一、4株鸡IBD活疫苗对鸡ND免疫抗体的影响（论文文献综述）
李新伟[1]（2020）在《新疆部分规模化鸡场传染性支气管炎的免疫抗体检测及免疫程序的制定》文中研究表明鸡传染性支气管炎（IB）,是由鸡传染性支气管炎病毒（IBV）导致的传染病。是一种急性、高度接触性传染病,各阶段鸡只均易感,该病主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿生殖系统和消化系统,给养鸡业造成了巨大的经济损失。疫苗接种被认为是目前防控鸡传染性支气管炎最有效的方法,但由于IBV血清型多且易发生变异,血清型间交叉保护性较差,这给鸡传染性支气管炎的防控带来了困难。本研究为了解新疆某养禽公司历年的抗体消长规律和免疫情况,根据抗体水平和以前使用的免疫程序为经验制定出三种不同的免疫方案,并进行抗体监测,从而分析出一套较优的免疫程序。对选出的免疫程序进行改进,根据免疫后ELISA监测数据及部分生产性能与原有程序进行对比,得出更适合于本地区的免疫程序,为新疆鸡传染性支气管炎免疫程序的调整提供依据。本试验的研究内容及结果如下:方法:（1）择新疆地区某规模化公司3个麻黄鸡种鸡场（命名为种鸡场一、二、三）和4个黄麻羽商品鸡场（命名为商品鸡场一、二、三、四）。调查试验鸡场的传染性支气管炎的免疫情况,并利用IBV的ELISA检测试剂盒检测其2016-2018年间的抗体消长规律。（2）根据其免疫情况、鸡群稳定情况和ELISA的检测数据针对IBV的免疫设计出A方案:7日龄和50日龄使用新易支(鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗（La Sota株+QXL87株）;B方案:1日龄和7日龄和分别使用（ND+IB+H9+IBD）-K、新易支进行免疫在50日龄用新易支加强一次,C方案:7日龄和50日龄分别使用鸡传染性支气管炎活疫苗（H120株）和鸡传染性支气管炎活疫苗（H52株）三种不同的免疫程序,（3）在新疆呼图壁和昌吉地区各选择一个种鸡场和一个商品鸡场对免疫程序产生的抗体情况做检测。最后对其程序进行改进后（1日龄和7日龄分别使用（ND+IB+H9+IBD）-K、新易支进行免疫,在45日龄用新易支加强一次）根据ELISA数据和部分生产性能与原有的程序进行比较,从而得出更优的免疫程序。结果:（1）受调查的三个种鸡场的抗体阳性率均随着年龄的上升逐步趋向于100%,离散度逐步下降,抗体水平较整齐。阳性率分别在20周龄或26周龄后基本达到100%,同时离散度逐渐降低。但种鸡场三2019年以前的抗体滴度较大。商品鸡场一、二和四在26日龄的时候抗体的阳性率普遍较低,离散度较低。但50日龄和70日龄的阳性率在100%,同时离散度较低。商品鸡场三的整体抗体滴度较大,离散度偏高。（2）B方案产生抗体的整体情况相比其他二种疫苗方案较稳定,但B方案在中50日龄阳性率未能到100%。离散度也略高。A方案产生抗体的整体情况相比优于C方案,但在种鸡场的圈舍显示其在50日龄的离散程度较大,同时所有圈舍存在抗体滴度大于15000的情况。C方案检测的数据提示,该方案的免疫程序效果较差,离散度较高,同时抗体滴度较高,提示该方案存在保护力弱等问题。（3）改进后的免疫程序与原有的做对比发现,改进后的只有在25日龄产生的抗体阳性率未达到100%,但50日龄时离散度较高,同时抗体滴度值在13500以下。相比而言,原有的免疫方案抗体离散度偏高,25日龄时抗体阳性率不到85%,抗体滴度值较大,50日龄和70日龄时存在滴度在16000以上和17000以上的现象。在生产性能上使用改进后免疫程序圈舍的生产数据明显优于原有免疫程序免疫的圈舍。改进后的免疫程序比原有免疫程序的产蛋率平均高3.48%;产蛋畸形率平均低0.68%;碎蛋率平均低0.42%,但软蛋率上都比较低。综上所述:随着年龄的增长IBV野毒感染的风险会逐步降低,同时种鸡场三在2019年前和商品鸡场三可能存在野毒的感染或已经存在感染过野毒的情况。再根据新的免疫程序和疫苗株的选择可以得出在该地区应优先挑选使用与用QXL87株和M41株的疫苗株进行免疫,同时在1日龄7日龄和50日龄分别使用（ND+IB+H9+IBD）-K、新易支和新易支进行免疫的程序是较优的免疫程序。最后表明调整后的免疫程序具能够提供好的生产性能,更适合于实验地区。
时锋[2]（2020）在《新疆某规模化鸡场新城疫抗体的动态监测及免疫程序的优化》文中进行了进一步梳理新城疫（Newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）引起的以禽类感染为主、表现有特征性临床症状的急性和高接触性传染病。该病的传播十分的迅速,病死率极高,一旦鸡群内出现病例,短时间内波及全群,引起大规模的死亡,严重危害着世界各国的禽类养殖业。目的:为了了解该规模化鸡场ND免疫效果,制定新的免疫程序,本次试验从新城疫的免疫防制入手,对新疆某规模化鸡场免疫NDV疫苗进行抗体动态监测、各类型疫苗免疫效果对比,并根据以上研究结果优化免疫方案。方法:采用血凝/血凝抑制试验对新疆某规模化鸡场近四年的免疫抗体进行动态监测。使用10种疫苗对相同饲养管理下的鸡群进行疫苗免疫效果评价,以抗体合格率作为评价标准,筛选免疫效果较好的疫苗。综合分析试验结果,对原有免疫方案进行优化,并进行抗体监测。结果:1.A场近四年抗体合格率为65.00%-100.00%、88.00%-100.00%、94.00%-100.00%、96.00%-100.00%;B场近四年免疫抗体合格率分别为83.00%-100.00%、96.00%-100.00%、96.50%-100.00%、96.70%-100.00%;C场近四年抗体合格率分别为58.40%-100.00%、94.00%-100.00%、80.00%-100.00%、87.50%-100.00%。3个麻羽种鸡场的免疫抗体水平均存在一定的波动,但免疫抗体水平逐年提高,其中B场的免疫效果优于A场和C场。2.ND+IB（默沙东）疫苗免疫组阳性率分别为32.18%、93.21%、100%;ND+H9（易邦）免疫组阳性率分别为55.63%、100%、100%;ND+IB+EDS（易邦）免疫组阳性率分别为52.13%、100%、100%;新流腺（信得/易邦）免疫组阳性率分别为10.23%、95.62%、100%;ND+H9+腺（信得）免疫组阳性率分别为60.23%、95.64%、98.56%;ND（基因7型）免疫组阳性率分别为88.75%、100%、100%;ND+H9-K（青岛易邦）免疫组阳性率分别为55.85%、100%、98.99%;新倍灵（默沙东）免疫组阳性率为70.23%、98.26%、100%;新威灵（默沙东）免疫组阳性率分别为60.23%、92.63%、100%;油苗:ND+IBD+H9免疫组阳性率分别为65.28%、98.36%、100%。