一、抗痫液抗病毒作用的实验研究（论文文献综述）
马茗晗[1]（2020）在《疏风止痉方治疗儿童癫痫临床观察及对耐药性癫痫模型大鼠脑内卡马西平浓度影响的研究》文中认为目的:1.评价疏风止痉方治疗儿童癫痫的疗效,初步探讨马融教授运用疏风止痉方治疗儿童癫痫证治规律。2.初步探讨疏风止痉方对耐药性癫痫模型大鼠癫痫发作及脑脊液中抗癫痫药物卡马西平浓度的影响。方法:1.采用回顾性研究的方法,收集马融教授运用疏风止痉方治疗的癫痫患儿62例,采集其性别、发病年龄、发作表现、发作频次、发作诱因、既往史、家族史、脑电图及颅脑核磁、服用抗癫痫西药情况及中医证素特征等,使用Excel表格建立数据库录入相关全部信息,使用SPSS20.0统计软件进行统计分析。评价疏风止痉方治疗儿童癫痫的疗效,并探讨其临床应用规律。2.选取大鼠100只,随机选取10只作为正常组大鼠,其余90只均采用氯化锂-匹罗卡品点燃癫痫大鼠模型,将点燃成功的癫痫大鼠先后通过14天丙戊酸钠、卡马西平预处理后,将仍有癫痫发作的大鼠作为耐药性癫痫模型。将耐药性癫痫模型大鼠随机分为5组,分别予以卡马西平、卡马西平联合特异性抑制剂PDTC及卡马西平联合低、中、高剂量疏风止痉方药灌胃治疗28天,观察耐药性癫痫模型大鼠每周的发作次数及发作持续时间。灌胃治疗结束后,每组大鼠中随机选取6只,利用微渗析采样技术收集大鼠脑脊液,高效液相色谱法检测大鼠脑脊液中卡马西平浓度。结果:1.疏风止痉方治疗儿童癫痫的疗效及证治规律（1）疏风止痉方治疗儿童癫痫具有一定的疗效,其显效率为35.5%,总有效率为80.6%。治疗非耐药性癫痫儿童显效率为45.9%,总有效率为94.6%;治疗耐药性癫痫儿童显效率为20.0%,总有效率为60.0%。（2）通过证素分析结果表明,疏风止痉方更适用于癫痫风热上扰证,患儿既往多有热性惊厥病史;发作常以外感发热为主要诱因;以强直-阵挛性发作为主要发作类型,中医证候表现为:意识丧失,双目直视或斜视,牙关紧闭,口角伴或不伴流涎,四肢强直抽搐,常伴有外感症状,如打喷嚏、鼻塞、流涕、咳嗽、咽红,舌淡红或红,苔白,脉浮或滑。2.疏风止痉方对耐药性癫痫大鼠发作行为的影响除正常对照组大鼠之外,其他各组大鼠每周均有不同程度的癫痫发作。（1）发作次数的影响:第1周、第2周疏风止痉方中、高剂量组发作次数少于耐药模型组、阳性对照组（p<0.01）;疏风止痉方低剂量组发作次数少于阳性对照组（p<0.01）,与耐药模型组无显着性差异（p>0.05）。第3周、第4周疏风止痉方各剂量组随药物剂量增加,发作次数呈减少趋势（p<0.05）;疏风止痉方中、高剂量组发作次数明显少于耐药模型组、阳性对照组（p<0.01）疏风止痉方低剂量组发作次数少于耐药模型组（p<0.01）,与阳性对照组无显着性差异（p>0.05）。（2）发作持续时间的影响:第1周、第2周疏风止痉方各剂量组随药物剂量增加,发作持续时间逐渐缩短（p<0.01）;阳性对照组发作持续时间短于其他各组（p<0.05）。第3周、第4周疏风止痉方各剂量组随药物剂量增加,发作持续时间逐渐缩短,各剂量组间无显着性差异（p>0.05）;疏风止痉方高剂量组发作持续时间短于耐药模型组、阳性对照组（p<0.01）。3.疏风止痉方对耐药性癫痫大鼠脑脊液中卡马西平浓度的影响（1）疏风止痉方各剂量组随着中药剂量增加,脑脊液中卡马西平浓度呈递增趋势,各剂量组之间无统计学差异（p>0.05）。（2）疏风止痉方高剂量组卡马西平浓度低于阳性对照组,两组相比无统计学差异（p>0.05）,疏风止痉方低、中剂量组卡马西平浓度低于阳性对照组（p<0.05）。（3）耐药模型组大鼠脑脊液中卡马西平浓度明显低于其他各治疗组,与阳性对照组、疏风止痉方高剂量组间有统计学差异（p<0.05）。结论:1.疏风止痉方治疗儿童癫痫显效率为35.5%,总有效率为80.6%。疏风止痉方不但对治疗非耐药性癫痫儿童有一定疗效,总有效率为94.6%,且对治疗耐药性癫痫儿童也有一定疗效,总有效率为60.0%。2.临床中疏风止痉方更适用于癫痫风热上扰证,患儿既往多有热性惊厥病史;发作常以外感发热为主要诱因;以强直-阵挛性发作为主要发作类型。3.疏风止痉方可减少耐药性癫痫模型大鼠发作次数、缩短发作持续时间,其作用机制可能与疏风止痉方通过调节脑内NF-κB炎症信号通路,抑制相关炎性细胞因子,下调P-gp水平,继而提高脑内抗癫痫药物卡马西平的浓度有关。
赵泽丰[2]（2020）在《“良关系”药对“远志-天麻”的抗癫痫成分研究及其衍生物合成与活性评价》文中指出癫痫是一种由大脑神经元过度放电所引起的中枢神经系统功能失常的慢性病或综合征。中药治疗癫痫的安全性与有效性在上千年的临床使用中已得到了有效的验证,目前已有多种中药中的单体成分被证实具有抗癫痫活性。受经典方剂《定痫丸》启发,本研究在前期挖掘中药中抗癫痫活性单体基础上选取“良关系”药对“远志-天麻”作为研究对象,通过文献报道鉴定建立了抗癫痫药对远志与天麻成分的化合物库,对其中具有潜在γ-氨基丁酸转氨酶（GABA-AT）抑制活性的化合物进行了虚拟筛选。随后在“组合中药分子化学”策略指导下设计合成了85种化合物并对其抗癫痫活性进行了评价。本研究结果发展了组合中药分子化学这一策略,其具有省时、合理和有效等特点,为抗癫痫药物的开发提供了新的科学途径,为复方中药现代化研究与开发提供新的策略。全文共分3章,作者的主要贡献如下:1.以“良关系”药对“远志-天麻”为研究对象,通过搜集TCM-Database@Taiwan、TCMSP及PubChem等数据库报道的该二味药所含的单体,构建“远志-天麻”药对的化合物库,共搜集到包含皂苷类、山酮类、糖苷类及糖酯类等成分的26种化合物库。以文献报道的GABA-AT抑制剂为训练集,通过提取其化学特征信息构建了基于配体的HipHop药效团。将先前构建的化合物库与药效团进行了匹配,采用分子模拟对接手段对匹配到的10种成分与GABA-AT（PDB:1OHW）的相互作用进行了评价,初步推断天麻中的糖苷类成分及远志中的糖酯类成分可能是具有新颖骨架的GABA-AT抑制剂。2.以远志中3,6’-二芥子酰基蔗糖酯的代谢产物3,4,5-三甲氧基肉桂酸（TMCA）和天麻素的代谢产物对羟基苄醇及其类似物香兰醇为母核。以前期分子库中筛选到的远志中的糖酯3,6`-二芥子酰基蔗糖及天麻中的糖苷天麻素为先导物,对其代谢产物TMCA和对羟基苄醇及类似物香兰酯进行了结构修饰,在“组合中药分子化学”策略指导下合理设计并合成了35种酯类衍生物,主要包括TMCA-天麻苷元酯（A19）、TMCA-香兰酯（A20）、TMCA-乙酰天麻素酯（A28）及包含中药活性片段的TMCA-香叶酯（A8）,TMCA-薄荷酯（A12）及TMCA-冰片酯（A13）等。随后再将TMCA-香兰酯的酯键改造为酰胺键并结合中药单体胡椒碱的结构设计合成了20种酰胺类化合物,其中包含TMCA-香兰酰胺（B18）等。在此基础上,引入了成药基团加巴喷丁与普瑞巴林,通过多步的上保护与去保护反应合成了30种肽类衍生物,其中包含TMCA-加巴喷丁-异戊香兰肽（C8）与TMCA-普瑞巴林-异戊香兰肽（C23）等。采用LC-MS-NMR平台对所合成的三个系列共85种化合物进行了系统的结构表征。3.通过最大电休克（MES）,皮下戊四唑（sc-PTZ）等经典动物实验对所合成化合物的抗癫痫活性进行了初步筛选,并采用旋转棒模型对化合物的神经毒性进行了评价,得到了多种保护指数(PI=TD50/ED50)远高于阳性药物卡马西平的活性化合物,其中酯类化合物TMCA-乙酰天麻素酯（A28）的MES模型半数有效量ED50为19.5mg/kg,保护指数为51.2;TMCA-异戊香兰酯（A32）的ED50为21.9 mg/kg,保护指数为31.9;TMCA-普瑞巴林-异戊香兰肽（C23）的ED50为29.8 mg/kg,保护指数为30.1。采用分子对接的手段对筛选得到的活性化合物与GABA-AT靶点的相互作用进行了评价,发现主要活性化合物多数以氢键或非键相互作用的形式对GABA-AT产生潜在的抑制作用。
刘冲冲[3]（2020）在《柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫的临床研究及其主要入血成分对KA致痫大鼠的抗耐药机制研究》文中认为耐药性癫痫的主要治疗困境是患者对抗癫痫药物（Antiepileptic Drugs,AEDs）耐药,如何减少或抑制患者对AEDs的耐药是国内外学者亟待解决的重大问题。本团队在长期临床实践中发现柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫能够提高西药抗痫作用,前期基础实验结果显示其抗痫机制可能与抑制多药耐药（Multi-Drug Resistance Genel,Mdrl）及编码的P-糖蛋白（P-giycoprotein,P-gp）有关,而调节P-gp的途径与炎症信号通路相关。本次临床研究在前期研究基础上进一步扩大样本量观察柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫的有效性及安全性,检测患者血清炎症因子的变化。本次动物实验研究探讨柴贝止痫汤及其主要入血成分对海人酸（KainicAcid,KA）致痫大鼠的抗耐药机制,以进一步了解其在复方中的抗耐药机制及其贡献度。[目的]通过临床试验,观察柴贝止痫汤治疗耐药性癫痫的有效性及安全性,通过炎症抗体芯片观察耐药性癫痫患者治疗前后血清炎症因子的变化。通过动物实验,探讨柴贝止痫汤及其主要入血成分α细辛醚、β细辛醚、贝母素甲、贝母素乙对KA致痫大鼠的抗耐药机制。[方法]临床研究:临床研究由疗效观察和机制探讨两部分组成,疗效观察采用随机对照的研究方法,纳入耐药性癫痫局灶性意识障碍性发作的患者84例,治疗组在原有抗痫西药的基础上添加柴贝止痫汤治疗,对照组在原有抗痫西药的基础上添加安慰剂治疗,观察周期为3个月。主要疗效指标包括月发作频次、无发作率、50%应答率（Response Rate,RR）;次要疗效指标包括癫痫发作程度的变化、中医证候变化、生活质量评分（Quality of life scale for epileptic patients-89,QOLIE-89）、癫痫伴发抑郁筛查量表（Neurological Disorders Depression Inventory For Epilepsy,NDDI-E）、抑郁自评量表（Self-rating depression scale,SDS）、汉密尔顿抑郁量表（Hamilton Depression Scale,HAMD）、汉密尔顿焦虑量表（Hamilton Anxiety Scale,HAMA）以及安全性评价。