一、人脐血白细胞干扰素的纯化及性质研究（论文文献综述）
戚中田,杜平[1]（1983）在《人脐血白细胞干扰素的纯化及性质研究》文中研究说明本实验研究了不同温度、不同KCNS浓度、不同PH及不同盐析次数对人脐血白细胞干扰素（下称人脐血IFN）的活件、纯度和回收的影响;观察了人脐血IFN与蓝色葡聚糖的亲和能力及其在Ccn A-Sepharose 4B柱和蓝葡聚糖2000-Sepharose 4B（BDS）柱上的层析行为;建立了简易可行的IFN纯化系统;测定了人脐血IFN的分子量;并提出了人脐血IFN是一组糖基隐蔽在分子内部的糖蛋白质的设想 建立的IFN纯化系统包括两步:第一步为“粗提”,系采用KCNS-酒精法;第二步为“精提”,系采用BDS柱亲和层析法。实验结果表明:沉淀粗制干扰素的最适条件是加入0.5M KCNS、调至pH4.0;析出干扰素的最佳pH是5.5～7.2;KCNS盐析一次与两次结果大致相同;冰酒精保冷普通离心机离心,对酒精溶液中的IFN活性无明显影响。粗制干扰素经第一步纯化,活性回收70％左右,比活性约为106国际单位mg蛋白-1。达到了临床级IFN的国际标准,可供临床试用;再经第二步,用BDS柱纯化,以0.4 M NaCl和0.8 M NaCl液分段洗脱,IFN活性回收40％以上,最高活性组份的纯度达107国际单位mg蛋白-1。分析性SDS-PAGE上呈现两条蛋白质区带。 实验结果还表明,人脐血干扰素对SDS、核酸酶和pH 2稳定;对蛋白酶敏感;具有明显的种属特异性;SDS-PAGE凝胶切片活性测定证明分子量在18.3K～24
侯云德,张智清,杨新科,吴淑华,李玉英,彭金枝,李应霞,杨崇泰,付秋林,胡裕文,赵海燕,王兰芝,段淑敏,苏小玲,张秀珍,张丽兰,史连永,刘小蕊[2]（1982）在《人白细胞干扰素基因的克隆化及其在大肠杆菌中的表达》文中提出以新城疫病毒F株诱生的人脐血白细胞内提取的12S聚（A）RNA制备dscDNA,以pBR322为载体,建立了人干扰素cDNA的无性繁殖系,后者为0.85kb,并在大肠杆菌中有明显表达,达1.3～18×104单位/升菌液。经血清学和理化鉴定,表达的多肽为人α干扰素。
郑亚凤[3]（2008）在《高多糖的姬松茸和灰树花品种及其生物活性的研究》文中研究说明收集了全国26份姬松茸和29份灰树花茵种,筛选出高多糖的姬松茸和灰树花品种,并研究其多糖的生物活性,主要结果如下:1.通过RAPD、SRAP、ISSR分子标记和ITS序列扩增对26（A01～A26）份姬松茸菌种过行多态性分析,综合四种分子标记的结果,采用类平均法（UPGMA）进行聚类分析,姬松茸可分为4大类.其中第2类的A08和A10茵种间的相异系数为0;第3类的A15、A16、A17菌种间的相异系数为0;第4类的A20、A21、A22菌种间的相异系数为0;这些菌种是同种异名,为同一个栽培种.通过RAPD、SRAP和ISSR的综合聚类分析,29份灰树花菌种（G01～G29）可分为8大类.其中第3类的G15与G16菌种间的相异系数为0;第8类的G07和G10菌种间的相异系数为0;第8类的G14、G18、G21、G26、G27菌种间的相异系数为0;这些菌种是同种异名,为同一个栽培种.2.采用正交法,对热水浸提法,超声辅助热水浸提法及微波辅助热水漫提法的姬松茸、灰树花多糖提取工艺进行了优化.姬松茸多糖热水浸提法的最佳工艺为:pH值7.5,料水比为1∶20,提取温度为100℃,提取时间为4 h,醇沉浓度为100%,多糖提取率为12.17%,多糖含量为64.84%.超声辅助热水浸提法的最佳条件为:超声功率600W,超声时间4min,漫提时间2h,多糖提取率为13.76%,多糖含量为54.97%;应用超声波可提高姬松茸多糖提取率13.06%,但是多糖含量下降了9.87%.微波辅助热水浸提法的最佳条件为:中功率,微波时间4min,水提2h,多糖提取率为14.13%,多糖含量为66.29%;应用微波可提高姬松茸多糖提取率16.10%,对多糖含量没有显着影响.灰树花多糖热水浸提法的最佳工艺为:pH值7.5,料水比为1∶20,提取温度为100℃,提取时间为4 h,醇沉浓度为95%,多糖提取率为7.08%,多糖含量为73.49%.超声辅助热水浸提法的最佳条件为:超声功率400W,超声时间6min,浸提时间2h,多糖提取率为8.04%,多糖含量为58.60%;应用超声波可提高灰树花多糖提取率13.56%。但与热水浸提法相比,多糖含量下降了14.89%.微波辅助热水浸提法的最佳条件为:高功率,微波时间4min,水提2h,多糖提取率为9.17%,多糖含量为70.41%,应用微波可提高灰树花多糖提取率29.52%,对多糖含量没有显着影响.3.对4类姬松茸品种和8类灰树花品种的多糖进行提取测定.筛选出高多糖姬松茸品种“AB01”,其发酵胶多糖含量达2.05mg/ml,是应用面积最广品种“N-2”（1.44mg/ml）的1.42倍,是平均值（1.27mg/ml）的1.61倍,是多糖含量最低品种“AB03”（0.61mg/ml）的3.36倍.该品种的深层发酵产量高,胞内多糖含量为12.04%,胞外多糖含量为1.54mg/ml.筛选出高多糖灰树花品种“GF06”,其发酵胶多糖含量达1.65mg/ml,是应用面积最广品种“52”（0.65mg/ml）的2.53倍,是平均值（0.59mg/ml）的2.79倍,是多糖含量最低品种“GF03”（0.22mg/ml）的7.50倍.该品种胞内多糖含量为7.22%,胞外多糖含量为0.98 mg/ml.4.通过构建小鼠S180荷瘤模型对姬松茸和灰树花及复合多糖组分进行抗肿瘤作用研究.姬松茸组中:“AB01”的发酵胶多糖（AB01-P）对小鼠S180肿瘤有极显着的抑制活性,与剂量呈正相关,高剂量组的抑瘤率为45.36%;高于“AB03”的发酵胶多糖（AB03-P）的最佳抑瘤率（25.14%）、“AB01”的胞内多糖（AB01-P-1）的最佳抑瘤率（36.61%）、“AB01”的胞外多糖（AB01-P-2）的最佳抑瘤率（30.05%）.灰树花组中:“GF06”的发酵胶多糖（GF06-P）有极显着的抑制S180肿瘤活性,与剂量呈正相关,高剂量组的抑瘤率为42.08%;高于“GF03”的发酵胶多糖（GF03-P）的最佳抑瘤率（26.78%）、“GF06”的胞内多糖（GF06-P-1）的最佳抑瘤率（38.25%）、“GF06”的胞外多糖（GF06-P-2）的最佳抑瘤率（39.89%）.