一、直接测定水中微量毒物药物及其降解产物的核磁共振技术(论文文献综述)
孟青[1](2021)在《褐藻胶裂解酶产酶菌株挖掘及其催化特性研究》文中研究指明褐藻胶是来自于褐藻植物的天然高分子多糖,由D-甘露糖醛酸(β-D-mannuronic acid,M)和L-古罗糖醛酸(α-L-guluronic acid,G)通过1,4糖苷键连接形成。褐藻寡糖(Alginate oligosaccharides,AOS)是褐藻胶的降解产物,其水溶性大幅提高而溶液粘度明显降低,克服了褐藻胶大分子不能跨越机体各种生物屏障和细胞膜的限制,拓宽了其作为生理活性物质的应用,并显示更为卓越的生物活性,如降低血糖血脂、抗病毒、抗氧化、免疫调节等,在食品、农业、生物、医药等多个领域都具有广阔的应用前景,是海洋功能食品及药物研究和开发的热点。褐藻胶裂解酶催化裂解褐藻胶的1,4糖苷键生成褐藻寡糖。相比于化学或物理降解,酶法降解只需一步降解反应,具有操作简单、反应条件温和、特异性高、产率高、产物易分离纯化等优点,在褐藻寡糖产业化中具有重要的应用前景。但目前褐藻胶裂解酶制剂种类稀少,价格昂贵,限制了褐藻寡糖的规模化生产。本研究主要目的是筛选获得褐藻胶裂解酶高产菌株,利用分子生物学技术使褐藻胶裂解酶在重组大肠杆菌中胞外表达,进一步对获得的多结构域褐藻胶裂解酶通过截短表达进行性质表征和结构域功能解析;需钠弧菌是已知生长速度最快的细菌,生长速度比传统模式生物大肠杆菌快近一倍,被认为是一种潜力巨大的新型模式生物,因此也探索了所筛选的需钠弧菌株系用作新型宿主菌的可行性。主要研究内容和结果如下:(1)从海泥中筛选获得一株胞外分泌褐藻胶裂解酶的需钠弧菌Vibrio natriegens SK42.001,保藏在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC),保藏号为No.M2017011。V.natriegens SK42.001所产褐藻胶裂解酶Aly01为诱导酶,发酵酶活为5.20±0.14 U/m L,该酶主要生产褐藻三糖。Aly01的分子量约为50 k Da,通过调整加酶量实现对海藻酸钠的不同程度降解时,随着加酶量的增大,产物分子量和粘度显着下降,甘露糖醛酸占比不断增加而古罗糖醛酸占比不断下降;产物1H NMR分析进一步表明V.natriegens SK42.001所产褐藻胶裂解酶Aly01偏好于裂解poly G片段。(2)利用PCR技术从V.natriegens SK42.001基因组中扩增获得Aly01的编码基因,该酶N端含有一段由28个氨基酸组成的信号肽。构建Aly01基因全长重组质粒p ET28a-aly01并转化大肠杆菌,结果显示大肠杆菌可识别Aly01来源的信号肽,并在18°C低温诱导下实现Aly01在大肠杆菌中的胞外分泌表达。利用TB培养基添加120mmol/L甘氨酸和10 mmol/L钙离子的协同策略,使重组菌的蛋白胞外分泌延滞期由12h缩短到3 h,同时钙离子的添加弥补了甘氨酸引起的细胞生长损失,促使总体酶活进一步提升至4.55 U/m L。此外,将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)与Aly01信号肽融合,构建重组质粒p ET28a-SPGFP并转化大肠杆菌,成功利用Aly01信号肽将外源GFP在大肠杆菌中分泌表达,进一步扩展了Aly01信号肽在大肠杆菌中胞外生产其他异源蛋白的应用。(3)序列分析和三维结构建模表明,Aly01包含32家族碳水化合物结合结构域(Carbohydrate binding module 32,CBM32)和催化域(catalytic domain,CD)两个结构域,中间由α螺旋连接肽和无规则卷曲连接肽相连。对Aly01进行截短表达,发现去掉CBM32的截短体(CD167)的催化活性为3779.36±92.18 U/μmol,仅有原始酶(6276.04±210.70 U/μmol)的60%,CD167的Km值和催化效率(Kcat/Km)分别为9.05±1.12和20.41±1.12 m M-1 S-1,原始酶Aly01的Km值和催化效率(Kcat/Km)分别为5.46±0.65和37.95±2.10 m M-1 S-1,表明CBM32通过提高Aly01对海藻酸钠的结合能力来提高其催化效率。降解产物分析显示,原始酶产物主要为三糖,而CD167的产物为二、三糖混合物,说明CBM32的截短改变了Aly01主要生产三糖的性质。根据分子对接和动力学模拟推测该酶降解模式为:CBM32充当感应器捕捉底物海藻酸钠后通过将其不断推入催化域来调控降解过程,两个结构域如同“两只手握住一根筷子”一样同时与海藻酸钠作用,随着海藻酸钠逐渐滑进催化域不断释放出三糖产物。(4)V.natriegens SK42.001全基因组测序和功能注释结果显示,其具有两个大小分别为3,476,249和1,850,671 bp的闭环染色体,编码4750个ORF,该菌株不含毒力因子数据库中的已知弧菌类毒素。该菌株的褐藻胶代谢途径推测为:先分泌褐藻胶裂解酶Aly01至胞外降解褐藻胶为小分子寡糖,进入细胞后由寡褐藻胶裂解酶降解为单体DEH(4-deoxy-L-erythro-hexoseulose uronic acid),之后经DEH还原酶、KDG(2-keto-3-deoxy-D-gluconate)激酶、KDPG(2-keto-3-deoxy-6-phospho-gluconate)醛缩酶作用生成3-磷酸甘油醛(D-glyceraldehdye-3-phosphate,G3P)和丙酮酸进入糖酵解途径,之后进入TCA循环。V.natriegens SK42.001在液体培养基中生长速率和生物量都是大肠杆菌的约1.5倍;在固体培养基上,该菌株划线5.5 h后即长出肉眼可见单菌落,而大肠杆菌则需10 h左右。抗生素试验结果显示V.natriegens SK42.001不耐受氯霉素(Cm)和四环素。以GFP为报告基因,以Cm为筛选基因,构建重组质粒p AWP89-Cm-GFP,采用三亲接合的方法将重组质粒引入V.natriegens SK42.001中,GFP在SK42.001重组菌中成功表达,在紫外光激发下可观察到绿色荧光,证明了V.natriegens SK42.001具备进一步开发用作新型模式菌株表达外源蛋白的潜力。
周游[2](2021)在《呕吐毒素光催化降解产物安全性评价及其诱导的胞内氧化应激状态原位监测方法研究》文中研究指明脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON),是一种主要由镰刀菌属产生的B型单端孢霉烯族真菌毒素,是全球污染频率最高和污染范围最广的真菌毒素之一。DON污染可导致粮食减产和使用价值降低,从而引发粮食安全问题,并造成严重经济损失。此外,由于目前仍缺乏有效的消减控制措施,食源性DON暴露很难避免,易引发呕吐、腹泻、发烧等急性中毒症状,长期DON暴露可能导致肠道功能紊乱、体重增加减缓和免疫失调等不良反应。目前,DON的降解方法主要包括物理、化学和生物法三大类,其中物理法通常脱除不完全,化学法容易造成二次污染且影响食物感官,生物法相对安全却又非常耗时。所以,迫切需要开发绿色、高效的新型DON降解技术。近年来,真菌毒素的光催化降解技术逐渐引起了研究者们的关注,作为一种绿色的高级氧化技术,其具有较广阔的发展前景。然而,研究者多注重新光催化剂的开发,而对降解产物的毒性较少给予关注。DON光催化降解后的产物是什么?其毒性如何?是否安全?是非常重要,却又时常被忽视的问题。因此,本研究合成了上转换纳米颗粒(Upconversion nanoparticles,UCNP)包被二氧化钛(TiO2)的新型光催化剂UCNP@TiO2,用于DON的降解,重点考察了DON光催化降解产物的体外、体内安全性,为反馈该技术降解效果提供理论支撑。同时,结合DON易诱导细胞氧化应激这一毒理现象,针对细胞内活性氧(ROS)和谷胱甘肽(GSH)两种胞内氧化应激标志物质,分别构建了ROS广谱性和GSH特异性纳米探针,并应用于DON及其降解产物介导的胞内氧化应激状态原位监测,进一步丰富了体外毒理学的活细胞原位分析方法。具体研究内容及结果如下:1.合成UCNP@TiO2光催剂并应用于DON的降解,重点研究了经不同时间光催化降解后DON降解产物的体外安全性。成功构筑了可同时利用紫外光和近红外光的UCNP@TiO2新型光催化剂,将其用于水溶液中DON的光催化降解,通过ESI/MS分析和二次质谱鉴定DON的降解中间产物为3种,荷质比(m/z)分别为329.399、311.243和280.913。以HepG2细胞为模型,通过考察细胞活性、细胞形态、细胞周期、胞内ROS水平、细胞凋亡状况、线粒体膜电位和胞内抗氧化酶系活性等指标,较为系统的研究了经不同时间(30、60、90、120 min)光催化降解后DON降解产物的体外安全性,发现经120 min光催化处理的DON降解产物对HepG2细胞的体外毒性显着降低,甚至无毒。2.根据DON及其降解产物易导致细胞氧化应激反应,构建了无标记的PEG-CdSe@ZnS量子点荧光探针,并用于DON及其降解产物诱导的活细胞内ROS的荧光成像及氧化应激状态原位监测。以PEG修饰提高了CdSe@ZnS量子点的生物相容性,并在溶液体系中考察了该探针对多种ROS(O2-、ONOO-、·OH、Cl O-和H2O2)的广谱响应能力;以典型ROS分子H2O2研究了PEG-CdSe@ZnS探针的分析性能,显示当H2O2浓度范围为0.078~1.25μM时,线性关系良好(y=-40.36x+124.83;R2=0.9896),检测限为19 n M(3δ,n=11),表明探针对ROS具有广谱响应能力和高灵敏度。选用优化后的探针孵育浓度(5 ppm),进一步用于DON及其光催化降解产物诱导的活细胞内ROS荧光成像和氧化应激状态评估,发现当DON浓度大于等于10 ppm时,荧光几乎被淬灭,氧化应激程度趋于饱和,而120 min的DON光催化降解产物几乎未导致荧光淬灭,并与对照组趋于一致(P>0.05),表明该产物未导致细胞氧化应激反应。3.以GSH适配体(Aptamer,Apt)为识别分子,金纳米簇(Au nanoclusters,AuNCs)和MoS2纳米片为荧光供体和淬灭剂,构建了Apt-AuNCs-MoS2复合纳米探针并用于活细胞中GSH的荧光成像和DON及其降解产物诱导的氧化应激水平原位监测。在以胞内总ROS为氧化应激评估指标的基础上,进一步选取GSH这一特异性指标为监测对象,用于氧化应激评估。所构建的Apt-AuNCs-MoS2复合探针对GSSG、Cys、Glu等类似成分具有良好的抗干扰能力,当GSH浓度范围为0.01~100μM时,荧光强度与GSH浓度的Log10值线性良好(y=203.93x+791.55,R2=0.9847),检测限为35 n M(3δ,n=11),表明该探针具有高特异性和高灵敏性。活细胞荧光成像结果显示,当DON浓度大于等于20 ppm时,荧光几乎无法恢复,氧化应激程度达到最大水平,而120 min的DON降解产物组荧光恢复趋于饱和,且与对照组差异不显着(P>0.05),表明该产物未诱导细胞氧化应激。