通过对耐药性癫痫局灶性意识障碍性发作的患者在治疗前、治疗3个月后、治疗6个月后各采取血清一次,利用炎症抗体芯片检测治疗前后血清炎症因子的变化,探讨柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫的抗痫作用。动物实验:采用侧脑室注射KA的方法建立癫痫大鼠模型,将癫痫大鼠分为模型组、卡马西平（Carbamazepine,CBZ）组、柴贝止痫汤+CBZ组、α细辛醚+CBZ组、β细辛醚+CBZ组、贝母素甲+CBZ组、贝母素乙+CBZ组,并设假手术组。连续灌胃60天后,采用Western Blot、RT-PCR检测海马P-gp、Mdrla/bmRNA的表达,免疫组化观察海马离子钙接头蛋白抗原（Ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba-1）和胶质纤维酸性蛋白（Glial fibrillary acidic protein,GFAP）的表达,液相色谱质谱联用（Liquid chromatography and mass spectrometry,LC-MS）检测脑内 CBZ 及其代谢产物 10,11-环氧化卡马西平（10,11-epoxidation of carbamazepine,CBZE）的含量,尼氏染色观察海马病理形态变化。[结果]临床试验一（1）基础资料:共纳入耐药性癫痫局灶性意识障碍性发作患者84例,入组前两组在两组性别方面比较,差异具有统计学意义（P<0.05）,其余基础资料差异无统计学意义（P>0.05）,二者基线资料基本一致。（2）主要疗效指标:治疗3个月后两组月发作频次及无发作率比较,差异具有统计学意义（P<0.01;P<0.05）;治疗2个月及3个月后,两组50%应答率的比较,差异具有统计学意义（P<0.01,P<0.01）。（3）次要疗效指标:治疗3个月后两组发作程度比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;治疗3个月后两组中医证候比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。（4）生活质量及情绪量表评价:生活质量总评分,治疗3个月后两组比较具有统计学意义（P<0.05）,两组进行单项比较,二者在疼痛、精力/疲乏、注意力、发作恐惧、社会支持等方面两组之间比较具有统计学意义（P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.01）。治疗3个月后两组SDS评分具有统计学意义（P<0.05）。（5）安全性治疗:在观察期内未发现与柴贝止痫汤添加有关的肝肾功能及血常规异常,未发现明显不良事件。临床研究二（1）柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫局灶性意识障碍性发作患者3个月后与治疗前相比,具有下调血清中 IL-1β、IL-4、IL-17、IL-1α、IL-15、IL-6、IL-11、1-309、MIG、GCSF、GM-CSF炎症因子的趋势。（2）柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫局灶性意识障碍性发作患者6个月后与治疗前相比,血清中1-309、IL-11、MIG表达下降,差异具有统计学意义。且具有下调IL-1β、1-309、IL-1α、IL-15、IL-8、IL-17、IL-6、IL-11、IL-16、MIG、IL-1ra、GCSF、BCL、MIP-1β、MIP-1α、IL-12P40 炎性因子的趋势。（3）柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫局灶性意识障碍性发作患者6个月后可能具有改善患者血清炎症因子的作用,其KEGG通路可能与Toll样受体信号通路、细胞因子受体相互作用及细胞因子信号通路相关。动物实验（1）各组大鼠海马组织P-gp表达:与假手术组相比,模型组、CBZ组表达升高,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;与模型组相比,假手术组及柴贝止痫汤+CBZ组表达下降,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.05）;与CBZ组相比,柴贝止痫汤+CBZ组、α细辛醚+CBZ组、贝母素甲+CBZ组、β细辛醚+CBZ组表达降低,差异具有统计学意义（P<0.01,P<0.05,P<0.05,P<0.05）。与柴贝止痫汤+CBZ组相比,模型组、CBZ组表达升高,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。（2）各组大鼠海马组织Mdrla/b mRNA表达:与假于术组相比,模型组、CBZ组表达升高,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,贝母素乙+CBZ组Mdrla mRNA表达升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;与CBZ组相比,柴贝止痫汤+CBZ组、α细辛醚+CBZ组、贝母素甲+CBZ组海马Mdrla/b mRNA表达降低,差异具有统计学意义（P<0.01,P<0.05;P<0.01,P<0.05;P<0.01,P<0.01）,β细辛醚+CBZ 组 Mdrla mRNA表达降低,差异具有统计学意义（P<0.01）。（3）海马组织中Iba-1及GFAP表达:与假手术组相比,模型组和CBZ组Iba-1及GFAP的表达升高,差异具有统计学意义（P<0.01,P<0.05;P<0.05,P<0.05）,β细辛醚+CBZ组Iba-1表达升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比,柴贝止痫汤+CBZ组、α细辛醚+CBZ组、贝母素甲+CBZ组、贝母素乙+CBZ组Iba-1表达降低,差异具有统计学意义（P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.05）。（4）各组大鼠右脑CBZ、CBZE含量:右脑CBZ含量比较:各组之间无明显统计学差异。右脑CBZE含量比较:与CBZ组相比,柴贝止痫汤+CBZ组、α细辛醚+CBZ组、贝母素甲+CBZ组右脑内CBZE的浓度升高,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.05,P<0.01）。与柴贝止痫汤+CBZ组相比,CBZ组含量降低,贝母素甲+CBZ组含量增加,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.05）;与贝母素甲+CBZ组相比,CBZ组、柴贝止痫汤+CBZ组、α细辛醚+CBZ组、β细辛醚+CBZ组、贝母素乙+CBZ组含量降低,差异具有统计学意义（P<0.01,P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01）。（5）各组大鼠海马组织尼氏染色模型组海马神经元急剧减少,排列紊乱,胶质细胞的增生,尼氏小体降解明显。CBZ组神经元细胞较模型组增多,胶质细胞增生较多,尼氏小体较少。柴贝止痫汤+CBZ组、α细辛醚+CBZ组、贝母素甲+CBZ组可见神经元丰富,尼氏小体丰富,少量胶质细胞,β细辛醚+CBZ组和贝母素乙+CBZ组可见神经元丰富,尼氏小体数目较少,空泡病变比较明显。[结论]1.柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫局灶性意识障碍性发作患者安全、有效,可以减少癫痫发作频次、降低发作程度,改善患者生活质量及自身抑郁状况。2.柴贝止痫汤添加治疗3个月后和6个月后有降低耐药性癫痫局灶性意识障碍性发作患者血清中炎症因子的趋势,治疗6个月后较治疗前患者血清中Ⅰ-309、IL-11、MIG水平降低,随着治疗时间延长,柴贝止痫汤添加降低患者血清炎症因子的作用逐渐明显。3.柴贝止痫汤及入血成分α细辛醚、贝母素甲分别联合CBZ可能具有促进KA致痫大鼠脑内CBZE含量增加、保护海马神经元的作用,其机制可能与降低海马P-gp、Mdrla/b mRNA表达、抑制海马Iba-1激活有关。
李金平[4]（2015）在《含环丙烷结构的新型抗癫痫药物的合成与活性研究》文中指出癫痫发病的复杂性和严重性以及相应药物的缺点决定了对于新型AEDs的需求将会迫切的且长期存在的。本文在绪论中介绍了癫痫概况以及AEDs衍生开发的历史,探讨了在AEDs开发中的一些规律和经验。基于这些经验,我们选择了将具有抗痫活性的不同片段进行拼合的思路设计了三类含环丙烷片段的化合物。第一类化合物是环丙烷螺环海因类化合物,该类化合物的出发点是试图将海因和磺酰胺这两个存在与许多抗痫药物中的片段结合起来,综合考虑产物稳定性等因素后,我们选择用乙二胺将两个片段连接起来得到了9个化合物,另外我们也制备了上述化合物的海因环开环衍生物来探讨开环类化合物的潜力。第二类化合物是在环丙烷二酸先后与磺胺以及胺类缩合,其目的是将丙戊酰胺的衍生物与碳酸酐酶抑制剂结合起来。我们也将环丙基取代为二丙基得到相应丙二酰胺类衍生物与之对比考察环丙烷片段存在的意义。第三类化合物是含环丙烷片段的缩氨基脲类化合物,其目的是将环丙烷结构与具有抗癫痫活性的缩氨基脲类结构结合起来。我们也合成了部分同时含有海因片段和缩氨基脲结构的化合物,其目的是考察当一种结构同时符合两种特征时药效会不会有加强。本文采取通用的MES实验和scPTZ测试来筛选上述化合物,在第一类化合物中抗MES活性表现最好的是4-F苯基取代的Ⅱ-7f,ED50为28.1 mg/kg略低于PHT,其保护指数PI为20,优于对照药物。第二类化合物中MES模型中活性最好的化合物是N上无取代的Ⅲ-10b,其ED50以及PI值分别为16.4mg/kg与24.8。N无取代的Ⅲ-4c之PI值为20.4而甲基取代的Ⅲ-4d此值则大于19.8,同样大于PHT。这说明了测试化合物相对于PHT而言具有更好的安全性。第四章目标化合物中虽然有成环类Ⅳ-5a-d在测试中表现出一定的抗癫痫能力,但该批次大部分化合物都存在严重的神经毒性或致死性,综合表现弱于PHT。为了更深入研究药物作用机理以及更全面了解化合物的生理活性,我们对相关化合物进行了碳酸酐酶抑制活性测试以及抗肿瘤细胞活性测试。化合物Ⅲ-9（羧基取代）对CA-2的IC5o值为0.077 μM,与乙酰唑胺相近,对于Hela细胞系抑制活性最好的化合物是2-氯苯取代的Ⅳ-5d,其IC50值为23.7μM,对甲苯基取代的Ⅳ-1a为40.7μM。此外对氯苯基取代的Ⅳ-1c （77.4μM）、Ⅳ-1d（64.7μM）、2,4-二氯苯基取代的Ⅳ-1e （73.1μM）以及2-硝基苯基取代的Ⅳ-1g（60.53μM）也表现优异。在HepG2细胞试验中,活性最好的化合物Ⅳ-1d的IC50值为26.7μM,其成环衍生物Ⅳ-5d的活性稍弱,为28.9μM。总而言之,本文应用拼合原理设计、合成并测试了一系列新型抗癫痫药物,这其中Ⅱ-7e、Ⅱ-7f、Ⅲ-10b、Ⅲ-4c与Ⅲ-4d等化合物表现良好,有开发成新型抗癫痫药物的可能,本文也对相关结构的构效关系进行了总结,为后续开发提供了一定参考信息。
