一、三黄提取液对豚鼠心室乳头肌跨膜电位的作用（论文文献综述）
李俊平[1]（2016）在《益气活血安神法通过抑制钙超载减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验研究》文中提出研究背景再灌注治疗是冠心病急性心肌梗死（AMI）治疗史上里程碑式的进展,其手段主要有三种：静脉溶栓、经皮冠状动脉腔内成形及支架植入术（PTCA+PCI）.冠脉旁路移植术（CABG）,随着介入器械和技术的日臻成熟,PCI已成为治疗冠心病AMI的主要手段。但是,再灌注治疗只是一种局部治疗手段,并不能终止冠心病的病理发展进程,加之治疗后出现的一系列心肌缺血再灌注损伤（MIRI）,严重制约了冠心病的治疗效果。在MIRI过程中炎症反应、氧化损伤、钙超载及能量利用障碍等都发挥着重要作用,其中钙超载是造成心肌细胞损伤和死亡的共同通路,故防治钙超载是减轻MIRI的重要举措。目前针对MIRI的西医干预多限于实验研究,很多药物尚未应用于临床,只有苯磺酸氨氯地平防治其他器官（如肝脏、卵巢）再灌注治疗后钙超载的实验报道。但由于苯磺酸氨氯地平是通过作用于血管平滑肌的L型Ca通道从而抑制钙超载,存在作用靶点单一、可明显抑制心肌细胞收缩功能,副作用较大,故临床应用有一定局限性。中药也有钙拮抗作用,但其具体作用特点及机制与临床常用有效西药钙通道阻滞剂苯磺酸氨氯地平（络活喜）的异同未见报道。基于心肌缺血再灌注损伤的中医病因病机,结合多年临床经验导师创制出益气活血复方（以下简称复方）,功在益气活血,凉血安神,其主要组成为黄芪、丹参、三七、银杏、酸枣仁等提取物。围绕“防治钙超载”和“保护心功能抑制心室重构”这两大目标,进行益气活血复方对心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤保护作用及机制的研究,拟为益气活血复方防治MIRI特色和优势分析提供实验依据。目的观察益气活血复方对心肌缺血再灌注损伤大鼠心室早期重构、心脏射血分数、和心肌梗死区／缺血区比例的影响；并从1miRNA-133调控钙超载及细胞凋亡角度探讨益气活血复方的作用机制。方法225只雄性Wistar大鼠,体重为300±20g,随机分为假手术组、模型组、络活喜组、益气活血复方高、中、低剂量6组,预防性给药7天后,结扎大鼠心脏冠脉左前降支,50min后复灌,制作大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。分别于造模前、造模后及复灌48h行心脏射血分数及心室内径检测,后处死大鼠,取血,离心取血清,剪取心脏,以依文思蓝-TIC双染色评估心肌梗死区与缺血区面积百分比,据此选择益气活血复方最优剂量进行后续机制探讨。每组取6只大鼠,行HE染色及TUNEL染色,取缺血区心肌组织,比色法检测心肌钙离子含量,Western blot法检测左心室缺血区心肌组织SERCA、CasR、MAPK通路、CytC、Caspase-3及Bcl-2蛋白的表达,Real-Time PCR法检测大鼠左心室缺血区心肌组织miRNA-133的表达。结果（1）心脏EF值：①造模术后：与假手术组相比,其余5组EF值均有不同程度的降低,差异具有统计学意义（P<0.05）；余各组间无差异。②复灌48h：模型组较造模术后EF值明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,余各组均有不同程度升高,但较造模术后无差异。③复灌48h：与假手术组相比,各组心脏EF值均有显着下降,差异具有统计学意义（P<0.01）；与模型组相比,益气活血复方高、中、低剂量组均能显着提高EF值,差异具有显着统计学意义（P<0.05）,但三者之间无差异；络活喜组与模型组无明显差异。（2） LVIDd及LVIDs: ①LVIDd:与假手术组相比,模型与低剂量组LVIDd明显增大,差异具有统计学意义（P<0.05）；余各组与假手术无明显差异。与模型组相比,高剂量组LVIDd显着降低,差异具有统计学意义（P<0.05）；余络活喜、中剂量及低剂量与模型组无差异。②LVIDs:与假手术组相比,模型组LVIDs显着增大,差异具有统计学意义（P<0.01）;余各组间无明显差异。与模型组相比,高剂量及中剂量组LVIDs显着降低,差异具有统计学意义（P<0.01）,但二者之间无差异。（3）心肌梗死／缺血区比率（梗死区／缺血区比率大于30%小于60%）：与模型组相比,络活喜及高剂量组均能显着减小心肌梗死／缺血区比率,差异具有统计学意义（P<0.05）；但络活喜及高剂量两组间无明显差异。（4）心肌组织钙含量：与假手术组相比,模型组钙离子显着升高,差异具有统计学意义（P<0.01）；络活喜及高剂量组含量显着降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,但络活喜及高剂量二者组间无明显差异。（5）对SERCA2A及CasR表达的影响：①SERCA2A与假手术相比,模型组心肌SERCA2A表达水平明显降低,差异具有统计学意义（P<0.01）：与模型组相比,络活喜和高剂量组表达水平均显着升高,差异具有统计学意义（P<0.01）,但络活喜和高剂量组间无明显差异。②CasR:与假手术组相比,模型、络活喜及高剂量组CasR表达水平显着升高,差异具有显着统计学意义（P<0.01）；与模型组相比,高剂量组显着降低,差异具有统计学意义（P<0.01）;高剂量与络活喜组相比,心肌CasR表达水平显着降低,差异具有统计学意义（P<0.01）。（6）心肌细胞凋亡检测：与假手术相比,各组心肌凋亡指数均有显着升高,差异具有统计学意义（P<0.01）；与模型组相比,络活喜及高剂量均能显着降低心肌凋亡指数,差异具有统计学意义（P<0.01）,但二者组间无明显差异。（7）对CytC、Caspase-3及Bcl-2表达的影响：①CytC:与假手术相比,模型及高剂量组心肌CytC表达均有明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）；络活喜与假手术之间无明显差异：与模型组相比,络活喜及高剂量组均有明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,但络活喜与高剂量组间无明显差异。②CasPase-3:与假手术相比,模型、络活喜及高剂量组CasPase-3表达均有明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）；与模型组相比,络活喜及高剂量组均有明显降低,差异具有统计学意义（P<0.01）,但络活喜与高剂量组间无明显差异。③Bcl-2：与假手术相比,模型和络活喜组均有明显降低,差异具有统计学意义（P<0.01）,高剂量与假手术组间无差异；与模型组相比,络活喜和高剂量组均有明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）：与络活喜组相比,高剂量组显着升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。（8）对P38、JNK、ERK1/2表达的影响：①P38：与假手术相比,模型、络活喜及高剂量组P38表达水平明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）；与模型组相比,络活喜和高剂量组显明显降低,差异具有统计学意义（P<0.01）;络活喜与高剂量组间无明显差异。②.JNK：与假手术组相比,模型组表达水平明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）；余各组间无明显差异。③ERK1/2：与假手术相比,模型、络活喜及高剂量组ERK1/2表达水平均有明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）；与模型组相比,络活喜组显着降低,差异具有统计学意义（P<0.01）；与络活喜组相比,高剂量组明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。（9）对miRNA-133表达的影响：与模型组相比,假手术、络活喜及高剂量组miRNA-133表达明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）；与假手术相比,络活喜及高剂量组无明显差异;络活喜与高剂量组之间无明显差异。结论（1）益气活血复方和络活喜均可减小大鼠心肌缺血再灌注损伤时心肌梗死面积；此外益气活血复方还能提高再灌注引起的心脏EF值降低、抑制LVIDd、LVIDs的增大,从而抑制MIRI早期左心室的恶性重构,改善心功能,其综合效应明显优于络活喜。（2）益气活血复方能抑制心肌缺血再灌注损伤钙超载,并减轻钙超载引起的线粒体途径的心肌细胞凋亡。（3）益气活血复方可能通过上调miRNA-133水平、调节p38MAPK通路来发挥保护受损心肌的作用。
