血清BDNF水平降低（P<0.05 或 0.01）,海马 AGEs、Aβ1-42/Aβ1-40、glu、IL-6、TNF-α 水平升高（P<0.05或0.01）。c.实验第2周血清IL-6、TNF-α水平升高（P<0.05或0.01）;第4周血清IL-1β、TNF-α水平显着降低（P<0.01）。结论:脾虚大鼠模型演化过程逐渐出现学习记忆能力下降的脑衰老表现,其分子特征体现为海马毒性蛋白累积、炎性水平升高与递质稳态兴奋性失衡。研究三从衰老探察脾虚证现代内涵及补中益气汤效用机制方法:Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量给药组与高剂量给药组,每组各8只。对照组常规饲养,模型组及各给药组按研究二方法持续造模4周,低、高剂量给药组自第15d至第28d起分别按5.85g/kg/d、17.55g/kg/d灌服补中益气汤水煎液。各组大鼠:①按研究二时间及方法观测外观行为评分、摄食量、体质量及粪便含水率。②按研究二方法,于实验第4周末进行强迫负重游泳实验;第4周进行Morris水迷宫实验。③实验第28d按研究二方法测定尿D-木糖排泄率。于实验第29d麻醉处杀后:取脾脏、胸腺计算脏器指数;取血清,ELISA法测定GAS、MTL、BDNF、VIP、IL-1β、IL-6、TNF-α 水平;取海马,ELISA 法测定 AGEs、Aβ1-40、Aβ1-42、glu、GABA、IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1 水平,免疫组化法测定 p65NF-kB,Western-blot 测定 p65NF-kB、p-p65NF-kB、RAGE、Iba-1,免疫荧光双标法测定NeuN+cleavedcaspase-3、Iba-1+TNF-α、Iba-1+TGF-β1共表达;取下丘脑,免疫组化法测定p65 NF-kB,Western-blot测定p65 NF-kB、p-p65 NF-kB、Iba-1。结果:①较之于对照组,模型组大鼠:a.皮肤毛发、行为状态、活跃程度、睡眠状态积分升高（P<0.05或0.01）,体质量、摄食量显着降低（P<0.01）;粪便含水率升高（P<0.05）。b.负重游泳时间显着降低（P<0.01）;尿D-木糖排泄率,血清GAS、MTL水平显着降低（P<0.01）;血清VIP水平显着升高（P<0.01）。c.空间探索潜伏期显着增加（P<0.01）,穿梭平台次数与目标象限路程比均降低（P<0.05）,空间探索路线呈随机式策略。d.血清BDNF水平降低（P<0.05）;海马AGEs、Aβ1-42、Aβ1-42/Aβ1-40、RAGE、glu、Iba-1、IL-1β、IL-6、TNF-α 水平上升（P<0.05 或 0.01）;p65NF-kB 表达量及活化程度上升（P<0.05或0.01）,GABA、TGF-β1水平降低（P<0.05或0.01）,NeuN 与 cleaved caspase3、Iba-1 与 TNF-α 共表达数增加（P<0.05 或 0.01）。e.下丘脑Iba-1表达量、p65NF-kB表达量及其活化程度显着上升（P<0.01）,GnRH表达量显着降低（P<0.01）。f.脾脏及胸腺指数显着降低（P<0.01）,血清IL-1β、TNF-α及TGF-β1水平显着降低（P<0.01）。②较之于模型组,各给药组大鼠:a.一般表征行为积分、体质量、摄食量、粪便含水率均有不同程度改善（P<0.05或0.01）。b.负重游泳时间显着增加（P<0.01）;尿D-木糖排泄率,血清GAS、MTL水平均升高（P<0.05或0.01）;血清VIP水平均显着降低（P<0.01）。c.空间探索潜伏期显着缩短（P<0.01）,空间探索路线呈趋向式策略;高剂量组大鼠穿梭平台次数增加（P<0.05）。d.血清BDNF水平升高（P<0.05）;海马NeuN与cleaved caspase3、Iba-1与TNF-α共表达数均降低（P<0.05）,Iba-1与TGF-β1共表达数均增加（P<0.05或0.01）;p65NF-kB表达量及活化程度均下调（P<0.05 或 0.01）;AGEs、Aβ1-42、RAGE、glu、Iba-1、IL-1β 水平均降低（P<0.05或0.01）,其中低剂量组大鼠海马IL-6与TNF-α水平显着降低（P<0.01）;TGF-β1水平显着升高（P<0.01）。e.下丘脑Iba-1表达量、p65NF-kB表达量及其活化程度降低（P<0.05或0.01）,GnRH表达量均升高（P<0.05）。f.高剂量组大鼠胸腺指数、血清IL-1β及TNF-α水平均升高（P<0.05或0.01）;各给药组大鼠血清TGF-β1水平均升高（P<0.05 或 0.01）,IL-6 水平显着降低（P<0.01）。结论:脾虚大鼠同时存在海马炎性衰老与外循环免疫衰老,AGEs/RAGE/NF-kB通路介导的小胶质细胞M1型激活与神经元凋亡可能是脾虚大鼠出现脑衰老表现的潜在机制。补中益气汤具有良好的健脾抗衰效用,其机制可能涉及抑制海马AGEs/RAGE/NF-kB信号通路过度激活及诱导小胶质细胞向M2型转化来保护神经元。本研究将方证相关理论与网络药理学分析手段相结合,以衰老为切入点,从整体-器官-细胞-分子层面系统探察了补中益气汤-脾虚证关联的机制,为探索中医方-证关联的生物学基础提供了新思路。
闵潇[5]（2020）在《益精方调控慢性缺氧诱导的睾丸Leydig细胞凋亡治疗LOH的机制研究》文中研究说明研究目的:1.研究症状性迟发性性腺功能减退症（symptomatic late onset hypogonadism,sLOH）患者的中医体质证候。2.研究人体慢性间歇性缺氧与sLOH之间的相关性。3.构建及评判慢性间歇性缺氧诱发迟发性性腺功能减退症（late onsethypogonadism,LOH）动物模型。4.传承名老中医经验,研究以补肾活血为主要治则的“益精方”对慢性间歇性缺氧诱导的LOH模型大鼠治疗效果;从睾丸间质细胞（Leydig）凋亡、睾丸病理组织学改变及Leydig细胞超微结构改变探讨其作用机制。研究方法:第一部分:采用横断面研究的方法,以自填问卷的形式,收集在中国中医科学院广安门医院男科就诊的伴有鼾眠表现的sLOH患者的病例资料。采用Epworth嗜睡量表、STOP-bang问卷测评嗜睡状态,采用精简版AMS（cAMS）筛查量表测评LOH症状,中医体质分类与判定表测评中医体质,测定静脉血男性激素和乳酸。运用Pearson相关性分析,对血乳酸、性激素与sLOH症状、嗜睡状态进行相关性分析。第二部分:运用Attendor动物气体控制系统（Pro版）,模拟慢性间歇性低氧模式,对50只40周龄的退役SD种鼠进行每日4小时,连续30天的低氧干预,设为模型组;设10只40周龄的退役SD种鼠为对照组;设10只8周龄的SD大鼠为正常组。在造模第15天、30天时,随机选取模型组中的10只大鼠,与对照组、正常组大鼠,采血,进行血清总睾酮（TT）、游离睾酮（FT）和乳酸检测。在造模第30天时,随机选取模型组中10只大鼠与对照组、正常组大鼠,进行大鼠悬尾实验和大鼠强迫游泳实验;结合血清TT、FT和乳酸水平评估造模效果。第三部分:选取造模成功的32只LOH模型大鼠,随机分成4组:模型组,益精方高、中、低剂量组,每组8只大鼠。继续运用Attendor动物气体控制系统（Pro版）对大鼠进行慢性间歇性低氧的干预,为期4周,同时灌胃4周。模型组大鼠按体重灌胃蒸馏水。低剂量组予以0.324g/mL的益精方水煎剂;中剂量组予以0.75g/mL的益精方水煎剂;高剂量组予以1.5g/mL的益精方水煎剂。4周结束后,采血,ELISA法测血清TT、FT;比色分析法测血乳酸值;将大鼠断颈处死,计算大鼠睾丸指数;细胞流式术检测睾丸Leydig细胞凋亡率;Western印迹检测睾丸组织Caspase-3、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测睾丸组织Caspase-3、Bcl-2、Bax的mRNA表达水平;分别以光学显微镜和透射电子显微镜观察睾丸病理组织学改变与超微结构的变化。研究结果:第一部分:sLOH患者排名前三的中医体质证候为气虚、痰湿、血瘀。41例sLOH患者完成了男性激素和乳酸检测,其中20例乳酸水平正常,21例乳酸水平高于正常,异常乳酸值范围为2.15-3.18（2.60±0.29）mmol/L,sLOH患者血乳酸异常比例约为51%。其中乳酸水平正常者气虚为主,乳酸水平增高者痰湿为主,但无论乳酸水平正常与否,血瘀均是sLOH患者比较突出的体质证候。Pearson相关性分析显示:Epworth评分与STOP-bang评分之间呈正向的强相关,r=0.681;cAMS评分与Epworth评分之间呈正向的弱相关,r=0.394;cAMS评分与STOP-bang评分之间呈正向的弱相关,r=0.311。