一、机械刺激后大鼠牙髓HSP70表达的动态变化（论文文献综述）
陆件[1]（2021）在《右美托咪定对窒息大鼠心肺复苏后神经细胞凋亡和自噬的影响及其机制研究》文中指出目的:观察右美托咪定（dexmedetomidine,Dex）对窒息心脏骤停（cardiac arrest,CA）大鼠自主循环恢复（return of spontaneous circulation,ROSC）后体温及其神经功能的影响,并在ROSC后12 h和24 h后观察脑皮质和海马神经细胞形态学和相关生物学分子的表达变化,探讨Dex对心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation,CPR）后大鼠神经细胞凋亡和自噬的影响及其作用机制。方法:健康雄性成年SD大鼠204只,随机分为四组,空白对照组（BC）、常规复苏组（N）、右美托咪定复苏组（D）、右美托咪定+拮抗剂复苏组（DT）,除BC组6只大鼠外,其余三组均66只。除BC组外,其余三组根据观察时间点的不同在ROSC后再随机分二亚组,即ROSC后12 h和24 h组,每个亚组的样本量以最终存活到观察时间点的大鼠数量决定。建立窒息大鼠心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation,CPR）模型,N组在CPR时使用常规给药方法（静脉注射肾上腺素和碳酸氢钠）复苏,D组于复苏前在使用常规复苏组药物的基础上腹腔注射Dex,DT组于复苏前在使用常规复苏组药物的基础上腹腔注射Dex和其拮抗剂育亨宾。在ROSC后,各复苏组均在恒温25℃条件下观察大鼠的体温变化。到达观察时间点（ROSC后12或24 h）时对大鼠进行神经功能缺损评分（neurological deficit score,NDS）。评分后迅速处死大鼠断头取脑获取脑海马和皮质组织,对海马和脑皮质组织进行病理和电镜观察。对脑皮质进行单细胞悬液制作,使用流式细胞（flow cytometer,FCM）技术检测神经细胞内的活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平。使用免疫组化（immunohistochemistry,IHC）技术检测海马神经细胞caspase-3表达的变化。利用蛋白免疫印迹（Western-Blotting）技术检测海马神经细胞热休克蛋白70（HSP70）、Bcl-2、Bax以及自噬相关蛋白Beclin1表达的变化。结果:复苏后大鼠在25℃恒温环境下,Dex干预后的D组大鼠体温与N组比较有显着性降低（P<0.05）,使用了Dex拮抗剂育亨宾后DT组大鼠的体温与N组无显着性差异（P>0.05）;常规复苏后的N组大鼠NDS与BC组比较有显着性降低（P<0.05）,Dex干预后的D组大鼠NDS与N组比较有显着性升高（P<0.05）,而阻断了Dex作用后的DT组大鼠NDS与D组比较有显着性降低（P<0.05）;N组大鼠的海马神经细胞损伤在光镜和电镜的观察下较BC组明显加重,D组的海马神经细胞损伤较N组有所减轻,DT组的海马神经细胞损伤较D组明显。使用常规复苏方法的N组大鼠脑皮质神经细胞内的ROS水平较BC组明显升高（P<0.05）,Dex干预后的D组脑皮质神经细胞内的ROS水平较N组有所减少（P<0.05）,而阻断了Dex作用后的DT组脑皮质神经细胞内的ROS水平较D组有所增加（P<0.05）;N组caspase-3的表达与BC组比较有显着性增加（P<0.05）,D组caspase-3的表达与N组比较有显着性降低（P<0.05）,DT组caspase-3的表达与D组比较有显着性升高（P<0.05）;N组Bax的表达与BC组比较有显着性增加（P<0.05）,D组Bax的表达与N组比较有显着性降低（P<0.05）,DT组Bax的表达与D组比较有显着性升高（P<0.05）;N组Beclin1的表达与BC组比较有显着性增加（P<0.05）,D组Beclin1的表达与N组比较有显着性降低（P<0.05）,DT组Beclin1的表达与D组比较无显着性差异（P>0.05）;N组Bcl-2的表达与BC组比较有显着性降低（P<0.05）,D复苏组Bcl-2的表达与N组比较有显着性增加（P<0.05）,DT组Bcl-2的表达与D组比较无显着性差异（P>0.05）;N组HSP70的表达与BC组比较有显着性增加（P<0.05）,D组HSP70的表达与N组比较有显着性增加（P<0.05）,DT组HSP70的表达与D组比较有显着性降低（P<0.05）。结论:使用常规药物CPR时联合腹腔注射Dex对复苏后大鼠有明显的致低温作用,并能显着提高复苏大鼠的神经功能。其机制与Dex能减少复苏后大鼠脑皮质神经细胞内的ROS水平,减少脑海马caspase-3、Bax和增加HSP70等凋亡相关蛋白的表达,以及调控Bcl-2-Beclin1复合体的自噬作用有关。
郑文亚[2]（2019）在《运输应激对山羊主要器官的应激损伤及热休克蛋白表达的影响》文中研究说明畜禽运输是畜牧业生产过程中必不可少的一个重要环节,运输过程中的拥挤、颠簸、震动、噪音、温度变化和禁食禁水等复合应激源均可造成动物机体生理紊乱、发病甚至死亡,同时降低肉品质量和动物福利,给畜牧业带来巨大的经济损失。热休克蛋白参与各种生命活动,主要发挥分子伴侣作用,具有组装、折叠和转运等功能,同时参与抗应激和抗凋亡等生理活动,在运输应激中可能发挥一定的作用。本实验选用12只体重相近（13.89±2.96 Kg）且健康的赣西公山羊为实验动物并将其随机分为3组,即对照组（不运输）、2 h运输处理组和6 h运输处理组,运输处理组在温度为28℃32℃、车速为3545 km/h条件下进行公路运输,运用HE染色、透射电镜技术、实时定量PCR、免疫组织化学和Western blot方法,系统分析了不同运输时间山羊心脏、肝脏、肾脏、肺脏、气管、支气管、脾脏、淋巴结和小肠的显微和超微病理变化,并探讨运输前后HSP27、HSP70和HSP90在山羊主要器官的分布和表达情况,为探讨山羊运输应激发病机制及其解决方案的研究提供基础资料。本研究主要取得了以下结果:（1）山羊心脏实验结果表明运输后心肌纤维发生颗粒变性,线粒体肿胀、破裂,间质水肿、充血出血、炎性细胞浸润,6 h运输处理组病变更严重。3种蛋白主要在心肌细胞胞质中表达,HSP27和HSP90在胞核中也表达。与对照组相比,2 h和6 h运输处理组HSP27、HSP70和HSP90的mRNA水平均升高,并且2 h运输处理组HSP27、HSP70和HSP90的蛋白表达量也有所升高,6 h运输处理组仅HSP70和HSP90的蛋白表达量有所升高。（2）山羊肝脏实验结果表明处理组肝脏发生不同程度的损伤,中央静脉扩张充血,窦间隙变小,肝细胞出现明显的颗粒和水泡变性,少量肝细胞核染色质聚集,线粒体肿大变形、嵴断裂消失,胞质中出现空泡和脂滴,6 h运输处理组更为严重。