一、鸡溃疡性肠炎灭活苗的制备与应用研究（论文文献综述）
王选[1]（2011）在《鸡源抗腹泻芽孢益生菌J-4菌株的筛选、鉴定、发酵条件优化及动物饲喂试验》文中指出近些年,疫病的不断出现,成为制约养鸡业发展的重要因素,尤其是鸡大肠杆菌性腹泻大面积发生,传染性强,死亡率高。目前,鸡饲料中普遍使用亚治疗剂量的抗生素类添加剂抑制和杀灭病原菌,这给养殖业带来一系列问题。首先在杀病原菌的同时也抑杀了鸡体内正常共生的菌群,破坏了微生态平衡；其次使鸡体内的耐药病原菌或变异病原菌不断产生；更严重的是鸡不断向环境中排泄这些抗生素或其代谢产物,使环境中的耐药病原菌与变异病原菌不断出现。这迫使养殖户增加抗生素用药量,更新用药品种,从而造成了变异病原菌高耐药性,肠道微生态环境进一步破坏。大量研究表明微生态制剂可调整机体的微生态平衡,在防治腹泻的同时也避免了耐药性的产生,有着抗生素无法比拟的优点,非常具有发展潜力,世界各国陆续积极地倡导和推广,使其受到瞩目。本试验从健康青年鸡粪便中分离得到的300株产芽孢菌株中分离得到152株菌具有体外抗大肠杆菌活性,其中J-4菌株的抗菌活性最强。对该菌株进行了菌落、菌体、芽孢形态观察,生理生化鉴定和16SrDNA系统发育树的构建,鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。微生态制剂分泌的抗菌肽具有较高抗菌活性、易降解等优点。本试验对J-4菌株的发酵液进行了分析,分别采用有机溶剂萃取,盐析,蛋白酶敏感性试验,酸耐受性试验,高温耐受性试验,初步断定该菌株分泌的抗菌物质是肽类。大多数益生菌在体外具有良好的抗菌活性,而到体内往往失效,其主要原因是消化道内的胃酸、胆盐、肠液,使菌体死亡。为了克服这些缺陷,对J-4菌株进行了胃酸、胆盐、肠液耐受性试验,在pH值为2.0环境中3h仍能存活90%,能够耐受0.3%的胆盐,在肠液中3h存活率为80%,适宜在消化道内存活和定植。J-4芽孢80℃保温70 min后仍有88%以上存活,有望成为益生菌菌株。为了提高防治腹泻的芽孢益生菌发酵液菌体浓度,对J-4菌株的发酵条件进行了优化,通过单因素试验和正交试验发现玉米粉为最佳碳源,花生饼粉为最佳氮源,MnSO4·H2O为最佳无机盐,确定J-4的最佳发酵条件为：玉米粉1%,花生饼粉2%,MnSO4·H2O 0.07%, NaH2PO4·2H2O 0.2%, Na2HPO4·2H2O 0.4%,初始pH 7.0,三角瓶装液量为30 mL/250 mL,接种量2%,摇瓶转速220 r/min,发酵温度37℃。培养条件优化后发酵液浓度显着提高：优化前发酵菌体浓度最高为2.23x108cfu/mL,优化后可达1.83x109cfu/mL,提高了7.2倍,而芽孢率在95%以上,为该菌的进一步研究与应用奠定了基础。将J-4菌株发酵液进行了小白鼠和雏鸡饲喂的安全性试验,15天后未发现小白鼠和雏鸡脏器、肠道的任何病变,证明此菌株为枯草芽孢杆菌安全菌株。为了进一步研究该菌的防治腹泻效果,建立了小白鼠大肠杆菌性腹泻模型,用J-4菌株发酵液进行饲喂,发现饲喂后小鼠盲肠内乳酸菌有益菌增多,而大肠杆菌等有害菌明显减少,试验组腹泻率和死亡率明显低于空白对照组；又建立了鸡的大肠杆菌性腹泻模型,J-4菌株对其进行了有效的预防和治疗。J-4益生菌株的抗鸡腹泻饲喂试验达到了良好的效果,为鸡大肠杆菌性腹泻的益生菌预防和治疗提供了新菌株。