李思耐[2]（2016）在《基于L型钙电流研究益气药干预心衰电生理重构机制》文中提出心力衰竭（心衰,heart failure, HF）是21世纪危害人类健康的重要心血管疾病,心衰患者5年生存率约为50%,其中D期心衰患者恶性心律失常的发生率明显增加,近50%患者死于恶性心律失常所导致的心源性猝死。电生理重构导致的恶性心律失常是心一衰患者死亡的重要原因之一。电生理重构是指在心衰时,由于病理生理机制发生变化,导致心肌细胞电冲动产生及传导机制发生的改变,涉及多种离子通道和细胞信号转导系统的功能改变,其中L型钙电流改变和动作电位时程（Action potential duration, APD）延长是关键环节。目前仍缺乏针对心衰电生理重构的有效药物可供临床选择,中医药研究有可能是解决这一问题的突破口。中医认为心气虚是心衰的基本病机,贯穿于心衰发生发展始终,益气药是中医防治心衰的一类基本药物,能够改善心衰患者心功能及临床症状,提高患者生存质量。黄芪、党参、人参是临床常用的益气药。目前已知的中医药作用机制具有多层次、多环节、多靶点等特点,前期研究从能量代谢和肌浆网钙转运角度探讨了益气药改善心衰模型心功能的作用机制,但从电生理重构角度探讨益气药改善心衰模型预后的机制研究还未见诸报道。本研究通过复制结扎冠脉所致心梗后心衰、缩窄主动脉所致压力负荷心衰两种小鼠模型,运用小动物超声心动图、心电图、全细胞膜片钳技术及Western Blot分子生物学方法,从整体、细胞、分子层面进行研究,以验证“益气药可能通过抑制钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（calcium/calmodulin-dependent protein kinase II, CaMKII）过表达,调控心衰细胞L型钙电流,缩短心衰心肌细胞及心脏复极时间,改善心衰电生理重构”的科学假说。方法1.动物造模：采用冠脉结扎术、主动脉缩窄术分别复制心梗后心衰、压力负荷心衰两种小鼠模型；2.分组和给药：（1）冠脉结扎术后小鼠随机分为模型组、假手术组、益气组（黄芪+党参）、西药组（美托洛尔）4组,术后给予相应药物干预4周；（2）主动脉缩窄术后小鼠随机分为模型组、假手术组、黄芪组（黄芪）、人参组（人参）、党参组（党参）、西药组（美托洛尔）6组,术后给予相应药物干预4周；3.检测方法：（1）冠脉结扎术后4周小鼠和主动脉缩窄术后4周小鼠记录体重、死亡等一般情况,利用小动物超声心动图检测心脏收缩、舒张功能及心室重构情况,利用心电图检测QT间期及室性心律失常发生率；（2）主动脉缩窄术后4周小鼠急性分离心肌细胞,利用全细胞膜片钳技术的电流钳模式记录心肌细胞APD,利用全细胞电压钳模式记录L型钙电流密度、失活时间常数（T）以及电压依赖性激活-失活曲线;（3）主动脉缩窄术后4周小鼠处死取心肌组织,应用Western Blot技术检测L型钙通道、CaMKII的蛋白表达水平。结果1.心衰模型的评价：（1）冠脉结扎术后4周模型小鼠与假手术组相比左室射血分数（left ventricular ejection fraction, LVEF）显着下降（p<0.01）,舒张末左室内径显着增加（p<0.01）,校正QT间期（QTc）显着延长（p<0.01）；（2）主动脉缩窄术后4周模型小鼠与假手术组相比LVEF显着下降（p<0.01）,收缩末左室内径增加（p<0.05）,左室前壁厚度显着增加（p<0.01）,Ea显着降低（p<0.01）, QTc显着延长（p<0.01）。2. 益气药对心衰小鼠心功能及QT间期的干预作用：（1）冠脉结扎术后4周,益气组与模型组相比LVEF有升高趋势但无统计学意义,西药组与模型组相比LVEF无显着差异,益气组、西药组与模型组相比QTc均显着缩短（p<0.01）；（2）主动脉缩窄术后4周,黄芪组与模型组相比LVEF升高（p<0.05）,Ea显着升高（p<0.01）,党参组与模型组相比LVEF显着升高（p<0.01）；黄芪组、人参组、党参组与模型组相比QTc均显着缩短（p<0.01）。3.益气药对心衰细胞APD及L型钙电流的干预作用：（1）APD:模型组与假手术组相比,在0.21、2.0Hz频率刺激下心肌细胞动作电位复极90%时间（APD90）均显着延长（p<0.01）；黄芪组与模型组相比,在0.2Hz、2.0Hz频率刺激下心肌细胞APD90缩短（p<0.05）；党参组与模型组相比,在0.2Hz、2.0Hz频率刺激下心肌细胞APD90显着缩短（p<0.01）,并且在异丙肾上腺素（isoprenaline, ISO）干预下与模型组相比APD90缩短（p<0.05）;（2） ICa,L电流密度：模型组与假手术组相比,在0.1Hz、1.0Hz刺激下ICa,L电流密度均显着增大（p<0.01）;黄芪组与模型组相比,1.0Hz刺激下ICa,L电流密度显着减小（p<0.01）;党参组与模型组相比,0.1 Hz、1.0Hz刺激下ICa,L电流密度均减小（p<0.01、p<0.05）,并且在ISO干预下ICa,L电流密度与模型组相比减小（p<0.05）；（3）Ica,L失活时间常数：模型组与假手术组相比ICa,L快速失活时间常数（τ1）和慢速失活时间常数（τ 2）均显着延长（p<0.01）,黄芪组、人参组、党参组与模型组相比,τ 1、τ 2均显着缩短（p<0.01）;（4）电压依赖性激活-失活：模型组与假手术组相比半数激活电位降低（p<0.01）,黄芪组、人参组、党参组、西药组与模型组相比,半数激活电位均显着升高（p<0.01）。4.益气药对心衰小鼠L型钙通道及CaMKⅡ表达的干预作用：（1）模型组与假手术组相比CANCA1C （L型钙通道主要亚基）表达水平无统计学差异,各给药组与模型组相比CANCA1C表达水平无统计学差异；（2）模型组与假手术组相比CaMKⅡ蛋白表达水平显着升高（p<0.01）,黄芪组、人参组、党参组、西药组与模型组相比CaMKⅡ蛋白表达水平均显着降低（p<0.01）。结论1.益气药（黄芪+党参）能够缩短心梗后心衰心脏复极时间,但对心梗后心衰模型心功能无明显改善效果；黄芪、人参、党参均能缩短压力负荷致心衰心脏复极时间,改善心衰电生理重构,并且黄芪能够同时改善心脏收缩和舒张功能,党参能够改善心脏收缩功能；2.益气药黄芪、人参、党参能够不同程度地干预心衰细胞L型钙电流密度,失活速度,电压依赖性激活、失活,改善心衰细胞L型钙电流重构,并且缩短心衰细胞动作电位复极时间,干预心衰细胞电生理重构,其中党参、黄芪的干预效果显着；3.益气药黄芪、人参、党参对L型钙通道的调控作用可能是通过抑制CaMKⅡ过表达实现的。
张玉玲[3]（2016）在《安律胶囊治疗冠心病室性早搏的临床观察》文中研究表明目的:通过对安律胶囊治疗痰浊血瘀型冠心病心律失常室性早搏进行临床疗效和安全性的观察,提供临床依据以证明安律胶囊是治疗痰浊血瘀型冠心病心律失常室性早搏的有效药物。方法:本研究所选病例西医诊断为冠心病心律失常室性早搏、辨证为痰浊血瘀型的患者。将符合本临床研究纳入标准的60例患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例。治疗组以服用常规西药为基础,加服安律胶囊,对照组以服用常规西药为基础,加服酒石酸美托洛尔片（倍他乐克）,疗程均为4周。观察两组病人在治疗前后24小时动态心电图室性早搏程度、中医证候等疗效性指标和血、尿常规等安全性指标的变化。结果:治疗组总有效率93.33%,对照组总有效率73.33%,两组的差异有显着性的意义。两组患者治疗前后的血、尿常规对比结果显示,安律胶囊对血、尿常规无异常影响。结论:1.安律胶囊治疗痰浊血瘀型冠心病室性早搏有显着的疗效,可以改善患者的临床症状和体征,改善患者24小时的动态心电图,降低室性早搏发作频率。2.安律胶囊治疗痰浊血瘀型冠心病室性早搏有显着的疗效,治疗前后安全性指标无异常改变,表明安律胶囊临床应用安全。
