一、强脉冲噪声对豚鼠耳蜗血管纹血管的影响（论文文献综述）
唐凌媛[1]（2018）在《红景天拮抗脉冲噪声所致豚鼠听力损伤的实验研究》文中进行了进一步梳理研究背景随着社会工业化的发展,人类暴露于噪声的机率在日益增加。据流行病学调查结果显示,噪声是致职业性伤害和听力致残最常见的原因,也已成为世界的七大公害之一,噪声性听力损伤（noise-induced hearing loss,NIHL）的发生率目前仍在不断增长,仅次于老年性聋,排第二位。急性声损伤（acute acoustic trauma,AAT）是指噪声暴露过程中或者暴露后立即观察到的听力改变、耳鸣耳闷等症状,它可由稳态和脉冲噪声暴露所引起。稳态噪声见于一些重型设备,环境噪声多为稳态噪声。脉冲噪声是持续时间小于0.5秒、间隔时间大于1秒的噪声,如冲压、锻锤、爆炸、枪炮射击声等,这类噪声因其声压级增长很快,因此比稳态噪声的危害更大。噪声不仅给人类的身体健康带来了危害,而且给社会造成经济负担[1-5]。因此,降低和预防AAT的发生也成了当前所研究的热点和难点。噪声引起耳蜗的损伤包括机械性和代谢性两种机制,先发生机械性损伤,之后继发代谢性损伤。大量的研究表明AAT的发生与氧化损伤有关,活性氧（reactive oxygen species,ROS）在氧化损伤中起关键作用。耳蜗氧化状态的改变（生理情况下耳蜗内ROS的产生和清除处于动态平衡,噪声刺激下ROS急剧增加）、耳蜗血流量（cochlear blood flow,CBF）减少、毛细胞膜破坏和自由基（如ROS、活性氮）代谢的影响等,其中氧化状态的改变和耳蜗血流量减少能引起ROS的积累,ROS损伤大分子如DNA,诱发基因突变,损伤线粒体,致毛细胞功能障碍,进而引起毛细胞死亡,造成听力损失。红景天是多年草本植物,是传统中药,具有抗缺氧、抗氧化、抗疲劳、抗衰老等功能[6-10]。红景天苷是从红景天根和茎中提取出来的成分,是红景天最有活性的成分,红景天苷是类苯基丙烷糖苷中的一种,可通过抗缺氧、抗氧化等保护机体各种细胞。目的在噪声暴露前给予豚鼠口服诺迪康胶囊,其成分为红景天,探讨红景天对噪声所致豚鼠听力损伤的拮抗作用。方法将40只豚鼠随机分为四组,每组10只:第1组（实验对照组）,暴露于噪声,给予安慰剂淀粉片处理。第2组（实验组）,噪声暴露前3天给予诺迪康胶囊处理,第1组和第2组同时暴露在相同条件的脉冲噪声中。第3组（红景天组）,只给与3天诺迪康胶囊预处理,不做其他处理。第4组（生理盐水组）,只给予3天生理盐水预处理,不做其他处理。用听性脑干反应（auditory brainstem response,ABR）检测不同组别豚鼠实验前后ABR听阈,用扫描电镜观察豚鼠左侧耳蜗毛细胞纤毛变化情况,用酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测右侧耳蜗缺氧诱导因子-1 α（Hypoxia inducible factor-1 α,HIF-1 α）、半胱天冬酶 3（caspase-3）、4-羟基壬烯酸（4-hydroxynonenal,4-HNE）的表达情况,比较实验前后豚鼠听阈的变化、耳蜗毛细胞纤毛变化情况及耳蜗中caspase-3、HIF-1 α和4-HNE表达的差异。统计方法采用SPSS20.0版统计软件对数据行统计分析,计量资料均用（x±s）表示,运用配对样本t检验和单因素方差分析对ABR听阈值行统计学分析,耳蜗中caspase-3、HIF-l α和4-HNE水平用单因素方差分析,耳蜗中caspase-3、HIF-lα和4-HNE水平相关性用Pearson分析,组间两两比较采用LSD检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果1.听阈:实验前,第1组豚鼠听阈为10.50± 1.58dB,第2组豚鼠听阈为11.50±2.11dB,第3组豚鼠听阈为10.25±1.42dB,第4组豚鼠听阈为11.00±1.29dB,实验后24h,第1组豚鼠听阈为49.50 ± 2.84dB,第2组豚鼠听阈为27.75 土 1.42dB,第3组豚鼠听阈为10.75±1.67dB,第4组豚鼠听阈为10.75土 1.21dB。实验前,4组豚鼠听阈比较差异没有显着性（P<0.05）,实验后24h,第1组与第2组豚鼠听阈比较差异有显着性（P<0.05）,第3组和第4组豚鼠听阈比较差异没有显着性（P>0.05）,实验前后第1组和第2组听阈相差20dB,差异有显着性（P<0.05）。2.耳蜗形态学变化:第1组高倍镜（2.0K）下见耳蜗外毛细胞纤毛大片缺失,第2组发现外毛细胞纤毛呈个别、散在缺失,第3组和第4组外毛细胞纤毛未见明显损伤,4组豚鼠的内毛细胞纤毛均未见缺失。3.耳蜗 caspase-3、HIF-1 α 和 4-HNE 表达情况:耳蜗 caspase-3 含量:第 1 组为 6.64±0.54 ng/g,第 2 组为 5.62±0.41ng/g,第 3 组为 4.10±0.40ng/g,第 4 组为 3.85±0.48ng/g,第 1 组 caspase-3 的表达明显高于第2组（P<0.05）、第3组（P<0.05）和第4组（P<0.05）,第2组caspase-3的表达明显高于第3组（P<0.05）和第4组（P<0.05）,第3组和第4组caspase-3含量比较没有统计学意义（P>0.05）。耳蜗 HIF-1 α 含量:第 1 组为 8.40±0.56ug/g,第 2 组为 5.29±0.43ug/g,第3组为3.33±0.20ug/g,第4组为3.55土0.43ug/g,第1组HIF-1 α的表达明显高于第2组（P<0.05）、第3组（P<0.05）和第4组（P<0.05）,第2组HIF-1α的表达明显高于第3组（P<0.05）和第4组（P=0.00l）,第3组和第4组HIF-1α含量比较没有统计学意义（P>0.05）。耳蜗 4-HNE 含量:第 1 组为 760.35 ± 51.30ug/g,第 2 组为 587.45 ± 44.00ug/g,第 3 组为 418.65 ±39.00ug/g,第 4 组为 414.31 土 14.30ug/g。第 1 组 4-HNE 的表达明显高于第2组（P<0.05）、第3组（P<0.05）和第4组（P<0.05）,第2组4-HNE的表达明显高于第3组（P<0.05）和第4组（P<0.05）,第3组和第4组4-HNE含量比较没有统计学意义（P>0.05）。四组间caspase-3、HIF-1 α和4-HNE表达有显着差异（F=24.674,P<0.05;F=90.258,户<0.05;F =51.663,P<0.05）,第 1 组和第 2 组 caspase-3、HIF-1 α 和4-HNE表达显着高于第3组和第4组（P<0.05）,且第1组caspase-3、HIF-1 α和4-HNE表达较第2组升高（P<0.05）。四组间caspase-3、HIF-1 α和4-HNE各行相关性分析,均无显着相关性（P>0.05）。结论红景天能显着降低脉冲噪声暴露后ABR听阈,降低耳蜗中caspase-3、HIF-1α和4-HNE的浓度,减轻耳蜗外毛细胞纤毛的缺失,从而减轻听力的损伤,其机理为红景天的抗缺氧、抗氧化作用。