邓久虎[2]（2011）在《鸡源鲍氏志贺菌间接ELISA及免疫组化检测方法的建立和应用研究》文中提出鸡志贺菌病是近年发现的由鸡源志贺菌引起鸡的一种新发急性传染病,可引起不同品种、不同日龄的鸡发生腹泻,并可导致雏鸡死亡。当前的研究结果表明,鸡源志贺菌病流行范围广泛,危害严重,其传播流行给我国养禽业造成了巨大的经济损失。相关资料显示,志贺菌可以在人禽间传播并造成交互感染,这就给人类公共卫生安全造成了严重隐患。因此,针对鸡源志贺菌病展开研究不但具有重要的兽医卫生学意义,而且具有重大的医学公共卫生学意义。本课题以鸡源鲍氏志贺菌（S.boydii）为研究材料,建立了2种鲍氏志贺菌的检测方法,其研究结果如下:?1包被鸡源鲍氏志贺菌脂多糖（LPS）抗原检测鸡鲍氏志贺菌感染抗体间接ELISA方法的建立及应用以鸡源鲍氏志贺菌菌体提取的LPS成分作为诊断抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功建立了检测鸡源鲍氏志贺菌的间接ELISA方法。通过对间接ELISA反应条件的一系列研究,确定了各组分的最适工作条件:鸡源志贺菌LPS抗原最适包被浓度为5μg/ml,最适包被条件为4℃过夜;待检血清的最佳稀释度为1:160,与包被抗原在37℃作用1h;酶标二抗的最适工作浓度为1:2000,血清与酶标二抗的反应条件为37℃1h;最适封闭条件为37℃作用1h;底物最适反应条件为室温避光20 min;阴阳性临界值为0.385。经特异性试验、敏感性试验和重复性试验,表明建立的间接ELISA方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点。应用已建立的间接ELISA检测方法对采自河南省不同地区的268份鸡血清样品进行检测,检出阳性血清93份,阳性率达34.70%。该方法可用于鸡鲍氏志贺菌病的血清学诊断和流行病学调查,具有重要的推广应用价值。2免疫组化检测石蜡切片中鸡源鲍氏志贺菌方法的建立及应用于实验感染鸡组织抗原定位的研究2.1免疫组化检测石蜡切片中鸡源鲍氏志贺菌方法的建立以鸡源鲍氏志贺菌为抗原制备铝胶灭活疫苗,免疫小鼠制备小鼠抗鸡源鲍氏志贺菌高免血清,并用饱和硫酸铵法提取小鼠抗鸡源鲍氏志贺菌IgG,通过DEAE离子交换层析纯化小鼠抗鸡源鲍氏志贺菌-IgG,建立了免疫组化（IHC）检测感染鸡石蜡组织切片中鸡源鲍氏志贺菌的方法。2.2免疫组化检测鸡源鲍氏志贺菌实验感染鸡组织抗原定位的研究应用建立的免疫组化方法对实验感染死亡鸡只的新鲜病料进行检测,对体内抗原的分布进行研究,结果显示:腹腔注射感染小鸡在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、十二指肠、回肠、盲肠和直肠中都能够检测到鸡源鲍氏志贺菌抗原,而且该菌抗原大部分位于各组织细胞、吞噬细胞、单核细胞、淋巴细胞等阳性细胞的细胞质和细胞膜中。本研究为探讨鸡源鲍氏志贺菌的致病机制提供了可靠依据。
李冉[3]（2011）在《猪链球菌感染猪脾脏的表达谱研究及新型亚单位疫苗研制》文中认为猪链球菌（Streptococcus suis, S.suis）是引起猪链球菌病的主要病原,能引起猪的脑炎、败血病、肺炎、心内膜炎及关节炎等。猪链球菌有33个血清型（1-31型,33型及1/2型）,其中猪链球菌2型（SS2）致病力最强且最为流行。为了深入研究该菌的致病机理及宿主应对其引起感染的免疫应答机制,本研究采用Affymetrix猪全基因组芯片检测猪感染SS2后脾脏基因表达谱变化,通过生物信息学等方法分析以期为该病致病机理及宿主的免疫机制研究提供基础资料。另外,对本实验室研究发现的新型SS2表面蛋白进行亚单位疫苗试验研究,以期获得一种能有效预防多种血清型猪链球菌病的亚单位疫苗。