魏华民,吴红金[4]（2015）在《中药抗心律失常的临床与基础研究进展》文中进行了进一步梳理心律失常是常见的心血管病症,不仅影响人们的生活质量,而且是猝死最常见的原因[1]。虽然药物和医疗器械的不断研发带来临床获益,但心律失常仍是棘手的问题之一[2]。中医药治疗因能够对病人进行整体调整,且具有多靶点、多层次的干预效果而具有一定优势,本文就抗心律失常中药的临床及基础研究做一简要综述。1中医对心律失常的认识根据心律失常的临床症状,中医将其归属于"惊悸、怔忡、厥证"等范畴,即包含"惶恐、惊惧"的精神方
刘惠良[5]（2014）在《心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔心功能影响及其机制研究》文中提出慢性心力衰竭（Chronic heart failure，CHF）是心血管疾病的常见并发症，其发病率逐年上升，正日益威胁着人们的身体健康。心力衰竭基础研究的深入和循证医学的开展，使得对心力衰竭的发病原因、病理生理机制以及临床预防和治疗的研究取得了巨大进步，而成功的心力衰竭动物模型建立为此提供了客观保障和积极贡献。动物心衰模型制作常用方法包括：心肌缺血型、压力负荷型、容量负荷型以及心肌病变型，不同的动物模型可以模拟相应疾病的发病机制。目前常用于研究代偿性肥大到失代偿心力衰竭的病理生理改变的动物模型之一是压力超负荷心衰模型，主动脉缩窄模型是左心室压力负荷心衰模型中较为理想的一种。其病理生理机制为早期心肌细胞发生代偿性肥大以对抗增高的后负荷，维持正常的射血功能，晚期发展为心力衰竭，而基因表达的改变、激素的影响、凋亡、能量代谢障碍、氧化应激、心律失常、血管功能障碍、胶原的沉积等是多重促进因素。心脏收缩力调节（cardiac contractility modulation，CCM）是指在心肌动作电位绝对不应期施加的一种非兴奋性电刺激信号（non-ExcitatoryCurrents，NEC）即绝对不应期电刺激（absolute refractory period electricalstimulation，ARPES）。ARPES不引发动作电位，但是能够使心肌细胞的收缩力增强。CCM的治疗可以改善左心室收缩功能，提高左室射血分数，而不增加额外耗氧量，可用于心力衰竭的治疗。自由基对生物细胞膜损伤的最终产物丙二醛（Mafonaldehyde，MDA）具有很强的生物毒性，而体内重要的自由基清除剂是超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD），SOD能够有效地清除体内自由基，保护细胞免受损伤；谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione-peroxidase，GSH-Px）作为催化过氧化氢分解的酶，也可以起到保护细胞膜结构和功能的作用。已有研究表明CHF患者的抗氧化能力和清除氧自由基能力降低。血浆MDA水平均随CHF程度增加而上升，而SOD活性随之下降，能够反映CHF程度及其预后。然而，有关CCM对心衰患者氧化应激影响的研究尚未见报道，需进一步研究。CHF的发生和发展过程中，肾素-血管紧张素-醛固酮系统（renin-angiotensin-aldosterone system，RAAS）的激活发挥着重要的作用。心衰时出现心室重塑，其重要表现是心肌纤维化（myocardial fibrosis，MF），而血管紧张素Ⅱ（angiotonin II，AngⅡ）是诱导MF、心肌细胞肥大过程中的主要介质，在CHF患者中明显升高，且升高水平与CHF病死率明显相关。AngⅡ过度表达导致心肌代谢及功能异常，促进压力超负荷诱导的心脏功能障碍，可使血管和心肌重构，这些病理改变又进一步激活RAAS，形成恶性循环。心肌收缩蛋白主要包括三种，即肌球蛋白、肌动蛋白和原肌凝蛋白，肌球蛋白是心肌的主要结构蛋白，占心脏成份的60%。心脏仅有2种肌球蛋白重链（myosin heavy chain，MHC）表达，即α-MHC和β-MHC，形成α-α和β-β同二聚体及α-β异二聚体，它们分别形成同功酶V1、V2和V3。V1具有最高的Ca2+和actin-activated ATPase活性，V2次之，V3为最低。正常心室肌以α-MHC表达为主，在左心室压力负荷增加时，机械牵张或神经体液因子可以刺激胚胎型β-MHC基因再表达增加。β-MHC与肌动蛋白的亲和力低于α-MHC，β-MHC基因再表达增加使心肌收缩力减弱、收缩速度减慢，导致心肌收缩功能减退。CCM可以增强心肌收缩力，其作用是否通过改变肌球蛋白重链表达尚需进一步研究。细胞凋亡是一种主动的细胞死亡，其整个过程需要蛋白的合成以及相关基因的调控才能完成，其中Bcl-2家族和Caspase家族是最重要的凋亡调控蛋白。凋亡的调控由十分复杂的信号网络系统控制，目前已知有3条主要信号通路：①线粒体通路；②死亡受体通路；③内质网通路。半胱胺酸-天冬氨酸蛋白酶（cysteine aspartate protease，Caspases-3）是体内细胞凋亡的执行者，凋亡的信号转导通路最终都能激活Caspases-3而水解各种细胞成分使细胞凋亡。乙醛脱氢酶2（acetaldehyde dehydrogenase，ALDH2）在依赖于线粒体提供能量的心脏表达特别多，研究发现其在心功能衰竭心肌中表达显着下降，ALDH2有抑制心肌细胞凋亡的作用。心肌细胞凋亡程度与心肌细胞表达Bcl-2/Bax的比率有关，Bcl-2/Bax的比率升高可以抑制心肌细胞凋亡，而Bcl-2/Bax的比率下降则促进心肌细胞凋亡。肌浆网是细胞内重要钙贮存器，其在胞浆中调节钙（calcium，Ca2+）浓度发挥着重要作用。Ca2+是心肌收缩和舒张活动的中心环节，肌浆网Ca2+-ATP酶（sarcoplasmic-endoplasmic-reticulum calcium ATPase，SERCA）在Ca2+的摄入、贮存和释放中发挥着关键作用。SERCA2分为SERCA2a，SERCA2b和SERCA2c三种亚型，心脏中主要是SERCA2a。肌浆网Ca2+摄取的两个关键因素是SERCA和受磷蛋白（phospho lamban，PLN）， PLN通过磷酸化和去磷酸化与SERCA2a作用，调节其Ca2+摄取功能。在人和实验动物心力衰竭模型中发现SERCA2a蛋白的表达及活性与正常心肌相比有明显降低。在慢性心衰情况下，心肌细胞功能失调的特征变化之一就是SERCA2a的活性及其mRNA表达下降，而增加SERCA2a的表达后可促进下降的心肌收缩力得到恢复，心功能得到改善。亦有研究发现在心力衰竭心肌中SERCA2amRNA表达与SERCA2a蛋白水平并不呈正相关，心肌心力衰竭发展的不同时期，SERCA2a的活性也不一样，而CCM增强心肌收缩力是否与SERCA2a及PLN对Ca2+摄入、贮存和释放的调节有关亦需进一步研究。本实验通过建立升主动脉缩窄心力衰竭兔模型，观察CCM对心力衰竭心功能影响，并探讨其可能机制。第一部分心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔心功能影响目的：通过升主动脉环扎法建立兔慢性心力衰竭模型，观察CCM对心功能的影响。方法：6月龄健康新西兰兔32只随机分为3组：假手术组（SHAM，n=8）、心衰模型组（HF，n=12）、CCM治疗组（CCM，n=12）。HF组与CCM组开胸后于升主动脉根部远端1.0cm处行环扎缩窄术；CCM组造模术中于左心室前壁近心尖部预置小儿临时起搏电极；SHAM组仅开胸，不给予主动脉环扎。三组分别于术前、术后4周、8周、12周行超声心动图检查，SHAM组、HF组于术后12周取血标本检测ANP、NT-proBNP。