果蝇唾液腺染色体观察及生产工艺改进

果蝇唾液腺染色体观察及生产工艺改进

一、果蝇唾腺染色体观察及制片技术改进(论文文献综述)

李霞,黄胜琴[1](2020)在《染色体的几种染色方法比较》文中提出针对高中生物实验课中三种常见的染色体染色剂,通过详细介绍其配制方法、优点、缺点及具体的改进方法,对这三种染色剂进行比较,得出实验时最好采用改良苯酚品红溶液对染色体进行染色的结论。

张昊,刘雄伦,罗红兵,李林,刘登望[2](2020)在《农学类“遗传学实验”课程的改革与实践》文中提出"遗传学实验"是农学类专业一门重要的专业基础实验课程,在我校有着较长的教学历史,取得了良好的教学效果。但在多年的教学实践过程中仍存在不足之处,因此,本教学团队针对问题进行了相关教学改革。笔者首次提出三个制片的基本要求、临时片制作永久片3个或5个的原则、组长制以及排序式评分方法,以期促进农学类学生学习与操作本门实验课程的积极性、提高学习效果,为我校"双一流"建设中的学生培养模式及实践课环节提供有益的参考。

王聪,郭蓓,刘玉芬,吕鹤书,黄煌,黄体冉[3](2018)在《模式生物在遗传学实验教学中的应用——以果蝇为例》文中认为模式生物在遗传学研究中有着举足轻重的作用,是重要的实验教学材料。本研究通过探讨经典模式生物果蝇在遗传学基础性、综合性、开放性实验教学中的应用,发现现行的果蝇遗传学实验教学内容主要以基础性课程为主,基于果蝇杂交、形态观察和分子检测的综合性大实验逐渐开展,但开放性实验较少。建议针对经典模式生物设置"N+1+X"实验课程模式,实现"理论知识-实验技术-创新能力"一站式培养。

梁韶,雷秀娟,宋娟,侯志芳,姚丽娜,郑惠元,王英平[4](2018)在《人参不同材料染色体制片技术优化》文中研究说明染色体制片效果受多种因素影响,通过对人参组培苗根尖、种子根尖、水培人参根尖和愈伤组织等不同材料的取材时间、预处理时间、解离方法、染色方法及制片方法等因素的探究,优化人参染色体制片技术。结果表明:人参组培苗诱导根尖长至2 cm,水培根尖长至1 cm,种子根尖长至1. 5 cm,愈伤组织继代后6~9 d时,取材分裂相较多;各根尖经0℃冰水处理10~15 h或2 mmol/L 8-羟基喹啉处理2~6 h,愈伤组织0℃放置24 h,染色体形态较好;各根尖37℃水浴条件下,2%纤维素酶+1%果胶酶酶解90 min,愈伤组织酶解120 min,比酸解效果好。愈伤组织如果压片法制片可以不用解离;用卡宝品红染液染色或45%醋酸压片可获得较好分裂相;组培苗诱导根尖和愈伤组织比种子根尖制片更经济、快捷。

赵丰兰,段永波,薛涛,朱艳芳,盛玮[5](2018)在《高校《遗传学实验》中果蝇实验综述》文中研究说明对高校《遗传学实验》课程中有关果蝇杂交实验的综合化研究、培养条件及果蝇饲养中的问题进行了综述分析。