主要研究内容如下：1.猪链球菌2型感染仔猪转录组学研究本试验采用高致病性SS2、无致病力基因缺失菌株分别感染仔猪,同时设置PBS模拟感染对照组,对感染后3天脾脏样品进行全基因表达谱变化分析,探索宿主对该病原的免疫应答反应及其致病机理。试验结果显示高致病性菌株感染组与模拟感染组相比,基因表达谱有明显的不同。高致病性菌株感染组共有120个转录本代表104个基因上调表达,132个转录本代表129个基因下调表达。而无致病力菌株感染组与模拟感染组相比基因表达谱基本一致,差异表达基因很少。通过生物信息学分析发现上调表达的基因主要与免疫应答反应相关,如参与炎性应答反应、急性期反应、蛋白粘附及应激反应等；下调表达基因则主要参与转录、转运、物质及能量代谢等,这些基因的下调表达可能与SS2感染后宿主细胞活性降低有关。结合芯片及细胞体外感染试验结果发现SS2感染后TLR受体家族中仅TLR2上调表达。因此推测该菌感染猪并引起严重的炎症应答反应可能主要是通过TLR-2信号通路的激活来实现的。另外,芯片结果显示细胞表面另一受体TREM-1也显着上调表达。为了研究该蛋白在感染过程中的作用,本研究通过对宿主体内膜型TREM-1的调节来研究该受体在感染SS2后宿主早期免疫应答过程中的作用。分别采用竞争抑制剂或激活物对体内TREM-1进行调节,比较两种不同处理方式小鼠对SS2的感染情况。结果发现在感染早期,激活TREM-1能显着增强机体炎症反应,高水平的促炎因子释放有利于机体快速清除病原,提高存活率。而感染早期对TREM-1抑制作用则延缓了促炎因子的释放,机体清除病原能力下降,SS2迅速增殖从而刺激机体产生强烈的炎性应答反应。过度的持续炎症在清除病原的同时对机体也造成严重的损伤,导致部分小鼠在过度炎症反应过程中急性死亡。该研究将有助于进一步了解SS2的致病机理及宿主的免疫应答机制。2.猪链球菌2型新型亚单位疫苗研究本试验通过对多种SS2免疫反应性抗原进行亚单位疫苗研究。通过不同抗原组合进行小鼠免疫并评价不同疫苗对SS2的攻毒保护力,结果发现具有良好免疫反应性的SS2表面抗原蛋白HP0197、HP1036及Enolase组成的亚单位疫苗免疫后能显着提高小鼠SS2人工感染存活率。进一步研究表明该疫苗免疫仔猪后一周即能从血液中检测到各蛋白特异性抗体,经过加强免疫后,机体产生较高水平抗体并持续较高水平的抗体滴度,经高致病性SS2攻毒后能提供80%的免疫保护。
李绍龙,张桂春,祝兴林,刘永华,何剑斌[4]（2004）在《禽结肠梭菌与沙门氏菌性肠炎及其防治措施》文中提出
贾世玉,刁有祥,付兴伦,邢仁增,马凤龙[5]（1999）在《鸡溃疡性肠炎油乳剂灭活苗的研制》文中研究指明将大肠梭状芽胞杆菌接种于色氨酸磷酸液体培养基作厌氧培养，３６ｈ 后离心收集细菌，生理盐水稀释使菌体浓度达５×１０９ ＣＦＵ／ｍ ｌ，经甲醛溶液灭活后，与油佐剂乳化制成鸡溃疡性肠炎灭活苗。经检测证明，该疫苗安全、可靠，无毒副作用，有效免疫期可达６个月
刁有祥,李久芹,贾世玉,张万福,牛钟相[6]（1999）在《用免疫荧光抗体技术快速诊断鸡溃疡性肠炎》文中研究指明鸡溃疡性肠炎（ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｅｎｔｅｒｉｔｉｓ）是由鹑梭状芽胞杆菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｕｍｃｏｌｉｎｕｍ）引起的一种急性败血性传染病。世界各地均有该病发生的报道。我国该病的发生也较严重，且呈上升趋势，对养鸡业危害较大［１，２］。但有关本病的快速诊断...