HSP27在中央静脉和门管区附近的肝细胞、血管内皮细胞及胆小管上皮细胞的胞质中都有分布;HSP70与HSP90主要定位于中央静脉和门管区附近的肝细胞胞质中,HSP90在胞核也有表达。与对照组相比,2 h运输处理组仅HSP27和HSP90的mRNA表达量上调,而6 h运输处理组仅HSP70的mRNA表达量上调,同时两个处理组仅HSP27与HSP70的蛋白表达量高于对照组。（3）山羊肾脏实验结果表明部分肾小管和集合小管结构紊乱,管腔界限不清,管腔可见脱落的上皮细胞和黏液,肾小球充血、肿胀,肾小囊腔变窄,线粒体肿胀且嵴断裂并减少,运输6 h后充血、出血更明显,管腔和肾小球细胞损伤更严重。对照组3种蛋白主要在肾小管和集合小管表达,运输后表达更强,处理组肾小体也可见阳性反应。与对照组相比,2 h运输处理组HSP27与HSP90的mRNA和蛋白表达量均有上调,而HSP70的mRNA的表达量下调,其蛋白表达量上调,6 h运输处理组仅HSP27的mRNA表达上调,而3个分子的蛋白表达均上调。（4）山羊肺脏、气管和支气管实验结果表明运输后气管和支气管黏膜水肿、充血,炎性细胞浸润,纤毛倒伏、断裂和脱落,少量黏膜上皮细胞变性、坏死,纤毛和杯状细胞超微病变明显,线粒体肿胀、嵴溶解减少,血管内皮细胞膜起泡、破损。肺泡腔塌陷或融合,肺泡隔增宽、充血,炎性细胞浸润,部分肺泡上皮细胞变性,肺泡腔可见脱落的细胞和碎片,肺泡II型上皮细胞超微病变明显,肺泡I型上皮细胞膜不平整、胞质空泡化,运输6 h后损伤更严重。HSP27和HSP70在气管和支气管上皮、腺上皮和血管内皮表达,处理组阳性表达的炎性细胞数量增多,在肺泡细胞和细支气管上皮普遍表达,HSP90表达强度较弱,仅在气管和支气管上皮、腺上皮及肺泡II型上皮细胞、细支气管上皮表达。气管HSP70蛋白表达量在2 h和6 h运输处理组与对照组相比明显上调,2 h运输处理组肺脏HSP70的mRNA和蛋白表达量与对照组相比均明显上调。（5）山羊淋巴结和脾脏实验结果表明运输后淋巴结和脾脏均出现急性病理变化,淋巴小结和脾小结增生明显,6 h运输处理组淋巴细胞和网状内皮细胞可见核破碎,细胞超微病变明显,发生凋亡或坏死。运输前后3种蛋白在淋巴结和脾脏中的定位存在差异,HSP27主要分布在弥散淋巴组织,HSP70和HSP90主要分布在淋巴小结和脾小结。与对照组相比,2 h运输处理组HSP27、HSP70和HSP90的mRNA水平在淋巴结和脾脏中均上调,而6 h运输处理组仅淋巴结中HSP70的mRNA水平和脾脏中HSP90的mRNA水平有所上调;两个处理组的淋巴结与脾脏HSP90蛋白表达量均有所上调,并且运输2 h后HSP27的蛋白在脾脏、HSP70的蛋白在淋巴结的表达量上调,运输6 h后HSP70在脾脏中的表达量与对照组相比下调。（6）山羊十二指肠、空肠和回肠实验结果表明运输后肠绒毛黏膜上皮和固有层有炎性细胞浸润、充血和出血,少量上皮细胞变性,微绒毛倒伏,核固缩,线粒体肿胀、增生。3种蛋白主要在肠绒毛上皮表达,HSP27和HSP70主要在胞质表达,HSP90在胞质和胞核均有表达。与对照组相比,十二指肠中HSP27和HSP70的mRNA水平在6 h运输处理组中均上调,2 h运输处理组仅HSP27的mRNA水平上调,而在蛋白水平上,仅HSP90的蛋白表达量在运输6 h后上调;空肠HSP27、HSP70和HSP90的mRNA水平在2 h运输处理组均上调,6 h运输处理组中仅HSP70的mRNA水平上调;回肠中仅HSP70的mRNA水平在2 h运输处理组上调,而HSP27的mRNA水平在两个处理组中均下调,HSP27蛋白表达量在两个处理组均明显降低,在运输2 h后HSP70蛋白表达量与对照组和6 h运输处理组相比均有所升高。总之,运输应激对山羊主要实质器官和空腔器官均造成了一定程度的病理性损伤,随着运输时间的延长损伤加重。运输后,HSP27、HSP70和HSP90的定位情况在不同器官中均出现了不同的变化,其mRNA和蛋白的表达量也有一定的变化,提示这些分子与运输应激对山羊脏器的损伤之间存在一定的联系。
柯贤锋[3]（2019）在《热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制探讨》文中进行了进一步梳理研究背景及意义近年来,随着国家西部大开发战略的实施,越来越多的人来到高原地区进行工作、生活、旅游等,但他们的健康面临着高原低压性缺氧的严重威胁。高原脑水肿（high altitude cerebral edema,HACE）是一种由高原大气压降低而引起的急性重型高原病。其临床表现为认知功能严重减退、共济失调、头痛、恶习呕吐等,严重者发生昏迷或死亡。高原脑水肿虽然发病率低,但其进展速度快且致死率高,因此,预防高原脑水肿的发生,对维护急进高原地区的部队人员、高原建设者和游客的健康具有重要意义。热习服（heat acclimation,HA）是指机体在长期的中等强度热刺激作用下产生的有利于机体适应热环境、提高耐热能力的一系列适应性反应,表现为机体的体温调节能力逐步提高,各种生理功能达到一个新的平衡状态,如出汗量升高而汗液中的盐离子浓度降低,静息时心率下降而心功能增强,核心体温相对下降,基础代谢率降低等。机体热习服后不仅对损伤性热应激具有保护作用,而且对其它多种应激如创伤、缺血/再灌注、缺氧等也起保护作用,称之为热习服诱导的交叉耐受（heat acclimation cross-tolerance）。有研究显示,热习服预处理后可减轻由创伤性脑外伤造成的大脑损伤程度,但其对低压性缺氧导致的高原脑水肿是否具有保护作用,目前还缺乏相关研究。因此,探讨热习服对高原缺氧导致的高原脑水肿的保护机制,对高原脑水肿的预防和治疗具有十分重要的意义。本课题通过建立高原脑水肿和热习服模型,探索热习服是否对低压性缺氧导致的高原脑水肿具有预防保护作用,并初步探讨HA对高原脑水肿的预防保护机制,为今后HACE的预防和治疗提供新的思路。研究方法1.成年健康雄性SD大鼠在（34±1）℃条件下持续暴露30天建立HA大鼠模型;在缺氧（7600m）条件下暴露24h建立HACE大鼠模型。随机将大鼠分为正常对照组（C组）、缺氧组（H组）、热习服组（HA组）和热习服+缺氧组（HHA组）。2.采用旷场实验,检测H组大鼠和HHA组大鼠在缺氧前后的行为学改变。观察各组大鼠的脑组织湿干重比,脑组织病理改变和神经细胞超微结构改变情况与神经元变性情况。3.检测各组大鼠动脉血血常规、血气和血红蛋白氧解离曲线。4.检测各组大鼠脑组织中的丙二醛（MDA）、乳酸含量和水通道蛋白（AQP4）、热休克蛋白70（HSP70）的表达情况。结果1.在温度（34±1）℃条件下连续暴露30d和缺氧（7600m）条件下暴露24h分别成功建立了HA大鼠模型和HACE大鼠模型,为后续研究提供了实验基础。2.热习服对低压性缺氧导致的高原脑水肿具有预防保护作用,主要表现在:大鼠HA预处理后,在接受极端缺氧刺激时,自发活动无明显抑制,其脑组织含水量显着低于H组大鼠,差异具有统计学意义（P<0.05）,而且脑组织的病理损伤程度以及神经元的变性程度均明显减弱,HA组大鼠的脑组织含水量与C组大鼠相比,差异无统计学意义（P>0.05）。