几种类型的疫苗在首次免疫后,均需要加强免疫,其免疫抗体才能达到国家规定水平,ND+H9（易邦）、ND+IB+EDS（易邦）、ND（基因7型）这三种疫苗的免疫效果最好。3.麻羽种鸡场免疫程序调整为2w:免疫ND+IB（Clone30+Ma5）（默沙东）、6w免疫ND+H9+IB（易邦）、11w:免疫新支灵、15w免疫（ND+H9）-K（青岛易邦）、20w+4免疫ND+IB+IBD（默沙东）、25w免疫（ND+H9+IB）-K（青岛易邦）、34w:免疫新支灵（默沙东）、40w免疫新倍灵（梅里亚）、47w+1免疫ND+H9（青岛易邦）。商品鸡的免疫程序为1日龄锐雏欣（颈部皮下注射）、7日龄免疫新易支（点眼）、14日龄免疫（ND+H9）-K（颈部皮下注射）、28日龄免疫信支妥（饮水）、50日龄免疫新易支（饮水）。结论:根据试验结果,新疆某规模化鸡场的NDV免疫效果呈现逐年升高的趋势,调整后的免疫方案对鸡群具有较好的保护性,免疫抗体阳性率达到了98.00%以上,有效的保护了鸡群免受NDV的侵害。
星东[3]（2017）在《ND-IBD二联灭活苗对商品蛋雏鸡免疫效果及机制研究》文中研究说明传染性法氏囊病（Infectious bursal disease,IBD）与新城疫（Newcastle disease,ND）的防控仍然是国内家禽养殖业面临的两大难题。IBD和ND疫苗在蛋鸡的应用已经取得一定的成效,但是在生产中其免疫效果仍达不到预期效果,而且经常由于苗毒毒力过强造成免疫器官损伤。而ND-IBD二联灭活苗经生产工艺改进,提高了抗原含量,且可以减少免疫次数,能够有效的避免活苗的缺陷。ND-IBD二联灭活苗在商品蛋雏鸡的免疫效果及机体对该疫苗的免疫反应仍然有待进一步的研究。因此,本试验比较了 ND-IBD二联灭活疫苗对1、7日龄商品蛋鸡的免疫效果,并比较了 ND-IBD二联灭活疫苗与IBD活苗对7日龄商品蛋鸡的免疫效果,同时结合实时荧光定量PCR分析了 ND-IBD二联灭活疫苗免疫后免疫因子mRNA表达量的变化情况。研究结果为ND-IBD二联灭活疫苗在蛋鸡生产上的应用提供了重要依据。具体内容如下:方法:1、ND-IBD二联灭活苗对1、7日龄商品蛋雏鸡免疫效果研究。选取体重、日龄相近的健康的1日龄商品蛋雏鸡360只,随机分成A、B和C三个处理组。A组为空白对照组,接种生理盐水;B组为1日龄疫苗免疫组,雏鸡1日龄时颈部皮下注射0.3mlND-IBD二联灭活疫苗;C组为7日龄疫苗免疫组,于雏鸡7日龄时颈部皮下注射0.3mlND-IBD二联灭活疫苗。试验期56d,免疫后每7d采血分离血清,采用血凝抑制试验检测ND抗体水平;并采用中和试验检测IBD抗体水平;同时采集法氏囊和脾脏,采用TRIzol法提取总RNA,反转录出cDNA,用实时荧光定量PCR检测CD4+、CD8+、IL-6、IFN-β的mRNA表达量。然后每7d对各组鸡进行IBDV攻毒保护试验,攻毒剂量0.2ml/羽,并于攻毒后72h剖检,观察法氏囊病变情况,并计算攻毒保护率。2、ND-IBD二联灭活疫苗与IBD活苗对商品蛋鸡免疫效果比较研究。选取体重、日龄相近的健康的1日龄商品蛋雏鸡240只分成3个处理组。A组为空白对照组,接种生理盐水;B组为IBD活苗免疫组,雏鸡7日龄时颈部皮下注射0.3mlIBD活疫苗;C组为ND-IBD二联灭活疫苗免疫组,于雏鸡7日龄时颈部皮下注射0.3mlND-IBD二联灭活疫苗。试验期42d,免疫后每7d采血分离血清,采用中和试验检测IBD抗体水平;同时采集法氏囊和脾脏,采用TRIzol法提取总RNA,反转录出cDNA用实时荧光定量PCR法检测CD4+、CD8+、IL-6、IFN-β的mRNA表达量。然后每7d对各组鸡进行IBDV攻毒保护试验,攻毒剂量0.2ml/羽。攻毒后72h剖检,观察法氏囊病变情况,并计算攻毒保护率。结果:1、ND-IBD二联灭活苗对1、7日龄商品蛋雏鸡免疫效果研究。抗体检测结果表明:在28～56日龄,C组的IBD和ND抗体水平显着高于A组与B组（P<0.05）;35日龄前,C组攻毒保护率显着优于A组,且相差10%。实时荧光定量PCR法检测结果表明:在法氏囊与脾脏中,28～56日龄时,C组基因CD4+、CD8+、IL-6、IFN-β的mRNA表达量,相比A组与B组显着升高（P<0.05）。2、ND-IBD二联灭活疫苗与IBD活苗对7日龄商品蛋鸡的免疫效果比较研究。抗体检测结果表明:28～42日龄,C组IBD体水平显着高于B组与A组（P<0.05）;35日龄前,C组攻毒保护效果高于B组与A组。实时荧光定量PCR结果表明:21～42日龄时,法氏囊与脾脏中基因CD4+、CD8+、IL-6、IFN-β的mRNA表达量,C组显着高于B组与A组（P<0.05）。结论:1.ND-IBD二联灭活苗免疫7日龄商品蛋雏鸡可显着提高IBD与ND抗体水平和免疫器官中细胞因子的mRNA表达量,增强机体免疫功能。2.ND-IBD二联灭活苗免疫7日龄商品蛋雏鸡,免疫效果优于IBD弱毒苗。
丁丽琼[4]（2017）在《胚胎免疫传染性法氏囊疫苗在肉鸡生产中的优化及应用》文中研究说明胚胎免疫的目的是降低雏鸡的死亡率、提高家禽的生产性能、降低劳动成本,发挥胚胎免疫的最大生产效益。将该技术应用于肉鸡生产中,对提高肉鸡养殖效益具有积极意义。方法:试验选用罗斯308种蛋入孵化机入孵,分为试验组和对照组。试验组（胚胎免疫）在胚胎孵化至一定胚龄（18-21d）时通过胚胎注射器注射传染性法氏囊疫苗（vHVT-013-16株）0.05 mL/枚（约2000 PFU）入出雏机孵化至21d出雏,对照组（传统免疫）直接落盘后,入出雏机孵化至21d出雏,同时人工注射相同剂量的传染性法氏囊疫苗（vHVT-013-16株）后,试验组和对照组均按照公司免疫程序后,将试验组和对照组白羽肉鸡运输至同一个肉鸡场饲养,按公司原有的免疫程序、饲养管理方法和“全进全出”的模式对试验组和对照组肉鸡进行饲养。