马增强[5]（2014）在《隐孔菌抗PRRSV生理活性物质及保肝作用的研究》文中认为猪繁殖与呼吸综合征（俗称蓝耳病）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的猪的严重传染性疾病。目前,尚没有治疗PRRSV的有效手段。因此,寻找新的抗病毒治疗方法来弥补疫苗预防的不足显得尤为重要。长期以来,隐孔菌（Cryptoporus volvatus）常被作为一种传统抗感染中药使用。在本研究中,结合现代色谱分离及间接免疫荧光技术,从隐孔菌的干子实体内分离纯化出两种具有抗PRRSV活性的新型化合物和核糖核酸酶。此外,研究还发现隐孔菌水溶性提取物对CC14诱导小鼠肝损伤具有保护作用。利用隐孔菌干子实体,通过去离子水抽提,综合运用HP-20、HP-2MGL大孔吸附层析、DEAE-cellulose离子交换层析、LH-20葡聚糖凝胶过滤和HPLC反相色谱等方法,最终分离得到一种具有抗PRRSV活性的新型化合物CM-H-L-5。隐孔菌水提物中不同组分的抗PRRSV效果各异;CM-H-L-5对PRRSV抑制作用呈剂量依赖性;CM-H-L-5可抑制PRRSV HV毒株的体外复制,其EC50为0.29mg/ml; CM-H-L-5是一具酰胺基团与羧酸基团的小分子多元醇组分,分子量为403.1Da。实验表明CM-H-L-5具有作为药物治疗PRRSV的潜力。通过DEAE-cellulose、Q-sepharose、Mono Q离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤等方法,以隐孔菌的干子实体为材料,分离纯化出一种具有抗PRRSV活性的RNase。隐孔菌RNase是一个分子量为50kDa的大分子蛋白,最适反应温度为50℃,最适反应pH为4,其部分肽段序列与草酸青霉RNase序列存在较高的同源性。该酶体外降解tRNA的活性较强。高浓度的Cd2+ （10mM）和低浓度的Fe3+ （1.25mM）对该酶活性有较强抑制作用。免疫荧光实验表明该酶可抑制PRRSVHV毒株的体外复制,其EC50为0.25mg/ml。为发掘隐孔菌的保肝价值,研究隐孔菌水提物对CC14诱导的小鼠体内总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、丙二醛（MDA）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）及肝细胞损伤程度的影响。采用四氯化碳（CC14）诱导小鼠急性化学性肝损伤模型,将动物随机分成5组,分别是空白对照组、模型组、阳性对照组、隐孔菌水提物低剂量组、高剂量组,试验结束后,检测各组小鼠血清及肝脏组织提取液各项肝功能指标并观察肝脏的病理损伤情况。隐孔菌水提物能明显降低CC14急性肝损伤小鼠血清AST、ALT,肝组织提取液MDA、T-SOD、GSH-PX值,还可减轻肝细胞坏死程度,表明隐孔菌水提物对CC14诱导的肝损伤有明显保护作用。
梁一超[6]（2013）在《柴胡黄芩配伍应用对小鼠急性癫痫模型的影响》文中研究表明目的与意义：癫痫是一类由多种原因所导致的脑部神经元的高度同步化异常放电而引起的以短暂性中枢神经系统功能失常为表现特征的临床综合征。根据病因的不同,癫痫一般分为两大类：既原发性癫痫和继发性癫痫。癫痫最为突出的临床特点是：反复发作,每次发作的不可预知以及需要长期的药物治疗。癫痫是神经系统最常见的疾病之一,是目前国内外神经科仅次于脑血管病及痴呆的第三大常见疾病。据流行病学资料统计,全世界约有5000万人口受到这种疾病的影响,近年我国的流行病学研究表明,有约900万癫痫患者,各地癫痫患病率在3.6‰—7.0‰不等。在我国广大农村地区,癫痫的患病率约为4.7‰-8.5‰,与全世界总体患病率基本相等,其中,约70%—-80%癫痫患者末接受治疗或治疗不规范,死亡率约为7.9/10万。由此可见,我国的癫痫患病率接近于发达国家,但死亡率却远高于世界水平,针对这一社会现象必须给予足够的重视。一直以来,癫痫患者同正常人群相较,都被认为会有更大的形成认知及行为障碍的概率。虽然存在明显的个体差异,但每个癫痫患者仍旧都会有认知能力受损害的风险。在癫痫发作频率高的患者中,认知功能和行为能力的损伤就会不断积累,从而使其语言能力、学习记忆力、注意力、定向力、行为以及情绪等均产生了不同程度的变化。目前,国内外治疗癫痫的标准是应用抗癫痫药物,而应用抗癫痫药物需要达到的目标即是消除癫痫发作,但是对引起癫痫的病理改变却无影响,且也不能阻断癫痫的进程。尽管目前抗癫痫药物的研究取得了很多进展,各种不同的新型抗癫痫药物不断问世,可是仍然有约1/3的癫痫病患者对药物的治疗不敏感。并且长期的癫痫发作和不间断的服用药物不但给患者家庭及社会带来相当大的经济负担。几乎所有的抗癫痫药物都有不止一种副作用,且差不多全部抗癫痫药物都有损害认知功能的可能性。同时又由于手术适应症的局限性、手术对颅脑功能的损害及昂贵的治疗费用等一系列相关因素,大大限制了外科手术治疗的应用。癫痫属中医“痫病”范畴,是一种发作性神志异常的疾病。因气机逆乱,元神失控而致精神恍惚,甚则突然仆倒,昏不知人等,移时苏醒后如常人的-类病症。中医中癫痫的病因病机与“痰”密不可分,亦与“肝”息息相关。既往研究表明,中医治疗癫痫有着悠久的历史,并且对现代医学及后人有着深远的影响。众多经方中的方剂对现代研究仍具有重要的指导意义,与此同时中医治疗癫痫也在与时俱进的发展。并且中药相对于西药而言,有毒副作用小及价格低廉等优势。癫痫“从肝论治”历史绵长,当代癫痫“从肝论治”多沿用《伤寒论》诸柴胡方加减。最大电休克模型（MES）、戊四氮（PTZ）惊厥模型、士的宁（STR）惊厥模型及匹罗卡品（PLCP）惊厥模型是应用最多的癫痫发作模型。可以抑制以上四种动物模型惊厥发作的药物,可能对控制临床癫痫的发作有效。本课题组前期研究表明：柴胡皂苷a在戊四氮、匹罗卡品、最大电休克所致动物癫痫中,有抗惊厥作用。另有研究显示：黄芩在匹罗卡品所致癫痫模型有抗惊厥及神经保护作用。药对是方剂中最基本的组成形式,在中医源远流长的发展长河中,有着悠久的历史,经方中众多经典药对沿用至今。现代对于中药药对的临床研究、理论研究、实验研究均有不同程度的进步和发展。药对经过配伍后,并不是做了一个简单的成分之间的加法,通常随之发生的是繁复的化学及物理变化,其中的化学成分就随之产生了变化。同时亦有研究表明,药对配伍可提高药物溶解度、提高药物靶向性、有药动学行为改变。张仲景以柴胡黄芩药对为基本组成,治疗黄疸、肝郁气滞所致的痞积肿块等多种病证,疗效显着。《本草纲目》：“柴胡行手足少阳,以黄芩为佐。”《本草述钩元》云柴胡“宣畅血脉,佐以黄芩为妙”。本课题组提倡癫痫“从肝论治”,自拟中药复方柴胡疏肝汤,在临床上取得了满意的治疗效果。柴胡为方中君药,臣以黄芩共奏和解少阳,疏理肝胆之功,又可疏畅气机与养肝柔肝相结合。故本研究建立了最大电休克、戊四氮、士的宁、匹罗卡品四个小鼠急性癫痫模型,拟进一步探讨柴胡黄芩配伍应用的抗癫痫作用。方法与内容：1最大电休克癫痫小鼠造模及处理使用YSD-4G药理生理实验多用仪筛选符合要求的小鼠,齿状夹以生理盐水浸湿后,夹住小鼠两耳尖部,进行交流电刺激,主要刺激参数为100V,2Hz（预实验结果）,单次刺激方式,以后肢强直性伸直为惊厥指标,筛选符合条件的小鼠60只,随机分为6组,每组均为灌胃给药,灌胃前空腹8小时,A组（模型组）予等体积生理盐水,B组按柴胡黄芩5：2给药,其中柴胡浓度为0.3g/m1,C组按柴胡黄芩1：1给药,其中柴胡浓度为0.21g/ml,D组（柴胡组）、E组（黄芩组）浓度均为0.42g/m1,F组（地西泮组）浓度为0.4g/m1。末次给药1h后再行上述电刺激,记录惊厥数和强直持续的时间,计算惊厥率。2戊四氮急性癫痫小鼠造模及处理选取SPF级昆明小鼠60只,分组及给药方法同MES癫痫小鼠,在末次给药1h后,各组予戊四氮85mg/kg腹腔注射,立即观察小鼠的痫性发作30min,小鼠痫性发作分级采用Racine标准。记录小鼠痫性发作的潜伏期,包括阵发性痉挛潜伏期（即从注射戊四氮开始至相当于1-3级发作的时间）、强直性惊厥潜伏期（即从注射戊四氮开始至相当于5级发作的时间）、死亡潜伏期。3士的宁急性惊厥小鼠造模及处理选取SPF级昆明小鼠60只,分组及给药方法同MES癫痫小鼠,在末次给药1h后,各组予士的宁2mg/kg腹腔注射,立即观察小鼠的痫性发作15min,记录小鼠发生发作性阵挛潜伏期、死亡潜伏期。4匹罗卡品急性惊厥小鼠造模及处理选取SPF级昆明小鼠60只,分组及给药方法同MES癫痫小鼠,在末次给药1h后,各组予匹罗卡品400mg/kg腹腔注射,立即观察小鼠的痫性发作30min,记录小鼠发生发作性阵挛潜伏期及死亡潜伏期。5统计学方法数据用SPSS13.0软件进行统计学分析,计量资料用x±s表示,各组比较采用重复测量的方差分析,组间比较采用Tukey法；强直性惊厥发作率的比较用R×C表资料的卡方检验；P<0.05表示差异有统计学意义,P<0.01表示差异有显着统计学意义。结果：1柴胡黄芩配伍应用对最大电休克模型的影响各组之间的惊厥率差异有统计学意义（χ2=59.000,P<0.001）,B、C、D、F组均能降低小鼠惊厥率,其中以B、F组降低明显。2柴胡黄芩配伍应用对戊四氮急性致痫小鼠发作性阵挛潜伏期、发作性强直潜伏期及死亡潜伏期的影响B、C、D、E、F组均能延长小鼠发作性阵挛潜伏期、发作性强直潜伏期及死亡潜伏期,与A组相比,C、D、E组无显着差异,B、F组有显着差异。3柴胡黄芩配伍应用对士的宁急性致痫小鼠发作性阵挛潜伏期及死亡潜伏期的影响B、C、D、E、F组均能延长小鼠发作性阵挛潜伏期,但与A组相比较均无统计学意义。B、C、D、E、F组均能延长小鼠死亡潜伏期,与A组相比,C、D、E组无统计学意义,B、F组有统计学意义（P<0.01）,且B组同C、D、E组比有统计学意义（P<0.01）。4柴胡黄芩配伍应用对匹罗卡品急性致痫小鼠发作性阵挛潜伏期及死亡潜伏期的影响B、C、D、E、F组均能延长小鼠发作性阵挛潜伏期及死亡潜伏期,但与A组相比,除F组外均无统计学意义（P<0.01）。结论：柴胡黄芩配伍应用在小鼠最大电休克模型、戊四氮惊厥模型、士的宁惊厥模型及匹罗卡品惊厥模型中有明显抗惊厥、抗癫痫的作用,其中以柴胡黄芩5：2组效果显着。
