一、菖蒲类中药材的理化鉴别(论文文献综述)
訾成飞,桂鑫,孙翠,马蕊,赵飞亚,陶爱恩[1](2021)在《百合科植物在纳西族医药中的应用整理》文中指出通过查证纳西医学现有文献,对百合科纳西药的品种、基原及标准进行整理。结果表明,相关文献记载的百合科药用植物共有36种(含变种),涉及34个药材品种,在我国现行各级药材标准中收载的基原植物有21个,占总数61. 76%。其中有2种为国家Ⅱ级保护植物和中国特有物种。在相关标准和文献中,各药材品种所记载的名称、基原、药用部位或功效等存在较大差异,纳西药材品种混乱、质量标准不完善的状况在纳西药材中较为普遍。因此,有必要进一步加强纳西药的本草考证、资源与使用现状调查,推动纳西药材的品种整理和质量标准体系建立。
杨鹤年,吴宿慧,李寒冰,李根林[2](2021)在《石菖蒲的研究进展及质量标志物预测分析》文中认为石菖蒲始载于《神农本草经》,为开窍药类中药,被广泛应用于治疗闭证神昏类的方剂中。鉴于石菖蒲的确切临床疗效以及新的药理活性和有效成分的不断发现,近年来被国内外广泛关注,成为热点研究的中药品种之一。然而,《中华人民共和国药典》2020年版对石菖蒲的传统理化鉴别、挥发油总含量测定等做出规定,尚难以体现和直接关联石菖蒲的多重临床疗效和多重复杂成分的特点。当前中药质量标志物(Q-marker)的提出为符合中药特色的质量标准建立指明了发展方向与研究思路,本文通过查阅文献对石菖蒲的化学成分、药理作用进行总结分析,并根据Q-marker的定义:从基于有效、特有、传递与溯源、可测和处方配伍的"五要素"对石菖蒲的Q-marker进行预测分析。文献综述结果发现,石菖蒲的挥发性成分尤以细辛醚类成分为代表可作为石菖蒲的Q-marker,为其完整的质量控制提供科学依据。
孙婉萍[3](2021)在《全国地方中药饮片标准现状分析及标准中制定医学项的方法研究》文中指出目的通过收集、整理、统计现执行版的各地方中药饮片炮制规范并做描述统计,分析我国中药饮片地方标准现状,利用统计学方法理论筛选出地方标准中的重点差异项,针对重点差异项进行内容分析方法研究,找到规范制定重点差异项标准的方法,为提高中药饮片质量标准提出参考依据及建议。方法1.通过文献研究法,对国家中医药管理局、国家及各省级药品监督管理局的官方网站、线上线下书店、出版社、电子期刊数据库等渠道,收集《中国药典》《全国中药炮制规范》以及各地区中药饮片炮制规范的纸质标准或电子影印版材料,查询国内外关于质量标准、中药饮片地方标准的相关研究文献;通过历代本草古籍和中医方书典籍等历史文献资料的查阅、整理,追本溯源地梳理中药性味归经、功能主治、用法用量等临床应用项目的历史应用脉络,客观科学的判断中药本身的准确内涵。2.运用描述统计对中药饮片国家标准、地方标准的相关数据信息资料进行分布状态、总体差异、标准特征等情况,通过图、表等形式描述中药饮片标准的基本情况。利用“赋值法”将文字内容拆分归类并量化为数值,再计算离散系数,进行差异分析来比较中药饮片在不同地方标准中的各个标准项目的差异情况,找到重点差异项。3.通过比较分析法,对文献研究法和统计分析法的结果,从定性和定量两个层次、双维度的来比较地方中药饮片炮制规范,有次序性的判断在众多标准内容项中更具明显差异的内容。结果1.截止到2020年1月,我国29个省、自治区、直辖市的中药饮片炮制规范收载品种3500余种,各地区的中药饮片地方标准修订的时间、原则、方法等各有不同,没有统一要求;各个地方标准之间的收载情况相比较,重复率在40%以上,中药饮片标准处于“管理多级,地标多杂,重复收载,标准各异”的现实情况。2.通过对中药饮片地方标准重复收载率较高的三个品种芜荑、银耳、甜瓜蒂的各个体例项目的离散系数进行差异性分析,确定[归经]、[性味]是地方中药饮片地方标准中存在的重点差异项。3.对医学标准项[归经]、[性味]的规范制定进行深入研究,通过中药药性理论、方剂学、以及中医病因病机、治法治则、脏腑经络中医理论的综合论证,以确定中药的[主治]为关键,再对[功能]、[性味]进行推导,最后确定[归经],即确定规范制定中药饮片地方标准中的医学标准项的技术路径。结论1.“性味归经”属于中药饮片医学标准项的主要内容,是中药药性理论主要内容,是对中药功效、性能及其运用规律的高度概括,是中药最为重要的学术特征和核心性能。性味归经差异大,就意味着各地方对中药饮片的本质存在较大争议。2.确定中药饮片地方标准中的医学标准项的规范方法步骤为:(1)通过历代主流本草、代表方剂,确定“主治”,经统计分析结果来看,应主要参考《中华本草》和《普济方》,将本草内容与方剂应用结果相结合进行考究,确定[主治]。(2)运用“病因病机,治法治则”的中医理论结合已确定的[主治],进行高度概括并提炼出中药[功能]项。(3)通过中药已确定的功能主治与中药药性理论之间的“效—性”关系,推导出中药的[性味]项。(4)根据已确定的[主治]和脏腑经络理论,进行“实践+理论”的综合归纳,确定中药的[归经]项。
刘和平,徐俊,李青苗,尚强,蔡信福,赵军宁[4](2021)在《不同基源石菖蒲药材挥发油指纹图谱研究》文中研究说明建立石菖蒲挥发油气相(GC)指纹图谱,为不同基源石菖蒲指纹图谱鉴别提供依据.采用蒸馏法提取挥发油,气相色谱法测定指纹图谱,结合质谱、保留指数、相关文献和NIST17. L标准谱图库对部分色谱峰定性鉴别,并通过相似度评价和主成分分析不同基源石菖蒲所含主要挥发性成分差异.结果显示,石菖蒲指纹图谱共有18个共有成分,确定了其中的9个成分,相似度评价和主成分分析可以准确区分不同基源的石菖蒲药材.所建立的指纹图谱测定方法可以用于石菖蒲药材的基源鉴定,研究结果为石菖蒲药材真伪品鉴定提供了实验依据.
