一、鸡大肠杆菌多价油乳剂灭活苗的研制（论文文献综述）
黄立[1]（2017）在《豫南地区鸡大肠杆菌病病原学调查与防控研究》文中提出目前,鸡大肠杆菌病作为一种重要的细菌性传染病,对我国养鸡业造成了严重危害。根据信阳市疫病检测工程中心（信阳农林学院市级工程中心）对豫南地区主要养鸡集中区的调查,在规模化养鸡场细菌性疾病当中,大肠杆菌发病率一直居于首位。鸡大肠杆菌血清型众多,耐药菌株也在不断增多,给防治本病增加了难度。因此,开展豫南地区鸡大肠杆菌病病原学调查与分析,对于有效防治鸡大肠杆菌病,具有重要的理论和实践意义。本研究涉及到豫南地区鸡致病性大肠杆菌分离与鉴定、对常用抗菌药物耐药性分析、中药活性成分与氨基糖苷类药物体外联合抗菌作用、利用优势致病菌株研制多价灭活苗等方面。通过系列研究,进一步弄清楚豫南地区鸡大肠杆菌病的流行状况,必将为豫南地区乃至河南的鸡大肠杆菌病科学防治工作,提供重要的理论依据和临床价值。1豫南地区鸡致病性大肠杆菌分离与鉴定对于豫南地区送检的164份病鸡样品,经过常规方法培养、纯化及镜检,并进行生理生化鉴定和PCR鉴定,共分离到鸡大肠杆菌121株,鉴定出88株分离菌株血清型,包括17种血清型;主要血清型是02、078、01、018、026、022,共72株,占总分离株的59.50%。给供试雏鸡接种121株分离菌株后,可见发病症状及剖检病变都与本病特征相符;在121株分离菌株中,有64株高致病性菌株、31株中度致病性菌株、26株低致病性菌株,分别占总试验菌株的52.9%、25.6%、21.5%。2对常用抗菌药物耐药性分析采用标准微量稀释法,测定62株鸡大肠杆菌对18种药物的体外最小抑菌浓度（MIC）,并通过PCR方法扩增I型整合酶基因。结果显示,全部菌株呈现多重耐药,耐药谱型达12种之多;对β-内酰胺类、酚胺醇类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类、四环素类等抗菌药物,均表现出不同程度的耐药性;对土霉素、复方新诺明、磺胺嘧啶、强力霉素四种药物,耐药率分别为95.2%、87.1%、80.6%、72.6%;I型整合酶基因检出率为87.1%。由此表明,鸡大肠杆菌临床分离株,对常用抗菌药物都产生了不同程度的耐药性。3中药活性成分与氨基糖苷类药物体外联合抗菌作用采用棋盘稀释法,了解中药活性成分与氨基糖苷类药物体外联合抗菌作用,进而筛选出具有协同抗菌效果的药物组合,为体内试验提供理论基础。结果表明,穿心莲内酯与氨基糖苷类药物联用,主要表现为协同作用;黄芩苷和小檗碱分别与氨基糖苷类药物联用,主要表现为相加作用;蒲公英提取物与氨基糖苷类药物联用,主要表现为无关作用。由此表明,穿心莲内酯与氨基糖苷类药物联合使用,可提高抗菌药物对耐药大肠杆菌的抗菌效果。4鸡大肠杆菌多价灭活苗制备与评价利用毒力强、免疫原性好、具有地方代表性的O1、O2、O78、O22、O26、O18六种优势血清型菌株,研制鸡大肠杆菌氢氧化铝胶多价灭活苗。免疫攻毒试验结果显示,疫苗对各日龄鸡的安全性较好,采用大肠杆菌菌株攻毒,免疫组可获得完全保护,说明该疫苗对大肠杆菌病免疫效果显着。这些研究成果,对于有效防治豫南地区鸡大肠杆菌病,提高豫南地区整体养鸡水平,具有重要指导意义。