试验结果如下:1胚胎免疫与传统免疫的比较在未对胚胎注射器针头、种蛋注射d等相关改进前,肉鸡胚胎免疫法接种氏囊疫苗,通过对比胚胎免疫与传统免疫的效果,可知第1台孵化机胚胎免疫与传统免疫的孵化率分别为86.20%和89.40%;第2台孵化机的胚胎免疫与传统免疫的孵化率分别为为87.10%和88.76%;第3台孵化机胚胎免疫与传统免疫的孵化率分别为87.80%和90.69%,第1台孵化机胚胎免疫与传统免疫的后期死胚率分别为4.46%和1.85%和;第2台孵化机胚胎免疫与传统免疫的后期死胚率分别为3.47%和1.92%;第3台孵化机的胚胎免疫与传统免疫的后期死胚率为3.34%和1.55%;抗体滴度、每周死亡淘汰率、肉鸡体重与传统免疫相近,差异不显着（P>0.05）。2胚胎免疫在生产应用中条件的优化通过对胚胎注射器的参数进行校正,最终确定针头的长度为21.08mm、针头型号为20G。通过对孵化至18.5d、18.75d、19.0d三个落盘（注射）d进行试验,后期死胚率分别为4.99%、2.37%、2.57%;孵化率分别为86.08%、86.52%、89.68%,根据孵化率及后期死胚率,最终确定胚胎免疫的注射d为19.0d。通过对三个不同周期种蛋进行试验,前期种蛋、高峰期种蛋的落盘时间小于20min,后期种蛋的落盘时间大于20min,后期死胚率分别为3.37%、2.94%、4.99%;孵化率分别为88.15%、89.02%、67.59%,因此最适合注射的种蛋生产周龄为产蛋前期和产蛋高峰期种蛋。3胚胎免疫在生产应用中的研究在对注射条件优化后,将胚蛋注射器设备与自动落盘设备对接,投入生产中使用。通过连续3d的自动化落盘注射,可知第1d胚胎免疫前期种蛋的孵化率为91.34%,低于传统免疫,高峰期种蛋的孵化率为90.78%,高于传统免疫,后期种蛋的孵化率为63.90%,高于传统免疫;第2d胚胎免疫前期种蛋的孵化率为89.35%,低于传统免疫,高峰期种蛋的孵化率为89.35%,高于传统免疫,后期种蛋的孵化率为58.89%,低于传统免疫;第3d胚胎免疫前期种蛋的孵化率为89.93%,低于传统免疫、高峰期种蛋的孵化率为89.54%,低于传统免疫,后期种蛋的孵化率均为62.12%,低于传统免疫;抗体滴度、阳性率、每周死亡淘汰率、肉鸡体重与传统免疫相近。以上结果表明胚胎免疫在改进和优化相关参数后,与传统免疫相比对白羽肉鸡肉鸡生产无不良影响,因此胚胎免疫技术可应用与白羽肉鸡肉鸡生产中替代传统人工免疫注射。
赖隆永[5]（2017）在《ND-IBD二联灭活苗对种母鸡的免疫效果及IBDV强弱毒株鉴别诊断研究》文中指出传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease,IBD）是由双股核糖核酸病毒科的传染性法氏囊病毒（Infectious Bursal Disease Virus,IBDV）引起的以感染雏鸡为主的免疫抑制性、高度接触性传染病;新城疫（Newcastle Disease,ND）是由副黏病毒科鸡新城疫病毒（Newcastle Disease Virus,NDV）引起鸡的急性、高度接触性和致死性传染病,不同年龄、品种以及性别的鸡均能感染ND,但是幼雏的发病率和死亡率明显更高。研究发现国内对ND-IBD二联灭活苗的研发及其对种母鸡免疫效果研究较少,因此,针对这种情况,对ND-IBD二联灭活苗对种母鸡免疫效果研究仍需要进一步研究;同时在生产临床实践中或者科研试验研究中,血清学方法监测雏鸡抗体水平在一定程度上,都会引起雏鸡应激,影响其生长性能和经济效益。通过从鸡蛋中提取ND和IBD卵黄抗体间接预估ND和IBD血清抗体,获取样品方便,减少雏鸡的反复应激,考虑到ND和IBD卵黄抗体与子代雏鸡ND和IBD血清抗体的关系尚不明确,因此通过测定ND和IBD卵黄抗体与ND和IBD血清抗体,进行ND和IBD卵黄抗体与子代ND和IBD血清抗体的相关性分析;另外,研究表明在临床实践中,机体内存在IBDV野毒和苗毒的感染,引起法氏囊病变和免疫失败,因此建立一种高效简便的IBDV野毒与疫苗毒的鉴别诊断方法具有重要意义。本研究拟对100日龄种母鸡进行皮下注射ND-IBD二联灭活苗,对其ND和IBD抗体水平进行检测,观察种母鸡及其子代的免疫效果,此外,对提取的种母鸡种蛋的ND和IBD卵黄抗体水平与子代雏鸡的ND和IBD血清抗体水平进行相关性分析,最后建立一种高效简便的IBDV野毒与疫苗毒的鉴别诊断方法。本试验的研究内容及结果如下:1.ND-IBD二联灭活苗对100日龄种母鸡的免疫效果研究。本试验通过对100日龄种母鸡进行皮下注射ND-IBD二联灭活苗,分别于免疫前、免疫后每隔15 d采血分离血清,利用血清学方法检测其ND和IBD抗体水平,并对其抗体水平进行分析,结果表明种母鸡接种ND-IBD二联灭活苗之后产生了较高的ND和IBD抗体水平,种母鸡得到了很好的免疫保护,并且其免疫保护力能够持续120d。可见,种母鸡免疫ND-IBD二联灭活苗,不仅可以有效地提高种母鸡的抗体水平,也可以提高子代的母源抗体水平。2.ND和IBD卵黄抗体与子代ND和IBD血清抗体的相关性分析。本试验通过检测种母鸡种蛋的ND和IBD卵黄抗体水平及其子代雏鸡的ND和IBD血清抗体水平,结合SPSS 18.0软件的分析,得到免疫组种蛋ND卵黄抗体与子代ND血清抗体水平关系的最优方程为y=0.923+0.701x;免疫组种蛋IBD卵黄抗体与子代IBD血清抗体水平关系的最优方程为y=2.365+0.7x。3.IBDV强弱毒株鉴别诊断方法的建立。根据NCBI中不同毒株的VP2共保守区段序列比对分析设计两对引物（片段长度为856bp和1356bp）和选择限制性内切酶BamHI和PstI进行RT-PCR扩增,并选择片段长度为856 bp的PCR产物,胶回收其目的基因进行限制性内切酶酶切,最后验证其特异性、敏感性和重复性,建立了IBDV强弱毒株鉴别诊断的RT-PCR-RFLP方法。综上,种母鸡免疫接种ND-IBD二联灭活苗后种母鸡及其子代获得较高抗体水平;此外,分析免疫组种母鸡种蛋的ND和IBD卵黄抗体水平与子代雏鸡的ND和IBD血清抗体水平的相关性,获得了它们之间的最优方程;最后建立了一种高效简便的IBDV野毒与苗毒的鉴别诊断RT-PCR-RFLP方法,为临床和生产实践制定科学的免疫程序提供科学依据和提供高效便利的监测手段;同时,为IBD的流行病学和诊断治疗研究提供了一种新的手段。
