一、益气活血中药对肾病大鼠高粘血症的影响及电镜观察（论文文献综述）
陈虹,陈敏,郑京[1]（2021）在《基于“浊毒理论”探讨加味四君子汤对肾病综合征的治疗》文中指出目的从"浊毒理论"探讨加味四君子汤对肾病综合征的治疗。方法 40只SPF级大鼠以随机数字表法分为正常组8只、造模组32只。造模组大鼠造模成功后再次随机分为模型组8只、激素组8只、中药组8只、联合组8只。正常组和模型组大鼠以生理盐水灌胃,剂量为20 ml/（kg·d）,激素组大鼠以泼尼松灌胃,剂量为10 mg/（kg·d）;中药组大鼠以中药灌胃,剂量为20 ml/（kg·d）;联合组以中药和泼尼松联合灌胃,剂量分别为20 ml/（kg·d）和10mg/（kg·d）。在灌胃第14天、第28天取血备用。用双缩脲比色法测定各组大鼠24 h尿总蛋白定量;电子显微镜下观察各组大鼠肾脏的病理改变。结果与模型组比较,灌胃第14天、第28天激素组、中药组、联合组24 h尿蛋白均降低（P <0.05）。灌胃28 d与灌胃14 d比较,模型组24 h尿蛋白升高,激素组、中药组、联合组均降低（P <0.05）。模型组大鼠肾脏组织电镜下表现为足突增宽、足突部分融合或弥漫性融合,足细胞肿胀;而激素组、中药组、联合组电镜下肾小球的病变明显减轻,只见足突部分融合。结论加味四君子汤可有效减少蛋白尿,减轻肾小球病变。
韩云鹏,谢春光[2]（2021）在《补阳还五汤治疗糖尿病及其并发症的研究进展》文中进行了进一步梳理糖尿病是以慢性高血糖为特征,多因素导致胰岛素分泌和（或）作用缺陷所引起的代谢性疾病,随着国民生活水平提高和生活方式改变,糖尿病发病率及并发症逐年升高,带来了严重的公共健康问题。近年来,气虚血瘀被认为是糖尿病诸多并发症的重要病机,作为益气活血代表方的补阳还五汤在治疗糖尿病及其并发症的临床研究、相关药理学作用机制研究也成为热点,并取得了重要的研究成果。
高海娟,雷根平,冯喆,李静静,李小会,应小平,于航星,董盛,王婷,吴瑾[3]（2021）在《芪地固肾方及其拆方对膜性肾病大鼠治疗作用的实验研究》文中认为目的探讨芪地固肾方及其拆方（培补固肾组、清利活血组）对膜性肾病大鼠的治疗效果,探索各拆方在全方疗效发挥中的作用,阐明配伍科学性及（或）优化方剂配伍。方法 SPF级雄性SD大鼠65只,选取空白组10只,余大鼠C-BSA尾静脉注射复制IMN模型,造模成功后按随机数字表法分为模型组、贝那普利组、芪地固肾方全方组（以下简称全方组）、培补固肾组和清利活血组共5组。灌胃4周后观察各组大鼠24 h-UTP、血清蛋白、血脂、肾功能、转氨酶,HE、Masson染色及电镜观察大鼠肾脏病理改变,免疫荧光观察IgG和C3沉积情况。结果芪地固肾方及其拆方可不同程度降低IMN大鼠24 h-UTP、升高血清蛋白、改善脂代谢紊乱,减轻肾脏病理损害,减少IgG沉积,两拆方组疗效均较全方差。培补固肾组较清利活血组表现出更好的减少24 h-UTP、升高ALB和降低TC的治疗效果。结论芪地固肾方对膜性肾病大鼠有明确治疗作用,培补固肾和清利活血组疗效均较全方差,提示本方组方科学有序。
王新慧[4]（2021）在《健脾祛湿和络方上调线粒体自噬减少被动Heymann肾炎大鼠足细胞调亡的机制研究》文中进行了进一步梳理特发性膜性肾病（idiopathic membranous nephropathy,IMN）是成人肾病综合征的最常见原因,发病率逐年增加,经积极治疗仍有1/3患者起病的5-10年内进展至终末期肾脏病,寻找针对IMN安全有效的新治疗策略迫在眉睫。持续大量蛋白尿是IMN肾功能进展的危险因素,足细胞损伤或耗竭是肾小球滤过屏障受损,蛋白尿产生的关键,足细胞凋亡则是足细胞损伤的主要形式。因此,减少足细胞凋亡对IMN蛋白尿的治疗具有重要意义。健脾祛湿和络方（jianpiqushiheluo formula,JQHF）临床疗效显着,可以减少蛋白尿,延缓肾功能进展。JQHF减少蛋白尿的机制,是否是通过减少足细胞凋亡,改善肾小球滤过膜损伤,有待阐明。此外,肾小球上皮下免疫复合物沉积是IMN最主要的病理表现。免疫复合物激活补体系统可以产生亚溶量C5b-9,插入足细胞膜,导致局部ROS的产生。当细胞内ROS累积超过线粒体的抗氧化能力时,氧化应激可以引起线粒体功能障碍,继而激活线粒体途径的细胞凋亡通路。线粒体自噬,则是降解、再回收受损和多余线粒体,以及维持细胞生存的重要机制。哺乳动物体内线粒体自噬的调控途径主要有3种:PINK1/Parkin途径、BNIP3L途径和FUNDC1途径。其中,PINK1的激活,被认为是诱导线粒体自噬的起始事件,在线粒体自噬过程中发挥重要作用。本实验以PINK1/Parkin通路对细胞凋亡的调控机制为切入点,展开研究。JQHF是否可以通过PINK1/Parkin介导的线粒体自噬,清除损伤线粒体,减少足细胞凋亡,发挥肾脏保护作用,是本次研究的重点。研究的主要内容如下。目的:本研究构建被动Heymann肾炎（passive Heymann nephritis,PHN）大鼠模型,模拟人类IMN肾脏病理损伤的机制,旨在探讨:1、JQHF对PHN大鼠的肾脏保护作用;2、JQHF对PHN大鼠线粒体功能障碍及足细胞凋亡的影响;3、JQHF调控PINK1/Parkin线粒体自噬通路对足细胞凋亡的保护作用。方法:使用绵羊抗大鼠FX1A血清建立PHN模型,分为模型组,盐酸贝那普利组,JQHF低、高剂量组、JQHF（低剂量）+3-MA干预组,另设正常组,给予相应药物灌胃。药物干预的第0、2、4、6周留取24小时尿液标本,药物干预6周后留取血清、肾组织标本。检测指标及方法:1、血清、尿液标本:全自动生化分析仪检测24小时尿蛋白定量（24h UTP）、ALB、TC、TG、AST、ALT、BUN、Scr;2、肾脏病理:免疫荧光染色观察肾小球IgG、C5b-9沉积情况;电镜,光镜HE、PAS、Masson染色观察大鼠肾脏病理改变;3、线粒体功能检测:电镜观察线粒体超微结构改变;流式细胞术检测线粒体膜电位以及细胞内ROS水平;4、细胞凋亡检测:TUNEL法检测肾小球、肾小管细胞凋亡;免疫组化检测足细胞标志蛋白WT-1、Nephrin表达;Western bolt检测Nephrin蛋白表达;5、PINK1/Parkin通路相关蛋白检测:免疫荧光染色观察肾小球内PINK1-Parkin,COX Ⅳ-LC3 共定位情况;Western bolt 检测肾组织中 PINK1,LC3-Ⅱ/Ⅰ,Cleaved caspase-3,Cyt c,Cyto-Parkin,Mito-Parkin 蛋白表达。结果:1、JQHF对PHN大鼠的肾脏保护作用（1）24h UTP比较:与给药前相比,模型组在给药6周时,24h UTP显着增多;给药6周时,与模型组、盐酸贝那普利、JQHF+3-MA组比较,JQHF低剂量组24h UTP显着降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）,JQHF高剂量与模型组比较也有降低（P<0.01）。（2）肾功能、血脂、肝功能指标比较:与空白组比较,模型组血清ALB减少,TC升高;与模型组比较,JQHF低剂量组ALB、TC指标显着改善（P<0.01,P<0.05）;联合使用3-MA,显着抑制了 JQHF对ALB的改善作用（P<0.01）;BUN的比较中,与模型组比较,JQHF低、高剂量组有明显下降（P<0.05,P<0.01）,其余组间无差异;TG、Scr、ALT、AST的水平比较,各组间均无明显差异;（3）肾脏病理损伤比较:与空白组比较,模型组肾脏病理损伤加重;与模型组比较,JQHF低、高剂量组肾小管间质损伤评分、肾小球数目增多、IgG沉积均有显着改善,C5b-9沉积仅有JQHF低剂量组减少明显（P<0.01）;与盐酸贝那普利组比较,JQHF低剂量组肾小管损伤评分、肾小球细胞数目也有显着降低（P<0.05,P<0.05）。3-MA+JQHF组与JQHF低剂量组比较,肾脏病理损伤加重,以上各项指标的比较均有显着差异。2、JQHF对PHN大鼠线粒体功能障碍及足细胞凋亡的影响（1）线粒体超微结构及膜电位:与空白组比较,模型组足细胞内线粒体肿胀变圆,外膜增厚,空泡样变,伴有嵴模糊以及排列紊乱,线粒体膜电位下降（P<0.01）;与模型组比较,各药物治疗组线粒体超微结构有不同程度改善,JQHF低、高剂量组改善最为明显,嵴结构基本正常,线粒体膜电位亦有显着增加（P<0.01,P<0.05）。3-MA显着抑制了 JQHF对线粒体超微结构以及膜电位的改善作用。