贾世玉,连京华,刁有祥,付兴伦,陈国柱,马凤龙[7]（1999）在《Dot-ELISA方法检测鸡肠梭菌抗毒素的研究》文中提出将肠梭菌培养液过滤除菌，滤液经硫酸铵沉淀，再经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析，收集毒素峰洗脱液，浓缩后制成毒素纯化抗原。用混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体，制成检测肠梭菌抗毒素的快速诊断膜。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检查１０份肠梭菌高免鸡血清均呈阳性反应，１５份鸡巴氏杆菌阳性血清、１０份鸡波氏杆菌阳性血清、１５份鸡大肠杆菌阳性血清、１０份鸡葡萄球菌阳性血清及３０份健康鸡血清均为阴性。鸡肠梭菌阳性血清均可被特异性抗原阻断。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ与常规间接ＥＬＩＳＡ差异不显着（Ｐ＞００５），两者的总符合率为９５００％。
刁有祥,牛钟相,张万福,贾世玉[8]（1999）在《鸡溃疡性肠炎灭活苗的制备与应用研究》文中指出用鹑梭状芽胞杆菌经福尔马林灭活后，与白油、司本８０、吐温８０，按一定比例混合后在胶体磨中快速乳化成油包水型，制备了鸡溃疡性肠炎灭活疫苗，经检测证明，该疫苗安全、可靠、稳定，４℃～８℃可贮存１２个月，１０℃～２５℃可贮存３个月，注射后抗体效价可维持６个月，保护率可达１００％。
郭宇[9]（2019）在《牛羊魏氏梭菌病的诊断及综合防治》文中提出由产气荚膜梭菌引起的牛羊魏氏梭菌病是一种急性传染病,常引起羊肠毒血症、羊猝狙、羔羊痢疾、牛猝死症等疾病,该病发病急、死亡快、死亡率高,给牛羊养殖业造成重大经济损失。对牛羊常见的魏氏梭菌病的诊断与综合防治措施进行综述,以期为牛羊魏氏梭菌病的防治提供参考。
崔金磊[10]（2016）在《我国6省市牛副结核病流行病学调查》文中进行了进一步梳理为了解我国部分省市规模化奶牛场牛副结核病的感染状况,采用ELISA方法对2015年间采集于内蒙古、黑龙江、湖北、四川、安徽、江苏6个省市规模化奶牛场的16172份牛血清样品进行了副结核病的抗体检测。结果显示：所检测样品的副结核病抗体的总体阳性率为2.45%。6个省市的抗体阳性率分别为：内蒙古1.40%、黑龙江3.90%、湖北2.05%、四川5.23%、安徽8%、江苏1.22%,其中,安徽、四川、黑龙江的感染率较高。不同饲养规模牧场的阳性率分别为：大型牧场2.42%、中型牧场2.01%、小型牧场4.32%。小型牧场的阳性率高于大、中型牧场。此次的流行病学调查采集样品的地理范围较广、样品的采集量较大,基本上能够反映我国6省市规模化奶牛场牛副结核病的感染情况,调查结果可为国家副结核病的预防和控制提供参考。
二、鸡溃疡性肠炎灭活苗的制备与应用研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、鸡溃疡性肠炎灭活苗的制备与应用研究（论文提纲范文）
（1）鸡源抗腹泻芽孢益生菌J-4菌株的筛选、鉴定、发酵条件优化及动物饲喂试验（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 概述具有腹泻症状的常见鸡病 |
| 1.1.1 鸡新城疫 |
| 1.1.2 鸡传染性法氏囊病 |
| 1.1.3 鸡霍乱(巴氏杆菌病) |
| 1.1.4 绿脓杆菌病 |
| 1.1.5 鸡溃疡性肠炎 |
| 1.1.6 沙门氏杆菌病 |
| 1.1.7 鸡白痢 |
| 1.1.8 大肠杆菌病 |
| 1.2 抗生素治疗鸡大肠杆菌性腹泻 |
| 1.2.1 抗鸡大肠杆菌性腹泻抗生素种类 |
| 1.2.2 抗生素使用过程中存在的问题 |
| 1.3 益生菌预防和治疗鸡腹泻 |
| 1.3.1 益生菌的定义 |
| 1.3.2 益生菌的作用 |
| 1.3.3 益生菌使用过程中存在的问题 |
| 1.3.4 饲用益生菌研究应用概况 |
| 1.3.5 饲用益生菌的应用前景 |
| 第2章 鸡源芽孢菌株J-4的筛选及鉴定 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 粪样及菌种 |
