一、猪抗鸡IBD血清的研制与应用（论文文献综述）
王占伟,邵国青,刘茂军,冯志新,王丽,高云飞,周开华,尹秀凤[1]（2012）在《鸡传染性法氏囊病病毒抗血清的研制》文中提出【目的】确保鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）抗血清高效力的同时又彻底解决安全性和免疫应激问题,旨在研制出一种高效、安全的鸡传染性法氏囊病（IBD）预防和治疗制品。【方法】以SPF鸡为免疫动物,按照《兽用生物制品试验研究指导技术原则》和《中华人民共和国兽药典》（2010年版）的要求研制IBDV抗血清,经脱毒处理后,对其半成品及成品进行检验。【结果】以IBDVNJ株免疫4周龄SPF鸡获得的抗血清,未脱毒处理前的血清效价≥1∶64,脱毒处理后的成品效价≥1∶32。半成品和成品的检验结果显示,经过脱毒处理后的IBDV抗血清制品呈橙黄色,无菌、无支原体、无外源病毒,对小白鼠、豚鼠和SPF鸡均安全,甲醛和硫柳汞残留量也未超过规定标准。【结论】研制的IBDV抗血清制品符合《中华人民共和国兽药典》的要求,完全可用于IBD的紧急预防和早期治疗,今后可作为一个正规产品上市以满足市场需要。
张丹俊,任顶宏,黄依平[2]（1993）在《猪抗鸡IBD高免血清的研制》文中认为本文通过猪源抗鸡IBD高免血清的研制及其无菌、安全、效力试验和临床应用结果,证明所研制的猪抗鸡IBD高免血清是安全有效的,预防和治愈率均达95%以上;避免了鸡源抗IBD血清存在散毒和传播其他鸡病的危险;具有制作简单、劳动量小、一次性采血量大、价格低廉及防治效果好等优点。值得推广使用。
孙银华,丁忠留,严勋,伍仁福[3]（1997）在《猪抗鸡IBD高免血清的研制和应用》文中研究说明 目前对IBD发病鸡群的治疗主要是注射鸡源高免血清或高免卵黄液,但来源于鸡的高免血清或卵黄抗体有交叉感染和垂直传递其它病原体的隐患。为克服这一弊端,我们在用异种动物山羊研制抗IBD高免血清成功的基础上,改用取材方便、放血量较大的肥猪作为试验材料,通过一系列的探索试验,制成了高效价的猪抗鸡IBD血清,降低了成本,治疗效果好,深受用户好评。
彭德旺,葛兆宏,陆广富,扶国才,黄秀萍[4]（1995）在《猪抗鸡IBD血清的研制与应用》文中研究指明将８头健康猪进行ＩＢＤ强化免疫接种，常规采集免疫猪血清，用琼扩试验测定血清ＩＢＤ抗体效价为１：６４～１：１２８。抗血清对自然发生ＩＢＤ的病鸡，皮下注射０．５ｍｌ／只，其总存活率达９５～１００％，但发病后期的病鸡治疗存活率一般为７０％左右。
张进良[5]（2010）在《鸡的主要病毒性疫病抗体快速检测方法的建立和应用研究》文中研究表明禽流感（AI）、新城疫（ND）、传染性支气管炎（IB）、传染性法氏囊（IBD）和鸡毒霉形体（MG）感染是目前危害我国养鸡业的几种主要的呼吸道传染病,可导致鸡群不同程度的死亡和生产性能的下降,给我国养禽业造成极大的经济损失。上述疫病虽均有疫苗进行免疫预防,但由于我国地域广阔,养殖模式多样,各种疫病特别是呼吸道疫病仍时有发生,因此,发病后的快速诊断或免疫后的血清抗体效价监测已经成为各地养禽场和诊断室的常规检测项目。目前常用的检测方法有血凝和血凝抑制试验、琼脂扩散试验以及酶联免疫吸附试验等,这些常规方法有的耗时长,有的需要特殊的仪器或技术人员,因而在基层应用受到一定限制。胶体金免疫层析方法是以条状纤维层析材料为固相载体,通过毛细管作用原理,以胶体金为示踪物来显示结果的一种新型的检测方法。这种方法具有操作简单、快捷,分析结果清楚、易于判断,且不需要任何仪器、成本低廉等优点,非常适用于现场检测及自动化检测分析。因此,在医学快速检测领域得到了迅猛发展,目前已逐渐应用于动物医学领域的快速检测方面。本研究针对目前鸡的几种主要病毒性疫病抗体检测方法中存在的问题,运用胶体金免疫层析技术,采用间接法原理,建立了五种鸡的主要病毒性疾病抗体的快速检测方法,一种抗体三联检的检测方法和一种抗体效价测定的检测方法。取得了如下研究成果。1. AIV-HA1、NDV-HN、IBV-N、IBDV-VP2和MG-VlhA1.2重组蛋白的表达纯化用带有GST标签的原核表达载体,实现了AIV-HA1、NDV-HN、IBV-N、IBDV-VP2和MG-VlhA1.2重组蛋白的高效表达,通过亲核层析的方法获得了适合于制备试纸条的重组蛋白,并用Western blot对纯化的蛋白进行了分析,结果证实,这5种融合表达的蛋白均具有较好的免疫活性。2.抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的制备复苏抗鸡IgG Fc段单克隆抗体生产细胞株BDRPDP细胞,经小鼠腹腔接种获得的抗体效价较高的腹水,用辛酸硫酸铵法纯化腹水,并用透析法对纯化的单克隆抗体进行脱盐,获得了高活性、高纯度的单克隆抗体。3.胶体金及胶体金单抗复合物的制备成功确立了柠檬酸三钠还原法制备20 nm胶体金的条件；并利用该胶体金,对抗鸡IgG Fc段单克隆抗体进行了胶体金标记条件的摸索,成功确立了胶体金标记单克隆抗体的条件：每毫升胶体金加入7μL 0.1 mol/L K2CO3时pH最佳,每毫升胶体金加入12μg单克隆抗体为最适蛋白用量,并在该条件下制备了胶体金单抗复合物。4. AIV、NDV、IBV、IBDV和MG血清抗体快速检测试纸条的研制以胶体金标记抗鸡IgG Fc段单克隆抗体作为金标抗体,固定在检测线上的AIV-HA1或NDV-HN或IBV-N或IBDV-VP2或MG-VlhA1.2重组蛋白作为捕获抗原,采用间接法,分别成功地建立了AIV HA1蛋白血清抗体快速检测试纸条、NDV血清抗体快速检测试纸条、IBV血清抗体快速检测试纸条、IBDV血清抗体快速检测试纸条和MG血清抗体快速检测试纸条。用制成的这5种单一血清抗体快速检测试纸条对AIV H5亚型阳性血清、AIV H9亚型阳性血清、NDV阳性血清、IBV阳性血清、IBDV阳性血清、IBDV阳性血清和MG阳性血清分别进行测试。每种试纸条均只与相应的阳性血清发生反应,与其他所有阳性血清均呈阴性反应。在此基础上,本研究又以抗鸡IgG Fc段单克隆抗体作为示踪物,采用三条检测线分别包被IBDV-VP2、IBV-N和AIV-HA1重组蛋白作为捕获抗原,建立了IBDV、IBV和AIV三联血清抗体快速检测试纸条。实验结果证明,本方法特异性强,灵敏度高,且操作简便、结果判定直观,可在一份样品中同时对IBDV、IBV和AIV三种抗体进行快速检测。5.IBV抗体效价快速检测试纸条的研制本研究以胶体金标记抗鸡IgG Fc段单克隆抗体作为示踪物,用固定在三条检测线上的不同浓度的IBV-N蛋白作为捕获抗原,采用间接法,成功地建立了IBV抗体效价快速检测试纸条。用制成的试纸条检测AIV H5亚型阳性血清、AIV H9亚型阳性血清、NDV阳性血清、IBV阳性血清、IBDV阳性血清、IBDV阳性血清和MG阳性血清分别进行测试,未出现与交叉反应。对不同效价的IBV抗体进行测试,确定为血清效价大于8log2出现三条检测线,介于8log2和5log2之间的出现两条检测线,介于5log2和2log2之间的出现一条检测线,小于2log2不出现检测线。实验结果表明,本方法特异性强,且操作简便、结果判定直观,可以用于IBV抗体效价测定。