（2）细胞内ROS水平:与空白组比较,模型组大鼠细胞内ROS水平显着升高;与模型组比较,盐酸贝那普利组,JQHF低、高剂量组ROS水平均有显着降低（P<0.05,P<0.001,P<0.01）;JQHF低剂量对ROS的清除作用,明显优于盐酸贝那普利组以及3-MA+JQHF组（P<0.05,P<0.001）。（3）肾小球、小管细胞凋亡:与空白组比较,模型组、盐酸贝那普利组、3-MA+JQHF组肾小管、肾小球细胞凋亡率均明显上升（P<0.001,P<0.05,P<0.01）;JQHF低、高剂量组的细胞凋亡率有改善,与空白组比较无明显差异;JQHF低剂量组肾小球细胞凋亡减轻最显着,较模型组有明显下降（P<0.05）。（4）足细胞数目及标志蛋白表达:与空白组比较,模型组足细胞数量显着减少;与模型组比较,盐酸贝那普利组、JQHF低、高剂量组足细胞数量均显着增多（P<0.001）;JQHF组与盐酸贝那普利组、3-MA+JQHF组比较,足细胞数量也有明显增加（P<0.001）。Nephrin蛋白表达方面,免疫组化与Western bolt结果一致,与模型组比较,JQHF低剂量组Nephrin表达显着增加;3-MA可以抑制JQHF对Nephrin的上调作用。3、JQHF调控PINK1/Parkin线粒体自噬通路对足细胞凋亡的保护作用（1）PINK1、Parkin蛋白表达:与空白组比较,模型组大鼠肾小球内PINK1、Mito-Parkin 蛋白表达降低（P<0.001,P<0.05）,Cyto-Parkin 表达增加（P<0.01）,PINK1-Parkin 荧光共定位系数 Pearson’s correlation 下降（P<0.001）,提示模型组PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬被抑制;与模型组比较,盐酸贝那普利组,JQHF低、高剂量组的PINK1、Mito-Parkin、Cyto-Parkin蛋白表达以及PINK1-Parkin共定位表达均有改善,差异显着;JQHF低剂量对以上指标的改善作用优于盐酸贝那普利;3-MA抑制自噬可以阻断JQHF对PINK1、Parkin的调控。（2）LC3、COX Ⅳ蛋白表达:与空白组相比,模型组、JQHF+3MA组肾小球LC3与COX Ⅳ（线粒体标记蛋白）荧光共定位系数Pearson’s correlation显着下降;与模型组比较,JQHF低剂量组的共定位表达显着增加（P<0.05）。与空白组比较,模型组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值显着降低;与模型组、盐酸贝那普利组比较,JQHF低、高剂量组的LC3-Ⅱ/Ⅰ比值显着升高（P<0.001,P<0.001）。3-MA抑制了 JQHF对LC3-Ⅱ/Ⅰ比值的调控。（3）凋亡因子（Cleaved caspase-3、Cyt c）表达:与空白组比较,模型组的Cleaved caspase-3、Cyt c 表达显着升高（P<0.001,P<0.001）;盐酸贝那普利组,JQHF低、高剂量组凋亡因子的表达均较模型组显着降低;JQHF低剂量的调节作用则优于盐酸贝那普利以及3-MA+JQHF。结论:（1）JQHF可以减少PHN大鼠24h UTP,提高血清ALB水平,药效作用显着优于盐酸贝那普利。JQHF可以减轻肾脏病理损伤,表现为减少肾小球内IgG、C5b-9免疫荧光沉积以及减轻肾小管损伤、改善肾小球内细胞数目增多。（2）PHN大鼠足细胞内存在ROS累积以及线粒体功能障碍,JQHF可以减少细胞内的ROS累积,改善足细胞线粒体超微结构,抑制线粒体膜电位下降,同时减轻足细胞以及肾小管细胞的凋亡。（3）JQHF可以显着上调肾小球内PINK1蛋白的表达,促进胞浆Parkin向线粒体转移,增加LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化以及LC3-Ⅱ与线粒体的结合,改善细胞内的线粒体自噬流,进而下调凋亡因子Cyt c,Cleaved caspase-3的表达。（4）3-MA可以显着阻断JQHF对PINK1/Parkin通路的激活,同时抑制JQHF对PHN大鼠足细胞凋亡,24h UTP以及肾脏病理损伤的改善作用。由此证实,JQHF是通过激活PINK1/Parkin介导的线粒体自噬,促进损伤线粒体的清除,改善线粒体功能障碍,减少凋亡因子Cyt c、Cleaved caspase-3的释放,继而减轻足细胞损伤,减少蛋白尿,发挥肾脏保护作用。
王媛媛[5]（2021）在《复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及炎症反应的影响》文中进行了进一步梳理目的:本实验研究旨在从炎症反应角度,观察复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病大鼠24h-UPr、肾功能与部分肝功能生化指标及IL-6、TGF-β1的影响,为探究复方青龙衣胶囊治疗阿霉素肾病大鼠蛋白尿的可行性,为探讨该药物新的功效提供理论依据。方法:实验选取6周龄清洁级雄性SD大鼠72只,适应性饲养一周后,先按照大鼠的体重随机分为两组,分别为空白组（n=12）与造模组（n=60）。按照Bertani方法,造模组大鼠按6.5mg/kg体重的剂量,利用一次性尾静脉注射阿霉素溶液的方法建立模型。以造模鼠24h-UPr≥10mg且有统计学意义作为造模成功判定标准。将造模成功且存活的大鼠随机分为四组,即复方青龙衣组（青龙衣组）、雷公藤多苷片组（雷公藤组）、盐酸贝那普利片组（洛汀新组）、模型对照组（模型组）。每日按时观测并记录各组大鼠一般状态及相关数据。造模成功后第1、2、4周末,测定大鼠24h-UPr。在第4周末,将大鼠腹腔注射10%的水合氯醛溶液,麻醉后心脏取血,检测Scr、BUN、TC、ALB、ALT与AST。将肾脏组织呈冠状面切开,一部分在冰水浴条件下,用匀浆器制备成10%的组织匀浆;另一部分放入2.5%戊二醛中固定,以备电镜观察肾组织结构改变;免疫组化染色法分析肾组织IL-6、TGF-β1定位与表达;PCR检测法测定肾组织IL-6、TGF-β1含量。结果:1.青龙衣组、洛汀新组与雷公藤组大鼠24h-UPr较模型组均降低（P<0.05）;青龙衣组大鼠,与洛汀新组比较24h-UPr明显降低（P<0.05）,与雷公藤组比较24h-UPr无明显差异（P>0.05）;2.青龙衣组、洛汀新组与雷公藤组大鼠TC值较模型组均降低,青龙衣组明显降低（P<0.05）;青龙衣组大鼠与雷公藤组、洛汀新组比较,TC值明显降低（P<0.05）。青龙衣组、洛汀新组与雷公藤组大鼠ALB值较模型组均升高,青龙衣组升高最为明显（P<0.05）;青龙衣组大鼠与雷公藤组、洛汀新组比较,ALB值明显升高（P<0.05）;3.青龙衣组、洛汀新组与雷公藤组大鼠肾组织中IL-6、TGF-β1的表达与定量较模型组均降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;4.透射电镜结果显示:青龙衣组、雷公藤组大鼠肾小球足细胞足突融合甚至消失程度明显减轻。结论:1.复方青龙衣胶囊可以有效降低阿霉素肾病大鼠24h-UPr及血清TC含量,升高血清ALB含量,减缓进一步肾脏损伤程度,从而延缓肾脏疾病的发展,发挥一定的肾脏保护作用;2.复方青龙衣胶囊可能通过降低IL-6、TGF-β1的表达与定量,减轻肾脏炎症反应的损伤,从而抑制蛋白尿。