蒋大伟[6]（2016）在《鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的可溶性表达及其免疫特性的研究》文中研究表明鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease,IBD）是由传染性法氏囊病病毒（Infectious Bursal Disease virus,IBDV）引起的一种严重危害雏鸡免疫器官,致使雏鸡免疫失败,造成B淋巴细胞严重受损的高发性、高接触性的病毒性传染病。其主要特征是IBDV侵袭雏鸡的中枢免疫器官法氏囊,并在法氏囊B淋巴细胞中大量增殖,对该细胞造成严重杀伤,从而导致严重的免疫抑制,使机体免疫力下降,使疫苗免疫失效,给养禽业的疫病防控带来很大的困难。该病于上世纪八十年代开始在我国广泛流行,给我国的养禽业带来了巨大的经济损失。因此该病的防治防控对养殖业具有重要的价值和意义。VP2位于IBDV基因组中的A节段,是主要免疫保护性抗原,在其高变区含有主要的中和性抗原表位,因此被作为研发预防IBD亚单位疫苗的主要蛋白。目前,科研人员通过不同的表达系统表达VP2蛋白,其中以真核表达系统为主,该系统有很多优势,如表达水平较高,表达产物有翻译后加工修饰,表达产物纯度高利于后期纯化等,但由于真核表达成本高,操作也更繁琐,因此该系统并不利于大量表达VP2蛋白。尽管原核表达系统大肠杆菌表达IBDV VP2蛋白可溶性表达量较低,其主要表达产物是无活性的包涵体,且背景蛋白较多限制了其后期的纯化。但大肠杆菌表达系统的最大优势在于成本低,操作简单,为亚单位疫苗产业化提供了可能。因此,本研究主要利用大肠杆菌表达VP2蛋白,分别构建9种含有不同可溶性标签的表达载体,探讨不同可溶性标签对VP2蛋白的可溶性表达及纯化的影响。此外,本研究从技术方法上优化VP2的可溶性表达条件,明显提高了VP2蛋白的可溶性表达,利用亲和层析、分子筛和蔗糖梯度离心纯化VP2蛋白,并用电镜观察VP2蛋白形成的病毒样颗粒（VLPs）。最后,将表达的VP2蛋白及纯化形成的VLPs制备成亚单位疫苗进行免疫保护试验,结果显示制备的亚单位疫苗具有良好的免疫原性,其免疫保护作用明显高于目前的IBDV商业化疫苗。本研究为研发新型IBDV基因工程亚单位疫苗奠定了坚实基础,提供了高效的亚单位候选疫苗。1、为了解决VP2在原核大肠杆菌中可溶性表达量较低且难以纯化的技术问题,本试验将9种不同可溶性标签插入原核表达载体p ET21b,构建9种可溶性表达载体,并与VP2连接后转化至大肠杆菌进行融合表达,其中Grifin,MBP,SUMO,Thioredoxin,γ-crystallin,Ars C和Ppi B这7种标签可有效改善与VP2的可溶性表达。将这7种融合蛋白进一步通过亲和层析的方法纯化,结果显示,融合蛋白γ-crystallin-VP2的回收率最高,融合蛋白MBP-VP2的纯度最高,可达到90%以上的纯度。为了验证融合VP2蛋白和切除标签后的VP2蛋白是否存在活性,利用琼扩试验（AGP）检测这7种纯化后的融合蛋白。融合VP2蛋白和被切除标签的VP2蛋白都均能与IBDV的阳性血清抗体结合发生沉淀反应,表明含有标签的融合蛋白及被切除标签的VP2蛋白均具有活性。此外,电镜观察结果显示,融合蛋白MBP-VP2切除MBP标签后的VP2蛋白可观察到大小为25～50nm的颗粒,暗示切除标签后的VP2蛋白仍具有形成病毒样颗粒（VLPs）的能力。2、为了研究相关方法对VP2蛋白表达的影响,构建了重组表达菌株大肠杆菌BL21（DE3）p Lys S（p ET28a-VP2）,通过优化表达条件,使VP2的可溶性表达有了明显提高,经琼脂扩散试验检测表达VP2含量,琼扩效价可达到1:64。利用亲和层析方法、亲和层析结合分子筛纯化及亲和层析结合蔗糖梯度离心纯化,三种方法均能对VP2起到较好的纯化作用,其中镍柱纯化产物的纯度可达90%。经电镜观察,大肠杆菌表达的VP2蛋白经纯化后可组装成与天然IBDV构象类似的VLPs。亲和层析纯化后形成的VLPs含量高于亲和层析方法结合蔗糖梯度离心纯化后形成的VLPs含量。动态光散射分析,自组装成的VLPs均一度很高,直径为25nm的颗粒。本试验明显改善了VP2可溶性表达量,初步摸索了VP2形成VLPs的条件,为进一步制备基因工程亚单位疫苗奠定了基础。3、为了对上述VP2蛋白及其形成的VLPs进行免疫原性研究,用中等毒力B87株和超强毒力0504株分别制备纯化和未纯化免疫原各6种,按一定比例加油佐剂,共制备了12种不同抗原含量的基因工程亚单位疫苗。按生物制品标准进行理化检验和无菌检验,结果均符合要求。安全试验表明所制疫苗安全性好、无不良反应。用检验合格的疫苗分别免疫SPF鸡群,并设立对照,定期采血测定各组的免疫抗体滴度并进行比较。结果显示各组呈现不同的免疫抗体水平,自制的亚单位疫苗具有良好的免疫原性,可有效提高鸡群的体液免疫水平。免疫攻毒保护试验结果显示,各组均呈现了不同程度的免疫保护作用,自制疫苗可产生良好的免疫保护作用,尤其是B87株和0504株纯化组高含量VLPs和B87株未纯化组的中琼扩效价VP2亚单位疫苗其免疫保护率均可达90%,0504株未纯化组的低琼扩效价VP2亚单位疫苗其免疫保护率高达100%,因此,确定这4种IBDV亚单位油乳剂为候选疫苗。总之,筛选的4种候选疫苗其抗体水平和免疫保护率均显着高于目前商业化基因工程亚单位疫苗和中等毒力活疫苗,且抗体水平略高于商业化的全病毒灭活苗。本研究确定的候选疫苗具有良好的免疫保护作用、安全可靠,能有效地预防鸡传染性法氏囊病的发生,对养禽业的发展具有重要的意义和价值,同时也为制备最佳性价比的亚单位疫苗奠定了坚实的基础。关于候选疫苗的免疫期、保存期及其相关免疫程序的制定等问题,有待今后进一步深入研究。
李俊平[7]（2015）在《禽网状内皮组织增生症病毒与A亚群白血病病毒共感染的致病性分析》文中进行了进一步梳理近年来,我国鸡群中禽网状内皮组织增生症病毒（REV）和A亚群禽白血病病毒（ALV-A）的感染比较普遍,且存在共感染现象。禽源活疫苗中污染REV被认为是禽网状内皮组织增生症的主要传染源。本论文从鸡马立克氏病（MD）火鸡疱疹病毒活疫苗中分离到1株REV,完成了其全基因组序列测定与分析；建立了REV与ALV-A共感染试验模型,分析了共感染对鸡的致病性；成功构建了REV的感染性克隆,初步分析了碱基突变对病毒拯救的影响；建立了检测鸡MD活疫苗中污染REV的间接免疫荧光（IFA）方法,完善了禽源活疫苗中外源病毒检验的国家标准。从鸡MD火鸡疱疹病毒冻干活疫苗中分离到1株REV,命名为MD-2。对分离毒株的全基因组序列测定与分析表明,MD-2与美国野鸡源毒株APC-566、中国台湾鹅源毒株3410/06和中国东北鸡源分离毒株HLJR0901的亲缘关系最近,同源性高达99%以上,而与我国南方分离毒株HA9901同源性为96.7%,与美国鸭源毒株SNV同源性相对最低,为93.5%。