一、骨碎补对去卵巢大鼠骨质疏松的骨计量学研究（论文文献综述）
张志宏,邢娜,彭东辉,王秋红,匡海学[1]（2021）在《中药抗骨质疏松作用及机制的研究进展》文中研究指明目的:了解中药抗骨质疏松症（OP）作用及其机制的研究进展,为开发新型抗OP药物提供理论参考。方法:以"骨质疏松""中药复方""有效成分""骨细胞""作用机制""Osteoporosis""Compound Chinese medicine""Active ingredients""Bone cell""Mechanism of action"等为关键词,在中国知网、万方数据、维普网、PubMed、ScienceDirect等数据库中组合检索于1980年3月-2020年8月期间发表的有关中药抗OP的相关文献,并在查阅《中国药典》、相关法规和参考书的基础上,对中药（单味中药、中药复方、中药有效成分）抗OP作用及其机制的研究进展进行归纳总结。结果与结论:本文涉及的抗OP中药包括29种单味中药和7种中药复方,其中起药效作用的成分包括中药提取物（醇提物、水提物）、黄酮类、多糖类、皂苷类、挥发油等。中药治疗OP效果明显,能够有效改善患者的骨代谢、增加其骨密度,同时改善临床症状。其主要是通过促进成骨细胞增殖分化、抑制破骨细胞形成、调节信号通路3个方面的作用机制发挥抗OP功效。
任聪[2]（2019）在《马鹿茸多肽“补肾健骨”作用与机制研究》文中研究指明目的:对马鹿茸多肽进行分离纯化,获得不同分子量的马鹿茸多肽（A～E）。研究马鹿茸多肽（A～E）对MC3T3-E1成骨细胞的增殖及成骨分化作用、对骨髓间充质干细胞的增殖及骨向分化的作用;马鹿茸多肽A对大鼠肾虚型骨质疏松症的作用,探究马鹿茸防治骨质疏松症的作用机制。通过HPLC-MS联用技术分析马鹿茸多肽A的组分组成,采用原子力显微镜对马鹿茸多肽A的表面结构进行分析和表征,采用网络药理学和生物信息学分析方法,探究马鹿茸多肽A防治骨质疏松症的靶基因和靶蛋白,及相关的作用机制的信号通路,为防治骨质疏松症提供理论依据和科学指导。材料与方法:1材料鹿茸药材购于辽宁西丰药材市场,经辽宁中医药大学中药鉴定教研室的李峰教授鉴定为鹿科动物马鹿Cervus elaphus Linnaeus的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角;马鹿茸多肽,由实验室自制。2方法2.1马鹿茸多肽（A～E）的分离纯化及分子量的分布测定采用多级膜分离技术分离并纯化得到5种不同分子量的马鹿茸多肽（A～E）;采用高效凝胶过滤色谱法和SDS-PAGE电泳法测定马鹿茸多肽（A～E）的分子量。2.2马鹿茸多肽（A～E）对MC3T3-E1成骨细胞的增殖及分化作用采用MTT法研究马鹿茸多肽对MC3T3-E1成骨细胞的增殖作用;以ALP为指标,采用ELISA法研究马鹿茸多肽（A～E）对MC3T3-E1成骨细胞的分化作用。2.3马鹿茸多肽（A～E）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）的增殖及骨向分化作用采用MTT法研究马鹿茸多肽（A～E）对骨髓间充质干细胞的增殖作用;以ALP、BGP、BMP-2为指标,采用ELISA法研究马鹿茸多肽（A～E）对骨髓间充质干细胞的骨向分化作用。分别采用RT-PCR法和Western-blot法检测BMSCs中BMP-2、Smad1、Smad5、Runx2基因和蛋白的表达。2.4马鹿茸多肽A对大鼠肾虚型骨质疏松症的作用采用切除雌性大鼠双侧卵巢的方法,建立肾虚型骨质疏松症模型,分别以补佳乐（Progynova）,仙灵骨葆（XLGB）作为阳性对照药,连续给予12周的马鹿茸多肽A。采用骨密度仪测定大鼠的骨密度;采用称量法测定大鼠的子宫指数;采用酶联免疫法（ELISA）检测大鼠血清中的雌二醇（E2）、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（BGP）、骨形成蛋白-2（BMP-2）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARγ2）的活性,及骨组织中的BALP、BMP-2、Smad1、Smad5、Runx2、TGF-β1,以及下丘脑和肾脏组织的TIEG1、TGF?1。分别采用RT-PCR法和Western-blot法检测骨组织BMP-2、Smad1、Smad5、Runx2基因和蛋白的相对表达。采用HE染色,观察大鼠股骨、椎骨的形态变化;采用免疫组化法观察大鼠骨组织的形态变化和阳性表达。2.5马鹿茸多肽A的组成与特征采用柱前衍生化的方法,利用氨基酸自动分析仪,测定马鹿茸多肽A水解后的氨基酸的种类和含量。采用HPLC-MS测定马鹿茸多肽A的组分分析。利用原子力显微镜,以粗糙度、表面高度分析、功率谱密度等为参数,测定马鹿茸多肽A的表面形貌。采用GO分析、KEGG分析和String蛋白互作网络等生物信息学方法,分析马鹿茸多肽A的72个多肽片段中,推测与骨质疏松症相关的靶基因和靶蛋白,以及作用机制相关的信号转导通路。结果:1分离纯化得到五种分子量的多肽,即多肽A（200～3000 Da）,多肽B（3000～5000 Da）,多肽C（5000～10000 Da）,多肽D（10000～50000 Da）,多肽E（>50000 Da）。2马鹿茸多肽（A～E）均能促进MC3T3-E1成骨细胞的增殖及成骨分化,其中分子量为200-3000 Da的多肽A,在浓度为200μg·m L-1,作用48 h后,促成骨细胞增殖及成骨分化的作用最显着。3马鹿茸多肽（A～E）对BMSCs细胞的增殖及分化作用3.1马鹿茸多肽（A～E）均能促进BMSCs的增殖及骨向分化,其中以分子量为200-3000 Da的多肽A,在浓度为200μg·m L–1时,促BMSCs的增殖及骨向分化的作用最显着。3.2马鹿茸多肽（A～E）增强Bmp-2、Smad1、Smad5、Runx2基因、蛋白的表达;多肽A上调Bmp-2、Smad1、Smad5、Runx2基因、蛋白的表达最接近诱导液组,可能跟激活Bmp-2/Smad1、Smad5/Runx2信号转导通路有关。4马鹿茸多肽A对大鼠肾虚型骨质疏松症的作用4.1血清中骨代谢相关指标检测结果马鹿茸多肽A升高E2、ALP、BGP、BMP-2的水平,并降低TRAP和PPARγ2水平。4.2子宫指数与正常组比较,模型组大鼠的子宫明显萎缩,各组的子宫指数明显小于正常组;与模型组比较,多肽A高、低剂量组、西阳对照组、中阳对照组,与模型组的子宫指数差异无统计学意义。4.3骨密度的检测结果各给药组均能增加大鼠骨密度,马鹿茸多肽A高剂量组的效果最显着。4.4骨组织中相关指标的检测结果与正常组比较,模型组大鼠骨组织中BALP、BGP、BMP-2、Smad1、Smad5、Runx2、TGFβ1、TIEG1含量显着降低;与模型组相比,马鹿茸多肽A高、低剂量组、西阳对照组、中阳对照组均能显着提高骨组织中BALP、BGP、BMP-2、Smad1、Smad5、Runx2、TGFβ1、TIEG1的水平,其中多肽A高剂量组的效果最显着。4.5下丘脑中的TGF-β1和TIEG1蛋白的表达各给药组均增强下丘脑中TGF-β1、TIEG1的表达水平,多肽A高剂量组的效果最显着。4.6肾中的TGF-β和TIEG1蛋白的表达各给药组均增强肾中TGF-β1、TIEG1的表达水平,多肽A高剂量组效果最显着。4.7骨组织中相关基因的表达各给药组大鼠骨组织中BMP-2、Smad1、Smad5、Runx2基因相对表达量显着升高;多肽A高剂量组对BMP-2、Smad1、Smad5、Runx2基因相对表达量优于其他组。4.8骨组织中相关蛋白的表达与正常组比较,模型组大鼠骨组织中BMP-2、Smad1、Smad5、Runx2蛋白灰度值量显着降低;各给药组均能增加BMP-2、Smad1、Smad5、Runx2的蛋白表达量,且多肽A高剂量组的效果最显着。4.9骨组织形态学检测的结果4.9.1 HE染色检测结果与模型组比较,马鹿茸多肽A高、低剂量组可见骨小梁增厚,结构紧密,骨髓腔变小,骨外膜可见骨原细胞。4.9.2骨组织的免疫组化的结果与正常组比,模型组中的Bmp-2、Smad1、Smad 5、Runx2的平均光密度显着下降;与模型组比,各组的Bmp-2、Smad1、Smad 5、Runx2的平均光密度显着高于模型组,马鹿茸多肽A高、低剂量组的Smad1和Runx2的平均光密度显着高于西阳对照组;多肽A高、低剂量组的Bmp-2、Smad1、Smad 5、Runx2的平均光密度接近甚至高于阳性组。5马鹿茸多肽A的组分分析5.1马鹿茸多肽A中氨基酸的种类与含量在水解后氨基酸中含有18种氨基酸,约占26.4%;组氨酸的含量最高,天冬氨酸含量最少,且8种必需氨基酸含量是2071.24mg.g-1占53.04%。游离氨基酸含有18种氨基酸,约占23.6%;苏氨酸的含量最高,脯氨酸含量最少;8种必需氨基酸553.81mg.g-1,占60.18%。结合氨基酸中必须氨基酸含量1517.43mg.g-1,达50.84%。5.2 HPLC-MS法测定马鹿茸多肽A的组分组成分析得到多肽片段共72个,分子量在700～2000 Da,等电点在4.33-11.45之间。5.3马鹿茸多肽A的表面形貌特征5.3.1表面形貌概况马鹿茸多肽A表面呈现有尖锐的椎体状,且不规律分布在表面。且当浓度从0.1μg.m L-1增加到5μg.m L-1,粗糙度Ra/Rq减小,但变化不明显。5.3.2表面高度分布浓度为0.1 ug.m L-1的马鹿茸多肽的表面高度是6.13969 nm;浓度为0.25μg.m L-1的马鹿茸多肽的表面高度是39.4588 nm;浓度为0.5μg.m L-1的马鹿茸多肽样品的表面高度是14.5105 nm;浓度为1 ug.m L-1的马鹿茸多肽样品的表面高度是16.6944 nm;浓度为5μg.m L-1的马鹿茸多肽样品的表面高度是28.6132nm。5.3.3功率谱密度（PSD）当波长为0.208祄,频率为4.80/祄,马鹿茸多肽A的PSD值为水平轴PSD为40.1 nm3,垂直轴PSD为44.7 nm3,二维的PSD分别为75055 nm4;当波长为0.0971祄,频率为10.3/祄,马鹿茸多肽的PSD值为水平轴的PSD为3.29 nm3,垂直轴的PSD为6.3 nm3,二维的PSD分别为2931 nm4。5.4马鹿茸多肽A的网络药理学研究网络药理学研究发现多肽A中的主要的靶蛋白是胶原蛋白α-1（I）链（COL1A1）、有丝分裂蛋白活化蛋白激酶激酶14（MAPK14）、纤维蛋白2（FBN2）等,推测分析可知PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路、MAPK信号通路,FOX信号通路等,可能与马鹿茸的“补肾健骨”的防治骨质疏松症的作用有关,其共同作用,防治骨质疏松症的发生。