陈超[2]（2018）在《低频强噪声急性暴露对巴马香猪听觉系统损伤的研究》文中研究说明目的:低频强声普遍存在于人们的生活环境中,其衰减慢、声波长、易穿越障碍物的特点,使得低频强声对人体的影响较高频强声更长远。小型猪在耳部解剖、内耳形态、电生理等方面与人类极其相似。本实验从听性脑干反应（Auditory brainstem response,ABR）、畸变产物耳声发射（Distortion product otoacoustic emission,DPOAE）、HE染色、免疫组化染色（Caspase-3和TUNEL染色）、耳蜗基底膜铺片及荧光染色（细胞核DAPI染色,灰度成像）等方面进行观察,将结果与对照组比较,探讨不同频率和声压级的低频强声持续暴露30min后对巴马香猪听觉系统的损伤;探讨长时间低频强声暴露后外毛细胞损伤方式。为进一步研究低频强声对人类听觉系统的影响提供基础及理论支持。方法:（1）将13只巴马香猪随机分为对照组（3只）及实验组（10只）,均于实验前行听性脑干反应和畸变产物耳声发射检测,将实验组随机分为50Hz实验组和70Hz实验组。（2）50Hz实验组、70Hz实验组分别置于50Hz（167d B）、70Hz（164d B）强声声场（各处声压级相同）内,持续暴露30min,对照组不给予噪声暴露,其他饲养条件与实验组相同。（3）噪声暴露后即刻进行听性脑干反应（ABR）和畸变产物耳声发（DPOAE）检测,用HE染色观察各组动物内耳结构改变;用免疫组织化学染色检测各组动物内耳相应结构上Caspase-3和TUNEL的表达;用免疫荧光4’,6--二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐（DAPI）标记细胞核的方法进一步观察毛细胞缺失情况,同时计算毛细胞缺失率。结果:（1）各组巴马香猪噪声暴露前后听性脑干反应（ABR）、畸变产物耳声发射（DPOAE）比较发现:实验前小型猪对照组平均ABR阈值为33.1±8.6 d B,50Hz实验组平均为33.5±9.4d B,70Hz实验组平均为33.2±9.2d B,各组间不存在统计学差异。噪声暴露后实验组ABR均未引出;对照组和实验组暴露前2000Hz以上DPOAE均可引出,暴露后50Hz实验组2000Hz以上DPOAE均未引出;70Hz实验组2000Hz以上DPOAE均未引出。噪声暴露导致巴马香猪听功能出现严重损伤。（2）HE染色结果显示实验组均出现Corti器细胞排列紊乱,螺旋韧带从蜗壳剥脱现象,70Hz实验组还出现血管纹从螺旋韧带剥脱现象。对照组和实验组巴马香猪耳蜗各部位免疫组化染色Caspase-3和TUNEL均未见阳性表达。耳蜗毛细胞免疫荧光结果（细胞核DAPI染色,灰度成像）可见正常组毛细胞排列整齐,低频强声暴露后,50Hz实验组外毛细胞排列紊乱、不规则,部分外毛细胞缺失,70Hz实验组外毛细胞排列紊乱、不规则,大量毛细胞缺失,较50Hz实验组外毛细胞缺失严重。结论:（1）低频强声持续暴露30min可对巴马香猪的听觉系统造成严重的损伤,外毛细胞损伤情况可见70Hz实验组较50Hz实验组损伤严重,高频率损伤较低频率更重。（2）低频强声长时间（30min）持续暴露后,毛细胞的主要死亡方式可能为坏死。
丁大连,亓卫东,杨琨,李鹏,孙虹,Richard Salvi[3]（2016）在《内耳病理学研究技术的进展》文中指出内耳病理学是一门从组织形态学角度研究内耳疾病的发生原因和发展过程及其损害机制的边缘医学基础学科。内耳病理学的样品制备观察技术包括颞骨切片技术、膜迷路切片技术、耳蜗和前庭膜迷路取材铺片技术、内耳组织学和组织化学技术、内耳扫描电镜和透射电镜样品制备技术、以及电镜下的超微细胞化学技术等。通过分析各项内耳病理研究技术的发生、发展和现状,并结合实践经验和技术革新经验,深入讨论上述各项技术的优缺点和技术细节。
尹志利[4]（2014）在《低频稳态强噪声暴露对大鼠听觉系统影响的研究》文中研究指明目的：建立低频稳态强噪声噪声性的耳聋模型，通过对大鼠低频稳态强噪声暴露后不同时期听性脑干反应变化检测、耳蜗扫描电镜观察以及内耳细胞凋亡检测，了解低频稳态强噪声对大鼠听力损伤严重程度、耳蜗结构损伤的特点及内耳细胞凋亡的变化，初步探讨低频稳态强噪声性听力损伤特点及机制。方法：52只SD大鼠随机分为正常对照组（Pr）13只和暴露组39只，暴露组包括即刻组（E0组）、3天组（E3组）和7天组（E7组）各13只，经强度为150dB中心频率在500Hz的稳态噪声持续暴露10分钟后，分别于暴露后即刻、3天、7天，行听性脑干反应变化检测，检测结束后处死动物取双侧耳蜗，一侧耳蜗行耳蜗扫描电镜观察，另一侧耳蜗取材制作耳蜗石蜡切片行HE染色及免疫组化观察。结果：经150dB，500Hz稳态强噪声暴露后即刻组，大鼠ABR阈值88.69±5.40dB，3天组阈值76.50±15.17dB，7天组阈值75.12±18.99dB。暴露后各时间点ABR阈值较暴露前显着增高（P<0.01），E0组与E3组、E7组之间有统计学差异（P<0.05），E3组与E7组之间无统计学意义（P＞0.05）。耳蜗扫描电镜观察大鼠内、外毛细胞均严重损伤，表现为毛细胞静纤毛缺失、融合及团状变，并可见螺旋器表面渗出性改变。外毛细胞较内毛细胞损伤重,耳蜗各圈均有损伤，由底圈向顶圈毛细胞损伤逐渐减轻，即刻组损伤最重，3天组和7天组损伤较即刻组有所减轻。免疫组化结果显示低频强声暴露后各组耳蜗Corti器、螺旋神经节细胞、血管纹和螺旋韧带均可见Caspase-3染色程度不同的表达，对照组无明显表达，实验暴露组各时间点平均光密度值与对照组之间有统计学差异（P<0.01），E0组与E3组、E7组之间有统计学差异（P<0.05），E3组与E7组之间有统计学差异（P<0.05）。结论1.低频稳态强噪声对大鼠听觉系统造成严重损伤，即刻时最严重，3天组仅可轻度恢复，7天组无进一步改善。2.低频稳态强噪声可造成大鼠耳蜗形态严重损伤，耳蜗形态损伤以底圈最重，外毛细胞损伤较内毛细胞重。3.低频稳态强声暴露后各组大鼠耳蜗Corti器、血管纹和螺旋韧带、螺旋神经节细胞均可见Caspase-3染色程度不同的阳性表达， Caspase-3介导的内耳细胞凋亡可能在噪声性耳聋的发病机制中起重要作用。4.耳蜗Corti器、螺旋神经节细胞、血管纹和螺旋韧带细胞凋亡变化与ABR结果基本一致，耳蜗内外毛细胞损伤程度变化趋势与ABR结果基本一致。