朱平,刘效栓,王红丽,罗燕燕,祁生磊[5](2021)在《三种菖蒲的比较研究进展》文中研究表明菖蒲在临床应用中常见的有石菖蒲、藏菖蒲和九节菖蒲,这三味药材虽只有一、二字之差,但其来源和功效差异较大。文章通过查阅本草典籍及地方标准,并利用Pubmed、知网、万方等数据库检索近10年来国内外关于三种菖蒲的相关文献资料。从其异名、来源、产地、植物形态、性状、理化鉴别、化学成分及药理活性等8个方面对三种菖蒲分别进行比较鉴别,以区分其真伪优劣,旨在为保障临床用药的安全性、准确性和有效性提供理论基础。
胡鑫[6](2020)在《地乌药材系统鉴定及质量评价》文中研究指明药用植物的主要药理活性成分通常为次生代谢产物,而次生代谢产物是植物适应环境的产物,药用植物次生代谢产物除受遗传因素调控外,地理环境、气候条件等生态因子亦对其产生重要影响,即环境导致同种异地药材质量的不同。我国野生地乌资源分布广泛,受地域影响各产地地乌药材质量势必存在显着差异,地乌药材基原的准确鉴别及优质药材产地选择对于其合理开发及临床应用至关重要,然而目前基于多产地地乌药材的综合质量评价体系尚未构建。鉴于此,本研究依据中国植物志记载的地乌产地分布区域,完成了8个省市16个产地的野生地乌资源收集,通过性状鉴别、显微鉴别以及理化鉴别等传统中药鉴别方法对来自16个产地的地乌样品进行鉴别,鉴定结果均与文献及《湖北省中药材质量标准》(2018版)记载的正品地乌药材特征一致。同时,首次基于DNA条形码ITS2序列成功构建了地乌药材的快速鉴别体系,传统鉴别技术结合DNA条形码鉴别技术的地乌药材系统鉴别体系确保了地乌药材鉴定结果的准确性,为其临床安全用药奠定基础。本研究构建的综合鉴定体系确保了采集的地乌药材的基原准确,在此基础上运用HPLC完成了16产地地乌药材五种药理活性成分(anhuienoside E、glycoside St-14a、hemsgiganoside B、hederasaponin B及flaccidosideⅡ)的含量测定。差异性分析发现anhuienoside E以及hemsgiganoside B在湖北长阳都镇湾地乌样品中含量显着高于其他产地(P<0.05);贵州毕节、湖北恩施板桥及元堡地乌样品中皂苷glycoside St-14a最高(P<0.05);而湖北恩施板桥地乌样品中皂苷flaccidosideⅡ显着高于其余各产地样品(P<0.05);湖北恩施板桥及湖北五峰白溢坪地乌样品皂苷hederasaponin B含量最高(P<0.05)。同时,湖北恩施板桥地乌样品中5种检测成分含量之和最高。基于五种化学成分含量的聚类分析表明,与其他产地相比,湖北地乌与重庆、安徽和贵州等地区的地乌药材在化学成分及含量上存在更大的相似性,在聚类热图上归为一大支。此外,本研究还采用紫外-可见光分光光度法对16产地地乌药材的三萜总皂苷含量进行测定,结果表明各产地地乌药材总皂苷含量差异显着。其中,贵州毕节地乌药材总皂苷含量最高(P<0.05),其次为湖北恩施板桥、安徽歙县、湖南桑植县,而湖北神农架及湖南衡山地乌药材三萜总皂苷含量最低。本研究构建了地乌药材传统鉴定及分子鉴别的复合鉴定体系,确保地乌药材基原准确。同时,分别使用HPLC法及紫外-可见光分光光度法对16个不同产地地乌药材的5个皂苷成分及总皂苷成分进行含量测定,以地乌药材各成分的含量及总皂苷含量作为其质量评价指标,综合分析了各产地地乌药材化学成分含量差异,并以此确定了优质地乌药材的产地。以上研究为地乌药材产地选择及临床用药安全奠定基础,同时为后期地乌优质品种选育提供一定数据支撑。
周豫新[7](2020)在《多基原药材大黄和常见蛇类药材金钱白花蛇的分子鉴定方法构建》文中研究指明多基原药材在近五版《中国药典》收载比例逐渐增加且该类药材涉及的中成药品种和中药处方数量庞大,但是不同基原的药材药理活性、有效成分和含量接近并不完全相同,导致即使是同一品种药材也存在质量差异。多基原药材基原物种多为近缘关系,形态特征差异小,使用单基因序列鉴定多基原药材物种效率较低,甚至存在有的基因型序列完全一致。名贵中药材因自然资源稀缺、人工培养困难导致供不应求,致使此类中药材出现伪劣品甚至掺假,严重影响临床用药安全和中药疗效。药材大黄是蓼科植物药用大黄(Rheum officinale)、掌叶大黄(Rheum palmatum)和唐古特大黄(Rheum tanguticum)的干燥根及根茎,是我国重要传统大宗中药材,为典型的一药多源药材。具有泻下功积、清热泻火、凉血解毒,逐瘀通经、利湿退黄的功效,用于治疗实热积滞便秘,血热吐衄,目赤咽肿,痈肿疔疮,肠痈腹痛,瘀血经闭,产后瘀阻,跌打损伤,湿热痢疾,黄疸尿赤等症。不同物种来源的大黄药材因化学成分存在差异导致药理活性和功效差异。为了快速、准确确定三个物种,确保精准入药,首先分别从三个物种的道地产区各获得1株新鲜植株,提取叶绿体基因组DNA,利用二代测序技术测序(next-generation sequence,NGS),经过基因拼接、基因注释对比分析三个物种叶绿体基因组差异。药用大黄叶绿体基因组大小为161,093bp,掌叶大黄叶绿体基因组大小为161,541bp,唐古特大黄叶绿体基因组大小为161,053bp。三个物种共注释出131个功能基因,其中91个蛋白质编码基因,8个rRNA基因,31个tRNA基因,其中7个基因含有1个内含子,2个基因含有2个内含子,18个基因为双拷贝,1个基因三拷贝。