王波[6](2018)在《巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库构建及其序列分析》文中研究说明巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)是大戟科(Euphorbiaceae)、橡胶树属(Hevea)热带雨林乔木中唯一的栽培种,也是世界上广泛种植的产胶树种,其树皮所产胶乳是天然橡胶的原材料,具有很高经济和战略意义。目前国内外在橡胶树cDNA文库和蛋白组水平上开展了系列分子生物研究,取得了一定的进展,而有关橡胶树全基因组测序的相关研究起步较晚,仅于2013、2016和2017年完成对RRIM600、热研7-33-97和BPM 24三个橡胶树品种的全基因组测序,但也仅组装到Scaffold水平,尚未达到染色体水平。本研究在染色体水平上构建橡胶树单染色体文库,并对其进行测序,通过序列分析对单染色体的一些序列进行功能注释,旨在从单染色体水平上为橡胶树基因组研究提供新思路、新方法,为橡胶树分子辅助育种提供基础,研究取得了如下结果:(1)以巴西橡胶树’热研7-33-97’古铜期的嫩叶为材料,经酶解低渗去壁后制备染色体标本,通过微细玻璃针法从橡胶树中期细胞中共分离出40条单染色体。采用LA-PCR法随机对分离出的18条单染色体进行体外扩增,电泳检测后均有条带,条带大小范围在200~4000bp之间,从中随机选取5条染色体通过Southern杂交检测验证其来源,结果表明该5条染色体均来自橡胶树;将这5条单染色体进行荧光原位杂交验证并结合核型分析,确定其分别是热研7-33-97的第5、6、11、13和14号染色体。(2)对上述5条单染色体的第二轮LA-PCR产物进行纯化,并将纯化后的产物连接、转化、克隆最终构建出热研7-33-97第5、6、11、13和14号染色体文库,其克隆子数目分别是4.5×105个、5.11×105个、3.32×105个、3.01×105个、4.41×105个,插入片段大小范围分别在250~1100bp、250~1200bp、300~1100bp、300~950bp、200~1100bp,平均长度分别为 536 bp、481bp、388 bp、401bp、485 bp,文库的覆盖率分别为2.7倍、3.2倍、1.9倍、3.8倍、2.2倍,空载率分别为2%、3%、3%、1%、2%。(3)从热研7-33-97的第5、6、11、13和14号染色体的文库中,每个随机挑出100~140个左右的阳性克隆子进行测序,并将测序信息与NCBI中的巴西橡胶树RRIM600全基因组数据库(GCA001907995.1)、热研7-33-97全基因组数据库(GCA001654055.1)、EST数据库进行在线比对。比对结果表明,五条染色体文库序列中与橡胶树热研7-33-97全基因组数据库(GCA001654055.1)的高同源性分别有23、30、21、21、18条;与RRIM600全基因组数据库(GCA001907995.1)高同源性分别有23、28、22、20、18条;与橡胶树EST文库比较同源性大于90%的有20、74、40、38、57条,通过功能分析后多数单染色体序列主要与橡胶树耐盐性、耐割性、割面干涸病和抗冻性等有关。(4)对五个染色体文库中与橡胶树的全基因组数据库和EST数据库高同源的19条序列进行了 Blast2GO软件分析,通过比对发现有高同源性的序列有17条。对这17条序列用Blast2GO软件进行GO MAP比对,均得到了 GO术语注释结果,共获得23个GO ID,其中生物学途径10个、细胞组分6个和分子功能7个;对注释结果进行GO分级,共分为5级,有不同的功能,在生物学途径方面主要参与细胞过程、代谢过程、单有机体过程、生物体调控、生物合成过程、初级代谢等;在分子功能方面,主要参与催化活性、运输活性和转移酶活性等;在细胞组件部分主要是参与细胞部分、细胞、细胞器的组成。对经过GO注释后的序列进行Enzyme Code和KEGG代谢途径分析,除了第11号染色体文库序列未能注释到相关酶的功能,在5号、6号、13号及14号染色体文库均得到Enzyme Code 注释,其中 L-5Chr-5、L-5Chr-91 和 L-6Chr-48 序列上都得到一个Enzyme Code注释,所得注释的酶的ID均为2.7.7.49,为RNA-引导的DNA聚合酶;L-13Chr-25序列上都得到一个Enzyme Code注释,所得注释的酶的ID是2.3.1.12,为二氢硫辛酰赖氨酸残留乙酰转移酶;L-14Chr-73所得注释的酶的ID为3.6.1.15,为三磷酸核苷磷酸酶。但进行KEGG代谢途径分析,并未获得代谢途径。