Epworth评分与cAMS性功能症状分呈正向弱相关,r=0.317;Epworth评分与cAMS自主神经紊乱症状分呈正向中等强度相关,r=0.531;Epworth评分与cAMS心理和躯体症状分呈正向中等强度相关,r=0.460;STOP-bang评分与cAMS性功能症状分呈正向弱相关,r=0.357;STOP-bang评分与cAMS自主神经紊乱症状分呈正向弱相关,r=0.266;STOP-bang评分与cAMS心理和躯体症状分呈正向中等强度相关,r=0.434。乳酸正常sLOH组与乳酸升高sLOH组两组间,在年龄、Epworth嗜睡量表评分、STOP-bang问卷评分、cAMS评分、男性激素各项指标及TSI指数上的差异无统计学意义（P>0.05）;缺氧高中低风险3组,年龄在缺氧中风险组和缺氧低风险组之间存在统计学差异（P<0.05）,血雄烯二酮在缺氧高风险组和缺氧低风险组之间存在统计学差异（P<0.05）,其余指标在各组之间的差异无统计学意义（P>0.05）。第二部分:与正常组和对照组相比,模型组大鼠造模第15天、第30天时2次检测的血清TT、FT水平均显着下降（P<0.05）,差异具有统计学意义。与正常组和对照组相比,模型组大鼠2次检测的血乳酸水平均显着增高（P<0.05）,差异具有统计学意义。造模第30天时悬尾实验:与正常组大鼠相比,对照组和模型组6min内不动时间均明显延长（P<0.05）,具有统计学意义;模型组与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）。游泳实验:与正常组和对照组相比,模型组大鼠游泳至力竭的时间均明显缩短（P<0.05）,差异具有统计学意义。依据LOH动物模型判定办法,以慢性间歇性缺氧为干预手段进行LOH动物模型构建,造模成功率为68%,造模途中死亡率为32%。第三部分:血TT、FT水平:与模型组相比,益精方低、中、高剂量组大鼠血TT、FT水平均显着增高（P<0.05）,呈剂量依赖性。血乳酸水平:与模型组相比,益精方低、中、高剂量组大鼠血乳酸水平均显着下降（P<0.05）,呈剂量依赖性。睾丸Leydig细胞凋亡率:与模型组相比,益精方中、高剂量组大鼠Leydig细胞凋亡率均显着下降（P<0.01）,具有显着统计学意义;益精方低剂量组与模型组相比,P>0.05,无明显统计学意义。Caspase-3蛋白表达水平方面:与模型组相比,低、中、高剂量组均显着下调（P<0.01）,低剂量组VS中剂量组,中剂量组VS高剂量组,P均>0.05;低剂量组VS高剂量组,P<0.01。Bcl-2蛋白表达水平方面:与模型组相比,益精方高剂量组Bcl-2蛋白表达水平显着上调（P<0.05）,差异具有统计学意义;低、中剂量组VS模型组,P均>0.05,低剂量组VS高剂量组,P<0.05。Bax蛋白表达水平方面:与模型组相比,益精方中、高剂量组Bax蛋白表达水平均显着下调（P<0.01）,差异具有显着统计学意义。低剂量组VS模型组,P>0.05;低剂量组VS高剂量组,P<0.05;中剂量组VS高剂量组,P>0.05。Caspase-3的mRNA表达水平方面:与模型组相比,低、中、高剂量组Caspase-3的mRNA表达水平均显着下调（P<0.05）,差异具有统计学意义;低剂量组VS高剂量组（P<0.01）,其余剂量组之间P均>0.05。Bcl-2的mRNA表达水平方面:与模型组相比,益精方高剂量组Bcl-2的mRNA表达水平显着上调（P<0.05）,差异具有统计学意义;中、低剂量组VS模型组（P>0.05）;低剂量组VS高剂量组（P<0.05）。Bax的mRNA表达水平方面:与模型组相比,益精方中、高剂量组Bax的mRNA表达水平均显着下调（P<0.01）,差异具有显着统计学意义;低剂量组VS高剂量组（P<0.05）,其余剂量组之间P均>0.05。光学显微镜下睾丸Leydig细胞数量:与模型组相比,益精方低、中、高剂量组均有升高,但低、中、高剂量组组间差异不大。发生凋亡改变的Leydig细胞数量,益精方低、中、高剂量组均少于模型组。益精方低、中、高剂量组Leydig细胞形态优于模型组,其中高、中剂量组Leydig细胞形态趋近正常。透射电子显微镜下,4组大鼠的睾丸Leydig细胞超微结构在脂滴形成上有所差异。研究结论:1.在伴有鼾眠表现的sLOH患者中存在血乳酸异常升高;sLOH患者缺氧的风险越高,其LOH症状越重;缺氧对sLOH患者自主神经紊乱症状、心理和躯体症状的影响较明显,对男性激素的影响相对不明显。提示慢性间歇性缺氧可能是LOH的重要潜在危险因素。sLOH患者的中医体质证候以气虚、痰湿、血瘀为主,其中乳酸水平正常者倾向于气虚,乳酸水平增高者倾向于痰湿。提示肾气虚夹痰湿、血瘀可能是sLOH较为关键的中医病因病机。2.增龄与慢性间歇性缺氧,都是大鼠血TT、FT水平下降的危险因素;增龄加上缺氧,较单一的增龄因素,对大鼠血TT、FT水平的影响更为显着。以慢性间歇性缺氧为干预手段进行LOH动物模型构建,造模成功率较高,造模方法切实可行。3.益精方能明显提高慢性间歇性缺氧诱导的LOH模型大鼠血TT、FT水平,降低血乳酸水平,降低睾丸Leydig细胞的凋亡率。其可能的作用机制在于:1)下调LOH模型大鼠睾丸组织中的Caspase-3、Bax的基因和蛋白表达,上调Bcl-2的基因和蛋白表达,调控了睾丸Leydig细胞的凋亡;2)改善LOH模型大鼠氧代谢,减轻乳酸蓄积,恢复雄激素合成睾丸内调节的正常环境,促进睾丸Leydig细胞分泌功能。
管斯琪[6]（2020）在《补肾生精法治疗少弱精子症及其调控生精细胞增殖与凋亡的研究》文中进行了进一步梳理目的人类生育力逐年降低已经成为影响发展的医学和社会学问题,男性因素导致的不孕不育占了 40%-50%,其中少弱精子症是男性不育症最常见的病因之一。对于特发性精液异常,西药治疗效果欠佳,手术治疗的应用范围存在一定局限性,而中医药具有较好的疗效。菟枸助育汤是在五子衍宗丸的基础上加减化裁而来,临床用于治疗少弱精子症逾20年,但目前尚无相关的研究。故本研究设计临床试验,观察评价菟枸助育汤对男性不育少弱精子症患者的临床疗效,并设计动物实验探究菟枸助育汤的核心药对“菟丝子-枸杞子”对生精功能障碍模型大鼠生精功能的影响,并对其具体的作用机制进行探讨。方法临床研究:收集男性不育少弱精子症76例,采用无病例对照研究的方法,观察菟枸助育汤对少精子症和弱精子症受试者精液质量（包括精液液化状态、精液量、精子活动率、精子浓度和总数等指标）和中医证候评分的干预作用。入组时,采集所有受试者的一般信息、病史、合并用药、体格检查等相关资料。研究第1天起每日给予入组的受试者菟枸助育汤中药免煎颗粒治疗,疗程共90天,分别于第0、30、60、90天各进行一次访视,记录受试者的精液常规结果和中医证候评分,同时进行安全性观察,记录各类不良事件,填写病例报告表,每次访视时严格进行脱落、剔除的评估,最后统计所有数据。实验研究:1.将78只SD大鼠随机分为空白对照组（NC组）、模型对照组（GTW组）、左卡尼汀组（GTW+LEV组）、菟丝子-枸杞子药对组（GTW+SCFL组）和药对+抑制剂组（LY+SCFL组）。2.除NC组以外,其余各组用雷公藤多苷（40mg/kg）灌胃4周,建立生精功能障碍模型。3.第5周起GTW+LEV组（予10ml/kg左卡尼汀灌胃）、GTW+SCFL组（予菟丝子-枸杞子中药液灌胃）和LY+SCFL组（予菟丝子-枸杞子中药液灌胃）每日分别予以相应药物干预,LY+SCFL组于第1周起每周1次尾静脉注射PI3K抑制剂。4.实验8周后测定各组大鼠精子质量、附睾/睾丸脏器系数,检测性激素、抑制素B、附睾肉毒碱的水平,光镜下和透射电镜下观察睾丸的组织病理形态和细胞的超微结构,用免疫组化法、western blot以及Real-Time PCR技术检测大鼠睾丸组织SCF、c-kit、PI3K、p-Akt、Bad、Bcl-2 和 Bax 蛋白及 mRNA 的表达。结果临床研究:本研究共完成临床病例76例,纳入研究的男性不育少精子症和弱精子症患者经过菟枸助育汤治疗后,总体的精液质量中液化状态、PR精子百分比、PR+NP精子百分比、精子浓度和精子总数等疗效性指标显着改善,具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;中医证候评分随着治疗进行有了明显的下降（P<0.05或P<0.01）;疗效判定为“痊愈”的11例,“显效”29例,“有效”32例,“无效”4例,总有效率为94.74%。整个观察期间脱落病例4例,无剔除病例,未见任何不良反应报告。实验研究:经菟丝子-枸杞子干预后的GTW+SCFL组与GTW组相比,大鼠的一般状态、附睾脏器系数、精子质量、卵泡生成素（FSH）、黄体生成素（LH）、泌乳素（PRL）和附睾肉毒碱均有显着的改善,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;睾丸组织病理形态及细胞的超微结构观察发现,GTW+SCFL组与GTW组比较,生精小管结构、排列较正常,生精细胞明显增多,形态改善,内含的线粒体等细胞器增多;免疫组化、western blot和Real-Time PCR结果显示,与GTW组比较,GTW+SCFL组大鼠睾丸SCF、c-kit、PI3K、p-Akt和Bcl-2蛋白含量升高,Bax、Bad蛋白表达下降（P<0.05或P<0.01）;LY+SCFL组与GTW+SCFL组相比,SCF、c-kit和PI3K的表达无明显差异,p-Akt和Bcl-2表达减少,Bad和Bax的蛋白表达增加（p<0.05或P<0.01）。结论1.菟枸助育汤在改善男性不育少弱精子症患者的精液参数和肾虚证候中医评分方面疗效显着,能提高患者的生精功能。2.菟枸助育汤中的核心药对“菟丝子-枸杞子”可以改善生精功能障碍模型大鼠一般状态、附睾脏器系数、精子质量、FSH、LH、PRL和附睾肉毒碱,并对雷公藤多苷致睾丸组织和生精细胞的形态结构和功能的损伤具有较好的修复作用。3.“菟丝子-枸杞子”药对可以有效调控模型大鼠睾丸组织SCF、c-kit、PI3K、p-Akt、BAD、Bcl-2、Bax 蛋白及其 mRNA 的表达,通过调控 SCF/c-kit-PI3K-Bcl-2 信号通路促进生精细胞增殖和抑制生精细胞凋亡的作用。综上,菟枸助育汤可有效提高男性不育少弱精子症患者的生精功能,临床疗效显着,其作用机制可能是通过SCF/c-kit--PI3K--Bcl-2通路调控生精细胞增殖和凋亡来实现的。