“AB01”和“GF06”发酵胶复合多糖（AG-P）低、中剂量组的抑瘤率呈剂量效应,高剂量组的抑瘤率较中剂量组没有提高,中剂量组的抑瘤率为49.18%.结果表明复合多糖组的抑瘤率较单个菌种多糖给药组略有提高.与对照组相比,姬松茸、灰树花及复合多糖各组分均可显着或极显着地提高S180荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数（免疫指标）.5.采用Annexin V/PI双染色流式细胞仪研究了高多糖姬松茸品种“AB01”发酵胶多糖（AB01-P）、高多糖灰树花品种“GF06”发酵胶多糖（GF06-P）和复合多糖（AG-P）对人骨肉瘤细胞株（MG-63）早期凋亡的影响.结果表明AB01-P可诱导MG-63细胞凋亡,且具有量效关系,2.0mg/ml剂量组的凋亡率为30.98%;GF06-P对MG-63细胞凋亡没有明显作用.AG-P对MG-63细胞有一定的凋亡作用,凋亡率为16.35%,不具剂量效应.6.应用RT-PCR技术,研究了AB01-P和GF06-P对人脐血粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）基因表达的影响。AB01-P有诱导人脐血单个核细胞表达GM-CSF的作用,最佳浓度为2.0μg/ml,从而证实了姬松茸多糖促进粒-巨噬细胞生成和调节动物机体免疫功能的分子机理.GF06-P对人脐血单个核细胞GM-CSF基因表达的诱导作用不明显.7.通过果蝇生存试验计数果蝇半数死亡天数、平均寿命、最高平均寿命;测定果蝇组织匀浆中的SOD（超氧化物歧化酶）值、MDA（丙二醛）含量和总抗氧化能力值.姬松茸组中:AB01-P对果蝇平均寿命的延长率最高,与对照组相比,对雄果蝇寿命的延长率达17.32%,对雌果蝇的寿命延长率为11.40%;对果蝇半数死亡的延长率为10.81%（雄）,10.21%（雌）;对果蝇平均最高寿命的延长率为15.91%（雄）,13.11%（雌）.灰树花组中:GF06-P能显着延长雌果蝇的平均寿命,延长率为为22.00%,对雄果蝇寿命的延长率为17.67%;对果蝇半数死亡的延长率为13.31%（雄）,19.71%（雌）;对果蝇平均最高寿命的延长率为12.74%（雄）,28.32%（雌）.复合多糖AG-P对雄果蝇的寿命延长率达23.78%;对雌果蝇寿命延长率为13.06%;显着延长雄果蝇平均最高寿命,延长率为20.77%,对雌果蝇平均最高寿命的延长率为19.01%.AB01-P能极显着提高雄果蝇的总抗氧化能力,提高率为28.89%,对雌果蝇没有影响.AB01-P-2能极显着提高雄性果蝇的SOD值,提高率为42.77%,但对雌果蝇没有影响;极显着提高雄雌果蝇的总抗氧化能力,提高率分别为68.89%、40.54%.GF06-P能显着提高雄果蝇的总抗氧化能力,提高率为17.78%;极显着提高雌果蝇的总抗氧化能力,提高率为48.64%.GF06-P-1可以显着降低雌性果蝇的MDA含量,极显着降低雄性果蝇的MDA含量;显着提高雌果蝇的总抗氧化能力,提高率为18.92%。GF06-P-2可以显着提高雄果蝇的SOD值,提高率为12.26%;极显着提高雌果蝇SOD值,提高率为38.41%.复合多糖（AG-P）可以显着降低雌性果蝇的MDA值,但对雄性果蝇没有显着影响.
李万君[4]（1983）在《人干扰素的种类及临床应用的安全性》文中研究说明 干扰素的发现已有20余年,初期主要集中在动物干扰素的研究,人干扰素的研究和用于临床防治病毒性疾病及恶性肿瘤,仅仅是近10来年的事。 干扰素的种类很多,国际新的命名法是按其抗原性分为:α—干扰素、β—干扰素和γ—干扰素三种。旧的命名法中,把a、β—干扰素称为Ⅰ型;γ—干扰素称之为Ⅱ型。按干扰素在生物界的分布,有:人干扰
张咏南,周淑琴[5]（1983）在《氯化钙对病毒诱生人脐血干扰素的刺激作用》文中研究说明在病毒诱生人脐血干扰素的过程中,不论在 NDV 吸附、诱导的同时或在生产时加入5mMCaCl2 都可使干扰素效价提高3—4倍;在吸附、诱导和生产时都加入,亦产生高效价干扰素。5mMCaCl2 增强干扰素的效果比部分纯化干扰素（P-IFN）的启动作用显着.10mMCaCl2 在病毒吸附诱导的同时加入亦有一定的刺激怍用,而在生产时加入则出现抑制现象.CaCl2 有促进溶血的作用,在干扰素酸化、中性化和冻化过程中尚有促进蛋白沉淀的作用。低速离心可除去沉淀下来的血红蛋白等物质。
马丽辉[6]（2008）在《骨髓间充质干细胞治疗类风湿关节炎机制和相关研究》文中研究表明类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）是一种高度致残的自身免疫性疾病,是我国造成劳动力丧失和致残的主要病因之一。RA目前尚无根治的方法,临床上所用药物仪能够在一定范围和程度上改善症状、延缓病情进展,且这些药物的副作用较大。另外,迄今为止的研究认为,RA造成的关节滑膜和软骨的破坏是不可逆转的,药物治疗无效,后期关节变形只能借助外科手术矫正。所以目前临床上急需寻找一种有效控制甚至根治类风湿关节炎的方法。骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）是一种具有高度自我增殖能力和多向分化潜能的干细胞。研究表明它具有免疫调节特性,MSCs在维持机体免疫平衡耐受、移植免疫耐受、自身免疫和肿瘤免疫逃逸以及胎-母免疫耐受方面都起到了一个重要作用。MSCs可以作用于T、B淋巴细胞,NK细胞,DC细胞等参与机体免疫调节。另外组织修复是MCSs又一个重要的特性,它参与多种组织的再生和修复。MSCs是一种基质千细胞,在特定的诱导条件下可以分化成多系组织细胞,同时MSCs可以分泌多种基质分子,改善局部受损环境加速损伤修复。近几年临床上MSCs在免疫方面的特性和免疫调节作用越来越受到关注,并有望成为治疗免疫性疾病的工具。所以利用骨髓间充质干细胞定向趋化、调节免疫、促血管和软骨修复等作用有可能为治疗类风湿关节炎找到新的出路。因此,MSCs是否可以治疗RA,以及其治疗机制值得深入研究。本文主要在MSCs治疗类风湿关节炎方面进行了一部分相关的研究。为临床上利用MSCs治疗RA提供可靠的实验基础和理论依据。本文的第一部分主要是骨髓间充质干细胞调节类风湿关节炎患者免疫机制的体外研究。体外实验中我们采集了类风湿关节炎患者的骨髓标本,分离、培养和扩增了RA患者骨髓间充质干细胞,观察了原代和传代的类风湿关节炎患者骨髓间充质千细胞的细胞形态,体外增殖能力、集落形成状况、细胞表面标记、以及电镜超微结构等一般生物学特性;另外在体外实验中我们将MSCs与RA患者T,B淋巴细胞共培养,观察了不同比例状态下MSCs共培养对RA患者T,B淋巴细胞的增殖,活化和功能成熟以及对其免疫调节和产生细胞因子等的影响。