丁海燕[7](2017)在《植物材料减数分裂染色体标本的快速制作》文中提出探索一种简便快速的植物材料减数分裂染色体标本制作技术,获得良好的减数分裂染色体标本以供原位杂交研究、遗传学实验教学等方面研究使用。以植物材料小麦、黑麦花药为材料,卡宝品红染色,冰冻揭片法制得减数分裂染色体标本,结果表明,这些用快速简便的方法获得的标本效果良好,染色体图像清晰,可较好的用于本科生实验教学、染色体分带、原位杂交等方面的研究。

黄体冉,郭蓓,刘玉芬,吕鹤书,孙祎振,申晓鸿[8](2017)在《改革遗传学实验教学,提高人才培养质量》文中提出为提高遗传学实验教学质量,夯实专业基础知识,该文立足于都市型高等农业院校遗传学实验教学实际,分析总结了教研室在树立正确的实验教学理念、精选实验教学内容和优化实验教学方法方面对遗传学实验教学进行改革的主要措施,为解决有限的实验教学学时与无限的实验教学内容之间的矛盾,提供了实践经验和理论基础。实践证明,以精选基础性、验证性实验内容,增加综合性大实验、增设自主设计实验为主题的遗传学实验教学改革在创新实验教学模式,提高人才培养质量方面取得了显着成绩。

马梦晨[9](2017)在《巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库的构建及序列分析》文中认为巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)是重要的热带作物,是我国特种经济作物。目前包括RFLP、AFLP、RAPD、SSR、SNP等十多种分子标记已在橡胶树上得到应用,主要集中在橡胶树连锁遗传图谱的构建、品种鉴定、分子标记辅助育种和遗传多样性研究中。巴西橡胶树的全基因组测序开展的较晚,于2013、2016和2017年分别完成对RRIM600、热研7-33-97和BPM 24三个橡胶树品种的全基因组测序,但也仅组装到Scaffold水平,尚未达到染色体水平,因此本研究从单条染色体入手,构建巴西橡胶树单染色体文库,对单染色体文库部分序列进行基因功能注释,旨在为橡胶树基因组研究提供新的思路与方法,为分子辅助育种提供基础。具体研究结果如下:(1)以巴西橡胶树热研7-33-97古铜期幼叶为材料制备染色体制片,从其中期分裂相中分离出32条染色体,并将分离出的单染色体用LA-PCR法扩增,其中有24条染色体检测有条带,条带大小多为300-4000 bp,对24条检测有条带的单染色体进行Dot-blot杂交验证其扩增来源,其中有22条杂交成功,证明其来自巴西橡胶树。随机选取5条斑点杂交成功的染色体进行Southern杂交,进一步证明了其来源于巴西橡胶树基因组,进而对这5条染色体进行荧光原位杂交验证并结合核型分析确定其分别为热研7-33-97的第3、7、13、15及16号染色体。(2)对已构建的单染色体文库连接转化与培养体系步骤进行了优化,优化后震荡培养时间为45 min,涂平板时菌液涂布体积确定为20μl/板,37℃倒置培养16 h。利用此体系本试验成功构建了巴西橡胶树热研7-33-97的第3、7、13、15及16号染色体微克隆文库,分别获得了 4.26×105个、3.6×105个、4.97×105个、2.83×105个、2.91×105个克隆子,插入片段范围依次为250~850bp、150~800bp、250~1200 bp、250~800 bp、250~1000 bp,平均插入片段依次为 437 bp、382 bp、491 bp、460 bp、456 bp,文库的覆盖率依次为2.1倍、1.6倍、3.6倍、2.1倍、2.3倍,空载率分别为3%、7%、2%、1%、2%。(3)随机获得了热研7-33-97的第3、7、13、15、16号染色体文库中的部分阳性克隆子测序序列,分别为80、88、83、81、111条,将测序结果与NCBI上巴西橡胶树热研7-33-97全基因组数据库(GCA001654055.1)、RRIM600全基因组数据库(GCA001907995.1)、EST数据库、巴西橡胶树18个分子标记的遗传图谱进行在线比对。该五条染色体文库中与热研7-33-97全基因组数据库(GCA001654055.1)有高同源性的分别为19、40、15、14、18条;与橡胶树EST文库同源性大于90%的依次为20、42、16、29、21条,经功能分析后多数与橡胶树耐割性、抗冻性、割面干涸病(死皮病)、耐盐性及胶乳形成相关。其中L-7Chr-4与橡胶树胶乳形成相关,还与EST序列GenBank: JZ378253.1的同源相似性为97%,经功能注释该编号与陆地棉苗根系抗盐胁迫相关。(4)对五个染色体文库中与橡胶树全基因组数据库和EST数据库有高同源性的21条序列进行了 Blast2GO软件分析,比对上有高同源性的序列有14条,对这14条序列用Blast2GO软件进行GO MAP比对,其中8条序列得到了 GO术语注释结果,共得到41个GO ID,其中生物学途径(P) 22个、细胞组分(C) 12个和分子功能(F) 7个,对41个注释结果进行GO分级,共分为5级,有不同的功能,在生物学途径方面主要参与细胞过程、代谢过程、单有机体过程、生物体调控、生物合成过程、初级代谢等方面;在分子功能方面,主要参与催化活性、运输活性和转移酶活性等;在细胞组件部分主要是参与细胞部分、细胞、细胞器的组成。对经过GO注释后的序列进行Enzyme Code和KEGG代谢途径分析,在3号染色体文库的L-3Chr-3序列上得到一个酶注释,ID为2.7.7.49,为谷氨酰胺腺苷转移酶,但并未获得代谢途径。