邓文桢[7]（2020）在《加味四二五合方联合芬吗通治疗化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的疗效观察》文中提出【目的】观察加味四二五合方联合西药芬吗通治疗化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的临床疗效,包括月经情况、全身症状、激素水平等。同时观察血常规、尿常规、肝肾功能、心电图等检测药物安全性。明确加味四二五合方联合芬吗通改善化疗源性早发性卵巢功能不全的可行性和有效性,并探讨其可能的作用机理,为中西医结合治疗化疗源性早发性卵巢功能不全找到更有效、更安全、更便捷的方法,为女性肿瘤患者提高生活质量带来更多可能性。【方法】按照随机数字表法将收集到的符合纳入标准的60例化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的患者,分为治疗组（加味四二五合方联合芬吗通组）30例和对照组（芬吗通组）30例。对照组:芬吗通（2/10mg雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片复合包装）,每日一片,先服砖红片14天,再服黄片14天,连续28天为一个疗程,月经来的第3天继续服用下一疗程;如月经不来潮,则连续服用下一疗程芬吗通。治疗组:在上述对照组基础上加服加味四二五合方,每天1剂,每周期不间断服用24天。如月经来潮则停服,待月经来的第5天继续服用一周期;如月经不来潮,则连续服用下一周期中药。连续服用3个月经周期,观察两组患者治疗前后的月经情况、全身症状、激素水平等的变化。【结果】治疗组治疗痊愈率为0,显着有效率为13.33%,有效率为80.00%,总体有效率为93.33%。对照组治疗痊愈率为0,显着有效率为3.33%,有效率为70.00%,总体有效率为73.33%。两组治疗后疗效比较（P<0.05）有统计学意义。治疗后两组中医证候疗效及总积分比较（P<0.05）有统计学意义,两组在治疗前后比较（P<0.05）也有统计学意义,治疗组优于对照组。两组激素水平,治疗后比较（P>0.05）无统计学意义,治疗前后比较（P<0.05）有统计学意义,治疗组与对照组均有效。治疗过程中患者未出现不良反应及药物毒副作用。【结论】加味四二五合方联合芬吗通能有效改善化疗源性早发性卵巢功能不全患者的月经情况以及临床症状和激素水平。治疗组和对照组均能改善患者月经,从全身症状和整体疗效来看,治疗组整体疗效优于对照组。治疗组未见明显不良反应,安全可靠,可推广应用于临床。
陈恂[8]（2020）在《柴芪汤通过细胞自噬改善代谢综合征血管内皮损伤的功效和机制研究》文中研究表明研究意义:代谢综合征是全球范围内热点关注的公共卫生问题,也是心脑血管病的前奏。血管内皮损伤是其中的始动环节。因此,找寻缓解甚至扭转代谢综合征血管内皮损伤的方法至关重要。近几年研究结果表明,代谢综合征血管内皮损伤与细胞自噬关系密切,抑制细胞自噬可以促进血管内皮损伤。我们前期的实验结果表明柴芪汤可有效改善代谢综合征血管内皮损伤,进一步分析发现其改善作用与mTOR自噬信号通路呈正向环路的NF-κ B信号通路相关。因此,本研究拟从细胞自噬角度,研究柴芪汤在改善代谢综合征血管内皮损伤时对Beclin-1、LC3、p62等相关分子表达的影响,来验证柴苗汤可通过上调细胞自噬来改善代谢综合征血管内皮损伤。以充实柴芪汤防治代谢综合征及相关血管系统并发症的作用机制,并为临床合理应用柴芪汤提供理论依据,丰富中医防治代谢综合征的理论基础。研究目的:明确柴芪汤通过调控细胞自噬改善代谢综合征血管内皮损伤的作用机制研究方法:（1）用高盐高脂高糖饲料喂养SD雄性大鼠制备代谢综合征血管损伤动物模型,用生理学方法联合放免法检测代谢综合征各组分指标;用HE染色、Masson染色、油红o染色联合Elisa、PCR、WB检测血清和组织中NO、ET-1含量,评价血管内皮损伤情况。（2）用高盐高脂高糖饲料喂养SD雄性大鼠制备代谢综合征血管损伤动物模型,用WB 方法检测组织中 LC3B、p62、Beclin-1、mTOR、p-mTOR、AMPK、p-AMPK 含量;用透射电镜观察自噬小体、自噬溶酶体的形态;用激光共聚焦显微镜观察组织LC3B的表达。（3）用低聚葡萄糖+棕榈酸脂联合培养HUVECs制备代谢综合征血管损伤细胞模型,用CCK8检测细胞活性;用Elisa、PCR、WB检测细胞上清和细胞中NO、ET-1含量。（4）用低聚葡萄糖+棕榈酸脂联合培养HUVECs制备代谢综合征血管损伤细胞模型,用 WB 方法检测细胞中 LC3B、p62、Beclin-1、mTOR、p-mTOR、AMPK、p-AMPK 含量;用电镜观察自噬小体、自噬溶酶体的形态;用GFP-mRFP-LC3腺病毒转染,以及DALGreen-DAPRed双染观察细胞自噬小体、自噬溶酶体的表达。研究结果:（1）结合模型大鼠生理指标、血清生化、组织切片及Elisa、WB、PCR结果,高糖高脂高盐饲料喂养8周后Model组大鼠体重、Lee’s指数、体脂率、SBP、血糖和血脂水平均明显高于Control组,血管内皮损伤明显。柴芪汤灌胃8周后可以明显扭转代谢综合征各组分指标异常,可明显减少内膜厚度、胶原纤维和脂滴面积,能降低血清中ET-1含量,增加NO含量,降低组织中ET-1 蛋白和mRNA的表达,增加eNOS磷酸化,增加eNOS mRNA的表达。综合以上结果:在高盐高脂高糖饲料喂养8周可以制备代谢综合征模型大鼠;柴芪汤可以改善代谢综合征相关血管内皮损伤。（2）结合电镜、免疫荧光和WB结果,柴芪汤能增加自噬小体和自噬溶酶体的形成,自噬相关蛋白LC3的表达明显高于Control组和Model组,自噬上游蛋白Beclin-1同样观察到明显增高,自噬底物蛋白p62与自噬水平负相关,组织中p62蛋白的表达明显低于Model组,趋势同自噬激活剂雷帕霉素。在自噬上游信号因子的探索中发现,与Model组相比,柴芪汤能明显减少mTOR的磷酸化,提高AMPK的磷酸化。综合以上结果:柴芪汤能上调组织自噬水平,改善代谢综合征血管内皮损伤,这一作用可能与减少mTOR的磷酸化,增加AMPK的磷酸化有关。（3）结合CCK8结果,d7 10%24h柴芪汤含药血清与d7 10%24h空白血清相比能明显提高细胞活力,差异有统计学意义（P<0.05）,且在柴芪汤含药血清所有条件干预中最接近100%（99.41%）。结合WB、Elisa、PCR结果,柴芪汤含药血清能降低细胞上清中ET-1含量,增加NO含量,降低细胞中ET-1蛋白和mRNA的表达,增加eNOS磷酸化,增加eNOS mRNA的表达。综合以上结果:柴芪汤含药血清能改善高糖高脂培养下HUVECs的细胞损伤。（4）结合电镜、GFP-mRFP-LC3腺病毒转染和WB结果,柴芪汤能增加细胞自噬小体和自噬溶酶体的形成,自噬相关蛋白LC3的表达明显高于Control组和Model组,自噬上游蛋白Beclin-1同样观察到明显增高,自噬底物蛋白p62与自噬水平负相关,细胞中p62蛋白的表达明显低于Model组,趋势同自噬激活剂雷帕霉素。DALGreen-DAPRed双染发现柴芪汤含药血清增加细胞自噬小体和自噬溶酶体的表达在12h、18h、24h均和0h存在显着差异（P<0.05）,且呈时间依赖型。在自噬上游信号因子的探索中发现,与Model组相比,柴芪汤能明显减少mTOR的磷酸化,提高AMPK的磷酸化。综合以上结果:柴芪汤能上调细胞自噬水平,改善代谢综合征血管内皮损伤,这一作用可能与减少mTOR的磷酸化,增加AMPK的磷酸化有关。研究结论:（1）高盐高脂高糖饲料饲养8周能成功制备代谢综合征血管损伤动物模型,柴芪汤能改善代谢综合征模型大鼠血管损伤情况。（2）柴芪汤能上调代谢综合征血管损伤模型大鼠胸主动脉的自噬水平,这一作用可能与AMPK/mTOR通路有关。（3）柴芪汤含药血清能改善高糖高脂培养下HUVECs的细胞损伤。（4）柴芪汤含药血清能随时间增加逐步上调高糖高脂培养下HUVECs细胞自噬水平,这一作用可能与AMPK/mTOR通路有关。（5）结合前期研究,柴芪汤改善代谢综合征各组分异常及血管内皮损伤的功效是多靶点的,这与中医的“整体观”有关,提示中医药临床防治代谢综合征当以“后天之本”为重,从脾论治。