这些信号通路的发现与推测是对鹿茸多肽防治肾虚型骨质疏松症的作用机制的补充,推测鹿茸多肽“补肾健骨”的作用,可能是这几种信号通路协同作用的结果。结论:1马鹿茸多肽分离并纯化为为五种不同分子量的多肽（A～E）;采用高效凝胶过滤色谱法和SDS-PAGE电泳法测定马鹿茸多肽的分子量的结果基本一致。2马鹿茸多肽（A～E）促进MC3T3-E1成骨细胞的增殖和分化;且分子量为200-3000 Da的多肽A的促增殖及分化的效果明显优于其他分子量的多肽。3马鹿茸多肽（A～E）促进骨髓间充质干细胞BMSCs的增殖和骨向分化;且分子量为200-3000 Da的多肽A的效果明显优于其他分子量的多肽;其作用机制可能是与其上调Bmp-2、Smad1、Smad5、Runx2信号转导通路有关。4马鹿茸多肽A能防治大鼠肾虚型骨质疏松症。作用机制可能是其激活Bmp-2、Smad1、Smad5、Runx2信号转导通路。5采用HPLC-MS技术分析马鹿茸多肽A有72个多肽片段,结合网络药理学的方法和生物信息学方法,发现了骨质疏松症相关的直接和间接的靶蛋白和靶基因,及其他信号通路,靶基因靶蛋白及多条信号通路协调作用,能预防治疗骨质疏松症的发生。6采用原子力显微镜（AFM）从微观角度分析马鹿茸多肽A的表面结构,表面有凹凸不平的的椎体状,不规律地分布在分子表面,推测可能是多肽的不规则的锥形结构促使多肽A更容易进入细胞,发挥药效作用;且多肽A溶液的的浓度越低,越能清晰地观察的表面形貌。AFM对多肽A结构的深入分析,为研究马鹿茸多肽的构效关系奠定基础。
赵亮,刘静[3]（2017）在《治疗原发性骨质疏松症的单味中药研究进展》文中研究表明骨质疏松症是一种以骨量减少、骨的微细结构破坏,导致骨脆性增加,容易发生骨折为特征的全身代谢性骨病。原发性骨质疏松症主要分为绝经后骨质疏松（Ⅰ型）和老年性骨质疏松（Ⅱ型）。Ⅰ型为高转换型骨质疏松,即骨吸收与骨形成均活跃,但以骨吸收为主,常见于妇女绝经后510年;Ⅱ型为低转换型骨质疏松,即骨吸收与骨形成均不活跃,但仍以骨吸收为主,一般指70岁后老年人发生的骨质疏松症。
李岳泽[4]（2016）在《基于铁调素探讨左归丸对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理》文中进行了进一步梳理目的本研究以去卵巢大鼠为骨质疏松症模型,用补肾经典方剂—左归丸进行干预,采用骨密度检测、Micro CT、免疫组化法、ELISA等实验技术,从铁调素对铁过载调节作用的角度,部分揭示左归丸对骨质疏松症的治疗作用及其机理,并为阐明“肾主骨”的科学内涵提供进一步的实验依据。方法先将60只SPF级雌性SD大鼠按体重随机分为3组：空白对照组12只,假手术组12只,造模组36只。造模组大鼠用45mg/kg体重的戊巴比妥钠麻醉后,施以双侧卵巢切除（OVX）手术。假手术组大鼠只切除卵巢周围少许脂肪组织。术后3个月,再将造模组大鼠按体重随机分为3组：模型组（OVX组）、OVX+戊酸雌二醇组（E2组）、OVX+左归丸组（左归丸组）,每组各12只。分组后开始对各给药组大鼠灌胃给药：左归丸组天鼠灌胃给予左归丸水煎液,给药浓度为0.968 g生药/mL,给药体积为1 mL/100g体重,给药剂量为9.68 g生药/kg体重；E2组大鼠灌胃给予戊酸雌二醇混 悬液,给药浓度为0.018 mg/mL,给药体积为1mL/100g体重,给药剂量为0.18 mg/kg体重。以上给药,一天一次,连续6天,休息1天后,再连续给药6天,如此给药3个月。空白对照组、假手术组和模型组大鼠按上法灌胃给予等体积的纯净水。灌胃期间,根据每周所称取的体重调整给药量。在末次给药1h后,将大鼠麻醉,腹主动脉取血,所取全血静置1h后,以3000 r/min离心20 min,取血清,分装后放在-80℃冰箱保存待测,用于外周血血清中铁蛋白（Ferritin）、铁调素（Hepcidin）、骨钙素（BGP）、Ⅰ型胶原（COL Ⅰ）和抗酒石酸酸性磷酸酶5b （TRACP-5b）含量的检测。然后,将大鼠迅速处死,取子宫并称重,测定子宫系数；取脊椎骨,用于骨密度（BMD）检测；取右侧股骨,福尔马林固定,Micro CT扫描,用于骨组织形态指标检测,包括骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁分离度（Tb.Sp）及结构模型指数（SMI）；取右侧胫骨,4%多聚甲醛（含1%oDEPC）固定,制作脱钙骨冰冻切片,用于骨髓中膜转铁蛋白1（Fpn1）蛋白表达的检测。实验结果皆以均数±标准差（x±s）表示,均采用SPSS20.0统计软件进行统计学处理。先进行正态性检验,正态分布数据两组以上的比较,采用单因素方差分析（ANOVA）,组间两两比较,方差齐性的采用其项下的LSD检验；方差不齐的则采用其项下的Dunnett’s T3（3）检验；若数据为非正态分布时,采用非参数检验Kruskal-Wallis单因素ANOVA （k样本）（W）,组间两两比较,采用其项下的Stepwise step-down检验。结果1左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠子宫系数的影响与假手术组相比,OVX组、E2组和左归丸组大鼠子宫系数皆明显降低；与OVX组相比,E2组大鼠子宫系数明显增高,而左归丸组与OVX组无差异。2左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠腰椎BMD的影响OVX组大鼠腰椎BMD较之假手术组显着降低；与OVX组相比,E2组和左归丸组天鼠腰椎BMD显着增高,但仍显着低于假手术组。3左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠股骨骨形态学指标的影响3.1左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠股骨BV/TV的影响与假手术组相比,OVX组大鼠股骨BV/TV显着降低；E2组和左归丸组大鼠BV/TV比OVX组明显增高,但仍显着低于假手术组。3.2左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠股骨Tb.N、Tb.Th及Tb.Sp的影响与假手术组相比,OVX组、E2组和左归丸组大鼠Tb.N明显降低,Tb.Sp则明显增高；与OVX组相比,E2组和左归丸组大鼠Tb.N均明显增高,Tb.Sp则明显降低。各组大鼠Tb.Th无明显差异。3.3左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠股骨SMI的影响与假手术组相比,OVX组大鼠SMI明显增高；E2组和左归丸组大鼠SMI与OVX组相比明显降低,但仍明显高于假手术组。4左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠外周血血清中Ferritin、Hepcidin、BGP、 COL Ⅰ及TRACP-5b含量的影响4.1左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠外周血血清中Ferritin、Hepcidin含量的影响与假手术组相比,OVX组大鼠外周血中Ferritin含量明显增高,Hepcidin含量则明显下降；与OVX组相比,E2组和左归丸组大鼠Ferritin含量均明显减少,Hepcidin含量则明显增高,但与假手术组相比仍有差异。4.2左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠外周血血清中BGP、COL I含量的影响与假手术组相比,OVX组大鼠外周血中BGP及COL I含量均明显增高；E2组和左归丸组大鼠BGP及COL I含量均明显低于OVX组,但左归丸组COL I含量仍明显高于假手术组。4.3左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠外周血血清中TRACP-5b含量的影响与假手术组相比,OVX组大鼠外周血中TRACP-5b含量明显增高；E2组、左归丸组大鼠TRACP-5b含量与OVX组相比明显降低。5左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠胫骨骨髓中Fpnl蛋白表达的影响OVX组大鼠胫骨骨髓中Fpnl蛋白表达IOD显着高于假手术组：与OVX组相比,E2、左归丸组Fpnl蛋白表达IOD显着降低；但左归丸组Fpnl蛋白表达IOD仍明显高于假手术组,E2组则与假手术组无差异。结论（1）切除大鼠卵巢可使骨微细结构破坏,骨密度降低,造成骨质疏松症；而左归丸可改善骨微细结构,提高骨密度,对卵巢切除所致的骨质疏松症产生治疗作用。（2）切除大鼠卵巢可使TRACP-5b以及BGP、COL I的水平增高,呈现出高转换的骨丢失状态；而左归丸对其具有一定的抑制作用,使骨吸收和骨形成趋于平衡,从而达到治疗骨质疏松症的作用。（3）切除大鼠卵巢可使Hepcidin水平降低,骨髓细胞上的Fpn1内陷降解因而被抑制,使铁离子过多转运至细胞外,导致铁过载,进而使破骨细胞活性增强；而左归丸能提高Hepcidin水平,改善卵巢切除所致的铁过载。这是其能够治疗骨质疏松症的机理之一。以上结果提示：铁调素对铁过载的调节作用在“肾主骨”中起着一定作用。