邵启文[2]（2019）在《鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗佐剂的筛选及免疫持续期的初步研究》文中认为禽致病性大肠杆菌（Avian pathogenic Escherichia coli,APEC）常引起家禽发生多种肠道外疾病如心包炎、气囊炎、肝周炎、蜂窝织炎及败血症,具有较高的感染率和死亡率,给养禽业带来严重损失。以本实验室构建的禽致病性大肠杆菌脂多糖缺失株E516△lpxL△lpxM（O1）、E058△lpxL△lpxM（O2）、E522△lpxL△lpxM（078）株作为制苗菌株等比例混合,分别辅以白油佐剂道达尔170、白油佐剂Marc52和铝胶佐剂研制了相应三价灭活疫苗,并对三种佐剂疫苗进行了安全性和免疫效力比较试验,以确定合适的疫苗佐剂。疫苗佐剂确定后,对该三价疫苗的免疫持续期进行研究。现将研究结果报告如下:1、三种不同佐剂疫苗的安全性比较利用制备的三种不同佐剂灭活疫苗,分别以单剂量0.5 mL/羽和双倍剂量1.0 mL/羽接种14日龄SPF鸡进行安全性试验。试验结果表明,注射白油佐剂灭活疫苗组的鸡,以单剂量0.5 mL/羽免疫,接种疫苗后12-24 h,部分鸡出现短时精神沉郁,之后无任何不良反应:以双倍剂量1 mL/羽免疫时,接种疫苗后5-8 h试验鸡出现精神不佳,24 h内恢复正常,由于双倍剂量组免疫剂量较大,部分试验鸡注射部位出现0.1-1.2 cm大小不等的结节,但未出现全身不良反应,免疫一周注射部位结节逐渐消失,生长状况良好。注射铝胶佐剂灭活疫苗组的鸡,在整个观察期内饮食和精神状态均正常,注射部位亦未见异常。以上结果说明我们所研制的油佐剂疫苗具有良好的安全性。2、三种不同佐剂疫苗的免疫效力试验以三种不同佐剂疫苗对14日龄SPF鸡进行免疫,42日龄时分别以亲本株E516（O1）、E058（02）和E522（078）攻毒,进行免疫保护试验。试验结果表明,白油佐剂道达尔170疫苗组攻毒后保护比均为7/10,白油佐剂Marc52疫苗组攻毒后保护比分别为5/10、5/10和7/10,铝胶佐剂疫苗组攻毒后保护比分别为3/10、3/10和5/10,攻毒对照组攻毒后死亡比均为10/10。以上试验结果表明,铝胶佐剂疫苗对同源野生株攻毒鸡的免疫保护效果差,白油佐剂道达尔170和白油佐剂Marc52疫苗尤其是前者对同源野生株攻毒鸡可以提供良好的免疫保护。综合安全性试验和免疫保护试验,我们确定白油佐剂道达尔170佐剂作为研制疫苗的佐剂。3、鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗的免疫持续期试验以鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗对14日龄SPF鸡进行免疫,分别在免疫后第30 d、第60 d和第90 d进行亲本株攻毒试验,对保护效力、特异性抗体水平及组织病理变化进行评价。试验结果表明,免疫后第30 d、第60 d和第90 d攻毒,试验鸡均得到不同程度较好保护。由于成年鸡对致病性大肠杆菌的敏感性降低,90日龄试验鸡攻毒对照组死亡比减少属于正常现象。白羽肉鸡的生长周期一般在9周以内,该疫苗应用在白羽肉鸡上,一次性免疫即可得到有效的保护。综合多因素考虑,我们暂定鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗的免疫持续期为3个月。
张翠翠[3]（2016）在《禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与O1、O2、O78菌株lpxL、lpxM基因缺失灭活疫苗的初步研究》文中指出禽致病性大肠杆菌主要引起禽类的心包炎、肝周炎、气囊炎、输卵管炎、腹膜炎等,并导致不同程度死亡率,给养殖业造成严重的经济损失。本研究采集江苏地区疑似大肠杆菌病的病鸡的组织进行大肠杆菌的分离鉴定,探究其致病性、耐药性；随后进行基因缺失多价灭活疫苗免疫保护效果的研究。为禽大肠杆菌病的防治提供理论依据,同时为多价灭活疫苗的研发奠定基础。一禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及致病性研究本研究对江苏省部分地区疑似大肠杆菌病的病死鸡进行大肠杆菌的分离与鉴定,共分离鉴定了162株大肠杆菌。