CCM组12周时给予绝对不应期电刺激（ARPES），每日6小时，持续一周，ARPES后采血标本检测。结果：1一般情况：32只新西兰兔，其中SHAM组8只术中无死亡，12周后均存活；HF组12只兔术中因气胸死亡2只，术后1只兔死于心力衰竭，12周时存活9只；CCM组12只兔术中死亡1只，术后死亡2只，1只兔自啮断电极导线，无法行CCM刺激而去组，12周时有效模型8只。24只兔造模成功17只，成功率70.8%；术前3组新西兰兔比较组间体重（Weight）、呼吸频率（R）和心率（HR）无明显差别；12周时HF组、CCM组兔临床表现为精神不振，活动少，口唇轻微紫绀，呼吸、心率比对照组增加，体重比对照组减少。2超声心动图指标变化：常规测量心脏超声指标，以LVEF＜50%为达到心衰标准。术前三组超声各项指标无明显差别。术后4周时三组兔的超声指标（如LVEF）比较虽有差异，但无统计学意义；8周时HF与CCM组有部分兔达到心衰标准；12周时HF与CCM组兔超声检查均达到LVEF＜50%的心衰标准。HF组和CCM组的IVS、IVPW、LVESD和LVEDD比SHAM组明显升高，而LVEF、LVFS和E/A比值在HF与CCM组比SHAM组明显下降。CCM组ARPES电刺激后心功能较HF组改善，差异有统计学意义。3血清心力衰竭标志物水平的比较：12周时HF组、CCM组血清ANP、NT-pro-BNP比对照组显着升高。而CCM组与HF组比较则显着降低，差异有统计学意义。结论：升主动脉环扎缩窄法可有效建立慢性心衰兔动物模型，CCM可增强心肌收缩力改善心衰兔的心功能。第二部分心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔的氧化应激的影响目的：观察慢性心力衰竭兔体内氧化应激的变化，探讨CCM对慢性心力衰竭兔的氧化应激的影响及机制。方法：8只CCM组兔，每天给予ARPES电刺激6小时，连续刺激一周，ARPES结束时采血标本，应用比色法检测血浆SOD、MDA、GSH-Px水平。SHAM、HF组兔12周时采血进行相应指标的检测结果：1CCM对慢性心力衰竭兔血浆SOD、GSH-Px水平的影响：HF组与SHAM组比较，血浆SOD、GSH-Px水平有明显下降，CCM组与SHAM组比较SOD、GSH-Px水平亦有下降，ARPES电刺激后CCM组SOD、GSH-Px水平比HF组有明显升高，差异有统计学意义。2CCM对慢性心力衰竭兔血浆MDA水平的影响：HF组与SHAM组比较，血浆MDA水平有明显升高，CCM组与SHAM组比较MDA水平亦有明显升高，CCM组MDA水平比HF组有明显下降，差异有统计学意义。3慢性心力衰竭兔的氧化应激与心衰程度关系分析：直线相关分析表明：NT-proBNP与SOD、GSH-Px呈负相关，相关系数r分别为（r=-0.809）、（r=-0.895）；NT-proBNP与MDA呈正相关（r=0.848）。ANP与NT-proBNP呈正相关性（r=0.914）。结论：心衰兔体内存在明显的过氧化损伤，CCM能够升高SOD及GSH-Px水平，降低MDA水平，这可能与CCM刺激能增加心肌收缩力，改善心脏的收缩和舒张功能有关；血浆MDA、SODG、SH-Px水平变化能够客观反映出CHF程度及其预后。第三部分心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔肌球蛋白重链表达的影响目的：观察慢性心力衰竭兔心室重构的发生发展，探讨CCM改善心力衰竭兔左心室重构的分子机制。方法：应用实时荧光定量反转录PCR、Western-blot方法对α-MHC、β-MHC mRNA及蛋白表达进行检测；应用酶联免疫吸附法测定血清中AngⅡ的含量；分离称重左心室心肌质量，计算左室心肌质量指数。结果：1HF组、CCM组血浆AngⅡ比SHAM组均有显着升高，差异有统计学意义；CCM组比HF组血浆AngⅡ虽有下降，但差异无统计学意义。2AngⅡ与ANP、NT-pro-BNP均呈正相关，相关系数分别为（r=0.946，r=0.875，P=0.000）。3CCM对α-MHC和β-MHC mRNA表达影响：α-MHC mRNA、β-MHC mRNA在三组中表达存在明显差异，α-MHC mRNA在HF组比SHAM组明显下降。CCM组与SHAM组比较α-MHC mRNA表达有下降，但两组差异无统计学意义；CCM在ARPES电刺激后α-MHC mRNA表达比HF组明显提高。β-MHC mRNA在HF组及CCM组均比SHAM组明显升高；CCM组在ARPES电刺激后β-MHC mRNA表达明显下降，与HF组比较差异有统计学意义。4CCM刺激对α-MHC and β-MHC蛋白表达影响：α-MHC蛋白表达水平在SHAM组与β-action参照比较处于较高水平表达，而β-MHC蛋白处于较低水平表达。HF组与CCM组的α-MHC蛋白表达水平明显下降而β-MHC蛋白表达明显升高。CCM组与HF组比较，ARPES电刺激后出现α-MHC蛋白表达水平的升高和β-MHC蛋白表达水平的下降。5左室质量指数LVMI在HF组与CCM组均比SHAM组明显增加，HF组与CCM组数值虽有差别，但差异无统计学意义。结论：心衰时LVMI及血浆AngⅡ增高，ARPES电刺激短期内对LVMI及AngⅡ的影响不显着；心肌α-MHC mRNA及蛋白表达减少，β-MHCmRNA及蛋白表达增多，心肌发生了明显重构。CCM治疗后α-MHCmRNA及蛋白表达水平增高，β-MHC mRNA及蛋白表达水平减少，显示CCM是通过改善心力衰竭兔心肌肌球蛋白重链蛋白表达，使心肌肌球蛋白重链逆重构而增强心脏收缩力的。第四部分心脏收缩调节对慢性心力衰竭兔心肌细胞钙收缩调节的影响目的：观察CCM对慢性心力衰竭兔心肌SERCA2mRNA、PLN mRNA及其蛋白水平的影响，探讨其在分子水平的作用机制。方法：应用RT-PCR、Western-blot方法检测心肌组织中的SERCA2a及PLN的mRNA及蛋白表达水平。结果：1CCM对SERCA2a及PLN mRNA表达影响：SERCA2a mRNA表达在HF组比SHAM组明显下降；CCM组与SHAM组比较有差异，但无统计学意义，CCM组在ARPES电刺激后SERCA2a mRNA基因表达较HF组明显提高。PLN mRNA表达在HF组、CCM组均比SHAM组明显升高，CCM组在ARPES电刺激后PLN mRNA表达明显下降，与HF组比较差异有统计学意义。SHAM组、HF组及CCM组的SERCA2a/PLN（S/P）比值的均值分别为0.86±0.07、0.057±0.001、0.38±0.07（P＜0.01）；CCM组经ARPES电刺激后，S/P比值在CCM组比HF组明显升高。2CCM对SERCA2a及PLN蛋白表达影响：以β-action为内参照，SHAM组SERCA2a蛋白表达水平与参照水平相似，处于较高水平表达，而PLN蛋白处于较低水平表达。HF组与CCM组中SERCA2a蛋白表达水平明显下降而PLN蛋白表达水平明显升高，ARPES电刺激后CCM组与HF组比较，SERCA2a和PLN蛋白表达水平出现反向变化，而PLN的变化更明显。3相关性分析显示NT-proBNP与SERCA2a呈负相关，相关系数r为（r=-0.856P=0.000）；NT-proBNP与PLN呈正相关（r=0.918P=0.000）；SERCA2a与PLN呈负相关性（r=-0.892P=0.000）。结论：兔心力衰竭时心肌SERCA2a mRNA及蛋白表达水平降低，PLNmRNA及蛋白表达水平升高；CCM治疗后SERCA2a mRNA及蛋白表达水平提高而PLN mRNA及蛋白表达水平下降，CCM通过影响钙调节蛋白mRNA及蛋白的表达而改善心脏收缩舒张功能。ARPES对PLNmRNA及蛋白表达影响更大，PLN可能是比SERCA2a更敏感的观察指标，S/P比值可能更能决定和反映心功能的改善。第五部分心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔心肌细胞凋亡的影响目的：通过制作兔升主动脉缩窄心力衰竭模型，观察在心力衰竭发展过程中心肌细胞的凋亡发生发展，探讨CCM改善心功能的抗细胞凋亡机制。