张承杰[6]（2020）在《当归芍药散对NS幼鼠FN、LN、Col-Ⅳ的影响》文中研究说明目的:观察当归芍药散对微小病变型肾病综合征幼鼠FN、LN、Col-Ⅳ的影响,进而从分子水平初步揭示当归芍药散干预小儿肾综的作用机制,并为其临床应用提供可靠的依据。方法:将200只SD雄性幼鼠按随机数字表法分为5组:（1）正常组（2）模型组（3）当归芍药散组（4）坎地沙坦组（5）当归芍药散与坎地沙坦联合用药组（下文简称结合组）。每组各40只。除正常组外,其余4组均尾静脉注射阿霉素构造肾综微小病变病理模型。造模采取2次造模法,即实验开始后第1d注射阿霉素4mg/kg,注射后密切观察幼鼠情况,第8d再次给与阿霉素2mg/kg。从第15d起各组分别以相应药物连续灌胃42d,实验共计8周。分别于实验第14d、21d、42d、56d随机每组取幼鼠10只,收集24h尿液并用BCA法测定24h尿蛋白含量;主动脉采血并取肾脏病理切片后检测各项生化指标:全自动生化分析仪检测血浆白蛋白（ALB）、总胆固醇（TCH）、甘油三酯（TG）的水平;ELASA法检测纤维黏连蛋白（FN）、层黏连蛋白（LN）、四型胶原蛋白（Col-Ⅳ）的含量;光镜观察肾组织形态结构;透射电镜观察肾小球基底膜、足突的变化。汇总数据并分析结果。结果:1.实验第21d时,模型组24h尿蛋白定量、FN、LN、Col-Ⅳ、TCH、TG等指标皆高于正常组,ALB水平低于正常组,差异有统计学意义（P<0.05）,光镜下肾小球基本正常,电镜下肾小球基底膜不均匀,增厚或裸露,可见足细胞变形或者融合,无明显系膜基质增多,提示微小病变型肾病造模成功。2.第42d时,当归芍药散组、坎地沙坦组、结合组（下文此三组简称给药组）24h尿蛋白定量皆低于于模型组,ALB水平高于模型组,差异有统计学意义（P<0.05）;当归芍药散组、结合组的TCH、TG、FN、LN、Col-Ⅳ水平皆低于模型组,差异皆有统计学意义（P<0.05）;结合组各项生化指标恢复优于单一给药组,差异有统计学意义（P<0.05）;模型组FN、LN、Col-Ⅳ水平较21d时升高,差异有统计学意义（P<0.05）。3.第56d时,各给药组各项生化指标与42d时相比,持续恢复,模型组各项生化指标持续恶化,差异有统计学意义（P<0.05）;且当归芍药散组FN、LN、Col-Ⅳ等指标接近结合组,与坎地沙坦组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.当归芍药散可以降低NS幼鼠24h尿蛋白定量;2.当归芍药散可以提高NS幼鼠ALB的水平;3.当归芍药散可以降低NS幼鼠TCH、TG的水平;4.当归芍药散可以明显降低NS幼鼠FN、LN、Col-Ⅳ的水平。
唐建[7]（2020）在《补肾活血祛风中药复方对阿霉素肾病大鼠的实验研究及基于p38MAPK信号转导通路研究治疗阿霉素肾病大鼠的分子机制》文中指出目的:中药复方是目前临床上治疗肾病综合征的重要方式,其在临床上的功效显着。本课题通过动物实验旨在研究补肾活血祛风中药复方（BSHXQF）对阿霉素肾病大鼠肾脏病理组织结构及p38MAPK信号转导通路的影响;研究BSHXQF中药复方单用和（或）联合糖皮质激素对阿霉素肾病大鼠干预的差异性,进一步探讨BSHXQF中药复方提高肾病综合征治疗效果可能的作用机制,为临床中西医结合治疗肾病综合征提供生物依据。方法:筛选健康雄性Spraque-Dawley（SD）大鼠140只,测定24时尿蛋白定量后（小于10mg）,随机分为空白对照组（A组）20只,造模组120只。造模组采用阿霉素（adriamycin,ADR）尾静脉注射方式（分两次注射）建立肾病综合征大鼠模型,3周后检测24小时尿蛋白定量大于100mg者即为肾病综合征模型复制成功。再将成模大鼠随机分为模型组（B组）、泼尼松组（C组）、中药组（D组）、中药+泼尼松组（E组）,每组各18只。各组大鼠给予相应的干预:空白对照组不干预,模型组予以蒸馏水灌胃,泼尼松组予以醋酸泼尼松片溶液,中药组予以补肾活血祛风方中药复方汤剂,中药+泼尼松组予以补肾活血祛风方中药复方汤剂和醋酸泼尼松片溶液,各组大鼠干预8周。分别在干预4周、8周末时每组随机抽取9只大鼠观察治疗效果,收集尿、血标本检测24h尿蛋白定量、肾功、凝血、血脂和白蛋白等相关指标,取肾脏组织观察病理变化,采用Real-time PCR技术和免疫组织化学法检测肾组织p38MAPK信号通路中的蛋白及m RNA表达量。结果:（1）.大鼠一般情况:A组一般情况良好;B组大鼠皮毛松散,活动下降,尾部出现不同程度的水肿和溃烂,饮食量减少,体重增加缓慢,部分大鼠出现门齿松动和脱落的情况;C、D、E组较模型组大鼠均有不同程度的好转。（2）.各组大鼠24小时尿蛋白定量和生化指标改变:与A组比较,B、C、D、E组大鼠24h尿蛋白量明显升高、血清白蛋白降低、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）升高（P<0.05）;与B组比较,C、D、E组24h尿蛋白均降低（P<0.05）,C组TC、TG升高,而D组TC、TG明显降低（P<0.05）,C、D、E组白蛋白差异无统计学意义（P>0.05）;各组组间比较发现所有组别大鼠血肌酐和尿素氮无明显差异（P>0.05）。（3）.各组大鼠肾脏病理组织结构改变:A组大鼠肾脏结构正常,各造模组大鼠肾脏病理可见肾小球肿大、肾小管上皮细胞变性肿胀、间质纤维组织增生及肾小球基底膜增厚等改变,且电镜可见足细胞排列紊乱和局部融合,肾小管上皮细胞核染色质聚集,胞浆内线粒体肿胀;与B组比较,各干预组肾脏病理损害不同程度的改善,其中E组大鼠肾脏病理病变最轻。（4）.各组大鼠肾组织p38MAPK表达的改变:与A组比较,B组大鼠肾脏组织p38MAPK蛋白和m RNA的表达明显增加（P<0.05）;与B组比较,各干预组表达有所下降（P<0.05）,C、D、E三组组间比较发现表达无明显差异（P>0.05）。结论:（1）.补肾活血祛风中药复方可改善阿霉素肾病大鼠一般情况,降低24小时尿蛋白定量,减轻或者延缓阿霉素肾病大鼠的肾脏病理损害,且当与糖皮质激素类药物联用时具有增强疗效的作用。（2）.补肾活血祛风中药复方可以下调阿霉素肾病大鼠肾组织p38MAPK的表达,提示BSHXQF中药复方减轻阿霉素肾病大鼠的肾脏病理损害的作用机制可能与干预p38MAPK信号通路有关。（3）.补肾活血祛风中药复方和糖皮质激素均对阿霉素肾病大鼠具有明显疗效,但在调节血脂代谢上BSHXQF中药复方明显优于糖皮质激素。（4）.与单用糖皮质激素治疗阿霉素肾病大鼠相较,BSHXQF中药复方+糖皮质激素对阿霉素肾病大鼠的综合治疗更优,体现了目前中西医结合治疗肾病综合征的优势。
徐莎莎[8]（2020）在《糖肾康颗粒对HHcy-DKD足细胞标志蛋白Nephrin、PCX影响的临床及实验研究》文中进行了进一步梳理目的:1.观察高同型半胱氨酸血症（HHcy）糖尿病肾脏疾病（DKD）气阴两虚血瘀证患者与正常人群在尿足细胞标志蛋白肾病蛋白（Nephrin）、足糖萼蛋白（PCX）中的差异,证实在HHcy-DKD发病机制中,足细胞损伤起重要作用。2.观察糖肾康颗粒对HHcy-DKD气阴两虚血瘀证患者尿足细胞标志蛋白Nephrin、PCX的干预作用,探讨糖肾康颗粒治疗HHcy-DKD的作用机理。方法:选取我院肾病科及内分泌科2019年4月-2019年12月收治的60例HHcy-DKD气阴两虚血瘀证患者,将60例患者随机分为治疗组和对照组各30例,两组患者均予以生活方式干预和西医基础治疗;治疗组患者加用糖肾康颗粒（3次/日,1袋/次）,疗程均为8周。同时选择20例健康体检者作为正常组。观察两组患者治疗前后尿白蛋白/尿肌酐比值（UACR）、24小时尿蛋白定量（24h UPr）、肾功能、血糖、血同型半胱氨酸（Hcy）及尿PCX、Nephrin、中医证候积分变化情况,并评估两组患者的疾病疗效、中医证候疗效。结果:1.疾病疗效:在总有效率方面,对照组、治疗组各为57.14%、82.76%,两组比较有显着性差异（P<0.05）。2.中医证候疗效:在总有效率方面,对照组、治疗组各为64.29%、89.66%,两组比较有显着性差异（P<0.05）。3.中医证候积分值:治疗前,两组比较无显着性差异（P>0.05）;治疗后,两组皆明显降低（P<0.05与P<0.01）;积分值下降幅度,治疗组显着优于对照组（P<0.01）。4.UACR、24h UPr:治疗前两组比较均无统计学意义（P>0.05）;治疗后,两组都表现为显着降低,且都具备统计学价值（P<0.05与P<0.01）;在这两项指标下降幅度上,相较对照组,治疗组均表现出明显优势（P<0.01）。5.血肌酐（Scr）、肾小球滤过率（e GFR）、尿素氮（BUN）、空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2h PG）:两组各项指标较治疗前均无明显变化（P>0.05）。6.血Hcy:治疗前,与正常组比较,两组均明显升高（P<0.01）;治疗前两组患者比较均无统计学意义（P>0.05）;治疗后,相比于治疗前,两组病人都表现为明显降低（P<0.05与P<0.01）;而且,相较对照组,治疗组表现出明显优势（P<0.01）。7.尿Nephrin、PCX:治疗前,与正常组比较,两组均显着性升高（P<0.01）;治疗前两组患者比较均无统计学意义（P>0.05）;治疗后,相比于治疗前,两组患者均显着降低（P<0.05与P<0.01）;而且,相较对照组,治疗组表现出明显优势（P<0.01）。