一、重组微生物-BCG疫苗及其运用前景（论文文献综述）
张云[1]（2014）在《牛病毒性腹泻—黏膜病病毒E0基因和E0-E2融合基因重组卡介苗的构建及免疫原性分析》文中指出牛病毒性腹泻-黏膜病（Bovine viral diarrhea-mucosal disease，BVD/MD）是由牛病毒性腹泻-黏膜病病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）引起的一种可以感染牛、羊、鹿、猪等多种动物的传染病，是长期危害动物养殖业健康发展的严重疾病之一，被国际兽疫局（Office International des Epi-zooties，OIE）定为B类传染病。鉴于当前BVD的流行态势和防治现状，安全有效的BVDV疫苗亟待研发。E0、E2蛋白是BVDV的两个主要保护性抗原，均可用于基因工程疫苗的研究。近年来，国内外学者利用不同的基因、表达系统和疫苗形式，在BVDV新型疫苗的研发上做了很多有益的工作。本研究选择E0、E2基因构建重组卡介苗，开展BVD疫苗的免疫原性研究。本试验首先对C24V标准株的E0基因进行截短和密码子优化，用中心模板法人工合成优化后的E0截短基因，运用重叠延伸剪接术将其与changchun184特异株的E2截短基因进行融合后分别亚克隆至表达载体pMV261和pMV361中构建重组表达质粒；然后将构建的重组表达质粒分别电转化入卡介苗（Bacillus Calmette-Guerin Vaccine，BCG）中，经抗酸染色和菌液PCR鉴定后，在45℃条件下热诱导各重组卡介苗（recombinant BCG，rBCG）总蛋白的表达，并进行SDS-PAGE分析和Western blotting检测；最后将构建的各rBCG和本实验室已构建的rBCG-pMV361-E2免疫小鼠，运用间接ELISA法检测其血清中的特异性抗体水平，用CCK-8法分析其脾脏中淋巴细胞增殖情况，用生物素双抗体夹心ELISA法分别测定其血清中IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12水平，用流式细胞术检测其脾脏中CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群含量等指标，对各rBCG的免疫效力进行综合评价。结果成功扩增出了mE0基因和E0-E2融合基因，构建了pMV261-mE0、pMV261-E2、pMV261-E0-E2、pMV361-mE0和pMV361-E0-E2重组表达质粒；在卡介苗中成功表达了大小为18kDa、43.9kDa和66.5kDa的目的蛋白，且具有反应原性；各rBCG免疫小鼠后均能在不同程度上刺激小鼠产生抗BVDV的抗体，经抗原刺激后小鼠淋巴细胞数量均有所增加，免疫期间IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的含量变化表明各rBCG均能够刺激Th1和Th2型反应，且较倾向于Th2型反应，三免后CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的含量均有所变化，表明构建的rBCG均可以在一定程度上诱导小鼠机体产生体液和细胞免疫应答反应，且较侧重于体液免疫应答反应。总体而言，rBCG-pMV261-E0-E2的免疫效果较强于其余各组。本研究证实了E0-E2融合蛋白能提高单一抗原的免疫特性，可作为研发BVDV新型疫苗的候选。成功构建rBCG-pMV261-E0-E2菌株，为研制可同时预防牛病毒性腹泻-黏膜病和结核病的二价基因工程疫苗奠定基础。
李青山[2]（2004）在《基因重组卡介苗在疾病预防和治疗中的应用》文中进行了进一步梳理
王福祥,孙永涛[3]（2004）在《重组微生物BCG疫苗研究》文中指出重组BCG疫苗是一种新型微生物疫苗,由于卡介苗（BCG）具有广泛的安全性和免疫佐剂作用,因此,以BCG为载体的重组疫苗研究日益受到科学家的重视。本文就近年来病毒、细菌和寄生虫等微生物的重组BCG疫苗的研究进展进行了综述。
李文桂[4]（2002）在《重组微生物-BCG疫苗及其运用前景》文中研究指明重组BCG疫苗是一种新型微生物疫苗。本文综述了细菌、病毒和螺旋体等微生物的重组BCG疫苗及其运用前景。
二、重组微生物-BCG疫苗及其运用前景（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、重组微生物-BCG疫苗及其运用前景（论文提纲范文）
（1）牛病毒性腹泻—黏膜病病毒E0基因和E0-E2融合基因重组卡介苗的构建及免疫原性分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒概述 |
| 1.1 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒病原学 |
| 1.2 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒流行病学 |
| 1.3 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒感染症状及剖检变化 |
| 1.4 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒的诊断 |
| 1.5 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒的防制 |
| 1.6 牛病毒性腹泻-黏膜病病毒 E_0、E_2基因研究进展 |
| 第二章 重组卡介苗研究进展 |
| 2.1 重组卡介苗的载体研究进展 |
| 2.2 重组卡介苗的应用现状 |
| 2.3 重组卡介苗存在的问题和展望 |
| 第三章 密码子优化技术研究进展 |
| 3.1 密码子优化技术的原理 |
| 3.2 密码子优化技术的应用 |
| 第四章 研究的目的和意义 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第一章 BVDV E_0、E_2和 E_0-E_2融合基因重组表达质粒的构建 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 BVDV E_0、E_2和 E_0-E_2融合基因在卡介苗中的表达 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 BVDV E_0、E_2和 E_0-E_2融合基因 RBCG 的免疫原性分析 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（2）基因重组卡介苗在疾病预防和治疗中的应用（论文提纲范文）
| 1 基础研究 |
| 2 基因重组 BCG 用于疾病预防和治疗的优点 |
| 3 基因重组 BCG 疫苗的种类 |
| 4 基因重组 BCG 的免疫途径和免疫效果 |
| 5 展望 |
（3）重组微生物BCG疫苗研究（论文提纲范文）
| 1. 人或猴免疫缺陷病毒(HIV或SIV)重组BCG疫苗 |
| 1.1 SIV重组BCG疫苗 |
| 1.2 HIV重组BCG疫苗 |
| 2. 细菌重组BCG疫苗 |
| 2.1 结核杆菌重组BCG疫苗 |
| 2.2 肺炎球菌重组BCG疫苗 |
| 2.3 百日咳杆菌、破伤风梭菌和白喉重组BCG疫苗 |
| 3. 寄生虫重组B3CG疫苗 |
| 3.1 血吸虫重组BCG疫苗 |
| 3.2 疟原虫重组BCG疫苗 |
| 3.3 利什曼原虫重组BCG疫苗 |
| 4. 结语 |
四、重组微生物-BCG疫苗及其运用前景（论文参考文献）
- [1]牛病毒性腹泻—黏膜病病毒E0基因和E0-E2融合基因重组卡介苗的构建及免疫原性分析[D]. 张云. 吉林农业大学, 2014(01)
- [2]基因重组卡介苗在疾病预防和治疗中的应用[J]. 李青山. 中国预防医学杂志, 2004(04)
- [3]重组微生物BCG疫苗研究[J]. 王福祥,孙永涛. 国外医学.流行病学传染病学分册, 2004(01)
- [4]重组微生物-BCG疫苗及其运用前景[J]. 李文桂. 免疫学杂志, 2002(S1)