张方珍[5]（2015）在《五味子总木脂素对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨》文中研究说明目的以去卵巢大鼠为骨质疏松症动物模型,观察五味子总木脂素对其的作用;并从对骨代谢具有重要调节作用的白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-11（IL-11）的角度,部分揭示其作用机理,为五味子总木脂素应用于治疗骨质疏松症提供实验依据。方法选用雌性SD大鼠92只,体重210±20g,SPF级,按体重随机分3组,空白对照组12只,假手术组12只,造模组68只。运用戊巴比妥钠45mg/kg对造模组大鼠进行麻醉后,摘除双侧卵巢;假手术组只摘除卵巢周围的少许脂肪组织,不切除卵巢。手术过程中有1只大鼠死亡。术后3周,再将造模组67只大鼠按体重随机分为5组:模型组12只;阳性对照组14只;五味子总木脂素小剂量组13只,中剂量组14只,大剂量组14只。分组后,开始对各给药组大鼠灌胃给药:五味子总木脂素小、中、大剂量组分别给予浓度为8.05mg/ml、16.1Omg/ml和32.20mg/ml的五味子总木脂素混悬液,给药体积为12ml/kg体重,给药剂量分别为96.6 mg/kg体重、193.2 mg/kg体重和386.4 mg/kg体重。阳性对照组灌胃给予浓度为0.015mg/ml的戊酸雌二醇（E2）溶液,给药体积为12ml/kg体重,给药剂量为0.18mg/kg体重。以上各组大鼠给药,每天1次,连续6天,休息1天后,再给药6天,如此给药13周。每周称体重一次,据此调整给药剂量。空白对照组、假手术组、模型组按上法灌胃给予等体积的1.07%吐温溶液。给药结束后,各组大鼠用45mg/kg剂量的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,处死各组大鼠之后,取左侧股骨运用 Skyscanl 174 X-Ray Microtomograph（micro-CT）进行骨组织形态指标检测,取右侧胫骨,制作脱钙冰冻切片,用于IL-6、IL-11蛋白及mRNA表达检测。实验结果皆以均数±标准差（x±s）表示,采用SPSS 20.0统计软件进行统计学处理。若数据为正态分布,则采用单因素方差分析进行处理:方差齐性的,组间两两比较采用LSD检验;方差不齐的则采用Dunnett’sT3检验。非正态分布的数据,采用Kruskal-Wallis 1-way ANOVA（k samples）进行检验:组间两两比较,采用 Stepwise step-down 法。结果1五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨组织形态指标的影响1.1五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨骨体积分数（BV/TV）的影响与假手术组比较,模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组大鼠股骨BV/TV均显着减少。与模型组比较,中剂量组、大剂量组和阳性对照组的BV/TV均显着增加;而小剂量组则无显着性变化。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的BV/TV明显高于小剂量组;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。1.2五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨骨小梁数量（Tb.N）的影响模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组大鼠股骨Tb.N显着少于假手术组。中剂量组、大剂量组和阳性对照组与模型组比较,Tb.N均显着增多;小剂量组与之比较,无显着性变化。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组与小剂量组比较,Tb.N显着增多;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。1.3五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨骨小梁厚度（Tb.Th）的影响模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组与假手术组比较,大鼠股骨Tb.Th均显着减少。与模型组比较,中剂量组、大剂量组以及阳性对照组的Tb.Th显着增加;而小剂量组无显着性变化。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的Tb.Th较小剂量组显着增加;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。1.4五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨骨小梁分离度（Tb.SP）的影响与假手术组比较,模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组大鼠股骨Tb.SP均显着增加。中剂量组、大剂量组以及阳性对照组与模型组比较,Tb.SP显着减少;小剂量组与之比较,无显着性变化。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的Tb.SP均明显少于小剂量组;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。1.5五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨结构模型指数（SMI）的影响模型组、阳性对照组以及五味子总木脂素小、中、大剂量组大鼠股骨SMI较假手术组明显增加。与模型组比较,中剂量组、大剂量组和阳性对照组的SMI明显减少;而小剂量组无显着性差异。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组与小剂量组比较,SMI均明显减少;大剂量组与中剂量组比较,无显着性差异。2五味子总木脂素对去卵巢大鼠胫骨骨髓中IL-6蛋白及其mRNA表达的影响与假手术组比较,模型组、五味子总木脂素小剂量组大鼠胫骨骨髓中IL-6蛋白及其mRNA表达IOD（积分光密度）均显着增高;而中剂量组、大剂量组和阳性对照组的IL-6蛋白表达IOD无显着差异;中剂量组的IL-6mRNA表达IOD显着增高,但大剂量组和阳性对照组的IL-6 mRNA表达IOD无显着性差异。与模型组比较,中剂量组、大剂量组和阳性对照组的IL-6蛋白及其mRNA表达IOD均明显降低;小剂量组的则均无显着性差异。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的IL-6蛋白及其mRNA表达IOD均明显低于小剂量组;大剂量组与中剂量组比较,无显着性变化。3五味子总木脂素对去卵巢大鼠胫骨骨髓中IL-11蛋白及其mRNA表达的影响与假手术组比较,模型组、五味子总木脂素小、中剂量组大鼠胫骨骨髓中IL-11蛋白及其mRNA表达IOD均明显增高;大剂量组的IL-11蛋白表达IOD明显增高,而其mRNA表达IOD无显着性差异;阳性对照组的IL-11蛋白及其mRNA表达IOD均无显着性差异。中剂量组、大剂量组以及阳性对照组的IL-11蛋白及其mRNA表达IOD均低于模型组;小剂量组与之比较均无显着性差异。三个剂量组之间比较,中剂量组、大剂量组的IL-11蛋白及其mRNA表达IOD均较小剂量组显着降低;大剂量组与中剂量组比较,均无显着性变化。结论（1）切除大鼠卵巢可使其股骨BV/TV、Tb.Th和Tb.N显着减少,使Tb.SP和SMI显着增加;而五味子总木脂素可使以上指标在一定程度上发生逆转。表明五味子总木脂素对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症具有治疗作用。（2）五味子总木脂素可使去卵巢所致的大鼠骨髓中增强的IL-6和IL-11蛋白表达减弱,表明该药可通过抑制骨髓中IL-6和IL-11的合成和分泌而达到治疗骨质疏松症的作用。
张继东[6]（2014）在《中药免煎颗粒辨证治疗骨质疏松症的临床观察》文中研究指明目的：本文旨在观察中药免煎颗粒辨证治疗原发性骨质疏松症的临床疗效和安全性。方法：随机选择在2013年9月-2014年8月本院门诊就诊的原发性骨质疏松症患者90例,进行为期6个月对照研究。治疗组服用中药免煎颗粒剂,对照组服用碳酸钙D3片,观察临床疼痛改善情况（第4,12,24周）和骨密度测定。结果：研究结果表明,患者的显效率、有效率在治疗组疗效均优于对照组,具有统计学意义（P<0.05）；而且能增加骨密度,增加幅度差异,但不具有统计学意义（P>0.05）。结论：研究结果提示,中药免煎颗粒辨证治疗原发性骨质疏松症,方便快捷,临床疗效肯定。
付小卫[7]（2014）在《基于破骨细胞和成骨细胞调控通路探讨左、右归丸对不同性别去势大鼠骨质疏松症的作用差异及其机制》文中研究表明目的从OPG/RANKL破骨细胞调控通路和Wnt/LRP-5/β-catenin成骨细胞调控通路的角度,揭示具有滋补肾阴作用的左归丸和具有温补肾阳作用的右归丸对不同性别去势大鼠骨质疏松症的作用差异及其机制,以探讨“肾主骨”是否存在性别差异以及产生差异的机理,进一步阐明“肾主骨”的科学内涵,并为采用中医治疗骨质疏松症的临床用药提供实验依据。方法选用同周龄SD大鼠160只,SPF级,雌雄各半,先随机分为6组：雌、雄性空白对照组各12只,雌、雄性假手术组各12只,雌、雄性造模组各56只。于去势术前,先用Osteocore3Digital2D骨密度仪（双能x线）扫描所有大鼠腰椎4-6（L4-6） BMD,得到扫描图像待分析。之后分别对两组造模组大鼠行去势手术,即对雌性造模组大鼠切除卵巢,对雄性造模组大鼠切除睾丸（其中雄性假手术组1只、造模组雌、雄性大鼠各3只因手术麻醉死亡）。术后,再将两组造模组大鼠按体重随机分为8组：卵巢切除组（OVX组）13只、睾丸切除（ORX组）14只、戊酸雌二醇组（E2组）14只,甲睾酮组（T组）、雌、雄性左归丸组、雌、雄性右归丸组各13只。OVX大鼠OP模型制作：采用戊巴比妥钠腹腔注射全身麻醉雌性大鼠后,摘除双侧卵巢；雌性假手术组也施行开关腹腔手术,但未摘除卵巢,只摘除少量卵巢周围脂肪组织。ORX大鼠OP模型制作：用戊巴比妥钠腹腔注射全身麻醉雄性大鼠后,分离双侧睾丸和附睾并切除双侧睾丸；雄性假手术组也用同样的方法找到并剥离双侧睾丸,但不摘除。术后10天,对各给药组大鼠灌胃给药：雌、雄性左归丸组大鼠灌服左归丸水煎液,给药浓度为0.968g生药/ml；雌、雄性右归丸组大鼠灌服右归丸水煎液,给药浓度为1.024g生药/ml；戊酸雌二醇组大鼠灌服戊酸雌二醇水溶液,浓度为0.0092mg/ml;甲睾酮组大鼠灌服甲睾酮水溶液,浓度为0.092mg/ml。以上给药体积均为1ml/100g体重,每周称重一次,根据体重调整给药体积,每天固定时间（下午2点）给药,连续6天,休息1天后,再连续给药6天,如此给药3个月。雌、雄空白对照组,雌、雄假手术组,OVX组、ORX组大鼠按上法灌服等体积的纯净水（雌性右归丸组和雄性左归丸组各有1只大鼠因灌胃操作不慎死亡）。