吴玮,韩浩伦,余萌,王方园,屈昌北,张建中,王鸿南,李保卫,王刚,孟令照,虞学军,吴大蔚,牛聪敏,刘钢[5]（2013）在《失重和飞船舱内噪声复合因素对豚鼠内耳Caspase-3表达的影响》文中进行了进一步梳理目的探讨失重及飞船舱内噪声复合因素对豚鼠听功能的损伤作用,及其对凋亡标志物Caspase-3在豚鼠内耳表达的影响。方法 36只豚鼠随机分为4组,其中对照组6只,单纯失重组（A组）、单纯噪声组（B组）及失重+噪声组（C组）各10只。单纯失重组（A组）仅给予后肢悬吊模拟失重处理;单纯噪声组（B组）仅给予模拟飞船舱内噪声暴露;噪声+失重组（C组）同时给予噪声暴露和模拟失重的复合因素处理。实验前、暴露后即刻和恢复3天测试听性脑干反应阈值。于暴露后8小时和3天两个时间点取耳蜗,利用免疫组织化学染色方法显示凋亡标志物Cas pase-3在实验动物内耳毛细胞、血管纹及螺旋神经节细胞中的表达。结果在暴露后8小时和恢复后3天两个时间点上,A组ABR阈值分别与B组、C组比较差异有统计学意义（p<0.05）,而B组与C组间差异无统计学意义（P>0.05）。在暴露前后,A组分别与B组、C组比较差异有统计学意义（p<0.05）,而B组与C组间差异无统计学意义（P>0.05）。比较在恢复前后ABR,A组与C组间差异无统计学意义（P>0.05）,B组分别与A组、C组比较差异有统计学意义（p<0.05）。Caspase-3免疫组化结果显示,单纯失重组（A组）、单纯噪声组（B组）和失重+噪声组（C组）在暴露后、恢复3天两个时间点上,毛细胞和血管纹Caspase-3表达均为阳性。三个实验组暴露后螺旋神经节的凋亡标志物Caspase-3表达均为阳性,其中A、C组为强阳性表达,B、C组为弱阳性表达。而恢复3天后,A组动物Caspase-3表达为阴性,较实验后表达明显降低,B、C组动物Caspase-3表达均为阳性,较暴露后表达有所增强。结论失重和模拟飞船噪声均可造成豚鼠ABR阈值的升高,当两者复合作用时,噪声暴露可能对其造成的听力损失的影响更大。相比于单纯噪声暴露,失重与噪声因素复合作用时可减缓听力恢复的进程。二者复合作用引起的听力损失与内耳毛细胞、螺旋神经节和血管纹细胞的凋亡有关。
卢燕[6]（2012）在《饱和氢生理盐水对噪声性聋的防治研究》文中研究指明目前越来越多的人受到噪声性聋（Noise Induced Hearing Loss, NIHL）的困扰，噪声性聋引起的感音神经性聋多为不可逆损伤，目前尚无有效的治疗方法。因此，预防成为研究的重点。最新研究发现，饮用饱和氢气水可减轻白噪声引起的听力损害[1]，但作用机理仍不明确，仍需全面深入的研究来揭示其规律特点。为此本实验设计通过腹腔注射饱和氢生理盐水，首次从听功能、形态学及生物化学等多方面来综合探讨饱和氢生理盐水对脉冲噪声引起的听力损害的防治作用及其保护机理。第一部分饱和氢生理盐水对噪声性聋动物保护模型的建立目的：建立噪声性聋动物模型，初步验证饱和氢生理盐水是否具有预防噪声性聋的作用。方法：取体重250～300g，清洁级白色健康、ABR阈值正常雄性Hartley豚鼠18只。随机分成5组，正常组2只，空白对照组（单纯噪声暴露）、生理盐水对照组（噪声暴露前1小时腹腔注射等体积的生理盐水，1ml/100g）、饱和氢生理盐水组（单纯腹腔注射饱和氢生理盐水）、饱和氢生理盐水处理组各4只，（噪声暴露前1小时腹腔注射饱和氢生理盐水，1ml/100g）。给予脉冲噪声（压力峰值157dB SPL，脉宽0.25ms）连续暴露100次。分别于脉冲噪声暴露后4小时、14天处死动物行扫描电镜观察。结果：扫描电镜结果显示噪声暴露后4小时毛细胞以底圈上半圈至第二圈下半圈损伤最重，空白对照组及生理盐水对照组内毛细胞纤毛广泛性缺失、融合，外毛细胞3排静纤毛全部缺失。饱和氢生理盐水处理组纤毛的缺失程度明显少于对照组。噪声暴露后14天的耳蜗毛细胞损伤重于噪声暴露后4小时。结论：成功构建噪声性聋动物模型，初步验证饱和氢生理盐水对噪声性聋动物模型具有一定的预防作用，可明显减轻脉冲噪声对内耳的损害。第二部分饱和氢生理盐水对噪声性聋的预防及修复作用目的：探索最佳给药时间及饱和氢生理盐水是否对噪声性聋具有促进修复的作用。方法：通过噪声暴露前即刻、1小时、2小时腹腔注射饱和氢生理盐水寻求最佳给药时间，于脉冲噪声暴露后即刻、1、2、4、8天测试听性脑干反应（auditorybrainstem respons，ABR）；第8天采用琥珀酸脱氢酶（Succinate Dehydrogenase，SDH）、硝酸银（AgNO3）及免疫组化染色等多种技术方法观察毛细胞的形态学变化。结果：ABR测试结果显示噪声暴露后在各时间点的ABR阈值饱和氢生理盐水处理1小时、2小时组与对照组均差异显着。饱和氢生理盐水处理1小时、2小时组ABR阈值恢复程度明显快于空白对照组及盐水对照组。形态学结果显示饱和氢生理盐水处理组动物耳蜗外毛细胞虽存在SDH着色变浅，存在片状无染色区的改变，与对照组相比，细胞肿胀现象减轻，细胞缺失数明显减少，排列较规则,尤以饱和氢生理盐水处理1小时组显着。AgNO3染色与激光共聚焦结果同样呈现饱和氢生理盐水处理1小时、2小时组外毛细胞和纤毛缺失明显减少的表现。结论：噪声暴露前1小时腹腔注射饱和氢生理盐水可有效拮抗脉冲噪声引起的耳蜗损伤，能够对噪声性聋起到一定程度的预防和修复作用。第三部分饱和氢生理盐水对噪声性聋的防治机理研究目的：通过检测豚鼠血浆中总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase，T-SOD）活性、超氧阴离子（O2-）活性、丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量和及耳蜗组织中T-SOD及O2-活性来研究饱和氢生理盐水对噪声性聋的防治机理。方法：于噪声暴露前和噪声暴露后2h,分别取血测定血浆中的T-SOD及O2-活性、MDA含量；噪声暴露后2h抽血后，立即断头处死豚鼠，取出双侧耳蜗，测定耳蜗组织中的T-SOD及O2-活性。结果：各组血浆中的T-SOD及O2-活性、MDA含量在噪声暴露前后均无统计学差异，在噪声暴露后各组间也无统计学差异，P>0.05。空白对照组与生理盐水对照组耳蜗组织中的T-SOD活性无统计学差异，P>0.05，但二者均与正常组和饱和氢生理盐水处理1小时组有明显统计学差异，P<0.05。结论：饱和氢生理盐水具有抗氧化作用，可有效清除耳蜗组织中大量氧自由基，减轻噪声引起的听力损失。第四部分噪声暴露对成年豚鼠动脉血气及电解质的影响目的：初步探讨脉冲噪声暴露对成年豚鼠动脉血气及电解质的影响。方法：各组分别于脉冲噪声暴露后即刻、1h、2h、4h心包穿刺采血约1ml测动脉血气及K+、Na+、Cl-、Ca2+的浓度。结果：噪声暴露后，空白对照组pH呈升高趋势，但各组动脉血气pH值均保持在正常范围内波动，各组间及各组在不同时间点均无统计学差异，P>0.05；噪声暴露后即刻、1h，空白对照组Ca2+浓度升高，与正常组、饱和氢生理盐水组差异显着，P<0.05；钾离子浓度于噪声暴露后即刻，空白对照组与饱和氢生理盐水处理组有统计学差异，P<0.05；钠离子浓度于噪声暴露后即刻、1h、2h，正常组与其余各组间均有统计学差异，P<0.05。结论：脉冲噪声可能致成年豚鼠的动脉血气pH及血浆Ca2+浓度升高。