用REV、ALV-A进行了1日龄SPF鸡的单感染和共感染试验,分析了REV和ALV-A共感染的致病性。结果表明,REV和ALV-A共感染对鸡呈现出明显的协同致病作用,表现为共感染组鸡的病死率较高,体重下降,CD4+/CD8+T淋巴细胞比值、法氏囊比重和胸腺比重显着降低。在常规免疫、活疫苗或灭活疫苗免疫状态下,低日龄（1日龄）和高日龄（10日龄）感染均会引起免疫鸡的体重下降和一定的死淘率,其中共感染造成的影响更加严重。常规免疫下,共感染组会引起低日龄感染鸡胸腺比重和法氏囊比重显着下降,各种感染组对外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞比例影响均不显着,但共感染组CD4+/CD8+比值一直低于其他各组,具有一定的规律性,表现出抑制体液免疫的趋势。灭活疫苗免疫下,共感染和REV单感染引起新城疫（ND）血凝抑制（HI）抗体效价、H5亚型禽流感HI抗体效价和H9亚型禽流感HI抗体效价显着下降,其中共感染组下降幅度更大,此外,共感染和REV单感染还均引起传染性法氏囊病（IBD）抗体阳性率降低。活疫苗免疫下,ND首免后共感染和REV单感染组的HI抗体效价均显着高于ALV-A单感染组和对照组,加强免疫后又低于后两组。总体而言,REV感染对灭活疫苗免疫造成的免疫抑制作用强于对活疫苗免疫造成的抑制,ALV-A单感染引起的免疫抑制作用较弱。此外,试验还表明,REV感染未发生垂直传播,而ALV-A能够引起严重的垂直传播。ALV-A单感染与共感染组到达产蛋日龄时（131日龄）,ALV-A抗体阳性率分别为31%和48%,子代9日龄鸡胚ALV-A分离阳性率分别为57.9%（11/19）和20%（3/15）,7日龄雏鸡ALV-A分离阳性率分别为66.7%（6/9）和36.4%（4/11）。随着日龄的增大,鸡对ALV-A耐受感染迅速下降,10日龄鸡单感染或共感染ALV-A后,ALV-A抗体阳性率达80%以上。各感染组对血清中9种细胞因子浓度和外周血淋巴细胞中7种Toll样受体mRNA转录水平总体影响不明显,无明显规律性。构建了REV MD-2的感染性克隆,拯救病毒的生长特性与亲本毒一致,且遗传标记能够稳定遗传。并通过定点突变技术对env基因中5个碱基进行了分别突变,发现第1433位碱基由T突变为G,导致env前蛋白第478位氨基酸由异亮氨酸突变为精氨酸,为致死性突变。建立了鸡MD活疫苗中污染REV的IFA检测方法。该方法对Ⅰ型MD活疫苗、MD火鸡疱疹病毒活疫苗和MD二价活疫苗的最低检出量分别为每500羽份疫苗中污染5、10和15TCID50的REV。综上结果,本研究揭示了REV和ALV-A共感染对鸡的协同致病作用,为养禽生产中重视其共感染的控制提供了科学依据。
李坚,袁明龙[8]（2012）在《休闲观光场所鸽新城疫的免疫试验与探讨》文中研究表明近年来,常有关鸽自然感染新城疫（Newcastle disease,ND）的报道,由Ⅰ型副粘病毒引起的鸽新城疫,是威胁养鸽业的主要疫病之一。鸽新城疫的发生不仅造成经济损失,更给休闲娱乐场所的人们带来身心健康的损害,以及严重的社会不利影响。因此,在目前对鸽新城疫未有充分认识与足够重视的大环境下,预防鸽新城疫显得更为重要。免疫接种是防制疫病发生的关键措施,在认真做好禽流感免疫的同时
鲁俊鹏,曾凡桂,黄宁海,刘闯[9]（2012）在《不同法氏囊病活疫苗对新城疫免疫效果影响的评估》文中研究说明为了评估不同毒力鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease,IBD）活疫苗是否会对鸡的免疫应答产生影响,本实验选用A、B、C三种商品化IBD活疫苗免疫商品肉鸡,以鸡新城疫（Newcastle Disease,ND）疫苗抗体的消长规律为模型,评估3种I BD疫苗对ND抗体产生的影响.免疫后ND抗体检测结果显示,三种疫苗对ND抗体产生的影响差异不明显。结果提示,临床上选用IBD疫苗不必过于关注其毒力。
刘瑞生,吕永锋,王必慧[10]（2012）在《鸡传染性支气管炎研究进展》文中研究表明传染性支气管炎（Infectious Brochitis,简称IB）是由传染性支气管炎病毒（IBV）引起鸡的一种急性、高度接触性传染病,主要危害鸡呼吸和泌尿生殖道,感染鸡可由于呼吸道或肾脏病变而引起死亡。耐过鸡生产性能和饲料报酬降低,极易继发
二、4株鸡IBD活疫苗对鸡ND免疫抗体的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、4株鸡IBD活疫苗对鸡ND免疫抗体的影响（论文提纲范文）
（1）新疆部分规模化鸡场传染性支气管炎的免疫抗体检测及免疫程序的制定（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 病原学 |
| 1.1 病毒的基因组及主要蛋白 |
| 1.2 病毒的理化特征 |
| 1.3 病毒的培养特性 |
| 2 IBV流行病学 |
| 2.1 IBV的国内流行现状 |
| 2.2 IBV的国外流行现状 |
| 3 IBV的致病机理及病理变化 |
| 3.1 肾型 |
| 3.2 呼吸型 |
| 3.3 腺胃型 |
| 3.4 其他型 |
| 4 IBV的诊断 |
| 4.1 病原学诊断 |
| 4.2 血清型诊断 |
| 4.3 分子生物学诊断 |
| 5 IBV的防治 |
| 5.1 IBV的预防 |
| 5.2 IBV的治疗 |
| 6 本文的研究目的与意义 |
| 第二章 实验研究 |
| 实验一 新疆某规模化养殖公司肉鸡场传染性支气管炎抗体检测 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 疫苗免疫情况及发病情况 |
| 2.2 抗体检测结果 |
| 3 分析与讨论 |
| 3.1 种鸡场的调查结果分析 |
| 3.2 商品场的调查结果分析 |
| 实验二 IBV不同毒株疫苗免疫抗体的监测 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 A方案检测结果 |
| 2.2 B方案检测结果 |
| 2.3 C方案检测结果 |
| 3 分析与讨论 |
| 实验三 传染性支气管炎免疫程序的改进和效果评价 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 IBV抗体检测结果 |