李启杰[7]（2013）在《复方甘草酸苷诱导抗病毒分子及免疫调节机制的体外研究》文中进行了进一步梳理目的上世纪六十年代以来,数十个国家的临床实践证明,复方甘草酸苷具有抗炎、抗纤维化、抗病毒、免疫调节等多种生物学功能,其抗病毒作用尤为显着。但是,针对复方甘草酸苷抗病毒免疫作用机制的研究报道较少,其分子机制尚不清楚。鉴此,本文针对复方甘草酸苷体外诱导抗病毒分子及免疫调节的作用进行研究,以探讨其具体的作用途径,为阐释其临床抗病毒疗效提供重要的理论支持。方法实验中以不同组织来源、不同种属来源的A549、Hela、SMMC-7721、TC-1四种细胞株作为研究对象,应用MTT法检测复方苷草酸苷对四种细胞增殖的影响；运用RT-QF-PCR技术检测复方苷草酸苷处理后四种细胞中抗病毒免疫关键基因IFN-β1、IRF3及ISG15的表达变化；采用Western blot法对IFN-β1、ISG15蛋白及IFN信号通路下游效应抗病毒蛋白Mx的含量变化加以验证性分析；运用ELISA法检测复方甘草酸苷处理后四种细胞中关键抗病毒免疫分子IL-29、 IL-12、IFN-γ的变化。上述实验数据,采用SPSS13.0进行统计学分析。结果与讨论MTT分析结果表明,复方甘草酸苷短时间刺激对TC-1细胞增殖影响较大而随作用时间的延长,对A549和Hela细胞的影响较显着。80μg/ml作用48h时四种细胞的相对生长率在50%到70%之间,故选择该浓度为后续实验研究之复方苷草酸苷的作用浓度。RT-QF-PCR研究发现,复方苷草酸苷刺激A549及Hela细胞12h,IFN-β1、 IRF3及ISG15基因的表达均达到最高水平（P<0.05）,三者均呈现较为明显的峰度变化且有较好的趋势相关性。SMMC-7721及TC-1细胞相关基因表达的峰度变化较为平缓,三者表达变化的趋势也成一定的相关性。Western blot检测结果显示,虽然不同细胞株的响应时间有所差异,但均展示出复方甘草酸苷对抗病毒效应分子的显着诱导作用。与正常对照组相比,A549及SMMC-7721细胞IFN-β1蛋白的表达水平24h较高（P<0.05）,Hela及TC-1细胞48h较高（P<0.05）;A549、Hela及TC-1细胞ISG15蛋白的表达水平24h较高（P<0.05）,而SMMC-7721细胞48h较高（P<0.05）；对于Mx蛋白的表达水平,A549及Hela细胞24h较高（P<0.05）,SMMC-7721及TC-1细胞48h较高（P<0.05）。ELISA检测结果提示,A549及Hela细胞中IL-29在复方甘草酸苷处理12h时含量较高（P<0.05）,SMMC-7721及TC-1细胞各检测时间点之间IL-29含量差异无统计学意义（P>0.05）;IL-12及IFN-γ的检测结果均为阴性。结论复方甘草酸苷作用于A549、Hela、SMMC-7721、TC-1细胞,均能引起IFN-β1、 IRF3及ISG15表达的一致性变化,三者可能共同作用而成为一条抗病毒免疫途径。复方甘草酸苷可能通过上调IFN-β1的表达来激活Mx蛋白的产生,这是其抗病毒作用的重要效应途径。此外,复方甘草酸苷刺激A549和Hela细胞,IL-29的表达升高,提示还可能存在IL-29参与的抗病毒免疫途径。综上所述,复方甘草酸苷可能通过激活或上调IFN-β1、ISG15、IL-29及抗病毒蛋白Mx的表达,来行使其抗病毒及免疫调节的分子药理学作用。
王强[8]（2013）在《宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠的相关性研究》文中研究表明目的：本研究通过建立海人酸难治性癫痫大鼠模型,采用宁痫颗粒、卡马西平单独或联合治疗,观察海人酸难治性癫痫大鼠行为学和脑电图变化,从炎症因子、凋亡及耐药基因探讨宁痫颗粒抗癫痫作用机制,为中西医结合治疗难治性癫痫提供了新的治疗方法。方法：第一部分：采用海人酸海马CA3区微量注射的化学点燃方法制作模型,通过苯妥英钠及脑电图筛选成功制作慢性难治性癫痫模型36只,随机分为模型组、卡马西平组、宁痫颗粒组、宁痫颗粒低、中、高剂量联合卡马西平组,再加假手术组,共7组,每组6只。第二部分：观察各组大鼠治疗前后体重、癫痫发作的次数、发作平均持续时间、被抓时平均防卫级别、发作级别、SRS发作总时间,并对各组大鼠治疗前后进行脑电图监测。第三部分：难治性癫痫大鼠模型每组6只,分组治疗后与假手术组6只,予心尖灌注生理盐水后取脑,在4%多聚甲醛中固定,常规制备石蜡切片（含皮层和海马）。HE染色观察海马各区及颞叶皮层神经元形态结构的改变,免疫组化观察海马及颢叶皮层c-fos、caspase-3的表达。第四部分：按上述治疗分组后股动脉采血,收集各实验组大鼠血清采用免疫酶联法（Elisa法）测定各实验组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平。第五部分：按上述治疗分组后大鼠在10%水合氯醛麻醉下取脑,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠脑内海马MDR1mRNA表达,western-blot法检测其相应P-gp表达。结果：第一部分：采用海马局部注射海人酸及药物筛选后成功制作成难治性癫痫大鼠模型。第二部分：治疗后大鼠体重比较：与卡马西平组比较,宁痫颗粒中、高剂量联合卡马西平组体重明显增加,有显着性差异（P<0.05）：大鼠治疗前后发作平均持续时间比较：与卡马西平组比较,宁痫颗粒中、高剂量联合卡马西平发作平均持续时间明显减少,有极显着性差异（P<0.01）：大鼠治疗前后被抓时的平均防卫反应评分：与卡马西平组比较,宁痫颗粒中、高剂量联合卡马西平组被抓时平均防卫反应评分明显减少,有极显着性差异（P<0.01）；大鼠治疗前后平均发作级别的变化：与卡马西平组比较,宁痫颗粒中、高剂量联合卡马西平组平均发作级别减少,有极显着性差异（P<0.01）; SRS发作总时间变化：与卡马西平组比较,宁痫颗粒中、高剂量联合卡马西平组SRS发作总时间明显减少,有极显着性差异（P<0.01）。脑电图显示宁痫颗粒中、高剂量联合卡马西平组大鼠痫性放电受到抑制。第三部分：c-fos表达：假手术组大鼠海马区组织切片中可见少量c-fos阳性细胞表达,模型组海马区c-fos阳性细胞的表达明显增多。与卡马西平组比较,宁痫颗粒低、中、高剂量组联合卡马西表达明显减少,有极显着性差异（氏0.01）；caspase-3表达：与卡马西平组比较,宁痫颗粒低、中、高剂量联合卡马西组表达减少,有显着性差异（P<0.05）。第四部分：IL-1p表达：与卡马西平组比较,宁痫颗粒低剂量联合卡马西平组大鼠血清IL-1p含量显着降低（P<0.05）,宁痫颗粒中、高剂量组联合卡马西平大鼠血清IL-6含量极显着降低（P<0.01）；IL-6表达：与卡马西平组比较,宁痫颗粒低剂量联合卡马西平组大鼠血清IL-6含量显着降低（尸<0.05）；宁痫颗粒中、高剂量联合卡马西平组大鼠血清IL-6含量极显着降低护<0.01)；TNF-α表达：与卡马西平组比较,宁痫颗粒低、中、高剂量联合卡马西平组大鼠血清TNF-α含量极显着降低（P<0.01）。第五部分：MDR1mRNA表达：与模型组比较,其余各组大鼠脑组织MDRI含量极显着降低（P<0.01）；与卡马西平组比较,宁痫颗粒中、高剂量联合卡马西平组大鼠脑组织MDRI含量极显着降低（P<0.01）; P-gp表达：与模型组比较,宁痫颗粒高剂量联合卡马西平组大鼠脑组织P-gp蛋白表达极显着降低（P<0.01）,宁痫颗粒低、中剂量联合卡马西平组表达显着降低∽<0.05)。结论：1.本研究成功建立了大鼠海马局部注射微量海人酸后经癫痫持续状态及药物筛选成为难治性癫痫模型,操作相对简单,成功率高,节约成本,为后续研究打下较好的基础。2.宁痫颗粒低、中、高剂量联合卡马西平组能明显减少各组致痫大鼠的痫性发作平均持续时间、被抓时的防卫反应评分、SRS发作总时间,并降低痫性发作程度,比单用中药或西药有明显改善。脑电图显示宁痫颗粒中、高剂量组联合卡马西平组大鼠痫性放电明显受到抑制,只见少量棘波或尖波,而以宁痫颗粒高剂量联合卡马西平组出现最少。3.宁痫颗粒低、中、高剂量联合卡马西平组可以明显降低c-fos、caspase-3基因的表达,抑制细胞凋亡,达到保护神经细胞的作用；推测宁痫颗粒可能作用于细胞凋亡途径的多个靶点,与卡马西平有协同增效的作用,但凋亡基因的表达并未随中药剂量的增加而下调。4.IL-1β、IL-6、TNF-α共同参与了免疫反应,其水平的变化间接反映了脑组织损伤程度。宁痫颗粒中、高剂量联合卡马西平组炎症因子的表达明显低于卡马西平组（P<0.01）,表明宁痫颗粒联合卡马西平具有一定的免疫抑制作用,比单用卡马西平疗效显着,进而说明两者联合具有协同作用,对癫痫有一定的治疗作用。5.宁痫颗粒联合卡马西平具有一定的抑制MDR1mRNA/P-gp的药物转运体功能,可以下调MDR1mRNA/P-gp表达,且存在一定的量效关系。