张丹俊,赵鸿斌[6]（1996）在《猪抗鸡ND＋IBD二联高免血清的研制》文中进行了进一步梳理猪抗鸡ＮＤ＋ＩＢＤ二联高免血清的研制张丹俊（安徽省农科院畜牧兽医研究所２３００３１）赵鸿斌（安徽省安庆市兴农家禽研究所）鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）和新城疫（ＮＤ）都是由病毒引起的烈性传染病。特别是ＩＢＤ近年来在全国各地流行甚广，常常并发或继发ＮＤ，给...
张文通[7]（2008）在《鸡传染性法氏囊病抗体快速检测试纸条的研制及初步应用》文中研究表明鸡传染性法氏囊病（Infectious Bursal Disease,IBD）是由传染性法氏囊病病毒（Infectious Bursal Disease Virus,IBDV）引起的一种鸡的急性、高度接触性传染病,给世界各国的家禽养殖业带来了巨大损失。自IBDV发现至今,新的变异株及超强毒株的出现,使得传统疫苗已不能控制其流行,这进一步增加了该病的防制难度。开展血清抗体检测是防制该病的重要措施之一,目前IBD血清抗体检测方法主要有琼脂凝胶扩散法、微量血清中和试验法及酶联免疫吸附试验法。但这些方法由于费时或成本高等因素的制约,主要用于实验室检测,不适合基层检测。因此,研制一种适合基层兽医或养殖个体进行快速检测IBD血清抗体的方法,对防制IBD是必要的。本研究运用胶体金免疫层析技术,建立一种快速检测鸡传染性法氏囊病血清抗体的胶体金免疫层析方法,取得了如下成果:1.IBDV结构蛋白（VP2）基因的原核表达及表达蛋白的纯化和免疫活性鉴定携带IBDV-VP2基因的pKG-VP2表达质粒在大肠杆菌BL21（DE3）plys S中进行表达,并对表达条件进行优化,结果显示pKG-VP2在30℃条件下诱导6h后表达量最佳,表达物分子量约为66KDa。Western-blot证实重组蛋白具有较好的免疫学活性。经GST标签蛋白亲和层析柱纯化,我们获得高纯度的表达蛋白,浓度为1.01mg/mL,为IBDV抗体检测试纸条奠定了物质基础。2.快速检测IBD血清抗体胶体金免疫层析试纸条的研制（1）复苏和增殖抗鸡IgG Fc段杂交瘤细胞株,注射小鼠,产生腹水,通过辛酸-硫酸铵法纯化,获得了高纯度的抗鸡IgG Fc段单克隆抗体。（2）采用柠檬酸三钠还原法,成功确立了20nm胶体金的制备条件:利用制备好的胶体金,对抗鸡IgG Fc单克隆抗体的胶体金标记条件的摸索,成功确立了最适标记条件:每ml胶体金最适添加7μL 0.1mol/L K2CO3和8μg抗鸡IgG Fc段单克隆抗体。（3）用胶体金标记抗鸡IgG Fc段单克隆抗体作为探针,用纯化的VP2蛋白和兔抗鼠IgG分别作为检测线试剂和质控线试剂,研制了一种快速检测IBD血清抗体试纸条,并对其特异性和敏感性进行了测试。特异性结果显示,试纸条检测IBDV阳性血清时,检测线出现明显的紫红色条带,呈阳性反应;而鸡的其它疾病阳性血清如禽流感、新城疫、传染性支气管炎、鸡毒支原体、鸡滑液囊支原体和SPF鸡血清、生理盐水均显示阴性反应。用琼脂凝胶扩散试验检测临床血清样品获得20份阳性样品,然后分别用试纸条和琼脂凝胶扩散试验检测这20份血清样品的效价,结果显示试纸条较琼脂凝胶扩散试验敏感8倍。3.快速检测IBD血清抗体胶体金免疫层析试纸条的临床初步应用在建立的快速检测方法的基础上,我们研制出鸡传染性法氏囊病血清抗体快速检测试剂盒。用该试剂盒检测临床采集的216份血清样品,阳性检出率为60.19%,与琼脂凝胶扩散法符合率为68.52%。
王爱富[8]（2017）在《抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白卵黄抗体制剂的制备》文中认为猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea,PED）是由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的一种高度接触性急性肠道传染病,发病急、传播速度快,仔猪致死率高,给我国养猪业带来巨大的经济损失。由于目前流行的PEDV毒株与现有疫苗毒株差异较大,导致现有的疫苗免疫保护率不高,因此,开发抗PEDV疫苗及生物制剂具有重大的现实意义。本研究根据Genbank上PEDV S基因序列（登录号JN601050.1）设计一对特异性引物,应用RT-PCR技术从患PED仔猪肠组织中扩增出约520 bp的基因片段,构建了重组表达质粒pET-32a-S1,转化至感受态细胞BL21（DE3）中,经0.4mmoL/L IPTG诱导表达6 h后成功表达出约33 kDa大小的可溶性重组蛋白。该重组蛋白经镍NTA琼脂糖凝胶纯化后,利用核酸蛋白仪测得浓度为3.2 mg/mL,Western Blot检测结果显示特异性良好。以稀释后的重组蛋白作为抗原包被酶标板,以鸡血清为待检样本、酶标兔抗鸡IgY为第二抗体,建立了一种特异性和敏感性高、重复性和稳定性好的间接ELISA检测鸡血清、卵黄抗PEDV抗体的方法。同时将50只初产蛋鸡分为组织灭活苗组、病毒灭活苗组、S蛋白疫苗组、综合免疫组以及对照组五组进行免疫试验,并利用自己建立的间接ELISA方法检测血清中特异性抗体效价。结果显示:4个免疫组在三次疫苗免疫后,均能产生高水平抗体,而S蛋白免疫组的蛋鸡血清特异性抗体效价均高于其他组。为筛选出卵黄抗体粉和卵黄抗体冻干粉最佳制作工艺,在第三次免疫7天后收集S蛋白免疫组的高免蛋制成卵黄抗体,采用喷雾干燥技术和冷冻干燥技术分别研制卵黄抗体粉和卵黄抗体冻干粉,并利用间接ELISA方法检测其抗体效价。结果显示,在加入保护剂后,通过控制一定的喷粉温度、优化喷雾干燥条件制粉,卵黄抗体在制备过程中出现平均1.71个滴度的损耗,这一工艺适合批量生产。初步应用高效价卵黄抗体对规模化猪场中患病仔猪进行治疗试验,对照组死亡率为82.50%;卵黄抗体粉组死亡率为25.33%;卵黄抗体液组死亡率为21.74%;卵黄抗体冻干粉组死亡率为24.07%。说明卵黄抗体制剂具有一定的临床有效性。
