一、针刺防治环磷酰胺对大鼠肝肾超微结构损害的观察(论文文献综述)
席蕴文[1](2021)在《赤箭调节免疫、减肥、降脂、降糖作用研究》文中研究说明本论文研究内容为中央本级重大增减支“名贵中药资源可持续利用能力建设项目-赤箭保健功效”课题一部分。天麻作为大宗中药材,《中国药典》2020年版收载天麻为兰科植物天麻Gastrodia ealta B1.的干燥块茎,具有息风止痉,平抑肝阳,祛风通络的功能。现代药理研究表明,天麻具有抗惊厥、抗眩晕、抗癫痫、催眠、镇痛、改善学习记忆力、抗抑郁、降血糖、降血脂、抗血凝、抗血栓、保护神经细胞、抑菌抗炎、提高免疫力、调节肠胃、减少肝脏损害、抗氧化性、抑制肿瘤细胞形成等作用。其地上茎杆部分(赤箭)目前多数废弃,其是否具有药用价值和保健功效有待研究。我们查阅了古籍文献,对赤箭和天麻均有记载,如东汉时期《神农本草经》载赤箭无天麻,以“其茎如箭杆”,赤色而得名,列为上品,曰“久服益气力,长阴,肥健,轻身、增年”。宋、元时期和明初将赤箭和天麻分为两味药,认为天麻药用部位是地下块茎,而赤箭用药部位是地上部分茎杆。宋代寇宗奭《本草衍义》记载:“天麻用根,须别药相佐使,然后见其功,仍须加而用之。苗则赤箭也。赤箭,天麻苗也。然与天麻治疗不同,故后人分之为二。”宋代科学家沈括云:“古方用天麻者不用赤箭,用赤箭者不用天麻。所用古方中天麻性效,两者均有之。”明代《本草纲目》云“赤箭用苗,有自表入里之功,天麻用根,有自内达表之理。”清代以后,天麻茎杆部位很少作为一味中药在使用。查阅现代文献,化学成分研究表明天麻地上部分天麻素的含量远比地下部分高,从天麻的地上部分分离得到21个化合物,但天麻地上部分药理活性研究未见报道。本文从化学成分、调节免疫、预防肥胖、预防高血脂、降血糖方面研究了赤箭(天麻地上部分)的作用,并比较了赤箭与天麻的差异,为赤箭的进一步研究和开发提供依据。目的:比较赤箭和天麻中腺苷、天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷B和A的成分含量;比较赤箭水提液和天麻水提液调节免疫功能、减肥、降脂、降糖和对肠道菌群的影响,评价赤箭进一步研究和开发的可行性。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC)测定6种成分的含量,流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~4 min,0.5%B;4~5 min,0.5%~2%B;5~10 min,2%~15%B;10~12 min,15%~20%B;12~15 min,20%~95%B;15~17 min,95%B;17~17.5 min,95%~0.5%B;17.5~20 min,0.5%B),流速 0.5 mL·min-1,检测波长 270 nm。免疫功能评价采用环磷酰胺致小鼠免疫功能低下模型,测定廓清指数、校正廓清指数及外周血象,以及T淋巴细胞增殖能力;并基于16S rDNA技术测定肠道菌群,进行生物信息学分析,对赤箭水提液和天麻水提液进行药理活性比较。预防减肥功能评价采用高脂饲料建立大鼠肥胖模型,分为正常对照组、模型对照组、阳性对照药奥利司他胶囊组、中药对照荷叶水提液组、天麻粉组、天麻水提液高、低剂量组、赤箭水提液高、低剂量组。自实验开始,正常对照组给予基础饲料,模型对照组、实验组动物每日给予等量的高脂饲料,饲料给予量与基础饲料相同。实验组灌胃给予不同剂量的受试药物,连续给予45天,实验期间每周称体重2次。实验结束检测各组大鼠的体重、Lee’s指数、肝体比、脂体比;检测血清中总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、甘油三酯(TG)、胰脂肪酶(PL)、脂联素(ADP)的含量;取盲肠内容物,用16S rDNA技术进行肠道菌群分析。预防高血脂功能评价采用高脂饲料建立大鼠高血脂模型,分为正常对照组、模型对照组、阳性对照药阿伐他汀组、血脂康组、天麻粉组、天麻水提液高、低剂量组、赤箭水提液高、低剂量组。自实验开始,正常对照组给予基础饲料,模型对照组、实验组动物每日给予等量的高脂饲料,饲料给予量与基础饲料相同。实验组灌胃给予不同剂量的受试药物,连续给予60天。每周称体重1次。实验结束后,检测并计算各组大鼠的体重、肝体比、脂体比;检测血清中TCHO、HDLC、LDLC、TG等指标,以及血清中肝脂酶(HL)、脂蛋白脂酶(LPL)的含量,并计算动脉硬化指数(动脉硬化指数=(TCHO-HDLC)/HDLC),测定肝匀浆中的TCHO、TG;取盲肠内容物,用16S rDNA技术进行肠道菌群分析。降血糖功能评价采用链脲佐菌素腹腔注射建立小鼠糖尿病模型,造模72 h后,测定小鼠空腹血糖,选取空腹血糖值大于10.0 mmol·L-1的小鼠作为造模成功小鼠。将造模成功小鼠按血糖值随机分为模型组、阳性对照药二甲双胍组、天麻水提液高、低剂量组、赤箭水提液高、低剂量组。灌胃给药4周。实验前和实验过程中每周1次称体重和测定空腹血糖(FBG),结束前一周进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT),实验结束时采血,分离血清,测定血清中 TCHO、HDLC、LDLC、TG。结果:赤箭粉末、醇提液中腺苷、天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷B和A这六种成分含量总和分别高于天麻粉末、醇提液,赤箭水提液和天麻水提液六种成分含量总和相近,且赤箭粉末和天麻粉末中天麻素和对羟基苯甲醇的总量均符合《中华人民共和国药典》2020年版的相关要求。免疫功能实验结果显示,与空白组比较,赤箭水提液中剂量组(10 g.kg-1)、天麻水提液中、低剂量组(10,5 g.kg-1)可明显增加免疫功能低下小鼠的廓清指数;赤箭水提液、天麻水提液高剂量组(20 g.kg-1)均可明显增高外周血中红细胞和红细胞压积水平。肠道菌群研究显示,与空白组比较,在门水平上,赤箭水提液和天麻水提液增加拟杆菌门的相对丰度,降低厚壁菌门的相对丰度;在属水平上,赤箭水提液、天麻水提液均可增加PrevotellaaceaeUCG-001 和 RuminococcaaceaeUCG-005 的相对丰度,降低厌氧棍状菌属,unclassifiedfErysipelotrichaceae 和 CandidatusStoquefichus 的相对丰度,这些肠道菌与免疫系统、细胞增殖、调节代谢等相关。预防肥胖实验结果显示,与模型组相比,天麻粉组大鼠的终末体重显着降低;与模型组相比,赤箭水提液低剂量组、天麻水提液低剂量组可降低PL的活力,从而降低脂类在体内的水解吸收,提示赤箭和天麻水提液可能通过抑制PL活力,从而对肥胖治疗产生积极作用。在门水平上,天麻粉、赤箭水提液和天麻水提液降低了厚壁菌门的相对丰度,在属水平上,赤箭水提液、天麻水提液和天麻粉降低毛螺菌科norankfLachnospiraceae属的相对丰度;赤箭水提液和天麻粉降低瘤胃菌科unclassifiedfRuminococcaceae属的相对丰度;天麻水提液和天麻粉降低有害菌韦荣球菌科norankfErysipelotrichaceae属的相对丰度。预防高血脂实验结果显示,与正常组相比,模型组肝组织中的TCHO含量明显升高;与模型组相比,赤箭水提液高剂量组、天麻水提液低剂量组和天麻粉末组可明显降低肝组织中TCHO含量;赤箭水提液高剂量组可升高血清中HL含量,提示赤箭水提液、天麻水提液和天麻粉末具有一定的降血脂功效。在属水平上,赤箭水提液和天麻水提液可降低有害菌艾克曼菌属(Akkermaansia)的相对丰度;赤箭水提液提高有益菌普雷沃氏菌科(unclassifiedfPrevotellaceae)的相对丰度;天麻水提液提高有益菌异杆菌属(Allobaculum)的相对丰度。降血糖实验结果显示,与模型组相比,赤箭和天麻水提液组FBG、OGTT、血清中TCHO、HDLC、LDLC、TG无统计学差异。提示赤箭和天麻水提液在所试剂量范围内对链脲佐菌素致小鼠糖尿病未表现出降血糖作用。结论:赤箭粉末、醇提液、水提液所测腺苷、天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷B和A总量高于或者接近于天麻相应提取液;调节免疫、减肥、降脂实验中,赤箭水提液与天麻水提液药理活性相似;肠道菌群研究发现,赤箭水提液和天麻水提液均可以降低有害菌韦荣球菌科(Erysipelotrichaceae)、艾克曼菌属(Akkermansia)的相对丰度,提高有益菌雷沃氏菌科(Prevotellaceae)的相对丰度;赤箭有待进一步研究。
闵潇[2](2020)在《益精方调控慢性缺氧诱导的睾丸Leydig细胞凋亡治疗LOH的机制研究》文中研究说明研究目的:1.研究症状性迟发性性腺功能减退症(symptomatic late onset hypogonadism,sLOH)患者的中医体质证候。2.研究人体慢性间歇性缺氧与sLOH之间的相关性。3.构建及评判慢性间歇性缺氧诱发迟发性性腺功能减退症(late onsethypogonadism,LOH)动物模型。4.传承名老中医经验,研究以补肾活血为主要治则的“益精方”对慢性间歇性缺氧诱导的LOH模型大鼠治疗效果;从睾丸间质细胞(Leydig)凋亡、睾丸病理组织学改变及Leydig细胞超微结构改变探讨其作用机制。研究方法:第一部分:采用横断面研究的方法,以自填问卷的形式,收集在中国中医科学院广安门医院男科就诊的伴有鼾眠表现的sLOH患者的病例资料。采用Epworth嗜睡量表、STOP-bang问卷测评嗜睡状态,采用精简版AMS(cAMS)筛查量表测评LOH症状,中医体质分类与判定表测评中医体质,测定静脉血男性激素和乳酸。运用Pearson相关性分析,对血乳酸、性激素与sLOH症状、嗜睡状态进行相关性分析。第二部分:运用Attendor动物气体控制系统(Pro版),模拟慢性间歇性低氧模式,对50只40周龄的退役SD种鼠进行每日4小时,连续30天的低氧干预,设为模型组;设10只40周龄的退役SD种鼠为对照组;设10只8周龄的SD大鼠为正常组。在造模第15天、30天时,随机选取模型组中的10只大鼠,与对照组、正常组大鼠,采血,进行血清总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)和乳酸检测。在造模第30天时,随机选取模型组中10只大鼠与对照组、正常组大鼠,进行大鼠悬尾实验和大鼠强迫游泳实验;结合血清TT、FT和乳酸水平评估造模效果。第三部分:选取造模成功的32只LOH模型大鼠,随机分成4组:模型组,益精方高、中、低剂量组,每组8只大鼠。继续运用Attendor动物气体控制系统(Pro版)对大鼠进行慢性间歇性低氧的干预,为期4周,同时灌胃4周。模型组大鼠按体重灌胃蒸馏水。低剂量组予以0.324g/mL的益精方水煎剂;中剂量组予以0.75g/mL的益精方水煎剂;高剂量组予以1.5g/mL的益精方水煎剂。4周结束后,采血,ELISA法测血清TT、FT;比色分析法测血乳酸值;将大鼠断颈处死,计算大鼠睾丸指数;细胞流式术检测睾丸Leydig细胞凋亡率;Western印迹检测睾丸组织Caspase-3、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测睾丸组织Caspase-3、Bcl-2、Bax的mRNA表达水平;分别以光学显微镜和透射电子显微镜观察睾丸病理组织学改变与超微结构的变化。