说明HA不会导致大鼠发生脑水肿。3.与C组比较,H组血红蛋白、红细胞和红细胞压积显着升高;但与H组相比,HHA组血红蛋白、红细胞和红细胞压积进一步升高（P<0.05）,提示热习服加缺氧组大鼠的血液携氧能力增强。与C组比较,H组的中性粒细胞百分比明显升高;与H组比较,HHA组的中性粒细胞百分比显着降低。与C组相比,H组的血氧饱和度、血氧分压显着下降;与H组比较,HHA组的血氧饱和度、血氧分压显着升高。提示热习服增强了高原缺氧暴露大鼠的供氧能力。与C组比较,H组的P50（血红蛋白氧饱和度为50%时对应的血氧分压）显着升高;与H组相比,HHA组的P50明显升高,提示血红蛋白释放氧的能力进一步增强。4.与C组比较,H组大鼠脑组织MDA、乳酸含量和AQP4表达量显着升高;与H组比较,HHA组MDA、乳酸含量和AQP4表达量显着降低,但其HSP70表达量显着升高。全文结论1.在温度（34±1）℃条件下连续暴露30天可成功建立热习服大鼠模型;在低压性缺氧（7600m）条件下暴露24h可成功建立高原脑水肿大鼠模型;2.采用温度为34℃、连续暴露30天的热习服方式能预防低压性缺氧（7600m）24h导致的大鼠高原脑水肿;3.大鼠热习服后可能通过提高血液的携氧和供氧能力,从而预防高原脑水肿的发生;4.大鼠热习服后还可能通过上调热休克蛋白70的表达,下调低压性缺氧条件下水通道蛋白4的表达,从而减轻低压性缺氧导致的脑损伤。
赵萤[4]（2019）在《力生长因子与动态压力在促撕脱再植牙牙周膜再生修复中的作用及机制研究》文中认为背景牙周膜是位于牙根与牙槽骨之间的结缔组织,牙齿依靠牙周膜韧带悬吊在牙槽窝中。牙周膜可承受、支持、传递和分散牙齿传来的咬合力,并在咬合力的作用下,引发和激活其内部各种细胞及关键分子发生变化,从而影响其塑形和改建。口腔急诊中常见牙撕脱性损伤,该类损伤中牙髓组织和牙周组织完全离断,患者就诊时,患牙牙周膜常见广泛的损伤甚至坏死,常规再植治疗后极易形成病理性愈合,甚至出现牙齿脱落,故该类损伤治疗难度大、预后极不稳定。因此,临床治疗中如何使撕脱再植牙获得理想的牙周膜性愈合是牙外伤领域的难题。在再植牙愈合的诸因素中,撕脱牙固定的形式、时间以及咬合加载的时机都对撕脱牙牙周膜性愈合影响巨大。牙外伤研究的奠基人Andreasen基于临床实践提出了功能性固定的概念,强调保持撕脱再植牙的生理动度对牙周膜再生愈合至关重要。事实上,牙周组织是人体改建最为活跃的组织之一,这与牙周组织担负咀嚼功能,承载咬合应力有关。而应力状态下牙周膜细胞的活性高低直接关系到牙周组织的适应性改建能力以及牙周健康状况。但是到目前为止,咬合力作用于牙周膜及促进损伤牙周膜组织再生与改建的分子机制仍不清楚。我们的前期研究显示,对体外培养的牙周膜干细胞（Periodontal ligaments stem cells,PDLSCs）施加模拟咬合力的动态压力刺激后,PDLSCs可表达IGF-1的剪接变异体,力生长因子（Mechano-growth factor,MGF）。作为IGF-1的剪接变异体,MGF与IGF-1的区别在于其具有特殊的E肽编码区域。研究显示MGF具有促组织再生修复的功能。但是MGF作用的分子机制目前尚未完全阐明。大量研究认为MGF并未通过IGF-1R依赖信号通路发挥功能,MGF的受体及其下游信号转导通路值得进一步探索。本研究的主要目的是明确在压力作用下,MGF是否可以通过调控PDLSCs,最终促进牙周膜再生修复,以期为临床治疗牙撕脱性损伤中获得理想的牙周膜性愈合提供新的策略及思路。目的（1）明确压力及MGF作用对PDLSCs及牙周膜细胞增殖、迁移、黏附、胶原合成以及分化的影响;（2）阐明压力及MGF调控PDLSCs的分子机制;（3）体内实验探明咬合力作用下MGF在牙周膜再生修复中的作用。方法（1）分离培养人牙周膜细胞,采用免疫磁珠法分选PDLSCs。并采用克隆形成实验、干细胞表面标志物鉴定、成骨诱导、成脂诱导及生长曲线测定,对分选后的PDLSCs及牙周膜细胞进行分析;（2）采用不同水平压力及不同浓度的MGF作用于体外培养的PDLSCs及牙周膜细胞,采用CCK8法检测压力及MGF对细胞活性的影响。利用Real-time PCR及Western blotting检测PDLSCs中PCNA,CXCR4,CAP,Osterix,BSP,OPN,CEMP1,Scleraxis,COL-Iα1 and COL-IIIα1的表达;（3）利用抗体芯片技术对MGF受体蛋白进行筛选,并采用抗体芯片结合Western blotting的方法对压力及MGF作用于PDLSCs后信号通路进行分析;（4）建立大鼠撕脱牙延迟再植模型,再植前给予MGF处理,并采用饲喂软食的方式剥夺大鼠咬合力,采用Micro-CT及HE染色检测撕脱再植牙牙根吸收率及牙周膜愈合的状况。在体研究咬合力作用下MGF在牙周组织再生修复中的作用。结果（1）采用免疫磁珠分选的PDLSCs可干细胞表面标志物、具有较强克隆形成能力和多向分化能力。而牙周膜细胞则低表达干细胞标志物,其克隆形成能力与多向分化能力较差;（2）压力和MGF可促进PDLSCs中牙周膜成纤维分化标志基因Scleraxis m RNA和蛋白表达水平上调,调控PDLSCs向牙周膜成纤维细胞分化;（3）压力与MGF可促进非受体型酪氨酸激酶Src激酶家族中Lyn及Fyn磷酸化,进而调控下游4E-BP1、AKT、ERK1/2及p38磷酸化,影响PDLSCs向牙周膜成纤维细胞分化;（4）Micro-CT及HE染色检测结果显示,给予牙撕脱再植大鼠饲喂硬食,并给予MGF多肽作用下,大鼠撕脱再植牙牙根的病理性吸收的面积均显着低于软食组、硬食组及软食结合MGF组,且牙周膜面积高于软食组及软食结合MGF组,牙周膜中胶原纤维排列整齐。结论压力及力生长因子MGF可调控PDLSCs的细胞活性,并促进其向牙周膜成纤维细胞分化,该过程主要依赖Src激酶家族中Lyn及Fyn磷酸化,继而调控下游4E-BP1、AKT、ERK1/2及p38活化参与信号转导过程。在大鼠撕脱牙延迟再植后,适宜咬合力加载及外源性力生长因子的加入可促进牙周膜再生修复并且可有效抑制病理性愈合的发生。
