山羊进行性肺炎病毒感染试验

山羊进行性肺炎病毒感染试验

一、绵羊进行性肺炎病毒对山羊的感染试验(论文文献综述)

杨义琴[1](2018)在《小反刍动物慢病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立和初步应用》文中研究指明小反刍动物慢病毒(SRLV)是山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)和梅迪-维斯纳病毒(MVV)的统称,主要引起山羊和绵羊的慢性持续性感染,表现为山羊的关节炎、脑脊髓炎和绵羊的间质性肺炎等。这两种病毒感染具有一定的宿主特异性,即CAEV多感染山羊,而MVV倾向于感染绵羊。但近年来的分子流行病学调查发现,其可跨种感染,并且基于病毒pol-gag基因序列可分为A、B、C、D和E五个亚群,当前建立的病原分子生物学检测方法仅适用于部分基因亚群毒株的检测,因而建立通用的CAEV和MVV核酸检测方法极为必要。本研究对GenBank公布的31株SRLV前病毒基因组序列进行比对,筛选出vif基因上约150bp的序列作为诊断标记物并设计简并引物,通过全基因合成方法获得该序列作为PCR反应的阳性对照模板,以此建立了SRLV通用PCR检测方法;在此基础上,使用SYBR Green I染料建立实时荧光定量RT-PCR方法。为验证建立的病原分子生物学检测方法,进行CAEV人工感染动物试验,并于感染前70天、10天;感染后第4天、8天、15天、23天、28天、42天、58天、71天、84天、99天、113天采集5mL的抗凝血。每次采血后,在72小时内,取1mL全血提取总DNA进行CAEV前病毒DNA的检测;随后,将抗凝血离心后取200μL的血浆用于提取病毒的RNA并反转录为cDNA,使用PCR和实时荧光定量RT-PCR方法来检测病原及其载量,并使用IDEXX SRLV抗体筛查试剂盒检测血清抗体。此外,采集了2017-2018年间新疆乌鲁木齐县、阿克苏、乌苏、巴楚县、富蕴县等地区的165只山羊样本进行抗体检测和病原学检测。研究结果表明筛选的位于SRLV vif基因上的150bp序列可作为其通用诊断标识物,建立的通用PCR检测方法,其敏感性为103个分子拷贝数,并初步证实其可用于CAEV和MVV野毒株RNA和前病毒DNA的检测;使用SYBR Green I染料建立的实时荧光定量RT-PCR方法其敏感性不低于100个分子拷贝数,线性范围为102-107分子拷贝数,且可用于CAEV动物感染的检测,较感染抗体被检出的时间提前。此外,在乌苏县和巴楚县分别检出25%和20%的CAEV血清学阳性样本,新疆地区CAEV血清学阳性率为2.4%,再次证实新疆有该病的流行。该研究建立的方法有望用于我国SRLV的病原学检测,并提示新疆地区有必要开展大范围的CAEV流行病学调查以掌握其流行情况、制订防控方案。

薛飞,相文华,沈荣显[2](1998)在《山羊实验感染绵羊进行性肺炎病毒的抗体应答反应》文中研究说明用琼脂凝胶免疫扩散试验(AGIDT)和免疫印迹试验(IBA)对山羊实验感染绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)的抗体应答反应进行了研究。结果,用AGIDT和IBA都可在接毒山羊的血清中检测到OPPV的抗体。AGIDT最早于接毒后15d检测到抗体;IBA最早于接毒后4d检测到抗OPPV的gp44和p28的抗体,以后又陆续检测到抗p94、p14和gp125的抗体。由此看出,IBA比AGIDT更为敏感。本研究结果表明,OP-PV可在山羊体内诱生较强的体液免疫应答反应,因此用OPPV通过山羊体传代的方法可能会得到具有良好抗原性的OPPV毒株。

薛飞,相文华,褚桂芳,沈荣显[3](1997)在《用绵羊进行性肺炎病毒实验感染山羊的研究》文中指出用绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)接种4只山羊3~4个月后,可观察到接毒山羊都出现了发育迟缓和消瘦现象,并有1只山羊出现了明显的临床病症。而未接毒的对照山羊则发育正常。接毒28d后,可以从接毒山羊的外周血单核细胞中分离到病毒。病理剖检发现4只接毒山羊中有1只山羊的多种器官出现了较为严重的病变,组织学检查则可看到典型的间质性肺炎、中度的脑炎和较为严重的脾炎的病变。以上的结果表明OPPV可以感染山羊,并对山羊有较强的致病性。因此将来用山羊培育OPPV强毒是可能的,并且这是研制OPPV减毒疫苗最为关键的一步。