孙银华,丁忠留,严勋,伍仁福[9]（1997）在《猪抗鸡IBD高免血浆的研制和应用》文中研究表明研究结果表明，应用典型传染性法氏囊病（IBD）病死鸡的法氏囊，经适当处理后，作为猪免疫抗原，肌肉或皮下注射肥猪，经两次以上免疫后，被免疫猪血浆的IBD琼扩抗体价达1：256以上。1994年以来，用1：32滴度的该血浆稀释液120万毫升，在疫区治疗IBD病鸡250余万羽，治愈率在95％以上。猪抗鸡IBD高免血浆来源广、效价高、保存期长、成本低、安全性好、无副作用、生产工艺简便、使用方便、无传播同源传染病的危险，综合利用，社会经济效益显着，是一种理想的、极有前途的IBD有效治疗剂。
崔言顺[10]（2005）在《传染性法氏囊病病毒野毒株的致弱与分子机理研究》文中指出传染性法氏囊病（Infectious bursal disease,IBD）是由传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus,IBDV）引起的鸡和火鸡的一种急性、高度接触性传染病。该病主要侵害3～6周龄雏鸡和青年鸡,除直接引起鸡死亡和生产性能下降外,还可导致感染鸡免疫抑制。IBDV属于双RNA病毒科（Birnaviridae）、禽双RNA病毒属（Avibirnavirus）。IBDV是一种小的、无囊膜病毒,为双节段、双链RNA基因组,二十面体对称结构。基因组分为A节段和B节段,A节段编码VP2、VP3、VP4、VP5 4种蛋白,B节段编码VP1。VP2、VP3是病毒的主要结构蛋白,共同构成病毒的主要保护性抗原。其中VP2携带宿主保护性抗原决定簇,可以诱导产生保护性中和抗体,并且具有血清学特异性,其核苷酸和氨基酸的序列多变性与病毒特性密切相关,因此成为研究IBDV抗原性和致病性的主要目标。自20 世纪80 年代中后期,世界上先后出现了IBDV 变异株、超强毒株IBDV（very virulent infectious bursal disease virus,vvIBDV）。目前,IBDV 标准毒株、超强毒株、变异株在我国并存,给免疫防制带来了极大的困难。只有对IBDV 野毒株致病性和分子生物学特性进行测定,才能针对特定的发病情况使用特定的疫苗,做到有的放矢。雏鸡母源抗体的存在也是制定免疫程序时必须考虑的一个重要因素,免疫前,有必要对IBDV母源抗体的滴度进行准确的测定。已报道我国有多处养鸡场发生vvIBDV 感染。能否有效地将vvIBDV 致弱并且获得有较高免疫原性、无免疫抑制的弱毒株,是摆在IBDV 研究者面前的一个亟待解决的问题。vvIBDV 致弱的分子机理的研究,特别是对VP2 高变区的研究,将对vvIBDV 的发生、IBDV 毒力标记的确定、野毒株和疫苗株的有效鉴别以及加速野毒株的致弱进程等方面的研究起到极大的推动作用。针对近年来山东省的IBD 流行情况,本课题主要进行了以下研究: 1.对山东省暴发IBD 的现状进行了系统地分析。从山东省几个地市发生重大IBD疫情的鸡场采集病料,根据病鸡发病的流行病学和临床症状,结合病毒分离、组织病理学观察、电镜观察、琼脂免疫扩散试验、间接荧光抗体试验等结果,确定几个鸡场的疫情均是由感染IBDV 野毒引起,分离鉴定出4 个野毒株分别命名为IBDV SD0210、SD0208、SD0110 和SD0106;进一步测定不同滴度的病毒液对3～6 周龄SPF 鸡的致病性,结果表明分离的4 个野毒株都具有很高的致病性,可以称为vvIBDV;对VP2 高变区基因的序列分析表明,4 个野毒株均具有目前所认定的超强毒株的特征。这表明近几年来山东省一些鸡场严重的IBD 疫情是由vvIBDV 的出现造成的。2.对MTT 比色法用于检测病料中IBDV 在细胞培养物中的增殖情况进行了研究,并首次将MTT 比色法用于IBDV 的分离鉴定。IBDV 野毒株在CEF 细胞中初次增殖时通常无可见细胞病变。本研究用MTT 比色法检测病料在细胞培养物中是否有IBDV 增
二、猪抗鸡IBD血清的研制与应用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、猪抗鸡IBD血清的研制与应用（论文提纲范文）
（1）鸡传染性法氏囊病病毒抗血清的研制（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 标准免疫原制备 |
| 1.3 动物免疫试验 |
| 1.4 抗体检测 |
| 1.5 抗血清脱毒处理 |
| 1.6 半成品检验 |
| 1.7 成品检验 |
| 1.7.1 物理性状观察肉眼观察 |
| 1.7.2 无菌、支原体及外源病毒检验 |
| 1.7.3 效价测定 |
| 1.7.4 安全检验 |
| 1.7.5 效力检验 |
| 1.7.6 甲醛、硫柳汞含量测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 免疫原制备结果 |
| 2.2 抗血清制品效价检测结果 |
| 2.3 半成品检验结果 |
| 2.4 成品检验结果 |
| 2.4.1 物理性状及无菌、支原体、外源病毒检验结果 |
| 2.4.2 安全检验结果 |
| 2.4.3 效力检验结果 |
| 2.4.4 甲醛、硫柳汞含量测定结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
（2）猪抗鸡IBD高免血清的研制（论文提纲范文）
| 1 材料 |
| 2 方法和结果 |
| 2.1 猪抗鸡IBD高免血清的制备 |
| 2.2 成品检验 |
| 2.2.1 抗体检测。 |
| 2.2.2 无菌检验。 |
| 2.2.3 安全试验。 |
| 2.2.4 效力试验。 |
| 2.2.5 临床应用。 |
| 3 结论 |
（3）猪抗鸡IBD高免血清的研制和应用（论文提纲范文）
| 1 材料、方法和结果 |