方法：CCM组在电刺激术完成后、SHAM和HF组在12周时，处死动物模型直接留取左室心肌标本，应用RT-PCR、Western-blot方法检测心肌组织中的的Bcl-2、Bax、ALDH2和Caspases-3mRNA以及蛋白基因表达水平；流式细胞仪观察心肌细胞凋亡比率，TUNEL方法观察心肌细胞凋亡。结果：1CCM对Bcl-2及Bax mRNA表达影响：以GAPDH为内参照基因，Bcl-2、Bax mRNA表达在三组中存在明显差异，Bcl-2mRNA表达在HF组和CCM组均较SHAM组明显下降，而Bax mRNA表达明显升高，差异均有统计学意义。CCM组在ARPES刺激后Bcl-2mRNA表达比HF组明显提高，而Bax mRNA表达明显下降，差异均有统计学意义。三组中Bcl-2/Bax比率为分别为0.92±0.22、0.05±0.14、0.17±0.04，ARPES刺激后Bcl-2/Bax比率在CCM组比HF组明显升高。2以β-action为内参照，SHAM组Bcl-2蛋白处于较高水平表达，而Bax蛋白处于较低水平表达；在HF组和CCM组，Bcl-2蛋白表达水平明显下降而Bax蛋白表达明显升高。ARPES刺激后，CCM组与HF组比较，出现了Bcl-2蛋白表达水平的升高和Bax蛋白表达水平的下降。3ALDH2、Caspase-3mRNA表达在三组中差异有统计学意义。HF组与SHAM组比较，ALDH2表达明显下降而Caspase-3mRNA表达明显升高，差异有统计学意义；CCM组与SHAM组比较，ALDH2mRNA表达下降，但两组差异无统计学意义，而Caspase-3mRNA表达则有升高，差异有统计学意义。ARPES刺激后CCM组与HF组比较，ALDH2mRNA明显提高而Caspase-3mRNA明显下降，差异有统计学意义。4SHAM组与β-action内参照水平相似，ALDH2蛋白处于较高表达水平，Caspase-3处于较低水平表达；在心力衰竭模型HF组和CCM组中，ALDH2蛋白表达水平明显下降，Caspase-3蛋白表达水平明显升高；ARPES刺激后，CCM组与HF组比较可见ALDH2蛋白表达水平的升高和Caspase-3蛋白表达水平的明显下降。5流式细胞术观察心肌细胞凋亡变化：三组比较心肌细胞凋亡%存在明显差异，HF组与CCM组为心力衰竭模型，较SHAM组心肌细胞凋亡百分比明显增加，三组比较有统计学差异；CCM组经一周的ARPES刺激后凋亡细胞数比HF组明显下降，差异有统计学意义。6TUNEL法观察心肌细胞凋亡：可见SHAM组与正常参照相似，心衰模型组HF+CCM组比SHAM组凋亡小体增多，CCM组与HF组比较凋亡小体减少。结论：兔心衰时抗凋亡基因Bcl-2、ALDH2mRNA及蛋白表达减少，促凋亡基因Bax mRNA及蛋白表达增多，Caspase-3mRNA及蛋白表达增多，凋亡细胞百分比升高，表明慢性心力衰竭心肌存在明显凋亡；经CCM治疗后Bcl-2、ALDH2mRNA及蛋白表达增多，而Bax mRNA、Caspase-3mRNA及蛋白表达减少，Bcl-2/Bax比率升高，心肌凋亡细胞减少。表明CCM刺激在增强心肌收缩力、改善心功能同时可以逆转心肌细胞的凋亡的发生和发展，可能是其能增强心肌收缩力的途径之一。
闫东[6]（2012）在《乌腺金丝桃正丁醇萃取物抗快速型心律失常物质基础及机制研究》文中提出目的采用乌头碱、氯化钙两种方法分别诱发大鼠快速性心律失常模型,研究藤黄科金丝桃属植物乌腺金丝桃正丁醇萃取部位抗快速型心律失常作用及其物质基础,并通过观察分离的单体物质对心肌细胞膜Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶的影响探讨乌腺金丝桃发挥抗快速型心律失常作用的机理。方法一、运用Medlab生物信号采集处理系统,通过计算机自动采样分析记录心电图,研究乌腺金丝桃不同提取部位对乌头碱、氯化钙两种方法所诱发的实验性心律失常的作用效果。二、基于离体心脏灌流技术、色谱分离法和波谱鉴定法等技术,分离出乌腺金丝桃抗心律失常有效部位中的化合物三、采用无机磷比色法检测乌腺金丝桃抗快速型心律失常有效部位的化合物对大鼠心肌细胞膜Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶活力的影响；结果一、乌腺金丝桃正丁醇萃取物能够延长乌头碱、氯化钙诱发的大鼠快速型心律失常的出现时间,缩短心律失常持续时间,与模型组比较差异具有统计学意义, P<0.05。二、从乌腺金丝桃正丁醇萃取物中,分离和鉴定了芦丁和金丝桃苷2种化合物。三、金丝桃苷能够提高快速型心律失常大鼠心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶活力及Ca2+-Mg2+-ATP酶活力,与空白对照组比较,差异具有统计学意义, P<0.05。结论一、乌腺金丝桃对乌头碱、氯化钙两种方法诱发的快速型心律失常动物模型均有明显的拮抗作用,表明乌腺金丝桃具有较好的抗快速型心律失常作用。二、芦丁和金丝桃苷是乌腺金丝桃抗快速心律失常的有效成分。其中金丝桃苷作用明显,被确定为乌腺金丝桃抗快速心律失常的物质基础之一。三、从乌腺金丝桃中分离的有效化合物金丝桃苷能够提高快速型心律失常大鼠心肌细胞膜的Na+-K+-ATP酶及Ca2+-Mg2+-ATP酶的活力,表明乌腺金丝桃抗快速型心律失常的作用机制可能与调节心肌细胞膜Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶活力有关。芦丁无以上药理作用,其组分抗快速性心律失常的作用可能是通过其他途径实现的。
于晓明[7]（2012）在《快律宁胶囊抗快速心律失常的离体药效学实验研究》文中进行了进一步梳理目的：探讨快律宁（以下简称为KLN）胶囊对大鼠离体心脏心室肌细胞电生理的影响及有无促心律失常的风险，探讨KLN胶囊对外源性自由基所致心律失常的影响并分析其作用机制。方法：实验一：将SPF级SD大鼠分为对照组、普罗帕酮组和KLN胶囊高、中、低剂量组，将对照组分别与用药组进行组间比较，将普罗帕酮组与KLN三个剂量组进行组内比较。1.观察KLN胶囊对大鼠离体心室肌细胞动作电位APD50、APD90、APA、VMAX、EAD等电生理指标，分析其作用机制；2.分别将各组用药前后的RR间期、QT间期、QTc进行比较，分析KLN胶囊有无促心律失常的风险。实验二：将SPF级SD大鼠分为对照组、维拉帕米组和KLN胶囊高、中、低剂量组，采用Langendoff灌流装置对大鼠离体心脏灌注硫酸亚铁/抗坏血酸的方法，复制外源性自由基所致大鼠心律失常模型，对比研究KLN胶囊与维拉帕米对其的保护作用。结果：实验一：1.与对照组相比，KLN胶囊高、中剂量组的APD50、APD90均有延长（p<0.01），而且具有剂量依赖性。低剂量组则不明显（p>0.05）。组内比较显示，普罗帕酮组的APD50、APD90均长于KLN胶囊三个剂量组（P<0.01）。2.与对照组相比，KLN胶囊可以剂量依赖的减小VMAX，其中高、中剂量组减小尤为明显（P<0.01），组内比较显示，KLN胶囊三个剂量组与普罗帕酮的VMAX无显着性差异（P>0.05）。3.与对照组相比，KLN胶囊可以剂量依赖的降低APA，组内比较显示普罗帕酮组的APA与KLN胶囊中低剂量相比有显着差异,普罗帕酮组的APA较低（P<0.01）,与高剂量组相比则无显着性差异（P>0.05）。4.KLN胶囊高中低三个剂量组的R-R间期用药后均有显着延长（P<0.05），而且呈剂量依赖性。5.KLN胶囊三个剂量组用药前后的QT间期及QTc无显着性差异（P>0.05）。6.普罗帕酮组用药后的RR间期、QT间期和QTc均有显着延长（P<0.05）)7.KLN胶囊三个剂量组在灌流过程中均未诱发EAD，普罗帕酮组则有4例出现了EAD，经统计EAD发生率有显着性差异（P<0.01）。实验二：1.与对照组相比，KLN胶囊可以剂量依赖的减少对外源性自由基所诱发VEB、VT的发生次数（P<0.01）。2.KLN胶囊三个剂量组及维拉帕米组均未出现VF，而对照组则诱发出VF，但经统计无显着性差异（P>0.05）。3.与对照组相比，KLN胶囊高剂量组心律失常的出现时间较晚（P<0.05）,而KLN胶囊中低剂量组、维拉帕米组心律失常的出现也有推迟的趋势，但经统计无显着性差异（P>0.05）。4.与对照组相比，KLN胶囊三个剂量组的心率明显减慢，而且呈剂量相关性。5.与对照组性比，KLN胶囊高、中剂量组的心律失常评分明显降低（P<0.05）,而KLN胶囊低剂量组和维拉帕米组则与对照组无显着性差异（P>0.05）。结论：1.KLN胶囊可以剂量依赖的对正常大鼠离体心脏电生理产生影响，而对QT间期无影响，因此可能具有较低的致心律失常的风险。2.KLN胶囊对外源性自由基诱发的心律失常可能具有预防和治疗作用，可以明显减慢心率，并可能对恶性心律失常（VT、VF）的发生具有一定的预防和治疗作用，其疗效优于维拉帕米。3．KLN胶囊抗快速型心律失常的机制可能与同时作用于钾通道、钠通道，钙通道有关，同时可能对自由基具有清除作用，抑制钙超负荷，可能具有多靶点治疗作用特点，是一种类似于Ⅲ类和Ic类和IV类复合作用的抗心律失常药物，因此对快速型心律失常可能具有很好的疗效，并可能具有较低的致心律失常的风险，具有很好的研究前景。