艾合买提·艾开木[4](2013)在《卡拉库尔羊自然感染绵羊慢病毒的血清学调查和组织学研究》文中研究指明为了检测卡拉库尔羊血清中绵羊慢病毒的特异性抗体和平均血清阳性率,本人在新疆阿克苏地区共采集约1075份血清样品,运用琼脂凝胶免疫扩散的方法对新疆卡拉库尔羊进行连续18个月的血清学检测,结果表明,被检测血清的平均阳性率为1.1%。通过临床诊断,被检查的新疆卡拉库尔羊未出现典型的绵羊慢病毒感染的症状。通过血清学检查后的阳性病例剖检,经病理组织学切片检查结果:没有特异性淋巴细胞性间质性肺炎发生,血管与关节滑膜没有OPP性损伤,有轻度的淋巴细胞性乳腺炎。得出结论新疆卡拉库尔羊的乳腺与肺部病变率低,从病理学上证实新疆卡拉库尔羊为抗绵羊慢性病毒较强的品种。以此为新疆牧民选育抗绵羊慢性病毒的绵羊品种提供了可靠的依据。

张辉[5](2005)在《绵羊慢病毒(南疆株)自然感染新疆卡拉库尔羊的研究》文中认为从新疆南部羊场采集新疆卡拉库尔羊血清样品1631份,用琼扩(agar gel immunodiffusion,AGID)检测血清中对绵羊慢病毒(Ovine lentivirus, OvLV)(南疆株,southern Xinjiang strain)的特异性抗体,平均血清学阳性率为1.3%。从血清学上证实新疆卡拉库尔羊为低敏感性品种。对从南疆选出的14 只自然感染OvLV(南疆株)的成年新疆卡拉库尔羊连续进行18 个月(每月检测一次)的血清学检测,结果表明血清抗体的类型可以发生转变,表明抗原连续性变异。临床观察表明,没有出现典型的与绵羊慢病毒有关的症状,未发现绵羊慢病毒感染的特征性病变。病理组织学切片检查未见特异性淋巴细胞性间质性肺炎,血管与关节滑膜没有OPP 性损伤,最为典型的病变是轻度的淋巴细胞性乳腺炎,表明乳腺为最敏感的靶器官。新疆卡拉库尔羊的乳腺与肺病变率均低于其他OvLV 毒株,从病理学上证实新疆卡拉库尔羊为对绵羊慢病毒的低敏感品种。对7 只新疆卡拉库尔羊进行绵羊慢病毒琼脂凝胶免疫扩散检测试验,然后采用PCR 技术,以受试羊外周血白细胞基因组为模板,扩增绵羊慢病毒gag基因,将该基因克隆到pBS-T 载体上,将重组子转入感受态细胞DH5α,用IPTG/X-gel 筛选阳性菌落,通过菌落PCR、酶切初步鉴定后测序,结果表明PCR 的检测方法较AGID 检测方法敏感,绵羊慢病毒南疆株与Visna 病毒的gag 基因序列有一定的同源性。

薛飞,相文华,沈荣显[6](1997)在《应用酶联免疫吸附试验检测实验感染绵羊进行性肺炎病毒的山羊血清抗体》文中进行了进一步梳理用酶联免疫吸附试验(ELISA)在接种绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)的山羊血清中可测到OPPV抗体。抗体的最早检出时间是接毒后的第15d,且4只接毒山羊都呈阳性反应。检测结果表明,OPPV可在山羊体内诱生较强的体液免疫应答反应。试验所用的ELISA除可用于OPPV通过山羊体的传代研究之外,还可应用于绵羊进行性肺炎(OPP)的诊断