实验结果显示,来自RA患者的MSCs呈典型的成纤维样细胞形态、表型鉴定CD45阴性,SH2（CD105）、CD71、CD44均阳性,其增殖能力和CFU-F集落形成状况、以及电镜超微结构等方面都与来源于健康对照组的MSCs无明显差异;MSCs与RA患者T、B淋巴细胞共培养研究发现,正常骨髓来源的MSCs对PHA和SAC刺激的RA患者T、B淋巴细胞的增殖均有抑制作用,并且这种抑制作用与BM-MSC的剂量呈依赖性;MSCs可以阻止T细胞进入细胞增殖周期;MSCs可以明显抑制活化的RA患者T淋巴细胞凋亡;但是MSC能促进B细胞功能成熟,分泌IgG增加。结果提示MSCs在多个环节对T,B淋巴细胞有免疫调节作用,并且上述的免疫调节作用不受MHC的限制。在MSCs对细胞因子产生影响的研究中,我们分别用ELASA方法检测了MSCs与RA患者淋巴细胞共培养上清液中IL-1、TNF-a、TGF-β1的含量,同时用RT-PCR检测了细胞内IL-1、TNF-a、TGF-β1的基因表达。我们看到MSCs与患者淋巴细胞共培养时可以影响IL-1、TNF-a及TGF-β1等细胞因子的产生和表达。在第二部分的研究中,我们利用动物实验主要探讨了在机体内环境下,MSCs对类风湿关节炎大鼠模型的免疫紊乱调节和关节滑膜、软骨损伤的修复效应,以及MSCs治疗类风湿关节炎的可行性、作用机制和治疗途径。我们将体外培养扩增后的MSCs经Brdu标记后从实验动物尾静脉注入,对模型大鼠进行异基因MSCs移植治疗。观察了治疗前后实验动物一般状况和关节肿胀的变化,同时从整体角度,动态观察了MSCs治疗前后实验动物外周血象变化;血清中IL-1、TNF-a及TGF-β1等细胞因子的变化,从局部角度观察了MSCs在受损关节局部滑膜、软骨区的趋化和聚集,以及对受损关节局部滑膜、软骨破坏的保护和修复作用。实验结果提示异基因MSCs移植治疗方法是安全的,并可有效改善RA实验动物的关节肿胀症状。经局部关节滑膜、软骨组织病理切片,BrdU和OPG（骨保护素）免疫组化结果显示,在受损关节滑膜、血管内膜及软骨中均可见大量棕黄色颗粒的BrdU阳性细胞,而正常关节滑膜处棕黄色颗粒出现BrdU阳性细胞数相对较少,同时MSC治疗组关节滑膜中OPG阳性率增加。说明经外周静脉输入的MSCs可集中趋化到实验动物炎症损伤部位,阻止局部组织损伤。并对模型鼠机体免疫紊乱状态起调节作用。MSCs在类风湿关节炎大鼠模型移植治疗有效的研究结果,为利用MSCs的免疫调节和损伤修复特性治疗类风湿关节炎的临床应用提供了有价值的实验基础。在第三部分的研究中,我们在上两部分的实验结果基础上,进一步观察了1例,利用脐带血间充质干细胞治疗的类风湿关节炎病人。初步观察了临床应用的安全性和治疗效果。结果显示输注脐带血间充质干细胞过程顺利,输注过程中以及输注后均无发热、皮疹、寒战等变态反应出现。单用MSCs输注后患者关节疼痛症状减轻、血沉下降、类风湿因子转阴、T细胞亚群恢复。
刘颖[7]（2011）在《人脐血基质细胞联合移植促进造血细胞归巢植入及支持造血重建的实验研究》文中进行了进一步梳理造血微环境（hematopoietic inductive microenvironment,HIM）是支持和调节造血干/祖细胞（haemopoietic stem/progenitor cell,HSPC）生长发育的内环境,其结构和功能的完整统一是维系造血功能正常进行的重要环节。作为造血微环境的重要组成部分,基质细胞可能通过形成造血干细胞（hematopoietic stem cell,HSC）生长的“龛”,分泌造血生长因子（hematopoietic growth factor,HGF）和细胞外基质（extracellular matrix,ECM）等参与造血细胞的自我更新、增殖分化和归巢定位,在免疫调节方面也具有重要的作用。深入探讨基质细胞对骨髓造血功能的影响,从修复或重建骨髓微环境正常功能入手治疗造血功能损伤具有重要的理论价值和实际意义。基质细胞由间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）分化而来,是一个包括成纤维细胞、内皮细胞、成骨细胞、脂肪细胞、巨噬细胞和网状细胞等成分复杂的异质细胞群。自1977年Dexter在体外培养出人骨髓基质细胞（human bone marrow stromal cells,hBMSCs）获得成功后,人们对hBMSCs进行了深入的研究。经实验研究和临床实践证实,hBMSCs体外培养扩增联合HSC回输是重建造血功能的有效方法。但hBMSCs来源受限,采集骨髓增加供者痛苦和风险,且细胞数量及增殖分化潜能随供者年龄增加而下降。自体移植中患者自身基质细胞存在异常,而异体移植亦有可能带来移植物抗宿主病（graft-versus-host disease,GVHD）等免疫相关问题,均限制了hBMSCs在临床上的广泛运用。人脐血来源丰富,取材方便,具有未成熟的干/祖细胞比例高且免疫原性较低等特点,在多种造血系统恶性疾病临床治疗中具有潜在的应用价值。本课题组长期从事人脐血源基质细胞（human umbilical cord blood-derived stromal cells,hUCBDSCs）及脐血造血微环境的研究,前期研究通过特定的细胞因子使hUCBDSCs得以有效扩增,扩增后的hUCBDSCs在细胞成分和免疫表型上与hBMSCs相似,能够分泌表达多种细胞因子,具备造血基质细胞的基本特征。以hUCBDSCs为滋养层的培养体系能有效支持脐血CD34+细胞体外扩增,特别对于促巨核细胞集落形成单位（colony forming unit-megakaryocte,CFU-Mk）形成的作用明显优于hBMSCs,提示hUCBDSCs在促进巨核系增殖分化成熟方面可能具有重要的意义。深入探讨hUCBDSCs移植在体内支持和调控造血、重建造血微环境的作用可为造血功能损伤修复治疗提供新的思路。基于上述分析,本课题首先建立两种不同来源基质细胞滋养层（hUCBDSCs和hBMSCs）培养体系,采用CCK-8法和Transwell法分别观察两种基质细胞对脐血单个核细胞（human umbilical cord mononuclear cells,hUCB-MNCs）增殖、粘附和迁移的影响,并采用RT-PCR法检测hUCBDSCs对归巢相关分子mRNA的表达情况。