何青莲,熊敏,李云英,石灵春,谭敏,李华[7]（2008）在《Caspase-3在白色和杂色豚鼠脉冲噪声损伤耳蜗中的表达》文中研究指明【目的】观察Caspase-3在暴露于脉冲噪声中的白色和杂色豚鼠耳蜗中的表达,以探讨黑色素对耳蜗损伤的保护作用机制。【方法】选用白色和杂色豚鼠各8只,暴露于脉冲噪声中复制耳蜗损伤模型。取耳蜗用石蜡包埋、切片,采用免疫组织化学法观察Caspase-3在两组豚鼠耳蜗的表达。【结果】Caspase-3在两组脉冲噪声暴露豚鼠耳蜗中均呈阳性表达,以血管纹和螺旋神经节的表达较强,而且Caspase-3在白色豚鼠耳蜗的表达显着强于杂色豚鼠。【结论】耳蜗黑色素拮抗耳蜗损伤的作用是通过抑制耳蜗Capase-3活性,从而抑制耳蜗细胞的凋亡来实现的。
陈伟[8]（2008）在《Hath1基因内耳导入治疗噪声性聋的实验研究》文中指出哺乳动物听觉系统中,耳蜗毛细胞作为感觉神经的终末细胞,可以将声音刺激转换成电信号,并通过听觉神经传导至中枢,维持正常的听力。过度声刺激、老化、耳毒性药物、感染及自身免疫性疾病等多种因素均可引发耳蜗毛细胞的不可逆性损伤,从而导致永久性的感音神经性耳聋。运用促使非感觉上皮细胞向毛细胞分化的关键基因,进行耳蜗内基因治疗,是重建Corti’s结构,从而恢复听觉功能的可行方法。新近报道在氨基甙类抗生素导致全聋的成年豚鼠内耳过表达Atohl（果蝇atonal基因的同系物）,实现了毛细胞再生,并伴有听功能的部分恢复。噪声性聋与药物性聋,在损伤机理,耳蜗病理改变等方面均不同。目前研究显示,脉冲噪声对内耳的损伤,主要为机械性损伤,继而发生血管性及代谢性损伤。而机械性损伤最先影响外毛细胞（outer hair cell,OHC）,而后是内毛细胞（inner hair cell,IHC）。支持细胞及神经纤维由于位置深在,损伤较轻。这些现象似乎都预示噪声导致毛细胞损伤后,残存的支持细胞及神经纤维状态优于药物损伤。在此基础上予以Hathl（human homolog of thedrosophila gene atonal,果蝇atonal基因的人同系物）治疗,是否也会实现毛细胞再生及听功能恢复,目前还没有相关研究。本研究利用腺病毒载体将诱导毛细胞分化的关键基因-Hathl导入噪声致聋的豚鼠耳蜗内,运用听功能检测和多种形态学方法对基因转导的效率,基因治疗的生物学效应进行了初步研究。研究分以下三个部分。第一部分高强度脉冲噪声性聋豚鼠模型建立本部分研究的目的是建立噪声性聋的豚鼠模型,用于耳蜗毛细胞再生的在体实验研究。听力正常的豚鼠给予脉冲噪声（压力峰值为175.0dB SPL,脉宽0.25 ms）连续暴露200次。噪声暴露后1周,应用听性脑干反应（auditory brainstem respons,ABR）、听神经复合动作电位（compound action potential,CAP）和耳蜗微音电位（cochlear microphonic CM）进行听功能检测。结果显示在4kHz、8kHz、16kHz和20kHz频率范围,刺激声最大输出时ABR波形无法引出,或者阈值极高（≥95 dB SPL）;在1kHz、2kHz、4kHz和8kHz频率范围,CAP波形无法引出,或者阈值极高（≥95 dB SPL）;CM在1kHz、2kHz、4kHz、8kHz、16kHz频率范围无法引出。噪声暴露后4周及8周,ABR、CAP阈值没有恢复,CM输入、输出曲线为线性。扫描电镜、耳蜗铺片及冰冻切片显示噪声损伤后1周,内、外毛细胞大部分缺失,支持细胞存在,耳蜗内的传入、传出神经纤维大部分保存良好。毛细胞计数结果显示,噪声暴露后1周,各频率ABR阈值≥95dB SPL的豚鼠,耳蜗IHC缺失率达到91.4%,OHC缺失率达到97.2%。以上结果说明,高强度脉冲噪声连续暴露,造成豚鼠极重度感音神经性耳聋;耳蜗内、外毛细胞缺失＞90%;支持细胞及传入、传出神经纤维保存良好,Corti’s器基本构架存在;并且听功能及耳蜗毛细胞损伤无法自行恢复;是毛细胞再生研究的理想动物模型。第二部分腺病毒携带目的基因转染豚鼠耳蜗的实验观察基因治疗的前提必需将目的基因高效地转染至靶细胞内。本部分的目的是探寻高效的转导方法,将Hathl基因确切地转染至噪声损伤后存留的支持细胞内。听力正常的豚鼠40只,随机分为2组,每组20只,分别采用完整圆窗膜途径和耳蜗鼓阶打孔途径,转导Ad-Hathl-EGFP和Ad-EGFP。结果显示,在转导效率上,耳蜗鼓阶打孔组明显优于完整圆窗膜组;但在听功能保护方面,完整圆窗膜组显示出优势。正常动物耳蜗内,目的基因主要表达在支持细胞区域,内、外毛细胞区域几乎没有阳性表达细胞;除支持细胞表达目的基因外,螺旋神经节细胞,鼓阶和前庭阶的间皮细胞也有表达。噪声致聋的豚鼠10只,选择耳蜗鼓阶打孔途径,转导Ad-Hathl-EGFP至噪声损伤后耳蜗。转导后14天,耳蜗内存留的支持细胞广泛表达Hathl,转染效率比正常动物组高,耳蜗第二回的转染阳性细胞几乎达到100%;表达部位与正常动物组相似,但螺旋韧带表达强于正常动物组。以上结果说明,经完整圆窗膜途径基因导入,对耳蜗没有损伤,听功能保护良好,但转导成功率较低（50%）;经鼓阶打孔途径基因导入,转导成功率高（92%）,但耳蜗临近打孔部位有损伤,高频听力轻度损失;噪声损伤后,经鼓阶打孔途径基因导入,转导成功率高（80%）,Hathl表达在支持细胞,螺旋神经节细胞,螺旋韧带及鼓阶、前庭阶间皮细胞,在转导后2周表达持续、稳定。第三部分Hathl基因内耳导入治疗噪声性聋的实验观察本部分的研究目的是观察Hathl基因对噪声致聋豚鼠耳蜗的生物学效应。在前两部分的基础上,对噪声损伤后成年哺乳动物耳蜗毛细胞再生、修复及听功能恢复做初步的研究。造模成功的豚鼠45只,随机分为3组,Ad-Hathl-EGFP组（30只）;Ad-EGFP组（5只）;空白组（10只）。基因导入后4周、8周测试听功能（ABR、CAP、CM）,并用多种形态学方法观察耳蜗内变化。结果显示,基因转导后4周,Hathl治疗组各频率ABR阈值低于对照耳（右耳）,也低于Ad-EGFP组及空白组,平均达到85dB SPL,高频听阈略好于低频;CAP阈值在4kHz频率为75dB SPL,在1、2、8、16kHz频率为85dB SPL;CM在1kHz时可以引出,刺激强度最低为80dB SPL,2kHz、4kHz、8kHz各频率无法引出,CM输入输出曲线显示为线性特征。扫描电镜（scanningelectron microscope,SEM）观察,Hathl过表达后4周,产生大量的内毛细胞,而外毛细胞只有岛状或片装的恢复。