各组大鼠分别于处死前16天和前3天,腹腔注射盐酸四环素（剂量为30mg/kg体重）,对骨组织进行荧光双标记。给药结束后,将大鼠用戊巴比妥钠腹腔注射进行全身麻醉,用骨密度仪扫描大鼠L4-6BMD,得到扫描图像待分析。然后,再将各组大鼠迅速处死,取右侧胫骨近端1/3,制作不脱钙骨切片,用于骨组织形态计量学指标的检测；取左侧胫骨近端1/3,制作脱钙骨冰冻切片,采用免疫组化法和原位杂交法分别检测OPG、RANKL、Wnt1、LRP-5、β-Catenin蛋白及其mRNA的检测。实验结果数据以均数±标准差（x±s）表示,采用SPSS20.0统计软件,若数据为正态分布时,采用单因素方差分析（ANOVA）进行数据处理,方差齐性时组间两两比较,采用LSD检验；方差不齐时采用Dunnett’s T3（3）检验；若数据为非正态分布时,采用非参数检验Kruskal-Wallis单因素ANOVA（k样本）（W）；配对数据对比采用配对样本T检验。结果1左、右归丸对不同性别去势大鼠腰椎BMD及骨丢失率的影响除T组外,其余各组大鼠给药后腰椎BMD与去势前相比均有明显差异（P<0.05或P<0.01）。相同性别大鼠给药后腰椎BMD组间比较：模型组（OVX组、ORX组）较假手术组显着降低；E2组、雌性左归丸组、雌性右归丸组大鼠腰椎BMD均较OVX组显着增高,但仍低于假手术组；与ORX组相比,T组、雄性右归丸组大鼠腰椎BMD显着增高,雄性左归丸组则无显着差异,但均低于假手术组。其中,雌性左归丸组与雌性右归丸组、雄性左归丸组与雄性右归丸组之间均存在明显差异,且后者高于前者。相同性别大鼠给药后腰椎骨丢失率组间比较,结果显示：模型组（OVX组、ORX组）大鼠腰椎骨丢失较假手术组显着增加；E2组、雌性左归丸组、雌性右归丸组大鼠腰椎骨丢失均较OVX组显着减少,但仍明显多于假手术组；与ORX组相比,T组、雄性右归丸组大鼠腰椎骨丢失显着减少,雄性左归丸组则无显着差异,但均仍多于假手术组。其中,雌性左归丸组与雌性右归丸组、雄性左归丸组与雄性右归丸组之间骨丢失率均存在明显差异,且后者低于前者。不同性别大鼠给药后腰椎骨丢失率组间比较,结果显示：雌性与雄性假手术组、OVX组与ORX组、雌性与雄性左归丸组、雌性与雄性右归丸组之间骨丢失均有显着差异。其中OVX组骨丢失明显多于ORX组（P<0.01）,雄性左归丸组则明显多于雌性左归丸组（P<0.05）、雄性右归丸组则明显多于雌性右归丸组（P<0.01）,但雌性假手术组骨量增加明显低于雄性假手术组（P<0.05）。2左、右归丸对不同性别去势大鼠骨组织形态计量学指标的影响2.1左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨TBV%及骨丢失率的影响相同性别大鼠胫骨TBV%组间比较：模型组（OVX组、ORX组）较假手术组显着降低；雄性左归丸组与ORX组相比无统计学差异（P>0.05）,其余各给药组均较同性别模型组显着升高,但仍明显低于同性别假手术组。其中,雌性右归丸组高于雌性左归丸组,雄性右归丸组高于雄性左归丸组,且之间差异有统计学意义。不同性别大鼠胫骨TBV%组间比较：雌性假手术组与雄性假手术组、OVX组与ORX组之间具有显着差异,且均为后者高于前者。相同性别大鼠胫骨骨丢失率组间比较,结果显示：模型组（OVX组、ORX组）骨量丢失明显多于假手术组；雄性左归丸组骨量丢失与ORX组相比无统计学差异（P>0.05）,其余各给药组均较同性别模型组骨量丢失显着减少,但仍明显多于同性别假手术组。其中,雌性右归丸组骨量丢失明显少于雌性左归丸组（P<0.01）,雄性右归丸组明显少于雄性左归丸组（P<0.05）。不同性别大鼠胫骨骨丢失率组间比较,结果显示：雌性与雄性假手术组、OVX组与ORX组、雌性与雄性左归丸组、雌性与雄性右归丸组之间骨量丢失均存在显着差异。其中OVX组骨量丢失明显多于ORX组（P<0.05）,雄性左归丸组则明显多于雌性左归丸组（P<0.05）、雄性右归丸组则明显多于雌性右归丸组（P<0.05）,但雌性假手术组骨量增加明显低于雄性假手术组（P<0.05）。2.2左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨TRS%、FS%及TRS/TFS比值的影响相同性别组间比较：模型组（OVX组、ORX组）大鼠胫骨TRS%、TFS%及TRS/TFS匕值均较同性别假手术组明显升高。各给药组中,E2组、T组和雌性右归丸组上述参数均较同性别模型组显着降低,且均与同性别假手术组无统计学差异；雌性左归丸组大鼠胫骨上述参数也明显低于OVX组,但仍高于雌性假手术组,且二者存在统计学差异；雄性左归丸组大鼠胫骨上述参数与ORX组相比,无统计学差异；而雄性右归丸组大鼠胫骨上述参数较ORX组明显降低,但仍明显高于雄性假手术组。两种中药治疗组中,雌性右归丸组与雌性左归丸、雄性右归丸组与雄性左归丸组大鼠胫骨上述参数相比,均有统计学差异,且前者明显低于后者。不同性别大鼠胫骨TRS%、TFS%及TRS/TFS比值组间比较,结果显示：雌、雄性假手术组、模型组（OVX组和ORX组）、左归丸组和右归丸组之间上述参数均有统计学差异,其中,TFS%比较,雌性假手术组低于雄性假手术组,OVX组高于ORX组,雌性左归丸低于雄性左归丸,雌性右归丸低于雄性右归丸；与之对应,TRS%比较,雌性假手术组高于雄性假手术组,OVX组高于ORX组,雌性左归丸低于雄性左归丸,雌性右归丸低于雄性右归丸；TRS/TFS比值比较,雌性假手术组高于雄性假手术组,OVX组高于ORX组,雌性左归丸组低于雄性左归丸组,雌性右归丸组低于雄性右归丸组。2.3左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨OSW、MAR和mAR的影响相同性别组间比较：模型组（OVX组、ORX组）大鼠胫骨OSW、MAR和mAR与同性别假手术组相比,显着增高。各给药组中,与同性别模型组（OVX组、ORX组）相比,E2组、T组和雌性右归丸组上述参数均显着下降,且与同性别假手术组无统计学差异；与OVX组相比,雌性左归丸组大鼠胫骨上述参数明显降低,但仍明显高于雌性假手术组；与ORX组相比,雄性左归丸组大鼠胫骨上述参数与之无统计学差异,而雄性右归丸组较之明显下降,但仍明显高于雄性假手术组；与同性别左归丸组比较,雌性、雄性右归丸组MAR和mAR均明显降低,雄性右归丸组OSW较雄性左归丸组明显降低,雌性右归丸组OSW较雌性左归丸组有降低趋势（P=0.054）。不同性别大鼠组间比较,结果显示：模型组（OVX组和ORX组）、左归丸组和右归丸组两种性别之间上述参数均存在差异（P<0.05或P<0.01）。其中,OVX组高于ORX组,雌性左归丸组低于雄性左归丸组,雌性右归丸组低于雄性右归丸组。假手术组之间比较,OSW雌性较雄性无统计学差异（P>0.05）,但有降低趋势；MAR和mAR则雌性显着低于雄性（P<0.05或P<0.01）。3左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓中OPG、RANKL蛋白和mRNA表达以及RANKL/OPG和RANKLmRNA/OPGmRNA比值的影响3.1左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓OPG蛋白和mRNA表达的影响相同性别组间进行比较,结果显示：与同性别假手术组相比,模型组（OVX组、ORX组）大鼠胫骨骨髓OPG蛋白和mRNA表达阳性密度均显着降低；与同性别模型组（OVX组、ORX组）相比,E2组、T组和雌性右归丸组阳性密度均显着增高,且与同性别假手术组无统计学差异；与OVX组相比,雌性左归丸组阳性密度明显升高,但仍明显低于雌性假手术组；与ORX组相比,雄性左、右归丸组OPG蛋白和mRNA表达阳性密度与其均无统计学差异（P>0.05）。不同性别组间大鼠胫骨骨髓OPG蛋白和mRNA表达阳性密度进行比较,结果显示：雌性假手术组低于雄性假手术组,OVX组低于ORX组,雌性左归丸组高于雄性左归丸组,雌性右归丸组高于雄性右归丸组,且两者之间有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。3.2左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓RANKL蛋白和mRNA表达的影响相同性别组间进行比较,结果显示：与同性别假手术组相比,模型组（OVX组、ORX组）大鼠胫骨骨髓RANKL蛋白和mRNA表达阳性密度均显着升高；与同性别模型组（OVX组、ORX组）相比,E2组、T组和雌性右归丸组阳性密度均显着减低,且与同性别假手术组无统计学差异；与OVX组相比,雌性左归丸组阳性密度明显减低,但仍明显高于雌性假手术组；与ORX组相比,雄性左归丸组阳性密度与其无统计学差异,而雄性右归丸组较之明显减低,但仍明显高于雄性假手术组。不同性别组间大鼠胫骨骨髓RANKL蛋白和mRNA表达阳性密度进行比较,结果显示：雌性假手术组高于雄性假手术组,OVX组高于ORX组,雌性左归丸组低于雄性左归丸组,雌性右归丸组低于雄性右归丸组,且两者之间有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。3.3左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓RANKL/OPG和RANKLmRNA/OPGmRNA比值的影响相同性别组间进行比较,结果显示：与同性别假手术组相比,模型组（OVX组、ORX组）大鼠胫骨骨髓RANKL/OPG和RANKLmRNA/OPGmRNA比值均显着升高；与同性别模型组（OVX组、ORX组）相比,E2组、T组和雌性右归丸组阳性密度均显着减低,且与同性别假手术组无统计学差异；与OVX组相比,雌性左归丸组阳性密度明显减低,但仍明显高于雌性假手术组；与ORX组相比,雄性左归丸组阳性密度与其无统计学差异,而雄性右归丸组较之明显减低,但仍明显高于雄性假手术组。不同性别组间大鼠胫骨骨髓RANKL/OPG和RANKLmRNA/OPGmRNA比值进行比较,结果显示：雌性假手术组高于雄性假手术组,OVX组高于ORX组,雌性左归丸组低于雄性左归丸组,雌性右归丸组低于雄性右归丸组,且两者之间有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。