一、猪水泡病病毒对人的感染(论文文献综述)
周广亚[1](2020)在《国内市售猪肉和食用植物油危害因素的风险评估研究》文中提出我国是全球最大的猪肉和食用植物油消费国。近年来,猪肉和食用植物油安全事件频发,给人们的生命健康和社会稳定带来诸多不良影响。风险评估是国际公认的一种有效评估食品安全风险的方法,在食品安全风险管理中发挥着巨大作用。因此,本文采用概率暴露评估、综合评价、数据挖掘等风险评估方法,构建了猪肉和食用植物油中相关危害因素的风险评估模型,并在此基础上设计实现了猪肉和食用植物油安全风险评估系统,旨在为猪肉和食用植物油的安全监管提供支持,以降低猪肉和食用植物油安全风险发生的可能性。本文的主要研究内容和结论如下:1市售猪肉中化学性危害因素和致病微生物的风险评估(1)市售猪肉中化学性危害因素的风险评估:基于不同国家猪肉中兽药残留标准的差异,建立了进口猪肉中兽药残留的风险评估模型。结果表明,美国、巴西、泰国、澳大利亚和俄罗斯猪肉中兽药残留的潜在风险较低。采用地理信息系统(GIS)方法对2015-2019年中国发生的猪肉兽药残留安全事件的分布、聚类情况进行研究,结果显示我国猪肉中兽药残留安全事件在时空上呈聚集分布,且热点聚集区域多分布在我国西南地区。通过构建暴露评估模型对国产猪肉中铅、砷、镉、汞的健康风险进行评估,结果表明猪肉中的砷对2到4岁年龄段人群的致癌风险超出可接受水平。采用故障树分析法探究了猪肉供应链中导致化学性危害事件发生的薄弱环节,结果表明预防我国猪肉化学性危害事件发生的关键是加强政府部门的监管和进一步完善我国食品安全标准体系。(2)市售猪肉中致病微生物的风险评估:通过构建定量风险评估模型对进口猪肉传入非洲猪瘟病毒和猪水泡病病毒的风险进行评估,结果表明来自加拿大、美国、巴西、德国、西班牙的进口猪肉传入非洲猪瘟病毒和猪水泡病病毒的风险均较低。采用模块化过程风险模型法构建了国产猪肉中大肠杆菌的风险评估模型,结果表明影响国产猪肉中大肠杆菌风险的主要因素是售卖时猪肉中大肠杆菌的污染水平、购买后常温下的储存时间和储存温度。通过分析猪肉供应链中沙门氏菌浓度的变化,建立了猪肉中沙门氏菌的定量风险评估模型。结果表明,每1万人中约有51人因食用猪肉而罹患沙门氏菌病。2食用植物油中化学性危害因素的风险评估(1)食用植物油中苯并芘、黄曲霉毒素B1和重金属的风险评估:通过分析花生油、大豆油和菜籽油中苯并芘的污染情况,评估了3种食用植物油中苯并芘的致癌风险。结果表明,三种食用植物油中苯并芘的致癌风险均处于可接受水平。使用暴露限值法和数学模型法对花生油中黄曲霉毒素B1的健康风险进行评估,结果表明花生油中黄曲霉毒素B1具有较高的健康风险。基于食用植物油中铅、砷、镉、铬的污染水平,构建了食用植物油中重金属的膳食暴露风险评估模型。结果表明,食用植物油中重金属铬的致癌风险超出最大可接受水平。(2)食用植物油中化学性危害因素的综合风险评估:建立了基于风险矩阵的食用植物油中化学性危害因素的风险等级评估模型。结果表明,2018年山东、黑龙江两省食用植物油的安全状况整体较好,但两省都需加强对食用植物油中苯并芘、黄曲霉毒素B1和特丁基对苯二酚的风险管理。进一步采用灰度关联法结合解释结构模型法(GRA-ISM)构建了食用植物油中化学性危害因素的风险等级评估模型。研究结果表明,影响食用植物油安全的主要化学性风险因素是苯并芘、砷、酸价和二丁基羟基甲苯。另外,使用熵权层次分析法集成BP神经网络算法构建了食用植物油化学性危害等级预测模型,模型的十折交叉验证及独立测试的决定系数R2分别达到0.994和0.992,预测模型拟合效果较好。3、猪肉和食用植物油安全风险评估系统的构建基于本文建立的猪肉和食用植物油安全风险评估模型,本研究采用MVC分层开发模式,设计并开发了一套猪肉和食用植物油安全风险评估系统(http://www.biotechshu.com:8080/porkandoil),该系统可以为食品安全从业人员和普通消费者进行猪肉和食用植物油的安全风险管理提供辅助。
卢昌[2](2014)在《三种水疱性疾病GeXP检测方法的建立》文中研究说明口蹄疫、猪水泡病和水疱性口炎分别是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)、猪水泡病病毒(Swine vesicular disease virus,SVDV)和水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)引起的哺乳动物的急性、高度接触性传染病,这三种病毒都可以感染猪,发病率极高,并能够形成大范围的流行,均被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告的动物疫病。临床上这三种疾病均以猪舌、唇、口腔黏膜、乳头和蹄冠等处上皮发生水疱为主要症状,因此从临床症状上难以对这三种疾病进行区分,必须通过病原学进行鉴别诊断。GeXP多重基因分析系统(Gene eXpression Profiler Genetic Analysis System)是美国Beckman Coulter公司研发的用于多基因表达定量分析的平台。该系统以mRNA为模版,在同一PCR反应体系中由荧光标记的通用引物和特异性嵌合引物引发的多种PCR反应,随后经毛细管电泳分离技术进行分析。该系统将毛细管电泳分离技术和高灵敏的激光诱导荧光技术相结合,使基因表达定量分析实现了更高的灵敏度和更快的速度。本研究以口蹄疫病毒O型、A型、Asia1型、猪水泡病病毒和水疱性口炎病毒为研究对象,建立了5种病毒的GeXP多重PCR检测体系。研究内容如下:1.5种病毒的引物常规PCR验证参考GenBank中已公布的FMDV-O型、FMDV-A型、FMDV-Asia1型、SVDV及VSV的基因组序列,根据GeXP引物设计要求选择其保守区域设计引物,并在RNA基因组水平上对所设计的5对引物的特异性和灵敏性进行验证。同时,构建口蹄疫病毒的O、A、Asia1、SVDV和VSV的pMD18-T Simple克隆载体,对所构建的质粒进行测序。结果显示,5对引物均具有良好的特异性和敏感性,克隆的靶基因与NCBI公布的序列一致性均在95%以上。2. GeXP多重PCR的建立通过对上述5对引物进行修饰,设计含有通用引物的特异性嵌合引物,以及5’端含有Cy5的通用引物。建立了GeXP的单重PCR和多重PCR检测系统,并对它们的特异性和敏感性进行了验证。