4.在体外毒理学和氧化应激评估的基础上,进一步选取BLAB/c小鼠为实验动物模型,探究了DON光催化降解产物缓解小鼠肠道屏障功能损伤与菌群紊乱的作用及机制。通过测定肠道组织中T-AOC、SOD、CAT、GSH-Px等抗氧化酶系活性,以及GSH/GSSG比值和MDA的水平,考察了DON及其降解产物诱导的肠道组织氧化应激程度;通过血清中DAO活力和肠道组织病理观察,考察了小鼠肠道组织损伤程度和机械屏障的完整性;并采用16S rRNA高通量测序技术研究DON及其降解产物暴露后小鼠肠道微生物区系组成。结果表明,120 min的DON降解产物处理有效缓解了DON暴露导致的肠道组织氧化应激水平升高和绒毛上皮组织损伤,改善了肠道屏障功能,同时缓解了DON诱导的肠道菌群紊乱。运用RT-q PCR法和组织免疫荧光技术,发现DON降解产物处理显着改善了小鼠肠道紧密连接蛋白claudin 3、ZO-1和occludin的基因转录和蛋白表达水平,从而有效改善了肠道屏障功能损伤,恢复了肠道机械屏障的完整性;16S rRNA测序表明120 min的DON降解产物显着上调了Bacteroides、Prevotella、Acinetobacter、Streptococcus、Anaerotruncus、Cupriavidus、Clostridium和Anaeroplasma的相对丰度,从而有效缓解了DON暴露导致的肠道菌群紊乱。此外,还发现DON暴露可诱导传统有益菌Akkermansia的代偿性增殖,进而发挥其肠道黏膜修复功能。且DON降解产物处理显着改善了小鼠采食量和生长性能,下调了血清中IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α等炎症因子水平,同时上调了ALT、AST和ALP等肝酶活性,降低了DON造成的肝脏组织损伤,还改善了小鼠能量代谢状态和自主活动量。综上所述,经光催化处理120 min后DON降解产物的体外、体内毒性显着降低,且在活细胞中未诱导显着的氧化应激反应,安全性得到有效提高,表明基于UCNP@TiO2的DON光催化降解技术绿色、高效,其在真菌毒素控制领域具有较大的发展潜力。
李玉婷[3](2021)在《基于常压等离子体质谱技术的多糖快速鉴定分析方法及降解研究》文中指出植物多糖对于糖尿病的治疗具有显着效果。近年来,常压质谱(Ambient mass spectrometry,AMS)技术因具有在常压下易操作,不需样品预处理等独特优势已被公认为一种快速且便捷的指纹分析工具。但是由于多糖在质谱中难解吸和难电离的特点,所以通过常压质谱法很难获得多糖的指纹。因此,利用常压微型辉光放电等离子体(Ambient micro-fabrication glow discharge plasma,MFGDP)准确鉴定大分子多糖的指纹图谱仍然是一个具有挑战性的难题。在该研究中,介绍了一种新颖的方法用于快速鉴别多糖。具体而言,在甲基化和程序升温系统(Temperature-programmed system,TPS)相结合的基础上,通过常压微型辉光放电等离子体解吸电离质谱法(Ambient micro-fabrication glow discharge plasma desorption ionization mass spectrometry,MFGDP-MS)实现多糖混合物的快速分析。同时,为了使常压等离子体技术成功扩展到多糖降解的应用研究中,基于低分子量壳聚糖(Low molecular weight chitosan,LMWC)具有更丰富生物活性的研究背景,对微波诱导等离子体解吸电离源(Microwave-induced plasma desorption/ionization,MIPDI)制备LMWC的技术进行了探究。本文主要的工作及研究结果如下:1)为了满足AMS预处理的要求,本研究中简化的甲基化方法具有省时和简单的优势。自制的TPS不仅弥补了MFGDP解吸效率低的不足,且相比于文献报道的激光辅助解吸装置具有成本低,离子传输损失低,常压下操作,应用范围广等优点。在TPS的最佳温度下,利用TPS-MFGDP-MS成功地表征了低聚糖、植物多糖和多糖混合物。同时,在该方法中,可产生大量寡糖的特征加合离子[M+NH4]+,这是其他常压质谱法难以实现的,为同时鉴定五种或多种多糖的混合物提供了可能。此外,采用基于算法的随机森林(Random forest,RF)监督分类模型,对7种典型的降血糖多糖进行了分类,结果具有良好的敏感性、特异性和准确性,表明所构建的RF模型具有出色的分类性能。2)鉴于MIPDI的降解参数对CTS的降解效率具有重要的意义,首先通过优化MIPDI的降解参数,使壳聚糖的降解率在60 min内可达到61%。然后利用光谱法探究了MIPDI在不同反应界面处活性离子的种类和含量。结果表明MIPDI在气液界面上具有最丰富的?OH含量。同时,以?OH为代表的活性粒子可以将分子量为540 KDa的壳聚糖(Chitosan,CTS)降解为水溶性CTS(≤10 KDa)。最后,通过FT-IR、XRD、FE-SEM、TGA、UV-vis、UPLC-MS等多种表征手段研究了CTS降解前后结构的变化。结果表明,随着处理时间的增加,CTS的链结构和晶体结构将进一步降解,而CTS的化学结构没有明显变化。
徐建业[4](2021)在《Online-SPE/LCMS定量筛查再生水中新兴污染物技术研究》文中研究表明近年来,各类新兴污染物(Emerging Contaminants,ECs)的大量使用甚至滥用导致其在污水以及环境中产生了大量的残留。绝大多数污水处理厂现行工艺无法有效去除污水中残留的新兴污染物,使得污水处理厂尾水成为环境中新兴污染物的间接污染源。常州新龙生态林湿地公园引用江边污水厂再生水做景观用水水源,建设人工湿地构筑物,深化处理再生水,能够有效控制氮、磷以及COD等常规污染物,但对于新兴污染物的分布特征和潜在生态风险有必要研究论证,为再生水景观利用的规模推广提供实践依据。研究开发了online-SPE串联TSQ MS方法检测尾水中6种典型酸性药物,研究开发online-SPE-LC串联QE+Orbitrap HRMS筛查方法,检测污水厂尾水及其湿地再生景观水中ECs赋存情况,并研究考察了UV/Cl高级氧化工艺降解典型ECs新兴污染物萘普生的降解效能和降解特征,解析并阐明降解机理,评估降解过程中的生态风险,为ECs的UV高级氧化控制工艺选择应用提供了理论基础和技术参考。具体研究结果如下:针对污水厂尾水建立大体积进样在线固相萃取-液相色谱串联质谱(Online Solid Phase Extraction-Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry,缩写为Online-SPE-LC-MS)检测方法,检测尾水中3类共6种典型酸性药物含量。基于外标法和标准加入法进行分析消除基质效应,结果显示,6种酸性药物在0.1-200 ng/L范围内线性相关性较好(r≥0.9964),检出限(LOD)为0.01-0.16 ng/L,定量限(LOQ)为0.02-0.52 ng/L,加标回收率为94.3%-102%,相对标准偏差(RSD)为0.49%-10.1%。尾水中检出卡马西平0.78 ng/L、双氯芬酸钠0.63ng/L,苯扎贝特、吲哚美辛、布洛芬及酮洛芬未检出;湿地公园中6种物质均未检出。针对污水厂尾水建立基于在线固相萃取-高分辨率质谱联用系统(Online-SPE/HRMS Orbitrap LCMS)的检测方法,开发了针对环境水体中新兴污染物的广谱筛查和定量分析方法,实现对水中7类共302种新兴有机污染物的广谱筛查,并结合标准加入法实现污染物的定量分析。结果表明,尾水中302种目标新兴污染物有41种检测出,磺胺甲基异恶唑、磺胺吡啶、甲氧苄氨嘧啶、甘宝素、全氟己酸、恶霜灵以及磷酸三丁脂在各点位均有检出且赋存浓度较高,污水厂进水药物检出浓度浓度范围在7.4-874 ng/L,尾水出水药物浓度检出含量在1.1-292.24 ng/L。此外,目标新兴污染物检出浓度在与人工湿地构筑物分布呈现出空间相关性,表明人工湿地能够一定程度上降低新兴污染物含量,但难以实现完全去除。以典型新兴污染物NAP为研究对象,研究紫外/氯高级氧化降解工艺深度控制NAP效果,分析NAP紫外/氯高级氧化降解反应动力学,识别和鉴定紫外高级氧化降解的中间产物,量化计算解析NAP的分子结构特征,ECOSAR模拟评估NAP及中间产物的生态风险性,发现紫外/氯高级氧化工艺能高效去除NAP,但其产物生态毒性增强,工艺的实践应用有待进一步考察,为此类化合物的紫外/氯高级氧化控制研究及风险评价提供科学依据。
熊开峰[5](2021)在《玉米芯纳米纤维素的制备及其在聚氨酯泡沫塑料中的应用》文中进行了进一步梳理纳米纤维素是从纤维素原料中制取的纳米生物高分子材料。纤维素原料来源丰富,成本低廉,绿色可再生,制备的纳米纤维素杨氏模量和拉伸强度高,光学特性优良,兼具纳米材料的特性,近年来受到了广泛关注。在纳米纤维素研究领域中,产品的高效制备是其研究和应用的基础。论文以玉米芯为原料,研究和分析了玉米芯纳米纤维素的制备方法,并将制备的玉米芯纳米纤维素用于聚氨酯泡沫塑料的制备过程,主要研究结果如下:首先,构建了适于玉米芯纳米纤维素制备的甲酸/盐酸预处理体系,研究了反应条件对组分溶出及纤维结构的影响,较优的预处理条件为时间3 h、温度90℃、甲酸浓度80%和盐酸浓度1.0%。经过预处理后,纤维素的脱除率仅为8.76%,半纤维素和木质素的脱除率分别为83.98%和63.29%,纤维素的结晶度为37.14%,较高的纤维素含量和结晶度比较适合后续纳米纤维素的制备。其次,以预处理后的玉米芯纤维素为原料,采用离子液体润胀-固体酸水解两段法制备了玉米芯纳米纤维素。第一段为纤维素润胀阶段,选用离子液体1-烯丙基-3-甲基咪唑氯盐(Amim Cl)进行润胀,改善无定形区纤维的反应活性。第二段为固体酸水解阶段,选用固体酸(Armbyst-40)对无定形区纤维素进行选择性水解,获得纳米纤维素。离子液体润胀体系的优化条件为:温度45℃,水分2.0%,固液比1:20,时间30 min,纤维润胀度高,润胀选择性好。相对于常规加热,微波加热和超声波加热的润胀效果更优,可减少润胀时间,提高纤维润胀度。固体酸水解体系较优预处理条件为:固体酸用量60 wt%(相对于纤维素)、温度60℃和水解时间8.0 h。另外,可实现离子液体和固体酸多次回用。再次,采用二元有机酸(草酸和马来酸)微波加热制备表面羧基化的玉米芯纳米纤维素,纤维素羟基与有机酸羧基通过酯化反应实现表面羧基化。草酸和马来酸制备的纳米纤维素产品平均长度分别为377 nm和290 nm,表面电荷分别为-42.1±0.7 m V和-32.7±0.6 m V,羧基含量分别为0.24 mmol/g CNC和0.19 mmol/g CNC,较高的表面电荷和羧基含量赋予产品优良的分散性。另外,产品具有较高的结晶度和热稳定性。水解残渣经机械磨解得到纤维素纳米纤丝。有机酸通过低温重结晶实现回收再利用,降低了生产成本,减少了对环境的污染负荷。有机酸预处理和温和水解相结合的方法实现了玉米芯纳米纤维素的制备。在此基础上,进一步研究了对甲苯磺酸/甲醛预处理-纤维素酶酶解制备纳米纤维素。利用对甲苯磺酸/甲醛体系脱除玉米芯的半纤维素与木质素,然后通过纤维素酶的酶解作用得到纳米纤维素;水解残渣经过机械磨解得到纤维素纳米纤丝。优化的预处理条件为对甲苯磺酸浓度80 wt%、温度80℃和时间60 min;优化的酶水解条件为酶解时间72 h和温度48℃,经过分析表征,此条件下制备的纳米纤维素性能优良。最后,将制备的纳米纤维素作为发泡材料用于复合聚氨酯泡沫塑料的制备过程,并对泡沫塑料进行了动态热力学、红外光谱、扫描电镜及压缩形变等分析。结果显示,纳米纤维素对聚氨酯泡沫塑料的泡孔形貌结构具有显着影响,适量的纳米纤维素有助于连续泡壁结构的形成,而过量的纳米纤维素引起泡壁的破裂。纳米纤维素可显着提高聚氨酯泡沫塑料的抗压强度和机械模量,但用量过高会引起开孔比例增大,导致泡沫整体机械抗压强度降低。合理的纳米纤维素尺寸和用量可优化聚氨酯泡沫塑料的性能。