8.安全性指标:两组患者血常规、大便常规、谷丙转氨酶（ALT）、心电图等较治疗前均无明显变化。结论:1.糖肾康颗粒的应用,能使HHcy-DKD气阴两虚血瘀证病人的临床症状得到明显改善,降低尿蛋白、血Hcy水平。2.HHcy-DKD气阴两虚血瘀证患者尿足细胞标志蛋白Nephrin、PCX水平明显高于健康人群,表明足细胞损伤参与了HHcy-DKD的发病过程。3.糖肾康颗粒可降低HHcy-DKD气阴两虚血瘀证患者尿足细胞标志蛋Nephrin、PCX水平,这或许是糖肾康颗粒治疗HHcy-DKD的作用机理之一。目的:观察糖肾康颗粒对高同型半胱氨酸血症（HHcy）糖尿病肾脏疾病（DKD）大鼠足细胞标志蛋白肾病蛋白（Nephrin）、足糖萼蛋白（PCX）的影响,阐明糖肾康颗粒对HHcy-DKD大鼠的作用机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为5组,包括正常组、DKD模型组（模型1组）、HHcy-DKD组（模型2组）、糖肾康组、缬沙坦组各10只。除正常组外,其余40只大鼠都通过手术切除单肾,再结合高糖高脂饮食以及链脲佐菌素（STZ）法制备DKD模型,除模型1组外,剩余DKD模型大鼠予1%高蛋氨酸（Met）饲料喂养,制备HHcy-DKD模型,剩余大鼠在上述模型基础上分为糖肾康组、缬沙坦组。糖肾康组给予糖肾康颗粒水溶液按4.0g/（kg·d）灌胃,缬沙坦组将缬沙坦胶囊混悬液按20mg/（kg·d）灌胃。糖肾康组、缬沙坦组在模型2组造模成功后第1天开始给药,正常组、模型1组、模型2组给予等量蒸馏水灌胃,时间均为8周。用ELISA检测尿白蛋白/尿肌酐比值（UACR）、24小时尿蛋白定量（24h UPr）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、血同型半胱氨酸（Hcy）、尿Nephrin、PCX水平;用Western blot法检测肾组织中Nephrin、PCX表达量;用透射电镜观察肾小球基底膜（GBM）的厚度以及足细胞的形态。结果:1.UACR、24h UPr比较:与正常组比较,模型2组均升高,都表现出明显差别（P<0.01）;对比模型2组,缬沙坦组以及糖肾康组都表现为降低,即都存在明显差异表现（P<0.01）;糖肾康与缬沙坦组比较,均无明显性差异（P>0.05）。2.肾功能（BUN、Scr）比较:各组均无明显性差异（P>0.05）。3.血Hcy比较:与正常组比较,模型1组无明显性差异（P>0.05）,模型2组明显升高,有明显性差异（P<0.01）;与模型2组比较,糖肾康组、缬沙坦组均下降,均有明显性差异（P<0.01）;糖肾康组与缬沙坦组比较,无明显性差异（P>0.05）。4.UNECR、UPCR水平情况比较:与正常组比较,模型2组均升高,均有明显性差异（P<0.01）;与模型2组比较,糖肾康组、缬沙坦组均下降,均有明显性差异（P<0.01）;糖肾康组与缬沙坦组比较,均无明显性差异（P>0.05）。5.肾组织中Nephrin、PCX表达情况（Western blot法）:与正常组比较,模型2组均降低,均有明显性差异（P<0.01）;与模型2组比较,糖肾康组、缬沙坦组均增多,均有明显性差异（P<0.01）;糖肾康组与缬沙坦组比较,均无明显性差异（P>0.05）。6.各组大鼠肾脏病理形态学变化:（1）肾组织肉眼观察:在正常组,大鼠左肾大小无异常,显示暗红色。模型2组大鼠左肾体积明显变大。糖肾康组、缬沙坦组均较正常组增大,但均较模型2组缩小。（2）电镜:与正常组大鼠相比,模型2组大鼠GBM明显增厚、足突融合甚至消失,糖肾康组、缬沙坦组大鼠GBM稍增厚、足突轻度融合,病理类型均较模型2组显着减轻。结论:1.糖肾康颗粒能够改善HHcy-DKD大鼠的生存质量,减少HHcy-DKD大鼠的尿蛋白、血Hcy水平。2.HHcy-DKD大鼠尿足细胞标志蛋白Nephrin、PCX蛋白含量均显着升高,而肾组织足细胞标志蛋白Nephrin、PCX表达均明显下降,表明HHcy-DKD存在足细胞损伤,糖肾康颗粒能够显着减少尿足细胞标志蛋白Nephrin、PCX含量,显着上调肾组织足细胞标志蛋白Nephrin、PCX的表达。3.糖肾康颗粒能够改善HHcy-DKD大鼠的肾脏病理表现。
叶太生[9]（2019）在《基于miR-21靶向Akt/mTOR信号通路探讨补气生血法调控自噬防治早期糖尿病肾病临床和实验研究》文中研究说明目的:糖尿病肾病（diabeticnephropathy,DN）是终末期肾病的主因,发病率高,防治意义重大。自噬是细胞清除受损物质,避免凋亡和坏死的自稳机制,参与了早期DN中肾细胞对抗损伤的过程,所以,自噬活性是防治早期DN的新靶点之一,目前国内外研究进展不多,中医认为DN是气虚血不足而瘀,进而肾“阴阳失和”的病证,治以补气生血而化瘀,本研究以补气生血法（当归补血汤）为基础,分为理论探讨、临床研究、实验研究三部分。先在理论研究基础上,分析医疗机构中治疗早期DN的临床处方,分析当归补血汤的组成“黄芪-当归”药对的应用规律;再通过动物实验研究当归补血汤能否通过调控自噬活性治疗早期DN,并比较该方防治早期DN以补气为主,使肾精得固而“阴阳自和”的过程,与干预肾组织中miR-21靶向Akt/mTOR信号通路调控自噬保护肾脏的过程是否一致,由此揭示其药效机制,探讨自噬是否为“阴阳自和”理论的微观基础之一,为中医药防治DN研究提供思路。理论探讨:1、基于中医气血理论:补气生血法能补阳气以生阴血,起到调和阴阳,促进“阴阳自和”的作用。2、当归补血汤:是补气生血的代表方,原方主治血虚发热,重用黄芪意在针对气虚为主的病机特点,也符合早期DN的基本病机。3、自噬活性:是维持细胞内环境稳定的自我稳定机制,理论上与“阴阳自和”的核心思想异曲同工。4、基于系统生物学思维:从临床到实验研究是中医药防治疾病研究的重要方法,也是阐释中医药理论科学内涵的有效途径。方法:1、临床研究:以2017年1月到2017年12月湖北省中医院内分泌科糖尿病肾病病例为样本库,基于真实世界的研究方法,筛选处方时,选择糖尿病为主要诊断,筛选合并早期糖尿病肾病的病例,且临床有效的治疗处方,处方的录入与核对将按照上述要求进行整理,并由中医药专业人员录入“中医传承辅助系统（V2.5）”进行药物频次分析、组方规律分析和新方分析等。2、实验研究:1)体外细胞实验:分别制备正常大鼠血清（Ⅰ）、当归补血汤高剂量（7g/Kg-d）含药血清（Ⅱ）、当归补血汤低剂量（1.75g/Kg·d）含药血清（Ⅲ）、格列齐特（2mg/Kg·d）含药血清（Ⅳ）。体外培养大鼠肾足细胞分为:正常对照组（A组）、高糖组（B组）、当归补血汤高剂量组（C组）、当归补血汤低剂量组（D组）、格列齐特组（E组）。A组加Ⅰ血清+5mmol/L葡萄糖;B组加Ⅰ血清+30mmol/L葡萄糖;C组加Ⅱ 血清+30mmol/L葡萄糖;D组加Ⅲ 血清+30mmol/L葡萄糖;E组加Ⅳ 血清+30mmol/L葡萄糖。分别培养12h、24h、48h、72h后收集细胞检测。采用MTT法检测不同时段各组足细胞增殖情况,应用流式细胞仪检测不同时段各组足细胞凋亡情况,透射电镜观察足细胞自噬形态。应用Western-Bolt检测细胞中Belcin-1、LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ 蛋白的表达,RT-PCR分别检测Belcin-1、LC3-I和LC3-Ⅱ的mRNA表达水平。2)体内动物实验:制备当归补血汤的醇提取物,在早期DN大鼠模型造模成功后,将SD大鼠随机分为A组:空白组;B组:模型组;C组:当归补血汤高剂量组[7g/（kg·d）];D组:当归补血汤低剂量组[1.75g/（kg·d）];E组:格列奇特组[2mg/（Kg·d）]。每组10只,连续灌胃4周后取材。检测血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、尿白蛋白排泄率（UAER）,并观察一般情况、肾脏组织病理（PAS染色）,电镜观察肾足细胞的自噬体情况;Western-Blot法分析 Akt（protein kinaseB）、mTOR（mammalian target of rapamycin）的表达,RT-PCR法检测miR-21以及Akt、mTOR的mRNA表达。结果:1、临床研究:提示早期DN临床多见症状:神疲乏力、口干、浮肿、腰酸、畏寒等均为糖尿病肾病常见症状,脉象多为沉、细脉。