在此基础上建立BABL/c小鼠造血微环境辐照损伤模型,采用hUCB-MNCs单移植,或分别联合两种不同来源基质细胞共移植的方法,比较观察两种基质细胞促进造血细胞体内归巢与植入、重建造血微环境及支持造血重建的作用,为安全有效的临床移植治疗提供新的辅助措施和手段。方法:1.体外构建hUCBDSCs和hBMSCs两种不同来源基质细胞滋养层培养体系。采用CCK-8法和Transwell法分别检测两种基质细胞对hUCB-MNCs体外增殖、粘附和迁移的影响;采用RT-PCR法检测hUCBDSCs对归巢相关因子（SDF-1、CXCR-4、ICAM-1、VCAM-1、HCAM、PECAM-1、Fn）mRNA的表达情况。2.以近交系BABL/c小鼠作为受体鼠,经60COγ射线致死剂量8.5 Gy全身照射预处理后分别接受不同剂量hUCB-MNCs（2、4、6或8×106/只）单移植,或联合hUCBDSCs（2×106/只）共移植,移植后第6周流式细胞仪检测小鼠骨髓人源CD45+细胞植入率。3.采用CM-DiI荧光染料预染hUCB-MNCs,辐照后BABL/c小鼠分别接受hUCB-MNCs（2×106/只）单移植,或联合两种不同来源基质细胞（2×106/只）共移植。激光共聚焦显微镜追踪观察移植后荧光标记hUCB-MNCs在小鼠体内的迁移分布情况,比较各组造血细胞归巢率。4.辐照后小鼠分别接受hUCB-MNCs（2×106/只）单移植,或联合两种不同来源基质细胞（2×106/只）共移植。观察移植后各组小鼠存活情况,记录生存率;动态检测外周血血象恢复情况,骨髓组织病理切片观察骨髓病理变化;不同时相点计数各组小鼠骨髓成纤维细胞集落形成单位（CFU-F）、脾集落形成单位（CFU-S）、粒/巨噬细胞集落形成单位（CFU-GM）和巨核细胞集落形成单位（CFU-Mk）产率。结果:1. hUCBDSCs对脐血单个核细胞体外增殖、粘附和迁移能力的影响同hBMSCs共培养组和hUCB-MNCs单独培养组相比较,hUCB-MNCs在hUCBDSCs共培养条件下增殖能力显着增强。两种基质细胞均能促进hUCB-MNCs的粘附,且共培养后hUCB-MNCs迁移能力也显着（P<0.05）强于无基质细胞支持对照。hUCBDSCs明显表达与造血细胞归巢植入密切相关的粘附分子、细胞因子及受体（SDF-1、CXCR-4、ICAM-1、VCAM-1、HCAM、PECAM-1、Fn）mRNA,揭示其对造血细胞在体内的归巢和植入具有重要作用。2. hUCBDSCs联合移植促进造血细胞归巢和植入辐照后小鼠分别接受不同剂量hUCB-MNCs（2、4、6或8×106/只）单移植,或联合hUCBDSCs（2×106/只）共移植。采用不同剂量的hUCB-MNCs单移植后的植入率随hUCB-MNCs输注量增加而增长。hUCBDSCs联合移植能不同程度提高小鼠骨髓中人CD45+细胞植入比例,尤其当输注低剂量hUCB-MNC（s2×106/只）时,hUCBDSCs共移植较单移植的植入率提高最为显着。激光共聚焦显微镜下观察CM-DiI标记的hUCB-MNCs在移植后2～3天主要归巢至骨髓和脾脏。移植后48小时,hUCBDSCs共移植组归巢率显着（P<0.05）高于hBMSCs共移植组和单移植组,显示移植后早期hUCBDSCs能促进造血细胞向骨髓迁移归巢。3.hUCBDSCs联合移植修复受损微环境,支持造血重建两种基质细胞共移植组在移植后均能促进小鼠存活,血象恢复较快,在移植后28天内恢复至照射前水平。其中,hUCBDSCs共移植组血小板受抑程度较轻,回升也较快,并于移植后21天恢复至照射前水平;h BMSCs共移植组白细胞于移植后10天迅速回升,在此后恢复趋势高于hUCBDSCs共移植组;共移植两组间血红蛋白变化趋势无显着性差异。hUCBDSCs联合移植移植后促进骨髓组织恢复,重建受损微环境,提高CFUs（CFU-F,CFU-S,CFU-GM,CFU-Mk）产率,特别是CHU-Mk数量较h BMSCs联合移植增多,提示hUCBDSCs对于促巨核系增殖分化具有重要作用。结论:1. hUCBDSCs能促进脐血单个核细胞增殖、粘附和迁移,且促增殖能力较h BMSCs强。人脐血源基质细胞显着表达一些归巢相关因子的mRNA。2. hUCBDSCs联合移植能提高移植后小鼠造血植入率,特别当造血细胞输注为低剂量时,这种作用更加显着。3. hUCBDSCs联合移植能促进造血细胞早期迁移归巢至骨髓和脾脏,提高归巢效率。4. hUCBDSCs联合移植能提高小鼠存活,促进移植后造血重建并修复受损微环境。
弓晓峰[8]（2006）在《黑灵芝元素形态、活性成分及其保健功能研究》文中研究表明灵芝为担子菌纲、多孔菌科（Polyporaceae）灵芝属（Ganoderma）真菌灵芝（Glucidum）和紫芝（Gjaponicum）的总称，作为药物已有悠久历史。随着人们对灵芝化学成分及其药理作用的深入研究，证实灵芝具有多种有效成分和广泛的生物学作用，对人类神经系统、呼吸系统、内分泌及代谢系统、心血管系统均有一定功效，还能提高机体免疫力、保肝解毒、降血糖、抗肿瘤、抗衰老，在医药临床、保健食品、化妆品等领域得到广泛应用。但国内外研究过的灵芝属真菌仅有赤芝（Glucidum）、紫芝（Gjaponicum）、树舌（Gapplanatum）、薄盖灵芝（Gcapense）、南方灵芝（Gaustrole）等5种，其中研究最多的是赤芝。迄今为止，尚未见有对黑灵芝进行系统研究的公开报道。 黑灵芝被称为灵芝中的极品，对人体保健具有的药用疗效，远比其它种类的灵芝为高。黑灵芝主要对肾脏机能有益，增强免疫功能，安眠醒脑，长期食用可调节体内多种机能，从而提高机体的整体素质和健康水平。为深入研究和开发黑灵芝资源，本文采用现代分离分析方法和生物技术手段，对江西赣州产黑灵芝进行了较为系统的研究，建立了一整套灵芝活性成分与功能实验的系统研究方法，所得结果可为黑灵芝高附加值产品的研究奠定相关理论和应用基础。现将主要研究结果归纳如下。 1．采用现代元素分析方法研究了黑灵芝中微量元素的含量及其溶出特性，比较了黑灵芝子实体及孢子粉、赤灵芝子实体及野生黑灵芝子实体中的元素含量，利用微波消解、ICP-MS同时测定了黑灵芝子实体和初步纯化多糖中微量元素及稀土元素的含量及形态分布。结果表明，黑灵芝子实体及孢子粉中Cu、Mn、Fe、Zn等元素的含量均高于赤灵芝子实体；黑灵芝酸性多糖中的微量元素及稀土元素的含量大多高于中性多糖；在江西黑灵芝及其多糖中含有痕量稀土元素Ce、Nd、Pr、Y。对黑灵芝样品元素测定的回收率在88.2％～110.6％。研究还发现，黑灵芝中微量元素在不同极性溶剂中具有不同的浸出率，绝大多数元素的溶出率随着溶剂极性增大而增大。初级形态分析参数计算结果表明，Cr、Co、Cd元素的浸出率最低，Zn、Fe、Cu和Mn的浸出率较高，Pb的浸出率最高，说明Pb比较容易溶出。大多数元素的头煎提取率T1＞二煎提取率T2，但T2值仍