研究结果:第一部分:sLOH患者排名前三的中医体质证候为气虚、痰湿、血瘀。41例sLOH患者完成了男性激素和乳酸检测,其中20例乳酸水平正常,21例乳酸水平高于正常,异常乳酸值范围为2.15-3.18(2.60±0.29)mmol/L,sLOH患者血乳酸异常比例约为51%。其中乳酸水平正常者气虚为主,乳酸水平增高者痰湿为主,但无论乳酸水平正常与否,血瘀均是sLOH患者比较突出的体质证候。Pearson相关性分析显示:Epworth评分与STOP-bang评分之间呈正向的强相关,r=0.681;cAMS评分与Epworth评分之间呈正向的弱相关,r=0.394;cAMS评分与STOP-bang评分之间呈正向的弱相关,r=0.311。Epworth评分与cAMS性功能症状分呈正向弱相关,r=0.317;Epworth评分与cAMS自主神经紊乱症状分呈正向中等强度相关,r=0.531;Epworth评分与cAMS心理和躯体症状分呈正向中等强度相关,r=0.460;STOP-bang评分与cAMS性功能症状分呈正向弱相关,r=0.357;STOP-bang评分与cAMS自主神经紊乱症状分呈正向弱相关,r=0.266;STOP-bang评分与cAMS心理和躯体症状分呈正向中等强度相关,r=0.434。乳酸正常sLOH组与乳酸升高sLOH组两组间,在年龄、Epworth嗜睡量表评分、STOP-bang问卷评分、cAMS评分、男性激素各项指标及TSI指数上的差异无统计学意义(P>0.05);缺氧高中低风险3组,年龄在缺氧中风险组和缺氧低风险组之间存在统计学差异(P<0.05),血雄烯二酮在缺氧高风险组和缺氧低风险组之间存在统计学差异(P<0.05),其余指标在各组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。第二部分:与正常组和对照组相比,模型组大鼠造模第15天、第30天时2次检测的血清TT、FT水平均显着下降(P<0.05),差异具有统计学意义。与正常组和对照组相比,模型组大鼠2次检测的血乳酸水平均显着增高(P<0.05),差异具有统计学意义。造模第30天时悬尾实验:与正常组大鼠相比,对照组和模型组6min内不动时间均明显延长(P<0.05),具有统计学意义;模型组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。游泳实验:与正常组和对照组相比,模型组大鼠游泳至力竭的时间均明显缩短(P<0.05),差异具有统计学意义。依据LOH动物模型判定办法,以慢性间歇性缺氧为干预手段进行LOH动物模型构建,造模成功率为68%,造模途中死亡率为32%。第三部分:血TT、FT水平:与模型组相比,益精方低、中、高剂量组大鼠血TT、FT水平均显着增高(P<0.05),呈剂量依赖性。血乳酸水平:与模型组相比,益精方低、中、高剂量组大鼠血乳酸水平均显着下降(P<0.05),呈剂量依赖性。睾丸Leydig细胞凋亡率:与模型组相比,益精方中、高剂量组大鼠Leydig细胞凋亡率均显着下降(P<0.01),具有显着统计学意义;益精方低剂量组与模型组相比,P>0.05,无明显统计学意义。Caspase-3蛋白表达水平方面:与模型组相比,低、中、高剂量组均显着下调(P<0.01),低剂量组VS中剂量组,中剂量组VS高剂量组,P均>0.05;低剂量组VS高剂量组,P<0.01。Bcl-2蛋白表达水平方面:与模型组相比,益精方高剂量组Bcl-2蛋白表达水平显着上调(P<0.05),差异具有统计学意义;低、中剂量组VS模型组,P均>0.05,低剂量组VS高剂量组,P<0.05。Bax蛋白表达水平方面:与模型组相比,益精方中、高剂量组Bax蛋白表达水平均显着下调(P<0.01),差异具有显着统计学意义。低剂量组VS模型组,P>0.05;低剂量组VS高剂量组,P<0.05;中剂量组VS高剂量组,P>0.05。Caspase-3的mRNA表达水平方面:与模型组相比,低、中、高剂量组Caspase-3的mRNA表达水平均显着下调(P<0.05),差异具有统计学意义;低剂量组VS高剂量组(P<0.01),其余剂量组之间P均>0.05。Bcl-2的mRNA表达水平方面:与模型组相比,益精方高剂量组Bcl-2的mRNA表达水平显着上调(P<0.05),差异具有统计学意义;中、低剂量组VS模型组(P>0.05);低剂量组VS高剂量组(P<0.05)。Bax的mRNA表达水平方面:与模型组相比,益精方中、高剂量组Bax的mRNA表达水平均显着下调(P<0.01),差异具有显着统计学意义;低剂量组VS高剂量组(P<0.05),其余剂量组之间P均>0.05。光学显微镜下睾丸Leydig细胞数量:与模型组相比,益精方低、中、高剂量组均有升高,但低、中、高剂量组组间差异不大。发生凋亡改变的Leydig细胞数量,益精方低、中、高剂量组均少于模型组。益精方低、中、高剂量组Leydig细胞形态优于模型组,其中高、中剂量组Leydig细胞形态趋近正常。透射电子显微镜下,4组大鼠的睾丸Leydig细胞超微结构在脂滴形成上有所差异。研究结论:1.在伴有鼾眠表现的sLOH患者中存在血乳酸异常升高;sLOH患者缺氧的风险越高,其LOH症状越重;缺氧对sLOH患者自主神经紊乱症状、心理和躯体症状的影响较明显,对男性激素的影响相对不明显。提示慢性间歇性缺氧可能是LOH的重要潜在危险因素。sLOH患者的中医体质证候以气虚、痰湿、血瘀为主,其中乳酸水平正常者倾向于气虚,乳酸水平增高者倾向于痰湿。提示肾气虚夹痰湿、血瘀可能是sLOH较为关键的中医病因病机。2.增龄与慢性间歇性缺氧,都是大鼠血TT、FT水平下降的危险因素;增龄加上缺氧,较单一的增龄因素,对大鼠血TT、FT水平的影响更为显着。以慢性间歇性缺氧为干预手段进行LOH动物模型构建,造模成功率较高,造模方法切实可行。3.益精方能明显提高慢性间歇性缺氧诱导的LOH模型大鼠血TT、FT水平,降低血乳酸水平,降低睾丸Leydig细胞的凋亡率。其可能的作用机制在于:1)下调LOH模型大鼠睾丸组织中的Caspase-3、Bax的基因和蛋白表达,上调Bcl-2的基因和蛋白表达,调控了睾丸Leydig细胞的凋亡;2)改善LOH模型大鼠氧代谢,减轻乳酸蓄积,恢复雄激素合成睾丸内调节的正常环境,促进睾丸Leydig细胞分泌功能。
晏斌[3](2020)在《灵归方对奥硝唑诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究》文中进行了进一步梳理背景:2010年世界卫生组织(World Health Organization,WHO)估计全世界大约有4850万对夫妇(8~12%)患有不孕不育,其患病率因国家和地区而异,男性因素所致生育问题的分布在20%~70%之间,精子数量少、形态异常、运动能力差是与男性因素相关的常见原因。随着世界范围内男性不育症的不断增多,它已成为一个越来越引起临床重视的健康问题。目前西医治疗男性不育症主要方式为药物治疗、手术及辅助生殖技术,但是存在疗效不确定、造成侵入性损害、价格高,或伴随不良反应和其他高风险的问题,使得男性不育症患者寻求其他治疗策略。随着中医药研究的发展,中医药成为男性不育症治疗中重要的方法之一,提供了安全、有效的治疗选择。灵归方为中国中医科学院西苑医院男科经验处方,由仙灵脾、当归、熟地黄、山药等13味药组成,具有补肾、活血的功效,前期临床研究发现灵归方有提高弱精子症患者精子活动率的作用,但其具体作用机制不明,故设计本研究以阐明灵归方改善精子活动率的可能机制。实验分为两部分,第一部分为探索使用奥硝唑(Ornidazole,ORN)制备弱精子症动物模型,观察不同剂量(200,400,800 mg/(kg·d))的ORN对于雄性SD大鼠精子浓度、活动率的影响;第二部分为保护性实验,设置对照组、模型组、灵归方组、左卡尼汀组,综合评价灵归方对弱精子症模型大鼠精液质量、附睾左旋肉碱(L-carnitine,LC)含量、附睾肉碱转运蛋白(Carnitine/organiccation transporter2,OCTN2)的蛋白及mRNA表达水平的影响,并检测灵归方干预后大鼠血清性激素水平,附睾SOD、GSH-Px活性以及MDA含量,光学显微镜观察睾丸、附睾组织病理学变化。第一部分:ORN诱导弱精子症模型大鼠的研究目的:观察不同剂量的ORN灌胃对雄性SD大鼠精液质量的影响,以制备弱精子症模型大鼠。方法:将40只雄性SD大鼠进行编号,使用电子秤称重并详细记录。按照随机数字表法将其分为对照组、模型1组、模型2组、模型3组各10只,具体给药方法为:模型 1 组:200mg/(kg·d)ORN;模型 2 组:400mg/(kg·d)ORN;模型 3组:800mg/(kg·d)ORN;对照组:1ml/100g0.5%CMC-Na(由于 ORN 水溶性差,故采用CMC-Na溶解后灌胃)。按照1ml/100g体重进行给药,连续灌胃20天,观察大鼠一般情况变化,在末次给药24小时后用5%水合氯酸溶液(0.7ml/100g)进行腹部注射麻醉,水合氯酸溶液使用剂量为按照0.4ml/100g体质量进行计算,大鼠麻醉后,称体重,取睾丸及附睾分别称重,计算睾丸、附睾脏器系数,并取大鼠左侧附睾尾进行精子浓度和活动率(PR+NP级精子百分率)分析。结果:1.在实验进行过程中,由于灌胃操作导致模型3组1只大鼠死亡。对照组一般状态良好,饮食正常,体毛浓密,且有光泽,大小便正常,活动量大,较活跃,存在笼内打斗现象;与对照组比较,模型1组上述各项征象无显着下降,饮食无明显减少,饮水量相当,体毛正常,光泽度稍差,活动量未见减少,存在笼内打斗现象,精神可;模型2组较对照组上述征象有下降,饮食量减少,体毛较稀疏,体毛光泽度不及模型1组,活动量以及打斗现象无明显减少,精神尚可;模型3组较对照组上述指标有显着下降,饮食量减少,体毛稀疏,体毛光泽度明显降低且不及模型2组,活动量少,打斗现象减少,精神差。2.与对照组比较,模型1组大鼠体重,睾丸、附睾重量,以及睾丸、附睾脏器系数变化差异均无统计学意义(P>0.05);模型2组体重,睾丸、附睾重量以及睾丸、附睾脏器系数有下降趋势,但无统计学差异(P>0.05);模型3组体重,睾丸、附睾重量以及睾丸、附睾脏器系数均下降,有统计学差异(P<0.05)。3.与对照组比较,模型1组与模型2组精子浓度改变无统计学差异(P>0.05),模型3组精子浓度下降(P<0.01);与对照组比较,模型1组(PR+NP)级精子浓度及精子活动率无统计学改变(P>0.05),模型2组、模型3组(PR+NP)级精子浓度及精子活动率均下降(P<0.01)。结论:1.200 mg/(kg·d)ORN灌胃20天对于大鼠体重,睾丸、附睾重量及脏器系数,精子浓度、(PR+NP)级精子浓度及活动率均无影响。2.400 mg/(kg·d)ORN灌胃20天,对大鼠精子浓度无影响,但可导致(PR+NP)级精子浓度及精子活动率下降,可用于制备弱精子症模型大鼠。3.800 mg/(kg·d)ORN灌胃20天可导致大鼠精子浓度、(PR+NP)级精子浓度及活动率均明显下降,可用于制备少弱精子症模型大鼠。第二部分:灵归方对ORN诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究实验一:灵归方对ORN诱导的弱精子症模型大鼠附睾LC相关通路的影响目的:观察灵归方对ORN诱导弱精子症模型大鼠精液质量、附睾LC含量,附睾OCTN2蛋白及mRNA表达水平的影响,揭示ORN诱导弱精子症模型大鼠附睾能量代谢障碍以及灵归方改善弱精子症大鼠附睾功能的相关机制。