通过玻板凝集和试管凝集试验对大肠杆菌分离株进行O血清型鉴定,其中定型菌株130株,未定型菌株32株,定型率为80.25%。在130株定型菌株中鉴定出34种O血清型,其中主要血清型有O78、O88、O65、O161、O1、O24、O13,占定型菌株的66.92%。通过PCR方法对分离到的162株大肠杆菌进行iss、iroN、tsh、cvaC、 iutA及irp26个与禽致病性大肠杆菌致病力密切相关的毒力基因的检测,其检出率分别为83.33%、80.86%、45.06%、48.76%、75.92%、58.02%,同时携带6个毒力基因的菌株有37株,占总分离菌株的22.83%。选取本研究分离鉴定的菌株64株（主要血清型45株）进行1日龄易感鸡的致病性试验,结果64个分离株中有55株属于高中致病性菌株,占85.94%。其中,高致病性菌株40株（主要血清型33株）,中度致病性菌株15株（主要血清型8株）,低致病性菌株9株。通过1日龄致病性试验并结合6个与禽致病性大肠杆菌致病力密切相关的毒力基因的检测,可以判定本研究分离菌中至少有80%的分离菌具有中高致病力。二禽致病性大肠杆菌耐药性研究本研究选取了16种抗生素（氨苄青霉素、四环素、强力霉素、先锋霉素V、磺胺异恶唑、链霉素、庆大霉素、环丙沙星、卡那霉素、左旋氧氟沙星、氟苯尼考、新霉素、阿奇霉素、诺氟沙星、多粘菌素B、环丙沙星）对60个分离株进行药物敏感性的筛选。60个分离株对强力霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺异嗯唑及环丙沙星的耐药率在80%及以上；对阿奇霉素、庆大霉素及多粘菌素B的耐药率在50%以下；对多粘菌素B的敏感性最高。60个分离株均出现不同程度的多重耐药情况。其中,受检菌株中耐13种药物的菌株最多,占总受检菌株的25.0%（15/60）；有63.33%（38/60）的受检菌株对9种及以上药物耐药。由此可知目前禽致病性大肠杆菌的耐药性严重且耐药谱比较广。三禽致病性大肠杆菌01、02、078菌株lpxL、lpxM基因缺失灭活疫苗的初步研究本研究利用本实验室保存的01、02、078血清型的野生株及其lpxL、lpxM突变株制备油佐剂多价灭活疫苗,免疫后对其特异性抗体反应水平、对野生株的攻毒保护率及免疫鸡内脏组织的病理变化进行研究。研究数据显示,本研究制备的疫苗的血清特异性抗体水平与攻毒保护率均优于商品疫苗组,突变株疫苗的安全性和免疫应激性优于野生株疫苗。不同佐剂对疫苗免疫保护效果的影响：突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗组的特异性抗体水平与保护率优于白油佐剂疫苗；对01、02、078毒株的保护率：突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗分别为86.67%、93.33%及100%,白油佐剂疫苗分别为对80%、86.67及86.67。不同免疫次数对免疫保护效果的影响：将突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗对鸡进行一次免疫后攻毒,其免疫保护率要优于商品疫苗的二次免疫的免疫保护率,与突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗二次免疫组相比保护率相当,对血清型01、02、078毒株的免疫保护率分别为80%、93.33%、93.33%。因此,本研究制备的突变株Montanide TSA71VG佐剂疫苗免疫一次就足够抵抗大肠杆菌01、02、078的感染,其保护率远远高于商品疫苗免疫组。