王明月[9]（2020）在《潞党参通过IL-15及其受体调控光老化小鼠皮肤炎症反应作用机制》文中研究表明目的:本研究通过观察中药潞党参对小鼠皮肤组织IL-6、TNF-α、IL-15及其受体、MAPK/ERK1/2信号通路、PI3K/Akt信号通路的影响。探讨潞党参调控小鼠皮肤光老化过程中的作用机制,为医美领域研发新的中药抗衰老产品提供新的实验依据。材料与方法:将90只SPF级昆明小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、潞党参高剂量组、潞党参中剂量组、潞党参低剂量组、VE对照组、Anti-IL-15组、MAPK抑制剂组、PI3K抑制剂组。除了空白对照组之外,其余8组均需进行光老化造模。造模采用UVA+UVB光源,即40w UVA灯管2根,40w UVB灯管2根,将4根灯管并列穿插安装到自制模拟日光箱中,照射小鼠背部皮肤制备光老化模型。用剃毛器将小鼠背部约为1.5×1.5cm2的长毛及绒毛剔除,每隔两至三日剃毛一次,将剃毛后的小鼠放入笼中,同时照射UVA、UVB。每周照射3次,共计14周。造模成功后,采用灌胃给药途径,连续给药4周,每日一次。空白对照组和模型对照组均灌注生理盐水,潞党参的各个组中（包括高剂量组、中剂量组和低剂量组）灌服不同浓度的潞党参,VE组灌服维生素E作为阳性对照物,Anti-IL-15组、MAPK抑制剂组、PI3K抑制剂组三组灌服相应的制剂。于第19周断颈处死全部小鼠,取下小鼠背部正中全层皮肤,置于冰箱内冷冻（-70℃）保存待测。酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠皮肤组织中IL-6、TNF-α、IL-15水平;免疫荧光法（IF）检测小鼠皮肤组织中IL-15、IL-15R水平以及IL-15与IL-15R共表达的情况;Western-blot法和免疫组化法（IHC）检测小鼠皮肤组织中IL-15、IL-15R、MAPK、P-MAPK、PI3K、P-PI3K、ERK1/2、P-ERK1/2、Akt、P-Akt的蛋白表达水平。结果:1光老化模型制备UVA辐照强度累计为261.79J/cm2,UVB辐照强度累计为6.54J/cm2,照射强度值均符合皮肤光老化动物实验的紫外线照射强度要求。照射14周后小鼠出现身体疲乏倦怠、经常收缩一团、运动量降低、皮肤干枯、表皮粗糙、纹理加粗加深、皮肤颜色出现暗红,偶有瘀斑等现象,比照光老化模型标准已经完全符合,造模成功。2 ELISA法检测结果:空白对照组中IL-6、TNF-α、IL-15呈现低水平表达。（1）IL-6水平:与空白对照组比较,模型对照组的小鼠皮肤组织中IL-6的表达显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,潞党参的各个组中（包括高剂量组、中剂量组和低剂量组）小鼠皮肤组织中IL-6的表达显着降低（P<0.01）。与VE组比较,潞党参低剂量组IL-6的表达显着升高（P<0.01）;潞党参中剂量组IL-6的表达变大（P<0.05）;而潞党参高剂量组与其差异不具有统计学意义。（2）TNF-α水平:与空白对照组比较,模型对照组的小鼠皮肤组织中TNF-α的表达显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,潞党参的各个组中（包括高剂量组、中剂量组和低剂量组）小鼠皮肤组织中TNF-α的表达显着降低（P<0.01）。与VE组比较,潞党参低剂量组TNF-α的表达显着升高（P<0.01）;潞党参中剂量组TNF-α的表达升高（P<0.05）;而潞党参高剂量组与其差异不具有统计学意义。（3）IL-15水平:与空白对照组比较,模型对照组的小鼠皮肤组织中IL-15的表达显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,潞党参的各个组中（包括高剂量组、中剂量组和低剂量组）小鼠皮肤组织中IL-15的表达显着降低（P<0.01）。与VE组比较,潞党参低剂量组IL-15的表达显着升高（P<0.01）;潞党参中剂量组IL-15的表达升高（P<0.05）;而潞党参高剂量组与其差异不具有统计学意义。3 IF法检测结果（1）IL-15、IL-15R、IL-15与IL-15R共表达在各组内均有阳性表达。（2）IL-15水平:小鼠皮肤组织中IL-15在空白对照组的表达水平较低;与空白对照组比较,模型对照组的小鼠皮肤组织中IL-15表达显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,潞党参的各个组中（包括高剂量组、中剂量组和低剂量组）小鼠皮肤组织中IL-15的表达显着降低（P<0.01）。与VE组比较,潞党参低剂量组、潞党参中剂量组IL-15的表达显着升高（P<0.01）;而潞党参高剂量组与其差异不具有统计学意义。（3）IL-15R水平:小鼠皮肤组织中IL-15R在空白对照组的表达水平较低;与空白对照组比较,模型对照组的小鼠皮肤组织中IL-15R表达显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,潞党参的各个组中（包括高剂量组、中剂量组和低剂量组）小鼠皮肤组织中IL-15R的表达显着降低（P<0.01）。与VE组比较,潞党参低剂量组、潞党参中剂量组IL-15R的表达显着升高（P<0.01）;而潞党参高剂量组与其差异不具有统计学意义。（4）IL-15与IL-15R共表达水平:小鼠皮肤组织中IL-15与IL-15R共表达在空白对照组的表达水平较低;与空白对照组比较,模型对照组的小鼠皮肤组织中IL-15与IL-15R共表达水平显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,潞党参的各个组中（包括高剂量组、中剂量组和低剂量组）小鼠皮肤组织中IL-15与IL-15R共表达的水平显着降低（P<0.01）。与VE组比较,潞党参低剂量组、潞党参中剂量组IL-15与IL-15R共表达的水平显着升高（P<0.01）;而潞党参高剂量组与其差异不具有统计学意义。4 Western-blot法检测结果（1）IL-15、IL-15R蛋白表达（1）IL-15蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组IL-15的蛋白表达显着升高（P<0.01）;而与模型对照组比较,中药剂量组IL-15的蛋白表达显着降低（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组IL-15的蛋白表达升高（P<0.05）。（2）IL-15R蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组IL-15R的蛋白表达显着升高（P<0.01）;而与模型对照组比较,中药剂量组IL-15R的蛋白表达显着降低（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组IL-15R的蛋白表达升高（P<0.05）。（2）MAPK、P-MAPK蛋白表达（1）MAPK蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组MAPK的蛋白表达显着升高（P<0.01）;而与模型对照组比较,中药剂量组MAPK的蛋白表达显着下降（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组MAPK的蛋白表达显着升高（P<0.01）。（2）P-MAPK蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组P-MAPK的蛋白表达显着升高（P<0.01）;而与模型对照组比较,中药剂量组P-MAPK的蛋白表达显着下降（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组P-MAPK的蛋白表达显着升高（P<0.01）。（3）PI3K、P-PI3K蛋白表达（1）PI3K蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组PI3K的蛋白表达显着升高（P<0.01）;而与模型对照组比较,中药剂量组PI3K蛋白表达显着下降（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组PI3K的蛋白表达显着升高（P<0.01）。（2）P-PI3K蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组P-PI3K的蛋白表达显着升高（P<0.01）;而与模型对照组比较,中药剂量组P-PI3K蛋白表达显着下降（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组P-PI3K的蛋白表达显着升高（P<0.01）。