方法:将40只雄性SD大鼠进行编号,使用普通电子秤称重并详细记录。按照随机数字表法将其分为对照组、模型组、左卡尼汀组、灵归方组,每组各10只,具体给药方法为:对照组:1ml/100g 0.5%CMC-Na;模型组:400mg/(kg·d)ORN;左卡尼汀组:LC 100mg/(kg·d)+400mg/(kg·d)ORN;灵归方组:灵归方浓缩液,按 17.5g 生药/kg+400mg/(kg·d)ORN,连续灌胃 20 天,ORN 均为上午 8:00-9:00灌胃,干预药物为下午5:30-6:30灌胃。末次给药24 h后,5%的水合氯醛腹腔麻醉,剪开阴囊,取出实验大鼠右侧附睾,用于进行精子浓度及活动率检测;左侧附睾在(pH 7.2~7.4)0.01mol/LPBS缓冲液配制的4%多聚甲醛固定液中进行固定,用于附睾LC含量、OCTN2蛋白与mRNA表达的检测。其中高效液相色谱法测定附睾中LC含量,免疫印迹法(Western Blotting,WB)检测大鼠附睾OCTN2蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测大鼠附睾OCTN2 mRNA表达。结果:1.与对照组比较,各组精子浓度改变无统计学差异(P>0.05);模型组(PR+NP)级精子浓度及精子活动率下降(P<0.05)。与模型组比较,灵归方组与左卡尼汀组(PR+NP)级精子浓度及精子活动率升高,有统计学差异(P<0.05);灵归方组与左卡尼汀组比较,(PR+NP)级精子浓度及精子活动率差异无统计学意义(P>0.05)。2.与对照组比较,模型组附睾LC含量下降(P<0.05);与模型组比较,灵归方组与左卡尼汀组附睾LC含量升高(P<0.05);且左卡尼汀组附睾LC含量高于灵归方组(P<0.05)。3.与对照组比较,模型组OCTN2蛋白表达下降(P<0.05);与模型组比较,灵归方组、左卡尼汀组OCTN2蛋白表达升高(P<0.05);灵归方组与左卡尼汀组比较,OCTN2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。4.与对照组比较,模型组OCTN2 mRNA表达下调(P<0.05);与模型组比较,灵归方组、左卡尼汀组OCTN2 mRNA表达上调(P<0.05);灵归方组与左卡尼汀组比较,OCTN2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.400mg/(kg·d)ORN连续灌胃20天可导致大鼠精子活动率下降,可能与抑制附睾OCTN2蛋白及mRNA表达,引起血浆向附睾LC转运减少,导致附睾LC含量下降有关。2.灵归方能够提高ORN诱导弱精子症模型大鼠(PR+NP)级精子浓度及精子活动率,可能与增加大鼠附睾LC含量有关。3.灵归方可以上调ORN所致弱精子症模型大鼠附睾中OCTN2蛋白及mRNA的表达,从而增加LC从血浆向附睾转运。实验二:灵归方对弱精子症模型大鼠血清性激素及附睾氧化应激反应的影响目的:观察灵归方对ORN所致弱精子症模型大鼠血清性激素水平,附睾SOD、GSH-Px、MDA的影响,进一步揭示ORN造成弱精子症模型大鼠的可能机制以及灵归方的保护作用。方法:分组及灌胃方式同实验一。股动脉取血,酶联免疫吸附试验法测定大鼠血清中FSH、LH、T含量,取右侧附睾组织制备成5%的组织匀浆,将匀浆3000rpm离心10min,取上清进行SOD、GSH-Px活性以及MDA含量的检测。左侧睾丸、附睾部分置于4%多聚甲醛固定,随后用于观察睾丸、附睾结构组织病理学变化。结果:1.与对照组比较,各组FSH、LH及T水平改变均无统计学差异(P>0.05)。2.与对照组比较,模型组附睾GSH-Px、SOD活性下降,MDA含量升高(P<0.05);与模型组比较,左卡尼汀组及灵归方组GSH-Px、SOD活性升高,MDA含量下降,均有统计学差异(P<0.01);灵归方组与左卡尼汀组相比GSH-Px、SOD活性以及MDA含量比较无统计学差异(P>0.05)。3.在显微镜下可见各组大鼠睾丸中各生精小管结构正常,管腔明显,整齐排列,大量精子及精子细胞充满生精小管管腔,形态正常;各级生精细胞结构完整,层次清晰,各级生精细胞分裂活跃,各细胞形态未见明显异常,各组之间的形态学差异并不明显;各组附睾组织形态学改变并不明显,管腔中可见大量的精子,模型组附睾管腔中可见少量脱落细胞成分。结论:1.400mg/(kg·d)ORN连续灌胃20天对雄性SD大鼠血清性激素水平,睾丸、附睾组织形态并无显着影响,但是会引起附睾GSH-Px、SOD活性下降,MDA含量升高,可能是导致大鼠精子活动率下降的原因之一。2.灵归方可以增加附睾SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量,减少ORN所致弱精子症模型大鼠附睾氧化损伤,维持正常的精子成熟环境。
白尹豪[4](2020)在《隔药灸脐法治疗桥本甲状腺炎的临床研究》文中认为目的:1.基于现阶段临床证据,探索采用灸法治疗桥本甲状腺炎的可行性;2.观察隔药灸脐法对桥本甲状腺炎患者中医临床症状评分、甲状腺功能、形态及健康状况的影响。方法:1.Meta分析:采用计算机检索中国知网数据库、中国生物医学文献、万方数据库、Pubmed、Embase和Cochrane Library,全面检索所有关于灸法治疗桥本甲状腺炎的临床随机对照试验,采用人工筛选的方法收集灸法治疗桥本甲状腺炎的临床证据,使用Cochrane Handbook推荐偏倚风险评估工具Risk of bias tool对纳入试验进行质量评价,采用Review Manager5.3软件进行统计分析并绘图。2.临床研究:采用随机单盲法将纳入的60例患者分为隔药灸脐组30例、隔淀粉灸脐组30例,治疗3个疗程后,观察两组患者治疗前后的中医临床症状、甲状腺激素水平(FT3、FT4、TSH)、甲状腺激素滴度(TPOAb、TGAb)、甲状腺形态、健康状况调查简表评分(SF-36)的变化。结果:1.Meta分析结果:(1)与单纯使用西药相比,灸法在升高FT3值方面疗效优于西药;在降低桥本甲状腺炎患者TGAb值、MCA值、TSH值方面疗效与西药相当且有优于西药的趋势,在升高桥本甲状腺炎患者FT4值方面疗效与西药相当。(2)与单纯使用西药相比,灸法联合西药在降低桥本中状腺炎患者TGAb值、MCA值、TPOAb值方面疗效优于西药,在升高桥本甲状腺炎患者FT3值方面疗效优于西药,在提高临床疗效方面效果优于西药;在降低桥本甲状腺炎患者TSH值方面疗效与西药相当且有优于西药的趋势,在升高桥本甲状腺炎患者FT4值方面疗效与西药相当且有优于西药的趋势。2.临床研究结果:(1)中医临床症状改善情况:隔药灸脐组患者颈前肿大、畏寒怕冷、胃脘或胁肋痛、情绪抑郁、便溏不爽的临床症状改善明显(P<0.01),隔淀粉灸脐组患者情绪抑郁、便溏不爽的临床改善明显(P<0.01);隔药灸脐组总有效率为80.95%,隔淀粉灸脐组总有效率为42.11%,比较两组差异有明显统计学意义(P<0.01)。(2)甲状腺激素水平改善情况:隔药灸脐组在治疗后FT3、FT4、TSH较治疗前存在显着统计学差异(P<0.01);隔淀粉灸脐组在治疗后仅FT3水平比较有显着统计学意义(P<0.01);在甲状腺激素水平改善程度上,两组比较有统计学差异(P<0.05)。(3)甲状腺抗体滴度改善情况:隔药灸脐组治疗前后TPOAb、TGAb组内比较有显着统计学意义(P<0.01),隔淀粉灸脐组患者治疗前后TPOAb、TGAb组内比有统计学意义(0.01<P<0.05),两组患者治疗后TPOAb、TGAb组间比较无统计学意义(P>0.05)。(4)甲状腺形态方面:隔药灸脐组治疗前后甲状腺结节最大直径、甲状腺峡部厚度、左叶厚度、右叶厚度比较有显着统计学意义(P<0.01),隔淀粉灸脐组各项指标治疗前后无统计学意义(P>0.05);两组组间比较有统计学意义(P<0.05)。(5)健康状况评分方面:隔药灸脐组患者治疗后在一般健康状况、躯体疼痛、生理职能、社会功能、情感职能方面均有改善(P<0.05);隔淀粉灸脐组患者仅在在一般健康状况方面有改善(P<0.05)。组间比较:在一般健康状况、健康变化方面两组差值比较有显着统计学意义(P<0.01);在生理机能方面两组差值比较有统计学意义(P<0.05)。结论:1.现阶段临床证据表明,与常规西药相比,灸法在治疗桥本甲状腺炎方面可能存在优势。2.隔药灸脐法可以明显改善桥本甲状腺炎患者中医临床症状,改善甲状腺激素水平(FT3、FT4、TSH)以及甲状腺抗体滴度水平(TPOAb、TGAb),提高患者生活质量,部分改善甲状腺肿大程度,且疗效优于隔淀粉灸脐法。
尹雅倩[5](2020)在《针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠HPO轴及FSH-cAMP信号通路的影响》文中研究表明背景卵巢储备功能减退(diminished ovarian reserve,DOR)是指卵巢内卵母细胞数目的减少和(或)质量下降,可导致生育力下降,同时伴有抗苗勒管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)水平降低、窦卵泡计数(antral follicle count,AFC)减少及促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)水平升高。随着社会发展,女性面临的生活压力和工作压力逐渐加重,DOR发病率逐年上升,由此导致的不孕严重影响女性生殖健康和生活质量,给其家庭带来沉重的精神及经济负担。FSH是下丘脑-垂体-卵巢(Hypothalamic-pituitary-ovarian,HPO)轴的主要激素之一,可促进颗粒细胞的增殖分化,影响卵泡的发育、成熟及排卵,影响雌激素的合成。FSH与其特异性受体(FSHR)的结合是其发挥生物学效应的基础。FSH与FSHR结合,可进一步激活环磷酸腺苷(Cyclic adenosine monophosphate,cAMP)/蛋白激酶 A(Protein kinase A,PKA)信号转导通路下游信号分子的级联放大,从而影响颗粒细胞增殖分化和卵巢性激素的合成。P450芳香化酶(P450arom)是颗粒细胞中的限速酶,P450arom催化作用使雄激素变为雌激素参与卵泡募集。临床试验显示,针刺可以降低血清FSH水平,提高血清雌二醇(Estradiol,E2)水平,通过调整异常的性激素水平而起到改善卵巢储备功能的作用。动物实验也表明,针刺可调整HPO轴的紊乱状态,一定程度上使分泌过多的下丘脑促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)水平恢复正常。FSH-cAMP信号通路对卵泡发育和卵巢功能十分关键,但基于该信号通路的针刺方面的研究较少。本实验从HPO轴整体调控及卵巢局部FSH-cAMP信号通路两个层面初步探索针刺治疗DOR的作用机制。目的探索针刺对DOR模型大鼠HPO轴及FSH-cAMP信号通路的影响。方法实验一:DOR动物模型的建立及验证20 只清洁级(Specific Pathogen Free,SPF)级雌性 Sprague Dawley(SD)大鼠,其中,3月龄大鼠10只,9月龄退役种鼠10只。