| 2.2 鸡群的生产性能调查结果 |
| 3 分析与讨论 |
| 3.1 抗体检测结果分析 |
| 3.2 生产性能对比结果分析 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 |
（2）新疆某规模化鸡场新城疫抗体的动态监测及免疫程序的优化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 新城疫的研究现状 |
| 1.1 新城疫的病原学 |
| 1.2 新城疫的流行病学 |
| 1.3 新城疫的临床症状及病理变化 |
| 1.4 新城疫的诊断 |
| 1.5 新城疫防控 |
| 2 本研究的目的与意义 |
| 第二章 试验研究 |
| 试验一 近四年新城疫免疫抗体的动态监测 |
| 1 材料 |
| 1.1 样品 |
| 1.2 试验仪器 |
| 1.3 试验试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 3个麻羽种鸡场近四年的免疫程序 |
| 2.2 样品采集 |
| 2.3 NDV抗体检测方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 三个种鸡场近四年NDV抗体检测结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 试验二 不同疫苗免疫抗体的检测及免疫效果对比 |
| 1 材料 |
| 1.1 样品 |
| 1.2 试验仪器 |
| 1.3 试验试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 抗体检测 |
| 2.2 免疫效果对比 |
| 3 结果 |
| 3.1 各型疫苗免疫后抗体检测结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 试验三 新城疫免疫程序的优化方案 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验疫苗 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 试验试剂及仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 免疫程序的优化 |
| 2.2 NDV抗体检测 |
| 2.3 免疫后鸡群健康状况监测 |
| 3 结果 |
| 3.1 免疫程序的优化 |
| 3.2 NDV抗体检测 |
| 3.3 免疫后鸡群的健康情况 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师评阅表 |
（3）ND-IBD二联灭活苗对商品蛋雏鸡免疫效果及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩词列表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 ND与IBD研究进展 |
| 2 ND和IBD疫苗的研究进展 |
| 2.1 ND与IBD活苗的研究进展 |
| 2.2 ND与IBD灭活苗的研究进展 |
| 2.3 疫苗佐剂 |
| 2.4 ND与IBD的疫苗免疫研究进展及注意事项 |
| 3 ND-IBD二联灭活苗研究进展 |
| 4 疫苗对免疫因子的影响 |
| 5 本课题研究的目的与意义 |
| 第二章 ND-IBD二联灭活疫苗免疫1、7日龄商品蛋鸡的免疫效果研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 毒株 |
| 1.3 试验用疫苗 |
| 1.4 试剂及试剂盒 |
| 1.5 主要试验仪器 |
| 1.6 试验用饲料 |
| 1.7 试验基地 |
| 1.8 试验数据分析相关软件 |
| 2 试验设计 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 抗体检测 |
| 2.3 攻毒保护试验 |
| 2.4 引物的设计与合成 |
| 2.5 组织RNA抽提 |
| 2.6 cDNA的合成 |
| 2.7 实时荧光定量PCR |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 商品蛋鸡血清IBD抗体水平检测 |
| 3.2 ND-IBD二联灭活疫苗对商品蛋鸡IBD抗体的影响 |
| 3.3 ND-IBD二联灭活疫苗对商品蛋鸡ND抗体的影响 |
| 3.4 攻毒保护试验结果 |
| 3.5 ND-IBD二联灭活疫苗对商品蛋鸡法氏囊中CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-βmRNA表达量的影响 |
| 3.6 ND-IBD二联灭活疫苗对商品蛋鸡脾脏中CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-βmRNA表达量的影响 |
| 4 讨论 |
| 第三章 ND-IBD二联灭活疫苗与IBD活疫苗免疫7日龄商品蛋雏鸡的效果比较研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 毒株 |
| 1.3 试验用疫苗 |
| 1.4 试剂及试剂盒 |
| 1.5 主要试验仪器 |
| 1.6 试验用饲料 |
| 1.7 试验基地 |
| 1.8 试验数据分析相关软件 |
| 2 试验设计 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 抗体检测 |
| 2.3 攻毒保护试验 |
| 2.4 引物设计与合成 |
| 2.5 组织RNA抽提 |
| 2.6 cDNA的合成 |
| 2.7 实时荧光定量PCR |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 ND-IBD二联灭活疫苗与弱毒活苗对商品蛋鸡IBD抗体的影响 |
| 3.2 攻毒保护试验结果 |
| 3.3 ND-IBD二联灭活疫苗与弱毒活苗对商品蛋鸡法氏囊中CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-βmRNA表达量的影响 |