| 1.1 免疫接种用抗原的制备 |
| 1.1.1 活毒苗 |
| 1.1.2 IBD组织灭活油佐剂疫苗 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 IBD诊断液 |
| 1.4 接种方法及血清抗体监测 |
| 1.5 高免血清的制备 |
| 1.6 高免血清的检验 |
| 1.6.1 效价测定 |
| 1.6.2 无菌检验 |
| 1.6.3 安全试验 |
| 1.7 治疗试验 |
| 1.8 高免血清保存期试验 |
| 2 小结与讨论 |
（5）鸡的主要病毒性疫病抗体快速检测方法的建立和应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词(Abbreviation) |
| 第1章 文献综述 |
| 1 禽流感的研究进展 |
| 1.1 病原 |
| 1.2 流行病学 |
| 1.2.1 宿主范围 |
| 1.2.2 禽流感的流行病学特点 |
| 1.3 AIV凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白 |
| 1.4 禽流感检测方法的研究进展 |
| 1.4.1 病原学的诊断方法 |
| 1.4.2 血清学诊断方法 |
| 1.4.3 分子生物学诊断技术 |
| 2 新城疫的研究进展 |
| 2.1 病原 |
| 2.1.1 病原的分类 |
| 2.1.2 血清型 |
| 2.2 血凝素神经氨酸酶蛋白结构与功能 |
| 2.3 新城疫的传播与危害 |
| 2.4 新城疫检测方法的研究进展 |
| 2.4.1 病毒的分离与鉴定 |
| 2.4.2 清学诊断技术 |
| 2.4.3 分子生物学诊断技术 |
| 3 鸡传染性支气管炎的研究进展 |
| 3.1 病原 |
| 3.1.1 病原的分类 |
| 3.1.2 清型 |
| 3.2 IBV的N蛋白研究 |
| 3.3 流行病学 |
| 3.4 鸡传染性支气管炎检测方法 |
| 3.4.1 病毒的分离与鉴定 |
| 3.4.2 IBV血清学检测技术 |
| 3.4.3 分子生物学检测技术 |
| 4 鸡传染性法氏囊的研究进展 |
| 4.1 病原 |
| 4.1.1 病毒学分类、形态及理化特性 |
| 4.1.2 病毒培养特性 |
| 4.1.3 病毒血清型 |
| 4.1.4 IBDV的基因组结构和编码的蛋白 |
| 4.2 流行病学 |
| 4.2.1 自然宿主与传播媒介 |
| 4.2.2 流行特点 |
| 4.3 鸡传染性法氏囊检测方法的研究进展 |
| 4.3.1 病毒分离 |
| 4.3.2 清学方法 |
| 4.3.3 分子生物学方法 |
| 5 鸡毒霉形体的研究进展 |
| 5.1 病原 |
| 5.1.1 病原及发病特点 |
| 5.1.2 MG的基因组结构和结构蛋白的研究 |
| 5.2 流行病学 |
| 5.3 鸡毒霉形体的检测方法 |
| 5.3.1 病原的分离鉴定 |
| 5.3.2 清学方法 |
| 5.3.3 分子生物学方法 |
| 6 胶体金免疫层析技术的研究进展 |
| 6.1 胶体金的特性及其制备 |
| 6.1.1 胶体金的特性 |
| 6.1.2 胶体金的制备方法 |
| 6.2 免疫胶体金的制备及其应用 |
| 6.2.1 免疫胶体金的制备原理 |
| 6.2.2 免疫胶体金的应用 |
| 6.4 胶体金免疫层析技术的原理及其优势 |
| 6.4.1 胶体金免疫层析技术的原理 |
| 6.4.2 胶体金免疫层析技术的优势 |
| 6.5 胶体金免疫层析技术的研究趋势 |
| 6.5.1 提高胶体金免疫层析产品的性能 |
| 6.5.2 实现多元检测 |
| 6.5.3 实现半定量或定量测定 |
| 7 研究目的与意义 |
| 第2章 AIV-HA1 NDV-HN IBV-N IBDV-VP2 MG-V1hA1.2重组蛋白的表达与纯化 |
| 1 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 质粒、菌株及试剂 |
| 2.1.2 相关溶液的配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 |
| 2.2.2 重组表达质粒的转化 |
| 2.2.3 诱导表达 |
| 2.2.4 包涵体的纯化与复性 |
| 2.2.5 蛋白浓度的测定 |
| 2.2.6 SDS-PAGE电泳 |
| 2.2.7 Western blot |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 重组菌诱导条件及目标蛋白纯化的SDS-PAGE电泳结果 |
| 3.2 Western blot分析 |
| 3.3 纯化蛋白浓度测定 |
| 4 讨论 |
| 4.1 表达载体与表达菌的选择 |
| 4.2 诱导条件和纯化方法 |
| 4.3 对HN、N蛋白表达形式的分析 |
| 4.4 对HN、VP2、VlhA1.2蛋白表达量和表达状态的分析 |
| 5 结论 |
| 第3章 AIV、NDV、IBV、IBDV、MG血清抗体快速检测试纸条的研制 |
| 1 研究的目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 仪器 |
| 2.1.2 生物材料、化学试剂及其它 |
| 2.1.3 溶液的配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的制备与纯化 |
| 2.2.2 胶体金的制备 |
| 2.2.3 胶体金颗粒的鉴定 |
| 2.2.4 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记胶体金pH值的确定 |
| 2.2.5 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记量的确定 |
| 2.2.6 金标单抗复合物的制备与纯化 |
| 2.2.7 封闭液的选择 |
| 2.2.8 样品垫、金标垫的制备 |
| 2.2.9 质控线与检测线的包被 |
| 2.2.10 试纸条的组装及结果判定标准 |
| 2.2.11 样品稀释液与样品稀释倍数的确定 |
| 2.2.12 试纸条交叉反应试验 |