分析三个物种叶绿体基因组中简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)的数目和类型,单碱基重复序列比例最大;大单拷贝区(large single copy region,LSC),反向重复区(inverted repeats,IRA和IRB)和小单拷贝区(small single copy region,SSC)的SSR数量不同;多数SSR的长度小于20bp。利用包含大黄三个基原物种在内的23个物种的叶绿体基因组构建进化树,大黄三个基原物种优先聚为一支。根据大黄药材三个基原物种叶绿体基因组信息差异,针对三个物种叶绿体基因组差异较大区域设计21对特异性引物用于筛选能够准确快速鉴定三个物种的候选序列。经PCR扩增、扩增产物测序和扩增序列信息比对,筛选出8对引物的扩增片段通过碱基替换、碱基缺失和碱基插入可以实现大黄药材三个基源物种的准确鉴定。金钱白花蛇(Bungarus multicinctus)是一种具有显着药理活性重要的传统中药,具有祛风,通络,止痉功效,用于治疗风湿顽痹,麻木拘挛,中风口眼?斜,半身不遂,抽搐痉挛,破伤风,麻风,疥癣等症。由于该药材在治疗类风湿性关节炎,癫痫,荨麻疹,颈椎病等方面疗效突出,导致需求量大,致使该品种药材的伪品频繁出现在中药市场。针对金钱白花蛇和常见伪品线粒体基因COI序列设计特异性引物,运用多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)对金钱白花蛇、黄斑渔游蛇(Xenochrophis flavipunctatus)、赤练华游蛇(Sinonatrix annularis)、眼镜蛇(Naja atra)和尖吻蝮蛇(Deinagkistrodon acutus)进行同时鉴定,并根据毛细管电泳信号峰面积相对定量分析混合样品中真伪样品量。运用MLPA方法鉴定五个物种,单一探针和混合探针特异性强,物种之间没有相互干扰,表明该方法特异性强。混合样品中样品DNA比例大于30%可以根据毛细管电泳峰面积推测混合样品含量,混合样品中样品DNA比例小于30%可用于鉴定样品中是否存掺伪。MLPA方法灵敏度高,可以检测到低至2.5ng金钱白花蛇样品DNA和4.375ng伪品DNA。综上所述,通过叶绿体全基因组实现大黄药材三个基原物种的快速鉴定,MLPA方法实现对金钱白花蛇及其常见伪品的同时鉴定,并进行相对定量分析。两个方法基于分子层面对两个中药材品种准确、快速、标准化的鉴定可以验证两个方法的有效性、稳定性和科学性,可以将这两种方法推广应用于其他多基原药材或贵重药材的鉴定。
赵霞[8](2020)在《硫黄及其制剂冰黄肤乐软膏的质量控制研究》文中认为目的:硫黄为自然元素类矿物硫族自然硫,采挖后,加热熔化,除去杂质,或用含硫矿物经加工制得。硫黄主产于山西、陕西、山东、河南、湖北、四川、广东等地,外用解毒杀虫疗疮,内服补火助阳通便。现代药理研究表明,硫黄具有缓泻、溶解角质、抗炎、抗菌、杀虫、镇咳、祛痰等作用。目前市场上硫黄来源混乱,除《中华人民共和国药典》(2015年版,以下简称《中国药典》)规定基源的硫黄外,还有利用煤、天然气等进行工业回收所制得的硫黄。此外,产地和加工方式的不同,导致硫黄质量参差不齐,其所含无机元素种类和含量不同,增加了硫黄及其制剂在生产应用时的不可控性。再者,硫黄含少许砷、砷盐等有害物质,长期使用可导致慢性中毒。冰黄肤乐软膏常用于治疗神经性皮炎、湿疹、银屑病等皮肤性炎症,组方中含有硫黄,且占比较大。《中国药典》硫黄项下仅规定了性状、鉴别、硫含量测定项目;冰黄肤乐软膏项下关于硫黄仅规定了鉴别项目。因此为全面了解和综合评价硫黄及其含硫制剂冰黄肤乐软膏,保证产品的质量可控和安全用药,本课题拟利用XRD衍射指纹图谱分析和硫黄无机元素含量测定结合指纹图谱分析建立硫黄的质量评价方法。拟通过HPLC法测定冰黄肤乐软膏中硫黄含量、ICP-MS法测定无机元素含量为完善冰黄肤乐软膏的质量标准提供参考。方法:1.硫黄定性研究:以性状鉴别、理化鉴别、显微鉴别和X射线衍射法(X-ray Diffraction,XRD)物相检索,对硫黄进行鉴别。采用XRD指纹图谱结合相似度评价分析方法,进行硫黄一致性评价。2.硫黄化学成分含量测定:采用中和滴定法和高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定硫黄中主成分硫的含量,采用电感耦合等离子体-质谱法(Inductively Coupled Plasma-Mass Spectrometry,ICP-MS)测定无机元素的含量。根据含量测定结果采用聚类分析、主成分分析和相似度评价分析方法对硫黄进行综合质量评价。3.冰黄肤乐软膏定性鉴别:采用薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,TLC)鉴定冰黄肤乐软膏中大黄、姜黄;采用气相色谱法(Gas Chromatography,GC)鉴定冰片、薄荷脑;采用燃烧法鉴定硫黄,评价不同厂家的硫黄质量。4.冰黄肤乐软膏含量测定:采用HPLC法测定冰黄肤乐软膏中大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚、硫黄5个化学成分的含量;采用ICP-MS测定冰黄肤乐软膏中24种无机元素的含量。结合相似度评价、主成分分析、聚类分析3种分析方法,从无机元素的层面建立冰黄肤乐软膏质量评价方法,完善冰黄肤乐软膏的质量标准,为其他含硫制剂质量标准的建立提供参考。5.