于金玲[4]（2005）在《鸡致病性大肠杆菌分离鉴定及多价油佐剂灭活疫苗的研制》文中认为为有效预防锦州地区鸡大肠杆菌病的发生,进行了本项研究: 首先,以锦州地区13个鸡场发病鸡群为病料来源,经细菌形态学鉴定、分离培养、生化试验和致病性试验及血清型鉴定,共分离到41株鸡致病性大肠杆菌,鉴定出11个血清型,确定O78、O1、O26及O2为锦州地区流行的鸡致病性大肠杆菌的优势血清型。 其次,以O78、O1、O26及O2为制苗用菌株制成多价油佐剂灭活疫苗。对该苗进行了安全性、免疫期、保存期、免疫剂量试验和田间试验。结果表明,该苗各项指标均符合需求,安全可靠,免疫原性强、免疫效果好,7d开始产生免疫力,免疫期可达6个月以上;疫苗保存期,4℃保存12个月,25℃保存6个月;最小免疫剂量为:雏鸡0.25ml/只,成鸡0.5ml/只;田间试验,取得了满意效果。
薛俊龙,张李俊,王采先,詹丽娥,田林君,李红丽,张国权[5]（2009）在《鸡大肠杆菌多价复合佐剂灭活苗的研制》文中研究指明鸡大肠杆菌多价复合佐剂灭活苗是采用山西省优势鸡致病性大肠杆菌的菌体碎片作为抗原物质,矿物油和黄芪多糖组成复合免疫增效佐剂研制而成的。通过免疫效果试验、免疫保护期试验及疫苗保存期试验等,结果表明,免疫后7 d,该疫苗即可产生坚强的免疫力,而常规疫苗（对照Ⅱ组）则需14 d;血清抗体滴度于接种后约6周时,O78达到1∶32（最高可达1∶53）,并且维持6周以上,而常规疫苗的最高值为1∶18;该疫苗的免疫保护期为5个多月,常规疫苗为4个月;4～8℃贮藏,保存期不低于14个月。实验室和区域试验结果说明该疫苗具有产生循环抗体时间早、安全、免疫保护率高等特点。
潘廷云[6]（2018）在《鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活苗安全性、最适抗原含量、免疫持续期及交叉免疫保护研究》文中认为禽致病性大肠杆菌病（AvianColibacillosis,AC）是由禽致病性大肠杆菌（APEC）引起的禽类传染性疾病,是养禽业重要的细菌病之一。由于抗生素治疗存在菌株抗药性和药物残留的缺陷,有效的疫苗防治禽致病性大肠杆菌病至关重要。本研究分别以鸡致病性大肠杆菌常见血清型O1（E516）、02（E058）、078（E522）三个菌株及由本实验室构建的脂多糖缺失E516△lpxL△lpxM、E058△lpxL△lpxM、E522△lpxL△lpxM株为抗原,与MontanideTS△71 VG油佐剂制成多价灭活苗。探讨脂多糖缺失灭活疫苗的安全性、最适抗原含量、免疫持续期和疫苗侯选株与流行株的交叉免疫保护。一鸡大肠杆菌病亲本株和脂多糖缺失多价灭活疫苗的安全性比较研究选取本实验室保存鸡致病性大肠杆菌E516（01）、E058（02）、E522（078）和构建的脂多糖缺失株 E516△lpxL△lpxM、E058△lpxL△lpxM、E522AlpxL△lpxM分别制成抗原含量为2.0 × 109 CFU/mL、2.0 × 1010 CFU/mL的多价灭活疫苗,以两倍正常剂量免疫进行安全性试验。结果显示,无论是亲本株还是脂多糖缺失多价灭活疫苗,抗原含量为2.0 × 109 CFU/mL免疫组的安全性优于2.0 × 1010 CFU/mL免疫组;在2.0 × 109 CFU/mL免疫组中,脂多糖缺失多价疫苗的安全性优于亲本株多价灭活疫苗。二鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗最适免疫抗原含量研究本研究制备抗原含量分别为2.0 × 108.5CFU/mL、2.0 × 109 CFU/mL和2.0 × 109.5 CFU/mL的01、02、078血清型亲本株及脂多糖缺失株油佐剂多价灭活疫苗。