4左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓中Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白和mRNA表达的影响4.1左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓Wnt1蛋白和mRNA表达的影响相同性别组间进行比较,结果显示：与同性别假手术组相比,模型组（OVX组、ORX组）大鼠胫骨骨髓Wntl蛋白和mRNA表达阳性密度均显着增高；与同性别模型组（OVX组、ORX组）相比,E2组、T组和雌性右归丸组阳性密度均显着降低,且与同性别假手术组无统计学差异；与OVX组相比,雌性左归丸组阳性密度明显减低,但仍明显高于雌性假手术组；与ORX组相比,雄性左归丸组阳性密度与其无统计学差异,而雄性右归丸组较之明显减低,但仍明显高于雄性假手术组。不同性别组间大鼠胫骨骨髓Wnt1蛋白和mRNA表达阳性密度进行比较,结果显示：雌性假手术组低于雄性假手术组,OVX组高于ORX组,雌性左归丸组低于雄性左归丸组,雌性右归丸组低于雄性右归丸组,且两者之间有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。4.2左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓LRP-5蛋白和mRNA表达的影响相同性别组间进行比较,结果显示：与同性别假手术组相比,模型组（OVX组、ORX组）大鼠胫骨骨髓LRP-5蛋白和mRNA表达阳性密度均显着升高；与同性别模型组（OVX组、ORX组）相比,E2组、T组和雌性右归丸组阳性密度均显着降低,且与同性别假手术组无统计学差异；与OVX组相比,雌性左归丸组阳性密度明显降低,但仍明显高于雌性假手术组；与ORX组相比,雄性左归丸组阳性密度与其无统计学差异,而雄性右归丸组较之明显降低,但仍明显高于雄性假手术组。不同性别组间大鼠胫骨骨髓LRP-5蛋白和mRNA表达阳性密度进行比较,结果显示：雌性假手术组低于雄性假手术组,OVX组高于ORX组,雌性左归丸组低于雄性左归丸组,雌性右归丸组低于雄性右归丸组,且两者之间有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。4.3左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓B-catenin蛋白和mRNA表达的影响相同性别组间进行比较,结果显示：与同性别假手术组相比,模型组（OVX组、ORX组）大鼠胫骨骨髓B-catenin蛋白和mRNA表达阳性密度均显着增高；与同性别模型组（OVX组、ORX组）相比,E2组、T组和雌性右归丸组阳性密度均显着减低,且与同性别假手术组无统计学差异；与OVX组相比,雌性左归丸组阳性密度明显减少,但仍明显高于雌性假手术组；与ORX组相比,雄性左归丸组阳性密度与其无统计学差异,而雄性右归丸组较之明显减少,但仍明显高于雄性假手术组。不同性别组间大鼠胫骨骨髓B-catenin蛋白和mRNA表达阳性密度进行比较,结果显示：雌性假手术组低于雄性假手术组,OVX组高于ORX组,雌性左归丸组低于雄性左归丸组,雌性右归丸组低于雄性右归丸组,且两者之间有统计学差异（P<0.05或P<0.01）。结论1.去势均可导致同龄不同性别大鼠发生高转换型骨质疏松症,即骨吸收和骨形成均增加,但由于骨吸收大于骨形成,而使骨量丢失。所不同的是,OVX大鼠的骨转换率显着高于ORX大鼠,骨丢失率也明显高于后者。OVX大鼠和ORX大鼠骨髓中RANKL表达均显着上调,而OPG表达均显着下调,两者的比值（RANKL/OPG）也均明显增高,从而使破骨细胞的活性增强,骨吸收增加；同时,Wnt1、LRP-5和P-catenin表达均显着上调,从而使成骨细胞的活性增强,骨形成增加。但由于破骨细胞活性增强的幅度大于成骨细胞活性增强的幅度,而导致骨质疏松症的发生；去势所致的雌性大鼠的上述改变明显强于去势的雄性大鼠。这是去势均可导致雌、雄大鼠发生高转换型骨质疏松症,但雌性大鼠的骨转换以及骨丢失率明显高于雄性的机理之一。2.左归丸、右归丸对不同性别去势大鼠骨质疏松症的作用存在明显差异：左归丸对OVX大鼠骨质疏松症具有明显的疗效,而对ORX大鼠骨质疏松症没有疗效；右归丸对OVX大鼠和ORX大鼠骨质疏松症虽均有明显的疗效,但对OVX大鼠的疗效要明显优于ORX大鼠。3.左归丸、右归丸对不同性别去势大鼠骨质疏松症的作用产生差异的机制：（1）左归丸产生差异的机制是,左归丸能使OVX骨质疏松症大鼠骨髓中RANKL表达显着下调,而使OPG表达显着上调；同时,使Wnt1、LRP-5和β-catenin表达显着下调；通过此作用,导致骨吸收与骨形成均降低,抑制骨的高转换,使骨吸收与骨形成达到相对的平衡状态,从而防止骨量的丢失。而左归丸对ORX骨质疏松症大鼠骨髓中的以上关键因子无明显影响。（2）右归丸产生差异的机制是,右归丸对OVX骨质疏松症大鼠骨髓中OPG、RANKL以及Wnt1、LRP-5和β-catenin的作用与左归丸的相同,只是右归丸的作用强度要明显高于左归丸。右归丸能使ORX骨质疏松症大鼠骨髓中RANKL以及Wnt1、LRP-5和β-catenin表达均显着下调；但对OPG表达无明显影响,并且对RANKL、Wnt1、LRP-5和β-catenin的作用要明显弱于对OVX骨质疏松症大鼠的作用,从而造成右归丸对OVX骨质疏松症大鼠骨的高转换的抑制作用要明显强于对ORX骨质疏松症大鼠,进而导致其对前者骨质疏松症的疗效要明显优于后者。4.以上结果表明,“肾主骨”存在性别差异,OPG/RANKL破骨细胞调控通路和Wnt/LRP-5/β-catenin成骨细胞调控通路发生不同改变,是造成这种差异的机制之一。5.对于OVX大鼠骨质疏松症,右归丸的疗效明显优于左归丸；对于ORX大鼠骨质疏松症,右归丸有效而左归丸无效。提示：肾阳虚,命门火衰可能是去势所致骨质疏松症发生的主要原因。
张允[8]（2014）在《六味地黄丸加味治疗绝经后骨质疏松症肝肾阴虚证型疗效研究》文中研究指明目的：验证六味地黄丸加味治疗绝经后骨质疏松症肝肾阴虚证型的有效性和安全性，为中西医结合治疗骨质疏松症提供思路。方法：选择2010年2月—2013年6月在四川省人民医院中医科就诊的获得完整随访资料的绝经后骨质疏松症肝肾阴虚证型患者120例，采用随机数字表的方法分为A、B、C三组。每组均是40例，A组年龄62.41±6.48岁，停经年龄10.50±4.11年，体重57.55±9.14kg，中医症候积分19.02±2.37；B组年龄64.57±4.62岁，停经年龄11.67±4.08年，体重58.63±8.76kg，中医症候积分18.89±2.18；C组年龄63.60±5.89岁，停经年龄9.44±4.36年，体重59.42±10.1kg，中医症候积分18.79±2.30。A组：由我院药剂科将六味地黄丸加味（熟地黄160g，山茱萸80g，牡丹皮60g，山药80g，茯苓60g，泽泻60g，鹿角胶60g，龟板胶60g，枸杞60g，白芍30g，补骨脂60g，骨碎补60g）药物粉碎成细粉，每100g药粉加入炼蜜100g，制成蜜丸（含生药6g/粒），每日2粒，连续服用6个月；B组：给予唑来膦酸注射液（Aclasta，密固达）5mg静滴1次，；C组：同时给予六味地黄丸加味蜜丸和密固达治疗，使用方法与A、B两组相同。三组均同时服用钙尔奇D（每片含元素钙600mg, VitD3125U）每日1次,每次1片,连续服用6个月,3组病例均观察、随访至第12月。选择治疗前（0月）和治疗后第3、6、9、12月等5个时间观察点,采用4级计分法（0无,1轻,2中,3重）对各中医症状（包括：①腰膝酸软；②四肢、腰背痛,或足跟痛；③疲乏少力,头晕目眩；④耳鸣健忘；⑤咽干舌燥；⑥胁痛；⑦失眠多梦；⑧五心烦热,自汗盗汗等8个项目）进行评价,采用视觉模拟评分法（Visual Analogue Scale, VAS）对患者疼痛程度进行评估,采用双能X线骨密度仪对患者腰椎和股骨骨密度（bone mineral density,BMD）进行检测,采用生活质量评价量表（short form36questionnaire, SF-36）对患者生活质量进行评价,采血查雌二醇对患者雌激素变化情况进行检测。结果：①雌二醇检测结果：3、6、9、12月A、C组雌二醇检测结果与治疗前比较,差异有统计学意义,说明用药后雌二醇浓度有明显增加,B组雌二醇检测结果与治疗前比较,差异无统计学意义；A组6、9月雌二醇浓度比较,差异有统计学意义（t=2.33,P=0.04）；C组6、9月雌二醇浓度比较,差异有统计学意义（t=2.9748,P=0.03）,说明在停药后雌二醇浓度仍有一定改善；A组9、12月比较,差异无统计学意义（t=1.80,P=0.10）；C组9、12月比较,差异无统计学意义（t=1.39,P=0.26）,说明停药超过3月后雌二醇依然可以继续维持一定浓度不降低。②VAS评分：A组VAS评分较治疗前有改善,差异有统计学意义,说明六味地黄丸加味具有一定的减轻疼痛的作用；A组9、12月VAS评分与6月比较，差异无统计学意义（t=22.93，P=1.29，t=19.32，P=0.86），说明停药后，服用六味地黄丸加味者的疼痛不再进一步缓解；B、C组治疗后各时间点变化均较A组明显，表明单纯使用六味地黄丸加味在缓解疼痛方面不如双磷酸盐理想；C组治疗后各时间点的VAS评分与A组比较（t=9.25,P=0.00，t=7.03,P=0.00，t=4.12,P=0.00，t=3.54,P=0.00），C组治疗后各时间点的VAS评分与B组比较（t=10.66,P=0.00，t=8.21,P=0.00，t=6.29,P=0.00，t=5.18,P=0.00），差异有统计学意义，说明六味地黄丸加味联合双磷酸盐较单用六味地黄丸加味或双磷酸盐更能减轻疼痛。③SF-36评分：A组治疗后各时间点SF-36评分与治疗前比较（t=8.40,P=0.00，t=5.21,P=0.00，t=3.08,P=0.00，t=2.23,P=0.00），差异有统计学意义，说明六味地黄丸加味对改善生活质量有一定效果；A组治疗后各时间点SF-36评分与B组比较，差异有统计学意义（t=18.40,P=0.00，t=13.73,P=0.00，t=7.84,P=0.00，t=2.17,P=0.00），说明六味地黄丸加味较双磷酸盐能更好的改善生活质量；C组治疗后各时间点SF-36评分与A、B组比较，差异有统计学意义，说明六味地黄丸加味联合双磷酸盐对生活质量有明显改善；A组9月SF-36评分与6月比较，差异有统计学意义（t=16.48，P=0.00），说明六味地黄丸加味组在停药后，生活质量仍有一定改善；A组12月SF-36评分与9月比较，差异无统计学意义（t=20.18，P=0.08），表明随着时间推移，六味地黄丸加味在停药后一定时间后，对生活质量的改善无明显差异。