张羱[6](2021)在《功能化纳米二氧化硅药物载体的构建及其分析应用研究》文中指出癌症是人类生命的全球公共威胁之一。基于纳米材料,开发多功能药物递送系统用于精准诊疗是分析传感与纳米医学领域面临的重大挑战。论文针对目前刺激响应纳米药物载体构筑繁琐、多疗法协同实现复杂、纳米二氧化硅在药物递送与传感领域缺乏有效整合的不足。围绕简化药物载体的合成、优化多疗法协同策略、构筑分析传感引导的新型诊疗一体化体系为目标。以纳米二氧化硅为载体,表面功能化调控后分别构建了谷胱甘肽(GSH)、p H/GSH响应的靶向纳米药物载体。同时基于二氧化锰(MnO2)纳米材料的光学吸收、氧化特性与降解产物Mn2+的芬顿活性,在GSH传感的同时实现了治疗试剂的递送,开发了一种新型诊疗一体化体系。具体开展了以下研究工作:一、牛血清蛋白修饰的靶向纳米药物载体用于还原响应药物释放。利用牛血清蛋白内生的二硫键与较高的分子量,将其同时作为响应官能团与纳米阀门,简化了还原响应纳米药物载体的构筑。本章以介孔二氧化硅为载体,表面氨基化后通过酰胺反应组装叶酸改性的牛血清蛋白,设计合成了还原响应靶向纳米药物载体用于表阿霉素的递送。探讨了GSH触发的药物释放、叶酸介导的肿瘤细胞识别与细胞毒性等性能。论证了将牛血清蛋白同时作为响应官能团与纳米阀门可行性。二、肿瘤微环境响应纳米药物载体用于阿霉素与化学动力试剂递送。化学疗法与化学动力疗法的整合为改善肿瘤细胞治疗效果提供了重要的策略,但锰基芬顿试剂仍面临反应活性弱,活性氧生成受微环境限制的挑战。立足牛血清蛋白在简化刺激响应药物载体合成上的优势,对介孔二氧化硅表面进行工程组装,依次修饰Fe3+络合的聚多巴胺与叶酸改性的矿化MnO2牛血清蛋白分子,便捷的实现了两种芬顿试剂的整合。通过考察载体在细胞内外的芬顿效应,双芬顿试剂显着增强了载体活性氧生成能力,改善了单一锰基化学动力试剂的缺陷。为简化化疗/化学动力疗法相协同的新型治疗平台的构建提供了思路。三、可降解SiO2@MnO2复合物用于GSH检测与诊疗一体化。将分析传感策略与药物递送相结合为开发新型诊疗一体化体系,为实现纳米二氧化硅在药物递送与传感领域的有效整合提供了一种有吸引力的方案。本章以染料掺杂二氧化硅(FS)为核,负载亚甲基蓝的多孔MnO2为壳,表面改性聚乙二醇后制备了可降解的药物载体FSMP用于GSH传感与光动力/化学动力协同治疗。其中FS为能量给体,MnO2同时作为能量受体、芬顿试剂与光敏剂亚甲基蓝负载场所,基于荧光共振能量转移建立了对GSH的传感方法;此外,FSMP在传感过程中生成Mn2+的同时释放光敏剂,激光照射下实现了光动力/化学动力协同,证明了FSMP在丰富分析传感引导的诊疗一体化领域具有广阔的应用前景。四、DMSN@MnO2药物载体用于GSH双模传感与肿瘤细胞检测。以氨基化树枝状介孔二氧化硅为载体原位还原KMnO4,对其进行叶酸改性,负载喜树碱(CPT)后得到靶向纳米药物载体CPT/DM-FA。利用CPT的荧光特性与MnO2的光吸收能力,建立了GSH荧光传感方法。同时,基于MnO2的氧化活性诱导3,3’,5,5’-四甲基联苯胺变蓝与GSH介导的褪色过程,实现了CPT/DM-FA对GSH的紫外传感。通过紫外传感方法原理与不同数量肿瘤细胞内GSH总量差异,CPT/DM-FA可实现肿瘤细胞检测,在开发多功能纳米平台方面具有显着优势。
魏佳楠[7](2021)在《填充吸附剂微萃取-质谱法检测水中毒剂及水解产物方法研究》文中研究说明化学毒剂的生产、存储和使用给国家和公共安全带来了重大问题,快速、准确提取化学毒剂是防化侦察的基本要求,因此开展以化学毒剂及其水解产物为目标物的样品前处理方法研究也是防化和反恐领域的重点方向。近年来,样品前处理技术发展迅速,相关研究朝着小型化、便捷化、自动化和绿色环保的方向不断深入。填充吸附剂微萃取技术(Microextraction by Packed Sorbent,MEPS)是基于固相萃取的原理,在固相萃取基础上改进的更加便捷的萃取方式,具有快速、高效、绿色等优势。目前已广泛应用于临床药物分析、食品安全及环境监测等多个领域,但针对化学毒剂所开发的MEPS方法还未见报道。本研究将MEPS与气相色谱-质谱(Gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)相结合,成功建立了MEPS-GC-MS方法,实现了水体中有机磷酸酯、沙林、梭曼及沙林水解产物甲基膦酸和沙林酸的快速检测。同时在无需衍生化的条件下,将MEPS与纳升电喷雾电离质谱(Nano electrospray ionization mass spectrometry,Nano-ESI-MS)相结合,建立了MEPS-Nano-ESI-MS方法并成功应用于甲基膦酸和沙林酸的检测。将目标物拓展于芥子气水解产物,建立了MEPS-Nano-ESI-MS方法成功实现了芥子气水解产物硫二甘醇的快速灵敏检测。本研究主要取得以下进展:1.建立MEPS-GC-MS方法用于有机磷酸酯、沙林及梭曼的检测(1)以磷酸三甲酯、磷酸三乙酯、磷酸三丙酯和甲基磷酸二乙酯为目标化合物,建立了MEPS-GC-MS方法并详细优化了影响提取效率的八个因素。当采用提取-丢弃模式的上样方式、C18为吸附剂、1000μL的样品体积(每个循环上样体积为100μL,连续上样10次)、5μL/s的样品循环速度、30μL氯仿为洗脱溶剂、5μL/s的洗脱速度(循环4次)时可获得最佳萃取效果。整个萃取过程仅需8 min即可完成。方法经验证得到磷酸三甲酯、磷酸三乙酯、磷酸三丙酯、甲基磷酸二乙酯的检测限分别为10 ng/m L、5 ng/m L、1 ng/m L和5 ng/m L,对自来水和地下水两种实际水样中存在的基质效应进行评估,基质因子范围为0.80~1.30,表明基质效应可以忽略,相对标准偏差(RSD)≤4.50%,洗脱步骤所用有机溶剂仅为30μL,符合绿色化学的发展要求。(2)以沙林、梭曼为目标化合物,建立了MEPS-GC-MS方法,并针对萃取过程中的四个主要影响因素进行优化,结果表明以C18为吸附剂,将1000μL的样品以5μL/s的流速流经吸附剂部分,淋洗溶剂为50μL超纯水,洗脱步骤选择40μL氯仿循环5次时可获得最佳萃取效果。方法经验证得到沙林及梭曼的检测限为1~2ng/m L,对自来水和雨水两种实际水样中存在的基质效应进行评估,基质因子范围为0.80~1.10,表明基质效应可以忽略,RSD≤8.00%。同时探索了已建立的前处理方法用于野外现场的可行性。模拟野外试验条件,实验结果表明用已建立的MEPS方法可快速提取水中有机磷毒剂原体并在吸附剂中有效保存3天以上,有效解决了沙林短时间内因水解过快而无法随时测定原体的问题。2.建立MEPS-MS方法检测沙林水解产物(1)合成了新型耐水衍生化试剂1-(重氮甲基)-3,5-双(三氟甲基)苯,并从试剂的现场方便储备性及是否适用于GC-MS仪器原位检测的角度,在步骤方法上将其与双(三甲基硅基)三氟乙酰胺(BSTFA)和三甲基苯基氢氧化(PTMAH)铵进行比较,结果表明,进样口热解甲基化反应所需时间短、试剂易于储备,更具现场操作性。建立了MEPS(PTMAH)-GC-MS方法用于检测水体中存在的沙林酸,经验证该方法可在短时间有效提取水体中的沙林酸。(2)以沙林水解产物甲基膦酸和沙林酸为目标分析物,建立了MEPS-Nano-ESI-MS方法,针对萃取过程中的影响因素优化了吸附剂种类和洗脱溶剂种类两个因素,结果表明以石墨化碳黑为吸附剂,以甲醇/水(v/v,1:1)为洗脱溶剂可获得最佳萃取效果。两种目标物方法检测灵敏度均为1 ng/m L,对自来水和雨水两种实际水样中存在的基质效应进行评估,基质因子范围为1.10~9.70,两种基质均具有不同程度的增强效果,RSD≤7.40%。该方法不需经过色谱分离和衍生化即可快速提取分析染毒水样,从而实现现场化学毒剂污染的快速证实。3.建立MEPS-Nano-ESI-MS方法检测芥子气水解产物建立了MEPS-Nano-ESI-MS方法用于芥子气水解产物硫二甘醇的提取与检测。同时合成了石墨烯量子点功能化纳米材料,并作为吸附剂填充于自制的MEPS设备中,对所合成材料与多种商业吸附材料如C18等在吸附效果上进行了比较,结果表明石墨烯量子点功能化材料表现出针对硫二甘醇更佳的吸附性能。采用单因素轮换试验和中心复合设计方法优化评估影响因素。在最佳测定条件下,所建立方法具有较低的检测限(1 ng/m L),对自来水和雨水两种实际水样中存在的基质效应进行评估,基质因子均为1.00,表明基质效应可以忽略,RSD≤5.40%。方法仅需少量有机溶剂和样品量,提取与检测仅在5 min之内即可完成,证实了MEPS-Nano-ESI-MS是测定水体环境中芥子气水解产物的有效方法。