安全性评价:采用Franz扩散仪进行体外透皮实验;采用ICP-MS法、氢化物发生原子荧光光谱法(Hydride Generation Atomic Fluorescence Spectrometry,HGAFS)、液相色谱-原子荧光光谱法(Liquid Chromatography-Atomic Fluorescence Spectrometry,LC-AFS)测定硫黄软膏及冰黄肤乐软膏样品和透皮接收液中的重金属元素及As(Ⅲ)、As(V)形态砷的含量,计算重金属透皮率,结合硫黄及含硫制剂中的重金属,对其进行安全性评价。结果:1.与理化鉴别和显微鉴别相比,性状鉴别不仅能够鉴别硫黄,还可以区分天然硫黄和人工硫黄。XRD指纹图谱物相检索结果显示硫黄的主要成分为硫,结构为S或S8。建立了 47批不同产地硫黄的XRD衍射指纹图谱,确定22个共有峰,以平均数指纹图谱为参照,通过夹角余弦法计算相似度对硫黄药材进行质量评价,结果显示65.96%的硫黄药材相似度均在0.990以上。2.硫黄化学成分测定,中和滴定法测定硫含量,结果显示47批硫黄的不合格率为40.4%。HPLC法测定硫含量,结果显示硫黄的不合格率为74.5%。HPLC法测定硫含量操作简便,精密度高,优于中和滴定法,因此推荐HPLC法测定硫含量。通过ICP-MS建立了硫黄中21种无机元素的含量测定方法,测定了 47批硫黄的21种无机元素的含量,进一步筛选出10种共有无机元素,采用相似度评价、主成分分析、聚类分析3种方法对47批硫黄进行综合质量评价,并建立了无机元素指纹图谱。结果显示P、As、Ca等元素含量均值高于100μg/g,Zn、Na等元素含量均高于10μg/g,其余元素含量低于10 μg/g,精密度、稳定性、重复性、加样回收率结果均符合《中国药典》规定,3种分析方法结果一致,可将硫黄分为天然硫黄和人工硫黄,部分样品交错可能是由于产地和加工方式不同。根据重金属含量测定结果,建议限量标准为:Cu 5 mg/kg、As 5 mg/kg、Cd 0.3 mg/kg、Hg 0.2 mg/kg、Pb 10 mg/kg。3.冰黄肤乐软膏定性结果显示:以燃烧法鉴别硫黄,28批样品中有20批(西藏产14批、自制6批)有SO2刺激性气味。采用GC鉴别冰片和薄荷脑成分,有20批(西藏产14批、自制6批)样品均在相同的保留时间出峰。以薄层色谱法鉴别大黄,28批样品中有20批(西藏产14批、自制6批)在相应的位置上有对应的斑点。以薄层色谱法鉴别姜黄,28批样品中有8批(西藏产2批、自制6批)在相应的位置上有对应的斑点。造成姜黄素未检出的原因可能是姜黄素不稳定,见光易分解,生产后放置时间长,不易检出,建议避光保存冰黄肤乐软膏,进行薄层色谱鉴别的冰黄肤乐软膏样品保存时间不宜过长,有待进一步研究。市面上各地生产的冰黄(磺)肤乐软膏较多,西藏厂家生产的软膏成分与《中国药典》规定的一致。4.通过HPLC法,建立了冰黄肤乐软膏中大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、硫黄5个化学成分的含量测定方法,并测定了 23批冰黄肤乐软膏的5种化学成分的含量。结果显示有6批未检出大黄和硫黄成分,其余17批大黄酸含量在0.089-0.37 mg/g之间,大黄素含量在0.064-0.256 mg/g之间,大黄素甲醚含量在0.052-0.127 mg/g之间,大黄酚含量在0.167-0.409 mg/g之间,硫黄含量在17.11~21.03 mg/g之间,精密度、稳定性、重复性、加样回收实验结果均符合《中国药典》相关规定。5.通过ICP-MS法,建立了冰黄肤乐软膏及原药材中24种无机元素的含量测定方法,测定了 23批冰黄肤乐软膏的24种无机元素的含量,进一步筛选出21种共有无机元素,利用相似度评价、主成分分析和聚类分析方法对23批冰黄肤乐软膏进行质量评价,并建立了无机元素指纹图谱。结果显示K、P、Ca等元素含量均值均高于100 μg/g,Na、Mg、Fe含量均值均高于10 μg/g,其余元素含量均值均低于10 μg/g,该方法的精密度、稳定性、重复性、加样回收率均符合《中国药典》规定,3种分析方法结果一致,可区分不同厂家的冰黄肤乐软膏。通过统计学软件SPSS 25.0和Origin 8.5分析冰黄肤乐软膏无机元素与原药材之间的相关性,结果显示Mg、Al、Cr主要来源于黄芩,P、K、Cu、Cd、Pb主要来源于姜黄,Ca主要来源于大黄,As、Hg主要来源于硫黄,大黄素类成分总量逐步回归方程为Y=4.429Mg+83.777Ba-2.258,硫黄含量逐步回归方程为 Y=1 23.241 Mg+2442.877Sr+73511.616As-141.970。6.采用ICP-MS、LC-AFS检测透皮接收液及软膏中的重金属元素和无机砷,结果显示冰黄肤乐软膏和硫黄软膏的透皮接收液中全部未检测出重金属元素及无机砷,重金属元素及无机砷的透过率为0。因此硫黄软膏和冰黄肤乐软膏作为皮肤外用药,安全性较高。结论:本实验通过硫黄的性状鉴别、XRD衍射指纹图谱、主成分硫及无机元素含量测定等研究内容,建立硫黄的质量评价方法,制定重金属限量标准。通过冰黄肤乐软膏中无机元素指纹图谱、重金属体外透皮实验、硫黄的含量测定等研究内容,为提高冰黄肤乐软膏的质量标准提供参考。
刘永红,郭建宏,张顺仓[9](2018)在《天南星科9种易混淆药材的鉴别特征概述》文中研究表明天南星科菖蒲属、半夏属等包含的一些常用药材名称相近,别名众多,性状相似,不同地区因用药习惯不同而常易混淆。从基原植物、药材性状、显微特征、理化特征及分子生物学鉴定等方面阐述了天南星科易混药材石菖蒲、水菖蒲、千年健、白附子、犁头尖、虎掌南星、天南星、半夏及滴水珠的鉴别特征,为天南星科常见药材的规范使用提供了参考。