易海清[7](2006)在《绵羊慢病毒自然感染新疆卡拉库尔羊的初步研究》文中研究表明对来自3个自然感染绵羊慢病毒羊场的7只新疆卡拉库尔羊进行病理学研究。在临床观察期间,实验羊仅出现轻微的与绵羊慢病毒有关的临床症状。病理组织学观察表明,5例血清学阳性羊的乳腺发生与绵羊慢病毒感染有关的不同程度的乳腺炎,亦证明乳腺是最敏感的靶器官。淋巴组织样间质性肺炎(LIP)、脉管炎、关节炎/滑膜炎都未见到。根据邓普辉等对乳腺炎严重度和分型的描述,新疆卡拉库尔羊乳腺炎病变的严重度均低于其他毒株感染的乳腺炎,从病理学上证实新疆卡拉库尔羊为对绵羊慢病毒的低敏感品种。 利用绵羊胎肺细胞进行绵羊进行性肺炎病毒的增殖。用阳性羊外周血单核细胞接种胎羊肺细胞,在传至第2代后产生典型的细胞病变效应(CPE)和合胞体的形成。病毒培养液经过100倍浓缩,制成抗原进行琼扩检测呈阳性反应。分离结果表明,这是一种较为敏感的分离绵羊慢病毒的方法。 参照GenBank中已发表的绵羊慢病毒的基因序列,设计合成2对引物,对绵羊慢病毒前病毒DNA的gag基因分2段进行PCR扩增。对PCR产物进行序列测定与分析,新疆分离株gag基因全长为1332bp,编码444个氨基酸。通过比较,我国的绵羊慢病毒与其他国家绵羊慢病毒株亲缘关系较远。

孙雨,杨林,王传彬,董浩,杨天意,张晨,宋晓晖[8](2018)在《我国11个省份山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的血清抗体检测》文中指出为摸清我国山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的流行情况,用竞争ELISA(C-ELISA)方法对采自河北等11个省份的山羊与绵羊血清进行了抗体检测。结果显示,共检测山羊血清2 083头份,检出山羊关节炎-脑炎抗体阳性血清8份,阳性率为0.38%;检测绵羊血清1 339份,检出绵羊进行性肺炎抗体阳性血清6份,阳性率为0.45%。按不同山羊血清来源统计,山羊关节炎-脑炎的规模场阳性率为0.51%,散养户阳性率为0.50%;按不同绵羊血清来源统计,绵羊进行性肺炎的规模场阳性率为0.53%,屠宰场阳性率为0.12%。按不同山羊饲养方式统计,山羊关节炎-脑炎的全舍饲阳性率为0.41%,半舍饲阳性率为0.35%,放牧阳性率为0.35%。按不同绵羊饲养方式统计,绵羊进行性肺炎的全舍饲阳性率为0.48%,半舍饲阳性率为0.26%,放牧阳性率为0.85%。结果表明,我国山羊与绵羊中分别存在山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的感染,但感染流行率较低。

管峰,石国庆,赵进,王一民[9](2014)在《羊慢病毒及其抗性基因研究进展》文中提出羊慢病毒也称小反刍动物慢病毒,主要包括绵羊梅迪–维斯纳病毒和山羊关节炎–脑炎病毒,二者主要感染绵羊和山羊,目前该病在世界范围内流行并给养羊业带来很大的经济损失。研究表明,不同绵羊品种对慢病毒易感性存在差异,这种差异表明易感性不同的绵羊可能存在遗传多样性的差异。全基因组关联分析发现绵羊跨膜蛋白TMEM154(Transmembrane protein 154)基因中的一个点突变E35K与抗病力高度相关,可以作为绵羊抗病选育的分子标记。文章详述了绵羊TMEM154基因E35K突变对抗病力的影响和当前慢病毒抗病基因研究概况,包括锌指家族、趋化因子受体CCR5、三重基序蛋白TRIM5α、载脂蛋白B m RNA剪辑酶催化多肽样蛋白3、多能发育相关基因2和4,并简要介绍了羊慢病毒特征和我国羊慢病毒病的流行状况,以期为我国绵羊养殖业和抗病选育提供参考。

薛飞,相文华,沈荣显[10](1999)在《绵羊进行性肺炎病毒与山羊关节炎一脑炎病毒的血清学交叉反应的研究》文中指出本实验用琼脂凝胶免疫扩散试验(AGIDT)和免疫印迹试验(IBA)对实验感染绵羊进行性肺炎病毒(OPPV)的山羊血清与山羊关节炎—脑炎病毒(CAEV)抗原以及实验感染CAEV的绵羊血清与OPPV抗原的交叉反应进行了研究。4只接种OPPV的山羊中有一只山羊的血清可与CAEV琼扩抗原发生交叉反应,并在免疫印迹试验中可识别CAEV的gp44、p35和p28。2只接种CAEV的绵羊中有一只绵羊的血清可与OPPV琼扩抗原发生交叉反应,并在免疫印迹试验中可识别OPPV的gp44和p28。以上的交叉反应结果表明OPPV与CAEV的抗原之间具有密切的相关性,这对于OPPV通过山羊和CAEV通过绵羊的传代研究是非常重要的,并对将来的免疫预防策略具有重要的指导意义。