杜平,吴清璇,杨蓉芬[9]（1980）在《人白细胞干扰素mRNA在大肠杆菌细胞中的翻译研究》文中研究说明 为弄清人白细胞干扰素mRNA向大肠杆菌细胞中的转化及其在大肠杆菌细胞中的翻译情况,我们作了一些初步探索,现将部分结果报道如下。 材料与方法 一、材料 1.制备干扰素mRNA的人白细胞:以白细胞分离波或 EDTA-H4NCl法从人新鲜脐带
蔡大川[10]（2004）在《1、整体重组酵母活菌治疗性疫苗抗HBV实验研究 2、人脐带血来源树突状细胞抗HBV治疗实验研究》文中研究指明目的：借助酵母菌的表达和免疫特性，利用基因工程技术构建表达乙型肝炎表面抗原及表面抗原与截短的热休克蛋白70的重组酵母菌，然后以整体活菌形式免疫BALB/C小鼠，作为一种针对HBV的治疗性疫苗，探索一种可有效活化机体抗HBV细胞免疫的免疫策略。方法：以基因工程技术构建内含HBsAg的重组啤酒酵母和毕赤酵母以及 HSP70（1-370）-HBsAg的重组毕赤酵母,以完整活菌形式于BALB/C小鼠皮下进行4次免疫后,用ELISA法检测其对乙型肝炎表面抗原的体液免疫及小鼠脾细胞与HBsAg共孵育后细胞因子的分泌情况；以[3H]掺入法测定小鼠脾细胞对HBsAg特异性的细胞增殖反应。结果：在两种重组酵母组中都成功诱导了小鼠体内乙型肝炎表面抗体的产生，显示乙型肝炎表面抗原抗原性并未受到影响。在重组啤酒酵母组中，通过[3H]掺入法可见HBsAg特异性的细胞增殖反应；在重组毕赤酵母组中，细胞因子检测结果显示重组毕赤酵母活菌可以诱导小鼠脾细胞分泌更多的IL-2，但对IL-4、γ-IFN的分泌无影响。结论：整体重组酵母活菌具有疫苗特性,可在小鼠体内激发体液免疫及一定程度的细胞免疫反应。重组酵母活菌用于激发机体抗HBV<WP=9>细胞免疫是一个全新的思路，重组酵母的用量、注射方式等有待进一步研究。
二、人脐血白细胞干扰素的纯化及性质研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、人脐血白细胞干扰素的纯化及性质研究（论文提纲范文）
（3）高多糖的姬松茸和灰树花品种及其生物活性的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 第一节 姬松茸研究进展 |
| 1 姬松茸的营养价值 |
| 2 姬松茸的深层发酵培养 |
| 3 姬松茸多糖的分离纯化及结构分析 |
| 4 姬松茸的药理和药用价值 |
| 5 姬松茸多糖的研究展望 |
| 第二节 灰树花研究进展 |
| 1 灰树花的营养价值 |
| 2 灰树花的深层发酵培养 |
| 3 灰树花多糖的分离纯化及组分分析 |
| 4 灰树花多糖的生物活性 |
| 5 研究展望 |
| 第三节 分子标记及其在食用菌研究中的应用 |
| 1 应用于食用菌研究的分子标记 |
| 2 分子标记在食用菌研究中的应用 |
| 第四节 本项目研究目的及意义 |
| 第二章 姬松茸和灰树花的种质资源分子标记鉴定 |
| 第一节 姬松茸的分子标记鉴定 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 供试菌株 |
| 1.2 培养基的配制 |
| 1.3 主要试剂和仪器 |
| 1.4 菌丝培养 |
| 1.5 DNA提取方法 |
| 1.6 PCR体系的建立 |
| 1.7 PCR产物检测 |
| 1.8 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 RAPD结果分析 |
| 2.2 ISSR结果分析 |
| 2.3 SRAP结果分析 |
| 2.4 RAPD、ISSR、SRAP综合分析 |
| 2.5 ITS结果分析 |
| 3 讨论 |
| 第二节 灰树花的分子标记鉴定 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 供试菌株 |
| 1.2 培养基的配制 |
| 1.3 主要试剂和仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 RAPD结果分析 |
| 2.2 ISSR结果分析 |
| 2.3 SRAP结果分析 |
| 2.4 RAPD、ISSR、SRAP综合分析 |
| 3 讨论 |
| 第三章 高多糖姬松茸和灰树花的品种筛选 |
| 第一节 姬松茸多糖提取条件的优化 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 热水浸提法最佳工艺的确定 |
| 2.2 超声波对姬松茸多糖提取率的影响 |
| 2.3 微波对姬松茸多糖提取率的影响 |
| 2.4 三种提取方法结果比较 |
| 3 讨论 |
| 第二节 灰树花多糖提取条件的优化 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 传统水提法最佳工艺的确定 |
| 2.2 超声波对灰树花多糖提取率的影响 |
| 2.3 微波对灰树花多糖提取率的影响 |
| 2.4 三种提取方法结果比较 |
| 3 讨论 |
| 第三节 高多糖姬松茸和灰树花品种筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 姬松茸与灰树花菌丝生长速度及生物量观测 |
| 2.2 姬松茸不同菌种多糖含量测定 |
| 2.3 灰树花不同菌种多糖含量测定 |
| 3 讨论 |
| 第四章 姬松茸、灰树花多糖的生物活性研究 |
| 第一节 姬松茸、灰树花多糖的体内抗肿瘤作用研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 姬松茸、灰树花多糖的抗肿瘤活性 |
| 2.2 姬松茸、灰树花多糖对S_(180)肿瘤小鼠免疫器官的影响 |
| 3 讨论 |