马梦茹[10](2017)在《巴西橡胶树热研7-33-97第4,12,17和18号染色体文库的构建及序列分析》文中提出橡胶树是天然橡胶的主要来源。巴西橡胶树(Heveabrasiliensis)是目前国内外产生胶乳的重要物种。对巴西橡胶树进行深入的分子细胞学研究在橡胶树的育种上具有重要意义。近年来,研究者们先后在2013、2016和2017年采用高通量测序技术完成了 RRIM600、热研7-33-97、BPM24等巴西橡胶树品种的全基因组测序,但拼接水平仅达到scaffold水平。其遗传图谱、连锁群等信息并没有与染色体进行对应,功能基因在染色体组上位置和连锁关系尚未完全确定。目前的研究结果直接应用于橡胶树育种的难度较大,本研究构建了巴西橡胶树单染色体文库,可在一定程度上解决此问题。本课题组成员在国内从2013年率先开启了巴西橡胶树单染色体文库的构建工作,其他有关此方面的研究尚未见报道。故本研究从其单染色体入手,运用单染色体显微分离、LA-PCR法扩增单条染色体技术,构建了 4条巴西橡胶树单染色体文库,旨在为橡胶树的分子辅助育种提供理论基础。研究结果如下:(1)本研究采用微细玻璃针法成功地从巴西橡胶树热研7-33-97多个中期分裂相细胞中分离出31条单染色体。挑选出其中4条,用LA-PCR法对单染色体进行两轮体外扩增,通过Dot-blot杂交证实扩增产物来自巴西橡胶树基因组;将此4条染色体LA-PCR二轮扩增产物用DIG或BIO标记成探针,经荧光原位杂交(FISH)验证结合核型分析确定出4条染色体分别来自于热研7-33-97的第4、12、17和18号染色体。并成功构建了其微克隆文库,依次获得了 2.11×105、2.75×105、2.77×105、1.32×105个克隆子,其插入片段范围分别为250~1100bp、250~1200bp、300~1400bp,300~1100 bp,平均插入片段分别约为450 bp、500 bp、500 bp、550 bp。四条染色体文库的覆盖率依次约为1.1倍、1.9倍、2.4倍、1.4倍,空载率分别为0%、0%、1%、1%。(2)在热研7-33-97的第4、12、17、18号染色体文库中分别随机取100个左右阳性克隆子进行了测序,测序后分别得到100、100、101、99条序列,去除重复序列后依次有87、83、91、87条。将这些序列进行BLAST在线同源比对,与巴西橡胶树RRIM600全基因组数据库同源性大于90%的各为13、11、20、11条;与巴西橡胶树热研7-33-97全基因组数据库同源性大于90%的各为17、15、23、13条;与橡胶树EST文库同源性大于90%的分别为18、19、19、14条。EST注释的功能多数与橡胶树抗冻性、胶乳合成、耐割性、死皮病等功能相关,也有参与氨基酸前体和LCR69前体、defensin蛋白质前体的合成。(3)对四个染色体文库中与橡胶树的全基因组数据库和EST数据库高同源的序列共27条序列进行了 Blast2GO软件分析。第4号染色体构建的文库中的8条序列共得到了 9个术语注释结果:5个有关分子途径(P),3个有关细胞组件(C),1个有关分子功能(F);第12号染色体构建的文库中的7条序列中共得到9个GO术语注释结果4个有关分子途径(P), 3个有关细胞组件(C),2个有关分子功能(F);第17号染色体构建的文库6条序列共得到了 8个GO术语注释结果,3个有关分子途径(P),4个有关细胞组件(C), 1个有关分子功能(F);第18号染色体构建的文库中2条序列获得了 2个GO术语注释结果,1个有关分子途径(P),1个有关细胞组件(C),未获得有关分子功能方面的注释。这些获得注释的序列在生物学途径中参与细胞增殖、负调控的生物过程、细胞调控的过程、生物合成、N代谢等过程;在分子功能方面,有些序列影响到了转化酶的活性;在细胞组件方面,这些序列主要是参与细胞器组成、细胞固有成分组成等。第4号、12号、17号染色体文库中L-4Chr-25、L-12Chr-59、L-17Chr-4均获得了同一个酶注释:谷氨酰胺腺苷转移酶(EC 2.7.7.49),进行KEGG代谢途径分析,未获得代谢途径。