二、绵羊进行性肺炎病毒对山羊的感染试验(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、绵羊进行性肺炎病毒对山羊的感染试验(论文提纲范文)

(1)小反刍动物慢病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立和初步应用(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
论文中常用缩写词英汉对照表
前言
第一章 文献综述
    1 小反刍动物慢病毒的历史与分布
        1.1 CAEV的历史与国内外分布
        1.2 MVV的历史与国内外分布
    2 病毒形态、理化、分子生物学特征
        2.1 病毒形态、理化特征
        2.2 分子生物学特征
    3 致病机理
    4 流行病学特征
    5 临床症状
        5.1 CAEV的临床症状
        5.2 MVV的临床症状
    6 检测技术
        6.1 血清学检测
        6.2 病原学检测
    7 防治
    8 研究目的与意义
第二章 试验研究
    试验一 小反刍动物慢病毒实时荧光定量RT-PCR方法建立与初步应用
        1 材料与仪器
        1.1 试验材料
        1.2 试剂
        1.3 仪器
        2 实验方法
        2.1 细胞培养
        2.2 提取前病毒DNA和病毒RNA
        2.3 引物设计与合成
        2.4 靶序列的合成与制备
        2.5 PCR扩增与电泳
        2.6 实时荧光定量RT-PCR方法
        3 结果与分析
        3.1 简并引物的设计和靶序列的比对
        3.2 PCR检测方法的建立
        3.3 PCR扩增方法的验证
        3.4 荧光定量RT-PCR检测方法的建立
        3.5 实时荧光定量RT-PCR的应用
        4 讨论
        5 小结
    试验二 山羊关节炎-脑炎病毒的动物感染试验与检测方法的应用
        1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器
        2 实验方法
        2.1 动物试验前准备
        2.2 攻毒试验
        2.3 样品采集
        2.4 感染检测
        3 结果与分析
        3.1 血清学检测结果
        3.2 PCR检测结果
        3.3 实时荧光定量RT-PCR检测结果
        4 讨论
        5 小结
    试验三 新疆部分地区山羊-关节炎脑炎的初步调查
        1 实验材料
        1.1 样品采集
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器
        2 实验方法
        2.1 血液样品处理
        2.2 PCR检测
        2.3 血清学检测
        2.4 实时荧光定量RT-PCR检测
        3 结果与分析
        3.1 PCR扩增结果
        3.2 血清学检测结果
        3.3 实时荧光定量RT-PCR检测结果
        4 讨论
        5 小结
结论
论文创新点
参考文献
致谢
作者简介
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表

(4)卡拉库尔羊自然感染绵羊慢病毒的血清学调查和组织学研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第1章 绵羊慢病毒的研究进展
    1.1 绵羊慢病毒病发生的历史
    1.2 病原及发病机理
    1.3 品种的敏感性
    1.4 临床症状和病理变化
    1.5 诊断
    1.6 研究进展
第2章 卡拉库尔羊自然感染绵羊慢病毒的血清学调查
    2.1 试验材料
    2.2 试验方法
    2.3 试验结果
第3章 卡拉库尔羊自然感染绵羊慢病毒的组织学检查
    3.1 试验材料
    3.2 试验方法
    3.3 试验结果
第4章 讨论
    4.1 新疆卡拉库尔对绵羊慢病毒的血清学阳性率及其影响因素
    4.2 新疆卡拉库尔羊对绵羊慢病毒的抗体类型与抗体消长
    4.3 病毒分离
    4.4 病原与病理变化的关系
    4.5 新疆卡拉库尔羊对绵羊慢病毒的品种敏感性
第5章 结论
参考文献
致谢
作者简历

(5)绵羊慢病毒(南疆株)自然感染新疆卡拉库尔羊的研究(论文提纲范文)