郑茜[10](2018)在《蝴蝶花的生药学及其体外抗肿瘤活性研究》文中研究表明目的:蝴蝶花Iris japonica Thunb.为鸢尾科鸢尾属多年生草本植物,在我国分布非常广泛,常用作民间草药及园林绿化植物,具有消肿止痛,清热解毒的功效。具有药用资源开发的广阔前景。由于蝴蝶花的使用一直停留在民间,又常常与药材射干和川射干混用,我们采用传统的一般鉴定方法结合现在新型鉴别方法DNA分子标记技术,从而明确该药材的来源,不仅保证了临床用药的安全性,与有效性,同时也为合理用药提供一定的科学依据。,而目前针对蝴蝶花系统性研究甚少,系统的进行蝴蝶花生药学研究,我们采用传统的一般鉴定方法结合现在新型鉴别方法DNA分子标记技术,从而明确该药材的来源,不仅保证了临床用药的安全性,与有效性,同时也为合理用药提供一定的科学依据。同时针对五种不同的细胞株对蝴蝶花进行抗肿瘤有效溶剂部位的筛选,为后续研究蝴蝶花抗肿瘤活性成分,以及蝴蝶花有效成分抗肿瘤机制,提供一个初步理论基础以及有力的实验依据。方法:首先本文是采用了来源鉴定、性状鉴定、显微鉴定、薄层色谱法、理化鉴定方法研究了蝴蝶花生药学。然后对蝴蝶花及其近缘物种进行基于ISSR和SCoT的分子标记的DNA分子鉴别。具体包括对蝴蝶花基源进行调查,对它的性状进行观察描述,对它的粉末和组织结构进行显微特征观察,对它所含成分进行理化鉴别。同时以不同极性的有机溶剂依次回流提取蝴蝶花总浸膏(硅胶干法拌样),得到五种不同的溶剂提取部位的样品,对人肝癌细胞株Hep G2,人宫颈癌细胞株Hela,人肺腺癌细胞A549,人结肠癌细胞株Hccc-9810和人大细胞肺癌细胞株H460进行体外培养,以CCK-8法测定蝴蝶花不同溶剂部位样品对体外五种肿瘤细胞增殖作用的影响,并用五氟尿嘧啶和蝴蝶花中含有的两种标品(鸢尾黄素、芹菜素)做阳性对照,筛选出对肿瘤增殖抑制率较高的部位和较敏感的肿瘤细胞株,对肿瘤细胞的增殖抑制率进行检测,采用Graph Pad Prism5软件计算IC50。结果:1.蝴蝶花(Iris japonica.)为鸢尾科鸢尾属植物蝴蝶花,多年生草本,茎直立。其根茎药材呈现不规则条状,常弯曲,通常不分枝,但具有不规则纵向皱纹,节间明显,且呈环状凸起,有干燥的叶柄或叶柄残基在它上面残留。根茎横切面具有大量叶迹维管束、纤维束,中柱鞘有许多维管束包围组成,散在大量草酸钙柱晶和方晶,粉末中发现石细胞,星状毛,网纹导管为主,纤维常成束,薄壁细胞壁呈不规则多面体形。理化实验发现含有黄酮、三萜类物质。薄层鉴别以氯仿-甲醇-冰醋酸(10-2-0.2)为展开剂,发现蝴蝶花根茎提取物分离度良好,结果显示鸢尾黄素和芹菜素对应位置斑点较明显。2.分子鉴别中筛选出的10条ISSR引物和SCoT引物,对蝴蝶花及其近缘物种共12份材料,分别扩增出130和143条带,多态性条带百分率分别为96.2%和97.9%。12份材料间的Shannon多样性信息指数(I)分别为0.5402和0.5003;Nei’s基因多样度指数(H)分别为0.3630和0.3273,表明12份材料间遗传差异较大。基于SCoT标记分析获得的遗传距离高于ISSR标记分析获得的遗传距离。基于SCoT标记聚类分析表明,在相似系数高于0.74时蝴蝶花、射干、川射干均能独立成支,能较好地与鸢尾属其他材料进行区分。3.体外抗肿瘤活性实验表明,不同极性溶剂的提取物和三阳性对照药物对人宫颈癌Hela细胞株均有一定的增殖抑制作用,同时对人肝癌Hep G2细胞株,人肺腺癌A549细胞,人结肠癌Hccc-9810细胞,人大细胞肺癌H460细胞也有一定的增殖抑制作用,通过计算比较各阳性对照药材和不同溶剂提取部位对五种不同肿瘤细胞株的增殖抑制率以及其IC50值,发现蝴蝶花中乙酸乙酯和正丁醇两个溶剂部位都能有效的抑制肿瘤增长,表现出较好的活性,且呈现出良好的剂量-量效关系,乙酸乙酯部位对Hep G2细胞增殖的抑制效果最好,IC50为53.08μg/ml,正丁醇部位对Hep G2人肝癌细胞株抑制作用较强,其IC50为174.91μg/ml,而石油醚部位高浓度呈现很小的抑制作用,95%乙醇部位不管给药浓度高低均无抑制作用,表明蝴蝶花抗肿瘤活性成分主要集中在乙酸乙酯部位和正丁醇部位。结论:以传统鉴别和分子鉴别相结合,确定蝴蝶花的基源及其近缘物种的亲缘关系。为蝴蝶花的药用开发提供系统的理论依据,建立较好且能稳定区分蝴蝶花品种的方法。以CCK-8法对蝴蝶花体外抗肿瘤活性进行研究,选取实验中培养的五种肿瘤细胞株,发现可以通过计算不同溶剂提取部位对他们的抑制率以及IC50值,可以得出,蝴蝶花的乙酸乙酯部位和正丁醇部位可以明显不同程度抑制肿瘤细胞的增殖,石油醚部位以及95%乙醇部位基本无抗肿瘤活性,为进一步研究蝴蝶花抗肿瘤活性成分奠定了理论和实验基础。
二、菖蒲类中药材的理化鉴别(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、菖蒲类中药材的理化鉴别(论文提纲范文)
(1)百合科植物在纳西族医药中的应用整理(论文提纲范文)
1 整理方法 |
2 结果 |
2.1 百合科纳西药的种类及资源特点 |
2.2 纳西族药用百合科药材标准现状 |
3 讨论 |
3.1 纳西药材名称规范 |
3.2 百合科纳西药材品种和基原 |
3.3 百合科纳西药材的质量标准 |
3.4 百合科纳西药的药用部位和功效 |
(2)石菖蒲的研究进展及质量标志物预测分析(论文提纲范文)
1 化学成分 |
1.1 挥发性成分 |