（4）ERK1/2、P-ERK1/2蛋白表达（1）ERK1/2蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组中ERK1/2的蛋白表达水平显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组小鼠皮肤组织中ERK1/2蛋白表达水平显着降低（P<0.01）;与MAPK抑制剂组比较,中药剂量组小鼠皮肤组织中ERK1/2的蛋白含量的表达水平显着升高（P<0.01）。（2）P-ERK1/2蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组中P-ERK1/2的蛋白表达水平显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组小鼠皮肤组织中P-ERK1/2蛋白表达水平显着降低（P<0.01）;与MAPK抑制剂组比较,中药剂量组小鼠皮肤组织中P-ERK1/2的蛋白含量的表达水平显着升高（P<0.01）。（5）Akt、P-Akt蛋白表达（1）Akt蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组中Akt的蛋白表达水平显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组小鼠皮肤组织中Akt蛋白表达水平显着降低（P<0.01）;与MAPK抑制剂组比较,中药剂量组小鼠皮肤组织中Akt的蛋白含量的表达水平显着升高（P<0.01）。（2）P-Akt蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组中P-Akt的蛋白表达水平显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组小鼠皮肤组织中P-Akt蛋白表达水平显着降低（P<0.01）;与MAPK抑制剂组比较,中药剂量组小鼠皮肤组织中P-Akt的蛋白含量的表达水平显着升高（P<0.01）。5 IHC法检测结果（1）IL-15、IL-15R蛋白表达（1）IL-15蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组IL-15的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组IL-15的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组IL-15的平均光密度值升高（P<0.05）。（2）IL-15R蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组IL-15R的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组IL-15R的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组IL-15R的平均光密度值升高（P<0.05）。（2）MAPK、P-MAPK蛋白表达（1）MAPK蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组MAPK的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组MAPK的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组MAPK的平均光密度值显着升高（P<0.01）。（2）P-MAPK蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组P-MAPK的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组P-MAPK的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组P-MAPK的平均光密度值显着升高（P<0.01）。（3）PI3K、P-PI3K蛋白表达（1）PI3K蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组PI3K的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组PI3K的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组PI3K的平均光密度值显着升高（P<0.01）。（2）P-PI3K蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组P-PI3K的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组P-PI3K的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与抗IL-15抗体对照组比较,中药剂量组P-PI3K的平均光密度值显着升高（P<0.01）。（4）ERK1/2、P-ERK1/2蛋白表达（1）ERK1/2蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组ERK1/2的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组ERK1/2、的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与MAPK抑制剂组比较,中药剂量组ERK1/2的平均光密度值显着升高（P<0.01）。（2）P-ERK1/2蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组P-ERK1/2的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组P-ERK1/2的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与MAPK抑制剂组比较,中药剂量组P-ERK1/2的平均光密度值显着升高（P<0.01）。（5）Akt、P-Akt蛋白表达（1）Akt蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组Akt的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组Akt的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与PI3K抑制剂组比较,中药剂量组Akt的平均光密度值显着升高（P<0.01）。（2）P-Akt蛋白表达:与空白对照组比较,模型对照组P-Akt的平均光密度值显着升高（P<0.01）;与模型对照组比较,中药剂量组P-Akt的平均光密度值显着降低（P<0.01）;与PI3K抑制剂组比较,中药剂量组P-Akt的平均光密度值显着升高（P<0.01）。结论:1皮肤光老化过程中有较多炎症因子产生,其中IL-15及其受体通过MAPK和PI3K信号转导通路分别激活蛋白激酶ERK1/2、Akt,导致MMPs表达增加,同时下调转化生长因子β/smad传导通路,可能是导致皮肤发生光老化的主要机制。2中药潞党参具有抗皮肤光老化的作用,其可能的作用机制之一是潞党参可以降低光老化小鼠皮肤组织中相关炎症因子的表达,直接或间接降低炎症因子及其受体对MAPK和PI3K信号转导通路相关基因和蛋白的影响。