结果显示所建立的GeXP单重PCR和多重PCR检测方法具有良好的特异性,除却FMDV-A型GeXP单重PCR检测灵敏度达到10copies/μL,其他4种病毒的GeXP单重PCR检测灵敏度均达到102copies/μL, GeXP多重PCR检测灵敏性为102copies/μL,比文献报道的荧光定量PCR的灵敏性高10~100倍。3. GeXP的样品检测及试剂盒组装利用建立的GeXP多重PCR检测体系对实验室保存的5株FMDV-O型毒株、3株FMDV-A型毒株、3株FMDV-Asia1型毒株、SVDV、VSV-IN毒株的野外样品和人工感染样品以及不同公司生产的口蹄疫病毒灭活疫苗进行了检测。同时组装了GeXP多重PCR检测试剂盒,并对其进行了批间、批内和保存期的验证检测。结果显示,该方法对5种病毒的检出率可达到100%,具有很好的敏感性和特异性,且该试剂盒具有良好的实用性和稳定性,在-20℃下可以保存6个月。
郑海学[3](2007)在《动物RNA病毒反向遗传系统的研究和建立》文中研究指明针对非逆转录RNA病毒发展起来的病毒反向遗传学可以实现对RNA病毒基因组结构与功能、复制与表达、病毒致病机制等研究。本研究用T7RNA聚合酶系统和聚合酶Ⅰ系统为基础建立了体内外拯救方法并初步进行应用。一、SVDV HK/70株生物特性测定、生物信息学分析及以T7 RNAP为基础的体外病毒拯救方法的建立和应用为了建立以T7 RNA聚合酶系统为基础的体外拯救病毒方法,选择猪水泡病病毒(SVDV)HK/70株作为细胞质复制的RNA病毒的研究模型。首先,分离和鉴定了该病毒,并测定了该病的一些生物学特性。然后,构建了SVDV全长cDNA并进行序列测定,以此为基础,分析了其相关生物信息学特征。为了鉴定SVDV HK/70株的全长cDNA分子的感染性,以线化的SVDV HK/70株的全长cDNA质粒(pSVOK12)为模板,应用T7 RNA聚合酶系统在体外进行转录,将获得的RNA用脂质体转染法导入IBRS-2细胞,传代培养,可以观察到典型的SVDV致细胞病变效应。使用反向血凝鉴定试验、间接免疫荧光实验、RT-PCR和序列测定进行检测,结果表明,从猪水泡病病毒全长cDNA拯救出了猪水泡病病毒(G-SVDV);利用常规负染的方法,电镜观察了G-SVDV的形态;测定了G-SVDV的TCID50和LD50,并与亲本毒进行了比较,结果显示G-SVDV与亲本毒的毒力差别不显着。本研究结果证明,我们已经成功构建了猪SVDV HK/70的感染性cDNA克隆,为进一步探索SVDV病毒致病的分子机制及研制新型SVD疫苗奠定了良好的基础。二、以T7 RNAP为基础的体内病毒拯救方法的建立和应用为了建立高效的体内病毒拯救系统,我们利用逆转录病毒转导技术建立了稳定表达T7 RNA聚合酶的细胞系。先克隆出T7 RNAP基因,定向克隆进逆转录病毒载体pBABEpuro,得到阳性重组质粒pT7BABEpuro。共转染包装细胞,获得含有VSV-G膜的假型病毒,含有T7 RNA聚合酶基因。然后把该假型病毒感染靶细胞,把T7 RNAP基因分别整合进BHK-21、IBRS-2和SK6细胞的基因组内。通过抗性筛选,获得了稳定表达具有转录活性T7 RNA聚合酶的细胞系,通过PCR、间接免疫荧光和流式细胞仪(FCM)等技术进行鉴定,结果表明,该T7 RNAP能够被稳定地整合进靶细胞基因组内,细胞系内的T7 RNAP具有较好的转录活性,其活性传代不减弱。最后,利用该细胞系成功拯救出具有感染性的SVDV,并与亲本毒的生物学特性作了比较。该策略使RNA拯救方法简化为一步快速的拯救方法。利用该方法对CSFV C株进行了拯救,进行了拯救病毒的鉴定,并做了兔子致病性试验。三、以真核细胞RNA聚合酶Ⅰ系统为基础的体内拯救系统的建立和应用为了克服那些难以适应甚至没有可适应细胞系的病毒拯救难题,设计构建了完全利用真核细胞聚合酶的RNA病毒体内拯救系统。先克隆出所需的真核RNA聚合酶Ⅰ启动子和终止子序列,建立RNA聚合酶Ⅰ启动转录的重组质粒。然后把SVDV全长cDNA装配进该载体,在IBRS-2细胞内和乳鼠体内成功拯救出了SVDV,第一次证明了聚合酶Ⅰ系统能够高效拯救细胞质复制的正链RNA病毒。并利用该拯救系统对FMDV进行了拯救,首次证明该聚合酶I系统能够转录出至少长8.2 kb的转录本。在此基础上,构建含有外源性生物标记5B 19的SVDV HK/70全长cDNA克隆,利用聚合酶Ⅰ反向遗传拯救系统拯救出含有该标记的病毒。为制备含有基因标记疫苗和建立鉴别诊断方法奠定一定的基础。该设计思路的实现,拓宽了高效病毒拯救的途径,为病毒反向遗传学研究提供了更为高效和广泛应用的病毒拯救技术方法。
冯霞[4](2005)在《猪瘟和猪水泡病基因标记疫苗的研究》文中研究指明猪瘟和猪水泡病被世界动物卫生组织(OIE)列入A类传染病名录,世界各国对这两种疫病均采取了严加防制及消灭措施,二者也是国际贸易中必查必检的对象。疫苗接种是预防和控制动物疫病的主要手段。由于传统疫苗在生产中的生物安全隐患和感染与免疫动物难以鉴别等缺陷,利用现代分子生物学技术和免疫学理论,研制新型安全、多联、可鉴别疫苗已成必然之势。基因疫苗以其自身的诸多优点和巨大的应用潜能已成为当今的研究热点之一。本研究通过RT-PCR、套式PCR和亚克隆技术构建了猪水泡病基因疫苗、猪水泡病和猪瘟二联基因疫苗和几种猪瘟基因疫苗,研究其免疫效果,为最终研制成功猪瘟和猪水泡病基因疫苗作技术探索。 1)构建了几种猪瘟基因疫苗:包括E2基因单表达重组质粒pcDNA Es1-11、E2基因双抗原表达质粒pBudCE Es1-11/Es2-22、E2基因与报告基因lacZ共表达质粒pBudCE lacZ/Es2-22、E2基因与猪IFN-γ基因共表达质粒pBudCE Es1-11/IFN-γ、以及E2基因与猪IL-18基因共表达质粒pBudCE Es1-11/IL-18,将以上真核表达质粒分别转染BHK-21细胞,用原位染色、酶联免疫吸附试验(ELISA)或RT-PCR技术证实它们均可表达外源基因。 2)用这几种猪瘟基因疫苗免疫兔,以阻断ELISA和MTT法监测试验兔抗体水平和淋巴细胞增殖情况,并进行攻毒保护试验。结果,单表达质粒pcDNA Es1-11免疫组中有3/4兔产生E2抗体,攻毒后,4/4完全保护。