3月龄大鼠作为对照(Control)组,9月龄退役种鼠作为DOR模型组。常规观察大鼠每日的阴道涂片以确定动情周期,选择处于动情间期的大鼠取材。ELISA法检测血清性激素(FSH、LH、E2、AMH、抑制素B(INH-B))水平、冰冻切片HE染色方法确定左侧卵巢窦卵泡计数。实验二:针刺对DOR大鼠HPO轴及FSH-cAMP信号通路的影响40只清洁级(Specific Pathogen Free,SPF)级雌性SD大鼠,其中,3月龄大鼠10只,9月龄退役种鼠30只。3月龄大鼠作为对照组(Control组),9月龄退役种鼠依据动情间期眼眶血FSH水平,区组随机分为三组:DOR模型组(DOR组)、束缚组(DOR+res组)、针刺组(DOR+acu组)。Control组及DOR组不予干预,DOR+res抓取后放置高台作为束缚固定,DOR+acu组针刺后放置高台,取穴为百会、关元、次髎穴,隔日一次,每次针刺20分钟,共针刺10次。常规观察大鼠每日的阴道涂片以确定动情周期。实验干预结束后选择处于动情间期的大鼠取材。ELISA法检测血清性激素(FSH、LH、E2、AMH、抑制素B(INH-B))水平、下丘脑GnRH含量、垂体FSH和LH含量及卵巢组织cAMP含量。Western Blot法检测卵巢组织FSHR蛋白的相对含量。实时荧光PCR法检测卵巢组织的FSHR mRNA及P450 mRNA相对含量。冰冻切片HE染色方法确定左侧卵巢的形态学改变及窦卵泡计数。结果实验一:DOR动物模型的建立及验证1.动情周期与Control组相比,DOR组大鼠动情周期紊乱率显着升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2.血清激素水平与Control组相比,DOR组大鼠的血清FSH水平明显升高,E2、AMH水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。血清LH、INH-B未见统计学差异(P>0.05)。3.窦卵泡计数与Control组相比,DOR组大鼠的窦卵泡数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。实验二:针刺对DOR大鼠HPO轴及FSH-cAMP信号通路的影响1.针刺对DOR大鼠HPO轴的影响(1)下丘脑组织GnRH含量:与control组相比,DOR组大鼠下丘脑组织中GnRH水平显着升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与DOR组相比,DOR+res组和DOR+acu组的GnRH水平显着降低,差异有显着统计学意义(P<0.01)。与DOR+res组相比,DOR+acu组的GnRH水平显着降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)垂体组织FSH和LH含量:四组大鼠垂体组织FSH及LH含量的组间两两比较均未见统计学差异(P>0.05)。(3)针刺对DOR大鼠卵巢储备功能的影响:①动情周期紊乱率:与control组相比,DOR组大鼠动情周期紊乱率明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与DOR组相比,DOR+res组动情周期紊乱率呈升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);DOR+acu组动情周期紊乱率呈降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。与DOR+res组相比,DOR+acu组动情周期紊乱率显着降低,差异有统计学意义(P<0.05)。②卵巢组织形态学改变:Control组大鼠卵巢切面皮质较连续,卵泡中颗粒细胞排列紧密,髓质较致密,血管形态完好。DOR组大鼠的卵巢切面皮质不连续,卵泡中颗粒细胞排列紊乱,髓质较稀疏,血管形态不完整。DOR+res组卵巢切面皮质连续性较差,颗粒细胞层连续性欠佳,髓质松散,血管分布较少。DOR+acu组卵巢切面皮质较连续,卵巢颗粒细胞层有增多趋势,髓质结构较稀松散,血管分布较少。③窦卵泡计数:与control组相比,DOR组窦卵泡计数显着减少,差异有统计学意义(P<0.05)。DOR组、DOR+res组和DOR+acu组三组之间窦卵泡数未见显着差异(P>0.05)。④血清性激素水平:与control组相比,DOR组大鼠血清FSH和LH水平显着升高,AMH和E2水平显着降低,差异有统计学意义(P<0.05),但INH-B水平未见显着差异(P>0.05)。与DOR组相比,DOR+res组血清5种激素水平均未见显着差异(P>0.05)。与DOR组相比,DOR+acu组血清FSH水平显着降低,E2和AMH水平显着升高,差异有统计学意义(P<0.05),其余2种激素水平未见显着差异(P>0.05)。与DOR+res组相比,DOR+acu组血清5种激素水平均未见显着差异(P>0.05)。2.针刺对DOR大鼠FSH-cAMP信号通路的影响:(1)卵巢组织FSHR相对表达量:与control组相比,DOR组大鼠卵巢组织FSHR蛋白相对表达量显着降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与DOR组相比,DOR+res组大鼠卵巢组织FSHR蛋白相对表达量未见显着差异(P>0.05)。与DOR和DOR+res组相比,DOR+acu组大鼠卵巢组织FSHR蛋白相对表达量均显着升高,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)卵巢组织FSHR mRNA及P450 mRNA相对表达量:①FSHR mRNA相对表达量改变:与Control组相比,DOR组大鼠卵巢组织FSHR mRNA相对表达量显着降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与DOR组相比,DOR+res组大鼠卵巢组织FSHR mRNA相对表达量未见显着差异(P>0.05)。与DOR组相比,DOR+acu组大鼠卵巢组织FSHR mRNA相对表达量显着升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与DOR+res组相比,DOR+acu组大鼠卵巢组织FSHR mRNA相对表达量未见显着差异(P>0.05)。②P450 mRNA相对表达量改变:与Control组相比,DOR组大鼠卵巢组织P450 mRNA相对表达量显着降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与DOR组相比,DOR+res组和DOR+acu组大鼠卵巢组织P450 mRNA相对表达量均显着升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与DOR+res组相比,DOR+acu组大鼠卵巢组织P450 mRNA相对表达量未见显着差异(P>0.05)。(3)卵巢组织cAMP含量:与Control组相比,DOR组大鼠卵巢组织的cAMP含量显着降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与DOR组相比,DOR+res组大鼠卵巢组织的cAMP含量均未见显着差异(P>0.05)。与DOR组及DOR+res组相比,DOR+acu组卵巢组织的cAMP含量显着升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论1.与三月龄雌性大鼠相比,九月龄SD大鼠雌性退役种鼠的卵巢储备功能明显减退,可作为DOR动物模型。2.针刺可降低DOR大鼠下丘脑组织GnRH含量。3.针刺可通过调整紊乱的动情周期及异常的性激素水平一定程度上改善DOR大鼠的卵巢储备功能。4.卵巢颗粒细胞FSH-cAMP信号转导通路可能参与针刺对DOR大鼠卵巢储备功能的调控,该部分结果还需进一步验证。
司佳弘[6](2020)在《秩边透水道针法对早发性卵巢功能不全大鼠性激素及Bcl-2、Bax表达的影响研究》文中研究说明目的:以腹腔注射环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)诱导早发性卵巢功能不全(Premature ovarian insufficiency,POI)大鼠模型,并运用秩边透水道针法对其进行干预。观察治疗后各组大鼠卵巢病理变化、血清性激素水平及卵巢中bcl-2和bax蛋白含量变化,阐明秩边透水道针法对POI大鼠卵巢功能的影响,为临床治疗早发性卵巢功能不全提供更为有效的治疗手段,同时扩大秩边透水道针法的治疗范围。方法:筛选有正常动情周期雌性SD大鼠60只,八周龄体质量(200±20)g,随机分为空白组、模型组、秩边组(秩边透水道)、普通针刺组(肾俞、关元、三阴交)、西药组(戊酸雌二醇组),每组12只。除空白组外,其余四组通过连续十五日腹腔注射环磷酰胺造模,于造模结束前连续十天取大鼠阴道涂片,以剔除动情周期无变化大鼠。于造模次日开始进行治疗,普针组和秩边组采取隔日针刺治疗,西药组每日采取戊酸雌二醇灌胃治疗,模型组和空白组在针刺组进行治疗的同时固定束缚,所有组治疗周期均为一月。治疗结束后统一取材,酶联免疫法检测血清中E2、FSH、LH、AMH、INHB的含量,分别用免疫组化法和免疫印迹法检测卵巢中bcl-2和bax蛋白的表达,并通过HE染色观察卵巢中卵泡及卵巢组织结构的变化。结果:1.大鼠一般情况:造模后,所有造模组大鼠的体重均有明显下降,与空白组相比差异显着(P<0.05)。造模组大鼠饮水量增加,饮食量减少,出现便质稀溏,毛色暗淡、干枯,不喜动,部分出现大鼠颈后和头顶部脱毛明显。造模结束后阴道涂片检测结果显示各造模组大鼠动情周期紊乱明显。2.各组大鼠血清激素水平:模型组大鼠血清中FSH、LH含量显着上升,E2含量显着下降,与空白组相比差异有显着统计学意义(P<0.05)。秩边组大鼠血清FSH和LH水平降低且E2水平明显升高,与模型组相比差异有显着统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠血清中AMH、INHB含量显着降低,与空白组相比差异有显着统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,秩边、西药组大鼠血清中AMH、INHB水平上升上升明显,差异有显着统计学意义(P<0.01)。秩边组大鼠血清中AMH和INHB含量较其他治疗组上升明显(P<0.01)。3.各组大鼠卵巢中bcl-2和bax蛋白表达:(1)bcl-2:模型组中bcl-2蛋白表达明显降低,与空白组相比差异有显着统计学意义(P<0.05),与模型组相比,各治疗组中蛋白表达均有不同程度的升高,秩边组和西药组中bcl-2蛋白含量与其相比差异显着(P<0.05);秩边组与西药组中bcl-2蛋白差异无显着统计学意义(P>0.05)。(2)bax:模型组中bax蛋白呈现高表达,与空白组相比,差异有显着统计学意义(P<0.01);各治疗组中bax蛋白表达均较模型组有不同程度的降低,西药组、秩边组、普针组中bax蛋白表达与其相比均有显着差异(P<0.05);与秩边组相比,空白组、西药组中蛋白表达与其差异无显着统计学意义(P>0.05)。4.卵巢组织及卵泡的变化:空白组大鼠卵巢形态饱满,颜色红润,卵巢中可见各级生长卵泡和黄体,闭锁卵泡数量少;模型组大鼠卵巢体积较小颜色暗淡发灰,卵巢中闭锁卵泡明显增多,生长中卵泡几不可见;秩边组大鼠卵巢体积、外观与空白组无显着差异,颜色较模型组红润,但不及空白组鲜艳,卵巢中可见正常发育的生长卵泡和黄体,空泡状卵泡和闭锁卵泡数量明显减少,卵巢结构与正常组相似。结论:1.秩边透水道针法能够有效改善早发性卵巢功能不全大鼠卵巢功能及卵泡质量。2.秩边透水道针法能够有效调节早发性卵巢功能不全大鼠血清中激素水平,降低大鼠血清中FSH、LH水平,升高E2、AMH和INHB水平,促使HPOA轴恢复平衡。3.秩边透水道针法对早发性卵巢功能不全大鼠的调节治疗作用是通过抑制卵巢中颗粒细胞的凋亡实现的,本针法能够有效调节POI大鼠卵巢中bcl-2和bax蛋白表达。