二、果蝇唾腺染色体观察及制片技术改进(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、果蝇唾腺染色体观察及制片技术改进(论文提纲范文)

(1)染色体的几种染色方法比较(论文提纲范文)

一、醋酸洋红
    (一)配制方法
    (二)优点
    (三)缺点及改进方法
二、龙胆紫溶液
    (一)配制方法
    (二)优点
    (三)缺点及改进方法
三、改良苯酚品红溶液
    (一)配制方法
    (二)优点
    (三)缺点及改进方法
四、小结

(2)农学类“遗传学实验”课程的改革与实践(论文提纲范文)

一、我校农学类“遗传学实验”课程的基本情况
二、我校农学类“遗传学实验”课程存在的问题
    (一)实验内容设置不科学
    (二)评分方法不合理
三、我校农学类“遗传学实验”改革与总结
    (一)遗传学小实验的改革
    (二)遗传学综合大实验的改革
四、结束语

(3)模式生物在遗传学实验教学中的应用——以果蝇为例(论文提纲范文)

1 果蝇的主要特征
2 果蝇遗传基础性实验
3 果蝇遗传综合性实验
4 果蝇遗传开放性实验
5 结语

(4)人参不同材料染色体制片技术优化(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 试验材料
    1.2 试验方法
        1.2.1 取材
        1.2.2 预处理
        1.2.3 解离
        1.2.4 染色
        1.2.5 制片
2 结果与分析
    2.1 取材时间
    2.2 预处理时间
    2.3 解离时间
    2.4 染色方法
    2.5 制片方法
3 讨论

(5)高校《遗传学实验》中果蝇实验综述(论文提纲范文)

1 果蝇在遗传学实验教学中的应用及改进
2 果蝇培养基及培养条件优化
3 实验果蝇培养的关键问题

(6)巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库构建及其序列分析(论文提纲范文)