双抗原表达质粒pBudCE Es1-11/Es2-22免疫组有1/4兔产生抗体,攻毒后,1/4完全保护,1/4部分保护,2/4不保护。pBudCE Es1-11/IL-18利pBudCE Es1-11/IFN-γ免疫组,都未检测到猪瘟抗体(4/4),攻毒后,1/4部分保护,3/4不保护。pBudCE lacZ/Es2-22免疫组(3只)也没出现猪瘟抗体,攻毒后,3/3部分保护。而空载体pcDNA3.1和pBudCE4.1对照组,4/4血清阴性,攻毒后,全部发病。与对照组相比,各免疫组的淋巴细胞均有一定程度的增殖。 3)构建了猪水泡病和猪瘟二联基因疫苗pBudCE E2/P1-11,用它转染BHK-21细胞,以间接免疫荧光染色和ELISA分别检测到猪水泡病和猪瘟抗原的表达。将其免疫兔,可检测到免疫组兔T淋巴细胞增殖明显;但用阻断ELISA未检测到血消CSFV特异性抗体,用猪瘟活疫苗(Ⅱ)攻击,实验兔有1/4完全保护。用乳鼠中和试验检测,发现所有兔血清SVDV中和抗体均低于1∶4。 4)构建了猪水泡病基因疫苗pcDNA P1,将其转染的BHK-21细胞经荧光染色,可见许多特异性荧光细胞。用其单独(B组)免疫或与pcDNA IFN-γ共同(C组)免疫猪三次,检测免疫前、后猪血清中SVDV特异性抗体的变化,发现免疫后B组和C组各有两只猪产生低水平的抗体,并在攻毒后迅速升高;并对免疫前和攻毒前的猪血清用乳鼠中和试验检测SVDV特异性抗体,结果只有pcDNA P1与pcDNA IFN-γ共同免疫组中有两只猪产生低水平的中和抗体(1∶4),其余猪的中和抗体均小于1∶4。第三次免疫3月后,用猪水泡病香港乳鼠组织毒5mL(2mL蹄叉和3mL颈部肌肉)分两个滴度(104 LD50/0.1mL和105 LD50/0.1mL)攻击,结果pcDNA P1单独免疫组(B组)有1/4获得完全保护(为104/0.1mL攻击),pcDNA P1与pcDNA IFN-γ共同免疫组(C组)中有1/4获得部分保护(为105/0.1mL攻击),A和D两个对照组全部发病。
陈玉燕[5](2015)在《9种猪病病原体GeXP多重PCR检测方法的研究》文中指出猪圆环病毒二型、猪瘟病毒、猪蓝耳病毒、水疱性口炎病毒、猪水泡病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪肺炎支原体、副猪嗜血杆菌以及猪胸膜肺炎放线杆菌等都是临床上较为常见的,传染性强、流行广泛,且危害极为严重的猪病病原体,极大的影响并制约着我国的生猪养殖行业的发展,也对社会公共卫生安全造成了巨大的隐患。这9种疫病常以混合感染的形式出现,临床症状十分复杂,目前的检测手段难以应对。GenomeLab TM GeXP遗传分析系统是一种新型的多基因表达定量分析平台,将GeXP的多重PCR扩增技术与毛细管电泳分析技术相结合,利用带有荧光标记的通用引物和特异性嵌合引物的联合扩增,使目的基因得到高效表达,该技术具有特异性强、灵敏度高、高通量及检测速度快等优点。本研究根据NCBI公布的PCV-2、CSFV、PRRSV、VSV、SVDV、TGE、M.hyo、HPS以及APP的靶基因序列,对保守区基因序列进行分析比对,并设计9对特异性引物,利用常规PCR的单引物单模板和单引物混合模板的双重验证方式,对以上引物进行特异性验证分析;同时利用高效的pMD19-T Simple克隆载体构建9种阳性克隆质粒,应用GeXP技术进行测序分析。结果显示,所设计的引物均具有良好的特异性和敏感性,阳性克隆质粒测序结果均与GenBank所中公布靶基因序列相符,同源性达到99.5%以上。将9对特异性引物其进行优化和修饰,设计出两组GeXP引物:一对加有cy5荧光标记的通用引物和9对特异性嵌合引物,并建立单重GeXP体系、初步构建多重GeXP体系、对多重体系的特异性引物Tm值及特异性引物的含量进行优化,并验证其特异性及灵敏度。结果显示,单重GeXP体系灵敏度可达102copies/μL,灵敏度与Lamp相当,是荧光定量PCR的1000多倍;多重GeXP体系优化结果显示,最优Tm值为58.5℃,最佳特异性引物含量为上下游各0.5μL,在该反应条件下体系对于目的片段的扩增更加的清晰、特异、更易于的判断,同时提高了该体系扩增的稳定性。对其他12种常见畜病病原体的进行特异性验证时,均未发现非特异性扩增,从而进一步证明该多重GeXP体系具有极高特异性;对27份临床样本进行检测,结果显示阳性率为40.7%,与实际的结果相符,证明了该多重GeXP体系具有高准确性及较强的临床实用价值。
王清艳[6](2008)在《动物外来传染病输入风险评估模型的建立及其应用》文中研究说明随着经济全球化进程的不断加快,国际间经贸往来和人员交往日益增多,传染病的传入风险也日益加大。近几年来,国际上先后出现了三十多种新发现的传染病,一些早已得到控制的老的传染病又死灰复燃。如何能提高传染病的早期发现及早期预警能力,及时做好防控措施,一直是研究与管理工作者努力解决的重大问题。到底哪些传染病传入我国的可能性更大,应以科学的方法加以确定。本课题以大量传染病疫情及相关信息为基础,应用风险分析的原理,建立了动物外来传染病输入风险评估体系,并以本体系为基础,对西尼罗河热的传播机制和流行规律分析,评估多种风险因素作用下我国各县市西尼罗河热风险程度。主要进行以下几方面的研究:1.建立了国际A类动物传染病疫情数据库,分析传染病的流行病学特点及流行现状。2.采用多指标综合评估方法,建立了动物外来传染病输入风险评估体系,体系主要包括:风险评估指标确定;风险评估指标说明;风险评估指标评价内容;风险评估指标判定参考标准;风险评估模型的建立。3.通过对西尼罗河热以往疫情数据分析和咨询专家意见,确定了中国西尼罗河热疫情发生的风险因素,收集相关资料,建立了可用于疫情分析的西尼罗河热风险数据库,采用定性与定量相结合的分析方法,对西尼罗河热传入我国的风险性进行了分析。4.利用美国疾病监控中心2003~2007年美国西尼罗河热月发病资料和香港气象中心1961~1990年美国月平均气温数据,对气温因素在美国西尼罗河热疫情发生中的作用进行了分析。结果显示:随着温度的升高,感染西尼罗河热的人数增加,以月为标准,气温与西尼罗河热发病人数的关系呈正态分布,这种规律在美国各州区域尺度上都是相似的。5.以中国国家气象中心1999~2004年气象资料为基础数据,结合GIS技术研究气象因子对西尼罗河热发生与传播的影响,建立了风险评估标准并绘制专题地图。