1.2 非挥发性成分 |
2 药理作用 |
2.1 中枢神经系统 |
2.2 心脑血管系统 |
2.2.1 抗脑缺血作用 |
2.2.2 抗心肌缺血 |
2.2.3 抗心律失常作用 |
2.4 消化系统 |
2.5 呼吸系统 |
2.6 抗肿瘤作用 |
2.7 抗菌、抗氧化作用 |
2.8 其他作用 |
3 石菖蒲Q-marker预测 |
3.1 基于化学成分有效性的石菖蒲Q-marker预测分析 |
3.2 基于化学成分特有性的石菖蒲Q-marker预测分析 |
3.3 基于传递与溯源性的原植物亲缘学石菖蒲 Q-marker 预测分析 |
3.4 基于可测和处方配伍性的石菖蒲Q-marker预测分析 |
4 结语 |
(3)全国地方中药饮片标准现状分析及标准中制定医学项的方法研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略词表 |
前言 |
1 导论 |
1.1 研究背景 |
1.2 研究目的及意义 |
1.2.1 研究目的 |
1.2.2 研究意义 |
1.3 研究思路、方法及技术路线 |
1.3.1 研究思路 |
1.3.2 研究方法 |
1.3.3 技术路线 |
1.4 相关概念 |
1.4.1 中药饮片 |
1.4.2 药品标准 |
1.4.3 中药饮片质量标准 |
1.4.4 国家药品标准 |
1.4.5 地方药品标准 |
2 相关理论及法律法规 |
2.1 相关理论 |
2.1.1 中药学理论 |
2.1.2 中医学理论 |
2.1.3 中药炮制理论 |
2.1.4 药品监管科学理论 |
2.1.5 统计学理论 |
2.2 相关法律法规 |
2.2.1 《中华人民共和国药品管理法》(2019 年主席令 13 届第 31 号) |
2.2.2 《省级中药饮片炮制规范修订的技术指导原则》(国药监 2018 年第 16 号) |
2.2.3 《国家药监局关于省级中药饮片炮制规范备案程序及要求的通知》(国药监药注[2020]2 号) |
2.2.4 《中共中央 国务院关于促进中医药传承创新发展的意见》(国中医药办发[2019]15号) |
2.2.5 《地区性民间习用药材管理办法》(1987 年原卫生部) |
2.3 本草学概述 |
2.3.1 本草、本草学、本草考证的内涵 |
2.3.2 本草学的研究内容 |
3 我国中药饮片质量标准的现状研究 |
3.1 国家中药饮片标准概述 |
3.1.1 《中国药典》的历史沿革 |
3.1.2 《中国药典》(2020 版)中药饮片标准的收载及内容情况 |
3.1.3 《全国中药炮制规范》的标准内容及收载情况 |
3.2 中药饮片地方标准现状 |
3.2.1 中药饮片地方标准的颁布时间及修订情况 |
3.2.2 地方中药饮片炮制规范的执行情况 |
3.2.3 地方中药饮片地方标准收载情况 |
3.3 小结 |
4 中药饮片地方标准的差异化分析 |
4.1 地方标准体例情况 |
4.1.1 地方标准之间比较体例项目的情况 |
4.1.2 地方标准与《中国药典》(2020 版)比较体例项目的情况 |
4.2 以三种中药饮片标准为例的差异化分析 |
4.2.1 离散度分析法 |
4.2.2 定性资料量化方法与赋分规则 |
4.2.3 芜荑的差异化分析 |
4.2.4 银耳的差异化分析 |
4.2.5 甜瓜蒂的差异化分析 |
4.2.6 分析结果 |
4.3 小结 |
5 中药饮片地方标准中医学标准的规范制定方法研究 |
5.1 医学标准项确定的方法研究 |
5.1.1 确定[主治]项与[功能]项 |
5.1.2 依据中医药理论确定[性味与归经]项 |
5.2 以“芜荑”为例,确定医学标准项 |
5.2.1 芜荑地方标准中医学标准项的比较 |
5.2.2 芜荑“主治”的确定 |
5.2.3 芜荑“功能”的确定 |
5.2.4 芜荑“性味”的确定 |
5.2.5 芜荑“归经”的确定 |
5.2.6 芜荑的医学标准项的制定结果 |
5.3 小结 |
6 结论与展望 |
6.1 结论 |
6.2 展望 |
本研究创新性的自我评价 |
参考文献 |
综述 我国中药饮片质量标准的研究进展 |
参考文献 |
个人简介 |
在学期间科研成绩 |
致谢 |
(4)不同基源石菖蒲药材挥发油指纹图谱研究(论文提纲范文)
0 引言 |
1 材料 |
1.1 仪器 |
1.2 材料 |
2 方法与结果 |
2.1 供试品溶液制备 |
2.2 对照品溶液制备 |
2.3 色谱条件 |
2.4 色谱条件优化及方法学考察 |
2.4.1 程序升温比较 |
2.4.2 分流比 |
2.4.3 精密性 |
2.4.4 稳定性 |
2.4.5 重复性 |
2.5 样品测定与共有模式建立 |
2.6 相似度评价 |
2.7 PCA主成分分析 |
3 结论 |
(5)三种菖蒲的比较研究进展(论文提纲范文)
1 3种菖蒲的别名、来源、产地[5]91对比 |
2 植物形态鉴别 |
3 性状鉴别 |
4 显微鉴别 |
5 薄层鉴别 |
6 化学成分与药理作用分析比较 |
7 小结 |
(6)地乌药材系统鉴定及质量评价(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略词表 |
前言 |
第一章 地乌性状、显微及理化鉴定 |
一、地乌性状鉴定 |
1 地乌样品采集 |
2 地乌性状特征鉴别 |
二、地乌显微鉴定 |
1 横切面显微鉴定 |
1.1 材料及仪器 |
1.2 实验方法 |
1.3 实验结果 |
2 粉末显微鉴定 |