丁惠宇[10]（2020）在《骨痿Ⅰ号方对肾虚血瘀型骨质疏松症的临床疗效观察及作用机制研究》文中进行了进一步梳理研究目的:1、观察骨痿Ⅰ号方对原发性骨质疏松症肾虚血瘀型患者的临床疗效,探讨该方的组方意义。2、通过实验观察骨痿Ⅰ号方对大鼠骨微观结构的影响,及其对Wnt3a/β-catenin信号通路表达的影响,探索补肾活血药物治疗骨质疏松症的作用机制。研究方法:临床研究:选取在南京中医药大学第二附属医院（江苏省第二中医院）门诊就诊并收治入病房的原发性肾虚血瘀型骨质疏松症确诊患者,经骨密度测定及相关临床检查确诊,且自愿加入临床研究,符合纳入标准者共50例,其中治疗组25例,对照组25例。住院期间检测血生化指标（血清ALP、血钙、血磷）、骨代谢指标（β-CTX、P1NP）及进行证候积分评定,1周后出院,出院后继续口服中药及抗骨质疏松西药,并于用药1周,1月,3月分别复查VAS疼痛评分,用药1月时门诊除复查VAS评分外,还需复查血生化、证候积分,及进行疗效评判,用药3月时复查骨密度及骨代谢指标。实验研究:1、观察骨痿Ⅰ号方对模拟骨质疏松症大鼠外周血生化、骨密度、骨组织形态、骨力学及HE病理学形态的影响。2、以qPCR实验及Western Blotting实验观察骨痿Ⅰ号方对模拟骨质疏松症大鼠骨组织BMP2、Runx2、Opn、Wnt3a mRNA 及蛋白的影响。生物信息学研究:通过网络生物药理学研究方药的分子生物学作用机制,通过分析论证其发挥作用的相关通路。研究结果:临床研究:（1）最终完成病例47例（治疗组24例,对照组23例）,治疗前治疗组与对照组的一般资料无明显统计学差异,具有可比性（P≥0.10）,两组之间腰背部VAS疼痛评分也无显着的统计学差异（P≥0.05）,血生化中血清ALP、血钙、血磷水平无明显统计学差异（P≥0.05）,中医肾虚血瘀证候评分比较,无显着性差异（P≥0.05）。（2）治疗后VAS疼痛评分变化:治疗组与对照组治疗后1周时VAS评分均下降不明显（均P≥0.05）,1月、3月VAS评分则较治疗前逐渐显着下降（均P≤0.05）,且随访时间越久,VAS评分越低。治疗后1周时两组间比较,差异均无明显统计学意义（P≥0.05）,而治疗后1月、3月时中药治疗组VAS评分组间差异有统计学意义。（3）治疗后骨密度变化:治疗3月后两组骨密度均较治疗前显着提高（均P≤0.05）,而两组间疗效比较,差异均无明显统计学意义（P≥0.05）。（4）治疗后血生化（血清ALP、血钙、血磷水平）变化:血清ALP、血钙、血磷水平均较治疗前有明显升高（P≤0.05）,组间比较治疗组血清ALP、血钙、血磷水平治疗后升高水平显着高于对照组,差异有统计学意义（P≤0.05）。（5）治疗后骨代谢指标（β-CTX、P1NP）变化:治疗3月后骨代谢指标β-CTX均较治疗前显着下降,P1NP较治疗前显着上升（P≤0.01）,组间比较中药治疗组β-CTX、P1NP变化程度均显着高于对照组,差异有统计学意义（P≤0.01）。（6）经治疗后两组患者有较好的疗效满意度,有较高的显效有效率,治疗组91.67%,对照组82.61%,两组间比较治疗组显着优于空白组。（7）两组治疗1月后都可改善患者的肾虚血瘀型中医证候评分（P≤0.05）,相较而言,治疗组评分改善情况显着优于对照组,两组间有明显统计学差异（P≤0.05）。实验研究:（1）与空白组相比,卵巢切除术后5周的模型组大鼠的骨密度、最大应力以及最大载荷显着降低,骨体积分数BV/TV、骨小梁数量Tb.N、骨小梁厚度Tb.Th也显着下降,骨小梁分离度Tbsp则明显增高,HE病理检测可见大鼠骨骼病变明显,组织结构出现病变,形态不完整;模型组大鼠血清钙,血清磷浓度,肌酐均出现下降,而血清碱性磷酸酶（ALP）,血尿素氮（BUN）,丙氨酸氨基转移酶（ALT）以及天门冬氨酸氨基转移酶（AST）都呈现上升趋势,且差异有统计学意义,说明骨代谢处于高转换状态,骨质疏松症模型复制成功。（2）骨痿Ⅰ号方对骨质疏松症有显着疗效,各剂量药物组与模型组相比,能显着升高骨密度水平,增加股骨以及腰椎的最大应力以及最大载荷,增加BV/TV、Tb.N、Tb.Th,而血清钙,磷浓度,肌酐出现升高,ALP,BUN,ALT及AST下降,且呈现剂量依赖性。HE病理检测也发现经治疗后的骨骼形态有所改观。（3）骨质疏松模型大鼠骨组织内BMP2、Runx2、Opn与Wnt3a/β-catenin信号通路蛋白水平均比正常空白组大鼠下降,提示骨组织中Wnt3a/β-catenin通路异常与骨质疏松发病存在密切联系。（4）qPCR检测及WB检测均发现BMP2、Runx2、Opn与Wnt3a/β-catenin信号通路蛋白水平上升,提示骨痿Ⅰ号方可通过正向介导促进Wnt3a/β-catenin通路转录,从而促进成骨细胞增殖分化,以达到相应治疗效果。生物信息学研究:发现该复方可通过促进相关高表达蛋白的激活,从而正向促进Wnt通路的激活,与本次研究结论一致。研究结论:骨痿Ⅰ号方可有效缓解原发性骨质疏松症肾虚血瘀型患者的胸腰背部疼痛,升高骨代谢重要指标血清ALP、血钙、血磷水平,改善β-CTX、P1NP水平,经治疗后患者有较好的疗效满意度,并能有效改善患者的肾虚血瘀型中医证候评分,配合常规抗骨质疏松药物治疗,相较于单独西药治疗,效果更加显着,体现该方具有良好的临床疗效,中医药辩证治疗肾虚血瘀型骨质疏松症具有其优势性。而实验发现应用骨痿Ⅰ号方可通过调控Wnt3a/β-catenin信号通路,上调Wnt3a蛋白及BMP2、Runx2、Opn因子,从而促进成骨细胞增殖分化,以达到抗骨质疏松的疗效。生物信息学研究也发现该复方可通过促进相关高表达蛋白Runx2的激活,从而激活Wnt通路,达到抗骨质疏松之效,与本次研究结论一致。
二、枸杞子对老龄雄性大鼠血中睾酮浓度的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、枸杞子对老龄雄性大鼠血中睾酮浓度的影响（论文提纲范文）
（1）经典名方及其有效成分调节免疫衰老的作用机制研究进展（论文提纲范文）
| 1 中性粒细胞与免疫衰老及中药的干预效果 |
| 2 单核/巨噬细胞与免疫衰老及中药的干预效果 |
| 3 树突状细胞与免疫衰老及中药的干预效果 |
| 4 自然杀伤细胞与免疫衰老及中药的干预效果 |
| 5 T淋巴细胞与免疫衰老及中药的干预效果 |
| 6 B淋巴细胞与免疫衰老及中药的干预效果 |
| 7 小结 |
（3）黄精属植物治疗肾精亏虚相关疾病的本草学和药理作用与药效物质研究进展（论文提纲范文）
| 1 黄精属植物治肾精亏虚症相关疾病的本草学研究 |
| 1.1 肾精亏虚症及其相关疾病的分析 |
| 1.2 黄精属治疗肾精亏虚相关疾病的历代本草应用分析 |
| 1.3 黄精属植物治疗肾精亏虚相关疾病的方剂应用分析 |
| 1.4 黄精属植物治疗肾精亏虚相关疾病的民族药应用分析 |
| 2 黄精属及其制剂治疗肾精亏虚相关疾病的临床应用分析 |
| 3 黄精属植物治疗肾精亏虚相关疾病的药理作用与药效物质研究 |
| 3.1 抗骨质疏松药效及其成分分析 |
| 3.2 抗类风湿性疾病药效和成分分析 |
| 3.3 抗糖尿病药效及其成分分析 |
| 3.4 调血脂药效及其成分分析 |
| 3.5 抗衰老药效和成分分析 |
| 3.6 免疫调节药效和成分分析 |
| 3.7 治疗不孕不育症药效和成分分析 |
| 3.8 抗阿尔茨海默病（Alzheimer's disease,AD）药效和成分分析 |
| 3.9 抗脑血管性疾病药效和成分分析 |
| 3.1 0 抗精神病药效和成分分析 |
| 4 结语与展望 |
（4）基于衰老分子机制探讨脾虚证-补中益气汤相关的生物学基础（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 “方证相关”研究进展 |
| 前言 |
| 1 方证相关的文献研究与数据挖掘 |
| 2 方证相关的临床应用 |
| 3 方证相关的实验探索 |
| 4 方证相关的生物信息学研究 |
| 5 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 脾虚证与衰老相关的研究进展 |
| 1 脾虚与衰老关系的中医学认识 |
| 2 脾虚与衰老相关性的临床研究进展 |
| 3 脾虚与衰老相关性的实验研究进展 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 综述三 补中益气汤现代研究进展 |
| 1 补中益气汤的临床应用 |
| 2 补中益气汤药理研究 |
| 3 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 研究一 脾虚证分子内涵与补中益气汤作用相关的网络药理学研究 |
| 1 数据库及软件 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 研究二 脾虚证演变与衰老相关的探讨 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 研究三 从衰老探察脾虚证现代内涵及补中益气汤的作用机制 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 1 立论背景及研究思路 |
| 2 脾虚模型大鼠的衰老样变及其生物学表征 |
| 3 脾虚证脑衰老样变的炎性损伤机制 |
| 4 补中益气汤的抗衰作用及其分子机制 |
| 5 研究创新点与局限性 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（5）益精方调控慢性缺氧诱导的睾丸Leydig细胞凋亡治疗LOH的机制研究（论文提纲范文）
| 英文缩略语表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 综述一 迟发性性腺功能减退症诊断、危险因素和动物模型研究述评 |
| 1.LOH诊断上的困惑 |
| 1.1 LOH精准诊断相对困难 |
| 1.2 LOH症状与睾酮水平低下不能完全对等 |
| 1.3 LOH诊断方法难以统一 |
| 1.4 LOH样症状如何定义有待商榷 |
| 1.5 LOH相关新概念的提出 |
| 1.6 小结 |
| 2.LOH动物模型构建概况 |
| 2.1 将老龄雄性大鼠(14-24月龄)视为LOH动物模型 |
| 2.2 环磷酰胺诱导生殖系统受损构建LOH动物模型 |