以月平均温度和相对湿度综合因素作为风险因子绘制专题地图并进行分析,结果发现:我国西北部除新疆西北部有中度风险地区零星分散外,全年风险较低。东南部1~7月高风险区从我国低纬度地区逐渐向高纬度地区移动,7月风险范围最大;8~12月,高风险区从我国高纬度地区逐渐移回到低纬度地区。6.以动物外来传染病输入风险评估体系为基础,对多种风险因素综合评估,分析我国各县市西尼罗河热发生的风险情况。结果表明:西尼罗河热对我国的影响不大,新疆、黑龙江、四川和江苏风险相对高,其次为吉林、辽宁、山东、浙江、江西、湖南、湖北和广东,其他地区风险相对低。西尼罗河热风险地区变化的原因主要取决于气温变化,全国整体时空模式:5~10月风险偏高,其中7、8月风险最高,11月至翌年5月风险相对低。将风险评估方法引入动物外来传染病输入风险评估体系是可行的,具有常规研究方法不可替代的作用。动物外来传染病输入风险评估指标考虑了风险因素的各个方面,具有普遍的地区适用性。如何结合其他传染病发生及传播的相关影响因素,建立更为全面合理的评估模型,并将其集成到评估体系中,是今后工作的重点。
况乾惕[7](1977)在《猪水泡病国外科研动态》文中研究指明 自1966年10月Nardelli氏等报道了一种临床上与口蹄疫难以区分的猪病在意大利Lombardy地区发生以来,1968年,意大利Brescia市兽疫实验室预备研究所与英国Pirbright动物病毒研究所的工作者,最早描述了该病是由一种肠道病毒引起,而与口蹄疫、水泡性口炎和水泡疹相区别。嗣后,1971年在香港、1972年以后本病在一些欧洲国家和日本相继出现,因而引起了国际有关部门和许多国家有关行政部门和研究单位的深切关注。
F.Brown,周育彪[8](1977)在《猪水泡病病毒对人的感染》文中研究说明猪水泡病病毒与科赛奇B5病毒在血清学上有着密切的关系,但依据中和试验和免疫扩散试验能将这两种病毒区分开来。应用上述试验,证明了帕布莱依特动物病毒研究所从事猪水泡病试验的四个人员所患的科赛奇样疾病是由猪水泡病病毒引起的。
江苏农学院[9](1977)在《猪水泡病和猪口蹄疫鉴别诊断》文中研究指明 1976年初,我省部分肉联厂和少数农村发生一种临床症状和猪水泡病十分相似的猪水泡性疾病,但病情比猪水泡病严重,尤其是鼻端较多出现水泡,约占30%左右。发病率一般在2~3天内可达90~100%。流行疫区、疫点有部分水牛发病,但同舍黄牛未见有发病。猪水泡病康复猪和注射猪水泡病免疫血清猪仍对本病有易感性。为了鉴定疾病的性质,谋图迅速控制和扑灭此病,现将我们配合省食品公司,省商品检验局以及部分肉联厂所做的一些工作,总结如下。
熊谷哲夫[10](1975)在《猪水泡病》文中研究指明 日本于1973年11月至12月,在神奈川、茨城以及爱知三县发生了具有猪口蹄疫症状的疾病,判明它是由肠道病毒引起的猪水泡病。关于猪水泡病发生的经过,病的性质以及其他国家发生的状况等等,在农林部编辑的《家畜卫生周报》中曾有详细的报道。除此而外,现在几乎没有得到其他的情报。学术报告也为数不多,而关于发病的病理,传播方式等了解此病必要的知识方面,还没有报告。不过,1972~73年在欧洲各地发生了猪水泡病,由于欧美研
二、猪水泡病病毒对人的感染(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、猪水泡病病毒对人的感染(论文提纲范文)
(1)国内市售猪肉和食用植物油危害因素的风险评估研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1 猪肉和食用植物油安全问题的概述 |
1.1 猪肉安全问题的概述 |
1.2 食用植物油安全问题的概述 |
2 猪肉和食用植物油安全风险评估的现状 |
2.1 猪肉安全风险评估的现状 |
2.2 食用植物油安全风险评估的现状 |
2.3 猪肉和食用植物油安全风险评估的常用方法 |
3 风险评估系统开发涉及的计算机技术 |
3.1 Java EE技术 |
3.2 Java Web开发技术 |
3.3 MVC开发模式 |
4 本研究的意义和主要内容 |
第二章 市售猪肉中化学性危害因素和致病微生物的风险评估 |
1 数据与方法 |
1.1 数据准备 |
1.2 计算方法 |
2 结果与分析 |
2.1 市售猪肉中化学性危害因素的风险评估 |
2.1.1 进口猪肉中兽药残留的风险评估 |
2.1.2 国产猪肉中兽药残留的风险评估 |
2.1.3 国产猪肉中重金属的风险评估 |
2.1.4 基于故障树的国产猪肉中化学性危害因素的风险评估 |
2.2 市售猪肉中致病微生物的风险评估 |
2.2.1 进口猪肉传入非洲猪瘟病毒和猪水泡病病毒的风险评估 |
2.2.2 国产猪肉中大肠杆菌的风险评估 |
2.2.3 国产猪肉中沙门氏菌的风险评估 |
3 讨论 |
4 本章小结 |
第三章 食用植物油中化学性危害因素的风险评估 |
1 数据与方法 |
1.1 数据准备 |
1.2 计算方法 |
2 结果与分析 |
2.1 食用植物油中苯并芘、黄曲霉毒素B1和重金属的风险评估 |
2.1.1 食用植物油中苯并芘的风险评估 |
2.1.2 花生油中黄曲霉毒素B1的风险评估 |
2.1.3 食用植物油中重金属的风险评估 |
2.2 食用植物油中化学性危害因素的综合风险评估 |
2.2.1 基于风险矩阵的食用植物油中化学性危害因素的风险等级评估 |
2.2.2 基于GRA-ISM的食用植物油中化学性危害因素的风险等级评估 |
2.2.3 食用植物油中化学性危害等级的预测 |
3 讨论 |
4 本章小结 |
第四章 猪肉和食用植物油安全风险评估系统的开发 |
1 材料与方法 |
1.1 风险评估系统的开发环境 |
1.2 风险评估系统的结构设计 |
2 结果与分析 |
2.1 系统主界面模块的实现 |
2.2 参数输入和结果显示模块的实现 |
2.3 业务控制模块的实现 |
2.4 猪肉和食用植物油安全风险评估模块的实现 |
2.4.1 进口猪肉中兽药残留的风险评估模型的实现 |
2.4.2 猪肉中大肠杆菌的风险评估模型的实现 |
2.4.3 食用植物油中苯并芘的风险评估模型的实现 |
2.4.4 食用植物油中化学性危害等级预测模型的实现 |
3 讨论 |
4 本章小结 |
第五章 全文总结 |
附录 |
参考文献 |
作者在攻读硕士学位期间公开发表的论文 |