陶学有[5]（2018）在《格列本脲通过抑制内质网应激缓解吗啡导致的痛觉过敏》文中提出吗啡（morphine）为临床中应用非常广泛的一种阿片受体激动剂,因其具备良好的镇痛效能故常用于治疗各种急慢性疼痛。在吗啡使用过程中,阿片样物质引起的痛觉过敏（Opioid-induced hyperalgesia,OIH）等副作用的出现严重影响了吗啡在临床中应用的效果。因此探讨吗啡诱导OIH发生的机制,采取有效的方法去防治OIH是基础和临床研究都需要面临的难题。神经元-胶质细胞或胶质细胞间相互作用被认为是形成OIH的主要机制之一。吗啡可引起脊髓中多种促炎因子如肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factorα,TNFα）、白细胞介素-1（interleukin-1,IL-1）以及白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）的合成和释放增加,如果在OIH发生之前经鞘内给予促炎因子的拮抗剂,OIH现象的发生会受到抑制。肿瘤坏死因子α、白细胞介素-1和白细胞介素-6等促炎因子主要由胶质细胞释放,这些促炎因子释放后可以再次激活机体的胶质细胞,导致严重的神经炎症反应。近年来越来越多的研究认为预防脊髓内微环境的炎症或者加速炎症的消退可能有效缓解OIH。损伤相关的模式分子（Damage Associated Molecular Pattern,DAMPs）在脑脊液和细胞外液中的持续累积是神经炎症迁延不愈的核心机制。通过生物学进化发展,机体形成了一套非常完善的系统对细胞损伤进行监控,并通过特殊的细胞信号传递系统对损伤细胞作出应答,以达到清除损伤细胞,对组织进行修复,最终维持内环境稳定的目的。在创伤和应激的病理状态下,机体可以通过体内的免疫系统模式受体（Pattern-recognition Receptors,PRRs）去对病原体所特有的模式分子进行识别,即PAMPs（Pathogen-associated Molecular Pattern,PAMPs）,最终通过激活免疫应答,维持机体的稳定。Matzinger早在1994年就提出了当机体自身的特有细胞出现损伤时可以释放内源性因子通过PAMPs等方式启动机体免疫应答反应的“危险模式”理论。细胞损伤后释放的内源性因子与PAMPs一起被称为DAMPs。一般将因细胞损伤而释放的内源性因子单独称为警觉素（Alarmins）或者DAMPs。DAMPs是一种由宿主来源的通过调节TOLL样受体（TLRSs）、NOD样受体（NLRs）、RIG样受体（RIRs）等模式识别受体活化,诱导自身免疫或免疫耐受的分子,主要包括高迁移率族蛋白1（High-mobility group box 1,HMGB1）和热休克蛋白70（Heat shock proteins70,HSP70）等。热休克蛋白（Heat shock proteins,HSP）是一种在机体内具备特殊功能的蛋白质,主要分布在机体细胞内发挥分子伴侣作用,同时对机体细胞起着保护作用的一类蛋白质,并在机体新合成蛋白质的肽链进行折叠过程中发挥重要的作用。当机体处于应激状态时,HSP的表达明显增多,对抗伤害性刺激,减轻机体的损伤。HSP在应激反应过程发挥着重要的作用,当机体发生缺血缺氧、炎症刺激等应激状态病理生理时,可促进其表达增多,并由细胞内向细胞外释放。据国内外研究报道,在动物模型和人群研究中均发现当受到创伤应激、剧烈运动、捕食应激等应激刺激时,机体血浆中的HSP70水平显着升高,故常认为血浆HSP70水平的升高是机体处于应激刺激状态的标志性“危险信号”。有研究发现吗啡处理后大鼠脑中HSP70 mRNA快速且剂量依赖性表达增加。本实验室前期文章报道,给予神经元吗啡刺激,吗啡通过MOR/AKT/KATP/ERK通路促进HSP70的释放。而KATP抑制剂格列本脲能够抑制KATP通道,减少HSP70的外排,抑制HSP70-TLR4-NLRP3信号通路介导的神经炎症。内质网应激是指细胞在受到刺激之后,内质网功能出现障碍,导致大量错误折叠和未折叠蛋白质积聚在内质网中的现象。在内质网应激初期,细胞生存信号通路激活,但是内质网应激时间过长或者程度过重,就会通过CHOP、JNK和内质网特有的caspase12激活而启动内质网应激介导的细胞凋亡信号通路,最终激活caspase3而导致细胞凋亡。有研究报道,在吗啡诱导OIH过程中,内质网应激扮演重要角色,如果出现内质网应激,将会诱导细胞凋亡,诱发加重OIH过程。考虑到HSP70以及内质网应激在OIH中的重要作用,以及格列本脲对HSP70的调节作用,我们考察HSP70等损伤相关的模式分子是否介导吗啡诱导OIH,以及格列本脲是否能够通过调节HSP70缓解OIH。目的:研究吗啡对HSP70的影响及格列本脲抑制吗啡导致的痛觉过敏的机制。方法:在SH-SY5Y细胞上,通过免疫印迹法来检测吗啡诱导内质网应激相关指标GRP78,eIF2α,IRE1α和ATF-6的表达,以及格列本脲和ERK抑制剂对其的影响;利用免疫荧光法检测GRP78的细胞定位。采用经典的测试小鼠疼痛行为学指标的实验方法——小鼠甩尾试验,来观察格列本脲对小鼠OIH行为学变化产生哪些影响。结果:吗啡促进HSP70的外排,这一作用被格列本脲取消;在SH-SY5Y细胞上,吗啡诱导内质网应激相关指标GRP78,eIF2α,IRE1α和ATF-6的表达;GRP78主要表达于神经元。内质网应激相关蛋白抑制剂能够显着缓解OIH。格列本脲可以减轻吗啡导致的痛觉过敏。结论:格列本脲通过减少HSP70外排,抑制内质网应激,缓解吗啡导致的痛觉过敏。
赵紫婷,苏士文,蒋蓉妹[6]（2015）在《矫治力初期牙髓组织HSP70表达及临床意义》文中研究表明目的观察在矫治力初期牙髓组织中heat shock protein 70（HSP70）的分布及表达,探讨适宜的矫治力对牙髓组织的影响并正确运用生物力学原则。方法 16例采用拔除上颌双侧第一前磨牙进行固定矫治的患者,随机分为正常对照组,加力（0.5 N）1、3、7 d组在受力相应时段拔除,并制备石蜡标本。免疫组织化学法（SABC）观察牙髓中HSP70的表达及分布。结果HSP70的阳性反应产物呈深褐色均质性沉淀,主要在血管内皮细胞,成牙本质细胞胞质周围呈颗粒状阳性表达。在加力1 d组HSP70的表达并没有明显增强（P>0.05）,3天组表达达高峰尤其是在血管内皮细胞中（P<0.01）,到7天后牙髓细胞的整体表达呈弱阳性。所有病例无一例牙髓坏死。结论在牙移动过程中牙髓组织中HSP70的表达先升高后又逐渐减低至恢复正常水平,提示HSP70在牙移动过程中对牙髓组织的改建过程可能起着重要作用;适宜的矫治力作用下产生的HSP70可能对牙髓组织提供了有效的保护。