邓文桢[7](2020)在《加味四二五合方联合芬吗通治疗化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的疗效观察》文中指出【目的】观察加味四二五合方联合西药芬吗通治疗化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的临床疗效,包括月经情况、全身症状、激素水平等。同时观察血常规、尿常规、肝肾功能、心电图等检测药物安全性。明确加味四二五合方联合芬吗通改善化疗源性早发性卵巢功能不全的可行性和有效性,并探讨其可能的作用机理,为中西医结合治疗化疗源性早发性卵巢功能不全找到更有效、更安全、更便捷的方法,为女性肿瘤患者提高生活质量带来更多可能性。【方法】按照随机数字表法将收集到的符合纳入标准的60例化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的患者,分为治疗组(加味四二五合方联合芬吗通组)30例和对照组(芬吗通组)30例。对照组:芬吗通(2/10mg雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片复合包装),每日一片,先服砖红片14天,再服黄片14天,连续28天为一个疗程,月经来的第3天继续服用下一疗程;如月经不来潮,则连续服用下一疗程芬吗通。治疗组:在上述对照组基础上加服加味四二五合方,每天1剂,每周期不间断服用24天。如月经来潮则停服,待月经来的第5天继续服用一周期;如月经不来潮,则连续服用下一周期中药。连续服用3个月经周期,观察两组患者治疗前后的月经情况、全身症状、激素水平等的变化。【结果】治疗组治疗痊愈率为0,显着有效率为13.33%,有效率为80.00%,总体有效率为93.33%。对照组治疗痊愈率为0,显着有效率为3.33%,有效率为70.00%,总体有效率为73.33%。两组治疗后疗效比较(P<0.05)有统计学意义。治疗后两组中医证候疗效及总积分比较(P<0.05)有统计学意义,两组在治疗前后比较(P<0.05)也有统计学意义,治疗组优于对照组。两组激素水平,治疗后比较(P>0.05)无统计学意义,治疗前后比较(P<0.05)有统计学意义,治疗组与对照组均有效。治疗过程中患者未出现不良反应及药物毒副作用。【结论】加味四二五合方联合芬吗通能有效改善化疗源性早发性卵巢功能不全患者的月经情况以及临床症状和激素水平。治疗组和对照组均能改善患者月经,从全身症状和整体疗效来看,治疗组整体疗效优于对照组。治疗组未见明显不良反应,安全可靠,可推广应用于临床。
安雨[8](2020)在《艾烟干预弱精子症大鼠的细胞凋亡机制研究》文中研究说明弱精子症是一种以精子进行性运动力低下为主要表现的疾病,属于男性不育的范畴,因其难治、复发率高的特点而成为现今生殖医学领域的一大难题。艾灸是治疗男性不育的常用方法,其作用机制备受关注。前期研究发现艾烟是艾灸起效的三途径之一,并且对普通Wistar大鼠的生殖功能有促进作用。本研究拟从细胞凋亡的角度,通过动物实验研究艾烟对弱精子症的作用机制。目的:使用奥硝唑灌胃法建立弱精子症大鼠模型,并给予不同浓度艾烟干预,观察艾烟对大鼠精子参数和细胞凋亡的影响,明确艾烟对弱精子症模型大鼠的作用效果,进一步揭示艾烟改善弱精子症的作用机制。方法:72只SD大鼠,按随机数字表法分为6组:溶剂对照组、模型组、香烟组、低浓度艾烟组、中浓度艾烟组、高浓度艾烟组,每组12只。溶剂对照组只给予0.2%竣甲基纤维素钠溶液(因奥硝唑难溶于水,需用该溶液配制造模药物)灌胃,其余5组用奥硝唑溶液灌胃,灌胃剂量是:前10天400mg/(kg·d),第11天起200 mg/(kg·d),共灌胃8周。低、中、高艾烟组从第11天开始进行艾烟干预,每日1次,每次20min,一周干预6天至第8周末,艾烟浓度分别为1 ×、3 ×、9 ×临床艾烟浓度。香烟组的干预时长、频率、浓度,与中浓度艾烟组相同。实验结束后:1.称取大鼠体重及睾丸重量,观察睾丸指数变化;使用扩散法收集大鼠附睾尾中的精子,使用计算机辅助精子分析系统检测大鼠的各项精子参数:精子密度、精子活力、精子活率、A级精子数、(A+B)级精子数。2.通过HE染色观察大鼠睾丸组织病理结构变化;通过TUNEL染色观察大鼠睾丸组织细胞的凋亡情况,使用体视学图像分析系统统计大鼠睾丸组织细胞的凋亡指数。3.使用Western Blot法检测睾丸组织凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达水平。所有数据结果用SPSS20.0软件统计分析。结果:1.大鼠睾丸指数、精子参数与溶剂对照组相比:模型组、香烟组大鼠的精子活力、精子活率、A级精子数、(A+B)级精子数均显着下降(P<0.01);低浓度艾烟组大鼠的精子活力、精子活率、A级精子数、(A+B)级精子数还存在明显差异(P<0.01);中、高浓度艾烟组大鼠的精子活力、精子活率、A级精子数、(A+B)级精子数的差异不明显(P>0.05)。与模型组相比:低浓度艾烟组大鼠的精子活力、精子活率、(A+B)级精子数显着提高(P<0.01),A级精子数显着提高(P<0.05);中、高浓度艾烟组大鼠的精子活力、精子活率、A级精子数、(A+B)级精子数显着提高(P<0.01)。与香烟组相比:低浓度艾烟组大鼠的精子活力、精子活率、A级精子数、(A+B)级精子数的差异不明显(P>0.05);中浓度艾烟组大鼠的精子活力、(A+B)级精子数显着提高(P<0.01),精子活率显着提高(P<0.05);高浓度艾烟组大鼠的精子活力、A级精子数、(A+B)级精子数显着提高(P<0.01),精子活率显着提高(P<0.05)。6组大鼠的睾丸指数、精子密度无统计学差异(P>0.05)。2.大鼠睾丸组织HE染色、凋亡指数溶剂对照组大鼠睾丸生精小管、各级生精细胞正常;模型组大鼠睾丸生精小管萎缩、各级生精细胞缺失及排列紊乱;香烟组大鼠睾丸损伤重于模型组;给予各浓度艾烟干预后,生精小管的结构、各级生精细胞的数量及排列均有不同程度恢复;中浓度艾烟组大鼠睾丸组织恢复更明显;高浓度艾烟组大鼠睾丸组织与溶剂对照组相比还存在一定差距。与溶剂对照组相比:模型组的凋亡指数显着上升(P<0.01);香烟组的凋亡指数显着上升(P<0.05);低、中浓度艾烟组凋亡指数的差异不明显(P>0.05);高浓度艾烟组的凋亡指数显着上升(P<0.05)。与模型组相比:香烟组凋亡指数的差异不明显(P>0.05);低浓度艾烟组的凋亡指数显着下降(P<0.01);中浓度艾烟组的凋亡指数显着下降(P<0.05);高浓度艾烟组凋亡指数的差异不明显(P>0.05)。与香烟组相比:低、中浓度艾烟组的凋亡指数显着下降(P<0.05);高浓度艾烟组凋亡指数的差异不明显(P>0.05)。3.凋亡相关蛋白表达情况与溶剂对照组相比.:模型组的Bcl-2表达显着下降(P<0.05),Bax表达显着上升(P<0.01);低、中浓度艾烟组的Bcl-2、Bax、Caspase-3表达无差异(P>0.05);高浓度艾烟组的Bcl-2、Bax表达无差异(P>0.05)、但Caspase-3表达显着上升(P<0.05)。与模型组相比:香烟组的Bcl-2、Bax、Caspase-3表达无差异(P>0.05);低浓度艾烟组的Bax表达显着下降(P<0.01),Caspase-3表达显着下降(P<0.05);中浓度艾烟组的Bcl-2表达显着上升(P<0.01),Bax表达显着下降(P<0.05);高浓度艾烟组的Bax表达显着下降(P<0.05)。与香烟组相比:低浓度艾烟组的Bax、Caspase-3表达显着下降(P<0.05);中浓度艾烟组的Bcl-2表达显着上升、Bax表达显着下降(P<0.05);高浓度艾烟组的Bcl-2、Bax、Caspase-3表达无差异(P>0.05)。结论:艾烟可以提高弱精子症大鼠精子活力、精子活率、A级精子数、(A+B)级精子数,改善睾丸生精小管结构、改善睾丸内环境,且中浓度艾烟的干预效果最佳,其机制可能是通过上调抗凋亡基因Bcl-2蛋白表达、下调促凋亡基因Bax、Caspase-3蛋白表达,减少睾丸组织细胞的凋亡数量,以抑制由细胞凋亡的线粒体途径异常引起的睾丸组织细胞凋亡,从而改善弱精子症大鼠的精子质量。
黄佳妮[9](2020)在《基于“肾主生殖”理论的补肾生精中药治疗男性不育作用机制研究》文中研究指明男性不育是指育龄夫妇在没有采取任何避孕措施的情况下,经过一年或更长时间的有规律性生活后,由男性因素造成不育者称为男性不育。目前,男性不育的发病率在全球范围内呈逐渐上升的趋势。该病的主要临床表型为少弱精子症,其发病率约占男性不育症40%~75%。由于该病发病机制较为复杂,当前的常规治疗手段仍然是药物治疗。然而,西药治疗少弱精子症的疗效欠佳,且副作用较大,因此亟需有效的药物替代治疗策略。中医依靠整体观念及辨证体系,因证因病因人施治,以其处方丰富、用方灵活等自身优势在治疗少弱精子症方面取得了一定的疗效,逐渐受到人们的青睐。本文基于“肾主生殖”理论研究补肾生精中药治疗男性不育的作用机制。在收集整理古代医籍和现代科研文献的基础上,从医案报道、临床研究、药理机制研究等多方面,对补肾生精中药治疗男性不育的机制进行了全面的阐述。研究认为肾气亏虚,精失所养是男性不育的病理基础,肾虚可致自身脏腑阴阳失衡,或因肾阴亏虚,虚火扰乱精室以致男子不育;或因肾阳亏虚,精室失于温煦以致男子不育。此外,肾虚亦可累及他脏,肝失疏泄,精室失调以致男子射精异常;脾肾虚损,精室乏源以致男子精液量少;心肾不交,精室扰动以致男子精液妄泄。补肾生精中药大多味甘,性温热或寒凉,趋向沉降,入下焦,主归肾经,因而具有补肾填精,助养生育的功效。在实验研究方面,复制少弱精子症大鼠模型,观察精杞胶囊对环磷酰胺致生精障碍模型大鼠的影响。结果显示:与模型组比较,精杞给药组大鼠睾丸和附睾组织结构较完整,各级生精细胞和精子排列紧密,数量增多;电镜观察到生精细胞、附睾主细胞及精子的核膜核仁较完整清晰,胞质较丰富,细胞器数量明显增多,线粒体嵴排列正常,高尔基复合体结构清晰,胞浆少见空泡;血清T、FSH、LH值均升高(P<0.01,P<0.001);SA含量增加(P<0.001);流式细胞术显示精子细胞阻滞在G2期(P<0.05,P<0.01),细胞总凋亡率明显降低(P<0.001)。实验结果提示精杞胶囊有抗大鼠生精细胞凋亡的作用,本研究可为补肾生精中药在男性生殖健康中的应用提供理论和实验依据。