作者在攻读硕士学位期间所参与的课题 |
致谢 |
(2)三种水疱性疾病GeXP检测方法的建立(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
英文缩略表 |
第一章 引言 |
1.1 口蹄疫病毒的研究进展 |
1.1.1 口蹄疫病毒的病原学特征 |
1.1.2 口蹄疫病毒的流行病学特征 |
1.1.3 口蹄疫的临床症状 |
1.1.4 口蹄疫诊断的研究进展 |
1.2 猪水泡病病毒的研究进展 |
1.2.1 猪水泡病毒病毒的病原学特征 |
1.2.2 猪水泡病病毒的流行病学特征 |
1.2.3 猪水泡病病毒的临床症状 |
1.2.4 猪水泡病诊断的研究进展 |
1.3 水疱性口炎病毒的研究进展 |
1.3.1 水疱性口炎病毒的病原学特征 |
1.3.2 水疱性口炎病毒的流行病学特征 |
1.3.3 水疱性口炎的临床症状 |
1.3.4 水疱性口炎诊断的研究进展 |
1.4 GeXP多重基因表达分析系统及其应用 |
1.4.1 系统扩增的原理 |
1.4.2 系统的优势 |
1.4.3 系统在生命科学中的应用 |
1.4.4 展望 |
1.5 研究的目的意义 |
第二章 FMDV、VSV及SVDV引物设计及验证 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 毒株 |
2.1.2 主要试剂 |
2.1.3 试剂配制 |
2.1.4 主要仪器 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 细胞的冻存、复苏与传代 |
2.2.2 FMDV、VSV及SVDV的培养 |
2.2.3 引物设计与合成 |
2.2.4 病毒RNA模板提取 |
2.2.5 病毒RNA的RT-PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳 |
2.2.6 单重PCR的特异性验证 |
2.2.7 单克隆质粒标准品的制备 |
2.2.8 单重PCR的敏感性验证 |
2.3 结果 |
2.3.1 单引物验证实验结果 |
2.3.2 单重PCR的特异性验证 |
2.3.3 单克隆质粒标准品的鉴定 |
2.3.4 单重PCR的灵敏度验证 |
2.4 讨论 |
第三章 FMDV、VSV及SVDV的GeXP检测方法的建立 |
3.1 材料与仪器 |
3.1.1 主要试剂 |
3.1.2 主要仪器 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 GeXP引物的设计与合成 |
3.2.2 GeXP单重PCR检测体系的建立 |
3.2.3 引物特异性及灵敏性分析 |
3.2.4 GeXP多重PCR的建立及灵敏性分析 |
3.3 实验结果 |
3.3.1 GeXP单重PCR的特异性分析 |
3.3.2 GeXP单重PCR的灵敏性分析 |
3.3.3 GeXP多重PCR的灵敏性分析 |
3.4 讨论 |
第四章 GeXP多重PCR的初步应用及其检测试剂盒的组装 |
4.1 材料与仪器 |
4.1.1 实验试剂 |
4.1.2 主要仪器 |
4.2 实验方法 |
4.2.1 样品处理及病毒RNA的提取 |
4.2.2 样品的GeXP多重PCR检测 |
4.2.3 试剂盒的组装 |
4.2.4 试剂盒使用说明书 |
4.2.5 试剂盒性能验证 |
4.3 实验结果 |
4.3.1 样品检测 |
4.3.2 试剂盒组装 |
4.3.3 试剂盒储存稳定性验证 |
4.3.4 试剂盒的重复性检测 |
4.4 讨论 |
第五章 全文总结 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
作者简介 |
(3)动物RNA病毒反向遗传系统的研究和建立(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 研究背景、目的和意义 |
1.2 研究内容和方法 |
1.2.1 以T7 RNAP为基础的体外病毒拯救方法的建立和应用 |
1.2.2 以T7 RNAP为基础的体内病毒拯救方法的建立和应用 |
1.2.3 完全依赖真核细胞RNA聚合酶Ⅰ为基础的体内拯救系统的建立和应用 |
1.3 研究现状 |
第二章 文献综述:RNA病毒反向遗传学系统 |
2.1 前言 |
2.2 RNA病毒反向遗传系统的理论基础 |
2.2.1 正链RNA病毒反向遗传系统建立的理论基础 |
2.2.2 负链RNA病毒反向遗传系统建立的理论基础 |
2.2.3 应用于RNA病毒反向遗传学中的转录系统 |
2.3 RNA病毒拯救系统建立的策略 |
2.3.1 基因组全长cDNA克隆的构建以及要解决的问题 |
2.3.2 体外转录和感染性转录本 |
2.3.3 体内转录和感染性cDNA克隆 |
2.3.4 利用不同转录系统的病毒拯救策略 |
2.3.5 用于拯救病毒的转录系统 |
2.4 影响感染性的参数(因素) |
2.4.1 体外转录的影响因素 |
2.4.2 非病毒核苷酸在子代病毒的归宿 |
2.5 病毒拯救体系的研究进展 |
2.5.1 以T7 RNA聚合酶为基础的病毒拯救系统的研究进展 |
2.5.2 真核RNA聚合酶Ⅰ拯救系统研究进展 |
2.5.3 真核RNA聚合酶Ⅱ拯救系统研究进展 |
第一部分 SVDV HK/70株生物学特性测定、生物信息学分析及以T7 RNA聚合酶为基础的体外拯救方法的建立 |
第三章 SVDV HK/70株病毒生物学特性初步鉴定 |
3.1 材料和方法 |
3.1.1 毒株、细胞与实验动物 |
3.1.2 试剂与酶 |
3.1.3 毒种鉴定 |
3.1.4 病毒的致病性 |
3.2 结果 |
3.2.1 毒种鉴定 |
3.2.2 病毒的致病性 |
3.3 讨论 |
第四章 SVDV HK/70株基因组全长cDNA的构建和序列测定 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 毒株 |
4.1.2 试剂与酶 |
4.1.3 引物设计与合成 |
4.1.4 RT-PCR |
4.1.5 目的基因的克隆与鉴定 |
4.1.6 HK/70株基因组全长cDNA序列的装配及测定 |
4.2 结果 |
4.2.1 RT-PCR的结果 |