孙芹芹[7]（2015）在《大气压低温等离子体对大鼠牙髓组织的影响》文中认为近年来,低温等离子体在口腔医学领域中的研究越来越多,如口腔材料表面改性、材料表面消毒、根管内杀菌、牙齿漂白以及种植体周围炎的预防等。在牙齿漂白方面,前人的研究结果已经表明低温等离子体具有显着的牙齿美白作用,而低温等离子体在这一过程中对牙髓组织的影响少有报道。本研究通过选择不同的牙齿漂白处理条件（包括低温等离子体,低温等离子体联合空白凝胶以及35%过氧化氢凝胶）来观察对大鼠牙髓组织的影响。以期为进一步的临床应用提供坚实的基础支持。本研究包括两部分：1.低温等离子体对大鼠牙髓影响的组织病理学研究本研究采用低温等离子体,低温等离子体联合空白凝胶,35%过氧化氢凝胶分为间歇和持续性的模式进行牙齿漂白,观察在漂白处理期间大鼠牙髓的组织病理学变化,并与正常对照组即未处理组的牙髓情况进行比较。结果显示低温等离子体联合空白凝胶的方法对牙髓组织无明显影响,且间歇的处理方式与正常对照组相同。低温等离子体组以及35%过氧化氢凝胶组均有不同程度的牙髓病理反应。2.低温等离子体对大鼠牙髓影响的免疫组织化学研究本研究采用低温等离子体,低温等离子体联合空白凝胶,35%过氧化氢凝胶分为间歇和持续性的模式进行牙齿漂白,通过HSP70, MMP-2,MMP-9的免疫组织化学方法观察在处理过程中牙髓组织的不同表现。结果显示正常对照组中几乎无HSP70,MMP-2,MMP-9的表达。等离子体组HSP70的表达高于35%过氧化氢凝胶组,而MMP-2, MMP-9的表达低于35%过氧化氢凝胶组。等离子体+空白凝胶组中HSP70, MMP-2, MMP-9呈低水平表达甚至无表达。35%的过氧化氢凝胶组中HSP70, MMP-2, MMP-9均呈强阳性表达。各实验组中不同时间点的表达也各不相同。结论：在低温等离子体的牙齿漂白的研究中,等离子体联合空白凝胶的方法对大鼠牙髓组织的影响最小。这将为下一步的临床应用提供了有力的基础支持。
尹音,陈新,李冬霞,张婧[8]（2014）在《丹参多酚酸盐对持续性+Gz环境下大鼠牙髓的影响》文中研究说明目的:探讨丹参多酚酸盐（DSSM）对高正加速度（+Gz）重复作用下的大鼠磨牙牙髓的作用。方法:27只SD雄性大鼠用随机区组法分为9组,每组3只。阳性对照组和药物组分别在+5 Gz、+10 Gz的条件下共离心30 s,每天重复5次,间隔以+1 Gz持续60 s,4 d/周,共3周。实验期间药物组于每次离心前30 min按剂量腹腔注射DSSM溶液（低、中、高给药剂量分别为2、6、18 mg/kg）,阴性及阳性对照组注射等体积生理盐水。实验结束后,光镜下观察各组大鼠牙髓组织形态学变化情况,并采用Real time qPCR方法测定大鼠磨牙牙髓中热休克蛋白（HSP70）mRNA相对含量表达的情况。结果:+5 Gz和+10 Gz阳性对照组大鼠活动程度降低,磨牙牙髓中出现空泡性变,组间差异不明显。HSP70 mRNA的相对含量比阴性对照组高（P<0.05）。药物组中HSP70 mRNA的相对表达量较各自阳性对照组降低,+10 Gz高剂量组有统计学意义（P<0.05）。结论:+Gz可引起牙髓损伤,+Gz值的增加与HSP70 mRNA相对表达量增加相关,DSSM可能对牙髓有保护作用。
陈洪博[9]（2014）在《热应激状态下大鼠心肌细胞HSP70在体内外表达规律与抗热应激损伤机理研究》文中研究表明热休克蛋白（heat shock proteins, HSPs）是广泛存在于酵母菌至哺乳动物细胞内的一类高度保守的蛋白质,在生理条件或应激条件下,能在有机体组织细胞内大量、稳定表达,对维持细胞生存和内环境稳定起重要的作用,其中HSP70蛋白是HSPs家族中表达最广泛的蛋白,由于它具有促进蛋白质的合成、折叠、运输和清除变性蛋白,目前成为研究最为广泛的IISPs。本文主要通过建立体内外大鼠心肌细胞热应激模型,观察热应激过程中心肌细胞内HSP70及其相应hsp70 mRNA的表达与转录,研究HSP70变化规律与热应激心肌细胞损伤之间的相关性,以及在热应激过程中抗应激性损伤的保护作用与机制；通过RNA干扰技术在H9c2心肌细胞抑制Hsc70蛋白表达,探讨Hsc70在心肌细胞凋亡中的作用。将60只220±20 g的SD大鼠随机分成6组,每组10只,将所有试验大鼠均进行为期20天的适应性饲养,使试验大鼠适应新的饲养环境,以减少外界环境应激因素的影响。适应性饲养结束后,将试验组大鼠的环境温度于30 min内由22±1℃迅速提高到42土1℃进行热应激处理,而对照组大鼠仍然置于正常饲养环境（22±1℃）中。热应激20 min、40 min、60 min、80 min和 100 min后,用眼球取血法,分离血清,检测血清中CK、CK-MB和LDH的含量。采血后迅速剖杀对照组和热应激试验组,将大鼠心脏其中一部分固定于10%中性福尔马林中,24h后换新鲜固定液,用于组织病理学、免疫组织化学检测；剩余部分细胞则速冻于液氮中,然后-70℃保存,提取蛋白和RNA分别用于Western Blot和荧光定量RT-PCR研究。将H9c2心肌细胞在37℃二氧化碳细胞培养箱中培养48 h细胞融合度达到90%以上后,迅速将H9c2心肌细胞置于预热的42℃二氧化碳培养箱中,热应激处理20 min、 40 min、60 min、80 min和100 min后收取样品。热应激结束后,取各组细胞上清液用于生化指标CK、CK-MB和LDH的检测；取各组心肌细胞分别进行组织学、细胞免疫荧光、Western Blot和荧光定量RT-PCR等检测。热应激后H9c2心肌细胞培养液中CK、CK-MB和LDH酶活性显着升高,表明H9c2心肌细胞结构的完整性发生了改变；热应激大鼠血清中CK、CK-MB知LDH酶活性显着升高,并且变化趋势是随着热应激时间的增加而逐渐升高,表明热应激处理后大鼠心脏出现随应激时间延长而加重的应激性损伤。组织学检测结果显示,热应激后H9c2心肌细胞体积急性肿胀,胞浆内出现大量红色颗粒,细胞核深染、个别浓缩；大鼠心肌细胞肿胀,细胞内颗粒变性,横纹逐渐消失,细胞间隙明显增宽,排列紊乱,心肌细胞间毛细血管扩张,充满红细胞,个别区域出现心肌细胞断裂。热应激死亡组大鼠心肌细胞排列明显紊乱,大量心肌细胞断裂,心肌细胞间毛细血管扩张充满红细胞。并且体内外心肌细胞应激性损伤表现出随着热应激时间的持续而逐渐加重的趋势,表明热应激导致大鼠体内外心肌细胞的病理损伤与所检测的酶活性密切相关,因此所检酶活性可以间接反映大鼠体内外组织细胞的应激性病理损伤。免疫组织化学检测结果显示,在对照组和热应激组大鼠体内外心肌细胞中均有Hsc70的表达和分布,且主要分布在细胞浆,不同的是H9c2心肌细胞中Hsc70阳性信号在热应激后减弱,大鼠心肌细胞中Hsc70阳性信号在热应激后增强随后减弱。Hsp72阳性信号只存在于热应激组大鼠体内外心肌细胞中,在体内外对照组中均不存在。在死亡组大鼠Hsc70主要分布于细胞浆中且呈不均匀分布,Hsp72呈颗粒状分布于细胞浆,但阳性信号强度明显低于对照组和热应激未死亡组大鼠。WesternBlot检测结果显示,离体培养H9c2心肌细胞中Hsc70表达量在应激过程中一直低于对照组,并且在热应激处理60 min后,Hsc70的表达量显着降低（P<0.05）；大鼠心肌细胞中Hsc70的表达量在热应激40 min后显着升高（P<0.05）,随着应激时间延长其含量又开始降低,在热应激100 min时已显着低于对照组；在死亡组大鼠心肌细胞中Hsc70含量极显着低于对照组（P<0.01）,也低于热应激100 min组。离体培养H9c2心肌细胞和大鼠心肌细胞中Hsp72的含量在热应激初期几乎检测不到,但随着热应激时间的延长均显着升高,然而Hsp72在体外培养H9c2心肌细胞中出现的时间早于在大鼠体内心肌细胞中、；在死亡组大鼠Hsp72含量高于对照组,但低于热应激100 min组。