| 2.1.2 培养基 |
| 2.1.3 试剂 |
| 2.1.4 实验仪器 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 粪样采集 |
| 2.2.2 鸡粪便中芽孢细菌的分离 |
| 2.2.3 病原指示菌平板的制作 |
| 2.2.4 菌株的初筛和复筛 |
| 2.2.5 拮抗细菌菌株形态特征的观察 |
| 2.2.6 芽孢杆菌J-4菌株的生理生化鉴定 |
| 2.2.7 基因组DNA的提取及16S rDNA的扩增纯化 |
| 2.2.8 J-4菌株16S rDNA序列分析及系统发育树的构建 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 初筛 |
| 2.3.2 复筛 |
| 2.3.3 拮抗细菌J-4菌株初步鉴定 |
| 2.3.4 J-4菌株的生理生化试验 |
| 2.3.5 J-4菌株系统发育树的构建 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 J-4菌株发酵条件优化 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 菌种 |
| 3.1.2 培养基 |
| 3.1.3 仪器 |
| 3.1.4 试剂 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 种子液培养 |
| 3.2.2 生长曲线的测定 |
| 3.2.3 芽孢产率的测定 |
| 3.2.4 菌体浓度的测定 |
| 3.2.5 不同碳源对摇瓶发酵的影响 |
| 3.2.6 不同氮源对摇瓶发酵的影响 |
| 3.2.7 不同无机盐对摇瓶发酵的影响 |
| 3.2.8 正交试验设计 |
| 3.2.9 装液量对摇瓶发酵的影响 |
| 3.2.10 转速对摇瓶发酵的影响 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 J-4生长曲线测定 |
| 3.3.2 培养条件优化 |
| 3.4 讨论 |
| 第4章 J-4菌株抗菌活性物质分析 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 菌株 |
| 4.1.2 试剂 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 抗菌活性物的性质鉴定 |
| 4.2.2 J-4菌株抗菌物的胃蛋白酶敏感性试验 |
| 4.2.3 J-4菌株抗菌物的酸耐受性试验 |
| 4.2.4 J-4菌株抗菌物的温度敏感性试验 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 J-4菌株的抗菌物性质鉴定 |
| 4.3.2 J-4菌株抑菌物质的胃蛋白酶水解 |
| 4.3.3 J-4菌株抗菌物的酸耐受性 |
| 4.3.4 J-4菌株抗菌物的温度耐受性 |
| 4.4 讨论 |
| 第5章 J-4菌株对胃肠道逆性环境耐受性及安全性研究 |
| 5.1 材料 |
| 5.1.1 试剂及培养基 |
| 5.1.2 菌种 |
| 5.1.3 主要仪器 |
| 5.1.4 试验动物 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 J-4菌株种子液的制备 |
| 5.2.2 J-4菌株人工胃液耐受性 |
| 5.2.3 J-4菌株耐胆酸盐试验 |
| 5.2.4 J-4菌株人工肠液耐受性 |
| 5.2.5 J-4菌株芽孢的温度耐受性 |
| 5.2.6 J-4菌株饲喂安全性试验 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 J-4菌株人工胃液耐受性 |
| 5.3.2 J-4菌株耐胆酸盐试验 |
| 5.3.3 J-4菌株人工肠液耐受性 |
| 5.3.4 J-4菌株芽孢温度耐受性试验 |
| 5.3.5 J-4菌株饲喂安全性试验 |
| 5.4 讨论 |
| 第6章 芽孢杆菌J-4菌株的小鼠饲喂试验 |
| 6.1 材料 |
| 6.1.1 菌种及试验动物 |