| 第二节 姬松茸和灰树花多糖的体外抗肿瘤研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 第三节 姬松茸和灰树花多糖诱导人脐血GM-CSF基因表达的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 姬松茸多糖对人脐血GM-CSF基因诱导表达的影响 |
| 2.2 灰树花多糖对人脐血GM-CSF基因诱导表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 第四节 姬松茸和灰树花多糖的抗衰老活性研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 姬松茸和灰树花多糖对果蝇寿命的影响 |
| 2.2 姬松茸和灰树花多糖对果蝇SOD活性值的影响 |
| 2.3 姬松茸和灰树花多糖对果蝇MDA含量的影响 |
| 2.4 姬松茸和灰树花多糖对果蝇总抗氧化能力的影响 |
| 3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录1 姬松茸分子标记鉴定相似性系数矩阵表 |
| 附录2 灰树花分子标记相似性系数矩阵表 |
| 致谢 |
（6）骨髓间充质干细胞治疗类风湿关节炎机制和相关研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究背景 |
| 技术路线 |
| 第一部分 骨髓间充质干细胞调节类风湿关节炎患者免疫机制体外研究 |
| 引言 |
| 技术路线 |
| 实验一、类风湿关节炎骨髓间充质干细胞生物学特性的研究 |
| 材料和仪器 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 实验二、异基因骨髓间充质干细胞对类风湿关节炎患者T、B细胞的影响 |
| 材料和仪器 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 实验三、骨髓间充质干细胞对类风湿关节炎患者主要细胞因子的影响 |
| 前言 |
| 材料和仪器 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第一部分附图 |
| 第二部分 骨髓间充质干细胞治疗类风湿关节炎疗效和机理的动物实验研究 |
| 引言 |
| 研究目标 |
| 实验流程 |
| 实验一 正常大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和鉴定 |
| 材料和仪器 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 实验二、类风湿关节炎大鼠模型的制作 |
| 材料与仪器 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 实验三、骨髓间充质干细胞治疗类风湿关节炎的机理和疗效 |
| 材料与仪器 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 本部分小结 |
| 参考文献 |
| 本部分附图 |
| 第三部分 利用间充质干细胞治疗类风湿关节炎的临床研究 |
| 引言 |
| 实验一、人脐带血间充质干细胞的分离培养和鉴定 |
| 材料和仪器 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 实验二、脐带血间充质干细胞治疗类风湿关节炎的临床研究 |
| 前言 |
| 材料和仪器 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 本部分小结 |
| 参考文献 |
| 本部分附图 |
| 本课题的结论 |
| 综述一 类风湿关节炎发病机制研究进展 |
| 综述二 骨髓间充质干细胞的生物学特性及其在免疫治疗中的应用 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（7）人脐血基质细胞联合移植促进造血细胞归巢植入及支持造血重建的实验研究（论文提纲范文）
| 中英文缩写一览表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 前言 |
| 实验方案与技术路线 |
| 第一部分 人脐血源基质细胞对脐血造血细胞体外增殖、粘附和迁移的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 人脐血源基质细胞联合移植促进脐血造血细胞归巢植入的研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 人脐血源基质细胞联合移植修复受损微环境重建造血功能的研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 文献综述 间充质基质细胞在临床移植中的应用进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 |
（8）黑灵芝元素形态、活性成分及其保健功能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语注释 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 灵芝的国内外研究概况 |
| 1.2.1 灵芝的分类与分布 |
| 1.2.2 主要化学成分 |
| 1.2.2.1 三萜类 |
| 1.2.2.2 灵芝多糖 |
| 1.2.2.3 无机元素 |
| 1.2.2.4 其他化学成分 |
| 1.3 灵芝的生理活性研究 |
| 1.3.1 灵芝的药理功能 |
| 1.3.2 灵芝的临床应用研究 |
| 1.4 灵芝产品的开发与应用前景 |
| 1.4.1 灵芝产品 |
| 1.4.2 灵芝的开发前景 |
| 1.5 本文研究的主要内容、创新点和科学意义 |
| 1.5.1 主要研究内容 |
| 1.5.2 主要创新之处和科学意义 |
| 第二章 黑灵芝中元素的形态分析 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 仪器设备 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.2.3.1 悬浮态和可溶态的分离与测定 |
| 2.2.3.2 无机态和有机态的分离与测定 |