荧光定量PCR检测结果显示体内外大鼠心肌细胞hsp70mRNA在热应激后均显着或极显着升高,但在大鼠心肌细胞细胞中Hsp70蛋白表达有迟滞现象；在死亡组大鼠hsp70 mRNA含量高于对照组,但低于热应激100 min组。研究结果表明,HSP70在基因和蛋白表达水平均呈现出显着性变化,揭示HSP70可能在H9c2心肌细胞抵抗热应激损伤中起重要作用,可能参与心肌细胞获得热耐受过程。体外培养H9c2细胞分成对照组、热应激组和siRNA+热应激组。首先对siRNA的基因序列、作用浓度和转染时间进行筛选,确定作为Hsc70基因干涉的最佳条件,然后采用MTT、estern blot和流式细胞仪方法研究Hsc70对热应激H9c2心肌细胞凋亡信号通路的影响。试验结果表明：80 nmol/L FAM-siRNA+1.5μL Lipofectamine2000为最佳转染条件,转染后48 h收获细胞为最佳转染时间,以oligo3为最佳RNAi把基因。MTT结果显示热应激后H9c2心肌细胞活力明显降低,Hsc70抑制表达可降低细胞活力。流式细胞仪检测结果表明,热应激120 min后,细胞凋亡率极显着低于对照组（P<0.01）；Hsc70抑制表达,热应激240 min后热应激+siRNA组细胞凋亡率显着低于热应激组细胞凋亡率（P<0.05）。Western Blot结果显示细胞浆中Hsc70含量在热应激组下降,在热应激+siRNA组中极显着降低（P<0.01）; Hsp72含量在热应激+siRNA组显着高于热应激组；热应激后促凋亡基因如cleaved PARP、 AIF、cleaved caspase-3和Bax表达量显着升高,而抗凋亡基因如Bcl-2表达降低,GRP78表达量降低,caspase-12表达量升高,Fas和FADD表达量无明显差异；与热应激组相比Hsc70抑制表达后热应激过程中cleaved PARP、AIF、cleaved caspase-3、Bax和GRP78变化不明显,而caspase-12显着降低,Fas和FADD显着升高。热应激组和热应激+siRNA组中细胞核中Hsc70含量均呈现先升高后降低,siRNA组Hsc70表达量明显高于热应激组；细胞核中Hsp72、AIF和cleaved PARP表达量都升高,siRNA组Hsc70表达量明显高于热应激组。试验结果表明Hsc70抑制表达升高热应激引起的H9c2心肌细胞凋亡率；在热应激引起的细胞凋亡过程中, Hsc70主要通过内质网通路和死亡受体通路发挥作用。
苏士文,赵紫婷,程哲[10]（2014）在《正畸力作用下大鼠牙髓组织中热休克蛋白70的表达及意义》文中进行了进一步梳理目的检测正畸力作用下大鼠牙髓组织中热休克蛋白70（Hsp70）的表达和分布。探讨其在正畸移动中的作用和机制。方法建立大鼠正畸牙移动模型,分别在受力1、15、30d处死,制备左侧上颌第一磨牙及其周围牙槽骨的石蜡标本,采用免疫组织化学法检测大鼠正畸牙移动过程中牙髓组织中Hsp70的表达情况。结果正常对照组、正畸加力1d组、正畸加力15d组和正畸加力30d组牙髓组织中Hsp70表达量分别为4.02±0.03、28.13±0.23、10.02±0.08、5.23±0.42,正畸加力1d组大白鼠牙髓组织中Hsp70表达量显着高于正常对照组（P<0.01）,正畸加力15d组和正畸加力30d组与正常对照组的差异无统计学意义（P>0.05）。结论 Hsp70参与了正畸牙移动,并且保护了牙髓组织。
二、机械刺激后大鼠牙髓HSP70表达的动态变化（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、机械刺激后大鼠牙髓HSP70表达的动态变化（论文提纲范文）
（1）右美托咪定对窒息大鼠心肺复苏后神经细胞凋亡和自噬的影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 右美托咪定对缺血缺氧后脑神经细胞凋亡和自噬影响的作用机制 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 英文对照缩略词表 |
| 攻读学位期间公开发表论文 |
| 致谢 |
（2）运输应激对山羊主要器官的应激损伤及热休克蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| SUMMARY |
| 中英文缩略词表 |
| 第一章 综述 |
| 1 应激对动物机体的影响 |
| 1.1 应激与心脏 |
| 1.2 应激与肝脏 |
| 1.3 应激与肾脏 |
| 1.4 应激与呼吸系统 |
| 1.5 应激与免疫器官 |
| 1.6 应激与肠道 |
| 1.7 运输应激对动物生理、内分泌指标及肉质的影响 |
| 2 热休克蛋白与动物器官保护 |
| 2.1 热休克蛋白与心脏 |
| 2.2 热休克蛋白与肝脏 |
| 2.3 热休克蛋白与肾脏 |
| 2.4 热休克蛋白与肺脏 |
| 2.5 热休克蛋白与免疫器官 |
| 2.6 热休克蛋白与肠道 |
| 第二章 运输应激对山羊心脏的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要仪器设备 |
| 1.2 主要化学试剂 |
| 1.3 实验方案与设计 |
| 1.4 石蜡包埋及HE染色 |
| 1.5 透射电镜技术 |
| 1.6 实时定量PCR |
| 1.7 免疫组织化学 |
| 1.8 Western blot |
| 1.9 统计分析 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊心脏的显微病理学观察 |
| 2.2 山羊心脏的超微病理学观察 |
| 2.3 山羊心脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.4 山羊心脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第三章 运输应激对山羊肝脏的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊肝脏的显微病理学观察 |
| 2.2 山羊肝脏的超微病理学观察 |
| 2.3 山羊肝脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.4 山羊肝脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第四章 运输应激对山羊肾脏的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊肾脏的病理学观察 |