全耳蜗铺片Pholloidin,Hoechst及Neurofilament免疫组化结果显示:IHC细胞区域可见到排列较整齐的内毛细胞核,而OHC区域仅见到零星的外毛细胞核,在OHC区域外侧有大量支持细胞核聚集,传入、传出神经纤维显示清楚。基因转导后8周,Hathl治疗组各频率ABR阈值低于对照耳（右耳）,也低于Ad-EGFP组及空白组,与4周时比较,进一步好转,平均达到70dB SPL;CAP阈值在8kHz频率为75dB SPL,在1、2、4、16kHz频率为80dB SPL;CM在1kHz、2kHz频率都可以引出,刺激强度最低为70dB SPL;4kHz、8kHz无法引出。输入输出曲线显示初步具有非线性的特征。SEM观察,Hathl转染后8周,耳蜗内产生了大量的内毛细胞及外毛细胞;TEM电镜观察,OHC及IHC具有毛细胞特征的表皮板,纤毛结构,并表达毛细胞特异标志物MyosinⅥ和Prestin。以上结果说明,噪声损伤耳蜗过表达Hathl,可以产生大量新的内、外毛细胞:IHC的再生、恢复早于OHC,4周时的听力恢复主要为IHC的作用,8周时的听力进一步好转则可能是OHC的贡献;再生的内、外毛细胞具有耳蜗毛细胞的特征。
王斌[9]（2008）在《地塞米松拮抗声损伤及庆大霉素耳毒性的实验研究》文中认为噪声性聋及药物性聋是常见的感音神经性聋,严重影响人们的生活质量。长期以来,对声损伤和庆大霉素耳毒性的防治一直是广大耳科工作者致力研究的课题。地塞米松作为合成的糖皮质激素,具有多种生理功能。已有研究发现,地塞米松能减小噪声及氨基甙类药物的耳毒性,但对这一现象机制的研究少有报道。地塞米松作为糖皮质激素,通过基因组途径及非基因组途径发挥作用。在基因组途径中,地塞米松通过与位于胞浆的糖皮质激素受体（Glucocorticoidreceptor,GR）结合,进而影响某些基因的转录与表达,因此了解GR在耳蜗的的分布很有必要。既往的研究应用酶联免疫吸附试验（ELISA）、原位杂交、免疫组织化学方法研究糖皮质激素在内耳的分布,而应用直观的免疫荧光技术分析GR在耳蜗的分布及声损伤对GR表达的影响还未见报道。Notch信号系统几乎涉及所有细胞的增殖、分化活动,Hes1（hairy andenhancer of split 1）为Notch的基本效应因子。Hes1 mRNA表达水平增高提示Notch信号活化,导致CDK（Cyclin-dependent kinases,周期性蛋白依赖激酶）抑制物p21Wafl/ Cip的聚集,而后者与细胞凋亡密切相关。噪声、地塞米松与hes1mRNA表达的关系可能是地塞米松拮抗声损伤的机制之一,对这一现象未见相关报道。地塞米松拮抗氨基甙类抗生素耳毒性的在体研究已有报道,离体实验避免了全身因素的干扰和影响,使研究途径更加便捷可靠。观察地塞米松是否拮抗庆大霉素对体外培养的Corti器的耳毒性,尚未见报道。抑制外毛细胞Ca2+敏感的外向K+电流可能是氨基甙类抗生素耳毒性的机制之一,地塞米松是否通过非基因组途径影响该电流,从而拮抗庆大霉素耳毒性,尚未见报道。因此,本研究的主要目的是探讨地塞米松对声损伤及庆大霉素耳毒性的影响及相关机制。以免疫荧光技术定位,荧光强度半定量分析为指标,探讨了糖皮质激素受体在豚鼠耳蜗的分布,声损伤后对其分布及各区域表达强度的影响。以听觉脑干诱发电位（ABR）,耳蜗形态学为指标探讨地塞米松减轻耳蜗声损伤的作用;用RT-PCR及荧光实时定量PCR技术,探讨噪声及地塞米松对豚鼠耳蜗hes1mRNA表达水平的影响。以免疫荧光技术定位,耳蜗形态学毛细胞计数为指标,探讨地塞米松减轻庆大霉素对离体培养的耳蜗Corti器的毒性作用。以听觉脑干诱发电位（ABR）为指标探讨地塞米松减轻庆大霉素耳毒性的作用;应用全细胞膜片钳记录技术探讨庆大霉素耳毒性及地塞米松拮抗庆大霉素耳毒性的离子通道机制。第一部分地塞米松拮抗内耳声损伤的实验研究一、糖皮质激素受体在豚鼠耳蜗的分布及声损伤对其表达的影响目的:研究GR在豚鼠耳蜗的分布及声损伤对豚鼠耳蜗GR表达的影响。方法:豚鼠随机分为二组:实验组予噪声暴露,噪声为白噪声,强度115dBSPL,暴露时间3h。暴露结束后2h断头剥取耳蜗。正常对照组不做处理,与实验组同时剥取耳蜗。制备耳蜗冰冻切片,免疫荧光技术观察豚鼠耳蜗GR表达情况,并进行荧光强度半定量分析。结果:（1）豚鼠耳蜗GR主要的阳性部位在螺旋韧带、血管纹、骨螺旋唇、Corti器以及螺旋神经节。螺旋韧带、血管纹、骨螺旋唇以及螺旋神经节等区域GR荧光强度无明显统计学意义（P＞0.05）,而上述各区域与Corti器的GR荧光强度相比,差异有显着意义（P＜0.05）。（2）声损伤后豚鼠耳蜗GR荧光强度在骨螺旋唇、corti器以及螺旋神经节较正常对照组无统计学意义（P＞0.05）,而螺旋韧带、血管纹区域荧光强度较正常对照组明显减低,有显着统计学意义（P＜0.01）。结论:GR在豚鼠耳蜗分布于螺旋韧带、血管纹、corti器和螺旋神经节,其中螺旋韧带、血管纹区域表达最强,corti器区域表达最弱;声损伤降低耳蜗各区域GR的表达,以血管纹、螺旋韧带最显着。二、地塞米松拮抗耳蜗声损伤及对豚鼠耳蜗hes1表达水平的影响目的:探讨地塞米松拮抗声损伤及与耳蜗hes1 mRNA的表达的关系。方法:在预实验的基础上,豚鼠随机分为5组,空白对照组,NS ip qd+植物油im qd;噪声组（N）,NS ip qd+植物油im qd+噪声暴露;地塞米松+噪声组（Dex+N）,Dex ip qd+植物油im qd+噪声暴露;RU486+噪声组（RU+N）,NS ip qd+RU486 im qd+噪声暴露;地塞米松+RU486+噪声组（Dex+RU+N）,Dex ip qd+RU486 im qd+噪声暴露。其中地塞米松剂量1mg/kg,浓度0.5mg/ml;RU486剂量20mg/kg,浓度25mg/ml。药物作用时间均为5d。噪声暴露于白噪声3小时,强度115dB SPL。噪声暴露结束即刻处死。取下颞骨,冰盒中取出耳蜗,用荧光实时定量PCR（real-time-PCR）检测耳蜗组织hes1 mRNA的表达。同样分组条件下,在噪声暴露前、噪声暴露结束后24小时测定Click和短纯音（2、4、6、8kHz）ABR反应阈值,空白对照组在实验开始和结束各测定一次ABR。各组动物进行耳蜗NBT染色及基底膜铺片。结果:（1）白噪声115dB SPL,暴露3h,促进豚鼠hes1 mRNA表达增加约3倍;地塞米松预处理5d,可以使hes1 mRNA表达水平接近于对照组。Dex-RU486-noise组hes1 mRNA表达水平接近于noise组,说明RU486基本上阻断了地塞米松下调豚鼠耳蜗hes1 mRNA表达水平的作用。