| 2.3 对退役种鼠进行“孤养+复合情志刺激”构建LOH动物模型 |
| 2.4 将去势小鼠视作LOH动物模型 |
| 2.5 小结 |
| 3.LOH危险因素研究概况 |
| 3.1 LOH常见的危险因素 |
| 3.2 肥胖与LOH |
| 3.3 LOH散在报道的危险因素 |
| 3.4 缺氧可能是LOH 一个尚未得到重视的潜在危险因素 |
| 3.5 小结 |
| 4.缺氧代谢产物乳酸与睾丸生殖机能 |
| 5.结语 |
| 6.参考文献 |
| 综述二 中医药对男性生殖内分泌的认识与诊疗进展 |
| 1.男性生殖内分泌的基础生理病理概况 |
| 1.1 下丘脑-垂体-睾丸轴是男性生殖内分泌的核心 |
| 1.2 HPT轴功能可受到多种危险因素的影响 |
| 2.以“天癸”为核心的中医男性生殖内分泌理论的构建 |
| 2.1 天癸是一种与人体生殖机能密切相关且客观存在的物质 |
| 2.2 天癸的本质和中西医结合研究 |
| 2.3 以天癸为核心或信使的中医“肾-天癸-精室”男性性腺轴的构建 |
| 2.4 小结 |
| 3.中医药在男性生殖内分泌疾病上的运用 |
| 3.1 常见的男性生殖内分泌疾病 |
| 3.2 中医药在动物实验研究方面对HPT轴的调控作用 |
| 3.3 中医药在临床研究方面对HPT轴的调控作用 |
| 3.4 小结 |
| 4.结语 |
| 5.参考文献 |
| 前言 |
| 第一部分 临床研究 症状性迟发性性腺功能减退症(sLOH)中医体质证候调查以及与慢性间歇性缺氧相关性研究 |
| 1.资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 研究方法 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 基本资料 |
| 2.2 sLOH患者“中医体质证候”基本调研概况 |
| 2.3 男性激素及静脉血乳酸值异常情况 |
| 2.4 cAMS评分与Epworth评分、STOP-bang评分的相关性分析 |
| 2.5 Epworth评分、STOP-bang评分与cAMS性功能症状、自主神经紊乱症状、心理和躯体症状评分之间的相关性分析 |
| 2.6 乳酸正常sLOH组与乳酸升高sLOH组各指标的比较 |
| 2.7 缺氧高中低风险3组间各指标的比较 |
| 2.8 cAMS评分轻度和中度2组间各指标的比较 |
| 3.讨论 |
| 3.1 sLOH患者中医体质证候 |
| 3.2 sLOH与缺氧 |
| 4.小结 |
| 5.参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 研究一 慢性间歇性缺氧诱导的LOH动物模型构建探究 |
| 1.材料和方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 主要设备与试剂 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 统计方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 造模第15天时,3组大鼠血TT、FT、乳酸检测对比 |
| 2.2 造模第30天时,3组大鼠血TT、FT、乳酸检测对比 |
| 2.3 造模第30天时,3组大鼠悬尾实验、游泳实验检测对比 |
| 2.4 模型判定与造模成功情况 |
| 3.讨论 |
| 3.1 增龄、缺氧与血TT、FT水平 |
| 3.2 缺氧对模型大鼠体能和情志的影响 |
| 3.3 乳酸的结果讨论 |
| 3.4 LOH动物模型讨论 |
| 4.小结 |
| 5.参考文献 |
| 研究二 补肾活血益精方对慢性间歇性缺氧诱导的LOH模型大鼠睾丸Leydig细胞凋亡的影响 |
| 1.材料和方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 各组大鼠睾丸指数的对比 |
| 2.2 各组大鼠血TT、FT水平的比较 |
| 2.3 各组大鼠血乳酸水平的比较 |
| 2.4 各组大鼠睾丸Leydig细胞凋亡率的情况对比 |
| 2.5 各组大鼠睾丸组织内Caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白表达情况 |
| 2.6 各组大鼠睾丸组织内Caspase-3、Bcl-2及Bax的基因表达情况 |
| 2.7 各组大鼠睾丸病理组织学情况比较 |
| 2.8 各组大鼠睾丸Leydig细胞超微结构的情况比较 |
| 3.讨论 |
| 3.1 Leydig细胞数量、功能与雄激素的关系 |
| 3.2 睾丸Leydig细胞的凋亡调控 |
| 3.3 益精方的组方分析及前期研究基础 |
| 3.4 益精方对LOH模型大鼠的可能作用机制一:调控睾丸Leydig细胞的凋亡 |
| 3.5 益精方对LOH模型大鼠的可能作用机制二:恢复雄激素合成睾丸内调节的正常环境,促进睾丸Leydig细胞分泌功能 |
| 4.小结 |
| 5.参考文献 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附件 |
（6）补肾生精法治疗少弱精子症及其调控生精细胞增殖与凋亡的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 中医药诊治男性不育少弱精子症的研究进展 |
| 1 少弱精子症诱因 |
| 2 中医病名 |
| 3 中医病因病机 |
| 4 中医药治疗 |
| 5 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 生精细胞增殖、凋亡相关蛋白及通路的研究进展 |
| 1 精子发生的三个阶段 |
| 2 生精细胞的增殖 |
| 3 生精细胞的凋亡 |
| 4 生精细胞增殖、凋亡相关蛋白 |
| 5 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 菟枸助育汤治疗男性不育少弱精子症的临床研究 |
| 前言 |
| 1 研究对象 |
| 2 研究方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 菟丝子-枸杞子对生精功能障碍SD大鼠生精功能的影响 |
| 前言 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 基于SCF/c-kit--PI3K--Bcl-2通路探讨菟丝子-枸杞子调控生精细胞增殖与凋亡的作用机制 |
| 前言 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 附录1 |
| 附录2 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（7）加味四二五合方联合芬吗通治疗化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的疗效观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语表 |
| 引言 |
| 第一部分 内容与方法 |
| 1.内容 |
| 1.1 诊断标准 |
| 1.1.1 西医诊断标准 |
| 1.1.2 中医诊断标准 |
| 1.1.3 中医证候评分标准 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 脱落标准 |
| 1.5 剔除标准 |
| 1.6 剔除、脱落及终止病例处理方法 |
| 2.方法 |
| 2.1 分组 |
| 2.2 治疗方法 |
| 2.2.1 中医治疗:加味四二五合方 |
| 2.2.2 西医治疗:芬吗通 |
| 2.3 观察项目 |
| 2.3.1 基本信息 |
| 2.3.2 观察指标 |
| 2.3.4 安全性指标 |
| 2.4 疗效判定标准 |
| 2.4.1 临床综合疗效判定标准 |
| 2.4.2 中医证候疗效判定标准 |
| 2.5 安全评价标准 |
| 2.6 不良事件观察 |
| 2.6.1 定义 |
| 2.6.2 不良事件的获取和记录 |
| 3.质量控制 |
| 3.1 临床资料收集 |
| 3.2 标本采集及处理 |
| 4.统计方法 |
| 第二部分 结果与分析 |
| 1. 一般资料比较分析 |
| 2.治疗前与治疗后的结果数据分析 |
| 第三部分 讨论 |
| 1.对化疗源性POI的认识 |
| 1.1 西医对化疗源性POI的认识 |
| 1.2 中医对化疗源性POI的认识 |
| 2.对化疗源性POI的治疗 |
| 2.1 西药周期治疗 |
| 2.2 中药复方调经治疗 |
| 3.方药分析 |
| 3.1 补气生血,行气活血,疏肝健脾 |
| 3.2 益肾填精,平调阴阳 |
| 3.3 攻毒散结 |
| 3.4 现代药理学研究进展 |
| 4.临床结果分析 |
| 4.1 临床疗效 |