完颜倩茹[8](2021)在《聚苹果酸基聚酯功能材料的结构与性能设计》文中研究表明随着人们对环境和安全问题的日益关注,生物可降解聚合物在过去几十年中获得了人们的广泛关注。到目前为止,科研工作者们已经成功合成了大量具有微生物或酶降解能力的聚合物。其中,来源于生物质的聚乳酸(PLA)、聚苹果酸(PLMA)等颇具吸引力。以PLMA为例,其单体L-苹果酸很容易从新鲜水果中提取,然后通过开环聚合或直接缩聚合成PLMA。然而,该聚合物开环反应步骤繁多、产率低下,而直接缩聚只能得到分子量较低的聚合物。因此,围绕PLMA的研究主要集中在以PLMA为链段或主体的脂肪族共聚酯上,目的是提高其分子量和机械强度,从而探索其在生物医学领域的可能应用。其实,PLMA主链上存在大量的活性位点,不仅仅是扩链,交联也可作为提高PLMA整体性能的有效途径。同时,还可通过交联网络结构的设计赋予其更广阔的应用,如弹性体以及智能材料等。因此,建立结构与性能的关系,对于拓展基于PLMA材料的应用至关重要。本文以PLMA聚酯功能材料的结构与性能设计为出发点,从直接缩聚的PLMA齐聚物出发,研究了 PLMA对PLMA/PLA不相容体系相结构和性能的影响、PLMA交联网络结构的设计对材料最终力学状态和刺激响应的影响,以及光-热转换填料对PLMA交联材料的形状记忆行为的影响,主要结论如下:(1)以PLMA低聚物为分散相,制备了 PLA/PLMA两相共混体系。从两相结构和界面相互作用的角度研究了共混物的力学性能和降解行为以及PLMA对PLA冷结晶的影响。相行为和粘弹性响应表明两相在热力学上是不相容的,两相界面张力较高。与PLA相比,PLMA较差的相附着力和较低的质量导致共混物的力学性能明显下降。而PLMA的加入所引起的稀释效应促进了 PLA的冷结晶。因此,通过固态退火可以很好地弥补因PLMA相的存在而引起的共混物强度和模量的损失。此外,亲水相PLMA的存在也可以调节共混物的降解速率。因此,本文提出了一种通过控制退火来制备具有可定制性能的绿色PLA/PLMA共混材料的简单方法,开发出一种全面生物质来源、生物可降解、综合性能均衡的脂肪族聚酯共混物,也为开发PLMA的应用提供了一种新的途径。(2)可通过交联开辟生物可降解PLMA作为功能材料的更多可能性,而网络结构是交联体系力学状态和最终应用的关键。利用不同链长的二醇构筑PLMA交联网络,以建立网络结构-力学状态-材料函数之间的关系。当二醇的分子量从100增加到400时,试样经历了明显的由高强度塑料向低损耗橡胶,最后向软弹性体的转变。以弹塑性和介电松弛为探针,探讨了交联样品的机械性能和网络结构的潜在联系,揭示了材料的脆-韧性转变过程。以具有不同网络结构的样品为构件,制作了具有良好性能的异步驱动器。由于交联PLMA具有易于调节的力学状态和Tg,以及良好的抗菌活性和形状记忆效应,因此在功能材料或智能材料方面具有广阔的应用前景。(3)通过在交联PLMA体系中引入碳纳米管(CNTs),制备出一种结构与性能可调的吸光纳米复合材料。通过CNTs与PLMA的原位聚合,实现CNTs的均匀分散,再进一步利用交联剂进行交联,得到一种具有较好机械强度和生物相容性的交联PLMA-CNTs纳米复合材料。从CNTs的负载量和PLMA与CNTs的相互作用两个方面研究了材料的力学性能和光热性能。以弹塑性为探针,探讨了 CNTs的分散状态和交联网络弛豫之间的关系。并通过光热转换实验,表征了交联PLMA-CNTs纳米复合材料的光吸收效率和光热转换稳定性,实现对交联PLMA-CNTs纳米复合材料形状记忆回复位置的精确调控。利用这类生物复合材料,可以很容易地制造出光热响应可编程和材料性能可调的智能器件。
黄晓欣[9](2021)在《不同切割方式处理青花菜贮藏过程中硫苷代谢及抗氧化活性研究》文中研究说明研究目的:青花菜(Brassica oleracea var.italica),又名西兰花,为十字花科芸薹属一、二年生草本植物,是甘蓝类蔬菜的一个变种。中医上认为青花菜性平味甘,可补肾填精、健脑壮骨、补脾和胃;主治久病体虚、肢体痿软、耳鸣健忘、脾胃虚弱、小儿发育迟缓等病症,因此具有一定的保健功效。近年来青花菜因其富含硫苷、多酚等抗氧化及抗癌活性物质而备受关注,对于硫苷生物合成途径的解析也成为当今研究的热点问题。硫代葡萄糖苷(Glucosinolates,简称硫苷),又称芥子苷油,广泛存在于11个种属双子叶被子植物中,以十字花科芸薹属硫苷含量最为丰富,目前已发现有200多种硫苷类化合物。当植物遭受机械损伤时,硫苷与芥子酶反应产生的降解产物如萝卜硫素和吲哚-3-甲醇等具有良好的抗癌活性,其中萝卜硫素是迄今为止发现的最强烈的Ⅱ相酶诱导剂,是蔬菜中防癌抗癌效果最好的活性成分。青花菜作为十字花科中硫苷含量最为丰富的蔬菜之一,经济实惠且日常生活中需求量不断增加,是非常具有研究意义及价值的材料。然而采摘后的青花菜在运输过程中,会因加工所导致的机械损伤而产生一系列生理及防御反应,以进一步防止组织受损。有研究证实创伤应激会诱导青花菜代谢物的积累,如通过刺激苯基丙烷代谢及硫苷生物合成途径积累酚类化合物和硫苷。另外,青花菜中次生代谢物还受不同伤害胁迫如机械损伤强度等的影响,因此本实验将利用代谢组学及生理学分析方法探索不同强度机械损伤对青花菜贮藏过程中活性代谢物的动态变化。基于以上思考,本课题从以下三方面展开研究:基于UHPLC-Quadrupole-Orbitrap MS/MS技术结合多元统计分析的代谢组学方法,对不同切割方式处理的青花菜在贮藏过程中代谢物的组成差异及分布规律进行分析;采用HPLC-MS/MS方法对样品中硫苷组分进行定量分析,以及黑芥子酶活性进行评价,进一步阐明不同切割方式处理对青花菜中硫苷含量变化的影响;对不同切割方式处理的青花菜在贮藏过程中的抗氧化活性变化进行评价,从抗氧化活性方面初步探索不同切割方式对鲜切青花菜生物活性的影响。研究方法:1.应用代谢组学研究方法,运用高分辨质谱(UHPLC-ESI-Quadrupole-Orbitrap MS/MS)技术对不同切割方式处理的青花菜在贮藏过程中的代谢产物组成变化进行研究,数据预处理后通过比对化合物测得精确质量数,结合保留时间、同位素丰度以及二级质谱特征碎片等对化合物进行定性,对处理间各组分含量的差异显着性进行单因素方差分析及正交偏最小二乘-判别分析,筛选VIP>1的组分为组间主要差异代谢物,再对组间差异代谢物进行聚类分析。2.利用HPLC-MS对不同切割方式青花菜贮藏过程中SIN、NAP、PRO、RAA、GBC、4ME、NEO七种硫苷组分进行定量分析,并对黑芥子酶活性进行测定,结合硫苷数据进行相关性分析、聚类热图分析,比较不同切割方式对青花菜贮藏过程中硫苷含量的影响。3.采用2,6-二氯酚靛酚滴定法对抗坏血酸的含量进行测定;试剂盒及酶标仪对苯丙氨酸解氨酶活性进行测定,以及DPPH自由基清除能力的方法对样品的抗氧化活性进行测定,结合第一章非靶向代谢组学中酚酸类物质的聚类热图分析,比较不同切割方式处理间青花菜在贮藏过程中体外抗氧化活性的变化规律,了解不同切割方式对其品质的影响。研究结果:1.本研究利用非靶向代谢组学方法,依托UHPLC-Quadrupole-Orbitrap-MS/MS技术,综合评价了鲜切青花菜在贮藏过程中代谢物轮廓的变化,随机械强度的增加样品中的代谢物轮廓变化越明显,酸类物质显着增多,其中脱落酸、N-乙基马来酰亚胺-S-谷胱甘肽、2-羟基-3-β-D-吡喃葡萄糖基苯甲酸(原儿茶酸4-O-葡萄糖苷)、1(2)-甲基丙基(丁基)葡糖苷、3(4)-O-阿魏酰奎宁酸这5种物质是不同切割处理下青花菜中差异最大的化合物,也是不同贮藏时间差异最显着的化合物。2.不同切割方式与青花菜中硫苷含量及组分密切相关,随机械强度的增加样品中吲哚族硫苷的含量也会增加,但RAA与GBC仍占主成。值得关注的是,轻度及中度机械损伤会导致PRO、RAA及GBC这三种硫苷在处理当天的含量显着降低,重度机械损伤则影响较小。另外,机械损伤强度也会影响样品中黑芥子酶活性,损伤程度小的会延缓酶活性的降低,而损伤程度大的则是加速样品中黑芥子酶的降解。3.不同切割方式会影响青花菜贮藏过程中苯丙氨酸解氨酶活性及抗坏血酸的含量,除重度机械损伤外其余各组酶活变化规律与黒芥子酶相似;轻度机械损伤会引起抗坏血酸含量的升高,而中度及重度机械损伤会加速样品贮藏中抗坏血酸的代谢;但不同切割处理对青花菜在贮藏过程中的抗氧化能力影响则不大,除重度机械损伤加速样品氧化外,其余各组样品抗氧化能力均呈现先降低后升高的趋势。通过非靶向代谢组学对不同切割方式处理下的青花菜在贮藏过程中产生的次生代谢物进行了较为全面的表征,随后结合硫苷的定量分析、酶活及抗氧化活性的测定对鲜切青花菜的内在化学物质基础及生物活性进行了阐述,为采摘后加工运输的青花菜品质及其生物活性的研究提供了研究思路和基础资料,为其品质定向改良提供方法支撑和理论基础。
李林燕[10](2021)在《大麦膳食纤维降血糖作用机制及其物质基础研究》文中研究表明糖尿病是一类因胰岛素分泌不足或作用缺陷所引起的以慢性高血糖为主,并伴有脂肪和蛋白质代谢紊乱的代谢紊乱性疾病。糖尿病发病率逐年上升,既对人类的健康造成了严重的危害,又给患者、家庭和社会带来了沉重的经济负担。研究表明,膳食纤维的摄入与糖尿病发病率显着负相关,且有利于预防和减轻糖尿病症状。大麦膳食纤维具有降血糖、降血脂、抗氧化、提高免疫力、肠道益生等作用,提示大麦膳食纤维具有防控糖尿病、心血管疾病等慢性代谢综合疾病的潜力,但目前大麦膳食纤维对糖尿病及相关病症的影响还缺乏系统性的研究。本论文以大麦膳食纤维为研究对象,在此基础上制备大麦碱提多糖BIF-60、大麦水提多糖BSF-20和BSF-80r,对这三种多糖的结构和溶液性质进行全面分析,并结合膳食纤维的结构、性质以及大鼠肠道菌群的变化,探讨大麦膳食纤维对2型糖尿病大鼠的改善效应及其作用机制。主要研究内容归纳如下:(1)通过碱提醇沉法从BIF中分离出得到BIF-60,对其理化性质和结构特征进行研究。结果表明BIF-60主要由木糖(48.5%)和阿拉伯糖(30.3%)组成,其平均分子量为1360 k Da。甲基化和1D/2D NMR分析表明,BIF-60由未取代的(1,4-连接的β-Xylp,56.9%)、单取代的(1,2,4-连接的和1,3,4-连接的β-木糖基,22.1%)和双取代的(1,2,3,4-连接的β-木糖基,18.4%)木糖单元连接成主链,支链上糖残基有T-Araf-(1→、T-Xylp-(1→、→5)-Araf-(1→、→2)-Araf-(1→、→3)-Araf-(1→和→4)-Glcp-(1→。BIF-60溶液在0.1-0.5%浓度下表现为近牛顿流体特性,在高浓度(超过1%)时表现出剪切稀化的假塑性流体特性。粘弹性测试中,BIF-60的储能模量G’和损耗模量G’’表现出频率和浓度依赖,BIF-60具有低凝胶稳定性和弱胶凝能力。(2)通过乙醇分级沉淀法从BSF中获得两个均相组分BSF-20和BSF-80r,对其理化性质和结构特征进行研究。甲基化和1D/2D NMR分析结果显示,BSF-20是主要由β-D-Glcp残基通过(1→4)键,偶尔通过(1→3)键连接组成;BSF-80r为线性α-(1→4)-葡聚糖,结构与极限糊精相同。HPSEC分析和X射线衍射分析结果显示BSF-20在水溶液中呈现线性柔性链形态,HPSEC分析表明BSF-20具有较高特性粘度([η]=657.8 m L·g-1)。BSF-20溶液为典型的高粘度假塑性流体,在低浓度和高浓度下均表现出剪切稀化行为。粘弹性测试中,BSF-20溶液的储能模量G’和损耗模量G’’均随浓度的增加而增加,储能模量G’始终大于损耗模量G’’,表现出典型弹性凝胶特征。(3)评估BSF、BIF和BTF对正常大鼠血糖血脂和肠道菌群的调节作用。三个大麦膳食纤维均显示出了降血脂作用,具体表现在甘油三酯、LDL-C水平下降,体重减轻。在肠道酵解方面,三个大麦膳食纤维提高了盲肠异丁酸、异戊酸、戊酸水平,以及粪便乙酸、丙酸、总SCFAs水平。此外,BSF和BTF显着提高了盲肠丙酸水平。大麦膳食纤维干预后正常大鼠的结肠菌群呈现显着差异,其中以BTF组和正常对照组之间的菌群结构相似度最低,且BIF组结肠菌群的多样性要高于BSF组。采用LEf Se分析对测序结果进行关键菌属分析发现BSF对产SCFAs罗氏菌属的生长具有促进作用,BIF增加了普雷沃氏菌属含量。(4)评估BSF、BIF和BTF对2型糖尿病大鼠血糖血脂和肠道菌群的调节作用。三个大麦膳食纤维均能显着降低FBG水平,提高HDL-C水平,降低血清ALT水平、提高总蛋白水平,降低氧化产物MDA水平,降低肌酐水平,对2型糖尿病大鼠的血糖血脂代谢和肝功能、肾功能起到改善作用。BSF和BTF还能显着改善大鼠胰岛素敏感性。从肠内酵解的角度来看,BSF显着增加盲肠和粪便中丁酸、总SCFAs水平,BSF还提高盲肠中丙酸水平;BTF显着提高盲肠中丁酸、总SCFAs以及粪便中乙酸、丙酸、总SCFAs水平;BIF显着提高盲肠中异丁酸、异戊酸、戊酸以及粪便中乙酸、丙酸、异丁酸、异戊酸、总SCFAs水平。16S r DNA测序分析结果显示,大麦膳食纤维干预后糖尿病大鼠的结肠菌群出现显着差异,BIF组与糖尿病对照组相距最远,菌群结构相差最大;且BIF组的α多样性(Shannon和Simpson指数)显着低于正常对照组,BIF组结肠菌群的组内均匀度和丰富度下降。LEf Se分析各大麦膳食纤维组结肠菌群关键物种,结果显示BSF促进普雷沃氏菌属和粪球菌属的增殖,BIF显着富集Akkermansia菌属,BTF增加毛螺菌科、乳酸杆菌属和Allobaculum菌属水平。三种大麦膳食纤维均对2型糖尿病大鼠具有改善作用。BSF的作用机制可能与促进胰岛素分泌、肠道代谢产物丁酸、肠道菌群普雷沃氏菌属和粪球菌属有关;BIF的作用机制可能与肠道代谢产物乙酸、异丁酸、异戊酸以及Akkermansia菌属相关;BTF的作用机制可能与肠道代谢产物乙酸、丁酸以及毛螺菌科、乳酸杆菌属和Allobaculum菌属存在关联。