张安冬[10](2019)在《基于膀胱ICCs起搏功能的针刺调节逼尿肌过度活动的肌源性机制研究》文中研究说明目的:本研究以逼尿肌过度活动(Detrusor Over-activity,DO)模型大鼠为研究对象,动态观察(针刺治疗后2小时、24小时、48小时、72小时)针刺的效应。并且借助逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)、蛋白免疫印迹反应(Western blot,Wb)、钙离子成像等技术,观察针刺对膀胱Cajal间质细胞(Interstitial cells of Cajal,ICCs)细胞起搏电流通道超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(Hyperpolarization activates cyclic nucleotidegated cation channels,HCN)相关亚型的影响以及ICCs细胞内钙离子震荡特性的影响,结合尿动力变化和肌条牵拉实验,揭示针刺调节逼尿肌兴奋性的肌源性机制,阐述针刺在调节逼尿肌过度活动中的相关效应和机理。方法:将SPF级雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组和药物组。采用环磷酰胺(Cyclophosphamide,CYP)腹腔注射方法建立大鼠逼尿肌过度活动模型。模型组:给予逼尿肌过度活动造模处理;针刺组:DO造模成功后,同时给予针刺次髎、会阳穴,电针连续波(频率30 Hz)20分钟;每天针刺治疗一次,连续三天;药物组:DO造模成功后,予灌胃ICCs细胞特异阻断剂Glivec(甲磺酸伊马替尼),每天治疗一次,连续三天。以上各组均进行尿动力测定以及膀胱肌条牵拉实验。为了进行动态观察针刺效应,每组又随机分为4个观察点亚组(对应不同观察点:针刺治疗后2小时,24小时,48小时,72小时),每个亚组10只大鼠。采用加拿大Laboria尿动力分析仪进行膀胱尿动力测定;离体膀胱肌条牵拉实验观察逼尿肌收缩特性;RT-PCR、Wb法测定膀胱ICCs细胞HCN1-4亚型mRNA和蛋白表达;钙离子成像技术检测膀胱ICCs细胞胞内钙离子震荡特征。结果:1、模型评价:采用CYP制备DO模型成功,主要尿动力表现为:储尿期膀胱逼尿肌可见不自主的收缩波,表现为期向性的收缩,并且模型组膀胱的有效容量明显缩小,储尿期时间明显缩短。2、尿动力特征:组间比较,在2小时、24小时、48小时、72小时观察点上,模型组大鼠膀胱有效容量明显小于假手术组(P<0.05),且其储尿期时间较假手术组大鼠明显缩短(P<0.05),符合DO模型状态;与模型组相比,针刺组和药物组在四个观察点上的膀胱有效容量均显着增加(P<0.05),储尿期时间明显延长(P<0.05),但针刺组和药物组之间没有差异性,说明针刺和药物均能有效改善逼尿肌不稳定状态;同时也发现,在四个观察点上,24小时观察点模型组的排尿压力低于假手术组(P<0.05),针刺组和药物组的排尿压力也低于假手术组(P<0.05),和模型组比较,有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。组内比较,假手术组各个观察点之间的膀胱有效容量及储尿时间均无明显变化(P>0.05),模型组各个观察点之间的膀胱有效容量及储尿时间均无明显变化(P>0.05),说明模型稳定;针刺组、药物组分别进行组内比较,膀胱有效容量增加及储尿时间延长的效应在24小时观察点时最佳,但各个观察点之间的差异均无统计学意义(P>0.05),说明针刺、药物(甲磺酸伊马替尼)对造模大鼠膀胱有效容量增加和储尿时间延长的效果较为持续,并可能在24小时观察点上最佳。3、膀胱离体肌条收缩特性:组间比较,在四个观察点中,24小时观察点上模型组大鼠膀胱肌条收缩频率较假手术组升高(P<0.05)、收缩幅度降低(P<0.05),且与模型组比较,针刺组膀胱肌条收缩频率降低(P<0.05),收缩幅度增高(P<0.05),药物组仅可见膀胱肌条收缩频率降低(P<0.05);在2小时、48小时、72小时观察点上,各组肌条的收缩频率和幅度组间差异均无统计学意义(P>0.05)。组内比较,假手术组各个观察点之间的肌条收缩频率和幅度均无明显变化(P>0.05);模型组各个观察点之间的肌条收缩频率和幅度均无明显变化(P>0.05);针刺组肌条收缩频率在24小时观察点较其他3个观察点低,但各个观察点之间差异无统计学意义(P>0.05),收缩幅度在24小时观察点上明显高于2小时观察点(P<0.05),体现24小时观察点优势;药物组肌条收缩频率在24小时观察点较其他3个观察点低,收缩幅度在24小时观察点较其他3个观察点高,但各个观察点之间差异无统计学意义(P>0.05),体现24小时观察点优势。4、膀胱ICCs细胞HCN各亚型变化:组间比较,在四个观察点中,只在24小时观察点上,模型组大鼠膀胱ICCs的HCN1和HCN2的信使核糖核酸(Messenger RNA,mRNA)和蛋白表达均高于假手术组大鼠(P<0.05),与模型组比较,针刺组和药物组均可见HCN1和HCN2的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),在2小时、48小时、72小时观察点上,各组膀胱ICCs的HCN1和HCN2的mRNA和蛋白表达组间差异无统计学意义(P>0.05),HCN3、HCN4所有观察点上组间差异无统计意义(P>0.05)。组内比较,假手术组各个观察点上HCN1和HCN2的mRNA表达组内均无明显变化(P>0.05),模型组各个观察点上HCN1和HCN2的mRNA表达组内均无明显变化(P>0.05),针刺组各个观察点上HCN1和HCN2的mRNA表达组内均无明显变化(P>0.05),药物组可见HCN1 mRNA在48小时观察点上明显高于24小时(P>0.05),而HCN2 mRNA组内差异无统计学意义(P>0.05),HCN3和HCN4的mRNA各组四个观察点之间差异均无统计学意义(P>0.05)。5、24小时观察点上膀胱ICCs细胞内钙离子震荡特性:模型组大鼠膀胱ICCs细胞内钙离子震荡频率较假手术组明显升高(P<0.0083)、钙离子震荡幅度明显增加(P<0.0083),与模型组比较,针刺组和药物组均可见膀胱ICCs内钙离子震荡频率降低(P<0.0083)、幅度下降(P<0.0083),说明针刺和药物治疗对降低ICCs兴奋性均有效。模型大鼠膀胱ICCs内钙离子震荡波宽较假手术组增加(P<0.05),但与模型组比较,针刺组、药物组差异均无统计学意义(P>0.05),说明针刺和药物对于调节ICCs细胞内钙离子震荡波宽无影响。结论:1、针刺干预后2小时、24小时、48小时、72小时后,DO大鼠的膀胱容量增加、膀胱储尿期时间延长。2、针刺干预后24小时,DO大鼠的膀胱逼尿肌肌条收缩频率明显降低、收缩幅度明显升高。说明针刺对逼尿肌的最佳效应体现在针刺后24小时。3、针刺干预后24小时,DO大鼠膀胱ICCs细胞HCN1和HCN2的mRNA和蛋白的表达明显降低,同时膀胱ICCs细胞内钙离子震荡的频率和幅度均降低,说明针刺可通过抑制膀胱ICCs细胞起搏通道HCN的表达及ICCs细胞内钙离子震荡特性,从而调节逼尿肌过度活动。
二、针刺防治环磷酰胺对大鼠肝肾超微结构损害的观察(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、针刺防治环磷酰胺对大鼠肝肾超微结构损害的观察(论文提纲范文)
(1)赤箭调节免疫、减肥、降脂、降糖作用研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
前言 |
第一章 文献综述 |
1.1 赤箭与天麻的历史沿革 |
1.2 天麻的化学成分研究 |
1.3 天麻现代药理研究 |
参考文献 |
第二章 UPLC测定比较天麻和赤箭的6种成分含量 |
2.1 材料 |
2.2 方法与结果 |
2.3 讨论 |
参考文献 |
第三章 赤箭和天麻增强免疫功能评价及肠道菌群研究 |
3.1 材料 |
3.2 方法 |
3.3 结果 |
3.4 讨论 |
参考文献 |
第四章 赤箭和天麻预防肥胖功能评价及肠道菌研究 |
4.1 材料 |
4.2 方法 |
4.3 结果 |
4.4 讨论 |
参考文献 |
第五章 赤箭和天麻预防高血脂功能评价及肠道菌群研究 |
5.1 材料 |
5.2 方法 |
5.3 结果 |
5.4 讨论 |
参考文献 |
第六章 赤箭和天麻降血糖功能评价 |
6.1 材料 |
6.2 方法 |
6.3 结果 |
6.4 讨论 |
参考文献 |
结语 |
攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
致谢 |
(2)益精方调控慢性缺氧诱导的睾丸Leydig细胞凋亡治疗LOH的机制研究(论文提纲范文)
英文缩略语表 |
摘要 |
Abstract |
综述一 迟发性性腺功能减退症诊断、危险因素和动物模型研究述评 |
1.LOH诊断上的困惑 |
1.1 LOH精准诊断相对困难 |
1.2 LOH症状与睾酮水平低下不能完全对等 |
1.3 LOH诊断方法难以统一 |
1.4 LOH样症状如何定义有待商榷 |
1.5 LOH相关新概念的提出 |
1.6 小结 |
2.LOH动物模型构建概况 |
2.1 将老龄雄性大鼠(14-24月龄)视为LOH动物模型 |
2.2 环磷酰胺诱导生殖系统受损构建LOH动物模型 |
2.3 对退役种鼠进行“孤养+复合情志刺激”构建LOH动物模型 |
2.4 将去势小鼠视作LOH动物模型 |
2.5 小结 |
3.LOH危险因素研究概况 |
3.1 LOH常见的危险因素 |
3.2 肥胖与LOH |
3.3 LOH散在报道的危险因素 |
3.4 缺氧可能是LOH 一个尚未得到重视的潜在危险因素 |
3.5 小结 |
4.缺氧代谢产物乳酸与睾丸生殖机能 |
5.结语 |
6.参考文献 |
综述二 中医药对男性生殖内分泌的认识与诊疗进展 |
1.男性生殖内分泌的基础生理病理概况 |
1.1 下丘脑-垂体-睾丸轴是男性生殖内分泌的核心 |
1.2 HPT轴功能可受到多种危险因素的影响 |
2.以“天癸”为核心的中医男性生殖内分泌理论的构建 |
2.1 天癸是一种与人体生殖机能密切相关且客观存在的物质 |
2.2 天癸的本质和中西医结合研究 |
2.3 以天癸为核心或信使的中医“肾-天癸-精室”男性性腺轴的构建 |
2.4 小结 |
3.中医药在男性生殖内分泌疾病上的运用 |
3.1 常见的男性生殖内分泌疾病 |
3.2 中医药在动物实验研究方面对HPT轴的调控作用 |
3.3 中医药在临床研究方面对HPT轴的调控作用 |
3.4 小结 |
4.结语 |
5.参考文献 |
前言 |
第一部分 临床研究 症状性迟发性性腺功能减退症(sLOH)中医体质证候调查以及与慢性间歇性缺氧相关性研究 |
1.资料与方法 |
1.1 研究对象 |
1.2 纳入标准 |
1.3 排除标准 |
1.4 研究方法 |
1.5 统计学方法 |
2.结果 |
2.1 基本资料 |
2.2 sLOH患者“中医体质证候”基本调研概况 |
2.3 男性激素及静脉血乳酸值异常情况 |
2.4 cAMS评分与Epworth评分、STOP-bang评分的相关性分析 |
2.5 Epworth评分、STOP-bang评分与cAMS性功能症状、自主神经紊乱症状、心理和躯体症状评分之间的相关性分析 |
2.6 乳酸正常sLOH组与乳酸升高sLOH组各指标的比较 |
2.7 缺氧高中低风险3组间各指标的比较 |
2.8 cAMS评分轻度和中度2组间各指标的比较 |