④骨密度：A组治疗后各时间点骨密度与治疗前比较，差异有统计学意义（腰1-4骨密度：t=7.56，p=0.00，t=6.04，p=0.00，t=4.68，p=0.00，t=2.69，p=0.00；Wards区骨密度：t=8.07，p=0.00，t=6.77，p=0.00，t=5.42，p=0.00，t=3.39，p=0.00；大粗隆骨密度：t=7.43，p=0.00，t=6.58，p=0.00，t=4.90，p=0.00，t=2.97，p=0.00；股骨颈骨密度：t=7.67，p=0.00，t=6.32，p=0.00，t=4.66，p=0.00，t=2.98，p=0.00），说明六味地黄丸加味对提高骨密度有一定作用；C组治疗后各时间点骨密度与A组比较（腰1-4骨密度：t=22.37,P=0.00，t=16.01,P=0.00，t=8.39,P=0.00，t=5.28,P=0.00，Wards区骨密度：t=23.92，P=0.00，t=17.42，P=0.00，t=9.10，P=0.00，t=5.72，P=0.00，大粗隆骨密度：t=20.86，P=0.00,t=15.29，P=0.00,t=10.64，P=0.00,t=4.41，P=0.00,股骨颈骨密度：t=24.55,P=0.00，t=18.20,P=0.00，t=11.73,P=0.00，t=3.17,P=0.00），C组治疗后各时间点骨密度与B组比较，差异有统计学意义（腰1-4骨密度：t=27.19,P=0.00，t=20.09,P=0.00，t=10.87,P=0.00，t=7.24,P=0.00，Wards区骨密度：t=26.22，P=0.00，t=21.46，P=0.00，t=13.43，P=0.00，t=6.88，P=0.00，大粗隆骨密度：t=29.92，P=0.00,t=22.14，P=0.00,t=14.82，P=0.00,t=6.51，P=0.00,股骨颈骨密度：t=28.85,P=0.00，t=20.03,P=0.00，t=13.16,P=0.00，t=7.44,P=0.00），说明六味地黄丸加味联合双磷酸盐对提高骨密度有增效作用；A组9月的骨密度与6月比较，差异有统计学意义（腰1-4骨密度：t=6.08，P=0.00；Wards区骨密度：t=6.88，P=0.00；大粗隆骨密度：t=5.90，P=0.00；股骨颈骨密度：t=6.45，P=0.00），说明停止给予六味地黄丸加味后仍对骨密度有一定改善作用；三组的12月骨密度与9月比较，差异无统计学意义（腰1-4骨密度：F=14.59，P=0.31，Wards区骨密度：F=14.26，P=0.29，大粗隆骨密度：F=13.69，P=0.34，股骨颈骨密度：F=13.76，P=0.29），说明随着时间推移，各组对骨密度的影响减弱。⑤中医症候积分：三组治疗后各时间点中医症候积分与治疗前比较，差异有统计学意义，说明三种方法对患者的中医症候积分均有影响；A组治疗后各时间点中医症候积分与B组比较（t=13.29，P=0.00，t=7.92，P=0.00，t=4.65，P=0.00，t=3.94，P=0.00），C组治疗后各时间点中医症候积分与B组比较（t=12.90，P=0.00，t=7.11，P=0.00，t=4.33，P=0.00，t=3.89，P=0.00），差异有统计学意义，说明六味地黄丸加味在改善中医症候积分方面有优势。3组患者治疗结束后及第12月随访时复查肝肾功能均未见明显异常，也无其他任何不良事件发生。结论：1.六味地黄丸加味能减轻绝经后骨质疏松症患者骨痛，提高骨密度，改善其生活质量；2.六味地黄丸加味与双磷酸盐合用可增强疗效，较单用双磷酸盐能更好的缓解疼痛、提高生活质量、提高骨密度、提高雌二醇水平，也未见不良事件发生。
高璐[9]（2014）在《补肾复方对绝经后骨质疏松症大鼠BMP2/RUNX2/MEK1相关信号网络的调控作用》文中进行了进一步梳理目的:通过观察去卵巢所致绝经后骨质疏松症大鼠下丘脑、肾、股骨中BMP2/RUNX2/MEK1相关信号转导通路改变，探索绝经后骨质疏松症的发病机制研究补肾复方对绝经后骨质疏松症大鼠下丘脑、肾、股骨BMP2/RUNX2/MEK1相关信号转导通路的调节作用，探讨补肾复方对绝经后骨质疏松症的防治作用机制，为后续研究补肾复方对绝经后骨质疏松症的影响及临床中医药防治绝经后骨质疏松症提供科学理论依据材料与方法：实验选用SPF级SD雌性大鼠10周龄，按体重分层随机分组。除正常组和假手术组，其余组大鼠予摘除双侧卵巢造模假手术组只行腰背部切口切开，不摘除卵巢组织术后7天给予低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠补肾复方（鹿茸、淫羊藿提取物、牡蛎粉）灌胃，盖天力组作为阳性对照组，连续12周实验组分为正常组、假手术组、模型空白组（简称模空组）、补肾复方低剂量组（简称低剂量组）、补肾复方中剂量组（简称中剂量组）、补肾复方高剂量组（简称高剂量组）、盖天力组。用电子天平测定各组大鼠体重及大鼠子宫湿重，计算子宫指数采用双能X线骨密度仪测量大鼠左侧股骨骨密度值采用HE染色法，光镜下观察大鼠股骨的病理改变利用实时定量PCR的方法检测各组大鼠下丘脑、肾、股骨BMP2、SMAD1、RUNX2、OSX、MEK1、ERK2mRNA表达；采用Western blot方法检测各组大鼠下丘脑、肾、股骨BMP2、SMAD1、RUNX2、OSX、MEK1、ERK2蛋白表达结果：实验一:1.各组大鼠左后肢离体股骨骨密度的比较，与正常组相比，模空组大鼠的股骨骨密度明显低于正常组（P＜0.01），骨质疏松症模型成功复制用药12周后，与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组、盖天力组均可显着上调模型大鼠股骨骨密度水平（P＜0.05）实验组间比较，低、高剂量组高于盖天力组（P＜0.05），但低、高剂量组间差异无统计学意义（P＞0.05）2.各组大鼠子宫指数的比较，与正常组相比，模空组大鼠的子宫指数明显低于正常组（P＜0.01），骨质疏松症模型成功复制用药12周后，与模空组大鼠的子宫指数比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组、盖天力组均可上调模型大鼠的子宫指数水平，但无统计学意义（P＞0.05）3.观察光镜下HE染色的各组大鼠右侧股骨病理切片可见正常对照组骨髓腔较小，骨小梁粗壮，形态结构完整，骨小梁表面可见成骨细胞模空组骨髓腔增大，骨小梁变窄、断裂实验二:1.与正常组比较，模空组大鼠血清BGP水平明显降低（P＜0.01），说明造模成功；补肾复方低、中、高剂量组与盖天力组用药12周后，与模空组比较可显着上调大鼠血清BGP水平（P＜0.01），但组间差异无统计学意义（P＞0.05）。2.与正常组比较，模空组大鼠血清TRACP水平显着升高（P＜0.01），补肾复方低、中、高剂量组与盖天力组用药12周后，与模空组比较可显着降低大鼠TRACP水平（P＜0.01）；实验组间比较，高剂量组低于低剂量组、中剂量组、盖天力组（P＜0.05）实验三:1.各组大鼠下丘脑、肾、股骨BMP2mRNA和蛋白表达水平结果显示:在下丘脑的表达结果，与正常组比较，模空组大鼠下丘脑BMP2mRNA表达降低，但无统计学差异（P＞0.05）；用药12周后，与模空组比较，各实验组均可下调其表达情况，但无统计学差异（P＞0.05）。与正常组比较，模空组BMP2蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）；与模空组比较，低、中、高剂量组在下丘脑BMP2蛋白表达水平明显降低（P＜0.01）在肾组织表达结果显示：与正常组比较，模空组大鼠BMP2mRNA表达降低，但无统计学差异（P＞0.05）；用药12周后，与模空组比较，高剂量组和盖天力组可上调其表达（P＜0.05）与正常组比较，模空组BMP2蛋白表达水平降低，但无统计学意义（P＞0.05）；与模空组比较，低剂量组、高剂量组BMP2蛋白表达水平升高，但无统计学意义（P＞0.05）在股骨表达结果显示：与正常组比较，模空组大鼠BMP2mRNA表达升高（P＜0.05）；用药12周后，与模空组比较，各实验组均可下调其表达（P＜0.05）。与正常组比较，模空组大鼠BMP2蛋白表达水平明显降低（P＜0.01）；与模空组比较，用药12周后，低、中剂量组BMP2蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）；与中剂量组比较，低剂量组BMP2蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）2.各组大鼠下丘脑、肾、股骨SMAD1mRNA和蛋白表达检测结果显示:在下丘脑表达结果显示，与正常组比较，模空组大鼠SMAD1mRNA表达降低（P＜0.05）；用药12周后，与模空组比较，各实验组均可下调其表达，但无统计学差异（P＞0.05）。与正常组比较，模空组SMAD1蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组、盖天力组在下丘脑中SMAD1蛋白表达水平明显降低（P＜0.01）在肾组织表达结果显示：与正常组比较，模空组大鼠SMAD1mRNA表达升高（P＜0.05）；用药12周后，与模空组比较，低剂量组可下调其表达（P＜0.05）与正常组比较，模空组SMAD1蛋白表达水平降低（P＜0.01）；与模空组比较，高剂量组、盖天力组BMP2蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）在股骨表达结果显示：与正常组比较，模空组大鼠SMAD1mRNA表达明显降低，但无统计学差异（P＞0.05）；用药12周后，与模空组比较，高剂量组可明显上调其表达（P＜0.01）。与正常组比较，模空组大鼠SMAD1蛋白表达水平明显降低（P＜0.01）；与模空组比较，用药12周后，低剂量组、中剂量组、高剂量组、盖天力组SMAD1蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）；实验组间比较，低剂量组SMAD1蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）实验四:1.