二、直接测定水中微量毒物药物及其降解产物的核磁共振技术(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、直接测定水中微量毒物药物及其降解产物的核磁共振技术(论文提纲范文)
(1)褐藻胶裂解酶产酶菌株挖掘及其催化特性研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
符号与缩略语说明 |
第一章 绪论 |
1.1 褐藻胶和褐藻寡糖 |
1.1.1 褐藻胶的结构和性质 |
1.1.2 褐藻胶的应用 |
1.1.3 褐藻寡糖及其生物活性 |
1.1.4 褐藻寡糖的制备 |
1.2 褐藻胶裂解酶 |
1.2.1 褐藻胶裂解酶的来源及分类 |
1.2.2 褐藻胶裂解酶的作用机制 |
1.2.3 褐藻胶裂解酶构效关系研究 |
1.3 新型宿主菌株需钠弧菌 |
1.3.1 需钠弧菌的性质和特点 |
1.3.2 需钠弧菌作为新型模式菌株的研究进展 |
1.4 立题依据和研究意义 |
1.5 研究思路和主要内容 |
第二章 产褐藻胶裂解酶菌株的筛选和发酵产酶 |
2.1 前言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 实验试剂 |
2.2.2 实验设备与仪器 |
2.2.3 培养基 |
2.2.4 试剂配制 |
2.2.5 产褐藻胶裂解酶菌株的筛选 |
2.2.6 褐藻胶裂解酶酶活力测定 |
2.2.7 酶解产物薄层色谱分析 |
2.2.8 产褐藻胶裂解酶菌株的鉴定 |
2.2.9 培养基成分对产酶的影响 |
2.2.10 培养条件对产酶的影响 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 菌种初筛 |
2.3.2 菌种复筛 |
2.3.3 形态学观察 |
2.3.4 生理生化特征 |
2.3.5 16S rRNA鉴定 |
2.3.6 培养基成分对产酶的影响 |
2.3.7 培养条件对产酶的影响 |
2.3.8 菌株SK42.001发酵产酶曲线 |
2.4 本章小结 |
第三章 褐藻胶裂解酶的分离纯化和降解产物分析 |
3.1 前言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 材料与试剂 |
3.2.2 实验设备与仪器 |
3.2.3 褐藻胶裂解酶的分离纯化 |
3.2.4 SDS-PAGE分析 |
3.2.5 褐藻胶裂解酶产物制备 |
3.2.6 褐藻胶裂解酶产物分析 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 菌株SK42.001褐藻胶裂解酶的分离纯化 |
3.3.2 SDS-PAGE电泳鉴定及纯化结果 |
3.3.3 褐藻胶裂解酶产物分析 |
3.4 本章小结 |
第四章 重组褐藻胶裂解酶胞外表达及其信号肽的扩展应用 |
4.1 前言 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 菌株和质粒 |
4.2.2 主要工具酶和试剂 |
4.2.3 实验设备与仪器 |
4.2.4 培养基 |
4.2.5 试剂配制 |
4.2.6 引物设计 |
4.2.7 菌株SK42.001褐藻胶裂解酶基因aly01的克隆 |
4.2.8 pET28a-aly01重组质粒的构建 |
4.2.9 pET28a-aly01重组质粒的转化和验证 |
4.2.10 褐藻胶裂解酶Aly01在大肠杆菌中的胞外表达和纯化 |
4.2.11 褐藻胶裂解酶Aly01胞外表达条件优化 |
4.2.12 褐藻胶裂解酶Aly01信号肽的扩展应用 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 褐藻胶裂解酶基因的扩增 |
4.3.2 褐藻胶裂解酶序列分析 |
4.3.3 重组表达载体的构建和转化 |
4.3.4 重组Aly01胞外表达和纯化 |
4.3.5 大肠杆菌胞外分泌Aly01培养条件的优化 |
4.3.6 大肠杆菌90 h胞外生产Aly01曲线 |
4.3.7 大肠杆菌利用Aly01信号肽胞外生产GFP |
4.4 本章小结 |
第五章 褐藻胶裂解酶的截短表达及多结构域功能解析 |
5.1 前言 |
5.2 材料与方法 |
5.2.1 菌株和质粒 |
5.2.2 主要工具酶和试剂 |
5.2.3 实验设备与仪器 |
5.2.4 褐藻胶裂解酶Aly01生物信息学分析 |
5.2.5 Aly01截短体质粒的构建 |
5.2.6 Aly01截短体在大肠杆菌中的表达及纯化 |
5.2.7 Aly01及截短体CD167的酶学性质 |
5.2.8 Aly01及截短体CD167的动力学及底物特异性 |
5.2.9 Aly01及截短体CD167的产物分析 |
5.2.10 分子对接和分子动力学 |
5.3 结果与讨论 |
5.3.1 Aly01氨基酸序列分析及3D结构模型建立 |
5.3.2 Aly01截短表达和蛋白纯化 |
5.3.3 Aly01及截短体生物化学性质 |
5.3.4 Aly01及截短体动力学参数和底物特异性 |
5.3.5 Aly01及截短体产物分析 |
5.3.6 Aly01与底物海藻酸钠对接及其反应模式 |
5.4 本章小结 |
第六章 V.natriegens SK42.001的褐藻胶代谢途径预测及其作为新型模式菌株的探索 |
6.1 前言 |
6.2 材料与方法 |
6.2.1 菌株和质粒 |
6.2.2 主要工具酶和试剂 |
6.2.3 实验设备与仪器 |
6.2.4 培养基 |
6.2.5 全基因组测序 |
6.2.6 菌株生长评估 |
6.2.7 抗生素抗性试验 |
6.2.8 质粒构建 |
6.2.9 接合 |
6.3 结果与讨论 |
6.3.1 菌株SK42.001基因组特征分析 |
6.3.2 菌株SK42.001褐藻胶代谢途径的预测 |
6.3.3 生长速率评估 |
6.3.4 外源蛋白GFP在 V.natriegens SK42.001中的表达 |
6.4 本章小结 |
主要结论与展望 |
主要结论 |
展望 |
论文创新点 |
致谢 |
参考文献 |
附录一:作者在攻读博士学位期间发表的论文 |
附录二:V.natriegens SK42.001的碳代谢途径 |
(2)呕吐毒素光催化降解产物安全性评价及其诱导的胞内氧化应激状态原位监测方法研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
主要中英文缩略词 |
第一章 绪论 |
1.1 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)概述 |
1.1.1 DON及其污染现状 |
1.1.2 掩蔽型 DON及修饰型 DON |
1.1.3 DON的吸收、分布、代谢与排泄 |
1.1.4 DON的国内外限量标准 |
1.2 DON的主要毒性与毒理机制 |
1.2.1 细胞氧化应激 |
1.2.2 细胞毒性 |
1.2.3 胃肠道毒性 |
1.2.4 免疫毒性 |
1.2.5 生殖毒性 |
1.2.6 遗传毒性 |
1.2.7 DON的主要毒性作用机制 |
1.3 DON的消减控制技术 |
1.3.1 DON的常规控制技术 |
1.3.2 DON的光催化降解技术 |
1.4 DON降解产物安全性评价研究 |
1.5 立题目的与意义 |
1.6 主要研究内容 |
第二章 基于UCNP@TiO_2的DON光催化降解及其降解产物体外安全性评价 |
2.1 引言 |
2.2 材料与仪器 |
2.2.1 实验材料与试剂 |
2.2.2 主要仪器 |
2.3 试验方法 |
2.3.1 UCNP@TiO_2光催化剂的制备与表征 |
2.3.2 DON的光催化降解、产物鉴定及样品制备 |
2.3.3 细胞活力测定 |
2.3.4 细胞形态学分析 |
2.3.5 流式细胞术分析细胞周期变化 |
2.3.6 细胞内活性氧水平检测 |
2.3.7 Annexin V-FITC和 PI双染法监测细胞凋亡 |
2.3.8 线粒体膜电位检测 |
2.3.9 胞内抗氧化酶系活力测定 |
2.4 实验结果与分析 |
2.4.1 UCNP@TiO_2光催化剂的表征 |
2.4.2 DON的残余浓度和降解产物的鉴定 |
2.4.3 不同时间DON降解产物对细胞活性的影响 |
2.4.4 DON降解产物对细胞形态的影响 |
2.4.5 DON降解产物对细胞周期的影响 |
2.4.6 DON降解产物对胞内ROS水平的影响 |
2.4.7 Annexin V-FITC和PI双染法检测细胞凋亡和坏死 |
2.4.8 DON降解产物诱导细胞线粒体膜电位变化 |
2.4.9 DON降解产物诱导的胞内抗氧化能力变化 |
2.5 讨论 |
2.6 本章小结 |
第三章 基于量子点探针的胞内ROS成像与DON产物诱导的氧化应激监测 |
3.1 引言 |
3.2 .材料与仪器 |
3.2.1 实验材料与试剂 |
3.2.2 主要仪器 |
3.3 试验方法 |
3.3.1 CdSe@ZnS量子点的修饰与表征 |
3.3.2 细胞毒性实验及PEG-CdSe@ZnS量子点浓度优化 |
3.3.3 胞内基础ROS对探针荧光性能影响观察 |
3.3.4 溶液体系中多种ROS的产生和ROS 的检测 |
3.3.5 不同浓度DON诱导的胞内ROS成像 |
3.3.6 DON降解产物诱导的胞内ROS成像 |
3.3.7 数据处理与统计分析 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 PEG-CdSe@ZnS量子点探针的原理及其验证 |
3.4.2 PEG-CdSe@ZnS量子点探针的表征 |
3.4.3 PEG-CdSe@ZnS细胞毒性评估和浓度优化 |
3.4.4 PEG-CdSe@ZnS量子点探针的分析性能验证 |
3.4.5 PEG-CdSe@ZnS探针的装载及胞内基础ROS的干扰验证 |