摘要
Abstract
1 引言
    1.1 橡胶树的研究概况
        1.1.1 橡胶树蛋白组学的研究进展
        1.1.2 橡胶树抗寒性的研究进展
        1.1.3 分子标记技术在橡胶树中的研究
    1.2 染色体显微分离及体外扩增
        1.2.1 染色体显微分离定义
        1.2.2 染色体显微分离
        1.2.3 植物染色体体外扩增方法
    1.3 单染色体的鉴定
        1.3.1 Southern杂交鉴定
        1.3.2 FISH杂交鉴定
        1.3.3 核型分析
    1.4 单染色体文库的构建与文库的应用进展
        1.4.1 单染色体文库的构建
        1.4.2 单染色体文库的鉴定
        1.4.3 热带作物单染色体文库构建研究进展
        1.4.4 橡胶树单染色体文库构建研究进展
    1.5 序列分析及基因功能注释
        1.5.1 序列比对
        1.5.2 基因功能注释
        1.5.3 Blast2GO
        1.5.4 Blast2GO的应用
    1.6 本研究的目的意义及技术路线
        1.6.1 研究的目的意义
        1.6.2 本研究的技术路线
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验试剂
        2.1.3 试验的主要仪器
    2.2 试验方法
        2.2.1 染色体标本的制备
        2.2.2 染色体的显微分离
        2.2.3 单染色体的体外扩增
        2.2.4 琼脂糖凝胶电泳检测
        2.2.5 巴西橡胶树基因组DNA的提取与检测
        2.2.6 Southern blot验证
        2.2.7 FISH验证
        2.2.8 单染色体微克隆文库的构建
3 结果与分析
    3.1 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体显微分离
    3.2 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体DNA体外扩增及检测
    3.3 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体扩增产物的鉴定
        3.3.1 热研7-33-97基因组DNA检测及酶切检测
        3.3.2 热研7-33-97五条单染色体扩增产物的Southern杂交验证
        3.3.3 热研7-33-97单染色体扩增产物的FISH杂交验证
    3.4 巴西橡胶树热研7-33-97的第5、6、11、13和14号染色体文库的构建与初步分析
        3.4.1 巴西橡胶树热研7-33-97的第5、6、11、13和14号染色体文库的构建
        3.4.2 阳性克隆子插入片段大小检测
        3.4.3 阳性克隆子测序后经Blast分析及序列注释
        3.4.4 巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库序列Blast2GO软件分析
4 讨论
    4.1 巴西橡胶树染色体标本制备方法的选择
    4.2 目标单染色体分离及有关污染的防控
    4.3 巴西橡胶树单染色体体外扩增的方法
    4.4 巴西橡胶树单染色体文库的构建及文库质量鉴定
    4.5 单染色体文库部分克隆子BLAST2GO分析
    4.6 巴西橡胶树单染色体文库的构建及文库信息丰富
5 结论
参考文献
附录Ⅰ
附录Ⅱ
附录Ⅲ
附录Ⅳ
    试剂的配制
作者简历
致谢

(7)植物材料减数分裂染色体标本的快速制作(论文提纲范文)

1 材料与方法
    1.1 试验材料
    1.2 试验试剂
    1.3 研究方法
        1.3.1 材料选取与处理方法
        1.3.2 花药染色与制片方法
        1.3.3 脱片与干燥封片方法
2 结果与分析
    2.1 小麦花药材料标本制作
    2.2 黑麦花药材料标本制作
3 讨论
    3.1 染色与揭片技术
    3.2 植物材料在本科学生实验中的应用

(8)改革遗传学实验教学,提高人才培养质量(论文提纲范文)

1 树立正确实验教学理念, 促进实验教学改革
2 合理安排实验教学内容, 提高学生综合素质
    2.1 精选基础性、验证性实验的内容, 巩固理论课教学质量
    2.2 增加综合性大实验, 提高学生动手能力
    2.3增设自主设计实验, 培养学生科研创新思维
3 优化教学方法, 提高教学质量
    3.1 变被动为主动, 充分发挥学生的主动性
    3.2 因材施教, 充分利用现代教育技术
    3.3 改革实验教学模式, 培养学生的创新能力
    3.4 完善考核制度, 客观评价学生的综合素质
4 结束语