| 2.2.3.3 有效成分的提取(灵芝酸性多糖、中性多糖) |
| 2.2.3.4 不同极性溶剂的浸出方法 |
| 2.2.3.5 微波消解方法 |
| 2.2.3.6 等离子体质谱仪(ICP-MS)测定条件 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 黑灵芝中元素的形态分析 |
| 2.3.1.1 方法学评价 |
| 2.3.1.2 标准曲线和检测限 |
| 2.3.1.3 黑灵芝元素总量的测定 |
| 2.3.1.4 不同品种灵芝中元素的含量 |
| 2.3.1.5 不同极性溶剂中微量元素的浸出率 |
| 2.3.1.6 水提液中微量元素的形态分析结果 |
| 2.3.1.7 各种微量元素的初级形态分析参数 |
| 2.3.1.8 黑灵芝多糖的提取及多糖中微量元素测定 |
| 2.3.2 黑灵芝中痕量稀土元素的形态分析 |
| 2.3.2.1 标准曲线和检测限 |
| 2.3.2.2 方法的准确度及标准样品分析 |
| 2.3.2.3 黑灵芝子实体及黑灵芝多糖中痕量稀土元素的含量 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 黑灵芝三萜化合物的定量测定-分光光度法的建立 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 主要仪器及试剂 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.2.2.1 对照品溶液的制备 |
| 3.2.2.2 分析方法 |
| 3.2.2.3 供试样品的制备方法 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 测定波长的选择 |
| 3.3.2 酸体系的选择 |
| 3.3.3 正交试验设计及结果 |
| 3.3.4 高氯酸用量的单因素试验验证 |
| 3.3.5 显色稳定性试验 |
| 3.3.6 标准曲线的绘制 |
| 3.3.7 样品测定 |
| 3.3.8 加标回收率试验 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 黑灵芝三萜类化合物提取工艺的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 主要仪器设备 |
| 4.2.3 实验方法 |
| 4.2.4 黑灵芝三萜类化合物的定性反应 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 提取液中黑灵芝三萜类的初步鉴定实验 |
| 4.3.2 室温浸泡提取黑灵芝总三萜 |
| 4.3.2.1 泡浸时间、固液比及提取次数与浸出率的关系 |
| 4.3.2.2 不同溶剂室温浸泡浸出率比较 |
| 4.3.3 溶剂回流提取黑灵芝总三萜的工艺条件 |
| 4.3.3.1 不同溶剂热回流浸出率比较 |
| 4.3.3.2 实验设计 |
| 4.3.3.3 实验结果及数据处理 |
| 4.3.4 超声提取黑灵芝总三萜工艺优化 |
| 4.3.4.1 不同溶剂超声提取结果比较 |
| 4.3.4.2 均匀试验设计 |
| 4.3.4.3 实验结果与数据处理 |
| 4.3.5 密闭式微波萃取黑灵芝中总三萜化合物的工艺优化 |
| 4.3.5.1 温度对萃取率的影响 |
| 4.3.5.2 萃取时间对萃取率的影响 |
| 4.3.5.3 固液比对萃取率的影响 |
| 4.3.5.4 萃取溶剂对萃取率的影响 |
| 4.3.5.5 溶剂浓度对萃取率的影响 |
| 4.3.5.6 萃取级数对浸出率的影响 |
| 4.3.5.7 微波萃取条件的正交试验分析 |
| 4.3.6 超临界CO_2萃取法用于黑灵芝三萜类化合物的研究 |
| 4.3.6.1 提取液分析 |
| 4.3.6.2 萃取压力对萃取率的影响 |
| 4.3.6.3 萃取温度与萃取率的关系 |
| 4.3.6.4 萃取时间对萃取率的影响 |
| 4.3.6.5 改性剂(夹带剂) |
| 4.3.6.6 黑灵芝与赤灵芝超临界萃取结果比较 |
| 4.3.6.7 均匀实验设计与均匀设计结果和数据处理 |
| 4.3.7 不同提取工艺的比较 |
| 4.3.7.1 溶剂回流法与超声提取法的比较 |
| 4.3.7.2 室温振荡法与微波萃取法的比较 |
| 4.3.7.3 不同提取方法的比较 |
| 4.4 本章小节 |
| 第五章 黑灵芝中麦角甾醇的分离提取、分析方法研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 主要仪器与设备 |
| 5.2.2 药材与试剂 |
| 5.2.3 实验方法 |
| 5.2.3.1 麦角甾醇标准溶液的制备 |
| 5.2.3.2 分析方法 |
| 5.2.3.3 供试样品的制备方法 |
| 5.2.3.4 TLC法 |
| 5.2.3.5 HPLC法 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 麦角甾醇紫外分光光度分析方法的建立 |
| 5.3.1.1 测定波长的选择 |
| 5.3.1.2 稳定性试验 |
| 5.3.1.3 标准曲线的绘制 |
| 5.3.1.4 精密度实验 |
| 5.3.1.5 不同方法提取结果比较 |
| 5.3.1.6 酸浓度对麦角甾醇提取含量的影响 |
| 5.3.1.7 萃取次数对提取率的影响 |
| 5.3.1.8 加标样品回收率测定 |
| 5.3.2 麦角甾醇提取工艺的优化 |
| 5.3.3 黑灵芝中麦角甾醇的TLC分析 |
| 5.3.4 黑灵芝中麦角甾醇的HPLC分析 |
| 5.3.4.1 流动相的选择 |
| 5.3.4.2 标准曲线的绘制 |
| 5.3.4.3 精密度实验 |
| 5.3.4.4 加标样品回收率测定 |
| 5.3.4.5 黑灵芝中麦角甾醇的测定 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 黑灵芝子实体中活性成分的分离纯化及结构鉴定 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验部分 |
| 6.2.1 材料与试剂 |
| 6.2.1.1 材料与试剂 |
| 6.2.1.2 主要仪器与设备 |