3.4.6 胞内ROS淬灭PEG-CdSe@ZnS量子点荧光性能验证 |
3.4.7 不同浓度DON诱导的胞内ROS荧光成像与氧化应激评估 |
3.4.8 DON降解产物诱导的胞内ROS成像与氧化应激评估 |
3.5 本章小结 |
第四章 基于适配体识别的胞内GSH成像与DON产物诱导的氧化应激监测 |
4.1 引言 |
4.2 材料与仪器 |
4.2.1 实验材料与试剂 |
4.2.2 主要仪器 |
4.3 试验方法 |
4.3.1 细胞的复苏与传代培养 |
4.3.2 等温滴定量热法验证GSH适配体的亲和性 |
4.3.3 金纳米簇(AuNCs)与MoS_2纳米片的合成 |
4.3.4 Apt-AuNCs-MoS_2复合探针的构筑、优化与表征 |
4.3.5 Apt-AuNCs-MoS_2复合探针的胞外GSH检测能力验证 |
4.3.6 Apt-AuNCs-MoS_2复合探针的细胞毒性 |
4.3.7 细胞成像过程中复合探针与细胞孵育时间优化 |
4.3.8 GSH诱导的荧光恢复验证 |
4.3.9 DON及其降解产物诱导的胞内GSH变化成像 |
4.3.10 DON诱导的细胞活性和细胞凋亡流式细胞术分析 |
4.3.11 数据分析与处理 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 GSH适配体亲和性验证 |
4.4.2 AuNCs与 MoS_2纳米片的表征 |
4.4.3 Apt-AuNCs-MoS_2复合探针的构筑与表征 |
4.4.4 Apt-AuNCs-MoS_2复合探针的荧光“off-turn”性能验证 |
4.4.5 Apt-AuNCs-MoS_2复合探针中MoS_2的优化 |
4.4.6 Apt-AuNCs-MoS_2复合探针胞外检测GSH性能 |
4.4.7 Apt-AuNCs-MoS_2复合探针的特异性分析 |
4.4.8 Apt-AuNCs-MoS_2复合探针的细胞毒性评估 |
4.4.9 复合探针与细胞共孵育时间优化 |
4.4.10 GSH发挥荧光恢复效能的胞内验证 |
4.4.11 DON及其降解产物诱导的GSH荧光成像与氧化应激评估 |
4.4.12 DON预处理诱导的细胞活性与凋亡变化 |
4.5 本章小结 |
第五章 DON光催化降解产物缓解BALB/c小鼠肠道屏障功能损伤和菌群紊乱 |
5.1 引言 |
5.2 材料与仪器 |
5.2.1 实验材料与试剂 |
5.2.2 主要仪器 |
5.2.3 实验动物及管理 |
5.3 试验方法 |
5.3.1 DON降解产物的制备 |
5.3.2 动物实验设计 |
5.3.3 体重、饮水量、采食量及脏器指数 |
5.3.4 血常规检查、血清生化指标、炎症因子测定 |
5.3.5 肠道氧化应激指标的测定 |
5.3.6 实时荧光定量PCR |
5.3.7 肠道及肝脏病理学观察 |
5.3.8 肠道组织免疫荧光分析 |
5.3.9 小鼠呼吸交换率、能量代谢和自主活动量测定 |
5.3.10 16S rRNA测序分析小鼠肠道微生物区系 |
5.3.11 数据处理与统计分析 |
5.4 结果与讨论 |
5.4.1 DON降解产物对小鼠体增重、采食量和饮水量的影响 |
5.4.2 DON降解产物对小鼠脏器指数的影响 |
5.4.3 DON降解产物对小鼠血液学、血清生化指标和肝病理的影响 |
5.4.4 DON降解产物对血清DAO水平和肠肝循环的影响 |
5.4.5 DON降解产物缓解肠道组织氧化应激损伤 |
5.4.6 DON降解产物缓解DON暴露诱导的小鼠肠道屏障损伤 |
5.4.7 DON降解产物对小鼠能量代谢和自主活动量的影响 |
5.4.8 16S rRNA测序分析DON降解产物对小鼠肠道菌群的影响 |
5.5 本章小结 |
主要结论与展望 |
主要结论 |
展望 |
本论文创新点 |
致谢 |
参考文献 |
附录:作者在攻读博士学位期间发表的成果 |
(3)基于常压等离子体质谱技术的多糖快速鉴定分析方法及降解研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略语对照表 |
第一章 绪论 |
1.1 引言 |
1.2 常压开源等离子源技术 |
1.2.1 基于喷雾技术的常压离子源 |
1.2.2 基于等离子体技术的常压离子源 |
1.2.3 电晕放电技术的等离子体 |
1.2.4 介质阻挡放电技术的等离子体 |
1.2.5 辉光放电技术的常压离子源 |
1.2.6 微波诱导技术的等离子体 |
1.3 多糖的降解方法 |
1.3.1 化学降解法 |
1.3.2 氧化降解法 |
1.3.3 生物降解法 |
1.3.4 物理降解法 |
1.4 多糖分析方法的研究现状 |
1.4.1 比色法 |
1.4.2 气相色谱法(GC) |
1.4.3 高效液相色谱法(HPLC) |
1.4.4 气相色谱-质谱联用法(GC-MS) |
1.4.5 液相色谱-质谱联用法(LC-MS) |
1.5 本文的研究意义和研究内容 |
1.5.1 研究意义 |
1.5.2 研究内容 |
第二章 甲基化结合TPS-MFGDP-MS快速鉴定多糖 |
2.1 引言 |
2.2 材料和方法 |
2.2.1 实验仪器 |
2.2.2 实验试剂 |
2.2.3 搭建TPS-MFGDP装置 |
2.2.4 MFGDP-MS工作条件 |
2.2.5 样品制备 |
2.2.6 多糖的甲基化 |
2.2.7 随机森林算法(RF) |
2.2.8 TPS-MFGDP相关参数优化实验 |
2.2.9 安全注意事项 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 载气流速的优化 |
2.3.2 TPS温度控制对信号强度性能的重要性 |
2.3.3 使用TPS-MFGDP-MS分析单糖 |
2.3.4 用TPS-MFGDP-MS分析甲基化的二糖,三糖和四糖 |
2.3.5 用TPS-MFGDP-MS分析甲基化和水解的多糖 |
2.3.6 统计分析 |
2.4 结论 |
第三章 新型常压MIPDI技术对壳聚糖的表征和降解研究 |
3.1 引言 |
3.2 材料和方法 |
3.2.1 实验仪器 |
3.2.2 实验试剂 |
3.2.3 CTS的制备 |
3.2.4 降解CTS实验装置 |
3.2.5 CTS的多种表征方法 |
3.2.6 CTS特性粘度的测量 |
3.2.7 重量分析以计算产率 |
3.2.8 MIPDI相关参数优化实验 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 MIPDI降解反应体系中的活性物质 |
3.3.2 MIPDI对 CTS分子量的影响 |
3.3.3 MIPDI降解CTS颜色与体积变化 |
3.3.4 FT-IR光谱分析 |
3.3.5 XRD分析 |
3.3.6 FE-SEM分析 |
3.3.7 TGA分析 |
3.3.8 UV-vis分析 |
3.3.9 UPLC-MS分析 |
3.3.10 方法对比 |
3.4 结论 |
总结与展望 |
参考文献 |
致谢 |
攻读硕士学位期间取得的科研成果 |
(4)Online-SPE/LCMS定量筛查再生水中新兴污染物技术研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
1 绪论 |
1.1 水中新兴污染物(ECs)概况 |
1.1.1 新兴污染物概况 |
1.1.2 水中新兴污染物的危害 |
1.1.3 尾水中新兴污染物来源 |
1.2 水中新兴污染物筛查检测方法 |
1.2.1 预处理技术 |
1.2.2 色谱及质谱检测技术 |
1.3 新兴污染物控制技术研究 |
1.3.1 新兴污染物的去除现状 |
1.3.2 紫外/氯高级氧化工艺概况 |
1.4 研究目的、内容及技术路线 |
1.4.1 研究目的及意义 |
1.4.2 研究内容 |
1.4.3 技术路线 |
2 尾水中典型酸性药物的在线SPE-QQQ液质联用方法研究 |
2.1 实验仪器 |
2.2 实验试剂 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 标准溶液 |
2.3.2 样品采集与前处理 |
2.3.3 色谱柱 |
2.3.4 色谱和和质谱条件 |
2.3.5 样品数据处理 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 质谱检测参数的优化 |
2.4.2 流动相选择 |
2.4.3 检出限及定量限 |
2.4.4 基质效应 |
2.4.5 标准加入法的设计和方法评价 |
2.4.6 污水厂尾水样品分析 |
2.4.7 方法性能对比 |
2.5 本章小结 |
3 在线SPE-HPLC-Orbitrap高分辨质谱检测方法的开发与应用 |
3.1 实验试剂 |
3.2 实验仪器 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 目标污染物 |
3.3.2 标准溶液 |
3.3.3 样品采集与前处理 |
3.3.4 质谱参数优化设定 |
3.3.5 色谱条件优化 |
3.3.6 样品数据处理 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 有机物筛查参数确定与高分辨谱库建立 |
3.4.2 有机物筛查和定性依据 |
3.4.3 色谱条件优化 |
3.4.4 样品基质效应 |
3.5 本章小结 |
4 新兴污染物在尾水回用为湿地景观水过程中的赋存 |
4.1 污水厂及其尾水再生回用概况 |
4.2 生态林公园再生水景观湿地利用 |
4.2.1 生态林公园人工湿地构筑物 |
4.2.2 再生水景观湿地利用存在健康和生态方面的风险 |
4.3 基于高分辨质谱筛查技术检测分析尾水、人工湿地水体中新兴污染物 |
4.3.1 尾水、人工湿地水体采样点位选定 |
4.3.2 实际水样新兴污染物浓度测定 |
4.4 本章小结 |
5 紫外/氯工艺对尾水中典型新兴污染物控制技术初探 |
5.1 实验仪器 |
5.2 实验试剂 |
5.3 实验方法 |
5.3.1 NAP溶液的配制 |
5.3.2 NAP及中间产物的分析方法 |
5.3.3 萘普生及游离氯浓度的测定 |
5.3.4 动力学实验 |
5.3.5 生态毒性评价 |
5.4 结果与讨论 |
5.4.1 紫外/氯工艺降解NAP动力学 |
5.4.2 萘普生分子活性位点预测 |
5.4.3 中间产物及反应路径 |
5.4.4 生态毒性预测及评价 |
5.5 本章小结 |
6 结论与展望 |
6.1 结论 |
6.2 创新点 |
6.3 展望 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间的研究成果 |
致谢 |
附录1 |
附录2 |
(5)玉米芯纳米纤维素的制备及其在聚氨酯泡沫塑料中的应用(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩写词说明 |
第1章 绪论 |
1.1 引言 |
1.2 植物纤维资源 |
1.2.1 纤维素 |