4.2.2 全长cDNA的连接及初步鉴定 |
4.2.3 全长cDNA的序列测定及其核苷酸序列 |
4.3 讨论 |
第五章 SVDV HK/70株全基因组生物信息学分析 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 毒株序列 |
5.1.2 HK'1/70株序列同源性比较和序列进化分析 |
5.1.3 蛋白水解位点的预测分析 |
5.1.4 5'NTR和3'NTR序列特征分析 |
5.1.5 SVDV结构蛋白二级结构的预测 |
5.1.6 SVDV结构蛋白抗原特异性淋巴细胞抗原表位的预测 |
5.2 结果 |
5.2.1 HK/70株系统发生树分析结果 |
5.2.2 SVDV 5'NCR序列分析结果 |
5.2.3 3'NTR的一级结构分析 |
5.2.4 HK/70株3'NTR的二级结构分析 |
5.2.5 蛋白二级结构和B细胞表位的预测结果 |
5.3 讨论 |
第六章 含有病毒全长cDNA重组质粒的稳定性分析 |
6.1 材料与方法 |
6.1.1 毒株 |
6.1.2 试剂与酶 |
6.1.3 RT-PCR |
6.1.4 目的基因的克隆与鉴定 |
6.1.5 含有HK/70株基因组全长cDNA序列的psVDGEM重组质粒的构建 |
6.1.6 含有HK/70株基因全长cDNA的psVDVOK_(12)重组质粒构建 |
6.1.7 质粒稳定性分析 |
6.2 结果 |
6.2.1 RT-PCR的结果 |
6.2.2 全长cDNA的连接及初步鉴定 |
6.2.3 测序结果分析 |
6.3 讨论 |
第七章 SVDV HK/70株全长cDNA分子克隆感染性的鉴定 |
7.1 材料和方法 |
7.1.1 实验材料 |
7.1.2 体外转录物RNA的制备 |
7.1.3 转染IBRS-2细胞 |
7.1.4 反向间接血凝鉴定试验 |
7.1.5 间接免疫荧光检测病毒抗原 |
7.1.6 RT-PCR法检测病毒基因组 |
7.1.7 电子显微镜观察病毒粒子 |
7.1.8 TCID_(50)实验 |
7.1.9 乳鼠LD_(50)实验 |
7.2 结果 |
7.2.1 体外转录结果 |
7.2.2 转染IBRS-2细胞结果 |
7.2.3 反向间接血凝鉴定试验 |
7.2.4 拯救病毒的RT-PCR鉴定 |
7.2.5 免疫荧光检测结果 |
7.2.6 电子显微镜观察结果 |
7.2.7 TCID_(50)实验结果 |
7.2.8 乳鼠毒力试验结果 |
7.3 讨论 |
第二部分 以T7 RNA聚合酶为基础的体内拯救方法的建立和应用 |
第八章 稳定表达T7 RNA聚合酶细胞系的建立以及用该细胞系对SVDV的体内拯救 |
8.1 材料与方法 |
8.1.1 菌株、质粒与细胞 |
8.1.2 酶与试剂 |
8.1.3 引物设计与合成 |
8.1.4 T7 RNAP基因的扩增与逆转录病毒载体的克隆 |
8.1.5 鉴定T7 RNAP转录活性载体的构建 |
8.1.6 GP2-293细胞培养与转染pT7BABEpuro |
8.1.7 假型重组逆转录病毒感染宿主细胞 |
8.1.8 不同代次的IBRST7细胞的T7 RNAP基因的PCR检测 |
8.1.9 SDS-PAGE对IBRST7细胞的T7 RNAP检测 |
8.1.10 T7 RNAP活性检测 |
8.1.11 流式细胞仪对细胞表达水平的分析 |
8.1.12 BHKT7和SK6T7细胞系的建立、筛选及活性检测 |
8.1.13 SVDV的拯救 |
8.2.结果 |
8.2.1 T7 RNA聚合酶基因的扩增及克隆结果 |
8.2.2 IRES基因扩增和克隆的结果 |
8.2.3 egfg基因的扩增和克隆结果 |
8.2.4 PCR扩增检测不同代次目的基因稳定性结果 |
8.2.5 SDS-PAGE检测不同代次T7 RNAP |
8.2.6 T7 RNAP活性检测结果 |
8.2.7 流式细胞仪对细胞表达水平的分析 |
8.2.8 BHKT7和SK6T7细胞系的建立、筛选及活性检测 |
8.2.9 SVDv的拯救及其生物学鉴定结果 |
8.3 讨论 |
第九章 用稳定表达T7 RNA聚合酶细胞系SK6T7对CSFVC株的拯救和初步鉴定 |
9.1 材料和方法 |
9.1.1 试验材料 |
9.1.2 所用试剂及限制性酶 |
9.1.3 引物的设计与合成 |
9.1.4 全长cDNA模板的线性化和纯化回收 |
9.1.5 细胞转染及传代 |
9.1.6 全长cDNA感染性的鉴定 |
9.2 结果 |
9.2.1 RT-PCR和nested-PCR鉴定结果 |
9.2.2 转染细胞的直接荧光抗体染色鉴定结果 |
9.2.3 兔子致病性实验结果 |
9.3 讨论 |
第三部分 以鼠源聚合酶Ⅰ系统为基础的体内拯救方法的建立和应用 |
第十章 用鼠源聚合酶Ⅰ系统对SVDV HK/70株拯救 |
10.1 材料与方法 |
10.1.1 菌株、质粒与细胞 |
10.1.2 酶与试剂 |
10.1.3 引物设计与合成 |
10.1.4 聚合酶Ⅰ启动子和终止子片段的扩增 |
10.1.5 聚合酶Ⅰ启动子和终止子片段序列分析和序列功能区的分析 |
10.1.6 SVDV HK/70株全长cDNA的装配 |
10.1.7 在IBRS-2细胞内的病毒拯救 |
10.1.8 在鼠体内的病毒拯救 |
10.2.结果 |
10.2.1 聚合酶Ⅰ启动子和终止子片段的扩增结果 |
10.2.2 聚合酶Ⅰ启动子和终止子片段序列分析和序列功能区的分析结果 |
10.2.3 SVDV HK/70株全长cDNA的装配的结果 |
10.2.4 转染IBRS-2细胞结果 |
10.2.5 SVDV的IBRS-2拯救毒的鉴定结果 |
10.2.6 在乳鼠体内拯救病毒的鉴定结果 |
10.3 讨论 |
第十一章 用鼠源聚合酶Ⅰ系统对FMDV的拯救及初步鉴定 |
11.1 材料与方法 |
11.1.1 菌株、质粒与细胞 |
11.1.2 酶与试剂 |
11.1.3 引物设计与合成 |
11.1.4 FMDV基因片段的扩增 |
11.1.5 FMDV全长cDNA的装配 |
11.1.6 在BHK-21细胞内的病毒拯救 |
11.2 结果 |
11.2.1 FMDV全长cDNA的装配的结果 |
11.2.2 转染BHK-21细胞结果 |
11.2.3 FMDV的BHK-21拯救毒的鉴定结果 |