(9)巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库的构建及序列分析(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
1 引言
    1.1 巴西橡胶树的研究概况
        1.1.1 巴西橡胶树种质资源概况
        1.1.2 巴西橡胶树抗病性和抗寒性研究进展
        1.1.3 分子标记技术在橡胶树研究中的进展
        1.1.4 巴西橡胶树基因组测序进展
    1.2 染色体显微分离和微克隆技术
        1.2.1 染色体显微分离和微克隆技术定义
        1.2.2 染色体显微分离方法
        1.2.3 植物染色体体外扩增方法
    1.3 染色体的鉴定
        1.3.1 Dot-blot杂交鉴定
        1.3.2 Southen blot杂交鉴定
        1.3.3 FISH杂交鉴定
        1.3.4 核型分析鉴定
    1.4 染色体文库的构建与鉴定
        1.4.1 染色体文库的构建方法
        1.4.2 文库的鉴定
        1.4.3 质粒文库在植物染色体文库构建中的应用进展
        1.4.4 热带植物单染色体文库构建研究进展
        1.4.5 橡胶树单染色体文库构建研究进展
    1.5 序列分析及基因功能注释
        1.5.1 序列比对
        1.5.2 基因功能注释
        1.5.3 基因本体论与Blast2GO
    1.6 本研究的目的意义及技术路线
        1.6.1 研究的目的意义
        1.6.2 本研究的技术路线
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验试剂
        2.1.3 试验的主要仪器
    2.2 试验方法
        2.2.1 染色体标本的制备
        2.2.2 染色体的显微分离
        2.2.3 单染色体的体外扩增
        2.2.4 琼脂糖凝胶电泳检测
        2.2.5 巴西橡胶树基因组DNA的提取与检测
        2.2.6 Dot-blot验证
        2.2.7 Southern blot验证
        2.2.8 FISH验证
        2.2.9 单染色体微克隆文库的构建
3 结果与分析
    3.1 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体显微分离过程
    3.2 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体DNA体外扩增及检测
    3.3 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体扩增产物的鉴定
        3.3.1 热研7-33-97基因组DNA检测及酶切检测
        3.3.2 热研7-33-97单染色体扩增产物的Dot-blot杂交分析
        3.3.3 热研7-33-97五条单染色体扩增产物的Southern blot杂交验证
        3.3.4 热研7-33-97单染色体扩增产物的FISH杂交验证
    3.4 巴西橡胶树热研7-33-97的第3、7、13、15及16号染色体文库的构建与初步分析
        3.4.1 巴西橡胶树单染色体文库构建体系的优化
        3.4.2 巴西橡胶树热研7-33-97的第3、7、13、15及16号染色体文库的构建
        3.4.3 阳性克隆子插入片段大小检测
        3.4.4 阳性克隆子测序后blast分析及序列注释
        3.4.5 巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库序列Blast2GO软件分析
4 讨论
    4.1 巴西橡胶树染色体标本制备方法的选择
    4.2 目标单染色体分离及有关污染的防控
    4.3 巴西橡胶树单染色体体外扩增的方法及扩增产物的鉴定
        4.3.1 单染色体体外扩增方法的选择
        4.3.2 单染色体扩增产物的鉴定
    4.4 巴西橡胶树单染色体文库的构建及文库质量鉴定
    4.5 单染色体文库部分克隆子BLAST2GO分析
5 结论
参考文献
附录Ⅰ
附录Ⅱ
附录Ⅲ
附录Ⅳ
本研究资金来源
硕士期间发表论文
致谢

(10)巴西橡胶树热研7-33-97第4,12,17和18号染色体文库的构建及序列分析(论文提纲范文)