| 4.2 激素水平变化情况 |
| 4.3 中医证候变化 |
| 5.不足及展望 |
| 5.1 不足 |
| 5.2 展望 |
| 第四部分 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 临床病例观察表(CRF表) |
| 综述一 化疗源性早发性卵巢功能不全的西医防治进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 化疗源性早发性卵巢功能不全的中医防治进展 |
| 参考文献 |
（8）柴芪汤通过细胞自噬改善代谢综合征血管内皮损伤的功效和机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 自噬与代谢综合征相关血管内皮损伤的研究现状 |
| 1 代谢综合征概述 |
| 2 自噬概述 |
| 3 自噬与代谢综合征相关血管内皮损伤的直接联系 |
| 4 自噬与代谢综合征相关血管内皮损伤的间接联系 |
| 5 展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 中医药防治代谢综合征血管内皮损伤研究现状 |
| 1 代谢综合征血管损伤概述 |
| 2 代谢综合征中医认识 |
| 3 代谢综合征血管损伤研究现状 |
| 4 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 技术路线 |
| 前言 |
| 实验一 柴芪汤对代谢综合征大鼠血管内皮的保护作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 5 讨论 |
| 实验二 柴芪汤通过增强细胞自噬改善代谢综合征大鼠血管内皮损伤 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 5 讨论 |
| 实验三 柴芪汤对高糖高脂培养下HUVECs的保护作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 5 讨论 |
| 实验四 柴芪汤通过增强细胞自噬改善高糖高脂培养下HUVECs的细胞损伤 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 5 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（9）潞党参通过IL-15及其受体调控光老化小鼠皮肤炎症反应作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 建立实验动物模型及潞党参对光老化小鼠皮肤组织中炎症因子的影响 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 潞党参对光老化小鼠皮肤组织中MAPK以及PI3K表达的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文三 潞党参对光老化小鼠皮肤组织中ERK1/2、Akt表达的实验研究 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述1 紫外线引起皮肤光老化机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述2 中草药防治皮肤光老化的现代研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（10）骨痿Ⅰ号方对肾虚血瘀型骨质疏松症的临床疗效观察及作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 理论研究 |
| 1 中医文献对“骨痿”的描述 |
| 1.1 “骨痿”病名的沿革 |
| 1.2 “骨痿”的病因病机 |
| 1.3 “骨痿”的相关治疗 |
| 2 现代肾虚血瘀型骨质疏松症的相关研究 |
| 2.1 骨质疏松症的中医现代分型 |
| 2.2 现代关于肾虚血瘀型骨质疏松症的机理研究 |
| 2.3 现代肾虚血瘀型骨质疏松症治疗的临床及实验研究 |
| 第二章 临床研究 骨痿Ⅰ号方治疗肾虚血瘀型骨质疏松症的临床疗效观察 |
| 1 临床资料 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入病例标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 筛选病例 |
| 2.2 分组及治疗 |
| 2.3 疗效评定标准 |
| 2.4 医学伦理控制 |
| 2.5 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 病例搜集情况 |
| 3.2 临床试验结果 |
| 4 结论 |
| 5 讨论 |
| 5.1 骨痿Ⅰ号方的组方依据 |
| 5.2 骨痿Ⅰ号方主要中药的临床研究 |
| 5.3 相关骨代谢指标的意义 |
| 第三章 实验研究 |
| 实验一 骨痿Ⅰ号方对模拟骨质疏松症大鼠外周血生化、骨密度、骨组织形态、骨力学及HE病理学形态的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物及制备 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物造模及分组 |
| 2.2 给药方法 |
| 2.3 取材 |
| 2.4 指标检测 |
| 2.5 统计学分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 骨代谢指标检测 |
| 3.2 骨密度对比 |
| 3.3 骨组织形态计量学对比 |
| 3.4 骨力学检测对比 |
| 3.5 HE检测 |
| 4 结论 |
| 实验二 骨痿Ⅰ号方对模拟骨质疏松症大鼠骨组织BMP2、Runx2、Opn、Wnt3a mRNA及蛋白的影响 |
| 1 实验材料: 同实验一 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 qPCR检测 |
| 2.2 Western Blot检测 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 qPCR检测 |
| 3.2 Western Blotting(WB)检测 |
| 4 结论 |
| 5 讨论 |
| 5.1 动物实验模型的选择 |
| 5.2 实验相关指标的选择及意义 |
| 5.3 Wnt3a/β-catenin通路的作用机制探讨 |
| 第四章 骨痿Ⅰ号方治疗骨质疏松症的生物信息学分析 |
| 1 分析对象 |
| 2 分析方法 |
| 2.1 药物成分及靶点筛选 |
| 2.2 疾病作用靶点筛选 |
| 2.3 药物-疾病共同靶点的筛选 |
| 2.4 中药-成分-疾病-靶点网络构建 |
| 2.5 PPI网络构建及核心靶点分析 |
| 2.6 GO富集分析 |
| 2.7 KEGG富集分析 |
| 3 结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 综述 |
| 参考文献 |
四、枸杞子对老龄雄性大鼠血中睾酮浓度的影响（论文参考文献）
- [1]经典名方及其有效成分调节免疫衰老的作用机制研究进展[J]. 涂玥,倪光夏,万毅刚,黄煌,刘不悔,房其军,王美子,陈佳鑫,岳靓,李姿霖,CHONG Fee-lan. 中国实验方剂学杂志, 2021(18)
- [2]“化瘀解毒生精方”治疗精索静脉曲张性弱精子性不育症的临床研究[D]. 王晨. 河南中医药大学, 2021
- [3]黄精属植物治疗肾精亏虚相关疾病的本草学和药理作用与药效物质研究进展[J]. 陶爱恩,赵飞亚,钱金栿,段宝忠,夏从龙. 中草药, 2021(05)
- [4]基于衰老分子机制探讨脾虚证-补中益气汤相关的生物学基础[D]. 朱昊如. 北京中医药大学, 2020(04)
- [5]益精方调控慢性缺氧诱导的睾丸Leydig细胞凋亡治疗LOH的机制研究[D]. 闵潇. 中国中医科学院, 2020(01)
- [6]补肾生精法治疗少弱精子症及其调控生精细胞增殖与凋亡的研究[D]. 管斯琪. 北京中医药大学, 2020(04)
- [7]加味四二五合方联合芬吗通治疗化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的疗效观察[D]. 邓文桢. 湖南中医药大学, 2020(03)
- [8]柴芪汤通过细胞自噬改善代谢综合征血管内皮损伤的功效和机制研究[D]. 陈恂. 北京中医药大学, 2020(04)
- [9]潞党参通过IL-15及其受体调控光老化小鼠皮肤炎症反应作用机制[D]. 王明月. 辽宁中医药大学, 2020(01)
- [10]骨痿Ⅰ号方对肾虚血瘀型骨质疏松症的临床疗效观察及作用机制研究[D]. 丁惠宇. 南京中医药大学, 2020(01)