| 2.2.13 试纸条检测下限的确定 |
| 2.2.14 快速检测血清抗体试剂盒组装及初步应用 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的纯化 |
| 3.2 胶体金的制备 |
| 3.3 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记胶体金pH值的确定 |
| 3.4 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记量的确定 |
| 3.5 金标单抗复合物的鉴定 |
| 3.6 封闭液的选择 |
| 3.7 检测线和质控线的包被条件 |
| 3.8 样品稀释液与样品稀释倍数的确定 |
| 3.9 试纸条交叉反应试验 |
| 3.10 试纸条检测下限的确定 |
| 3.11 试剂盒的重复性试验和保存期试验 |
| 3.12 几种试剂盒的临床应用 |
| 4 讨论 |
| 4.1 胶体金颗粒制备及鉴定 |
| 4.2 胶体金标记的单克隆抗体的制备 |
| 4.3 胶体金标记物抗鸡IgG Fc段单克隆抗体 |
| 4.4 封闭液的选择 |
| 4.5 检测线和质控线包被条件 |
| 4.6 样品稀释液与稀释倍数的确定 |
| 4.7 试纸条检测下限的确定 |
| 4.8 几种试剂盒的临床应用 |
| 5 结论 |
| 第4章 AIV、IBV、IBDV抗体快速联检试纸条的研制 |
| 1 研究的目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 仪器 |
| 2.1.2 生物材料、化学试剂及其它 |
| 2.1.3 溶液的配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 试纸条的构建 |
| 2.2.2 最佳反应条件的选择 |
| 2.2.3 试纸条的特异性试验 |
| 2.2.4 试纸条的敏感性试验 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 最佳反应条件的选择 |
| 3.2 试纸条的特异性试验 |
| 3.3 试纸条的敏感性试验 |
| 4 讨论 |
| 4.1 最佳反应条件的选择 |
| 5 结论 |
| 第5章 IBV抗体效价快速检测试纸条的研制 |
| 1 研究的目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 仪器 |
| 2.1.2 生物材料、化学试剂及其它 |
| 2.1.3 溶液的配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 试纸条的构建 |
| 2.2.2 最佳反应条件的选择 |
| 2.2.3 试纸条的特异性试验 |
| 2.2.4 试纸条的敏感性试验 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 最佳反应条件的选择 |
| 3.2 试纸条的特异性试验 |
| 3.3 试纸条的敏感性试验 |
| 4 讨论 |
| 4.1 最佳反应条件的选择 |
| 4.2 试纸条测定界限的选择 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 研究生期间发表的主要论文和专利申请 |
| 致谢 |
（7）鸡传染性法氏囊病抗体快速检测试纸条的研制及初步应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表(ABBREVIATION) |
| 第1章 文献综述 |
| 1 鸡传染性法氏囊病的研究进展 |
| 1.1 IBDV的病原学 |
| 1.1.1 病毒学分类、形态及理化特性 |
| 1.1.2 病毒培养特性 |
| 1.1.3 病毒血清型 |
| 1.1.4 IBDV的基因组结构和编码的蛋白 |
| 1.2 IBD的流行病学 |
| 1.2.1 自然宿主 |
| 1.2.2 传播媒介 |
| 1.2.3 传染源和传播途径 |
| 1.2.4 近年该病的流行出现了新特点 |
| 1.3 IBD诊断方法研究进展 |
| 2 胶体金免疫层析技术研究进展 |
| 2.1 胶体金免疫层析技术的原理 |
| 2.1.1 胶体金的定义和特点 |
| 2.1.2 胶体金标记技术 |
| 2.1.3 免疫胶体金技术 |
| 2.1.4 免疫层析技术 |
| 2.1.5 胶体金免疫层析技术 |
| 2.1.5.1 抗体夹心法 |
| 2.1.5.2 间接法 |
| 2.1.5.3 竞争抑制法 |
| 2.2 胶体金免疫层析技术的优点 |
| 2.2.1 快捷迅速,大大缩短出结果时间 |
| 2.2.2 灵敏准确 |
| 2.2.3 结果受外界因素影响较小 |
| 2.2.4 安全简便,不需任何仪器和设备 |
| 2.2.5 成本低廉,所需试剂和样本量少 |
| 2.3 胶体金免疫层析试纸条的制备流程 |
| 2.3.1 胶体金的制备 |
| 2.3.2 金标抗体的制备、纯化及保存 |
| 2.3.3 胶体金免疫层析试纸条的结构及检测原理 |
| 2.4 胶体金免疫层析技术在兽医领域的应用 |
| 2.4.1 病毒性疾病的诊断 |
| 2.4.2 细菌性疾病的诊断 |
| 2.4.3 寄生虫病的诊断 |
| 2.4.4 血、尿残留药物浓度的检测 |
| 2.5 胶体金免疫层析技术的研究趋势 |
| 2.5.1 提高胶体金质量 |
| 2.5.2 进一步提高检测灵敏度,拓宽检测范围 |
| 2.5.3 实现多项检测 |
| 2.5.4 实现半定量或定量测定 |
| 3 研究目的与意义 |
| 第2章 IBDV的VP2基因的原核表达及表达蛋白的纯化和免疫活性鉴定 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.1 质粒、细菌及主要试剂 |
| 1.1.2 主要试剂及溶液的配制 |
| 1.1.2.1 抗生素类 |
| 1.1.2.2 常用贮存液的配制 |
| 1.1.2.3 SDS-PAGE和Western-blot试剂 |
| 1.1.2.4 GST标签蛋白亲和层析纯化柱配方 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 |