2.1 材料及仪器 |
2.2 实验方法 |
2.3 实验结果 |
三、地乌理化鉴定 |
1 材料及仪器 |
2 实验方法 |
3 实验结果 |
4 讨论 |
第二章 地乌DNA条形码分子鉴定 |
1 材料及仪器 |
1.1 材料 |
1.2 实验试剂 |
1.3 实验仪器 |
2 实验方法 |
2.1 溶液配制 |
2.2 改良CTAB法提取基因组DNA |
2.3 PCR扩增 |
2.4 琼脂糖电泳检测 |
2.5 数据分析 |
3 实验结果 |
3.1 方法学验证 |
3.2 PCR扩增、测序成功率及序列特征 |
3.3 变异位点分析 |
3.4 基于相似度比对法(Blast法)的鉴定结果 |
4 讨论 |
第三章 HPLC法同时测定地乌中5种有效成分含量 |
1 材料及仪器 |
1.1 材料 |
1.2 实验试剂 |
1.3 实验仪器 |
2 实验方法 |
2.1 色谱条件及系统适用性试验 |
2.2 溶液配制 |
2.3 方法学考察 |
2.4 样品含量测定 |
3 实验结果 |
3.1 方法学考察结果 |
3.2 基于HPLC的5种皂苷成分含量测定 |
3.3 地乌药材特征图谱 |
3.4 地乌药材聚类分析 |
4 讨论 |
第四章 地乌三萜总皂苷含量测定 |
1 材料及仪器 |
1.1 材料 |
1.2 实验试剂 |
1.3 实验仪器 |
2 实验方法 |
2.1 溶液配制 |
2.2 最大吸收波长考察 |
2.3 标准曲线绘制 |
2.4 样品总皂苷含量测定 |
3 实验结果 |
3.1 最大吸收波长考察结果 |
3.2 标准曲线的绘制 |
3.3 地乌总皂苷含量测定结果 |
3.4 地乌5种皂苷成分含量与总皂苷含量相关性分析 |
4 讨论 |
结语与创新 |
参考文献 |
文献综述 |
参考文献 |
攻读硕士期间发表的论文 |
致谢 |
(7)多基原药材大黄和常见蛇类药材金钱白花蛇的分子鉴定方法构建(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略词表 |
前言 |
第一章 基于叶绿体基因组多基原药材大黄分子鉴定方法构建 |
1 仪器与材料 |
1.1 实验样品 |
1.2 实验仪器 |
1.3 实验试剂 |
2 方法 |
2.1 大黄药材叶绿体基因组DNA提取 |
2.2 叶绿体基因组测序、拼接、注释 |
2.3 重复序列分析 |
2.4 构建叶绿体基因组系统进化树 |
2.5 候选序列筛选 |
3 结果 |
3.1 大黄基原植物鉴定 |
3.2 大黄药材样品鉴定 |
3.3 大黄三个基原物种叶绿体基因组特征分析 |
3.4 重复序列分析 |
3.5 系统进化分析 |
3.6 大黄三个基原物种叶绿体基因组差异比较分析 |
3.7 候选鉴定序列分析 |
4 讨论 |
第二章 基于MLPA方法常见蛇类药材金钱白花蛇分子鉴定方法构建 |
1 仪器与材料 |
1.1 实验样品 |
1.2 实验仪器 |
1.3 实验试剂 |
2 方法 |
2.1 样品DNA提取 |
2.2 杂交序列筛选和构建系统发育树 |
2.3 MLPA探针设计 |
2.4 MLPA试验 |
2.5 毛细管电泳检测 |
2.6 MLPA方法特异性试验 |
2.7 MLPA方法灵敏度试验 |
2.8 MLPA方法检测混合样品 |
3 结果 |
3.1 鉴定序列分析 |
3.2 MLPA方法鉴定金钱白花蛇特异性分析 |
3.3 MLPA方法鉴定金钱白花蛇灵敏度分析 |
3.4 用MLPA法定量分析金钱白花蛇的掺假情况 |
4 讨论 |
结语与创新 |
参考文献 |
文献综述 |
1 以聚合酶链式反应为基础的分子鉴定技术 |
2.其他分子鉴定技术 |
参考文献 |
附录 |
攻读硕士学位期间发表论文 |
致谢 |
(8)硫黄及其制剂冰黄肤乐软膏的质量控制研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略词表 |
文献综述 |
1 硫黄的来源考察与文献记载 |
2 硫黄的药理作用 |
3 国内外硫黄质量控制研究进展 |
4 矿物药研究方法概述 |
5 小结 |
参考文献 |
前言 |
技术路线 |
第一章 硫黄药材定性研究 |
第一节 硫黄性状鉴别和燃烧法化学鉴别 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第二节 硫黄显微鉴别 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第三节 硫黄XRD衍射指纹图谱 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第二章 硫黄的无机元素分析 |
第一节 主成分硫含量测定 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第二节 硫黄无机元素全扫半定量分析 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第三节 硫黄中21种无机元素指纹图谱及重金属限量标准的建立 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第三章 硫黄炮制工艺对硫黄质量的影响研究 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第四章 冰黄肤乐软膏主要成分定性鉴别 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第五章 冰黄肤乐软膏中成分含量测定 |