| 3.4 ND-IBD二联灭活疫苗与弱毒活苗对商品蛋鸡脾脏中CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-βmRNA表达量的影响 |
| 4 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（4）胚胎免疫传染性法氏囊疫苗在肉鸡生产中的优化及应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 鸡传染性法氏囊病的概述 |
| 2 胚胎免疫的研究进展 |
| 2.1 胚胎免疫概述 |
| 2.2 胚胎免疫的作用机理 |
| 2.3 鸡胚胎免疫研究进展 |
| 2.4 传染性法氏囊疫苗胚胎免疫的作用机理 |
| 3 胚胎免疫在生产应用中的现状 |
| 4 本研究的目的及其意义 |
| 第二章 胚胎免疫与传统免疫的比较 |
| 1 试验材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验动物及处理 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.4 试验数据处理 |
| 2 |
| 2.2 试验结果与分析 |
| 2.2.1 胚胎免疫与传统免疫孵化率的比较 |
| 2.2.2 胚胎免疫与传统免疫后期死胚率(18. 5-21d未出雏的死胚)的比较 |
| 2.2.3 胚胎免疫与传统免疫白羽肉鸡抗体滴度的比较 |
| 2.2.4 胚胎免疫与传统免疫白羽肉鸡死亡淘汰率的比较 |
| 2.2.5 胚胎免疫与传统免疫白羽肉鸡体重的比较 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 胚胎免疫在生产中条件的优化 |
| 1 试验材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验动物及处理 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 注射器设备针头参数对胚胎免疫的影响 |
| 2.2 种蛋落盘(注射)d对胚胎免疫的影响 |
| 2.3 种蛋周期对胚胎免疫的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 注射器设备针头参数对胚胎免疫的影响 |
| 3.2 种蛋落盘(注射)d对胚胎免疫的影响 |
| 3.3 种蛋周期对胚胎免疫的影响 |
| 第四章 胚胎免疫在生产应用中的研究 |
| 1 试验材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验动物及处理 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 试验结果与分析 |
| 2.1 胚胎免疫对白羽肉鸡孵化率的影响 |
| 2.2 胚胎免疫对白羽肉鸡后期死胚率的影响 |
| 2.3 胚胎免疫对白羽肉鸡抗体滴度的影响 |
| 2.4 胚胎免疫对白羽肉鸡抗体阳性率的影响 |
| 2.5 胚胎免疫对白羽肉鸡死亡淘汰率的影响 |
| 2.6 胚胎免疫对白羽肉鸡体重的影响 |
| 3 讨论 |
| 第五章 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）ND-IBD二联灭活苗对种母鸡的免疫效果及IBDV强弱毒株鉴别诊断研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1 IBD研究进展 |
| 1.1 IBD流行病学特点 |
| 1.2 IBD病原学特征 |
| 1.3 IBDV基因组结构与VP2蛋白 |
| 1.4 IBDV毒株 |
| 1.5 IBDV的诊断 |
| 1.6 IBD的防治 |
| 2 ND研究进展 |
| 2.1 ND流行病学特点 |
| 2.2 ND病原学特征 |
| 2.3 ND的诊断 |
| 2.4 ND的防制 |
| 3 ND和IBD疫苗的研究进展 |
| 3.1 IBD疫苗研究进展 |
| 3.2 ND疫苗研究进展 |
| 3.3 疫苗的基本要求 |
| 3.4 免疫失败的原因 |
| 4 疫苗免疫监测方法 |
| 5 PCR-RFLP研究进展 |
| 5.1 PCR-RFLP的基本原理 |
| 5.2 PCR-RFLP技术的应用 |
| 6 本研究目的和意义 |
| 第二章 ND-IBD二联灭活苗对100日龄种母鸡的免疫效果研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验动物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 试验分组 |
| 2.2 免前抗体水平检测 |
| 2.2.1 HA试验(微量法) |
| 2.2.2 HI试验(微量法) |
| 2.2.3 TCVN(固定病毒稀释血清) |
| 2.3 免后抗体水平检测 |
| 2.4 种蛋的收集 |
| 2.5 子代雏鸡抗体水平检测 |
| 2.6 攻毒保护试验 |
| 2.7 数据处理 |
| 3 结果分析 |
| 3.1 ND-IBD二联灭活苗对种母鸡ND抗体水平的影响 |
| 3.2 ND-IBD二联灭活苗对种母鸡IBD抗体水平的影响 |
| 3.3 四批次孵化雏鸡ND抗体水平的分析 |
| 3.4 四批次孵化雏鸡IBD抗体水平的分析 |
| 3.5 攻毒保护结果 |
| 3.6 中和试验中DF-1细胞病变观察 |
| 4 讨论 |
| 第三章 ND和IBD卵黄抗体与子代血清抗体的相关性分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 试验分组 |
| 2.2 氯仿法提取卵黄抗体 |
| 2.3 HI试验和ELISA试验 |
| 2.4 数据处理 |
| 2.5 结果的比对 |
| 3 结果分析 |
| 3.1 种蛋ND卵黄抗体与子代血清抗体水平几何均值 |
| 3.2 种蛋IBD卵黄抗体与子代血清抗体水平几何均值 |
| 3.3 免疫组种蛋ND卵黄抗体与子代血清ND抗体水平相关性分析 |
| 3.4 免疫组种蛋IBD卵黄抗体与子代血清抗体水平相关性分析 |
| 3.5 血清抗体水平与卵黄抗体水平比对结果 |