潘利忠[9]（2010）在《平痫冲剂对慢性癫痫大鼠脑内谷氨酸、γ-氨基丁酸含量的影响及多耐药基因表达的研究》文中研究指明目的：通过平痫冲剂对慢性癫痫幼龄大鼠脑组织海马内谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）含量的影响及多耐药基因表达的研究,探讨平痫冲剂抗癫痫的作用机制。实验一：方法：采用SPF级新生28天Wistar幼龄大鼠60只,体重70±10g,雌雄各半；依据随机数字表分组法将60只幼龄大鼠随机分为6组,每组10只,即正常对照组（A组）、模型对照组（B组）、平痫冲剂大剂量组（C组）、平痫冲剂中剂量组（D组）、平痫冲剂小剂量组（E组）、阳性对照组（F组）。除A组给予生理盐水外其余各组均用戊四唑（PTZ）亚惊厥剂量持续腹腔注射法复制出癫痫点燃模型；在造模成功后,A、B组给予生理盐水,F组给予苯巴比妥,D、C、E组给予平痫冲剂；治疗21天后断头处死取其脑组织,通过生物化学方法和生物化学技术检测幼龄大鼠脑组织中海马内的Glu、GABA含量水平。结果：对于Glu含量,模型对照组与正常对照组比较Glu含量明显增加；而平痫冲剂大剂量组、平痫冲剂中剂量组、平痫冲剂小剂量组和阳性对照组与模型对照组比较,Glu含量都有不同程度的下降（P<0.01）（P<0.05）。对于GABA含量,模型对照组与正常对照组比较GABA含量明显降低；而平痫冲剂大剂量组、平痫冲剂中剂量组、平痫冲剂小剂量组和阳性对照组与模型对照组比较,GABA含量都有不同程度的升高（P<0.01）（P<0.05）。结论：平痫冲剂能够抑制实验性癫痫幼龄大鼠兴奋性氨基酸递质的活性,并提高其抑制性氨基酸递质的活性,从而提高癫痫发作阈值,降低大脑皮层的兴奋性,使得兴奋性氨基酸递质与抑制性氨基酸递质重新得以平衡,有效抑制癫痫的发作。实验二：方法：本研究在建立匹罗卡品癫痫持续状态后慢性难治性癫痫模型的基础上,通过比较不同药物干预下对多药耐药转运蛋白及基因P-gp/MDR1mRNA和MRP1mRNA的影响,从病理组织学进行疗效分析,观察难治性癫痫大鼠脑内P-gp/MDR1mRNA和MRP1mRNA的表达和分布,在形态和功能不同角度研究多药耐药转运蛋白及基因P-gP/MDR1mRNA和MRP1mRNA在慢性难治性癫痫多药耐药机制中的作用,并探讨难治性癫痫多药耐药可能的分子病理机制,及中药平痫冲剂对其表达的影响,进而探讨平痫冲剂对难治性癫痫的作用机制。实验动物及分组：同实验一。平痫冲剂对难治性癫痫大鼠脑组织P-gp及多药耐药基因MDR1mRNA和MRP1mRNA的表达的影响。采用荧光实时定量PCR、免疫组化和Westem-blot的方法,观察难治性癫痫大鼠脑内海马和皮层部位多药耐药转运蛋白及基因P-gp/MDR1和MRP1的表达和分布。探讨难治性癫痫多药耐药可能的分子病理机制及平痫冲剂对其表达的影响。结果：采用荧光实时定量PCR、免疫组化和westem-blot的方法检测P-gp、MDR1-mRNA、MRP1-mRNA的表达结果相一致。（1）与正常对照组比较,模型对照组,平痫冲剂大剂量组,平痫冲剂中剂量组,平痫冲剂小剂量组,阳性对照组P-gp/MDR1-mRNA、MRP1-mRNA在海马、皮质部位的表达增加,有显着性差异（P<0.05）。模型对照组,平痫冲剂大剂量组,平痫冲剂中剂量组,平痫冲剂小剂量组,阳性对照组之间均无差异（P>0.05）。但P-gp/MDR1-mRNA、MRP1-mRNA其表达含量由低到高依次是平痫冲剂中剂量组、平痫冲剂大剂量组、平痫冲剂小剂量组、模型对照组、阳性对照组。（2）模型对照组,平痫冲剂大剂量组,平痫冲剂中剂量组,平痫冲剂小剂量组,阳性对照组,P-gp、MDR1-mRNA、MPR1-mRNA在海马与其在皮质部位表达含量之间无明显差异,无统计学意义（P>0.05）,但皮质部位的表达含量略高于其在海马部位的表达。结论：1匹罗卡品诱发的癫痫持续状态后慢性难治性癫痫模型,皮层和海马P-gp从MDR1mRNA和MRP1mRNA呈高表达。难治性癫痫的耐药可能与P-gp/MDR1mRNA和MRP1mRNA的高表达有关。2癫痫的反复发作可以诱导慢性难治性癫痫大鼠海马和皮层P-gp/MDR1mRNA和MRP1mRNA的表达,当发作与抗癫痫药物如卡马西平共同作用时,多药耐药蛋白、基因的表达增加,反复癫痫发作和抗癫痫药物都参与了对多药耐药蛋白及基因P-gp从MDR1mRNA、MRP1mRNA的诱导。3中药平痫冲剂具有一定的抑制P-gP/MDR1、MRP1的药物转运体功能,可以下调P-gP/MDR1mRNA、MRP1mRNA的表达。中药平痫冲剂对药物转运体抑制功能可能是其治疗难治性癫痫的作用机制。
郑香春[10]（2008）在《中药柴贝止痫汤对难治性癫痫大鼠发作情况及耐药基因表达的研究》文中研究表明研究背景:在过去的20年中,尽管不断有新的抗癫痫药（antiepileptic drugs,AEDs）投入临床应用,但仍有30%左右的癫痫患者对AEDs不敏感,出现难以被控制的反复发作,临床上称之为难治性癫痫。难治性癫痫的预后不佳,有较高的致残和致死率,属于现代难治病范畴。因此研究难治性癫痫对AEDs产生耐药的原因,发现新的治疗措施,具有重要意义。在肿瘤化疗的过程中发现,长期接触某一种化疗药物产生的不仅对此种化疗药物耐药,而且可对其他结构和功能不同的多种化疗药物产生交叉耐药性的现象,此被称为多药耐药（multidrug resistance,MDR）。研究表明肿瘤细胞膜上表达的多药转运体,能够将化疗药物泵出细胞外,减少了肿瘤细胞内的药物浓度,参与了肿瘤耐药的发生。同样情况也出现在难治性癫痫上,通常如果患者对一种AED耐受,他往往也对其它的AEDs不敏感。研究发现难治性癫痫耐药和肿瘤耐药之间存在相同的病理机制。目前研究认为在生理条件下人体血脑屏障（blood-brainbarrier,BBB）毛细血管内皮细胞和胶质细胞上就有多药转运体的表达,而在难治性癫痫患者病灶切除的标本发现血脑屏障上有高表达的多药转运体。进一步对其功能的研究发现,多药转运体是一类ATP结合蛋白质超家族,能够识别多种作用机制不同的AEDs,主动将药物泵出到BBB以外。因此认为,难治性癫痫患者脑内多药转运体表达增高,引起AEDs通过血脑屏障障碍,患者脑中AEDs浓度下降,可能参与了难治性癫痫多药耐药的发生。P—糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）和多药耐药相关蛋白1（multi-drug resisitance associatedprotein,MRP1）是被人们研究最早的两种多药转运体。目的:本研究在建立匹罗卡品癫痫持续状态后慢性难治性癫痫模型的基础上,通过比较不同药物干预下对多药耐药转运蛋白及基因P-gp/MDR1 mRNA和MRP1 mRNA的影响,从行为功能指标和病理组织学两个方面进行疗效分析,观察难治性癫痫大鼠脑内P-gp/MDR1 mRNA和MRP1 mRNA的表达和分布,在形态和功能不同角度研究多药耐药转运蛋白及基因P-gp/MDR1 mRNA和MRP1mRNA在慢性难治性癫痫多药耐药机制中的作用,并探讨难治性癫痫多药耐药可能的分子病理机制,及中药复方柴贝止痫汤对其表达的影响,进而探讨中药干预难治性癫痫的可能机制。材料和方法:本文共分三部分:第一部分:匹罗卡品癫痫持续状态后慢性难治性癫痫大鼠的行为学观察。实验动物及分组:健康雄性Wistar大鼠88只,随机分为5组:正常对照组（8只）、空白模型组（20只）、中西药联合治疗组（20只）、中药治疗组（20只）、西药治疗组（20只）。以不同药物干预,观察致痫大鼠机体状态、癫痫发作的次数、每次发作持续时间、平均持续时间（每次癫痫发作的持续时间总和除以癫痫发作的总次数）、癫痫发作级别、致痫大鼠防卫反应级别及进行体重检测,以判定、分析药物的疗效。第二部分:难治性癫痫大鼠脑组织病理形态学变化。采用HE染色和尼氏染色进行脑组织形态学观察。HE染色观察海马CA1区、CA2区、CA3区、齿状回、额叶、颞叶皮层神经元形态结构的改变,尼氏染色观察海马CA1区、CA2区、CA3区、齿状回、额叶、颞叶皮层脑神经元存活情况、尼氏小体丢失情况。第三部分:中药柴贝止痫汤对难治性癫痫大鼠脑组织P-gp及多药耐药基因MDR1 mRNA和MRP1 mRNA的表达的影响。采用荧光实时定量PCR、免疫组化和Western-blot的方法,观察难治性癫痫大鼠脑内海马和皮层部位多药耐药转运蛋白及基因P-gp/MDR1和MRP1的表达和分布。探讨难治性癫痫多药耐药可能的分子病理机制,及中药复方柴贝止痫汤、卡马西平对其表达的影响。结果:第一部分实验结果1各致痫组大鼠发作总次数的变化:与空白模型组比较,柴贝止痫汤联合卡马西平组、柴贝止痫汤组、卡马西平组的发作总次数减少,有显着性差异（P＜0.05）;与柴贝止痫汤联合卡马西平组比较,柴贝止痫汤组的发作总次数增加,有显着性差异（P＜0.05）。2各致痫组大鼠发作总持续时间的变化:与空白模型组比较,柴贝止痫汤联合卡马西平组发作总时间减少,有显着性差异（P＜0.05）;与柴贝止痫汤联合卡马西平组比较,柴贝止痫汤组、卡马西平组发作总时间增加,均有显着性差异（P＜0.05）。3各致痫组大鼠治疗前后发作平均持续时间的变化:给药后,与空白模型组比较,柴贝止痫汤联合卡马西平组、柴贝止痫汤组、卡马西平组发作平均持续时间减少,有显着性差异（P＜0.05）;与柴贝止痫汤联合卡马西平组比较,柴贝止痫汤组发作平均持续时间增加,有显着性差异（P＜0.05）。与给药前比较,柴贝止痫汤联合卡马西平组发作平均持续时间减少,有极显着性差异（P＜0.01）;柴贝止痫汤组、卡马西平组发作平均持续时间均减少,有显着性差异（P＜0.05）。4各致痫组大鼠治疗前后癫痫发作级别的变化:给药后,与空白模型组比较,柴贝止痫汤联合卡马西平组、卡马西平组癫痫发作级别有明显降低,有显着性差异（P＜0.05）。与给药前比较,柴贝止痫汤联合卡马西平组癫痫发作级别明显降低,有极显着性差异（P＜0.01）;卡马西平组癫痫发作级别降低,有显着性差异（P＜0.05）。5各致痫组大鼠治疗前后防卫反应级别的变化:给药后,与空白模型组比较,柴贝止痫汤联合卡马西平组、柴贝止痫汤组、卡马西平组大鼠防卫反应级别均有降低,存在显着性差异（P＜0.05）;与柴贝止痫汤联合卡马西平组比较,卡马西平组大鼠防卫反应级别增加,有显着性差异（P＜0.05）。与给药前比较,柴贝止痫汤联合卡马西平组、柴贝止痫汤组防卫反应级别均有明显降低,有极显着性差异（P＜0.01）;卡马西平组防卫反应级别降低,有显着性差异（P＜0.05）。