3.讨论 |
3.1 sLOH患者中医体质证候 |
3.2 sLOH与缺氧 |
4.小结 |
5.参考文献 |
第二部分 实验研究 |
研究一 慢性间歇性缺氧诱导的LOH动物模型构建探究 |
1.材料和方法 |
1.1 实验动物及分组 |
1.2 主要设备与试剂 |
1.3 实验方法 |
1.4 统计方法 |
2.结果 |
2.1 造模第15天时,3组大鼠血TT、FT、乳酸检测对比 |
2.2 造模第30天时,3组大鼠血TT、FT、乳酸检测对比 |
2.3 造模第30天时,3组大鼠悬尾实验、游泳实验检测对比 |
2.4 模型判定与造模成功情况 |
3.讨论 |
3.1 增龄、缺氧与血TT、FT水平 |
3.2 缺氧对模型大鼠体能和情志的影响 |
3.3 乳酸的结果讨论 |
3.4 LOH动物模型讨论 |
4.小结 |
5.参考文献 |
研究二 补肾活血益精方对慢性间歇性缺氧诱导的LOH模型大鼠睾丸Leydig细胞凋亡的影响 |
1.材料和方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
2.结果 |
2.1 各组大鼠睾丸指数的对比 |
2.2 各组大鼠血TT、FT水平的比较 |
2.3 各组大鼠血乳酸水平的比较 |
2.4 各组大鼠睾丸Leydig细胞凋亡率的情况对比 |
2.5 各组大鼠睾丸组织内Caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白表达情况 |
2.6 各组大鼠睾丸组织内Caspase-3、Bcl-2及Bax的基因表达情况 |
2.7 各组大鼠睾丸病理组织学情况比较 |
2.8 各组大鼠睾丸Leydig细胞超微结构的情况比较 |
3.讨论 |
3.1 Leydig细胞数量、功能与雄激素的关系 |
3.2 睾丸Leydig细胞的凋亡调控 |
3.3 益精方的组方分析及前期研究基础 |
3.4 益精方对LOH模型大鼠的可能作用机制一:调控睾丸Leydig细胞的凋亡 |
3.5 益精方对LOH模型大鼠的可能作用机制二:恢复雄激素合成睾丸内调节的正常环境,促进睾丸Leydig细胞分泌功能 |
4.小结 |
5.参考文献 |
结论 |
创新点 |
不足与展望 |
致谢 |
个人简历 |
附件 |
(3)灵归方对奥硝唑诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
英文缩略语 |
综述一 中医诊治男性不育症研究进展 |
参考文献 |
综述二 西医诊治男性不育症研究进展 |
参考文献 |
实验研究 |
前言 |
第一部分 ORN诱导弱精子症模型大鼠的研究 |
1. 材料与方法 |
2. 数据分析 |
3. 实验结果 |
3.1 大鼠一般状态 |
3.2 大鼠体重,睾丸、附睾重量 |
3.3 大鼠睾丸、附睾脏器系数 |
3.4 精子浓度及活动率 |
4. 小结 |
第二部分 灵归方对ORN诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究 |
实验一 灵归方对ORN诱导弱精子症大鼠附睾LC相关通路的影响 |
1. 材料与方法 |
2. 数据分析 |
3. 实验结果 |
3.1 精子浓度及活动率 |
3.2 附睾LC含量 |
3.3 灵归方对附睾OCTN2蛋白表达的影响 |
3.4 灵归方对附睾OCTN2 mRNA表达的影响 |
实验二 灵归方对弱精子症大鼠血清性激素及附睾氧化应激反应的影响 |
1. 材料与方法 |
2. 数据分析 |
3. 实验结果 |
3.1 灵归方对血清性激素水平的影响 |
3.2 灵归方对附睾组织GSH-Px、SOD活性,MDA含量的影响 |
3.3 灵归方对睾丸、附睾组织结构的影响 |
讨论 |
1. 选择LC相关通路作为研究的依据 |
2. 选择ORN作为造模药物的依据 |
3. 灵归方组方分析 |
4. 灵归方改善弱精子症大鼠作用机制 |
4.1 灵归方增加弱精子症大鼠附睾LC含量 |
4.2 灵归方上调OCTN2蛋白及mRNA在附睾中的表达 |
4.3 灵归方抗氧化作用 |
结论 |
创新点 |
不足与展望 |
参考文献 |
致谢 |
个人简介 |
附录 |
(4)隔药灸脐法治疗桥本甲状腺炎的临床研究(论文提纲范文)
提要 |
ABSTRACT |
引言 |
第一部分 灸法为主治疗桥本甲状腺炎的Meta分析 |
1 资料与方法 |
1.1 纳入标准 |
1.2 排除标准 |
1.3 检索策略 |
1.4 文献筛选与数据提取 |
1.5 偏倚风险评估 |
1.6 软件与统计分析方法 |
2 结果 |
2.1 文献检索结果 |
2.2 纳入研究基本信息 |
2.3 纳入研究的偏倚风险评估结果 |
2.4 Meta分析结果 |
2.5 安全性分析 |
3 小结 |
4 讨论 |
4.1 灸法治疗桥本甲状腺炎的立法依据 |
4.2 研究的局限性 |
4.3 对临床的启示 |
参考文献 |
第二部分 隔药灸脐法治疗桥本甲状腺炎的临床研究 |
1 一般资料 |
1.1 受试者来源 |
1.2 诊断标准 |
1.3 纳入标准 |
1.4 排除标准 |
1.5 剔除标准 |
1.6 脱落标准 |
2 研究方法 |
2.1 随机分组及样本量 |
2.2 盲法实施 |
2.3 治疗方法 |
2.4 试验过程 |
2.5 观察指标 |
2.6 统计方法 |
2.7 评价标准 |
3 结果 |
3.1 病例剔除及脱落情况 |
3.2 两组基线情况比较 |
3.3 试验结果 |
讨论 |
1 中医学对桥本甲状腺炎的认识 |
1.1 病因病机 |
1.2 证型分析 |
1.3 中医对桥本甲状腺炎的治疗 |
1.4 中医治疗桥本甲状腺炎的机制研究 |
1.5 小结 |
2 西医学对桥本甲状腺炎的认识 |
2.1 桥本甲状腺炎的病因 |
2.2 桥本甲状腺炎的诊断 |
2.3 桥本甲状腺炎的治疗 |
2.4 小结 |
3 结果分析 |
3.1 试验结果分析 |
3.2 隔药灸脐法与隔淀粉灸脐法疗效差异分析 |
4 疗效机理分析 |
4.1 隔药灸脐法应用概述 |
4.2 灸法作用 |
4.3 药物作用 |
4.4 穴位作用 |
4.5 综合作用 |
结语 |
参考文献 |
综述 近十年中医药治疗桥本甲状腺炎的临床研究 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
查新报告 |
(5)针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠HPO轴及FSH-cAMP信号通路的影响(论文提纲范文)
中文摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略词 |
第一部分 文献综述 |
综述一 卵巢储备功能减退的生物学机制研究进展 |
1. 下丘脑-垂体-卵巢轴功能紊乱与卵巢储备功能减退生物学机制 |
2. 氧化应激参与卵巢储备功能减退生物学机制 |
3. 自身免疫反应参与卵巢储备功能减退生物学机制 |
4. 基因功能异常与卵巢储备功能减退生物学机制 |
5. 线粒体功能异常参与卵巢储备功能减退生物学机制 |
6. 脑源性神经营养因子参与卵巢储备功能减退生物学机制 |
参考文献 |
综述二 针刺改善卵巢储备功能的动物学实验研究进展 |
1. 现有的卵巢储备功能减退模型 |
2. 针刺干预卵巢储备功能减退的机理研究进展 |
参考文献 |
第二部分 实验研究 |
前言 |
实验一: DOR动物模型的建立及验证 |
1. 材料及方法 |
2. 结果 |
3. 讨论 |
4. 小结 |
实验二: 针刺对DOR大鼠的HPO轴及FSH-cAMP信号通路的影响 |
1. 材料及方法 |
2. 结果 |
3. 讨论 |
4. 小结 |
结论 |
本研究的不足与展望 |
参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
(6)秩边透水道针法对早发性卵巢功能不全大鼠性激素及Bcl-2、Bax表达的影响研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
主要符号表 |
前言 |
1.实验材料 |
1.1 实验动物 |
1.2 实验动物分组 |
1.3 主要实验药物及试剂 |
1.4 主要仪器设备 |
2.实验方法 |
2.1 POI动物模型的建立 |
2.2 阴道脱落细胞涂片检查步骤 |
2.3 动情周期判断标准 |
2.4 针刺穴位的定位 |
2.5 治疗方法 |
2.6 标本的采集及处理方法 |
3.指标的检测与方法 |
3.1 ELISA法检测血清中FSH、LH、E2、AMH、INHB的含量 |
3.2 卵巢组织形态 |
3.3 免疫组化法检测卵巢中bcl-2和bax蛋白表达 |
3.4 Western Blot法检测卵巢中bcl-2和bax的蛋白含量 |
3.5 实验结果分析 |
4.实验结果 |
4.1 大鼠动情周期变化 |
4.2 各组卵巢组织形态学观察 |
4.3 大鼠体重变化 |
4.4 大鼠脏器系数变化 |
4.5 各组大鼠血清FSH、LH、E2 水平变化 |
4.6 各组大鼠血清AMH、INHB水平变化 |
4.7 免疫组化法检测各组大鼠卵巢中bcl-2、bax的变化 |
4.8 Western blot法检测各组大鼠卵巢中bcl-2和bax的变化 |
5.讨论 |
5.1 传统医学对早发性卵巢功能不全的认识 |
5.2 POI动物模型的选择 |
5.3 治疗穴位的选择 |
5.4 秩边透水道针法对大鼠血清激素水平的影响 |
5.5 秩边透水道针法对血清AMH、INHB的影响 |
5.6 秩边透水道针法对大鼠卵巢中bcl-2和bax蛋白表达的影响 |
结论 |
不足与展望 |
参考文献 |
附图 |
附录 |
综述 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
(7)加味四二五合方联合芬吗通治疗化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的疗效观察(论文提纲范文)
中文摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略语表 |
引言 |
第一部分 内容与方法 |
1.内容 |
1.1 诊断标准 |
1.1.1 西医诊断标准 |
1.1.2 中医诊断标准 |
1.1.3 中医证候评分标准 |
1.2 纳入标准 |
1.3 排除标准 |
1.4 脱落标准 |
1.5 剔除标准 |
1.6 剔除、脱落及终止病例处理方法 |
2.方法 |
2.1 分组 |
2.2 治疗方法 |
2.2.1 中医治疗:加味四二五合方 |
2.2.2 西医治疗:芬吗通 |
2.3 观察项目 |
2.3.1 基本信息 |
2.3.2 观察指标 |
2.3.4 安全性指标 |
2.4 疗效判定标准 |
2.4.1 临床综合疗效判定标准 |
2.4.2 中医证候疗效判定标准 |
2.5 安全评价标准 |
2.6 不良事件观察 |
2.6.1 定义 |
2.6.2 不良事件的获取和记录 |
3.质量控制 |
3.1 临床资料收集 |
3.2 标本采集及处理 |
4.统计方法 |
第二部分 结果与分析 |
1. 一般资料比较分析 |
2.治疗前与治疗后的结果数据分析 |
第三部分 讨论 |
1.对化疗源性POI的认识 |