11.3 讨论 |
第十二章 猪水泡病标记病毒的制备和初步鉴定 |
12.1 材料和方法 |
12.1.1 菌株、质粒与细胞 |
12.1.2 酶与试剂 |
12.1.3 引物设计与合成 |
12.1.4 含有5B19基因片段的扩增 |
12.1.5 含有5819标记的SVDV HK/70株全长cDNA的装配 |
12.1.6 转染IBRS-2细胞 |
12.1.7 拯救病毒的鉴定 |
12.2 结果 |
12.2.1 含有5B19基因片段的扩增以及含有该片段全长cDNA装配的结果 |
12.2.2 转染IBRS-2细胞结果 |
12.2.3 拯救病毒的RT-PCR鉴定结果 |
12.2.4 间接免疫荧光检测结果 |
12.2.5 反向间接血凝鉴定试验结果 |
12.2.6 TCID_(50)实验结果 |
12.3 讨论 |
第十三章 结论 |
参考文献 |
附录 |
一:OIE A类疾病(OIE List A Diseases) |
三:SVDV HK/70株全基因组核苷酸序列及其序列比对结果 |
致谢 |
作者简介 |
(4)猪瘟和猪水泡病基因标记疫苗的研究(论文提纲范文)
第一章 序言 |
1.1 研究背景及目的、意义 |
1.1.1 猪瘟、猪瘟病毒和猪瘟弱毒疫苗 |
1.1.2 猪水泡病和猪水泡病病毒 |
1.1.3 基因标记疫苗 |
1.1.4 本研究的目的及意义 |
1.2 国内外研究现状 |
1.2.1 猪瘟疫苗研究进展 |
1.2.2 猪水泡病疫苗研究概况 |
1.3 研究内容与方法 |
第二章 猪瘟基因标记疫苗的构建及体外表达 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1 菌种、载体和主要试剂 |
2.1.2 主要仪器 |
2.1.3 细胞和种毒 |
2.1.4 引物的设计与合成 |
2.1.5 目的片段的获得 |
2.1.6 重组质粒的构建、克隆及鉴定 |
2.1.7 转染质粒的提取 |
2.1.8 转染 |
2.1.9 各基因体外表达的检测 |
2.2 结果 |
2.2.1 目的片段 |
2.2.2 表达质粒的鉴定 |
2.2.3 转染质粒浓度 |
2.2.4 各基因的体外表达 |
2.3 讨论 |
第三章 猪瘟基因标记疫苗对兔的免疫保护试验 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 质粒、疫苗与实验动物 |
3.1.2 主要试剂 |
3.1.3 免疫用质粒的制备 |
3.1.4 各猪瘟基因疫苗对家兔的免疫 |
3.1.5 阻断ELISA检测CSFV特异性抗体 |
3.1.6 T淋巴细胞增殖试验 |
3.1.7 病毒攻击保护试验 |
3.2 结果 |
3.2.1 兔血清CSFV特异性抗体的动态变化 |
3.2.2 T淋巴细胞增殖试验 |
3.2.3 攻毒试验 |
3.3 讨论 |
第四章 猪瘟与猪水泡病二联基因疫苗研究 |
4.1 材料和方法 |
4.1.1 菌种、载体和主要试剂 |
4.1.2 细胞、种毒、质粒、疫苗和实验动物 |
4.1.3 猪瘟病毒E2基因与猪水泡病病毒P1区基因双表达质粒的构建 |
4.1.4 转染质粒的提取、转染和体外表达 |
4.1.5 免疫用质粒的制备 |
4.1.6 双表达基因疫苗对家兔的免疫 |
4.1.7 阻断ELISA检测CSFV特异性抗体 |
4.1.8 T淋巴细胞增殖试验和猪瘟活疫苗(Ⅱ)攻毒保护实验 |
4.1.9 乳鼠中和试验 |
4.2 结果 |
4.2.1 猪瘟病毒E2基因与猪水泡病病毒P1区基因双表达质粒的鉴定 |
4.2.2 转染质粒浓度 |
4.2.3 间接免疫荧光染色检测猪水泡病抗原的表达 |
4.2.4 猪瘟E2蛋白的表达 |
4.2.5 双表达质粒免疫家兔的CSFV特异性抗体的动态变化 |
4.2.6 T淋巴细胞增殖试验 |
4.2.7 乳鼠中和试验 |
4.2.8 猪瘟活疫苗(Ⅱ)攻毒保护试验 |
4.3 讨论 |
第五章 猪水泡病基因标记疫苗的研究 |
5.1 材料和方法 |
5.1.1 材料 |
5.1.2 引物的设计和合成 |
5.1.3 猪水泡病基因疫苗的构建及体外表达 |
5.1.4 猪水泡病基因疫苗的猪体试验 |
5.2 结果 |
5.2.1 目的片段的获得和猪水泡病P1基因重组质粒的鉴定 |
5.2.2 转染质粒浓度 |
5.2.3 间接免疫荧光染色检测猪水泡病抗原的表达 |
5.2.4 间接ELISA检测SVDV特异性抗体 |
5.2.5 乳鼠中和试验检测猪血清SVDV中和抗体 |
5.2.6 攻毒保护试验 |
5.3 讨论 |
第六章 结论 |
第七章 猪水泡病及猪水泡病病毒研究进展(文献综述) |
7.1 猪水泡病 |
7.1.1 疾病的发现、命名与流行情况 |
7.1.2 病原学 |
7.1.3 流行病学 |
7.1.4 临床症状和组织嗜性 |
7.1.5 诊断 |
7.2 猪水泡病病毒 |
7.2.1 SVDV基因组结构 |
7.2.2 SVDV编码的蛋白及功能 |
7.2.3 SVDV的衣壳结构和抗原特性 |
7.2.4 SVDV受体及其侵入 |
参考文献 |
致谢 |
附录 |
作者简历 |
(5)9种猪病病原体GeXP多重PCR检测方法的研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
英文缩略表 |
1 引言 |
1.1 临床常见病原体 |
1.1.1 猪圆环病毒及其危害 |
1.1.2 猪瘟病毒及其危害 |
1.1.3 猪蓝耳病毒及其危害 |
1.1.4 水疱性.炎病毒及其危害 |
1.1.5 猪水泡病病毒及其危害 |
1.1.6 猪传染性胃肠炎病毒及其危害 |
1.1.7 猪肺炎支原体及其危害 |
1.1.8 副猪嗜血杆菌及其危害 |
1.1.9 猪胸膜肺炎放线杆菌及其危害 |
1.2 临床诊断方法 |
1.2.1 病原菌的分离培养 |
1.2.2 酶联免疫吸附方法 |
1.2.3 聚合酶链反应方法 |
1.2.4 环介导等温扩增 |
1.2.5 基因芯片技术 |
1.3 Ge XP多重基因表达分析系统 |
1.3.1 Ge XP系统的组成及原理 |
1.3.2 Ge XP系统的应用及优势 |
1.4 研究的目的及意义 |
1.5 研究的内容及技术路线 |