6各组大鼠体重变化比较:给药前,与正常组大鼠比较,空白模型组、柴贝止痫汤联合卡马西平组、柴贝止痫汤组、卡马西平组体重均减轻,有显着性差异（P＜0.05）。给药后,与正常组大鼠比较,空白模型组、柴贝止痫汤联合卡马西平组、柴贝止痫汤组、卡马西平组体重均减轻,有显着性差异（P＜0.05）;与空白模型组比较,柴贝止痫汤联合卡马西平组体重增加,有显着性差异（P＜0.05）与给药前比较,各组大鼠体重均有增加,有显着性差异（P＜0.05）。第二部分实验结果1氯化锂—匹罗卡品慢性难治性癫痫动物模型脑组织海马CA1区、CA2区、CA3区、齿状回,额叶,颞叶皮层神经元出现明显损伤,其病变以海马CA1区、CA3区最明显,其次为CA2区、齿状回、额叶、颞叶皮层。2中药复方柴贝止痫汤、卡马西平能够在一定程度上减轻难治性癫痫大鼠脑组织海马CA1区、CA2区、CA3区、齿状回,额叶,颞叶皮层神经元的损伤,提示二者神经元保护作用的存在。第三部分实验结果采用荧光实时定量PCR、免疫组化和Western-blot的方法检测P-gp、MDR1-mRNA、MRP1-mRNA的表达结果相一致。1与正常组大鼠比较,在难治性癫痫大鼠海马和皮质部位,空白模型组、柴贝止痫汤联合卡马西平组、柴贝止痫汤组、卡马西平组P-gp/MDR1 mRNA、MRP1 mRNA表达含量均有明显增高,具有统计学意义（P＜0.05）;柴贝止痫汤联合卡马西平组、柴贝止痫汤组、卡马西平组、空白模型组之间其表达无明显差异,无统计学意义（P＞0.05）,但P-gp、MDR1-mRNA、MRP1-mRNA表达量由高到低依次是卡马西平组、空白模型组、柴贝止痫汤组、柴贝止痫汤联合卡马西平组。2正常组、空白模型组、柴贝止痫汤联合卡马西平组、柴贝止痫汤组、卡马西平组,P-gp、MDR1-mRNA、MRP1-mRNA在海马与其在皮质部位表达含量之间无明显差异,无统计学意义（P＞0.05）,但皮质部位的表达含量略高于其在海马部位的表达。结论:1匹罗卡品癫痫持续状态后慢性难治性癫痫模型操作简单、成功率高、稳定性好。柴贝止痫汤联合卡马西平的给药方式对难治性癫痫大鼠的疗效优于单独应用卡马西平及柴贝止痫汤,提高了抗癫痫药物对耐药性难治性癫痫大鼠的疗效。2匹罗卡品诱发的癫痫持续状态后慢性难治性癫痫模型,皮层和海马P-gp/MDR1 mRNA和MRP1 mRNA呈高表达。难治性癫痫的耐药可能与P-gp/MDR1 mRNA和MRP1 mRNA的高表达有关。3癫痫的反复发作可以诱导慢性难治性癫痫大鼠海马和皮层P-gp/MDR1mRNA和MRP1 mRNA的表达,当发作与抗癫痫药物如卡马西平共同作用时,多药耐药蛋白、基因的表达增加,反复癫痫发作和抗癫痫药物似乎都参与了对多药耐药蛋白及基因P-gp/MDR1 mRNA、MRP1 mRNA的诱导。4中药复方柴贝止痫汤具有一定的抑制P-gp/MDR1、MRP1的药物转运体功能,可以下调P-gp/MDR1 mRNA、MRP1 mRNA的表达。中药复方柴贝止痫汤对药物转运体抑制功能可能是其治疗难治性癫痫的机制之一,其与适当的抗癫痫药物合用,将有助于难治性癫痫的治疗。
二、抗痫液抗病毒作用的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、抗痫液抗病毒作用的实验研究（论文提纲范文）
（1）疏风止痉方治疗儿童癫痫临床观察及对耐药性癫痫模型大鼠脑内卡马西平浓度影响的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 研究一 疏风止痉方治疗62例癫痫儿童的临床观察 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究方法 |
| 3 研究结果 |
| 小结 |
| 研究二 疏风止痉方对耐药性癫痫模型大鼠发作行为及脑脊液中卡马西平浓度的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述一 炎症反应与癫痫发作的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 中医药治疗热痫及抑制炎性因子的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）“良关系”药对“远志-天麻”的抗癫痫成分研究及其衍生物合成与活性评价（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语对照表 |
| 第一章 绪论及文献综述 |
| 1.1 癫痫简介 |
| 1.2 西药治疗癫痫介绍 |
| 1.3 中药治疗癫痫 |
| 1.3.1 柴胡桂枝汤 |
| 1.3.2 小镇心丸 |
| 1.3.3 大钩藤饮 |
| 1.3.4 加味逍遥散 |
| 1.3.5 千金保命丹 |
| 1.3.6 定痫丸 |
| 1.3.7 六君健脾汤 |
| 1.3.8 天麻钩藤饮 |
| 1.3.9 癫痫宁片 |
| 1.3.10 青阳参片 |
| 1.4 “良关系”药对“远志-天麻”成分介绍 |
| 1.5 远志中活性成分TMCA结构修饰研究进展 |
| 1.5.1 天然产物中的TMCA类似物生物活性研究进展 |
| 1.5.2 人工合成的TMCA衍生物的活性研究进展 |
| 1.6 GABA-AT介绍 |
| 1.7 本论文研究目的 |
| 第二章 “远志-天麻”成分中GABA-AT靶点抑制活性化合物的虚拟筛选 |
| 2.1 研究思路 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 远志与天麻化学成分收集 |
| 2.2.2 药效团的构建 |
| 2.2.3 分子模拟对接研究 |
| 2.3 研究结果 |
| 2.3.1 远志与天麻化合物库的构建 |
| 2.3.2 药效团的构建与评价 |
| 2.3.3 药效团对远志与天麻中抑制GABA-AT活性成分的虚拟筛选 |
| 2.3.4 远志与天麻中潜在活性成分与GABA-AT靶点的分子模拟对接 |
| 2.4 结果分析 |
| 第三章 基于“组合中药分子化学”策略“远志-天麻”药效成分的系列衍生物的设计与合成 |
| 3.1 研究思路 |
| 3.1.1 先导化合物的设计 |
| 3.1.2 “组合中药分子化学”研究策略 |
| 3.2 化合物设计 |
| 3.2.1 A系列“TMCA-香兰酯”类化合物的设计 |
| 3.2.2 B系列“TMCA-香兰酰胺”类化合物的设计 |
| 3.2.3 C系列“TMCA-普瑞巴林-异戊香兰肽”类化合物的设计 |
| 3.3 实验仪器与试剂 |
| 3.4 分析方法 |
| 3.4.1 LC-HRMS测试方法 |
| 3.4.2 NMR测试方法 |
| 3.4.3 熔点与红外测试方法 |
| 3.5 A系列化合物的合成 |
| 3.5.1 合成方法 |
| 3.5.2 结构表征 |
| 3.6 B系列化合物的合成 |
| 3.6.1 合成方法 |
| 3.6.2 结构表征 |
| 3.7 C系列化合物的合成 |
| 3.7.1 合成路线设计 |
| 3.7.2 结构表征 |
| 3.8 结果分析 |
| 第四章 “远志-天麻”药效成分系列衍生物的抗癫痫活性评价 |
| 4.1 研究思路 |
| 4.2 实验仪器与试剂 |
| 4.3 A系列化合物药理活性测定 |
| 4.3.1 最大电休克模型 |
| 4.3.2 皮下戊四唑模型 |
| 4.3.3 神经毒性测定 |
| 4.3.4 细胞毒性测定 |
| 4.3.5 数据处理 |
| 4.3.6 分子模拟对接 |
| 4.4 A系列化合物药理实验结果 |
| 4.4.1 最大电休克模型筛选结果 |
| 4.4.2 抗癫痫活性的进一步测定及神经毒性评价 |
| 4.4.3 细胞毒性测定结果 |
| 4.4.4 活性化合物的类药性评价及代谢参数预测 |
| 4.4.5 分子模拟对接结果 |
| 4.4.6 构效关系研究 |
| 4.5 B系列化合物药理活性测定 |
| 4.5.1 最大电休克模型 |
| 4.5.2 皮下戊四唑模型 |
| 4.5.3 神经毒性 |
| 4.5.4 自主活动测定 |
| 4.5.5 镇静催眠活性测定 |
| 4.5.6 数据处理 |
| 4.5.7 分子模拟对接 |
| 4.6 B系列化合物药理活性测定结果 |
| 4.6.1 最大电休克模型筛选结果 |
| 4.6.2 抗癫痫活性的进一步测定及神经毒性评价 |
| 4.6.3 自主活动测定结果 |
| 4.6.4 戊巴比妥钠诱导睡眠测定结果 |
| 4.6.5 分子模拟对接 |
| 4.6.6 构效关系研究 |
| 4.7 C系列化合物药理活性测定 |
| 4.7.1 最大电休克模型 |
| 4.7.2 皮下戊四唑模型 |
| 4.7.3 神经毒性 |
| 4.7.4 活性化合物对癫痫模型斑马鱼的行为学研究 |
| 4.7.5 分子模拟对接 |
| 4.7.6 分子动力学模拟 |
| 4.8 C系列化合物药理活性测定结果 |
| 4.8.1 最大电休克模型结果 |
| 4.8.2 抗癫痫活性的进一步测定及神经毒性评价 |
| 4.8.3 活性化合物对癫痫模型斑马鱼的行为学研究 |
| 4.8.4 分子模拟对接结果 |
| 4.8.5 分子动力学模拟结果 |
| 4.8.6 构效关系研究 |
| 4.9 结果分析 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间取得的科研成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫的临床研究及其主要入血成分对KA致痫大鼠的抗耐药机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 文献综述一 癫痫的病因病机及治法概述 |
| 1 癫痫的常见病因病机 |
| 2 癫痫的治法分述 |
| 3 结语 |
| 参考文献 |
| 综述二 单味中药及其单体成分抗痫作用与机制研究进展 |
| 1 疏肝理气药 |
| 2 平肝熄风药 |
| 3 活血化瘀药 |
| 4 补虚药 |
| 5 开窍药 |
| 6 淡渗利湿药 |
| 7 安神定志药 |
| 8 展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 |