PETRONIS EROTOKRITOU[8]（2012）在《快律宁胶囊及其含药血清对大鼠心室肌细胞内钙离子平均荧光强度的作用》文中认为目的观察快律宁胶囊（以下简称为KLN）及其含药血清对单个大鼠心室肌细胞内钙离子(Ca2+)平均荧光强度的影响。方法将SD大鼠随机分为空白对照组和KLN高、中、低剂量组，分别灌胃给药后取血，制备KLN含药血清。分离单个大鼠心室肌细胞，Fluo-3/AM探针进行荧光标记，用激光共聚焦显微镜扫描观察，于第2次和第3次扫描之间加入药物。观察KLN对静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度和对心肌细胞钙库释放的影响，以及KLN含药血清对静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度的影响。结果①与对照组相比，KLN高、中、低剂量均能明显升高静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度（P<0.05），均随时间延长呈逐渐增高趋势，升高的程度呈剂量依赖性。②与对照组相比，KLN高、中剂量能明显升高无钙台氏液中心肌细胞胞浆Ca2+平均荧光强度（P<0.01），促进心肌细胞钙库释放，随时间推移，心肌细胞内Ca2+平均荧光强度呈逐渐上升趋势，高剂量KLN的作用与中剂量相比更加迅速、显着。而低剂量KLN对心肌细胞内Ca2+平均荧光强度的影响与对照组相比无显着性差异（P>0.05）。③与正常血清对照组相比，KLN高、中剂量含药血清可明显增加静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度（P<0.01），而低剂量对静息细胞胞浆Ca2+平均荧光强度的影响则与正常血清对照组无明显统计学差异（P>0.05）。结论KLN既能促进心肌细胞自发的外钙内流，又能促进心肌细胞内的钙库释放。前者说明KLN抗心律失常作用与其对Ca2+通道的作用有关，而后者说明本药还可能具有正性肌力作用。KLN含药血清的作用效果与直接向细胞外液中加入KLN结果一致。
张晓云,薛淑芳,陈立峰,王雪芳,马建伟,赵兰平[9]（2012）在《炙甘草汤干预缺氧对离体豚鼠心肌细胞跨膜电位的影响》文中认为目的:本实验通过观察炙甘草汤对缺血缺氧心肌电生理活动的影响,探讨其对心肌的保护和抗心律失常作用的机制。方法:玻璃微电极细胞内记录的方法,观察正常灌流液、缺血缺氧灌流液和缺血缺氧+炙甘草汤（20mg/ml、40mg/ml and 80mg/ml）灌流液对豚鼠左心室流出道慢反应自律细胞及心室乳头肌细胞动作电位的影响。结果:（1）缺血缺氧时左室流出道细胞APD50、APD90和APD均明显缩短（P<0.05）,VDD及RPF显着变慢（P<0.01）;而加入不同剂量炙甘草汤（20mg/ml、40mg/ml and80mg/ml）可剂量依赖性的拮抗由缺血缺氧介导的APD50、APD90和APD的缩短（P<0.05,0.01或0.001）,使VDD及RPF加快基本恢复正常的节律。此种干预作用以80mg/ml炙甘草汤最为明显。（2）缺血缺氧时心室肌细胞的Vmax、APD50和APD90及APD均明显减小（P<0.05）;在缺血缺氧灌流液中加入不同剂量的炙甘草汤后上述效应得到明显改善。结论:提示炙甘草汤对缺血缺氧导致的左心室流出道慢反应自律细胞的异常电生理所诱发的心律失常及心肌细胞损伤有显着保护作用。
沈剑,沈辉娟,杨栋,王伟,许斌浩,沈岳良,王如伟,谢强敏,颜小锋[10]（2011）在《改良技术虫草头孢菌粉提取物对缺血性心律失常和心肌细胞动作电位的影响》文中进行了进一步梳理目的观察采用改良技术获得的虫草头孢菌粉（Cordyceps Cephalosporium Mycelia,CCM）提取物对豚鼠乳头肌动作电位的影响,探讨CCM提取物实验性抗室性心律失常的机制。方法利用垂体后叶素（Pit）诱发的大鼠缺血性心律失常模型,观察用药前后心电图的改变。采用标准玻璃微电极技术,记录豚鼠乳头肌跨膜动作电位（TAP）。在频率为1.0 Hz刺激下,观察不同浓度的CCM提取物（10,30,100 mg.L 1）对标准Tyrode液灌流心肌TAP的影响。结果大鼠在尾静脉注射Pit后,其心电图T波波幅发生双向性改变,CCM提取物可明显减弱Pit对T波的影响,并降低Pit诱导的心律失常发生率。不同浓度的CCM提取物可浓度依赖性地降低动作电位幅度（APA）以及0相最大上升速率（Vmax）;可延长动作电位复极50%和90%的时间（APD50、APD90）;但对静息电位（RP）无明显影响。结论改良技术获得的CCM对APA和Vmax的抑制及对心室肌APD的延长可能是其抗心律失常作用的电生理基础。
二、三黄提取液对豚鼠心室乳头肌跨膜电位的作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、三黄提取液对豚鼠心室乳头肌跨膜电位的作用（论文提纲范文）
（1）益气活血安神法通过抑制钙超载减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 文献综述 |
| 综述一 心肌缺血再灌损伤的西医研究进展 |
| 1 心肌缺血再灌注损伤及表现 |
| 2 心肌缺血再灌注损伤的可能机制 |
| 3 心肌缺血再灌注损伤的干预 |
| 4 结语 |
| 参考文献 |
| 综述二 心肌缺血再灌注损伤的中医研究进展 |
| 1 历代医家对胸痹的认识 |
| 2 对心肌缺血再灌注损伤中医病因病机认识 |
| 3 益气活血安神立法依据 |
| 4 方药组成与解析 |
| 5 结语 |
| 参考文献 |
| 综述三 中药干预钙超载研究进展 |
| 1 钙超载及其机制 |
| 2 钙超载引起MIRI的机制及西医防治 |
| 3 中医药干预钙超载 |
| 4 目前存在的问题及应对策略 |
| 参考文献 |
| 实验研究 益气活血复方对大鼠心肌缺血再灌注损伤影响的实验研究 |
| 研究背景 |
| 实验一 益气活血复方对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心脏射血分数和梗死区/缺血区面积百分比的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 益气活血复方对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌钙超载及细胞凋亡的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 益气活血复方对心肌缺血再灌注大鼠钙超载、细胞凋亡下游信号通路的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附件 |
（2）基于L型钙电流研究益气药干预心衰电生理重构机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 心力衰竭室性心律失常的触发机制与药物防治靶点 |
| 1 心力衰竭电生理重构 |
| 2 触发活动是心衰室性心律失常发生的主要机制 |
| 3 心肌触发活动的本质 |