1.1 西医对化疗源性POI的认识 |
1.2 中医对化疗源性POI的认识 |
2.对化疗源性POI的治疗 |
2.1 西药周期治疗 |
2.2 中药复方调经治疗 |
3.方药分析 |
3.1 补气生血,行气活血,疏肝健脾 |
3.2 益肾填精,平调阴阳 |
3.3 攻毒散结 |
3.4 现代药理学研究进展 |
4.临床结果分析 |
4.1 临床疗效 |
4.2 激素水平变化情况 |
4.3 中医证候变化 |
5.不足及展望 |
5.1 不足 |
5.2 展望 |
第四部分 结论 |
致谢 |
参考文献 |
附录 临床病例观察表(CRF表) |
综述一 化疗源性早发性卵巢功能不全的西医防治进展 |
参考文献 |
综述二 化疗源性早发性卵巢功能不全的中医防治进展 |
参考文献 |
(8)艾烟干预弱精子症大鼠的细胞凋亡机制研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
符号说明 |
第一部分 文献综述 |
综述一 弱精子症的西医研究进展 |
1 病因 |
2 发病机制 |
3 治疗 |
4 结语 |
参考文献 |
综述二 弱精子症的中医研究进展 |
1 病因病机 |
2 临床研究 |
3 机制研究 |
4 结语 |
参考文献 |
综述三 弱精子症大鼠药物模型的研究进展 |
1 奥硝唑溶液灌胃法 |
2 雷公藤多苷灌胃法 |
3 腺嘌呤灌胃法 |
4 环磷酰胺腹腔注射法 |
5 结语 |
参考文献 |
前言 |
第二部分 实验研究 |
实验一 不同浓度艾烟对弱精子症模型大鼠睾丸指数、精子参数的影响 |
1 材料 |
2 方法 |
3 结果 |
4 讨论 |
5 小结 |
实验二 不同浓度艾烟对弱精子症模型大鼠睾丸组织病理形态学和凋亡指数的影响 |
1 材料 |
2 方法 |
3 结果 |
4 讨论 |
5 小结 |
实验三 不同浓度艾烟对弱精子症模型大鼠睾丸组织的Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响和抗细胞凋亡机制研究 |
1 材料 |
2 方法 |
3 结果 |
4 讨论 |
5 小结 |
第三部分 结语 |
1 结论 |
2 创新点 |
3 不足之处 |
4 展望 |
参考文献 |
致谢 |
在学期间主要研究成果 |
(9)基于“肾主生殖”理论的补肾生精中药治疗男性不育作用机制研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
前言 |
1 补肾生精中药治疗男性不育的文献依据 |
1.1 古代医籍中相关文献记载 |
1.1.1 古籍中与男性不育相关的病机论述 |
1.1.2 古籍中与男性不育相关的病案记载 |
1.2 现代科研中相关文献报道 |
1.2.1 医案报道获良效 |
1.2.2 临床研究证药效 |
1.2.3 药理实验阐机制 |
2 “肾主生殖”失司为男性不育的基本病机 |
2.1 肾气亏虚,精失所养是男性不育的病理基础 |
2.2 肾虚本脏阴阳失衡 |
2.2.1 肾阴亏虚,虚火扰乱精室以致不育 |
2.2.2 肾阳亏虚,精室失于温煦以致不育 |
2.3 肾虚累及他脏病变 |
2.3.1 肝失疏泄,精室失调以致不育 |
2.3.2 脾肾虚损,精室乏源以致不育 |
2.3.3 心肾不交,精室扰动以致不育 |
3 补肾生精中药治疗男性不育的作用机制 |
3.1 补肾生精中药的传统药性特点 |
3.1.1 寒凉滋阴,温热助阳 |
3.1.2 甘味补虚,扶正固本 |
3.1.3 脏腑归经,主入肾经 |
3.1.4 趋向沉降,主入下焦 |
3.2 补肾生精中药的现代药理研究 |
3.2.1 对生殖激素的影响 |
3.2.2 对精液质量的影响 |
3.2.3 对组织形态的影响 |
3.2.4 对超微结构的影响 |
3.2.5 对细胞凋亡的影响 |
4 精杞胶囊治疗男性不育的作用机制 |
4.1 精杞胶囊方剂组成 |
4.2 精杞胶囊各药药理作用 |
4.3 精杞胶囊对环磷酰胺诱导大鼠生精细胞凋亡的影响 |
4.3.1 实验材料与仪器 |
4.3.2 实验方法 |
4.3.3 实验结果 |
4.3.4 讨论 |
结语 |
参考文献 |
附录 主要缩略语中英文对照表 |
攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
致谢 |
(10)基于膀胱ICCs起搏功能的针刺调节逼尿肌过度活动的肌源性机制研究(论文提纲范文)
主要英文缩略表 |
中文摘要 |
ABSTRACT |
引言 |
第一部分 电针对逼尿肌过度活动大鼠尿动力的影响 |
1. 材料 |
1.1 实验动物 |
1.2 实验主要试剂 |
1.3 实验主要仪器 |
2. 方法 |
2.1 动物分组及处理 |
2.2 逼尿肌过度活动大鼠造模方法 |
2.3 尿动力测定方法 |
2.4 观察指标 |
2.5 统计学方法 |
3. 结果 |
3.1 基线比较 |
3.2 不同观察点每组大鼠膀胱有效容量比较 |
3.3 同一观察点各组大鼠膀胱有效容量比较 |
3.4 不同观察点每组大鼠储尿时间比较 |
3.5 同一观察点各组大鼠储尿时间比较 |
3.6 不同观察点每组大鼠排尿压比较 |
3.7 同一观察点各组大鼠排尿压比较 |
4. 小结 |
4.1 逼尿肌过度活动大鼠尿动力特点 |
4.2 电针对逼尿肌过度活动大鼠尿动力的影响 |
第二部分 电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱离体肌条收缩的影响 |
1. 材料 |
1.1 实验动物 |
1.2 实验主要试剂 |
1.3 实验主要仪器 |
1.4 主要试剂的制备 |
2. 方法 |
2.1 膀胱离体肌条的制备 |
2.2 观察指标 |
2.3 肌条牵拉试验步骤 |
2.4 统计学方法 |
3. 结果 |
3.1 不同观察点每组大鼠膀胱离体肌条收缩频率比较 |
3.2 同一观察点各组大鼠膀胱离体肌条收缩频率比较 |
3.3 不同观察点每组大鼠膀胱离体肌条收缩幅度比较 |
3.4 同一观察点各组大鼠膀胱离体肌条收缩幅度比较 |
4. 小结 |
4.1 膀胱离体肌条牵拉实验的意义 |
4.2 电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱离体肌条收缩的影响 |
第三部分 电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱ICCS细胞HCN各亚型表达的影响 |
1. 材料 |
1.1 实验动物 |
1.2 实验试剂 |
1.3 实验仪器 |
1.4 主要试剂配制 |
2. 方法 |
2.1 标本取材 |
2.2 观察指标 |
2.3 实验操作步骤 |
2.4 统计方法 |
3. 结果 |
3.1 大鼠膀胱ICCs细胞上HCN各亚型mRNA表达观察 |
3.2 24小时观察点各组大鼠膀胱ICCs细胞HCN蛋白表达比较 |
4. 小结 |
4.1 膀胱ICCs细胞HCN各亚型的功能特点 |
4.2 膀胱ICCs细胞HCN各亚型与膀胱起搏功能的关联 |
4.3 电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱ICCs细胞HCN各亚型表达的影响 |
第四部分 电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱ICCs细胞内钙离子震荡特征的影响 |
1. 材料 |
1.1 实验动物 |
1.2 实验试剂 |
1.3 实验器械和仪器 |
1.4 主要实验试剂制备 |
2. 方法 |
2.1 观察指标 |
2.2 原代膀胱ICCs细胞培养 |
2.3 24小时观察点大鼠原代膀胱ICCs细胞内钙离子震荡特征检测 |
2.4 统计方法 |
3. 结果 |
3.1 原代膀胱ICCs细胞形态学特征 |
3.2 24小时观察点各组大鼠原代膀胱ICCs细胞内钙离子震荡特征比较 |
4. 小结 |
4.1 膀胱ICCs细胞概述 |
4.2 膀胱ICCs细胞内钙离子震荡变化与细胞兴奋性的关系 |
4.3 电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱ICCs细胞兴奋性的影响 |
第五部分 分析与讨论 |
1. 逼尿肌过度活动的研究概况 |
1.1 逼尿肌过度活动与膀胱过度活动症的关系 |
1.2 逼尿肌过度活动的流行病学研究 |
1.3 逼尿肌过度活动的相关发病机制 |
1.4 逼尿肌过度活动的治疗方法 |
2. 中医学对逼尿肌过度活动的认识 |
3. 电针治疗逼尿肌过度活动的选穴依据 |
3.1 经穴-脏腑相关理论研究 |
3.2 现代神经生理学依据 |
4. 膀胱ICCs细胞兴奋与逼尿肌过度活动发病有密切联系 |
4.1 膀胱ICCs细胞结构和数量与逼尿肌过度活动的关联 |
4.2 ICCs细胞起搏细胞相关的HCN |
4.3 ICCs细胞内钙离子震荡特性是其兴奋性的间接体现 |
4.4 机械牵张刺激在逼尿肌过度活动肌源性机制中的作用 |
5. 电针治疗逼尿肌过度活动大鼠的效应研究 |
5.1 电针对逼尿肌过度活动大鼠尿动力的影响 |
5.2 电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱离体肌条收缩的影响 |
5.3 电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱ICCs细胞HCN各亚型表达的影响 |
5.4 电针对逼尿肌过度活动大鼠膀胱ICCs兴奋性的影响 |
创新点 |
结论 |
致谢 |
参考文献 |
附录 |
附录1 文献综述 膀胱ICCs细胞的研究进展 |
参考文献 |
附录2 在校期间发表学术论文 |
附录3 参加学术会议情况 |
附录4 RT-PCR与Westernblot实验具体步骤 |
四、针刺防治环磷酰胺对大鼠肝肾超微结构损害的观察(论文参考文献)
- [1]赤箭调节免疫、减肥、降脂、降糖作用研究[D]. 席蕴文. 南京中医药大学, 2021(01)
- [2]益精方调控慢性缺氧诱导的睾丸Leydig细胞凋亡治疗LOH的机制研究[D]. 闵潇. 中国中医科学院, 2020(01)
- [3]灵归方对奥硝唑诱导的弱精子症模型大鼠附睾功能影响的实验研究[D]. 晏斌. 中国中医科学院, 2020(01)
- [4]隔药灸脐法治疗桥本甲状腺炎的临床研究[D]. 白尹豪. 山东中医药大学, 2020(01)
- [5]针刺对卵巢储备功能减退模型大鼠HPO轴及FSH-cAMP信号通路的影响[D]. 尹雅倩. 中国中医科学院, 2020(01)
- [6]秩边透水道针法对早发性卵巢功能不全大鼠性激素及Bcl-2、Bax表达的影响研究[D]. 司佳弘. 山西中医药大学, 2020(07)
- [7]加味四二五合方联合芬吗通治疗化疗源性早发性卵巢功能不全肾阴阳两虚证的疗效观察[D]. 邓文桢. 湖南中医药大学, 2020(03)
- [8]艾烟干预弱精子症大鼠的细胞凋亡机制研究[D]. 安雨. 北京中医药大学, 2020(04)
- [9]基于“肾主生殖”理论的补肾生精中药治疗男性不育作用机制研究[D]. 黄佳妮. 南京中医药大学, 2020(08)
- [10]基于膀胱ICCs起搏功能的针刺调节逼尿肌过度活动的肌源性机制研究[D]. 张安冬. 上海中医药大学, 2019(03)