（2）各组ABR平均阈移:空白对照组阈移为0.5～1.40dB;噪声组click阈移为29.56dB,短纯音（2、4、6、8kHz）阈移为32.75～34.78dB;地塞米松+噪声组click阈移为11.46dB,短纯音（2、4、6、8kHz）阈移为12.75～15.85dB;RU486+噪声组click阈移为26.93dB,短纯音（2、4、6、8kHz）阈移为30.15～33.26dB;地塞米松+RU486+噪声组click平均阈移为27.38dB,短纯音2、4、6、8kHz阈移为30.26～33.52dB。噪声组、地塞米松+RU486+噪声组分别与地塞米松+噪声组相比,全频的ABR阈移均有显着性差异（p＜0.05）。（3）耳蜗基底膜NBT染色显示噪声组底回损伤较重,地塞米松+噪声组损伤轻微。结论:地塞米松对耳蜗声损伤具有拮抗作用;下调耳蜗hes1 mRNA的表达水平,减少细胞凋亡,可能是地塞米松对声损伤发挥保护作用的机制之一。第二部分地塞米松拮抗庆大霉素耳毒性的实验研究一、地塞米松拮抗庆大霉素耳毒性作用的离体实验研究目的:采用Corti器体外培养的方法,观察地塞米松是否对庆大霉素的耳蜗毒性具有拮抗作用。方法:成功建立耳蜗Corti器体外培养系统后,选取出生3d的SD大鼠,随机分为3组,正常对照（Control）组,进行Corti器体外培养,72h后中止培养;庆大霉素（GM）组,培养48h后加入庆大霉素液（浓度0.5mmol/L）,作用24h后中止培养;地塞米松+庆大霉素（Dex+GM）组,培养24h后加入地塞米松溶液（浓度100ng/mL）,培养48h后加入庆大霉素液（浓度0.5mmol/L）,培养72h后中止培养。各组中止培养后,Rhodamine-phalloidin染色,免疫荧光技术观察Corti器毛细胞生长状况。结果:正常对照（Control）组毛细胞无明显缺失;庆大霉素（GM）组外毛细胞有明显缺失,而内毛细胞基本无明显改变,三排外毛细胞中以内两排损害较重;地塞米松+庆大霉素（Dex+GM）组可见外毛细胞的缺失程度明显减轻,内毛细胞基本无明显改变。结论:地塞米松预处理对离体耳蜗Corti器的庆大霉素耳毒性具有拮抗作用。二、地塞米松拮抗庆大霉素耳毒性作用的电生理学研究目的:探讨地塞米松拮抗庆大霉素耳毒性的离子通道机制。方法:（1）豚鼠随机分为6组,生理盐水（control）组,生理盐水0.5ml,ip;庆大霉素（GM）组,庆大霉素80mg/kg,im;地塞米松低浓度（Dex-1）组,地塞米松0.2mg/kg ip;地塞米松高浓度（Dex-h）组,地塞米松1mg/kg ip;地塞米松低浓度+庆大霉素（Dex-1+GM）组,地塞米松0.2mg/kg ip,庆大霉素80mg/kg,im;地塞米松高浓度+庆大霉素（Dex-h+GM）组,地塞米松1mg/kg ip,庆大霉素80mg/kg,im。给药前及给药结束后,测定ABR反应阈,计算ABR阈移。（2）全细胞膜片钳技术记录单离外毛细胞钙敏感外向钾电流。分别观察0.1、1、10、100、1000umol/L庆大霉素对钙敏感外向钾电流的影响;全细胞膜片钳技术记录单离外毛细胞钙敏感外向钾电流。分别观察0.1、1、10、100、1000umol/L地塞米松对钙敏感外向钾电流的影响。结果:（1）生理盐水（control）组、Dex-1组和Dex-h的ABR平均阈移很小,为1.0～1.6dB;GM组click平均阈移为10.6dB,短纯音在5.0～21.0dB之间,并以6kHz及8kHz的阈移最为明显;Dex-1+GM组Dex-h+GM组click平均阈移为5.8～7.2dB,短纯音在2.5～5.2dB之间,与GM组相比有显着性差异（p＜0.05）。（2）庆大霉素以浓度依赖性方式抑制外毛细胞Ca2+敏感的外向K+电流;地塞米松以浓度依赖方式增大外毛细胞Ca2+敏感的外向K+电流。结论:地塞米松能够显着降低庆大霉素对豚鼠的耳毒性,并且对豚鼠听功能没有明显影响;庆大霉素抑制外毛细胞Ca2+敏感的外向K+电流,可能是急性耳中毒的机制之一;地塞米松拮抗庆大霉素耳毒性的作用可能是通过激活外毛细胞Ca2+敏感的外向K+通道的非基因组效应实现的。
杨俊慧[10]（2006）在《豚鼠低强度爆震聋后耳蜗细胞凋亡及其相关基因表达的变化》文中进行了进一步梳理随着工矿业爆炸物以及爆震性武器威力的增加,爆震性耳聋的发病率越来越高,它是由综合致病因素引起的,其致聋机理尚未完全阐明,爆震所致的内耳损伤目前尚无确切有效的治疗方法。近年来研究表明,耳蜗细胞凋亡是噪声及氨基糖甙抗生素致聋导致耳蜗细胞死亡的主要表现方式,Caspase-3在耳蜗的发育、耳聋疾病中起重要作用,凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax在老年沙鼠耳蜗细胞中表达并发挥作用。但耳蜗细胞凋亡及其相关基因是否参与低强度耳爆震伤,均尚不十分清楚。为探讨低强度爆震性聋诱发的耳蜗细胞凋亡及Caspase-3等相关基因在低强度爆震性聋中的作用（包括表达、激活、调控等过程）,从而为临床防治爆震性聋等因素造成的感音神经耳聋提供理论依据。本课题进行以下三部分研究。第一部分进行豚鼠低强度耳爆震伤实验模型的建立:应用YBD-2000型冲击波发生器,以低强度压缩空气直接冲击豚鼠中耳模拟低强度耳爆震伤,进行豚鼠中耳解剖、听阈测试、耳蜗光镜及电镜观察。第二部分探讨豚鼠低强度耳爆震伤后耳蜗细胞凋亡及其相关基因表达的变化:在低强度爆震性聋模型上,应用TUNEL、荧光染色法及电镜技术检测凋亡是否是低强度爆震性聋耳蜗损害的一种方式,应用免疫组化、原位杂交及Western Blot技术检测Caspase-3、Bcl-2、Bax、PARP及cytochrome c等凋亡相关分子在低强度爆震性聋后不同时间耳蜗细胞凋亡中的改变,采用激光共聚焦检测低强度爆震性聋耳蜗细胞凋亡各时相点细胞内钙的变化情况。第三部分探讨Caspase-3特异性抑制剂对豚鼠低强度耳爆震伤后耳蜗细胞凋亡的影响:采用ABR、TUNEL、Caspase-3检测和透射电镜检查等各项指标。实验的主要结果和结论如下:1.豚鼠低强度耳爆震伤后,ABR反应阈发生大幅度的增加,在12h左右达到高峰,之后呈下降趋势,爆震后7d反应阈仍未恢复。中耳解剖、光镜及电镜显示损伤耳蜗具有爆震性聋的病理特征。提示本实验YBD-2000型冲击波发生器对豚鼠进行低强度耳爆震伤效果稳定,所建模型稳定、可靠,方法易于掌握,更有利于爆震性聋的实验研究,为进一步探讨耳爆震伤的发生机制奠定基础。2.低强度耳爆震伤后耳蜗细胞发生凋亡现象,与听阈改变一致。Caspase-3参与
二、强脉冲噪声对豚鼠耳蜗血管纹血管的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、强脉冲噪声对豚鼠耳蜗血管纹血管的影响（论文提纲范文）
（1）红景天拮抗脉冲噪声所致豚鼠听力损伤的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 研究背景 |