1.2.2 半纤维素 |
1.2.3 木质素 |
1.2.4 玉米芯的特点 |
1.3 纳米纤维素材料 |
1.3.1 形态和尺寸 |
1.3.2 结晶度 |
1.3.3 机械强度 |
1.3.4 热稳定性 |
1.3.5 光学性质 |
1.4 纳米纤维素的制备技术 |
1.4.1 酸解法 |
1.4.2 机械法 |
1.4.3 氧化法 |
1.4.4 酶解法 |
1.4.5 离子液体法 |
1.4.6 高温液态水水解法 |
1.4.7 联合法 |
1.5 纳米纤维素的纯化和分离 |
1.6 纳米纤维素在聚氨酯材料中的应用 |
1.7 本论文研究思路及内容 |
1.7.1 研究目的和意义 |
1.7.2 研究的主要内容 |
1.7.3 研究思路和方案 |
第2章 甲酸/盐酸预处理对玉米芯纤维组分及结构的影响 |
2.1 引言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 材料 |
2.2.2 预处理 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 预处理时间对纤维组分及结构的影响 |
2.3.2 预处理温度对纤维组分及结构的影响 |
2.3.3 甲酸浓度对纤维组分及结构的影响 |
2.3.4 物料平衡图 |
2.4 本章小结 |
第3章 离子液体润胀-固体酸水解法制备玉米芯纳米纤维素 |
3.1 引言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 材料 |
3.2.2 纳米纤维素制备 |
3.2.3 纤维润胀处理性能的表征 |
3.2.4 粒度分布 |
3.2.5 纤维晶体结构和结晶度(Cr I)测定 |
3.2.6 红外光谱分析(FTIR) |
3.2.7 热重分析(TGA) |
3.2.8 原子力显微镜(AFM)分析 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 不同离子液体种类和处理温度对纤维润胀的影响 |
3.3.2 预处理体系水分含量对纤维润胀的影响 |
3.3.3 预处理时间对纤维润胀的影响 |
3.3.4 预处理固液比对纤维润胀的影响 |
3.3.5 加热方式对纤维润胀的影响 |
3.3.6 处理条件对玉米芯纳米纤维素尺寸的影响 |
3.3.7 粒径分布及形貌分析 |
3.3.8 热稳定性分析 |
3.3.9 红外光谱分析 |
3.3.10 离子液体和固体酸回收 |
3.4 本章小结 |
第4章 有机酸法制备表面羧基化的纳米纤维素 |
4.1 引言 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 材料 |
4.2.2 玉米芯纳米纤维素的制备 |
4.2.3 玉米芯纳米纤维素的表征 |
4.2.4 水解液中单糖的测定 |
4.2.5 Zeta电位的测定 |
4.2.6 羧基的测定 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 有机酸水解条件对纳米纤维素得率的影响 |
4.3.2 原子力显微镜分析 |
4.3.3 热稳定性分析 |
4.3.4 红外光谱分析 |
4.3.5 X射线衍射分析 |
4.3.6 表面电荷及羧基含量分析 |
4.3.7 有机酸的回收 |
4.4 本章小结 |
第5章 对甲苯磺酸预处理-酶水解法制备纳米纤维素 |
5.1 引言 |
5.2 材料与方法 |
5.2.1 材料 |
5.2.2 玉米芯纳米纤维素的制备 |
5.2.3 玉米芯纳米纤维素的表征 |
5.3 结果与讨论 |
5.3.1 对甲苯磺酸/甲醛预处理-酶法水解制备纳米纤维素 |
5.3.2 X射线衍射分析 |
5.3.3 热稳定性分析 |
5.3.4 红外光谱分析 |
5.3.5 形态结构分析 |
5.4 本章小结 |
第6章 玉米芯纳米纤维素用于制备复合聚氨酯泡沫塑料 |
6.1 前言 |
6.2 原料与方法 |
6.2.1 原料 |
6.2.2 纳米纤维素在多元醇中的分散 |
6.2.3 纳米纤维素复合聚氨酯泡沫的制备 |
6.2.4 材料结构表征 |
6.3 结果与讨论 |
6.3.1 玉米芯纳米纤维素在多元醇中的流变行为 |
6.3.2 玉米芯纳米纤维素复合聚氨酯泡沫塑料的动态力学行为 |
6.3.3 玉米芯纳米纤维素复合聚氨酯泡沫塑料的差式扫描量热表征 |
6.3.4 玉米芯纳米纤维素复合聚氨酯泡沫塑料的红外分析 |
6.3.5 玉米芯纳米纤维素复合聚氨酯泡沫塑料的泡孔形貌分析 |
6.3.6 纳米纤维素复合聚氨酯泡沫塑料的力学压缩行为 |
6.4 本章小结 |
第7章 结论与展望 |
7.1 结论 |
7.2 创新点 |
7.3 展望 |
参考文献 |
致谢 |
攻读学位期间发表论文情况 |
附录 |
(6)功能化纳米二氧化硅药物载体的构建及其分析应用研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
ABSTRACT |
第一章 绪论 |
1.1 引言 |
1.2 纳米二氧化硅的概述 |
1.2.1 纳米二氧化硅的结构与分类 |
1.2.2 二氧化硅纳米粒子的合成 |
1.3 纳米二氧化硅功能化调控 |
1.3.1 核壳功能结构 |
1.3.2 卵壳功能结构 |
1.3.3 表面官能团修饰 |
1.3.4 纳米阀门 |
1.3.5 分子靶向机制 |
1.4 纳米二氧化硅用于药物载体的肿瘤微环境响应 |
1.4.1 pH响应 |
1.4.2 GSH响应 |
1.4.3 ROS响应 |
1.4.4 其他肿瘤微环境响应 |
1.4.5 ROS介导的肿瘤微环境响应疗法 |
1.5 纳米二氧化硅用于信号分子传感 |
1.5.1 pH传感 |
1.5.2 GSH传感 |
1.5.3 H_2O_2传感 |
1.5.4 其他肿瘤信号分子传感 |
1.6 选题依据、研究内容与创新点 |
1.6.1 立题背景 |
1.6.2 研究内容 |
1.6.3 创新点 |
参考文献 |
第二章 牛血清蛋白修饰的靶向介孔二氧化硅纳米粒子用于还原响应药物释放 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 仪器与试剂 |
2.2.2 靶向介孔二氧化硅纳米药物载体的制备 |
2.2.3 载药量与药物释放的测定方法 |
2.2.4 细胞成像与细胞毒性实验方法 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 MSN-FA的表征 |
2.3.2 载药量及药物释放考察 |
2.3.3 细胞毒性 |
2.3.4 细胞成像 |
2.4 本章小结 |
参考文献 |
第三章 肿瘤微环境响应介孔二氧化硅纳米粒子用于递送阿霉素与化学动力试剂 |
3.1 前言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 试剂与仪器 |
3.2.2 纳米药物载体的制备 |
3.2.3 载药量与药物释放的测定方法 |
3.2.4 过渡金属介导的芬顿反应 |
3.2.5 细胞成像与细胞毒性实验方法 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 MPPF纳米复合物的表征 |
3.3.2 ROS生成能力评估 |
3.3.3 体外药物释放研究 |
3.3.4 肿瘤细胞识别研究 |
3.3.5 肿瘤细胞药物递送与细胞毒性研究 |
3.4 本章小结 |
参考文献 |
第四章 可降解SiO_2@MnO_2纳米复合物用于谷胱甘肽检测与肿瘤细胞诊疗一体化 |
4.1 前言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 仪器与试剂 |
4.2.2 FSMP与 SMP纳米复合物的制备 |
4.2.3 亚甲基蓝负载 |
4.2.4 体外ROS生成 |
4.2.5 GSH检测 |
4.2.6 细胞实验 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 FSMP纳米复合物的制备与表征 |
4.3.2 GSH的检测与传感机理 |
4.3.3 FSMP的诊疗一体化 |
4.3.4 生物安全性评价 |
4.4 本章小结 |
参考文献 |
第五章 DMSN@MnO_2纳米药物载体用于谷胱甘肽双模传感与靶向肿瘤细胞检测 |
5.1 前言 |
5.2 实验部分 |
5.2.1 仪器与试剂 |
5.2.2 MnO_2修饰靶向纳米药物载体的制备 |
5.2.3 喜树碱负载的DM-FA的制备 |
5.2.4 紫外法GSH检测 |
5.2.5 荧光法GSH检测 |
5.2.6 细胞实验 |
5.3 结果与讨论 |
5.3.1 DM-FA纳米复合物的制备与表征 |
5.3.2 CPT/DM-FA的传感性能研究 |
5.3.3 CPT/DM-FA 肿瘤细胞检测 |
5.4 本章小结 |
参考文献 |
第六章 总结与展望 |
6.1 总结 |
6.2 展望 |
攻读学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
个人简况及联系方式 |
(7)填充吸附剂微萃取-质谱法检测水中毒剂及水解产物方法研究(论文提纲范文)
缩略语表 |
摘要 |
Abstract |
第一章 前言 |
1.1 研究背景及意义 |
1.2 国内外研究进展 |
1.2.1 化学侦察装备现场采样方法 |
1.2.2 填充吸附剂微萃取技术进展 |
1.2.3 衍生化气相色谱法检测化学毒剂进展 |
1.3 论文思路和框架 |
第二章 MEPS-GC-MS方法检测水相中有机磷酸酯 |
2.1 引言 |
2.2 实验仪器和材料 |
2.2.1 实验仪器 |
2.2.2 实验材料与试剂 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 自制MEPS萃取设备 |
2.3.2 标准溶液配制 |
2.3.3 GC-MS分离参数 |
2.3.4 填充吸附剂微萃取过程 |
2.4 实验结果与讨论 |
2.4.1 色谱条件确定 |
2.4.2 单因素优化 |
2.4.3 方法分析性能 |
2.4.4 基质效应 |
2.5 本章小结 |
第三章 MEPS-GC-MS方法检测水相中的沙林与梭曼 |
3.1 引言 |
3.2 实验仪器和材料 |
3.2.1 实验仪器 |
3.2.2 实验材料与试剂 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 自制MEPS提取设备 |
3.3.2 标准溶液的制备 |
3.3.3 GC-MS分离参数 |
3.3.4 填充吸附剂微萃取过程 |
3.4 实验结果与讨论 |
3.4.1 色谱条件确定 |
3.4.2 单因素优化 |
3.4.3 方法的分析性能 |
3.4.4 基质效应 |
3.4.5 微萃取存储检测效果 |
3.4.6 方法比较 |
3.5 本章小结 |
第四章 MEPS-MS方法检测沙林水解产物 |
4.1 引言 |
4.2 实验仪器和材料 |
4.2.1 实验仪器 |