各组大鼠下丘脑、肾、股骨RUNX2mRNA和蛋白表达水平结果显示:在下丘脑表达结果，与正常组比较，模空组RUNX2mRNA表达明显降低（P＜0.05）；与模空组相比，低剂量组下丘脑RUNX2mRNA表达有所升高，但无统计学意义（P＞0.05）与正常组比较，模空组RUNX2蛋白表达明显增加（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组、盖天力组RUNX2蛋白表达明显降低（P＜0.01）在肾组织表达结果显示：与正常组比较，模空组RUNX2mRNA表达明显降低，但无统计学意义（P＞0.05）；与模空组相比，高剂量组RUNX2mRNA表达明显升高（P＜0.05）与正常组比较，模空组RUNX2蛋白表达明显降低（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组、盖天力组RUNX2蛋白表达明显降低（P＜0.05）在股骨表达结果显示：与正常组比较，模空组RUNX2mRNA表达明显降低（P＜0.01）；与模空组比较，高剂量组RUNX2mRNA表达明显升高（P＜0.01）与正常组比较，模空组RUNX2蛋白表达明显降低，但无统计学意义（P＞0.05）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组蛋白表达明显升高，但无统计学意义（P＞0.05）2.各组大鼠下丘脑、肾、股骨OSX mRNA和蛋白表达水平结果显示:在下丘脑表达结果，与正常组比较，模空组OSX mRNA表达明显降低（P＜0.05）；与模空组相比，低剂量组下丘脑OSX mRNA表达有所升高，但无统计学意义（P＞0.05）与正常组比较，模空组OSX蛋白表达明显降低（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组、盖天力组OSX蛋白表达明显升高（P＜0.01）在肾组织表达结果显示：与正常组比较，模空组OSX mRNA表达明显升高（P＜0.05）；与模空组相比，低、中、高剂量组OSX mRNA表达明显降低（P＜0.05）与正常组比较，模空组OSX蛋白表达明显升高（P＜0.01）；与模空组比较，中剂量组、高剂量组、盖天力组OSX蛋白表达明显升高（P＜0.01）在股骨表达结果显示：与正常组比较，模空组OSX mRNA表达明显升高（P＜0.05）；与模空组比较，低、中、高剂量组OSX mRNA表达明显降低（P＜0.05）与正常组比较，模空组OSX蛋白表达明显升高（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组、盖天力组OSX蛋白表达明显升高（P＜0.01）实验五:1.各组大鼠下丘脑、肾、股骨MEK1mRNA和蛋白表达水平结果显示:在下丘脑表达，与正常组比较，模空组MEK1mRNA表达明显降低（P＜0.05）；与模空组相比，低剂量组、高剂量组MEK1mRNA表达升高，但无统计学意义（P＞0.05）与正常组比较，模空组MEK1蛋白表达明显升高（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组、盖天力组MEK1蛋白表达明显降低（P＜0.01）在肾组织表达结果显示：与正常组比较，模空组MEK1mRNA表达升高，但无统计学意义（P＞0.05）；与模空组相比，高剂量组、盖天力组MEK1mRNA表达升高（P＜0.05）与正常组比较，模空组MEK1蛋白表达明显降低（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、高剂量组MEK1蛋白表达明显降低（P＜0.05）。在股骨表达结果显示：与正常组比较，模空组MEK1mRNA表达明显升高，但无统计学意义（P＞0.05）；与模空组相比，高剂量组MEK1mRNA表达明显降低（P＜0.05）与正常组比较，模空组MEK1蛋白表达明显降低（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组MEK1蛋白表达明显升高（P＜0.01）2.各组大鼠下丘脑、肾、股骨ERK2mRNA和蛋白表达水平结果显示:在下丘脑表达，与正常组比较，模空组ERK2mRNA表达升高，但无统计学意义（P＞0.05）；与模空组相比，高剂量组ERK2mRNA表达明显升高（P＜0.01）与正常组比较，模空组ERK2蛋白表达明显升高（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组ERK2蛋白表达明显降低（P＜0.01）；与低剂量组、中剂量组比较，高剂量组ERK2蛋白表达明显降低（P＜0.05）在肾组织表达结果显示：与正常组比较，模空组ERK2mRNA表达升高，但无统计学意义（P＞0.05）；与模空组相比，高剂量组ERK2mRNA表达升高（P＜0.01）与正常组比较，模空组ERK2蛋白表达明显降低（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、高剂量组ERK2蛋白表达明显降低（P＜0.01）。在股骨表达结果显示：与正常组比较，模空组ERK2mRNA表达明显降低（P＜0.01）；与模空组相比，低、中剂量组ERK2mRNA表达升高，但无统计学意义（P＞0.05）与正常组比较，模空组ERK2蛋白表达明显升高（P＜0.01）；与模空组比较，低剂量组、中剂量组、高剂量组ERK2蛋白表达明显升高（P＜0.01）结论1.正常大鼠下丘脑、肾、股骨表达BMP2、SMAD1、RUNX2、OSX、MEK1、ERK2，表明正常大鼠下丘脑、肾、股骨存在BMP2/RUNX2/MEK1信号转导网络通路2.绝经后骨质疏松症大鼠股骨RUNX2、MEK1、ERK2mRNA表达水平降低，BMP2、OSXmRNA表达水平升高，BMP2、SMAD1、MEK1蛋白表达降低，OSX、ERK2蛋白表达水平升高；肾组织BMP2、RUNX2、MEK1mRNA表达降低，SMAD1、OSXmRNA表达水平升高，SMAD1、RUNX2、MEK1、ERK2蛋白表达降低，OSX蛋白表达升高；下丘脑SMAD1、RUNX2、OSX、MEK1mRNA表达水平降低，OSX蛋白表达降低，BMP2、SMAD1、RUNX2、MEK1、ERK2蛋白表达升高，是绝经后骨质疏松症发病机制之一3.补肾复方能明显提高绝经后骨质疏松症大鼠的骨密度。4.补肾复方能明显提高绝经后骨质疏松症大鼠血清BGP含量，降低绝经后骨质疏松症大鼠血清TRACP含量，而起到防治绝经后骨质疏松症的作用5.补肾复方能使绝经后骨质疏松症大鼠股骨BMP2、OSX、MEK1mRNA表达水平明显降低，SMAD1、RUNX2mRNA表达水平升高，BMP2、SMAD1、OSX、MEK1、ERK2蛋白表达升高；肾组织SMAD1、OSXmRNA表达水平降低，BMP2、RUNX2、MEK1、ERK2mRNA表达水平升高，RUNX2、MEK1、ERK2蛋白表达水平降低，SMAD1、OSX蛋白表达升高；下丘脑ERK2mRNA表达水平升高，BMP2、SMAD1、RUNX2、MEK1、ERK2蛋白表达降低，OSX蛋白表达升高；提示补肾复方可能通过改善和调控下丘脑、肾、股骨BMP2、SMAD1、RUNX2、OSX、MEK1、ERK2的mRNA、蛋白表达，起到防治绝经后骨质疏松症的作用
刘振海,刘红,王少君,李艳[10]（2013）在《防治骨质疏松症常用单味中药实验研究概况》文中研究指明中医药对骨质疏松症的防治具有很高的临床价值和突出优势。研究证实,中药防治本病有其特殊的疗效且副作用极少。本文对淫羊藿、熟地黄、杜仲、黄芪、骨碎补、补骨脂、续断7味中药在防治骨质疏松症方面的实验研究作一简要总结,为指导临床用药和进一步用先进的科学研究方法和手段来揭示其治疗骨质疏松症的机理,提高中医药防治骨质疏松症的水平提供参考。
二、骨碎补对去卵巢大鼠骨质疏松的骨计量学研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、骨碎补对去卵巢大鼠骨质疏松的骨计量学研究（论文提纲范文）
（1）中药抗骨质疏松作用及机制的研究进展（论文提纲范文）
| 1 抗OP中药概述 |
| 2 中药抗OP机制 |
| 2.1 对成骨细胞的影响 |
| 2.2 对破骨细胞的影响 |
| 2.3 调节信号通路 |
| 2.3.1 Wnt/β-catenin信号通路 |
| 2.3.2 OPG/RANKL/RANK信号通路 |
| 2.3.3 NF-κB信号通路 |
| 2.3.4 其他信号通路 |
| 3 结语 |
（2）马鹿茸多肽“补肾健骨”作用与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 肽的分离与纯化 |
| 第一节 肽的分离与纯化 |
| 第二节 高效凝胶过滤色谱法测定马鹿茸多肽的分子量 |
| 第三节 SDS-PAGE法测定马鹿茸多肽分子量的分布 |
| 第二章 马鹿茸多肽对成骨细胞的增殖和分化的作用 |
| 第三章 马鹿茸多肽对骨髓间充质干细胞的增殖和骨向分化的作用 |
| 第一节 马鹿茸多肽对骨髓间充质干细胞的增殖和分化的作用 |
| 第二节 马鹿茸多肽促骨髓间充质干细胞骨向分化的机制研究 |
| 第四章 马鹿茸多肽对大鼠肾虚型骨质疏松症的作用 |
| 第五章 马鹿茸多肽A的组分研究 |
| 第一节 马鹿茸多肽A中的氨基酸的组分分析 |
| 第二节 HPL-MS测定马鹿茸多肽A的组分分析 |
| 第三节 马鹿茸多肽A的表面结构研究 |
| 第四节 马鹿茸多肽A的网络药理学研究 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述一 中药防治骨质疏松症的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 多肽类物质的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（3）治疗原发性骨质疏松症的单味中药研究进展（论文提纲范文）
| 1 杜仲 |
| 2 续断 |
| 3 淫羊藿 |
| 4 补骨脂 |
| 5 骨碎补 |
| 6 牛膝 |
| 7 蛇床子 |
| 8 黄芪 |
| 9 丹参 |
| 1 0 熟地黄 |
| 1 1 山茱萸 |
| 1 2 结语 |
（4）基于铁调素探讨左归丸对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词中英文对照表 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组及处理 |