| 1.2.2 重组表达质粒的转化 |
| 1.2.3 诱导表达 |
| 1.2.4 蛋白浓度的测定 |
| 1.2.5 SDS-PAGE电泳 |
| 1.2.6 Western-blot |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 重组菌诱导表达及目标蛋白纯化的SDS-PAGE电泳结果 |
| 2.2 Western-blot分析 |
| 2.3 蛋白浓度的测定 |
| 3 讨论 |
| 3.1 表达载体和表达菌的选择 |
| 3.2 诱导表达条件的选择 |
| 3.3 对VP2蛋白表达量低的分析 |
| 4 结论 |
| 第3章 鸡传染性法氏囊血清抗体胶体金免疫层析方法的建立 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 仪器和材料 |
| 1.1.2 抗体、血清、抗原及化学试剂 |
| 1.1.3 溶液的配制 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的制备与纯化 |
| 1.2.1.1 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的制备 |
| 1.2.1.2 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的纯化 |
| 1.2.2 胶体金的制备 |
| 1.2.3 胶体金颗粒的鉴定 |
| 1.2.4 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记胶体金pH值 |
| 1.2.5 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记量的确定 |
| 1.2.6 金标单抗复合物的制备与纯化 |
| 1.2.7 封闭液的选择 |
| 1.2.8 样品垫、金标垫的制备 |
| 1.2.9 点样 |
| 1.2.10 试纸条的组装及结果判定标准 |
| 1.2.11 试纸条特异性试验 |
| 1.2.12 试纸条敏感性试验 |
| 1.2.13 快速检测鸡传染性法氏囊血清抗体试剂盒组装及初步应用 |
| 1.2.13.1 快速检测鸡传染性法氏囊血清抗体诊断试剂盒的组成 |
| 1.2.13.2 快速检测鸡传染性法氏囊病血清抗体诊断试剂盒性能考察 |
| 1.2.13.3 快速检测鸡传染性法氏囊病血清抗体诊断试剂盒的初步应用 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的纯化 |
| 2.2 胶体金的制备 |
| 2.3 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记胶体金pH值 |
| 2.4 抗鸡IgG Fc段单克隆抗体的最适标记量的确定 |
| 2.5 封闭液的选择 |
| 2.6 检测线和质控线包被物浓度的选择 |
| 2.7 试纸条特异性试验 |
| 2.8 试纸条敏感性试验 |
| 2.9 试剂盒的重复性试验和保存期试验 |
| 2.10 试剂盒的临床应用 |
| 3 讨论与结论 |
| 3.1 胶体金颗粒制备及鉴定 |
| 3.2 胶体金标记的单克隆抗体的制备 |
| 3.3 胶体金标记物抗鸡IgG Fc段单克隆抗体 |
| 3.4 封闭液的选择 |
| 3.5 点样量的确定 |
| 3.6 血清样品稀释倍数的确定 |
| 3.7 血清样品对试纸条敏感度的影响 |
| 3.8 快速检测鸡传染性法氏囊血清抗体诊断试剂盒的应用 |
| 4 结论 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白卵黄抗体制剂的制备（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表(Abbreviations) |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 猪流行性腹泻概述 |
| 1.1.1 PEDV研究进展 |
| 1.1.2 PEDV S蛋白及其功能 |
| 1.1.3 PEDV流行病学及变异分析 |
| 1.1.4 PED的防控现状 |
| 1.2 卵黄抗体研究进展 |
| 1.2.1 卵黄抗体的结构特点 |
| 1.2.2 卵黄抗体的理化特点 |
| 1.2.3 卵黄抗体的作用机理 |
| 1.2.4 卵黄抗体的提取 |
| 1.2.5 卵黄抗体的应用 |
| 1.3 本课题研究的目的与意义 |
| 第二章 猪流行性腹泻病毒S1基因的原核表达 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 病料来源 |
| 2.1.2 菌株、质粒与表达载体 |
| 2.1.3 试验主要试剂 |
| 2.1.4 试验主要仪器 |
| 2.1.5 试验主要溶液配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 PEDVS1 部分基因的克隆 |
| 2.2.2 pMDTM19T-S1-DH5ɑ克隆载体的构建 |
| 2.2.3 重组表达载体pET-32a-S1 的构建与鉴定 |
| 2.2.4 PEDVS1 蛋白的表达与鉴定 |
| 2.2.5 PEDVS1 蛋白纯化 |
| 2.2.6 重组蛋白的Western Blot分析 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 PEDVS1 基因PCR扩增结果 |
| 2.3.2 重组质粒pMDTM19T-S1 的鉴定结果 |
| 2.3.3 重组质粒pET-32a-S1 的鉴定结果 |
| 2.3.4 重组质粒的诱导表达结果 |
| 2.3.5 重组蛋白的纯化结果 |
| 2.3.6 Western Blot鉴定结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 目的基因的选择 |
| 2.4.2 重组蛋白的纯化 |