| 临床研究一 柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫的疗效与安全性评价 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 研究结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 小结 |
| 临床研究二 柴贝止痫汤添加治疗对耐药性癫痫患者血清炎症因子的影响 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 研究结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 小结 |
| 第三部分 实验研究 柴贝止痫汤及其主要入血成分对KA致痫大鼠的抗耐药机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 小结 |
| 创新性 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附录 |
| 附录1 癫痫发作程度表 |
| 附录2 痫病痰气郁滞证中医证候评定量表 |
| 附录3-1 成年癫痫患者生活质量评定量表-89项 |
| 附录3-2 生活质量量表各分项题目分值表 |
| 附录3-3 生活质量量表各项得分权重分值 |
| 附录4 NDDI-E量表(中文版) |
| 附录5 抑郁自评量表(SDS) |
| 附录6 汉密尔顿抑郁量表(HAMA) |
| 附录7 汉密尔顿焦虑量表-24项(HAMD-24) |
（4）含环丙烷结构的新型抗癫痫药物的合成与活性研究（论文提纲范文）
| 论文创新点 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 简写说明 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 癫痫概述 |
| 1.2 抗癫痫药物 |
| 1.3 经典抗癫痫药物结构改造史 |
| 1.3.1 苯巴比妥结构改造 |
| 1.3.2 卡玛西平的结构改造 |
| 1.3.3 丙戊酸的结构改造 |
| 1.3.4 苯妥因的改造过程 |
| 1.3.5 GABA衍生物 |
| 1.3.6 抗癫痫天然提取物 |
| 1.3.7 其他抗癫痫化合物结构 |
| 1.4 抗癫痫药物的结构特点与新药开发 |
| 1.5 本课题设计思路 |
| 第二章 侧链含磺酰胺基团的新型环丙烷螺环乙内酰脲类化合物的设计、合成与活性 |
| 2.1 设计思路 |
| 2.2 合成部分 |
| 2.2.1 试剂与仪器 |
| 2.2.2 合成路线 |
| 2.2.3 实验步骤 |
| 2.2.4 合成部分讨论 |
| 2.3 化合物抗癫痫活性测试与结果 |
| 2.3.1 抗癫痫药物筛选简介 |
| 2.3.2 药理实验部分 |
| 2.3.3 抗癫痫活性测试结果与讨论 |
| 2.4 本章小结与讨论 |
| 第三章 新型苯磺酰胺类化合物的设计、合成与生物活性研究 |
| 3.1 设计思路 |
| 3.2 合成部分 |
| 3.2.1 试剂与仪器 |
| 3.2.2 合成路线 |
| 3.2.3 实验步骤 |
| 3.2.4 合成部分结果与讨论 |
| 3.3 抗癫痫实验与结果 |
| 3.3.1 抗癫痫实验部分 |
| 3.3.2 抗癫痫活性测试结果与讨论 |
| 3.4 化合物对碳酸酐酶抑制活性药理实验 |
| 3.4.1 碳酸酐酶简介 |
| 3.4.2 碳酸酐酶实验部分 |
| 3.4.3 碳酸酐酶抑制活性测试结果与讨论 |
| 3.5 本章小结与讨论 |
| 第四章 新型缩氨基脲类化合物设计、合成与生物活性 |
| 4.1 设计思路 |
| 4.2 合成部分 |
| 4.2.1 试剂与仪器 |
| 4.2.2 合成路线 |
| 4.2.3 实验步骤 |
| 4.2.4 合成部分讨论 |
| 4.3 抗癫痫活性测试与结果 |
| 4.3.1 抗癫痫药理实验部分 |
| 4.3.2 抗癫痫活性测试结果与讨论 |
| 4.4 抗肿瘤活性实验与结果 |
| 4.4.1 抗肿瘤活性实验部分 |
| 4.4.2 抗肿瘤测试结果与讨论 |
| 4.5 本章小结与讨论 |
| 论文总结与展望 |
| 参考文献 |
| 附录Ⅰ：部分化合物核磁图谱 |
| 附录Ⅱ 部分化合物质谱 |
| 附录Ⅲ：在读期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（5）隐孔菌抗PRRSV生理活性物质及保肝作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 隐孔菌、猪繁殖与呼吸综合征病毒与微生物生理活性物质研究进展 |
| 1.2 核糖核酸酶研究进展 |
| 1.3 急性肝损伤保护作用研究进展 |
| 1.4 研究目的、意义及整体技术路线 |
| 第二章 隐孔菌抗病毒天然产物的分离纯化条件优化 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 实验结果与分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 隐孔菌新型化合物体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 隐孔菌核糖核酸酶的分离纯化及生理生化性质研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 隐孔菌水溶性提取物对化学性肝损伤的辅助保护作用 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.3 实验结果与分析 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 研究生期间发表论文 |
| 参与完成专利 |
（6）柴胡黄芩配伍应用对小鼠急性癫痫模型的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 第三章 结果 |
| 1 柴胡黄芩配伍应用对最大电休克模型的影响 |
| 2 柴胡黄芩配伍应用对戊四氮急性致痫小鼠发作性阵挛潜伏期、发作性强直潜伏期及死亡潜伏期的影响 |
| 3 柴胡黄芩配伍应用对士的宁急性致痫小鼠发作性阵挛潜伏期及死亡潜伏期的影响 |
| 4 柴胡黄芩配伍应用对匹罗卡品急性致痫小鼠发作性阵挛潜伏期及死亡潜伏期的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 1 柴胡黄芩配伍应用在各癫痫模型中的意义及影响 |
| 2 柴胡黄芩配伍应用在柴胡疏肝汤中的意义 |
| 3 讨论小结 |
| 4 创新与不足 |
| 第五章 全文小结 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间研究成果 |
| 致谢 |
（7）复方甘草酸苷诱导抗病毒分子及免疫调节机制的体外研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 0.1 病毒性疾病是中西医学的重要研究课题 |
| 0.2 抗病毒西药研究现状 |
| 0.3 抗病毒中药研究进展 |
| 0.4 甘草酸苷具有广谱抗病毒作用 |
| 0.5 甘草酸苷抗病毒机理研究现状 |
| 0.6 本文研究思路 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 本研究主要结果及其科学意义 |
| 3.2 本研究的特色与创新性分析 |
| 3.3 本研究存在的不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 在读期间公开发表的学术论文 |
（8）宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠的相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一部分 海人酸难治性癫痫大鼠动物模型的建立 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品及试剂 |
| 1.3 实验仪器设备 |
| 1.4 主要溶液配制 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 难治性癫痫动物模型制作方法 |
| 2.2 实验动物癫痫发作分级 |
| 2.3 药物筛选实验动物 |
| 2.4 难治性癫痫模型造模成功标准 |
| 3 结果 |
| 3.1 难治性癫痫模型的制备存活情况 |
| 3.2 行为学观察 |
| 3.3 急性期表现 |
| 3.4 静止期表现 |
| 3.5 慢性自发发作期表现 |
| 4 讨论 |
| 4.1 难治性癫痫动物模型的选择 |
| 4.2 海人酸难治性癫痫动物模型评价 |
| 4.3 海人酸难治性癫痫模型存在的问题 |
| 第二部分 宁痫颗粒联合CBZ对难治性癫痫大鼠行为学及脑电图观察 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 主要溶液配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验动物分组以及给药方法 |
| 2.2 痫性发作行为学记录 |
| 2.3 体重检测 |
| 2.4 观察大鼠被抓时防卫反应分级 |
| 2.5 Racine标准分级 |
| 2.6 脑电图观察 |
| 2.7 难治性癫痫大鼠模型的疗效评价 |
| 2.8 脑电图评价 |
| 3 统计学方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 慢性期及给药致痫大鼠发作以及存活情况 |
| 4.2 大鼠痫性发作行为学观察结果 |
| 4.3 各组大鼠脑电图结果 |
| 5 讨论 |
| 5.1 宁痫颗粒“从肝论治”病机分析 |
| 5.2 宁痫颗粒组方成分分析 |
| 5.3 实验对照药物的选择 |