治疗早期DN的常用药物:黄芪、当归、丹参、玄参、山药、茯苓、地黄等,当归补血汤中药对“黄芪-当归”为用药之首,用药四气特点提示温、寒为主次,五味特点甘、苦为序,用药归经频率提示脾、肝、肾、心、肺为顺序。2、实验研究:1)实验一（体外细胞实验）:（1）当归补血汤能抑制高糖刺激的肾足细胞增殖,与B组比较有显着性差异（P<0.05）,同时C组效果最为显着,与D、E组比较具有显着性差异（P<0.01）,并且发现48h增殖情况差异性最为显着;（2）足细胞在高糖诱导下凋亡明显,不同药物干预对比提示当归补血汤高剂量组可以明显减缓凋亡,由于高糖刺激后肾足细胞损伤,出现细胞凋亡,给予药物干预后再孵育48h后,各实验组肾足细胞细胞凋亡率统计分析结果为:A组4.79%、B组39.28%、C组13.66%,D组为19.43%、E组为12.82%;（3）电镜观察相对A组,B组肾小球球囊粘连,有肾间质纤维化,自噬体减少,C、D、E组病变均较模型组轻,而且发现自噬体增多。2)实验二（体外细胞实验）:经过高糖干预的肾足细胞自噬标志蛋白表达下降（P<0.05）,其中当归补血汤高剂量组对自噬调控结果提示蛋白标志物Belcin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ明显增加（P<0.05）,其中C组效果最为明显（P<0.01）。3)实验三（体内动物实验）:（1）一般情况是A组SD大鼠动作敏捷灵活,饮食、皮毛及大小便情况均正常;B、C、D、E各组SD大鼠造模约7天开始活动减少,体重开始下降,逐渐消瘦,皮毛失去光泽,部分出现多饮、多食,多尿等表现,3周后上述表现非常突出;分组给药后的C、D、E各组情况较B组好转,给药1周后C、D组动物反应活跃,食量增加明显,毛发开始光亮,多饮改善,体重逐渐增加;（2）生化指标方面,B组和A组比较,也具有统计学意义（P<0.05）,药物干预的C、D、E组均与B组比较有显着性差异（P<0.01）,对比C组,E组降糖效果明显。血尿素氮、肌酐,B组和A组对比,差异有统计学意义（P<0.05）,B组和A组比较,也具有统计学意义（P<0.05）,药物干预的C、D、E组均与B组比较有显着性差异（P<0.01）,有统计学差异;（3）肾PAS染色,A组肾脏基本正常,未见明显系膜增生或毛细血管变性。B组肾脏可见明系膜基质增生明显,局部可见球囊融合,与A组相比肾脏病变明显,且全部有病变,说明造模成功。C、D、E组肾脏可见明显病变,表现为轻重不一的肾小球、肾小管病变,系膜基质轻度增生。PAS 阳阳性区系膜基质面积变化提示与A组比较B组系膜增生明显（P<0.05）,与B组比较,C、D、E各组均能改善系膜增生P<0.05),其中C组效果最好（P<0.01）;（4）电镜观察,相对A组,B组肾小球球囊粘连,有肾间质纤维化,自噬体减少,C、D、E组病变均较模型组,而且发现自噬体增多,三组差别不明显;（5）Nephrin蛋白免疫荧光染色,A组足细胞裂孔蛋白Nephrin在肾小球中沿毛细血管袢呈均匀连续的线状分布,B组与A组比较Nephrin组蛋白表达减少,C、D、E组Nephrin蛋开始增加白表达,由连续线状分布变为弥散的颗粒状分布,各组之间提示与A组比较B组Nephrin蛋白明显（P<0.05）,与B组比较,C、D、E各组均能改善系膜增生（P<0.05）,其中C组效果最好（P<0.01）。4)实验四（体内动物实验）:（1）Akt、mTOR的表达均下降,与B组比较差异有统计学意义（P<0.05）,与D组比较,C组大鼠肾组织Akt、mTOR的表达有统计学意义（P<0.05）。（2）miR-21及Akt、mTOR的mRNA表达,发现B组和A组比较,差异有统计学意义（P<0.05）,C、D、E组均与B组比较有显着性差异（P<0.01）;就下调AktmRNA、mTORmRNA表达而言,发现B组和A组比较,差异有统计学意义（P<0.05）,C、D、E组均与B组比较有显着性差异（P<0.01）。结论:1、运用数据分析软件——中医传承辅助系统（v2.5）,对临床治疗DN方剂的组方用药规律进行分析,说明了治疗早期DN基本病机气虚血不足而瘀及“补气生血”而化瘀治法的综合优势,尤其符合当归补血汤中药对“黄芪胃当归”的用药特点,还可减少或避免西药的副作用,也是进一步实验研究的基础。2、实验研究:1)体外细胞实验提示高糖诱导了肾足细胞的凋亡,而肾足细胞受损是DN的病理基础之一,保护肾功能可以从保护肾足细胞入手,而补气生血法（当归补血汤）含药血清的作用在于干预了自噬体的形成,促进了肾足细胞的自我修复能力,也是维持细胞功能的基础,所以当归补血汤对足细胞保护作用的机制除影响细胞凋亡以外,还和自噬有关,高糖刺激后Beclinl、LC3-Ⅱ表达明显低于正常组,提示自噬活性受到抑制,正常状态下自噬维护细胞内环境稳定的能力下降,给予当归补血汤干预后发现自噬标志蛋白增加,提示自噬活性增强。综上所述,自噬在肾脏病中扮演着重要的角色,或许参与DN的发生、发展,而当归补血汤可能阻止高浓度葡萄糖引起的自噬活性下降,提示其通过自噬延缓DN肾损害的作用。2)体内动物实验提示足细胞的损伤和自噬活性下降,当归补血汤治疗后延迟了肾脏的这种损伤的程度,生化指标改善明显,病理结构变化及Nephrin蛋白变化提示与干预自噬有关,基于此,本研究从生化指标和病理形态上说明:补气生血法（当归补血汤）能明显改善早期DN大鼠肾功能,当归补血汤减少蛋白尿作用略优于格列齐特;同时发现当归补血汤能改善Nephrin的抑制状态,发挥减少蛋白尿作用,同时当归补血汤抑制肾组织miR-21表达,进而调控了病理状态下Akt/mTOR信号通路的失衡,保持了肾足细胞自噬活性,抑制了高糖刺激引起的肾系膜增生,起到延缓肾损害的作用,以上表明补气生血法（当归补血汤）能抑制miR-21的表达,靶向Akt/mTOR信号通路调控了肾足细胞自噬活性,这可能是其治疗治疗早期DN的重要机制之一,也说明补气生血法（当归补血汤）防治DN可能是通过调控自噬实现的,而自噬活性可能是“阴阳自和”理论的微观基础之一。
刘利飞[10]（2018）在《化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠肾组织Notch和Hh信号通路表达的干预作用》文中研究指明目的:研究化瘀通络中药对糖尿病肾脏病（diabetic kidney disease,DKD）大鼠肾脏损伤的干预作用,并探讨其作用机制是否与调控肾组织Notch和Hedgehog（Hh）通路的激活有关。方法:60只健康雄性SD大鼠,随机选取10只作为正常组（C组）,50只为造模组。造模组大鼠给予高糖高脂饲料喂养联合小剂量（35 mg/kg）链脲佐菌素（streptozotion,STZ）腹腔注射以建立糖尿病大鼠模型。成模大鼠随机分为模型组（M组）、化瘀通络中药组（Q组）和厄贝沙坦组（I组）。Q组和I组分别给予相应药物灌胃,C组和M组予相应体积的纯净水灌胃,连续灌胃16周。期间定期监测血糖、饮水量、进食量、尿量、24h尿蛋白定量;于第16周末大鼠称重,麻醉后留取血、尿标本,取右肾称重,留取肾组织标本,采用光镜、电镜进行病理学观察;采用免疫组织化学（immunohistochemistry technique,IHC）、实时定量PCR（Real-time PCR）和蛋白印迹法（Western Blot）对Notch和Hh信号通路中相关蛋白及m RNA表达进行检测。结果:1化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠“瘀血阻络证”的干预作用1.1大鼠一般状况C组大鼠一般状况良好,糖尿病（diabetes mellitus,DM）造模成功后,M、Q、I组大鼠出现不同程度的毛色晦暗、反应迟钝、舌色爪色紫暗等症状,于第12周部分大鼠出现脓疮等并发症。于第12周开始,各治疗组大鼠与模型组相比,上述症状有不同程度减轻。1.2随机血糖和血脂水平与C组相比,各造模组大鼠甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和极低密度脂蛋白胆固醇水平明显升高（P<0.01）。而与M组相比,化瘀通络中药组大鼠甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和极低密度脂蛋白胆固醇水平明显降低（P<0.01）。各造模组大鼠的随机血糖值,组间比较未见统计学差异（P>0.05）。