| 4 心衰时触发活动产生的病理生理基础 |
| 5 心衰室性心律失常的药物干预靶点 |
| 6 中医药防治靶点 |
| 7 小结 |
| 8 参考文献 |
| 综述二 从CaMKII信号通路探讨益气药防治心衰的优势特点 |
| 1 CaMKII激活与心力衰竭 |
| 2 CaMKII参与心力衰竭的病生理机制 |
| 3 心气虚证与慢性心力衰竭 |
| 4 CaMKII可能是慢性心力衰竭心气虚证实质研究的切入点 |
| 5 小结 |
| 6 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 益气药对心衰小鼠心功能及QT间期的干预作用 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 实验二 益气药对心衰细胞动作电位及L型钙电流的干预作用 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 实验三 益气药对心衰左室L型钙通道及CaMII表达的干预作用 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 存在问题与不足 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（3）安律胶囊治疗冠心病室性早搏的临床观察（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1.冠心病室性早搏，祖国医学对其研究的概况 |
| 2.现代医学对冠心病心律失常室性早搏的研究概况 |
| 临床研究 |
| 1.一般资料 |
| 2.诊断标准 |
| 3.病例选择标准 |
| 4.研究方法 |
| 5.统计学处理 |
| 6.临床资料分析 |
| 7.安全性评价结果 |
| 讨论 |
| 1.痰瘀互结与冠心病室性早搏的关系 |
| 2.安律胶囊药物配伍分析 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（4）中药抗心律失常的临床与基础研究进展（论文提纲范文）
| 1 中医对心律失常的认识 |
| 2 治法方药研究 |
| 3 经典方的研究 |
| 4 现代组方研究 |
| 5 常用药物及其单体研究 |
| 6 问题与展望 |
（5）心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔心功能影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔心功能影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔的氧化应激的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔肌球蛋白重链表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔心肌细胞钙收缩调节的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第五部分 心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔心肌细胞凋亡的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）乌腺金丝桃正丁醇萃取物抗快速型心律失常物质基础及机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 有关心律失常的中医文献述要 |
| 1.1 古代文献对心律失常的认识 |
| 1.2 心律失常的现代临证研究进展 |
| 2.心律失常的西医学研究进展 |
| 2.1 心律失常的分型 |
| 2.2 心律失常的发生机制 |
| 2.3 心律失常的药物治疗 |
| 2.4 心律失常的实验研究方法 |
| 3.药材乌腺金丝桃的研究进展 |
| 3.1 乌腺金丝桃的植物学特征 |
| 3.2 乌腺金丝桃的药用研究 |
| 实验研究 |
| 第一部分 乌腺金丝桃正丁醇萃取物抗快速型心律失常 |
| 1 乌腺金丝桃正丁醇萃取物的提取 |
| 1.1 实验材料与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2.乌腺金丝桃正丁醇萃取物对乌头碱诱发大鼠快速性心律失常的影响 |
| 2.1 实验药物 |
| 2.2 实验动物 |
| 2.3 试剂 |
| 2.4 实验仪器 |
| 2.5 实验方法 |
| 2.6 统计方法 |
| 2.7 实验结果 |
| 3.乌腺金丝桃正丁醇萃取物对氯化钙诱发的大鼠快速型心律失常的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 统计方法 |
| 3.4 实验结果 |
| 4.第一部分实验总结 |
| 第二部分 乌腺金丝桃抗心律失常有效部位化学成分的研究 |
| 1 实验材料与仪器 |
| 1.1 药材与药品 |
| 1.2 实验仪器 |
| 2.试验方法 |
| 2.1 上柱前处理 |
| 2.2 洗脱剂的选择 |
| 2.3 装层析柱 |
| 2.4 层析过程 |
| 2.5 样品收集 |
| 3.合并的8个流份,分别进行离体心脏灌流实验 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 统计方法 |
| 3.4 实验结果 |
| 4.再次硅胶柱层析 |
| 5.应用HPLC检测组分 |
| 第三部分 乌腺金丝桃抗快速型心律失常活性成分作用机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3.统计方法 |
| 4.实验结果 |
| 讨论 |
| 1.乌腺金丝桃正丁醇萃取物抗心律失常作用研究 |
| 2.乌腺金丝桃抗心律失常作用的活性物质研究 |
| 3.金丝桃苷抗快速型心律失常作用机制研究 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
（7）快律宁胶囊抗快速心律失常的离体药效学实验研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 研究背景 |
| 1 中医对快速型心律失常的认识及研究 |
| 1.1 疾病范畴 |
| 1.2 病机认识 |
| 1.3 治疗 |
| 2 西医对快速型心律失常的研究进展 |
| 2.1 快速型心律失常的发病病因 |
| 2.2 快速型心律失常的发生机制 |
| 2.3 心律失常的药物治疗 |
| 2.4 非药物治疗 |
| 3 中药抗快速型心律失常的实验研究 |
| 3.1 单味中药抗心律失常的实验研究 |
| 3.2 复方抗心律失常的实验研究 |
| 3.3 目前常用的实验研究方法 |
| 4 KLN 胶囊治疗阴虚火旺型快速型心律失常机制 |
| 4.1 心阴虚火旺是快速型心律失常的重要病机之一 |
| 4.2 心悸阴虚火旺证的治法 |
| 4.3 KLN 胶囊组方分析 |
| 4.4 快律宁（KLN）胶囊前期实验研究结果 |
| 4.5 “快律宁（KLN）”前期临床研究结果 |
| 4.6 本课题来源 |
| 4.7 实验技术路线图 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 KLN 胶囊对大鼠离体心室肌细胞电生理特性的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要设备和仪器 |
| 1.2 主要试剂及其配制 |
| 1.3 动物选择 |
| 1.4 实验分组 |
| 1.5 分组给药 |
| 1.6 电生理参数记录方法 |
| 1.7 统计学方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 KLN 胶囊对大鼠左心室肌细胞动作电位 APD50、APD90 影响 |
| 2.2 KLN 胶囊对大鼠左心室肌细胞动作电位 VMAX、APA 影响 |