| 第一节 急性声损伤概述 |
| 第二节 急性声损伤的机制 |
| 第三节 ROS与AAT |
| 1.1 ROS的概述 |
| 1.2 ROS与耳蜗损伤 |
| 1.2.1 耳蜗ROS的形成 |
| 1.2.2 ROS与耳蜗缺血缺氧 |
| 1.2.3 ROS与线粒体损伤 |
| 1.2.4 ROS与谷氨酸兴奋性中毒 |
| 1.2.5 ROS与毛细胞死亡 |
| 1.3 凋亡基因调控 |
| 第四节 抗氧化剂治疗ATT |
| 第五节 红景天的药理作用 |
| 1.1 红景天抗缺氧作用 |
| 1.2 红景天抗氧化作用 |
| 第二章 实验部分 |
| 第一节 实验设计 |
| 1.1 动物分组及脉冲噪声暴露 |
| 1.1.1 动物分组 |
| 1.1.2 各组豚鼠预处理 |
| 1.1.3 脉冲噪声暴露 |
| 1.2 实验前及实验后24h四组豚鼠ABR听阈的测量 |
| 1.3 豚鼠耳蜗取材 |
| 1.4 耳蜗扫描电镜样品制备及观察 |
| 1.5 ELISA检测组织中caspase-3、HIF-1α和4-HNE浓度 |
| 1.5.1 ELISA检测组织中caspase-3的浓度 |
| 1.5.2 ELISA检测组织中HIF-1 α的浓度 |
| 1.5.3 ELISA检测组织中4-HNE的浓度 |
| 1.6 统计学分析 |
| 第二节 实验结果 |
| 1.1 四组豚鼠的ABR听阈的变化 |
| 1.2 耳蜗的形态学结果 |
| 1.3 耳蜗caspase-3、HIF-1 α和4-HNE表达情况 |
| 第三节 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（2）低频强噪声急性暴露对巴马香猪听觉系统损伤的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词一览表 |
| 1.引言 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 实验动物与方法 |
| 2.2 仪器、试剂及来源 |
| 2.3 低频强声暴露方法 |
| 2.4 听性脑干反应测试（ABR） |
| 2.5 畸变产物耳声发射（DPOAE） |
| 2.6 耳蜗标本的取材 |
| 2.7 苏木精 — 伊红染色法（HE 染色） |
| 2.8 免疫组织化学染色方法 |
| 2.9 基底膜铺片及 DAPI 染色 |
| 3.结果 |
| 3.1 各组巴马香猪噪声暴露前后 ABR 阈值比较 |
| 3.2 各组巴马香猪噪声暴露前后 DPOAE 比较 |
| 3.3 各组巴马香猪耳蜗标本 HE 染色结果（图 1） |
| 3.4 各组巴马香猪耳蜗标本 Caspase-3 染色结果（图 2） |
| 3.5 各组巴马香猪耳蜗标本 Tunel 染色结果（图 3） |
| 3.6 各组巴马香猪耳蜗标本免疫荧光染色（细胞核 PI 染色，灰度成像）结果（图4） |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（3）内耳病理学研究技术的进展（论文提纲范文）
| 1 病理学与内耳病理学 |
| 2 内耳切片技术的发展 |
| 3 内耳膜迷路取材铺片技术的发展 |
| 4 内耳组织化学技术的发展 |
| 5 内耳样品电镜技术的发展 |
| 6 内耳电镜细胞化学技术的发展 |
（4）低频稳态强噪声暴露对大鼠听觉系统影响的研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（5）失重和飞船舱内噪声复合因素对豚鼠内耳Caspase-3表达的影响（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 噪声暴露方法 |
| 1.3 模拟失重方法 |
| 1.4 听性脑干反应(ABR)阈值测试 |
| 1.5 凋亡标志物Caspase-3免疫组织化学观察 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 各实验组豚鼠听力变化 |
| 2.1.1 各实验组动物不同时间ABR阈值的变化,见表1。 |
| 2.1.2 各实验组动物实验前后、恢复前后ABR阈移比较,见表2。 |
| 2.2 内耳细胞内凋亡标志物Caspase-3免疫组织化学结果 |
| 2.2.1 毛细胞Caspase-3免疫组织化学结果空白对照组内耳毛细胞Caspase-3表达为阴性。 |
| 2.2.2 血管纹Caspase-3免疫组织化学结果 |
| 2.2.3 螺旋神经节Caspase-3免疫组织化学结果 |
| 3 讨论 |
（6）饱和氢生理盐水对噪声性聋的防治研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 第一部分 饱和氢生理盐水对噪声性聋动物保护模型的建立 |
| 引言 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 噪声暴露 |
| 2.3 内耳扫描电镜样品的制备 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 饱和氢生理盐水对噪声性聋的预防及修复作用 |
| 引言 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 噪声暴露 |
| 2.3 噪声暴露后的检测 |
| 2.4 琥珀酸脱氢酶（SDH）染色 |
| 2.5 硝酸银（AgNO3）染色 |
| 2.6 免疫荧光染色 |
| 2.7 光学显微镜观察 |
| 2.8 激光共聚焦显微镜观察 |
| 3 统计学分析 |
| 4 结果 |
| 4.1 听力学结果 |
| 4.2 SDH 染色及外毛细胞计数 |
| 4.3 AgNO_3 染色观察 |
| 4.4 耳蜗免疫荧光染色观察 |
| 5 讨论 |
| 第三部分 饱和氢生理盐水对噪声性聋的防治机理研究 |
| 引言 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 噪声暴露 |
| 2.3 血浆 T-SOD 活力、O_2-活力和 MDA 含量测定 |
| 2.4 耳蜗组织 T-SOD 活力和 O_2-活力测定 |
| 2.5 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 血浆 T-SOD 活力、O_2-活力及 MDA 含量变化 |
| 3.2 耳蜗 T-SOD 活力、O_2-活力的变化 |
| 4 讨论 |
| 第四部分 噪声暴露对成年豚鼠动脉血气及电解质的影响 |
| 引言 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 动物造模 |