免疫后对其特异性抗体水平、亲本株攻毒保护率及免疫鸡攻毒后内脏组织病理变化进行研究。研究数据显示,抗原含量为2.0 ×108 5 CFU/mL免疫,亲本株疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为50.0%、55.6%、55.6%,脂多糖缺失疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为50.0%、55.6%、66.7%;抗原含量为 2.0 ×109 CFU/mL 免疫,亲本株疫苗对 01、02、078亲本株保护率分别为80.0%、88.9%、88.9%;脂多糖缺失株疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为90.0%、88.9%、100.0%;抗原含量为2.0 ×109.5 CFU/mL免疫,亲本株疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为70.0%、77.8%、77.8%;脂多糖缺失株疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为80.0%、88.9%。、100.0%。因此,本实验室制备的脂多糖缺失多价灭活疫苗不同抗原含量免疫组的保护率均高于相同抗原含量亲本株疫苗组,该疫苗的最适抗原含量2.0 × 109 CFU/mL。三鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫持续期研究本研究以鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗进行免疫,分别在免疫后30 d、60 d、90 d和120 d进行亲本株攻毒,根据特异性抗体水平、亲本株攻毒保护率及鸡内脏组织病理变化进行研究。结果表明,在30 d攻毒,疫苗对01、02、078亲本株的保护率分别为88.9%、87.5%、87.5%;在60 d攻毒,疫苗对01、02、078亲本株的保护率均为66.7%;在90 d攻毒,疫苗对01、02、078亲本株的保护率分别为50.0%、50.0%、66.7%;在120 d攻毒,免疫组和攻毒对照组均未出现病死鸡。因此,免疫后30 d、60 d、90 d攻毒,鸡均得到不同程度保护。但由于成年鸡对致病性大肠杆菌的敏感性降低,免疫后120 d攻毒免疫组和对照组均未出现病死鸡,所以本研究暂定该疫苗的免疫持续期为3个月。四鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗交叉免疫保护研究本研究以鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗进行免疫,免疫后检测特异性抗体水平,对01、02、078亲本株和近年流行的菌株O1（Y12,T12）、02（E172,E899）、078（Y14,Y48）进行攻毒和免疫鸡内脏组织的病理变化进行研究。研究结果显示,对01血清型E516、Y12、T12菌株的免疫保护率分别为88.9%、80.0%、87.5%;对02血清型E058、E172、E899菌株的免疫保护率分别为87.5%、88.9%、80.0%;对078血清型E522、Y14、Y48菌株的免疫保护率分别为88.9%、80.0%、80.0%。本研究得出此鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗对疫苗候选株和流行株均提供不低于80.0%的保护。