| 2.3 KLN 胶囊对大鼠左心室 R-R 间期、QT 间期的影响 |
| 2.4 KLN 胶囊对 EAD 发生率的影响 |
| 讨论 |
| 1 正常心肌细胞动作电位电生理特点 |
| 2 抗心律失常药的电生理作用 |
| 3 KLN 胶囊对大鼠离体心脏动作电位时程(APD)的影响 |
| 4 KLN 胶囊对大鼠离体心脏动作电位 APA、VMAX 的影响 |
| 5 KLN 胶囊与普罗帕酮对大鼠离体心脏心室肌细胞动作电位影响的比较 |
| 6 KLN 胶囊对大鼠离体心脏 QT 间期的影响 |
| 7 KLN 胶囊促心律失常的风险研究 |
| 8 KLN 胶囊组方药物抗心律失常的离子通道研究 |
| 8.1 黄连 |
| 8.2 苦参 |
| 8.3 生地黄 |
| 8.4 当归 |
| 8.5 酸枣仁 |
| 8.6 柏子仁 |
| 8.7 小结 |
| 9 KLN 胶囊抗心律失常电生理机制分析 |
| 实验二 KLN 胶囊对外源性自由基所致心律失常的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要设备和仪器 |
| 1.2 主要试剂及其配制 |
| 1.3 动物选择 |
| 1.4 分组方法 |
| 1.5 Langendoff 心脏灌流 |
| 1.6 分组灌流给药 |
| 1.7 实验观察指标 |
| 1.8 统计学方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 心律失常个数的比较 |
| 2.2 心律失常出现时间、心率差及心律失常评分的比较 |
| 讨论 |
| 1 自由基致心律失常的机制 |
| 2 外源性自由基致心律失常实验研究 |
| 3 KLN 胶囊对外源性自由基诱发心律失常的保护作用 |
| 4 KLN 胶囊与维拉帕米抗外源性自由基所致心律失常作用比较 |
| 5 KLN 胶囊抗外源性自由基诱发心律失常机制分析 |
| 6 小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 发表论文 |
（8）快律宁胶囊及其含药血清对大鼠心室肌细胞内钙离子平均荧光强度的作用（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 研究背景 |
| 1 历代中医家对心悸的认识 |
| 1.1 《黄帝内经》中心悸相关记载 |
| 1.2 张仲景对心悸的认识 |
| 1.3 隋唐时期心悸证治的发展 |
| 1.4 宋金元时期心悸证治的发展 |
| 1.5 明清时期心悸证治的发展 |
| 1.6 当代名医治疗心悸经验 |
| 2 现代医学对快速性心律失常的认识 |
| 2.1 快速性心律失常的发生机制 |
| 2.2 快速性心律失常的治疗 |
| 3 快速性心律失常的病机及治法 |
| 3.1 阴虚火旺是快速性心律失常的重要病机 |
| 3.2 清心火、养心阴、安心神是快速性心律失常的重要治法 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 动物选择 |
| 1.2 主要设备和仪器 |
| 1.3 主要试剂及溶液配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 快律宁含药血清的制备 |
| 2.2 单个大鼠心室肌细胞的分离 |
| 2.3 荧光探针标记 |
| 2.4 钙离子平均荧光强度变化测定 |
| 2.5 数据处理及统计学方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 快律宁胶囊对静息细胞胞浆钙离子平均荧光强度的影响 |
| 3.2 快律宁胶囊对心肌细胞钙库释放的影响 |
| 3.3 快律宁含药血清对静息细胞胞浆钙离子平均荧光强度的影响 |
| 讨论 |
| 1 心室肌细胞内钙离子平均荧光强度测定原理 |
| 2 钙离子与心肌细胞电生理 |
| 2.1 钙离子与心肌细胞动作电位 |
| 2.2 钙离子与心肌收缩性 |
| 3 细胞膜钙离子通道 |
| 4 快律宁胶囊组方分析及现代药理研究 |
| 4.1 快律宁胶囊处方分析 |
| 4.2 快律宁胶囊中单味中药对细胞内钙离子作用的现代药理研究 |
| 5 血清药理学研究 |
| 5.1 运用血清药理学方法研究中药药理的意义 |
| 5.2 动物选择 |
| 5.3 给药方法 |
| 5.4 含药血清浓度控制 |
| 5.5 血清添加量 |
| 5.6 血清的处理 |
| 6 快律宁胶囊对心室肌细胞内钙离子平均荧光强度的作用 |
| 7 快律宁含药血清对心室肌细胞内钙离子平均荧光强度的作用 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 科技查新报告 |
| 致谢 |
| 博士学位说文摘要 |
（9）炙甘草汤干预缺氧对离体豚鼠心肌细胞跨膜电位的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验药物 |
| 1.2 动物 |
| 1.3 仪器 |
| 1.4 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 炙甘草干预缺血缺氧介导的豚鼠左心室流出道动作电位的效应 |
| 2.2 炙甘草干预缺血缺氧对豚鼠心室乳头肌动作电位的效应 |
| 3 讨论 |
（10）改良技术虫草头孢菌粉提取物对缺血性心律失常和心肌细胞动作电位的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 药品和试剂 |
| 1.3 Pit诱发的大鼠心肌缺血模型及心电图记录 |
| 1.4 豚鼠心室乳头肌标本的制备 |
| 1.5 TAP的记录 |
| 1.6 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 CCM提取物对Pit诱导的心肌缺血大鼠心电图的影响 |
| 2.2 不同浓度CCM提取物对心室肌细胞RP的影响 |
| 2.3 不同浓度CCM提取物对心室肌细胞跨膜动 |
| 2.4 不同浓度CCM提取物对心室肌细胞动作电位0相最大上升速率 (maximal velocity, Vmax) 的影响 |
| 2.5 不同浓度CCM提取物对心室肌细胞动作电位复极 (APD) 的影响 |
| 3 讨论 |
四、三黄提取液对豚鼠心室乳头肌跨膜电位的作用（论文参考文献）
- [1]益气活血安神法通过抑制钙超载减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验研究[D]. 李俊平. 中国中医科学院, 2016(01)
- [2]基于L型钙电流研究益气药干预心衰电生理重构机制[D]. 李思耐. 北京中医药大学, 2016(08)
- [3]安律胶囊治疗冠心病室性早搏的临床观察[D]. 张玉玲. 黑龙江省中医药科学院, 2016(02)
- [4]中药抗心律失常的临床与基础研究进展[J]. 魏华民,吴红金. 中西医结合心脑血管病杂志, 2015(02)
- [5]心脏收缩力调节对慢性心力衰竭兔心功能影响及其机制研究[D]. 刘惠良. 河北医科大学, 2014(09)
- [6]乌腺金丝桃正丁醇萃取物抗快速型心律失常物质基础及机制研究[D]. 闫东. 黑龙江中医药大学, 2012(12)
- [7]快律宁胶囊抗快速心律失常的离体药效学实验研究[D]. 于晓明. 山东中医药大学, 2012(12)
- [8]快律宁胶囊及其含药血清对大鼠心室肌细胞内钙离子平均荧光强度的作用[D]. PETRONIS EROTOKRITOU. 山东中医药大学, 2012(02)
- [9]炙甘草汤干预缺氧对离体豚鼠心肌细胞跨膜电位的影响[J]. 张晓云,薛淑芳,陈立峰,王雪芳,马建伟,赵兰平. 中药药理与临床, 2012(01)
- [10]改良技术虫草头孢菌粉提取物对缺血性心律失常和心肌细胞动作电位的影响[J]. 沈剑,沈辉娟,杨栋,王伟,许斌浩,沈岳良,王如伟,谢强敏,颜小锋. 中国现代应用药学, 2011(12)