1.3 24小时尿蛋白定量检测结果从干预第4周末开始,与C组对比,各造模组大鼠24小时尿蛋白定量均明显上升（P<0.01）;但于第12周和16周末,与M组对比,Q组和I组大鼠的24小时尿蛋白定量均明显降低（P<0.01）;于第16周末,Q组较I组明显降低（P<0.01）。1.4血凝指标检测结果与C组比较,各造模组大鼠血浆凝血酶原时间（prothrombin time,PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）、凝血酶时间（thrombin time,TT）均明显缩短（P<0.05或P<0.01）,国际标准化比值（international standardization ratio,INR）明显减小（P<0.01）,血浆纤维蛋白原（fibrinogen,FIB）水平明显升高（P<0.01）。与M组比较,Q组大鼠PT、INR和APTT均明显增大（P<0.05或P<0.01）,I组无明显差异（P>0.05）。在TT和FIB方面,各造模组之间无统计学差异（P>0.05）。2化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠肾脏损伤的干预作用2.1肾脏肥大指数比较与C组对比,各造模组大鼠肾脏肥大指数明显升高（P<0.01）;而与M组对比,Q组DKD大鼠的肾脏肥大指数明显降低（P<0.01）。2.2光镜及透射电镜观察结果光镜观察可见各造模组大鼠出现不同程度的肾小球体积增大,肾小囊腔隙狭窄,肾小球基底膜增厚,系膜基质增多,肾小管上皮细胞肿胀;电镜可见基底膜不规则性增厚,足突部分融合;而各治疗组病理改变较模型组有不同程度减轻。2.3肾功能检测与C组对比,各造模组大鼠血肌酐、尿素氮及尿酸水平均显着升高（P<0.01）;与M组对比,Q组大鼠的血肌酐和血尿酸水平显着降低（P<0.01）。3化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠肾组织Notch通路表达的干预作用3.1 Real-time PCR检测肾组织Notch1、Jagged1、HES1和Hey1 m RNA表达与C组对比,各造模组大鼠肾皮质Notch1、Jagged1、HES1和Hey1m RNA表达量明显升高（P<0.01）;与M组对比,Q组和I组大鼠Notch1、Jagged1、HES1和Hey1 m RNA表达量均明显减少（P<0.01）;与I组对比,Q组大鼠HES1 m RNA表达量明显减少（P<0.01）。3.2免疫组化法检测肾组织Notch1、Jagged1、HES1和Hey1蛋白表达Notch1蛋白阳性信号主要定位于肾小球固有细胞、肾小管上皮细胞的胞浆,呈黄色或棕黄色颗粒状;Hey1蛋白阳性信号主要定位于肾小球固有细胞、肾小管上皮细胞的细胞核和/或胞浆;HES1蛋白阳性信号主要定位于肾小球固有细胞、肾小管上皮细胞的细胞核;Jagged1蛋白阳性信号主要定位于肾小管上皮细胞的胞浆。Notch1、HES1、Hey1和Jagged1蛋白于C组大鼠有少量表达,M组表达明显增多,Q组和I组较M组有所减少。3.3 Western Blot检测肾皮质中Notch1、Jagged1、HES1和Hey1蛋白表达与C组对比,各造模组大鼠Notch1、Hey1、HES1和Jagged1蛋白的表达量均明显增多（P<0.01）;与M组对比,Q组和I组大鼠Notch1、Hey1、HES1和Jagged1蛋白的表达量均明显减少（P<0.01）;与I组对比,Q组Hey1和HES1两种蛋白表达量明显减少（P<0.01）4化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠肾组织Hh通路表达的干预作用4.1免疫组化检测各组大鼠肾组织GLI1、SHH、FSP1、LN蛋白结果GLI1、SHH、FSP1和LN蛋白的阳性信号均定位于肾小管上皮细胞的胞浆,呈黄色或棕黄色颗粒状。C组大鼠GLI1、SHH、FSP1、LN蛋白表达微弱,M组大鼠表达明显增多,Q组和I组表达量较M组有所减少。4.2 Real-time PCR检测肾组织GLI1、SHH、FSP1 m RNA表达与C组比较,各造模组大鼠GLI1、SHH、FSP1 m RNA表达均明显增多（P<0.01）;在SHH m RNA表达方面,与M组比较,Q组和I组表达量均降低（P<0.05）,Q组和I组之间无统计学差异（P>0.05）。在GLI1和FSP1 m RNA表达方面,与M组比较,Q组和I组表达量均降低（P<0.01）;与Q组比较,I组表达量增加（P<0.05或P<0.01）。4.3 Western Blot检测各组大鼠肾组织GLI1、SHH、FSP1蛋白结果与C组对比,各造模组大鼠GLI1、SHH、FSP1蛋白的表达量均明显增多（P<0.01）;与M组对比,Q组和I组大鼠GLI1、SHH、FSP1蛋白的表达量均明显减少（P<0.01）;与I组对比Q组GLI1、SHH、FSP1蛋白表达量明显降低（P<0.01）。结论:1.模型大鼠血糖升高后逐渐出现蛋白尿及DKD肾脏病理改变,提示DKD模型复制成功。且模型大鼠存在糖脂代谢紊乱,血液处于高凝状态,出现典型的血瘀症状,符合中医瘀血阻络证改变。2.化瘀通络中药能明显改善DKD大鼠瘀血阻络状态,降低大鼠尿蛋白,减轻肾脏病理损伤,对大鼠肾脏有明显的保护作用。3.化瘀通络中药能够抑制Notch通路Notch1、Jagged1、HES1和Hey1蛋白的高表达,这可能是其减少尿蛋白排泄,减轻肾脏损伤的作用机制之一。4.化瘀通络中药能明显抑制Hh通路的部分活化,从而减少FSP1和LN的表达,这可能是其减轻肾小管损伤和肾间质纤维化的重要途径之一。
二、益气活血中药对肾病大鼠高粘血症的影响及电镜观察（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、益气活血中药对肾病大鼠高粘血症的影响及电镜观察（论文提纲范文）
（1）基于“浊毒理论”探讨加味四君子汤对肾病综合征的治疗（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2中药 |
| 1.1.3 西药 |
| 1.1.4 实验器材 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 检测方法 |
| 1.3.1 24 h尿蛋白定量检测 |
| 1.3.2肾脏病理检测 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组24 h尿蛋白定量比较 |
| 2.2 肾组织病理 |
| 3 讨论 |
| 3.1 NS中医病因病机 |
| 3.2 NS浊毒的定义及致病特点 |
| 3.3 加味四君子汤功效 |
| 3.4 加味四君子汤治疗NS的机制研究 |
（2）补阳还五汤治疗糖尿病及其并发症的研究进展（论文提纲范文）
| 1 临床研究 |
| 1.1 糖尿病视网膜病变 |
| 2.2 糖尿病周围神经病变 |
| 1.3 糖尿病肾病 |
| 1.4 糖尿病下肢血管病变 |
| 1.5 糖尿病足 |
| 1.6 糖尿病心血管病变 |
| 2 实验研究 |
| 2.1 改善血管内皮损伤 |
| 2.2 改善动脉粥样硬化 |
| 2.3 保护缺血组织 |
| 2.3.1 促进血管新生 |
| 2.3.2 改善低灌注 |
| 2.4 改善脂质代谢 |
（3）芪地固肾方及其拆方对膜性肾病大鼠治疗作用的实验研究（论文提纲范文）
| 1 材料与仪器 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 试剂与仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 阳离子化牛血清白蛋白(Cationic bovine serum albumin, C-BSA)溶液配置 |
| 2.2 分组与模型制备 |
| 2.3 干预方法 |
| 2.4 检测指标与方法 |
| 2.5 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 大鼠一般情况 |
| 3.2 各组大鼠24h-UTP |
| 3.3 大鼠血清生化指标 |
| 3.4 肾脏病理观察结果 |
| 4 讨论 |