第一节 HPLC法测定冰黄肤乐软膏中大黄和硫黄化学成分 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第二节 冰黄肤乐软膏中24种无机元素含量测定及重金属限量标准的建立 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
第六章 冰黄肤乐软膏及硫黄软膏重金属元素体外透皮实验研究 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
3 实验结果与分析 |
4 小结 |
全文总结 |
创新点 |
参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
(9)天南星科9种易混淆药材的鉴别特征概述(论文提纲范文)
1 天南星科9种药材基原植物的鉴别特征 |
2 天南星科9种药材的性状鉴别特征 |
3 天南星科9种药材的显微鉴别特征 |
4 天南星科9种药材的理化鉴别特征 |
5 天南星科9种药材的分子生物学鉴定 |
6 展望 |
(10)蝴蝶花的生药学及其体外抗肿瘤活性研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
前言 |
第一章 蝴蝶花的传统生药学研究 |
1.1 实验材料、试剂及仪器 |
1.1.1 实验材料 |
1.1.2 实验试剂 |
1.1.3 实验仪器 |
1.2 实验方法 |
1.2.1 植物形态 |
1.2.2 性状鉴别 |
1.2.3 显微鉴别 |
1.2.4 理化鉴别 |
1.2.5 薄层鉴别 |
1.3 实验结果 |
1.3.1 植物来源及形态描述 |
1.3.2 性状鉴别结果 |
1.3.3 显微鉴别结果 |
1.3.4 理化鉴别结果 |
1.3.5 薄层鉴别结果 |
1.4 讨论与小结 |
第二章 基于ISSR和 SCoT分子标记的蝴蝶花及其近缘物种的DNA分子鉴别 |
2.1 实验材料、试剂及仪器 |
2.1.1 实验材料 |
2.1.2 实验试剂 |
2.1.3 实验仪器 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 总DNA的提取 |
2.2.2 总DNA的检测 |
2.2.3 PCR扩增 |
2.2.4 ISSR和 SCoT分子标记引物筛选 |
2.3 实验结果 |
2.3.1 部分总DNA提取结果 |
2.3.2 ISSR和SCoT引物筛选 |
2.3.3 多态性分析 |
2.3.4 遗传距离分析 |
2.3.5 系统发育分析 |
2.4 讨论与小结 |
2.4.1 蝴蝶花及其近缘物种的亲源关系 |
2.4.2 ISSR和 Scot引物在射干和川射干鉴别中的应用 |
第三章 蝴蝶花体外抗肿瘤活性部位筛选及对不同肿瘤细胞的活性研究 |
3.1 实验材料、试剂及仪器 |
3.1.1 实验材料 |
3.1.2 实验试剂和耗材 |
3.1.3 实验仪器 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 蝴蝶花根茎不同极性提取物的制备 |
3.2.2 细胞株的培养、传代、冻存、复苏 |
3.2.3 CCK-8法检测细胞增殖抑制作用 |
3.2.4 数据处理 |
3.3 实验结果 |
3.3.1 不同极性溶剂回流提取 |
3.3.2 阳性对照抗肿瘤活性 |
3.3.3 蝴蝶花不同溶剂部位抗肿瘤活性的 |
3.4 讨论与小结 |
参考文献 |
蝴蝶花的研究进展及鸢尾属植物的抗肿瘤活性研究 综述 |
1 蝴蝶花概述 |
1.1 蝴蝶花生药学研究 |
1.2 蝴蝶花化学成分 |
1.3 蝴蝶花药理作用 |
2 鸢尾属植物的抗肿瘤活性研究 |
2.1 鸢尾属的化学成分 |
2.2 鸢尾属植物抗肿瘤活性 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
四、菖蒲类中药材的理化鉴别(论文参考文献)
- [1]百合科植物在纳西族医药中的应用整理[J]. 訾成飞,桂鑫,孙翠,马蕊,赵飞亚,陶爱恩. 中国民族民间医药, 2021(15)
- [2]石菖蒲的研究进展及质量标志物预测分析[J]. 杨鹤年,吴宿慧,李寒冰,李根林. 中国新药杂志, 2021(13)
- [3]全国地方中药饮片标准现状分析及标准中制定医学项的方法研究[D]. 孙婉萍. 辽宁中医药大学, 2021
- [4]不同基源石菖蒲药材挥发油指纹图谱研究[J]. 刘和平,徐俊,李青苗,尚强,蔡信福,赵军宁. 成都大学学报(自然科学版), 2021(01)
- [5]三种菖蒲的比较研究进展[J]. 朱平,刘效栓,王红丽,罗燕燕,祁生磊. 中国民族民间医药, 2021(02)
- [6]地乌药材系统鉴定及质量评价[D]. 胡鑫. 湖北中医药大学, 2020(11)
- [7]多基原药材大黄和常见蛇类药材金钱白花蛇的分子鉴定方法构建[D]. 周豫新. 湖北中医药大学, 2020(12)
- [8]硫黄及其制剂冰黄肤乐软膏的质量控制研究[D]. 赵霞. 北京中医药大学, 2020(04)
- [9]天南星科9种易混淆药材的鉴别特征概述[J]. 刘永红,郭建宏,张顺仓. 扬州大学学报(农业与生命科学版), 2018(04)
- [10]蝴蝶花的生药学及其体外抗肿瘤活性研究[D]. 郑茜. 西南医科大学, 2018(06)