摘要
Abstract
1 引言
    1.1 巴西橡胶树研究概况
        1.1.1 巴西橡胶树种质资源现状
        1.1.2 巴西橡胶树重要栽培品种热研7-33-97品种概况
        1.1.3 巴西橡胶树细胞学研究进展
        1.1.4 巴西橡胶树分子生物学研究进展
    1.2 染色体微分离和微克隆技术的研究进展
        1.2.1 染色体微分离、微克隆技术的发展概况
        1.2.2 植物单染色体微分离及微克隆技术的方法
        1.2.3 单染色体微分离及微克隆技术在植物中的应用
        1.2.4 单染色体微克隆文库构建的研究进展
    1.3 本研究的目的意义及技术路线
        1.3.1 研究的目的意义
        1.3.2 技术路线
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 供试材料
        2.1.2 试验试剂
        2.1.3 试验的主要仪器
    2.2 试验方法
        2.2.1 基因组DNA的提取
        2.2.2 染色体标本的制备
        2.2.3 单染色体的显微分离
        2.2.4 单染色体的体外扩增
        2.2.5 单染色体扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测
        2.2.6 单染色体扩增产物的Dot-blot杂交验证
        2.2.7 单染色体扩增产物的FISH检测及分析
        2.2.8 单染色体微克隆文库的构建
3 结果与分析
    3.1 巴西橡胶树热研7-33-97中期细胞染色体标本的制备
    3.2 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体的显微分离
    3.3 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体的LA-PCR体外扩增结果
    3.4 巴西橡胶树热研7-33-97单染色体LA-PCR扩增产物的鉴定
        3.4.1 基因组DNA提取和酶切
        3.4.2 Dot-blot探针效率评估结果
        3.4.3 单染色体第二轮LA-PCR扩增产物的Dot-blot杂交验证
        3.4.4 单染色体第二轮LA-PCR扩增产物的FISH杂交检测
    3.5 巴西橡胶树热研7-33-97第4、12、17及18号染色体文库的构建与初步分析
        3.5.1 第4、12、17及18号染色体文库的构建
        3.5.2 插入片段的PCR检测结果
        3.5.3 单染色体文库部分阳性克隆子序列的Blast分析及注释
        3.5.4 第4、12、17和18号染色体文库序列的Blast2GO分析
4 讨论
    4.1 关于制备染色体标本的讨论
    4.2 关于染色体微分离和微克隆问题的讨论
        4.2.1 关于染色体微分离的问题讨论
        4.2.2 关于染色体微克隆的问题讨论
        4.2.3 关于外源污染的防控问题讨论
    4.3 关于扩增产物的验证问题的讨论
        4.3.1 关于Dot-blot验证的讨论
        4.3.2 关于FISH验证中关键步骤的讨论
    4.4 关于文库质量的讨论
    4.5 关于部分测序序列的Blast2GO分析讨论
5 结论
参考文献
附录Ⅰ
附录Ⅱ
附录Ⅲ
项目资金来源与论文发表情况
致谢

四、果蝇唾腺染色体观察及制片技术改进(论文参考文献)

  • [1]染色体的几种染色方法比较[J]. 李霞,黄胜琴. 教育与装备研究, 2020(06)
  • [2]农学类“遗传学实验”课程的改革与实践[J]. 张昊,刘雄伦,罗红兵,李林,刘登望. 教育教学论坛, 2020(20)
  • [3]模式生物在遗传学实验教学中的应用——以果蝇为例[J]. 王聪,郭蓓,刘玉芬,吕鹤书,黄煌,黄体冉. 科教文汇(上旬刊), 2018(12)
  • [4]人参不同材料染色体制片技术优化[J]. 梁韶,雷秀娟,宋娟,侯志芳,姚丽娜,郑惠元,王英平. 吉林农业大学学报, 2018(05)
  • [5]高校《遗传学实验》中果蝇实验综述[J]. 赵丰兰,段永波,薛涛,朱艳芳,盛玮. 农业灾害研究, 2018(03)
  • [6]巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库构建及其序列分析[D]. 王波. 海南大学, 2018(08)
  • [7]植物材料减数分裂染色体标本的快速制作[J]. 丁海燕. 植物研究, 2017(05)
  • [8]改革遗传学实验教学,提高人才培养质量[J]. 黄体冉,郭蓓,刘玉芬,吕鹤书,孙祎振,申晓鸿. 实验科学与技术, 2017(03)
  • [9]巴西橡胶树热研7-33-97五条染色体文库的构建及序列分析[D]. 马梦晨. 海南大学, 2017(07)
  • [10]巴西橡胶树热研7-33-97第4,12,17和18号染色体文库的构建及序列分析[D]. 马梦茹. 海南大学, 2017(07)

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果蝇唾液腺染色体观察及生产工艺改进
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