| 2.4.3 重组蛋白的活性检测 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 抗PEDV卵黄抗体制剂的研究及初步应用 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 疫苗及动物来源 |
| 3.1.2 试验主要试剂 |
| 3.1.3 试验主要仪器 |
| 3.1.4 试验主要溶液配制 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 蛋鸡免疫程序 |
| 3.2.2 卵黄抗体制备工艺摸索 |
| 3.2.3 间接ELISA检测方法的建立 |
| 3.2.4 卵黄抗体效价的测定 |
| 3.2.5 动物治疗试验 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 间接ELISA条件优化结果 |
| 3.3.2 血清中特异性抗体及其卵黄抗体效价变化规律 |
| 3.3.3 卵黄抗体粉制作工艺的筛选结果 |
| 3.3.4 卵黄抗体冻干粉制作工艺的筛选结果 |
| 3.3.5 卵黄粉抗体效价损耗检测结果 |
| 3.3.6 三种卵黄抗体制剂动物治疗试验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 检测鸡血清、卵黄中PEDV抗体间接ELISA方法的建立 |
| 3.4.2 卵黄抗体效价检测 |
| 3.4.3 卵黄抗体制剂初步应用 |
| 3.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表论文 |
| 致谢 |
| 附录Ⅰ |
| 附录Ⅱ |
（10）传染性法氏囊病病毒野毒株的致弱与分子机理研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 文献综述 |
| 第一章 鸡传染性法氏囊病的研究进展 |
| 1.1 概述 |
| 1.2 IBDV 的病原特性 |
| 1.2.1 病原 |
| 1.2.1.1 病毒的结构 |
| 1.2.1.2 病毒的形态发生 |
| 1.2.1.3 病毒蛋白 |
| 1.2.2 血清型 |
| 1.2.3 培养特性 |
| 1.2.3.1 IBDV 在鸡胚上的增殖 |
| 1.2.3.2 IBDV 在细胞上的增殖 |
| 1.2.3.3 IBDV 在细胞中增殖的分子机制 |
| 1.2.4 抵抗力 |
| 1.3 IBD 的诊断 |
| 1.3.1 流行病学 |
| 1.3.2 临床症状 |
| 1.3.3 病理变化 |
| 1.4 IBD 的检测 |
| 1.4.1 病毒分离鉴定 |
| 1.4.2 免疫学试验及分子生物学检测 |
| 1.5 治疗 |
| 1.5.1 抗体治疗 |
| 1.5.2 西药治疗 |
| 1.5.3 中草药防制 IBD |
| 1.6 IBD 免疫抑制 |
| 第二章 鸡传染性法氏囊病病毒变异分子生物学研究进展 |
| 2.1 病毒基因组结构 |
| 2.2 蛋白结构与功能 |
| 2.3 病毒抗原变异的分子基础 |
| 2.4 病毒毒力变异的分子基础 |
| 第三章 超强毒 IBD 的发生 |
| 3.1 超强毒 IBDV 的发生及其研究 |
| 3.1.1 超强毒 IBDV 的发生 |
| 3.1.2 vvIBDV 抗原变异 |
| 3.1.3 vvIBDV 致病型变化 |
| 3.1.4 vvIBDV 毒力标记 |
| 3.2 vvIBDV 毒株致弱和适应细胞培养 |
| 3.3 症状和病变 |
| 3.4 分子诊断工具 |
| 3.5 致病性和免疫抑制 |
| 3.6 预防与控制 |
| 第四章 鸡传染性法氏囊病防制的研究进展 |
| 4.1 常规疫苗免疫 |
| 4.2 新型传染性法氏囊病疫苗研究进展 |
| 4.2.1 基因工程疫苗 |
| 4.2.2 亚单位疫苗 |
| 4.2.3 载体疫苗 |
| 4.2.4 VP5蛋白缺失IBDV毒株 |
| 4.2.5 DNA 疫苗 |
| 4.3 免疫防制中存在的主要问题 |
| 4.3.1 IBDV的毒力标记尚未确定 |
| 4.3.2 血清型和毒力的分类发生混淆 |
| 4.3.3 疫苗的质量令人堪忧 |
| 4.3.4 综合防制措施有待进一步加强 |
| 试验研究 |
| 第五章 野毒株的分离鉴定 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 标准SPF 鸡IBD 阳性血清 |
| 5.1.2 IBD 琼脂扩散试验抗原 |
| 5.1.3 荧光标记的 IBDV 特异性血清 |
| 5.1.4 SPF 鸡胚和 SPF 鸡 |
| 5.1.5 IBDV 病料采集及处理 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 病毒的分离 |
| 5.2.1.1 病料的前处理 |
| 5.2.1.2 分离病毒 |
| 5.2.2 动物回归试验 |
| 5.2.3 组织病理学观察 |
| 5.2.4 琼脂免疫扩散试验 |
| 5.2.4.1 琼脂板的制备 |
| 5.2.4.2 病料处理 |
| 5.2.4.3 琼扩试验步骤 |
| 5.2.5 间接荧光抗体法对分离株抗原的检测 |
| 5.2.6 电镜观察 |
| 5.2.7 IBDV 与MDV、CAV、REV 共感染的检测 |
| 5.2.7.1 病料的处理 |
| 5.2.7.2 IBDV与MDV、CAV、REV 的检测 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 发病鸡的临床症状及流行病学 |
| 5.3.2 病毒分离结果 |
| 5.3.3 琼脂扩散试验 |
| 5.3.4 动物回归试验结果 |
| 5.3.5 组织病理学观察 |
| 5.3.6 电镜观察结果 |
| 5.3.7 荧光显微镜观察结果 |
| 5.3.8 共感染检测的结果 |
| 5.4 讨论 |
| 第六章 4个传染性法氏囊病病毒分离株的致病性研究 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 材料 |
| 6.1.1.1 毒株 |
| 6.1.1.2 SPF 鸡胚、SPF 鸡 |
| 6.1.2 方法 |