| 6.1.2 培养基 |
| 6.1.3 试剂 |
| 6.1.4 仪器 |
| 6.2 试验方法 |
| 6.2.1 大肠杆菌病原菌平板制备 |
| 6.2.2 大肠杆菌与J-4菌液的制备 |
| 6.2.3 小鼠腹泻模型的建立 |
| 6.2.4 J-4菌株对小鼠腹泻的防治 |
| 6.2.5 小鼠肠道菌群检测方法 |
| 6.2.6 小鼠免疫器官指数的检测 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.3.1 J-4菌株对小鼠腹泻的防治效果 |
| 6.3.2 J-4菌株对小鼠肠道菌群的影响 |
| 6.3.3 J-4菌株对小鼠免疫器官指数的影响 |
| 6.4 讨论 |
| 第7章 芽孢杆菌J-4菌株的鸡饲喂试验 |
| 7.1 材料 |
| 7.1.1 菌株及试验动物 |
| 7.1.2 培养基 |
| 7.2 试验方法 |
| 7.2.1 大肠杆菌及J-4菌液的制备 |
| 7.2.2 鸡大肠杆菌性腹泻模型的制备 |
| 7.2.3 J-4菌株对鸡的大肠杆菌性腹泻预防与治疗 |
| 7.2.4 腹泻鸡的解剖观察 |
| 7.3 结果与分析 |
| 7.3.1 J-4菌株预防、治疗鸡腹泻效果 |
| 7.3.2 J-4菌株对鸡肠道菌群的影响 |
| 7.3.3 鸡腹腔解剖结果 |
| 7.4 讨论 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的学术论文 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
（2）鸡源鲍氏志贺菌间接ELISA及免疫组化检测方法的建立和应用研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 志贺菌研究进展 |
| 1.2 细菌LPS 研究概况 |
| 1.3 志贺菌检测方法的研究现状 |
| 1.4 研究目的与意义 |
| 实验一 包被LPS 抗原检测鸡源鲍氏志贺菌抗体的间接ELISA 方法的建立及应用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 结论与讨论 |
| 实验二 免疫组化检测鸡源鲍氏志贺菌方法的建立及应用于实验感染鸡组织抗原定位的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 结论与讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| ABSTRACT |
（3）猪链球菌感染猪脾脏的表达谱研究及新型亚单位疫苗研制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 猪2型链球菌病 |
| 1.1.1 前言 |
| 1.1.2 病原学及流行病学 |
| 1.1.3 毒力相关因子 |
| 1.1.4 致病机理研究 |
| 1.1.5 临床症状 |
| 1.1.6 猪链球菌2型感染模型 |
| 1.1.7 疫苗研究 |
| 1.2 猪链球菌2型感染宿主免疫应答研究 |
| 1.3 基因芯片在病原微生物中的应用 |
| 1.3.1 基因芯片在疾病诊断中的应用 |
| 1.3.2 基因芯片用于病原与宿主互作 |
| 1.3.3 TREM-1在病原感染过程中的作用研究 |
| 第2章 猪链球菌2型感染仔猪脾脏基因表达谱研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 菌株及培养条件 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.2.3 主要仪器 |
| 2.2.4 试验分组 |
| 2.2.5 猪链球菌2型抗体的ELISA检测 |
| 2.2.6 细菌计数 |
| 2.2.7 人工感染及样品采集 |
| 2.2.8 SS2分离鉴定 |
| 2.2.9 脾脏总RNA提取 |
| 2.2.10 RNA纯化 |
| 2.2.11 cDNA第一链合成 |
| 2.2.12 cDNA第二链合成 |
| 2.2.13 双链cDNA纯化 |
| 2.2.14 生物素标记cRNA |
| 2.2.15 cRNA纯化 |