| 6.2.2 实验方法 |
| 6.2.2.1 黑灵芝三萜类化合物的分离纯化 |
| 6.2.2.2 薄层层析法 |
| 6.2.2.3 液相色谱 |
| 6.2.2.4 紫外扫描 |
| 6.2.2.5 红外光谱检测 |
| 6.2.2.6 核磁共振分析 |
| 6.2.2.7 质谱分析 |
| 6.3 结果与讨论 |
| 6.3.1 TLC分离条件的选择 |
| 6.3.1.1 吸附剂的选择 |
| 6.3.1.2 展开剂的选择 |
| 6.3.1.3 显色剂的选择 |
| 6.3.2 硅胶柱柱层析分离纯化操作条件的选择 |
| 6.3.2.1 层析柱的选择 |
| 6.3.2.2 吸附剂的选择 |
| 6.3.2.3 洗脱剂的选择 |
| 6.3.3 分离纯化 |
| 6.3.3.1 硅胶柱柱层析分离纯化 |
| 6.3.3.2 凝胶柱纯化及淋洗曲线 |
| 6.3.4 结构鉴定 |
| 6.3.4.1 灵赤酸B甲酯(Methyl ganolucidate B) |
| 6.3.4.2 赤芝酸A(Lucidenic acid A) |
| 6.3.4.3 麦角甾醇(Ergosterol) |
| 6.3.4.4 化合物Ⅲ的LC-MS质谱图分析 |
| 6.4 本章小结 |
| 第七章 黑灵芝提取物的抑菌和抗氧化活性研究 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 主要实验仪器及试剂 |
| 7.2.1 材料与试剂 |
| 7.2.2 主要仪器 |
| 7.2.3 实验方法 |
| 7.2.3.1 抑菌实验样品的制备 |
| 7.2.3.2 菌悬液及抑菌滤纸片的制备 |
| 7.2.3.3 抑菌测定方法 |
| 7.2.3.4 抗氧化实验样品的制备 |
| 7.2.3.5 抗氧化活性的测定 |
| 7.3 结果与讨论 |
| 7.3.1 灵芝提取物对不同细菌的抑菌作用 |
| 7.3.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定 |
| 7.3.3 抗氧化实验样品的浸出率比较 |
| 7.3.4 不同溶剂提取物清除DPPH·自由基的能力 |
| 7.3.5 灵芝提取物抑制O_2~-·自由基的作用 |
| 7.3.6 与BHT和抗坏血酸的抗氧化能力的比较 |
| 7.4 本章小结 |
| 第八章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位以来论文及科研情况 |
（10）1、整体重组酵母活菌治疗性疫苗抗HBV实验研究 2、人脐带血来源树突状细胞抗HBV治疗实验研究（论文提纲范文）
| 英文缩写及中英文对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 论文正文 |
| 前 言 |
| 第一部分 整体重组酵母活菌治疗性疫苗抗HBV实验研究 |
| 一、 整体重组啤酒酵母活菌治疗性疫苗抗HBV治疗初步研究 |
| 第一节 乙型肝炎表面抗原酵母表达载体的构建与鉴定 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 第二节 重组表达载体在酵母内的表达与鉴定 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 3l |
| 第三节 整体基因重组啤酒酵母免疫用于抗HBV的实验研究 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 二、 整体重组毕赤酵母活菌治疗性疫苗抗HBV治疗的实验研究 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 第二部分 人脐血来源树突状细胞抗.HBV治疗实验研究 |
| 一、 人脐血树突状细胞的体外培养扩增及生物学特性的研究 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 二、 人脐血来源树突状细胞用于抗HBV的实验研究 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 讨 论 |
| 全文小结 |
| 本课题的创新点 |
| 附: SiRNA用于抗HBV治疗的初步研究 |
| 材料与方法 |
| 结 果 |
| 讨 论 |
| 参考文献 |
| 全文参考文献 |
| 文献综述一:树突状细胞和HBV持续感染 |
| 文献综述二:树突状细胞抗肿瘤临床治疗方案研究进展 |
| 文献综述三:RNAi技术用于抗HBV、HCV治疗研究进展 |
| 文献综述四:HBV宫内感染研究进展 |
| 致 谢 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
四、人脐血白细胞干扰素的纯化及性质研究（论文参考文献）
- [1]人脐血白细胞干扰素的纯化及性质研究[J]. 戚中田,杜平. 第二军医大学学报, 1983(S1)
- [2]人白细胞干扰素基因的克隆化及其在大肠杆菌中的表达[J]. 侯云德,张智清,杨新科,吴淑华,李玉英,彭金枝,李应霞,杨崇泰,付秋林,胡裕文,赵海燕,王兰芝,段淑敏,苏小玲,张秀珍,张丽兰,史连永,刘小蕊. 中国医学科学院学报, 1982(06)
- [3]高多糖的姬松茸和灰树花品种及其生物活性的研究[D]. 郑亚凤. 福建农林大学, 2008(11)
- [4]人干扰素的种类及临床应用的安全性[J]. 李万君. 白求恩医科大学学报, 1983(05)
- [5]氯化钙对病毒诱生人脐血干扰素的刺激作用[J]. 张咏南,周淑琴. 安徽医学院学报, 1983(04)
- [6]骨髓间充质干细胞治疗类风湿关节炎机制和相关研究[D]. 马丽辉. 山西医科大学, 2008(02)
- [7]人脐血基质细胞联合移植促进造血细胞归巢植入及支持造血重建的实验研究[D]. 刘颖. 第三军医大学, 2011(12)
- [8]黑灵芝元素形态、活性成分及其保健功能研究[D]. 弓晓峰. 南昌大学, 2006(11)
- [9]人白细胞干扰素mRNA在大肠杆菌细胞中的翻译研究[J]. 杜平,吴清璇,杨蓉芬. 解放军医学杂志, 1980(04)
- [10]1、整体重组酵母活菌治疗性疫苗抗HBV实验研究 2、人脐带血来源树突状细胞抗HBV治疗实验研究[D]. 蔡大川. 重庆医科大学, 2004(03)