| 5.4 各组药物对癫痫大鼠体重及行为学的影响 |
| 5.5 脑电图变化 |
| 小结 |
| 第三部分 宁痫颗粒联合CBZ对难治性癫痫大鼠caspase-3、c-fos表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品及试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 HE染色结果 |
| 2.2 免疫组化染色结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 神经元细胞凋亡、死亡与癫痫关系 |
| 3.2 宁痫颗粒联合卡马西平对kA癫痫大鼠c-fos的影响 |
| 3.3 宁痫颗粒联合卡马西平对kA癫痫大鼠caspase-3的影响 |
| 小结 |
| 第四部分 宁痫颗粒联合CBZ对难治性癫痫大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验药品与试剂 |
| 1.2 主要仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 观察指标：血清IL-1 β、IL-6、TNF-α检测 |
| 2.2 ELISA检测 |
| 3 统计学方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 对大鼠血清IL-1β水平的影响 |
| 4.2 对大鼠血清IL-6水平的影响 |
| 4.3 对大鼠血清TNF-α水平的影响 |
| 5 讨论 |
| 5.1 癫瘸与炎症因子 |
| 5.2 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠IL-1β的影响 |
| 5.3 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠IL-6的影响 |
| 5.4 宁瘸颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠TNF-α的影响 |
| 小结 |
| 第五部分 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠脑组织MDR1mRNA/P-gp表达影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验药品及试剂 |
| 1.2 主要溶液的配制 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 荧光定量PCR法检测MDR1mRNA表达 |
| 2.2 实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR) |
| 3 统计学方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 脑组织P-gp Western Blot检测 |
| 4.2 对脑组织P-gp蛋白表达的影响 |
| 5 讨论 |
| 5.1 MDR1/P-gp表达与难治性癫痫 |
| 5.2 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠MDR1mRNA/P-gp表达的影响 |
| 5.3 宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫作用的可能机制 |
| 小结 |
| 全文讨论 |
| 全文总结 |
| 创新点及应用价值 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 文献综述一 |
| 文献综述二 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 附件一 |
（9）平痫冲剂对慢性癫痫大鼠脑内谷氨酸、γ-氨基丁酸含量的影响及多耐药基因表达的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 中英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一章 理论研究 |
| 一:癫痫的中医学研究进展 |
| 1.古代中医文献对癫痫的认识 |
| 2.中医药治疗癫痫的研究现状 |
| 3 中药抗癫痫作用的实验研究概况 |
| 4.评价与展望 |
| 二:癫痫的西医学研究进展 |
| 1.发病原因 |
| 2.发病机制 |
| 3 西医学对癫痫治疗的认识 |
| 参考文献 |
| 三:癫痫动物模型的研究 |
| 1.急性癫痫模型 |
| 2.慢·性癫痫模型 |
| 3 癫痫大发作模型 |
| 4.癫痫小发作模型 |
| 5.癫痫大发作模型 |
| 6 难治性癫痫模型 |
| 7.小结 |
| 参考文献 |
| 四:难治性癫痫多药耐药机制的相关研究进展 |
| 1 多药耐药转运体 |
| 2 多药耐药基因与癫痫耐药的关系 |
| 3 多药耐药基因和蛋白参与癫痫耐药的可能作用机制 |
| 4 目前对于癫痫和多药耐药的研究情况 |
| 5 小结和展望 |
| 6 参考文献 |
| 第二章 实验研究 |
| 实验一 平痫冲剂对戊四唑致痫大鼠脑内谷氨酸、r-氨基丁酸含量的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学处理 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 实验二 平痫冲剂对难治性癫痫大鼠脑组织p-糖蛋白及多药耐药基因MDR #1和MPR1表达的影响 |
| 第一部分 免疫组织化学法检测难治性癫痫大鼠脑组织P-糖蛋白的表达 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 结果 |
| 第二部分 蛋白免疫印迹法检测难治性癫痫大鼠脑组织P-糖蛋白的表达 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 结果 |
| 第三部分 荧光实时定量PCR法检测难治性癫痫大鼠脑组织多药耐药基因MDRImRNA和MRPImRNA的表达 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 附图 |
（10）中药柴贝止痫汤对难治性癫痫大鼠发作情况及耐药基因表达的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 癫痫的中医药研究进展 |
| 1 古代中医文献对癫痫的认识 |
| 2 中医药治疗癫痫的研究现状 |
| 3 中药抗癫痫作用的实验研究概况 |
| 4 评价与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 癫痫实验动物模型的研究 |
| 1 急性实验动物癫痫模型 |
| 2 慢性癫痫模型 |
| 3 癫痫大发作模型 |
| 4 癫痫小发作模型 |
| 5 原发性癫痫模型 |
| 6 难治性癫痫模型 |
| 7 结语 |
| 参考文献 |
| 综述三 难治性癫痫多药耐药机制的相关研究进展 |
| 1 多药耐药转运体 |
| 2 多药耐药基因与癫痫耐药的关系 |
| 3 多药耐药基因和蛋白参与癫痫耐药的可能作用机制 |
| 4 目前对于癫痫和多药耐药的研究情况 |
| 5 小结和展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 难治性癫痫大鼠动物模型的行为学观察 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验二 难治性癫痫大鼠脑组织病理形态学变化 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验三 中药柴贝止痫汤对难治性癫痫大鼠脑组织P-糖蛋白及多药耐药基因MDR1和MRP1表达的影响 |
| 引言 |
| 第一部分 荧光实时定量PCR法检测难治性癫痫大鼠脑组织多药耐药基因MDR1和MRP1的表达 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 第二部分 免疫组织化学法检测难治性癫痫大鼠脑组织P-糖蛋白的表达 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 第三部分 蛋白免疫印迹法检测难治性癫痫大鼠脑组织P-糖蛋白的表达 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附图 |
四、抗痫液抗病毒作用的实验研究（论文参考文献）
- [1]疏风止痉方治疗儿童癫痫临床观察及对耐药性癫痫模型大鼠脑内卡马西平浓度影响的研究[D]. 马茗晗. 天津中医药大学, 2020(04)
- [2]“良关系”药对“远志-天麻”的抗癫痫成分研究及其衍生物合成与活性评价[D]. 赵泽丰. 西北大学, 2020(01)
- [3]柴贝止痫汤添加治疗耐药性癫痫的临床研究及其主要入血成分对KA致痫大鼠的抗耐药机制研究[D]. 刘冲冲. 北京中医药大学, 2020(04)
- [4]含环丙烷结构的新型抗癫痫药物的合成与活性研究[D]. 李金平. 武汉大学, 2015(07)
- [5]隐孔菌抗PRRSV生理活性物质及保肝作用的研究[D]. 马增强. 中国农业大学, 2014(01)
- [6]柴胡黄芩配伍应用对小鼠急性癫痫模型的影响[D]. 梁一超. 南方医科大学, 2013(03)
- [7]复方甘草酸苷诱导抗病毒分子及免疫调节机制的体外研究[D]. 李启杰. 成都中医药大学, 2013(07)
- [8]宁痫颗粒联合卡马西平对难治性癫痫大鼠的相关性研究[D]. 王强. 成都中医药大学, 2013(07)
- [9]平痫冲剂对慢性癫痫大鼠脑内谷氨酸、γ-氨基丁酸含量的影响及多耐药基因表达的研究[D]. 潘利忠. 南京中医药大学, 2010(12)
- [10]中药柴贝止痫汤对难治性癫痫大鼠发作情况及耐药基因表达的研究[D]. 郑香春. 北京中医药大学, 2008(12)