| 2.2 山羊肾脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.3 山羊肾脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第五章 运输应激对山羊肺脏、气管和支气管的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊气管的病理学观察 |
| 2.2 山羊支气管的病理学观察 |
| 2.3 山羊肺脏的病理学观察 |
| 2.4 山羊气管和支气管三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.5 山羊肺脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.6 山羊气管、支气管和肺脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第六章 运输应激对山羊免疫器官的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊淋巴结和脾脏的病理学观察 |
| 2.2 山羊淋巴结和脾脏三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.3 山羊淋巴结和脾脏三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 第七章 运输应激对山羊小肠的病理损伤及HSP27、HSP70和HSP90 表达的影响 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 山羊小肠的显微病理学观察 |
| 2.2 山羊小肠的超微病理学观察 |
| 2.3 山羊小肠三种热休克蛋白的分布与表达情况 |
| 2.4 山羊小肠三种热休克蛋白的定量表达情况 |
| 3 讨论与分析 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（3）热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制探讨（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 热习服和高原脑水肿大鼠模型的建立 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 热习服对大鼠高原脑水肿的预防保护效应 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 热习服预防大鼠高原脑水肿机制的初步研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 热习服对缺氧损伤的保护效应 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 |
| 致谢 |
（4）力生长因子与动态压力在促撕脱再植牙牙周膜再生修复中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 牙周膜干细胞的分离、培养与鉴定 |
| 0 引言 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 压力及力生长因子对人牙周膜干细胞增殖及分化的影响 |
| 0 引言 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 压力及力生长因子促牙周膜干细胞向牙周膜成纤维细胞分化的分子机制研究 |
| 0 引言 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第四部分 咬合力调控状态下力生长因子对大鼠牙撕脱性损伤后牙周膜再生修复的影响 |
| 0 引言 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（5）格列本脲通过抑制内质网应激缓解吗啡导致的痛觉过敏（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（6）矫治力初期牙髓组织HSP70表达及临床意义（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1. 1一般资料 |
| 1. 2 标本处理 |
| 1. 3 主要试剂 |
| 1. 4 免疫组化染色及染色结果的判定标准 |
| 1. 5 统计学方法 |
| 2 结 果 |
| 2. 1 HE 染色组织学观察( 均在低倍镜下观察) |
| 2. 2 免疫组化染色结果 |
| 3 讨 论 |
（7）大气压低温等离子体对大鼠牙髓组织的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 文献回顾 低温等离子体在口腔医学中的研究现状 |
| 一、低温等离子体在牙根管内杀菌中的应用 |
| 二、低温等离子体在牙齿漂白中的应用 |
| 三、低温等离子体在材料表面改性中的应用 |
| 四、低温等离子体相关安全性研究 |
| 五、总结与展望 |
| 前言 |
| 实验一 大气压低温等离子体对牙髓影响的组织病理学研究 |
| 1. 料及仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 大气压低温等离子体装置 |
| 2.2 低温等离子体的温度测量 |
| 2.3 低温等离子体对大鼠牙髓影响的组织病理学研究 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 低温等离子体的温度 |
| 3.2 低温等离子体对大鼠牙髓影响的组织病理学观察 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 实验二 大气压低温等离子体对大鼠牙髓影响的免疫组织化学研究 |
| 1. 材料与仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 组织标本制备 |
| 2.2 免疫组化法检测HSP70表达 |
| 2.3 免疫组化法检测MMP-2,MMP-9表达 |
| 2.4 结果判定标准 |
| 2.5 统计学分析 |
| 3. 结果与讨论 |
| 3.1 不同处理方式下大鼠牙髓组织HSP70的表达 |
| 3.1.1 实验结果 |
| 3.1.2 讨论 |
| 3.2 不同处理方式下大鼠牙髓组织MMP-2和MMP-9的表达 |
| 3.2.1 不同处理方式下大鼠牙髓组织MMP-2的表达 |
| 3.2.1.1 实验结果 |
| 3.2.2 不同处理方式下大鼠牙髓组织MMP-9的表达 |
| 3.2.2.1 实验结果 |
| 3.2.3. 讨论 |