| 2.3 动脉血气及主要电解质检测时间点 |
| 2.4 动脉血抽取步骤 |
| 2.5 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 噪声暴露对豚鼠动脉血气的影响 |
| 3.2 噪声暴露对豚鼠主要电解质的影响 |
| 4 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 1 噪声的基本概念 |
| 2 影响噪声性听力损失的主要因素 |
| 3 噪声性聋的发生机制 |
| 3.1 机械损伤学说 |
| 3.2 代谢损伤学说 |
| 4 噪声性聋的防防与治疗 |
| 4.1 预防措施 |
| 4.2 噪声习服 |
| 4.3 治疗原则 |
| 5 噪声性聋的防治研究进展 |
| 5.1 钙通道阻滞剂 |
| 5.2 抗氧化药物 |
| 5.3 改善谷氨酸-谷氨酰胺循环药物 |
| 6 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文 |
| 致谢 |
（8）Hath1基因内耳导入治疗噪声性聋的实验研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 高强度脉冲噪声性聋豚鼠模型建立 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 腺病毒携带目的基因转染豚鼠耳蜗的实验观察 |
| 引言 |
| 第一章 Ad-EGFP经完整圆窗膜转染正常豚鼠耳蜗的观察 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 第二章 Ad-Hath1-EGFP经鼓阶打孔转染正常豚鼠耳蜗的观察 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 第三章 Ad-Hath1-EGFP经鼓阶打孔转染噪声损伤后豚鼠耳蜗的观察 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 Hath1基因内耳导入治疗噪声性聋的实验观察 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论与展望 |
| 文献综述 Prestin-外毛细胞运动蛋白 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（9）地塞米松拮抗声损伤及庆大霉素耳毒性的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一部分 地塞米松拮抗内耳声损伤的实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 糖皮质激素受体在豚鼠耳蜗的分布及声损伤对其表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 实验二 地塞米松拮抗声损伤及对豚鼠耳蜗hesl表达水平的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 地塞米松拮抗庆大霉素耳毒性的实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 地塞米松拮抗庆大霉素耳毒性作用的离体实验研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 实验二 地塞米松拮抗庆大霉素耳毒性作用的电生理学研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 |
| 文献综述二 |
| 附录 在读期间发表的论文及参加的会议 |
| 致谢 |
（10）豚鼠低强度爆震聋后耳蜗细胞凋亡及其相关基因表达的变化（论文提纲范文）
| 英文缩写一览表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 论文正文豚鼠低强度爆震聋后耳蜗细胞凋亡及其相关基因表达的变化 |
| 前言 |
| 第一部分 豚鼠低强度爆震聋实验模型的建立 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 豚鼠低强度爆震聋后耳蜗细胞凋亡及其相关基因表达的变化 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 Caspase-3 特异性抑制剂对豚鼠低强度爆震聋后耳蜗细胞凋亡的影响 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 致谢 |
| 图片 |
| 文献综述一 爆震性聋研究进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 细胞凋亡与内耳疾病 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
四、强脉冲噪声对豚鼠耳蜗血管纹血管的影响（论文参考文献）
- [1]红景天拮抗脉冲噪声所致豚鼠听力损伤的实验研究[D]. 唐凌媛. 南方医科大学, 2018(01)
- [2]低频强噪声急性暴露对巴马香猪听觉系统损伤的研究[D]. 陈超. 安徽医科大学, 2018(01)
- [3]内耳病理学研究技术的进展[J]. 丁大连,亓卫东,杨琨,李鹏,孙虹,Richard Salvi. 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志, 2016(03)
- [4]低频稳态强噪声暴露对大鼠听觉系统影响的研究[D]. 尹志利. 安徽医科大学, 2014(11)
- [5]失重和飞船舱内噪声复合因素对豚鼠内耳Caspase-3表达的影响[J]. 吴玮,韩浩伦,余萌,王方园,屈昌北,张建中,王鸿南,李保卫,王刚,孟令照,虞学军,吴大蔚,牛聪敏,刘钢. 中华耳科学杂志, 2013(03)
- [6]饱和氢生理盐水对噪声性聋的防治研究[D]. 卢燕. 福建医科大学, 2012(01)
- [7]Caspase-3在白色和杂色豚鼠脉冲噪声损伤耳蜗中的表达[J]. 何青莲,熊敏,李云英,石灵春,谭敏,李华. 广州中医药大学学报, 2008(05)
- [8]Hath1基因内耳导入治疗噪声性聋的实验研究[D]. 陈伟. 中国人民解放军军医进修学院, 2008(08)
- [9]地塞米松拮抗声损伤及庆大霉素耳毒性的实验研究[D]. 王斌. 复旦大学, 2008(05)
- [10]豚鼠低强度爆震聋后耳蜗细胞凋亡及其相关基因表达的变化[D]. 杨俊慧. 第三军医大学, 2006(11)