| 4 讨论 |
| 第四章 IBDV强弱毒株鉴别诊断方法的建立 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 引物的设计与合成 |
| 2.2 病毒RNA提取 |
| 2.3 RT-PCR以及PCR扩增 |
| 2.4 PCR产物测序 |
| 2.5 琼脂糖凝胶回收目的基因 |
| 2.6 限制性内切酶BamHI和PstI进行酶切 |
| 2.7 特异性试验 |
| 2.8 敏感性试验 |
| 2.9 重复性试验 |
| 2.10 病料检测 |
| 3 结果分析 |
| 3.1 BC6-85和B87 VP2基因的RT-PCR扩增结果 |
| 3.2 BC6-85和B87酶切结果 |
| 3.3 特异性试验结果 |
| 3.4 敏感性试验结果 |
| 3.5 重复性试验结果 |
| 3.6 病料PCR-RFLP检测结果 |
| 4 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间的学术论文与研究成果 |
| 致谢 |
（6）鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的可溶性表达及其免疫特性的研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 鸡传染性法氏囊病的概述 |
| 1.2 传染性法氏囊病病毒的生物学特性 |
| 1.3 IBDV的基因组 |
| 1.4 IBDV的编码蛋白 |
| 1.5 IBDV的毒力及致病性研究 |
| 1.6 IBDV VP2蛋白的B细胞表位研究进展 |
| 1.7 IBD的诊断 |
| 1.8 IBD疫苗的研究进展 |
| 1.9 目前存在的问题及本研究的目的意义 |
| 2 9种标签对IBDV VP2蛋白可溶性表达及纯化的影响 |
| 引言 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的原核表达与纯化 |
| 引言 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 IBDV VP2 蛋白免疫原性的研究 |
| 引言 |
| 4.1 材料 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 5 全文总结 |
| 参考文献 |
| ABSTRACT |
（7）禽网状内皮组织增生症病毒与A亚群白血病病毒共感染的致病性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 插图与附表清单 |
| 缩略词表 |
| 第一章 引言 |
| 1.1 国内外研究现状 |
| 1.2 研究目的与意义 |
| 1.3 研究内容与技术路线 |
| 1.4 研究目标 |
| 第二章 鸡马立克氏病HVT活疫苗中污染REV的分离鉴定及基因组序列分析 |
| 摘要 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 REV与ALV-A共感染对SPF雏鸡的致病性分析 |
| 摘要 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 REV与ALV-A共感染对疫苗免疫鸡的致病性分析 |
| 摘要 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 REV分离株MD-2感染性克隆的构建及突变分析 |
| 摘要 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 鸡MD活疫苗中污染REV检测方法的建立 |
| 摘要 |
| 6.1 前言 |
| 6.2 材料与方法 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 小结 |
| 第七章 结论 |
| 第八章 创新点 |
| 第九章 文献综述 |
| 9.1 病原学 |
| 9.2 流行病学比较 |
| 9.3 检测与诊断 |
| 9.4 生物制品中的病毒污染 |
| 9.5 预防和控制 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（9）不同法氏囊病活疫苗对新城疫免疫效果影响的评估（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 鸡群免疫及采血 |
| 1.3 ND抗体检测 |
| 2 结果和分析 |
| 2.1 不同免疫组、不同天龄ND HI水平 |
| 2.2 各组各天龄抗体水平变化规律 |
| 3 小结与讨论 |
四、4株鸡IBD活疫苗对鸡ND免疫抗体的影响（论文参考文献）
- [1]新疆部分规模化鸡场传染性支气管炎的免疫抗体检测及免疫程序的制定[D]. 李新伟. 石河子大学, 2020(05)
- [2]新疆某规模化鸡场新城疫抗体的动态监测及免疫程序的优化[D]. 时锋. 石河子大学, 2020(05)
- [3]ND-IBD二联灭活苗对商品蛋雏鸡免疫效果及机制研究[D]. 星东. 福建农林大学, 2017(01)
- [4]胚胎免疫传染性法氏囊疫苗在肉鸡生产中的优化及应用[D]. 丁丽琼. 福建农林大学, 2017(01)
- [5]ND-IBD二联灭活苗对种母鸡的免疫效果及IBDV强弱毒株鉴别诊断研究[D]. 赖隆永. 福建农林大学, 2017(01)
- [6]鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的可溶性表达及其免疫特性的研究[D]. 蒋大伟. 河南农业大学, 2016(06)
- [7]禽网状内皮组织增生症病毒与A亚群白血病病毒共感染的致病性分析[D]. 李俊平. 中国农业大学, 2015(07)
- [8]休闲观光场所鸽新城疫的免疫试验与探讨[J]. 李坚,袁明龙. 上海畜牧兽医通讯, 2012(03)
- [9]不同法氏囊病活疫苗对新城疫免疫效果影响的评估[J]. 鲁俊鹏,曾凡桂,黄宁海,刘闯. 广东畜牧兽医科技, 2012(02)
- [10]鸡传染性支气管炎研究进展[J]. 刘瑞生,吕永锋,王必慧. 家禽科学, 2012(01)
标签：抗体论文; 鸡传染性法氏囊病论文; 血清蛋白论文; 传染病论文; 问题疫苗论文;