（4）健脾祛湿和络方上调线粒体自噬减少被动Heymann肾炎大鼠足细胞调亡的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一、线粒体功能障碍与肾小球足细胞损伤 |
| 1 线粒体的生物学功能 |
| 2 线粒途径介导的足细胞损伤 |
| 3 足细胞相关的线粒体自噬信号通路 |
| 4 展望 |
| 5 参考文献 |
| 综述二、特发性膜性肾病的中医药治疗及研究进展 |
| 1 特发性膜性肾病的中医概念 |
| 2 特发性膜性肾病的辨治思路 |
| 3 中医药治疗特发性膜性肾病的临床研究 |
| 4 基于足细胞损伤中药治疗特发性膜性肾病的机制研究 |
| 5 展望 |
| 6 参考文献 |
| 第二部分 健脾祛湿和络方对被动Heymann大鼠的肾脏保护作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 指标留取 |
| 4 检测指标及方法 |
| 5 统计方法 |
| 结果 |
| 1 大鼠一般情况比较 |
| 2 生化指标比较 |
| 3 肾组织病理形态比较 |
| 讨论 |
| 1 实验动物模型的选择与鉴定 |
| 2 健脾祛湿和络方的组方依据 |
| 3 健脾祛湿和络方的肾脏保护作用 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 第三部分 健脾祛湿和络方对被动Heymann肾炎大鼠线粒体功能障碍及足细胞凋亡的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 指标留取 |
| 4 检测指标及方法 |
| 5 统计方法 |
| 结果 |
| 1 线粒体损伤情况比较 |
| 2 肾小管、肾小球细胞凋亡率比较 |
| 3 足细胞损伤及凋亡情况比较 |
| 讨论 |
| 1 被动Heymann肾炎大鼠存在足细胞线粒体功能障碍 |
| 2 健脾祛湿和络方对线粒体及足细胞凋亡的影响 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 第四部分 健脾祛湿和络方对PINK1/Parkin介导线粒体自噬通路的调控作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 指标留取 |
| 4 检测指标及方法 |
| 5 统计方法 |
| 结果 |
| 1 各组足细胞线粒体自噬相关蛋白荧光共定位情况的比较 |
| 2 Western bolt检测PINK1/Parkin通路相关自噬蛋白表达 |
| 3 Western bolt检测凋亡相关的线粒体蛋白 |
| 讨论 |
| 1 健脾祛湿和络方对PINK1/Parkin线粒体自噬信号通路的调控 |
| 2 健脾祛湿和络方上调线粒体自噬减少足细胞凋亡 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 全文总结 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 在校期间的主要研究成果 |
| 中医药科技查新报告书 |
（5）复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及炎症反应的影响（论文提纲范文）
| 中英文缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1.祖国医学对蛋白尿的研究 |
| 1.1 古代研究 |
| 1.2 现代研究 |
| 1.3 蛋白尿的治疗 |
| 2.现代医学对炎症反应及蛋白尿的认识 |
| 2.1 现代医学对炎症反应的认识 |
| 2.2 现代医学对蛋白尿的认识 |
| 材料与方法 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 1.4 主要实验仪器 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 实验环境设置 |
| 2.2 模型建立与实验分组 |
| 2.3 给药灌胃干预 |
| 2.4 取材 |
| 2.5 相关指标检测与步骤 |
| 2.6 统计方法 |
| 结果 |
| 1.大鼠的一般情况 |
| 2.大鼠24h-UPr的变化情况 |
| 3.大鼠生化指标的变化情况 |
| 3.1 大鼠血清Scr与BUN的变化情况 |
| 3.2 大鼠血清TC的变化情况 |
| 3.3 大鼠血浆ALB的变化情况 |
| 3.4 大鼠血清ALT与AST的变化情况 |
| 4.透射电镜结果 |
| 5.免疫组化检测结果 |
| 5.1 肾组织中IL-6的测定 |
| 5.2 肾组织中TGF-β1的测定 |
| 6.荧光定量qPCR检测结果 |
| 讨论 |
| 1.关于肾性蛋白尿模型、实验大鼠、给药途径及给药剂量的选择 |
| 2.关于对照药物的选择 |
| 3.复方青龙衣胶囊的组方、作用及机理分析 |
| 3.1 改善大鼠的一般状态 |
| 3.2 降低24h-UPr |
| 3.3 升高血清ALB,降低血清TC |
| 3.4 减轻肾脏病理损伤 |
| 3.5 降低IL-6、TGF-β1的表达及含量 |
| 4.存在的问题与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
| 个人简历 |
（6）当归芍药散对NS幼鼠FN、LN、Col-Ⅳ的影响（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1.小儿NS的古代文献研究概况 |
| 1.1 病名追溯 |
| 1.2 分类方法 |
| 1.3 病因病机 |
| 1.4 辨证要点 |
| 1.5 治法治则 |
| 2.现代中医学对NS的研究概况 |
| 2.1 辩证分型 |
| 2.2 名家论治 |
| 3.现代中药学对NS的研究概况 |
| 3.1 单味中药对NS的研究进展 |
| 3.2 中成药对NS的研究进展 |
| 4.西医学对NS的研究概况 |
| 4.1 定义 |
| 4.2 病因 |
| 4.3 临床表现 |
| 4.4 西药治疗 |
| 材料与方法 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 实验试剂 |
| 1.4 实验器材 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 实验分组 |
| 2.2 制备模型 |
| 2.3 药物灌胃 |
| 2.4 观察指标 |
| 2.5 统计分析 |
| 结果 |
| 1.一般情况 |
| 2.幼鼠24h尿蛋白定量水平变化 |
| 3.幼鼠生化指标水平变化 |
| 3.1 幼鼠ALB变化 |
| 3.2 幼鼠TCH变化 |
| 3.3 幼鼠TG变化 |
| 4.幼鼠FN、LN、Col-Ⅳ水平变化 |
| 5.光镜下肾组织变化 |
| 6.电镜下肾小球变化 |
| 讨论 |
| 1.微小病变型NS模型制备方案的选择 |
| 2.当归芍药散与NS |
| 2.1 当归芍药散中单味药治疗NS的药理学依据 |
| 2.2 当归芍药散组方治疗NS的药理学分析 |
| 2.3 当归芍药散治疗NS的中医中药学原理 |
| 3.ECM与NS |
| 3.1 FN与NS |
| 3.2 LN与NS |
| 3.3 Col-Ⅳ与 NS |
| 3.4 FN、LN、Col-Ⅳ与 NS |
| 4.当归芍药散与FN、LN、Col-Ⅳ |
| 5.不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
| 个人简介 |
（7）补肾活血祛风中药复方对阿霉素肾病大鼠的实验研究及基于p38MAPK信号转导通路研究治疗阿霉素肾病大鼠的分子机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词表 |
| 前言 |
| 第一部分 补肾活血祛风中药复方对阿霉素肾病大鼠的实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验药物和试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 阿霉素肾病大鼠模型制备及分组 |
| 2.2 实验药物溶液的制备方法 |
| 2.3 实验给药方法 |
| 2.4 实验标本采集 |