4.2.2 实验材料与试剂 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 新型衍生化试剂的制备 |
4.3.2 标准溶液的制备 |
4.3.3 MEPS-GC-MS结合衍生化检测MPA/IMPA |
4.3.4 MEPS-Nano-ESI-MS方法检测MPA/IMPA |
4.4 实验结果与讨论 |
4.4.1 衍生化试剂合成中间产物结构鉴定 |
4.4.2 MEPS-GC-MS结合衍生化检测MPA/IMPA |
4.4.3 MEPS-Nano-ESI-MS方法检测MPA/IMPA |
4.5 本章小结 |
第五章 吸附剂材料制备及MEPS-Nano-ESI-MS方法检测硫二甘醇 |
5.1 引言 |
5.2 实验仪器和材料 |
5.2.1 实验仪器 |
5.2.2 实验材料与试剂 |
5.3 实验方法 |
5.3.1 石墨烯量子点键合二氧化硅(GQDs/Si O2)复合材料制备 |
5.3.2 标准溶液的制备 |
5.3.3 纳升喷雾电离条件 |
5.3.4 填充吸附剂微萃取过程 |
5.3.5 Design-Expert实验设计 |
5.4 实验结果与讨论 |
5.4.1 石墨烯量子点键合二氧化硅(GQDs/Si O2)复合材料表征 |
5.4.2 电喷雾质谱检测 |
5.4.3 吸附剂种类优化 |
5.4.4 洗脱溶剂优化 |
5.4.5 统计分析方法的设计 |
5.4.6 方差分析(ANOVA) |
5.4.7 拟合统计 |
5.4.8 因素相互作用 |
5.4.9 最佳参数 |
5.4.10 方法的分析性能 |
5.5 本章小结 |
第六章 结论与展望 |
6.1 研究结论 |
6.2 特色与创新性 |
6.3 展望 |
参考文献 |
附录 A 附图 |
作者在学期间取得的学术成果 |
主要简历 |
致谢 |
(8)聚苹果酸基聚酯功能材料的结构与性能设计(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 引言 |
1.2 聚苹果酸概述 |
1.2.1 苹果酸的简介 |
1.2.2 聚苹果酸的简介 |
1.2.3 聚苹果酸的合成 |
1.2.4 聚苹果酸的性能 |
1.2.5 聚苹果酸的应用 |
1.3 论文选题意义、主要研究内容及创新点 |
1.3.1 选题意义 |
1.3.2 主要研究内容 |
1.3.3 创新点 |
第二章 聚苹果酸/聚乳酸共混材料的形态及性能 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 实验原料 |
2.2.2 实验仪器 |
2.2.3 样品制备 |
2.2.4 性能测试 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 PLMA的性能表征 |
2.3.2 PLA/PLMA共混材料的相形态 |
2.3.3 PLA/PLMA共混材料的降解性能 |
2.3.4 PLA/PLMA共混材料的力学性能 |
2.4 本章小结 |
第三章 聚苹果酸交联结构的设计及性能调控 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 实验原料 |
3.2.2 实验仪器 |
3.2.3 样品制备 |
3.2.4 性能测试 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 交联PLMA的制备 |
3.3.2 交联PLMA的力学性能 |
3.3.3 交联PLMA的脆-轫性能转变 |
3.3.4 交联PLMA的抗菌性能 |
3.3.5 交联PLMA的形状记忆行为 |
3.4 本章小结 |
第四章 交联聚苹果酸/碳纳米管复合材料的结构与性能设计 |
4.1 引言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 实验原料 |
4.2.2 实验仪器 |
4.2.3 样品制备 |
4.2.4 性能测试 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 交联PLMA/CNTs纳米复合材料的制备 |
4.3.2 交联PLMA/CNTs纳米复合材料的力学性能 |
4.3.3 交联PLMA/CNTs纳米复合材料的弹塑性性能 |
4.3.4 交联PLMA/CNTs纳米复合材料的降解性能 |
4.3.5 交联PLMA/CNTs纳米复合材料的光热行为 |
4.4 本章小结 |
第五章 结语 |
参考文献 |
攻读学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
(9)不同切割方式处理青花菜贮藏过程中硫苷代谢及抗氧化活性研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略语 |
文献综述 |
参考文献 |
前言 |
第一章 不同切割方式处理下青花菜在贮藏过程中代谢物轮廓比较 |
第一节 仪器与材料 |
第二节 实验方法 |
第三节 结果与分析 |
第四节 小结与讨论 |
第二章 不同切割方式处理下青花菜在贮藏过程中硫苷及芥子酶活性的变化 |
第一节 仪器与材料 |
第二节 实验方法 |
第三节 结果与分析 |
第四节 小结与讨论 |
第三章 不同切割方式处理下青花菜在贮藏过程中抗氧化活性评价 |
第一节 仪器与材料 |
第二节 实验方法 |
第三节 结果与分析 |
第四节 小结与讨论 |
结语 |
参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
(10)大麦膳食纤维降血糖作用机制及其物质基础研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略词表 |
第1章 绪论 |
1.1 糖尿病概述 |
1.2 膳食纤维与糖尿病研究进展 |
1.2.1 膳食纤维与糖尿病研究现状 |
1.2.2 β-葡聚糖与糖尿病研究现状 |
1.2.3 阿拉伯木聚糖与糖尿病研究现状 |
1.3 肠道菌群与宿主健康 |
1.3.1 肠道菌群与肠道屏障 |
1.3.2 肠道菌群与代谢 |
1.3.3 肠道菌群与肠道免疫 |
1.4 大麦膳食纤维的结构与功能研究进展 |
1.4.1 大麦膳食纤维的结构研究 |
1.4.2 大麦膳食纤维的功能研究 |
1.5 本文研究的主要内容和创新点 |
第2章 大麦碱提多糖的结构初探 |
2.1 前言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 试剂材料与仪器 |
2.2.2 实验方法 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 理化性质分析 |
2.3.2 相对分子质量分析 |
2.3.3 基本结构分析 |
2.3.4 流变性能分析 |
2.4 本章小结 |
第3章 大麦水提多糖的结构初探 |
3.1 前言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 试剂材料与仪器 |
3.2.2 实验方法 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 理化性质分析 |
3.3.2 相对分子质量分析 |
3.3.3 基本结构分析 |
3.3.4 扫描电镜分析 |
3.3.5 流变性能分析 |
3.3.6 构象参数和X射线衍射分析 |
3.4 本章小结 |
第4章 大麦膳食纤维对正常大鼠血糖血脂影响 |
4.1 前言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 试剂材料与仪器 |
4.2.2 实验方法 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 大麦膳食纤维的制备和分析 |
4.3.2 体重情况 |
4.3.3 FBG和 GSP |
4.3.4 血脂(TG、TC、HDL-C、LDL-C) |
4.3.5 肝功能、肾功能 |
4.3.6 氧化应激(SOD、CAT、MDA) |
4.3.7 盲肠和粪便SCFAs |
4.4 本章小结 |
第5章 大麦膳食纤维对正常大鼠肠道菌群影响 |
5.1 前言 |
5.2 实验部分 |
5.2.1 试剂材料与仪器 |
5.2.2 实验方法 |
5.3 结果与讨论 |
5.3.1 α多样性分析 |
5.3.2 β多样性分析 |
5.3.3 菌群鉴定 |
5.3.4 菌群差异分析 |
5.4 本章小结 |
第6章 大麦膳食纤维对糖尿病大鼠血糖血脂影响 |
6.1 前言 |
6.2 实验部分 |
6.2.1 试剂材料与仪器 |
6.2.2 实验方法 |
6.3 结果与讨论 |
6.3.1 体重情况 |
6.3.2 FBG、GSP、胰岛素、HOMA-IR和 QUICKI |
6.3.3 血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C) |
6.3.4 肝功能、肾功能 |
6.3.5 氧化应激(SOD、CAT、MDA) |
6.3.6 盲肠和粪便SCFAs |
6.4 本章小结 |
第7章 大麦膳食纤维对糖尿病大鼠肠道菌群影响 |
7.1 引言 |
7.2 实验部分材料与仪器 |
7.2.1 试剂材料与仪器 |
7.2.2 实验方法 |
7.3 结果与讨论 |
7.3.1 α多样性分析 |
7.3.2 β多样性分析 |
7.3.3 菌群鉴定 |
7.3.4 菌群差异分析 |
7.4 本章小结 |
第8章 结论与展望 |
8.1 结论 |
8.2 展望 |
攻读学位期间的研究成果 |
致谢 |
参考文献 |
四、直接测定水中微量毒物药物及其降解产物的核磁共振技术(论文参考文献)
- [1]褐藻胶裂解酶产酶菌株挖掘及其催化特性研究[D]. 孟青. 江南大学, 2021
- [2]呕吐毒素光催化降解产物安全性评价及其诱导的胞内氧化应激状态原位监测方法研究[D]. 周游. 江南大学, 2021(01)
- [3]基于常压等离子体质谱技术的多糖快速鉴定分析方法及降解研究[D]. 李玉婷. 西北大学, 2021(12)
- [4]Online-SPE/LCMS定量筛查再生水中新兴污染物技术研究[D]. 徐建业. 常州大学, 2021(01)
- [5]玉米芯纳米纤维素的制备及其在聚氨酯泡沫塑料中的应用[D]. 熊开峰. 广西大学, 2021(01)
- [6]功能化纳米二氧化硅药物载体的构建及其分析应用研究[D]. 张羱. 山西大学, 2021(01)
- [7]填充吸附剂微萃取-质谱法检测水中毒剂及水解产物方法研究[D]. 魏佳楠. 军事科学院, 2021
- [8]聚苹果酸基聚酯功能材料的结构与性能设计[D]. 完颜倩茹. 扬州大学, 2021(08)
- [9]不同切割方式处理青花菜贮藏过程中硫苷代谢及抗氧化活性研究[D]. 黄晓欣. 北京中医药大学, 2021
- [10]大麦膳食纤维降血糖作用机制及其物质基础研究[D]. 李林燕. 南昌大学, 2021