| 2.2.16 cRNA片段化 |
| 2.2.17 基因芯片杂交及分析 |
| 2.2.18 芯片结果实时荧光定量PCR(qPCR)验证 |
| 2.2.19 细胞信号受体表达水平分析 |
| 2.2.20 小鼠感染后TREM-1的qPCR检测 |
| 2.2.21 小鼠感染剂量确定 |
| 2.2.22 TREM-1的抑制/激活对感染的影响 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 感染前SS2检测 |
| 2.3.2 SS2感染后仔猪症状 |
| 2.3.3 样品RNA质量检测 |
| 2.3.4 芯片杂交结果及差异表达基因聚类分析 |
| 2.3.5 差异表达基因Biological Process Gene Ontology(GO)分析 |
| 2.3.6 芯片结果的qPCR验证 |
| 2.3.7 细胞水平检测细胞受体表达情况 |
| 2.3.8 人工感染SS2后小鼠TREM-1表达情况 |
| 2.3.9 感染剂量确定 |
| 2.3.10 细胞因子检测 |
| 2.3.11 感染后细胞因子检测 |
| 2.3.12 SS2感染后血液含菌量检测 |
| 2.3.13 小鼠感染存活率 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 猪链球菌2型新型亚单位疫苗研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 菌株 |
| 3.2.2 主要试剂 |
| 3.2.3 培养基及缓冲液 |
| 3.2.4 蛋白表达、纯化相关试剂 |
| 3.2.5 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂 |
| 3.2.6 Western Blotting相关试剂 |
| 3.2.7 ELISA相关试剂 |
| 3.2.8 主要仪器 |
| 3.2.9 引物设计与合成 |
| 3.2.10 猪链球菌2型细菌基因组DNA提取 |
| 3.2.11 目的基因PCR扩增 |
| 3.2.12 诱导表达蛋白的SDS-PAGE鉴定 |
| 3.2.13 重组蛋白的Western Blotting检测 |
| 3.2.14 重组蛋白的纯化 |
| 3.2.15 重组蛋白的浓度测定 |
| 3.3 亚单位疫苗效果评价 |
| 3.3.1 试验动物 |
| 3.3.2 亚单位疫苗对小鼠免疫效果评价 |
| 3.3.3 亚单位疫苗对仔猪免疫效果评价 |
| 3.4 结果及分析 |
| 3.4.1 疫苗用抗原蛋白基因分布检测 |
| 3.4.2 纯化重组蛋白的SDS-PAGE及Western Blotting鉴定 |
| 3.4.3 蛋白质浓度测定 |
| 3.4.4 亚单位疫苗免疫后各蛋白抗体水平检测 |
| 3.4.5 小鼠半数致死量测定 |
| 3.4.6 亚单位疫苗的小鼠免疫保护力评价 |
| 3.4.7 亚单位疫苗对猪的安全性评价 |
| 3.4.8 疫苗ELISA抗体检测 |
| 3.4.9 仔猪免疫保护力评价 |
| 3.5 讨论 |
| 第4章 结论 |
| 参考文献 |
| 附表 |
| 致谢 |
| 个人资料 |
| 教育经历 |
| 在读期间发表的主要文章 |
| 已申报专利 |
（9）牛羊魏氏梭菌病的诊断及综合防治（论文提纲范文）
| 1 常见牛羊魏氏梭菌病 |
| 1.1 羊肠毒血症 |
| 1.1.1 流行病学及症状: |
| 1.1.2 防治措施: |
| 1.2 羊猝狙 |
| 1.2.1 流行病学及症状: |
| 1.2.2 防治措施: |
| 1.3 羔羊痢疾 |
| 1.3.1 流行病学及症状: |
| 1.3.2 防治措施: |
| 1.4 牛猝死症 |
| 1.4.1 流行病学及症状: |
| 1.4.1. 1 最急性型: |
| 1.4.1. 2 急性型: |
| 1.4.1. 3 亚急性型: |
| 1.4.2 防治措施: |
| 2 实验室诊断 |
| 2.1 涂片和镜检 |
| 2.2 细菌分离培养和鉴定 |
| 2.3 牛乳发酵试验 |
| 2.4 小鼠致死实验 |
| 3 综合防控措施 |
| 3.1 合理选址 |