| 2.5 检测指标和方法 |
| 2.5.1 大鼠一般情况观察 |
| 2.5.2 大鼠24h尿蛋白检测 |
| 2.5.3 大鼠血清生化指标 |
| 2.5.4 大鼠肾脏组织病理结构观察 |
| 2.6 统计学处理 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 大鼠一般情况 |
| 3.2 24h尿蛋白情况 |
| 3.3 大鼠血清生化指标 |
| 3.4 各组大鼠肾脏病理变化 |
| 3.4.1 HE染色肾组织病理光镜观察 |
| 3.4.2 电镜观察 |
| 4 讨论 |
| 4.1 关于模型的建立和认识 |
| 4.2 现代医学对肾病综合征的认识 |
| 4.3 祖国医学对肾病综合征的认识 |
| 4.4 补肾活血祛风中药复方评价 |
| 4.5 补肾活血祛风中药复方对阿霉素肾病大鼠的干预作用 |
| 第二部分 基于p38MAPK信号转导通路研究补肾活血祛风中药复方治疗阿霉素肾病大鼠分子机制 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验药物和试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 阿霉素肾病大鼠模型制备及分组 |
| 2.2 实验药物溶液的制备方法 |
| 2.3 实验给药方法 |
| 2.4 实验标本采集 |
| 2.5 检测指标和方法 |
| 2.5.1 免疫组织化学法检测肾组织p-p38MAPK蛋白表达 |
| 2.6 统计学处理 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 PCR检测各组大鼠肾组织p38MAPKm RNA表达量结果 |
| 3.2 各组大鼠肾组织免疫组化法检测p38MAPK的实验结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 补肾活血祛风中药复方调控阿霉素肾病大鼠肾组织p38MAPK信号转导通路分子机制的探讨 |
| 4.2 p38MAPK信号转导通路激活后肾脏损害的关系 |
| 4.3 抑制p38MAPK信号转导通路表达与肾脏损害的关系 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 一、中医药治疗肾病综合征的临床研究进展 |
| 1.肾病综合征的中医病名 |
| 2.肾病综合征的中医病因病机 |
| 3.肾病综合征中医证型分布 |
| 4.现代中医药治疗肾病综合征的进展 |
| 二、p38MAPK信号通路与肾病综合征等肾脏疾病关系的研究进展 |
| 1.p38MAPK信号通路的简介 |
| 2.p38MAPK信号通路与肾病综合征的关系 |
| 3.p38MAPK信号通路与其他肾脏疾病的关系 |
| 4.小结 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间公开发表的文章 |
（8）糖肾康颗粒对HHcy-DKD足细胞标志蛋白Nephrin、PCX影响的临床及实验研究（论文提纲范文）
| 临床研究 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 1 前言 |
| 2 研究方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 展望 |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 1 前言 |
| 2 研究方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 足细胞标志蛋白损伤与 DKD 关系及其中医药干预作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
（9）基于miR-21靶向Akt/mTOR信号通路探讨补气生血法调控自噬防治早期糖尿病肾病临床和实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1 补气生血法 |
| 2 现代医学对早期DN及自噬的认识 |
| 3 中医药学对早期DN及自噬的认识 |
| 4 总体思路及探究问题 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究 基于中医辅助传承系统的早期糖尿病肾病临床用药规律分析 |
| 1 方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 当归补血汤含药血清对高糖作用下肾足细胞增殖、凋亡及自噬的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 当归补血汤含药血清对高糖作用下肾足细胞自噬相关蛋白的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 当归补血汤对早期DN大鼠肾功能及足细胞自噬的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 当归补血汤干预miR-21靶向Akt/mTOR信号通路对早期DN大鼠足细胞自噬活性影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 附录 |
| 一、文献综述 |
| 参考文献 |
| 二、在校期间发表的论文情况 |
| 致谢 |
（10）化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠肾组织Notch和Hh信号通路表达的干预作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠“瘀血阻络证”的干预作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠肾脏损伤的干预作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠肾组织Notch通路表达的干预作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠肾组织Hh通路表达的干预作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 中医药对糖尿病肾脏病治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、益气活血中药对肾病大鼠高粘血症的影响及电镜观察（论文参考文献）
- [1]基于“浊毒理论”探讨加味四君子汤对肾病综合征的治疗[J]. 陈虹,陈敏,郑京. 中国医药科学, 2021(23)
- [2]补阳还五汤治疗糖尿病及其并发症的研究进展[J]. 韩云鹏,谢春光. 四川中医, 2021(10)
- [3]芪地固肾方及其拆方对膜性肾病大鼠治疗作用的实验研究[J]. 高海娟,雷根平,冯喆,李静静,李小会,应小平,于航星,董盛,王婷,吴瑾. 时珍国医国药, 2021(07)
- [4]健脾祛湿和络方上调线粒体自噬减少被动Heymann肾炎大鼠足细胞调亡的机制研究[D]. 王新慧. 中国中医科学院, 2021
- [5]复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及炎症反应的影响[D]. 王媛媛. 黑龙江省中医药科学院, 2021
- [6]当归芍药散对NS幼鼠FN、LN、Col-Ⅳ的影响[D]. 张承杰. 黑龙江省中医药科学院, 2020(02)
- [7]补肾活血祛风中药复方对阿霉素肾病大鼠的实验研究及基于p38MAPK信号转导通路研究治疗阿霉素肾病大鼠的分子机制[D]. 唐建. 成都中医药大学, 2020(02)
- [8]糖肾康颗粒对HHcy-DKD足细胞标志蛋白Nephrin、PCX影响的临床及实验研究[D]. 徐莎莎. 安徽中医药大学, 2020(03)
- [9]基于miR-21靶向Akt/mTOR信号通路探讨补气生血法调控自噬防治早期糖尿病肾病临床和实验研究[D]. 叶太生. 湖北中医药大学, 2019(03)
- [10]化瘀通络中药对糖尿病肾脏病大鼠肾组织Notch和Hh信号通路表达的干预作用[D]. 刘利飞. 河北医科大学, 2018(12)