| 2.2 取材 |
| 2.3 指标检测 |
| 2.4 统计学处理 |
| 结果 |
| 1 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠子宫系数的影响 |
| 2 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠腰椎BMD的影响 |
| 3 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠股骨骨形态学指标的影响 |
| 4 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠外周血血清中Ferritin、Hepcidin、BGP、COLⅠ及TRACP-5b的影响 |
| 5 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠胫骨骨髓中Fpn1蛋白表达的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 附图 |
（5）五味子总木脂素对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略表 |
| 文献综述 中药治疗骨质疏松症的研究进展 |
| 1 单味中药对骨质疏松症的治疗作用 |
| 2 单味中药主要成分对骨质疏松症的治疗作用 |
| 3 复方中药对骨质疏松症的治疗作用 |
| 4 其他方法对骨质疏松症的治疗作用 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组及处理 |
| 2.2 指标的检测方法 |
| 2.2.1 骨组织形态指标检测 |
| 2.2.2 胫骨骨髓中IL-6和IL-11蛋白及其mRNA表达的检测 |
| 2.2.2.1 脱钙骨冰冻切片的制作 |
| 2.2.2.2 胫骨骨髓中IL-6和IL-11蛋白表达的检测 |
| 2.2.2.3 胫骨骨髓中IL-6和IL-11 mRNA表达的检测 |
| 2.3 统计学分析 |
| 结果 |
| 1 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨组织形态指标的影响 |
| 1.1 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨BV/TV的影响 |
| 1.2 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨Tb.N的影响 |
| 1.3 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨Tb.Th的影响 |
| 1.4 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨Tb.SP的影响 |
| 1.5 五味子总木脂素对去卵巢大鼠股骨SMI的影响 |
| 2 五味子总木脂素对去卵巢大鼠胫骨骨髓中IL-6蛋白及其mRNA表达的影响 |
| 3 五味子总木脂素对去卵巢大鼠胫骨骨髓中IL-11蛋白及其mRNA表达的影响 |
| 讨论 |
| 1 五味子总木脂素对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用 |
| 2 五味子总木脂素治疗去卵巢所致大鼠骨质疏松症的作用机理 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 附图 |
（6）中药免煎颗粒辨证治疗骨质疏松症的临床观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 1 临床资料 |
| 2 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（7）基于破骨细胞和成骨细胞调控通路探讨左、右归丸对不同性别去势大鼠骨质疏松症的作用差异及其机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略表 |
| 综述 中医药防治骨质疏松症的研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组及处理 |
| 2.2 指标检测 |
| 2.2.1 大鼠L4-6 B MD检测的测定 |
| 2.2.2 骨组织形态计量学指标的测定 |
| 2.2.3 OPG、RANKL、Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白表达的检测 |
| 2.2.4 OPG、RANKL、Wnt1、LRP-5及β-catenin mRNA表达的检测 |
| 2.3 统计学分析 |
| 结果 |
| 1 左、右归丸对不同性别去势大鼠腰椎BMD及骨丢失率的影响 |
| 2 左、右归丸对不同性别去势大鼠骨组织形态计量学指标的影响 |
| 3 左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓中OPG、RANKL蛋白和mRNA表达以及RANKL/OPG和RANKLmRNA/OPGmRNA比值的影响 |
| 4 左、右归丸对不同性别去势大鼠胫骨骨髓中Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白和mRNA表达的影响 |
| 讨论 |
| 1 破骨细胞调控通路和成骨细胞调控通路 |
| 2 去势所致不同性别大鼠骨质疏松发生的特点 |
| 3 左、右归丸对不同性别去势大鼠骨质疏松症的作用差异 |
| 4 左、右归丸对不同性别去势大鼠骨质疏松症的作用差异的机理探讨 |
| 5 中医认识 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附图 |
（8）六味地黄丸加味治疗绝经后骨质疏松症肝肾阴虚证型疗效研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料与方法 |
| 2 治疗方法 |
| 3 疗效评价标准 |
| 4 统计学方法 |
| 结果 |
| 1 试验完成情况及不良反应 |
| 2 各组结果及分析 |
| 讨论 |
| 1 绝经后骨质疏松的发病机制 |
| 2 绝经后骨质疏松症的常见中医临床分型 |
| 3 补益肝肾对骨质疏松的影响 |
| 4 中医药对骨质疏松的影响 |
| 5 六味地黄丸加味方剂分析及加味药物的现代认识 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略词对照表 |
| 致谢 |
| 综述 |
（9）补肾复方对绝经后骨质疏松症大鼠BMP2/RUNX2/MEK1相关信号网络的调控作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 技术路路线 |
| 实验一 绝经后骨质疏松症大鼠模型的建立及评价 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 实验小结 |
| 实验二 绝经后骨质疏松症大鼠血清 BGP、TRACP 含量及补肾复方的调节作用 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 实验小结 |
| 实验三 绝经后骨质疏松症大鼠下丘脑、肾、股骨BMP2、SMAD1 的 mRNA、蛋白表达及补肾复方的调节作用 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 实验小结 |
| 实验四 绝经后骨质疏松症大鼠下丘脑、肾、股骨 RUNX2、OSX 的 mRNA、蛋白表达及补肾复方的调节作用 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 实验小结 |
| 实验五 绝经后骨质疏松症大鼠下丘脑、肾、股骨 MEK1、ERK2 的 mRNA、蛋白表达及补肾复方的调节作用 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 实验小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 附件 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）防治骨质疏松症常用单味中药实验研究概况（论文提纲范文）
| 1 淫羊霍 |
| 2 补骨脂 |
| 3 骨碎补 |
| 4 杜仲 |
| 5续断 |
| 6 黄芪 |
| 7 熟地黄 |
| 8 结语 |
四、骨碎补对去卵巢大鼠骨质疏松的骨计量学研究（论文参考文献）
- [1]中药抗骨质疏松作用及机制的研究进展[J]. 张志宏,邢娜,彭东辉,王秋红,匡海学. 中国药房, 2021(03)
- [2]马鹿茸多肽“补肾健骨”作用与机制研究[D]. 任聪. 辽宁中医药大学, 2019(01)
- [3]治疗原发性骨质疏松症的单味中药研究进展[J]. 赵亮,刘静. 现代中西医结合杂志, 2017(04)
- [4]基于铁调素探讨左归丸对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理[D]. 李岳泽. 中国中医科学院, 2016(02)
- [5]五味子总木脂素对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨[D]. 张方珍. 中国中医科学院, 2015(01)
- [6]中药免煎颗粒辨证治疗骨质疏松症的临床观察[D]. 张继东. 青岛大学, 2014(05)
- [7]基于破骨细胞和成骨细胞调控通路探讨左、右归丸对不同性别去势大鼠骨质疏松症的作用差异及其机制[D]. 付小卫. 中国中医科学院, 2014(07)
- [8]六味地黄丸加味治疗绝经后骨质疏松症肝肾阴虚证型疗效研究[D]. 张允. 泸州医学院, 2014(03)
- [9]补肾复方对绝经后骨质疏松症大鼠BMP2/RUNX2/MEK1相关信号网络的调控作用[D]. 高璐. 辽宁中医药大学, 2014(06)
- [10]防治骨质疏松症常用单味中药实验研究概况[J]. 刘振海,刘红,王少君,李艳. 环球中医药, 2013(06)