| 3.2 科学饲养 |
| 3.3 严格消毒 |
| 3.4 卫生控制 |
| 3.5 免疫预防 |
（10）我国6省市牛副结核病流行病学调查（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 1 引言 |
| 1.1 副结核病简介 |
| 1.2 副结核病的病原学 |
| 1.2.1 病原分型 |
| 1.2.2 禽分枝杆菌副结核亚种的检测方法 |
| 1.2.2.1 直接镜检法 |
| 1.2.2.2 细菌分离培养 |
| 1.2.2.3 变态反应 |
| 1.2.2.4 补体结合试验 |
| 1.2.2.5 聚合酶链式反应(PCR) |
| 1.2.2.6 宿主免疫应答检测 |
| 1.2.2.7 检测分枝杆菌的新型方法 |
| 1.3 牛副结核病的流行病学 |
| 1.3.1 传染源 |
| 1.3.2 传播途径 |
| 1.3.3 易感动物 |
| 1.4 牛副结核病的发病机理及临床症状 |
| 1.5 副结核病与人克罗恩病的关系 |
| 1.6 野生动物副结核病的流行状况 |
| 1.7 牛副结核病的流行状况 |
| 1.8 本研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 被检样品 |
| 2.1.2 副结核病抗体检测ELISA试剂盒 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 试剂准备 |
| 2.2.2 抗体ELISA检测步骤及方法 |
| 2.3 数理统计 |
| 3 结果 |
| 3.1 不同地区奶牛养殖场牛副结核病抗体检测结果 |
| 3.1.1 内蒙古自治区奶牛养殖场牛副结核病抗体检测结果 |
| 3.1.2 黑龙江省奶牛养殖场牛副结核病抗体检测结果 |
| 3.1.3 湖北省奶牛养殖场牛副结核病抗体检测结果 |
| 3.1.4 四川省奶牛养殖场牛副结核病抗体检测结果 |
| 3.1.5 安徽省奶牛养殖场牛副结核病抗体检测结果 |
| 3.1.6 江苏省奶牛养殖场牛副结核病抗体检测结果 |
| 3.1.7 不同地区奶牛养殖场牛副结核病总体抗体阳性率检测结果 |
| 3.2 不同规模的奶牛养殖场牛副结核病抗体检测结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 结果分析 |
| 4.2 牛副结核病的防控措施 |
| 4.2.1 药物防治牛副结核病的效果 |
| 4.2.2 疫苗预防牛副结核病的效果 |
| 4.2.3 牧场牛副结核病的净化 |
| 4.2.4 牧场净化生副结核病的标准 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
四、鸡溃疡性肠炎灭活苗的制备与应用研究（论文参考文献）
- [1]鸡源抗腹泻芽孢益生菌J-4菌株的筛选、鉴定、发酵条件优化及动物饲喂试验[D]. 王选. 河北农业大学, 2011(09)
- [2]鸡源鲍氏志贺菌间接ELISA及免疫组化检测方法的建立和应用研究[D]. 邓久虎. 河南农业大学, 2011(07)
- [3]猪链球菌感染猪脾脏的表达谱研究及新型亚单位疫苗研制[D]. 李冉. 华中农业大学, 2011(04)
- [4]禽结肠梭菌与沙门氏菌性肠炎及其防治措施[J]. 李绍龙,张桂春,祝兴林,刘永华,何剑斌. 畜禽业, 2004(08)
- [5]鸡溃疡性肠炎油乳剂灭活苗的研制[J]. 贾世玉,刁有祥,付兴伦,邢仁增,马凤龙. 中国兽药杂志, 1999(03)
- [6]用免疫荧光抗体技术快速诊断鸡溃疡性肠炎[J]. 刁有祥,李久芹,贾世玉,张万福,牛钟相. 中国兽医学报, 1999(03)
- [7]Dot-ELISA方法检测鸡肠梭菌抗毒素的研究[J]. 贾世玉,连京华,刁有祥,付兴伦,陈国柱,马凤龙. 山东农业科学, 1999(01)
- [8]鸡溃疡性肠炎灭活苗的制备与应用研究[J]. 刁有祥,牛钟相,张万福,贾世玉. 中国预防兽医学报, 1999(01)
- [9]牛羊魏氏梭菌病的诊断及综合防治[J]. 郭宇. 畜牧与饲料科学, 2019(06)
- [10]我国6省市牛副结核病流行病学调查[D]. 崔金磊. 内蒙古农业大学, 2016(02)