中文摘要
英文摘要
符号、缩略语词表
引言
第一部分 文献综述
    1 绵羊进行性肺炎的研究进展
        1.1 绵羊进行性肺炎发生的历史
        1.2 病原及发病机理
        1.2.1 病原
        1.2.2 发病机理
        1.2.3 病毒的感染与传播
        1.3 品种的敏感性
        1.4 临床症状和病理变化
        1.4.1 临床症状
        1.4.2 病理变化
        1.5 诊断预防
        1.5.1 诊断
        1.5.2 预防与控制
    2 慢病毒的研究进展
        2.1 慢病毒病
        2.1.1 猴艾滋病
        2.1.2 马传染性贫血
        2.1.3 梅迪病和维斯纳病
        2.1.4 牛慢病毒病
        2.1.5 猫的慢病毒病
        2.2 基因组及蛋白
        2.2.1 基因组
        2.2.2 MVV 蛋白
        2.3 慢病毒载体
        2.3.1 慢病毒载体构建
        2.3.2 载体的改造方式
        2.4 慢病毒基因疫苗
        2.4.1 慢病毒疫苗研究的主要成就
        2.4.2 慢病毒疫苗研究的面临的主要困难
第二部分 实验部分
    实验一 对自然感染绵羊慢病毒的新疆卡拉库尔羊的血清学实验
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
    实验二 对自然感染绵羊慢病毒的新疆卡拉库尔羊的病理学实验
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
    实验三 绵羊白细胞内的慢病毒cDNA gag 基因的PCR 检测的研究
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
第三部分 结论
参考文献
附录
致谢
作者简介

(7)绵羊慢病毒自然感染新疆卡拉库尔羊的初步研究(论文提纲范文)

独创性声明
关于学位论文使用授权的说明
中文摘要
英文摘要
缩略词表
第一章 文献综述
    1 绵羊慢病毒概述
        1.1 绵羊慢病毒的历史及分类地位
        1.2 绵羊慢病毒的形态,理化及生物学特性
        1.3 绵羊慢病毒的感染与传播
        1.4 品种的敏感性
        1.5 临床症状和病理变化
        1.6 诊断与防治
    2 绵羊慢病毒的分子生物学
        2.1 OvLV的核酸和基因组的结构
        2.2 绵羊慢病毒编码的蛋白
        2.3 绵羊慢病毒的复制,蛋白质合成和形态发生
        2.4 绵羊慢病毒的持续性感染
        2.5 绵羊慢病毒感染的免疫应答
第二章 绵羊慢病毒自然感染新疆卡拉库尔羊的病理学观察
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
第三章 绵羊慢病毒的分离培养
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
第四章 绵羊慢病毒前病毒gag基因检测与序列分析
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
第五章 结论
参考文献
附录
致谢
作者简介

四、绵羊进行性肺炎病毒对山羊的感染试验(论文参考文献)

  • [1]小反刍动物慢病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立和初步应用[D]. 杨义琴. 石河子大学, 2018(12)
  • [2]山羊实验感染绵羊进行性肺炎病毒的抗体应答反应[J]. 薛飞,相文华,沈荣显. 中国兽医学报, 1998(02)
  • [3]用绵羊进行性肺炎病毒实验感染山羊的研究[J]. 薛飞,相文华,褚桂芳,沈荣显. 畜牧兽医学报, 1997(05)
  • [4]卡拉库尔羊自然感染绵羊慢病毒的血清学调查和组织学研究[D]. 艾合买提·艾开木. 新疆农业大学, 2013(05)
  • [5]绵羊慢病毒(南疆株)自然感染新疆卡拉库尔羊的研究[D]. 张辉. 新疆农业大学, 2005(05)
  • [6]应用酶联免疫吸附试验检测实验感染绵羊进行性肺炎病毒的山羊血清抗体[J]. 薛飞,相文华,沈荣显. 中国兽医科技, 1997(05)
  • [7]绵羊慢病毒自然感染新疆卡拉库尔羊的初步研究[D]. 易海清. 新疆农业大学, 2006(02)
  • [8]我国11个省份山羊关节炎-脑炎与绵羊进行性肺炎的血清抗体检测[J]. 孙雨,杨林,王传彬,董浩,杨天意,张晨,宋晓晖. 中国兽医科学, 2018(01)
  • [9]羊慢病毒及其抗性基因研究进展[J]. 管峰,石国庆,赵进,王一民. 遗传, 2014(12)
  • [10]绵羊进行性肺炎病毒与山羊关节炎一脑炎病毒的血清学交叉反应的研究[J]. 薛飞,相文华,沈荣显. 畜牧兽医学报, 1999(04)

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山羊进行性肺炎病毒感染试验
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