| 6.1.2.1 各毒株的处理 |
| 6.1.2.3 鸡只的人工感染试验 |
| 6.1.2.4 病理组织学观察 |
| 6.2 结果 |
| 6.2.1 人工接种鸡胚的结果 |
| 6.2.2 4个IBDV野毒株对SPF鸡的致病性 |
| 6.2.3 组织病理学观察结果 |
| 6.2.4 IBDV对中枢免疫器官的作用 |
| 6.3 讨论 |
| 第七章 传染性法氏囊病病毒4个野毒株VP2基因高变区的克隆与序列分析 |
| 7.1 材料 |
| 7.1.1 病毒 |
| 7.1.2 菌种 |
| 7.1.3 试剂 |
| 7.1.4 溶液配制 |
| 7.1.4.1 DEPC-H20 |
| 7.1.4.2 100mg/mL 氨苄霉素 |
| 7.1.4.3 X-gal |
| 7.1.4.4 LB 培养液(基) |
| 7.1.4.5 SOB 培养基 |
| 7.1.4.6 SOC 培养基 |
| 7.2 方法 |
| 7.2.1 4 个野毒株原代毒核酸 RNA 的提取 |
| 7.2.2 VP2 高变区的扩增 |
| 7.2.2.1 引物的设计与合成 |
| 7.2.2.2 RT-PCR |
| 7.2.2.3 Nested-PCR |
| 7.2.2.4 PCR 扩增鉴定 |
| 7.2.3 PCR 产物的回收 |
| 7.2.4 VP2 高变区的克隆与鉴定 |
| 7.2.4.1 PCR 产物与pMD18-T vector 的连接 |
| 7.2.4.2 感受态细胞的制备——氯化钙法 |
| 7.2.4.3 连接产物的转化 |
| 7.2.5 重组质粒的提取与鉴定 |
| 7.2.5.1 SDS 碱裂解法小量提取质粒 |
| 7.2.5.2 重组质粒的琼脂糖凝胶电泳鉴定 |
| 7.2.5.3 重组质粒的双酶切鉴定 |
| 7.2.6 阳性质粒测序与序列分析 |
| 7.3 结果 |
| 7.3.1 RT-PCR 结果 |
| 7.3.2 目的基因的克隆和测序 |
| 7.3.2.1 重组质粒的酶切鉴定 |
| 7.3.2.2 序列分析 |
| 7.4 讨论 |
| 第八章 MTT 比色法在IBDV 分离中的应用 |
| 8.1 材料 |
| 8.1.1 法氏囊病料 |
| 8.1.2 MTT 溶液 |
| 8.1.3 裂解液 |
| 8.1.4 DMEM |
| 8.1.5 犊牛血清 |
| 8.1.6 SPF 鸡法氏囊浸出液 |
| 8.1.7 法氏囊提取液 |
| 8.1.8 鸡胚浸出液 |
| 8.1.9 主要仪器设备 |
| 8.2 方法 |
| 8.2.1 鸡胚成纤维细胞的制备 |
| 8.3 结果 |
| 8.4 讨论 |
| 第九章 IBDV超强毒株的传代致弱 |
| 9.1 材料与方法 |
| 9.1.1 病毒 |
| 9.1.2 SPF鸡胚和SPF鸡 |
| 9.1.3 试剂 |
| 9.1.4 溶液配制 |
| 9.1.4.1 细胞生长液和细胞维持液 |
| 9.1.4.2 Hank’s 液 |
| 9.1.5 鸡胚成纤维细胞的制备 |
| 9.1.6 病毒的传代 |
| 9.1.7 原始囊毒及不同代次细胞毒致病性的测定 |
| 9.1.8 细胞适应毒的遗传稳定性试验 |
| 9.1.9 弱毒株的免疫原性试验 |
| 9.1.10 VP2高变区扩增 |
| 9.1.11 序列测定和比较 |
| 9.2 结果 |
| 9.2.1 病毒的传代驯化 |
| 9.2.2 原始囊毒及不同代次细胞毒病毒致病性实验 |
| 9.2.3 致弱株的稳定性试验 |
| 9.2.4 致弱株的免疫原性和最佳免疫剂量 |
| 9.2.5 RT-PCR 产物及重组质粒的酶切鉴定 |
| 9.2.6 序列分析 |
| 9.3 讨论 |
| 9.4 小结 |
| 第十章 IBDV细胞苗免疫效果的研究 |
| 10.1 材料与方法 |
| 10.1.1 实验材料 |
| 10.1.2 实验分组 |
| 10.1.3 母源抗体水平和免疫后抗体效价的检测 |
| 10.1.4 计算免疫器官指数及观察病理组织切片 |
| 10.1.5 人工感染用毒株及攻毒途径 |
| 10.1.6 统计学分析 |
| 10.2 结果 |
| 10.2.1 母源抗体水平与免疫后的 IBDV 抗体效价 |
| 10.2.2 三种疫苗免疫后对免疫器官的影响 |
| 10.2.2.1 囊重比与囊指数 |
| 10.2.2.2 免疫器官的组织损伤 |
| 10.2.3 不同代次细胞毒对攻毒的免疫保护作用 |
| 10.2.4 对新城疫疫苗免疫应答的免疫抑制 |
| 10.3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 缩略语英汉对照表 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、猪抗鸡IBD血清的研制与应用（论文参考文献）
- [1]鸡传染性法氏囊病病毒抗血清的研制[J]. 王占伟,邵国青,刘茂军,冯志新,王丽,高云飞,周开华,尹秀凤. 南方农业学报, 2012(12)
- [2]猪抗鸡IBD高免血清的研制[J]. 张丹俊,任顶宏,黄依平. 安徽农业科学, 1993(01)
- [3]猪抗鸡IBD高免血清的研制和应用[J]. 孙银华,丁忠留,严勋,伍仁福. 中国家禽, 1997(09)
- [4]猪抗鸡IBD血清的研制与应用[J]. 彭德旺,葛兆宏,陆广富,扶国才,黄秀萍. 中国畜禽传染病, 1995(01)
- [5]鸡的主要病毒性疫病抗体快速检测方法的建立和应用研究[D]. 张进良. 华中农业大学, 2010(05)
- [6]猪抗鸡ND＋IBD二联高免血清的研制[J]. 张丹俊,赵鸿斌. 中国家禽, 1996(02)
- [7]鸡传染性法氏囊病抗体快速检测试纸条的研制及初步应用[D]. 张文通. 华中农业大学, 2008(12)
- [8]抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白卵黄抗体制剂的制备[D]. 王爱富. 佛山科学技术学院, 2017(01)
- [9]猪抗鸡IBD高免血浆的研制和应用[J]. 孙银华,丁忠留,严勋,伍仁福. 上海畜牧兽医通讯, 1997(04)
- [10]传染性法氏囊病病毒野毒株的致弱与分子机理研究[D]. 崔言顺. 西北农林科技大学, 2005(02)