2 PCV-2、CSFV、PRRSV、VSV、SVDV、TGE、Mhyo、HPS与APP引物设计及验证 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 毒株 |
2.1.2 主要试剂 |
2.1.4 主要仪器 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 细胞的复苏、传代与冻存 |
2.2.2 病毒的增殖 |
2.2.3 支原体及细菌的培养 |
2.2.4 引物的设计与合成 |
2.2.5 病毒RNA/DNA的提取 |
2.2.6 病毒RT-PCR逆转录 |
2.2.7 菌株DNA的提取 |
2.2.8 单重PCR的特异性验证 |
2.2.9 单克隆质粒标准品的制备 |
2.3 结果 |
2.3.1 单引物单模板验证实结果 |
2.3.2 单引物混合模板特异性验证结果 |
2.3.3 阳性克隆质粒标准品的鉴定 |
2.4 讨论 |
3 PCV-2、CSFV、PRRSV、VSV、SVDV、TGE、Mhyo、HPS与APP的Ge XP检测方法的建立及初步应用 |
3.1 材料与仪器 |
3.1.1 试验毒株 |
3.1.2 主要试剂 |
3.1.3 主要仪器 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 Ge XP引物的设计与合成 |
3.2.2 单重Ge XP检测体系的建立 |
3.2.3 多重Ge XP体系的建立 |
3.3 结果 |
3.3.1 单重Ge XP体系的构建 |
3.3.2 多重Ge XP体系的建立及优化 |
3.4 讨论 |
4 全文总结 |
致谢 |
参考文献 |
附录 |
个人简历、在学期间发表的学术论文及取得的研究成果 |
(6)动物外来传染病输入风险评估模型的建立及其应用(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
1 引言 |
1.1 当前国内外动物传染病疫情形势分析 |
1.2 风险分析在动物传染病预测中的研究与应用 |
1.2.1 风险分析的概念和基本内容 |
1.2.2 风险评估的基本方法与步骤 |
1.2.3 多指标综合评估方法步骤 |
1.2.4 风险评估在动物传染病方面的应用实例 |
1.3 GIS 简介 |
1.3.1 GIS 概念 |
1.3.2 GIS 的类型和构成 |
1.3.3 GIS 的基本功能 |
1.3.4 GIS 在医学卫生领域中的应用 |
1.4 课题研究的目的和意义 |
2 重大动物传染病疫情数据库的建立及风险因素分析 |
2.1 口蹄疫疫情信息及其流行病学特点 |
2.2 非洲猪瘟疫情信息及其流行病学特点 |
2.3 猪水泡病疫情信息及其流行病学特点 |
2.4 猪瘟疫情信息及其流行病学特点 |
2.5 牛瘟疫情信息及其流行病学特点 |
2.6 小反刍兽疫疫情信息及其流行病学特点 |
2.7 蓝舌病疫情信息及其流行病学特点 |
2.8 非洲马瘟疫情信息及其流行病学特点 |
2.9 高致病性禽流感疫情信息及其流行病学特点 |
2.10 新城疫疫情信息及其流行病学特点 |
2.11 牛肺疫疫情信息及其流行病学特点 |
2.12 牛结节疹疫情信息及其流行病学特点 |
2.13 水泡性口炎疫情信息及其流行病学特点 |
2.14 裂谷热疫情信息及其流行病学特点 |
2.15 绵羊痘和山羊痘疫情信息及其流行病学特点 |
3 动物外来传染病输入风险评估体系的建立 |
3.1 风险评估概念 |
3.2 确定风险评估指标体系的基本原则 |
3.3 风险评估体系建立的方法 |
3.3.1 风险评估指标的确定及权重 |
3.3.2 风险评估指标说明 |
3.3.3 指标评价内容 |
3.3.4 风险评估指标判定参考标准 |
3.3.5 风险评估模型的建立 |
3.3.6 小结 |
4 西尼罗河热输入风险评估体系的建立 |
4.1 西尼罗河热流行病学特征 |
4.1.1 传染源与传播途径 |
4.1.2 传播媒介 |
4.1.3 西尼罗河热病毒的致病性和危害 |
4.1.4 分子流行病学 |
4.1.5 流行特征 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 计算机环境 |
4.2.2 西尼罗河热风险评估技术路线 |
4.3 风险评估指标的确定及权重 |
4.3.1 建立西尼罗河热风险评估指标体系 |
4.3.2 确定各评估指标的权重 |
4.4 西尼罗河热疫情及相关信息采集、处理与数据库的建立 |
4.4.1 数据采集可行性分析 |
4.4.2 数据说明 |
4.4.3 相关数据信息的可视化研究 |
4.5 风险因素对西尼罗河热影响的分析 |
4.5.1 传染源 |
4.5.2 传播途径 |
4.5.3 防控措施 |
4.6 建立各项指标的评分标准并打分 |
4.7 采用综合评分方法计算风险值 |
4.8 绘制风险评估地图 |
4.9 讨论 |
4.9.1 预防和控制西尼罗河热的相关措施 |
4.9.2 防止西尼罗河热病毒传入我国的措施 |
5 结论 |
致谢 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间发表的论文 |
四、猪水泡病病毒对人的感染(论文参考文献)
- [1]国内市售猪肉和食用植物油危害因素的风险评估研究[D]. 周广亚. 上海大学, 2020(02)
- [2]三种水疱性疾病GeXP检测方法的建立[D]. 卢昌. 中国农业科学院, 2014(11)
- [3]动物RNA病毒反向遗传系统的研究和建立[D]. 郑海学. 中国农业科学院, 2007(05)
- [4]猪瘟和猪水泡病基因标记疫苗的研究[D]. 冯霞. 中国农业科学院, 2005(10)
- [5]9种猪病病原体GeXP多重PCR检测方法的研究[D]. 陈玉燕. 重庆理工大学, 2015(02)
- [6]动物外来传染病输入风险评估模型的建立及其应用[D]. 王清艳. 东北农业大学, 2008(04)
- [7]猪水泡病国外科研动态[J]. 况乾惕. 兽医科技资料, 1977(S2)
- [8]猪水泡病病毒对人的感染[J]. F.Brown,周育彪. 兽医科技资料, 1977(S2)
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