| 3.2.4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（8）丹参多酚酸盐对持续性+Gz环境下大鼠牙髓的影响（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料和仪器 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 实验分组 |
| 1.2.2 实验条件 |
| 1.2.3 给药方法 |
| 1.3 光镜标本取材和制备 |
| 1.4 HSP70 mRNA的相对表达量 |
| 1.5 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 行为表现 |
| 2.2 磨牙肉眼观察 |
| 2.3 磨牙牙髓病理学观察 |
| 2.4 HSP70 mRNA的相对表达量 |
| 3 讨论 |
（9）热应激状态下大鼠心肌细胞HSP70在体内外表达规律与抗热应激损伤机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 应激损伤与热休克蛋白 |
| 1 应激 |
| 1.1 应激的概念 |
| 1.2 应激分类 |
| 1.3 应激反应的基本表现 |
| 1.4 应激对畜禽业的危害 |
| 1.5 热应激对机体的影响 |
| 2 热休克蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)的概述 |
| 2.1 HSP70的概念 |
| 2.2 HSP70的生物学功能 |
| 2.3 HSP70的主要生物学特性 |
| 2.4 HSP70的表达与调控 |
| 3 HSP70与细胞凋亡和细胞损伤 |
| 3.1 细胞凋亡 |
| 3.2 细胞损伤 |
| 4 RNA干扰 |
| 5 HSP表达及抗应激损伤研究的意义 |
| 参考文献 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第二章 大鼠体内外心肌细胞热应激损伤模型的建立 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 H9c2细胞生长曲线 |
| 2.2 热应激对H9c2细胞活力的影响 |
| 2.3 大鼠热耐受时间检测 |
| 2.4 热应激后体、内外大鼠心肌细胞损伤相关酶的检测 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 热应激大鼠体内、外心肌细胞中HSP70及其mRNA表达变化与应激性损伤研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 热应激后大鼠体内外心肌细胞的应激性病理损伤 |
| 2.2 热应激大鼠体内、外心肌细胞内Hsc70定位 |
| 2.3 热应激大鼠体内、外心肌细胞中Hsp72定位 |
| 2.4 热应激对大鼠体内、外心肌细胞内Hsc70表达水平的影响 |
| 2.5 热应激对大鼠体内、外心肌细胞内Hsp72表达水平的影响 |
| 2.6 RT-PCR检测hsp70 mRNA转录水平 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 热应激致死大鼠心肌细胞损伤及Hsp70表达变化研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物及试验设计 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 热应激死亡组大鼠心脏的组织病理变化 |
| 2.2 热应激死亡组大鼠心肌细胞内Hsp70定位 |
| 2.3 热应激死亡组大鼠心肌细胞内Hsp72定位 |
| 2.4 热应激死亡组大鼠心脏Hsc70表达量检测 |
| 2.5 热应激死亡组大鼠心脏Hsp72表达量检测 |
| 2.6 热应激死亡组大鼠心脏hsp70 mRNA表达量检测 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 Hsc70对热应激诱导心肌细胞凋亡的影响研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 数据统计与分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 荧光显微镜检测转染效率 |
| 2.2 FACS检测转染效率 |
| 2.3 Hsc70蛋白的表达 |
| 2.4 siRNA转染后不同时间Hsc70表达的影响 |
| 2.5 热应激对H9c2细胞凋亡的影响 |
| 2.6 Hsc70抑制表达后热应激对H9c2细胞凋亡的影响 |
| 2.7 热应激对心肌细胞活力的影响 |
| 2.8 免疫荧光检测热应激对心肌细胞凋亡的影响 |
| 2.9 Hsp70基因干涉热应激引起细胞凋亡通路的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 siRNA转染条件的研究 |
| 3.2 热应激对H9c2心肌细胞凋亡的影响 |
| 3.3 热应激对H9c2心肌细胞凋亡通路的影响 |
| 3.4 热应激对心肌细胞内HSP70表达的影响 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 本文创新点 |
| 附录 |
| 博士期间发表论文 |
| 致谢 |
四、机械刺激后大鼠牙髓HSP70表达的动态变化（论文参考文献）
- [1]右美托咪定对窒息大鼠心肺复苏后神经细胞凋亡和自噬的影响及其机制研究[D]. 陆件. 苏州大学, 2021(06)
- [2]运输应激对山羊主要器官的应激损伤及热休克蛋白表达的影响[D]. 郑文亚. 甘肃农业大学, 2019
- [3]热习服对大鼠高原脑水肿的预防效应及其机制探讨[D]. 柯贤锋. 中国人民解放军陆军军医大学, 2019(03)
- [4]力生长因子与动态压力在促撕脱再植牙牙周膜再生修复中的作用及机制研究[D]. 赵萤. 中国人民解放军空军军医大学, 2019(06)
- [5]格列本脲通过抑制内质网应激缓解吗啡导致的痛觉过敏[D]. 陶学有. 南京医科大学, 2018(01)
- [6]矫治力初期牙髓组织HSP70表达及临床意义[J]. 赵紫婷,苏士文,蒋蓉妹. 口腔医学, 2015(04)
- [7]大气压低温等离子体对大鼠牙髓组织的影响[D]. 孙芹芹. 兰州大学, 2015(01)
- [8]丹参多酚酸盐对持续性+Gz环境下大鼠牙髓的影响[J]. 尹音,陈新,李冬霞,张婧. 实用口腔医学杂志, 2014(06)
- [9]热应激状态下大鼠心肌细胞HSP70在体内外表达规律与抗热应激损伤机理研究[D]. 陈洪博. 南京农业大学, 2014(12)
- [10]正畸力作用下大鼠牙髓组织中热休克蛋白70的表达及意义[J]. 苏士文,赵紫婷,程哲. 浙江医学, 2014(05)