杨发龙[7]（2000）在《禽大肠杆菌病疫苗》文中进行了进一步梳理对禽大肠杆菌病灭活苗、亚单位苗及弱毒苗的研究概况作了综述 ,对未来禽大肠杆菌病疫苗的研究方向进行了展望
李沐森[8]（2007）在《吉林城区鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定及灭活疫苗研制》文中提出吉林城区近几年多次流行鸡大肠杆菌病,为预防控制本病的发生,本试验从5个区10个鸡场采取病料,通过细菌分离培养、生化试验、动物试验、血清学试验分离鉴定出致病性大肠杆菌18株,并确定了血清型,分别为O1、O2、O5、O9、O20、O24、O73、O78,其中O78、O2、O9、O24共占定型菌株的77.8%,为吉林城区的优势血清型,并进行了免疫原性测定。以确定的O78、O2、O9、O24四种优势血清型大肠杆菌为制作疫苗菌株,通过生产种子制备、纯粹检验、活菌计数、灭活及灭活检验、内毒素检测、油相制备、水相制备、乳化制苗等环节制成了现地区多价油佐剂疫苗。经过对疫苗的物理性状检验、无菌检验、安全性检验、效力试验、免疫产生期试验、持续期试验、保存期试验、最小免疫剂量试验、田间免疫试验评价,证明该疫苗安全性高、稳定性好,免疫期可达6个月以上,符合国家生物制品质量标准,确定最小免疫剂量为雏鸡0.25ml/只,成鸡0.5ml/只。适于在吉林城区推广应用。
张安国,沈华,马文芝,宋桂敏,刘田生[9]（1998）在《鸡大肠埃希氏菌多价油乳剂灭活苗的研制》文中研究指明鸡大肠埃希氏菌多价油乳剂灭活苗，是用从天津市各区（县）主要养鸡场和养鸡户鸡群中分离到的５个优势血清型（Ｏ１１１，Ｏ８９，Ｏ７８，Ｏ８６，Ｏ３０）菌株的各自培养物，经甲醛灭活后制成的油乳剂苗，每１ｍＬ含菌量为１００亿，每只鸡颈部皮下或肌肉注射０．５ｍＬ，１５ｄ产生较强免疫力，对同型菌株的保护率为９１．６７％，免疫期可持续６个月以上，安全性和免疫原性良好。
王广伟[10]（2010）在《枣庄地区鸡大肠杆菌病的防治研究》文中指出随着养鸡业的发展,大肠杆菌病对枣庄地区养鸡业的危害日趋严重,造成了巨大经济损失。由于该病的普遍存在,加上大肠杆菌血清型复杂,疫苗免疫预防达不到理想效果,临床上表现为滥用药物,这不仅增强了细菌的耐药性,而且易形成药物残留,危害人类健康。本文就枣庄地区鸡大肠杆菌病综合防治进行了研究,探明了其发病原因、发病规律、血清型分布、耐药情况,并通过自家疫苗和复方制剂的防治试验,制定出了较为科学合理的预防和治疗措施,取得了理想的结果。本论文的试验分为三部分:1、流行病学调查采用兽医流行病学调查方法,对枣庄地区鸡大肠杆菌病进行了较系统调查。结果表明,枣庄地区大肠杆菌病的发病原因复杂,发病率为31.6%,死忘率为14.43%,占本地区鸡场全部鸡病的42%以上。不同日龄的鸡均可发病,以15-35日龄为高发日龄段,占大肠杆菌病总发病率的50%-60%,其次是35-40日龄和7-15日龄段,7日龄以下和40日龄以上鸡发病相对较少,蛋鸡在开产前后或产蛋高峰期前后发病最多,育雏阶段发病较少或基本不发病。大肠杆菌病一年四季均可发生,但以寒冷冬季（12月份至第二年的1月份）和高温多雨潮湿季节（7-8月份）及气温多变季节（4-5月份）发病为主,占大肠杆菌发病总数的84%左右。2、病原分离鉴定与药敏试验采用常规细菌分离、鉴定方法,从枣庄市五区一市鸡场采集的27份自然发病鸡大肠杆菌病料中,分离出致病性大肠杆菌22株,分离率为81.49%。鉴定出不同血清型20株(其中O78型9株、O35型4株、O88型2株、O2型1株、O18型1株、O5型1株、O15型1株、O111型1株),共8个血清型,以O78、O35、O88三个血清型为主,占定型菌株的75%,其中O78血清型占定型菌株的45%,为优势血清型。细菌药敏试验结果显示,分离菌株呈现出不同程度的耐药性,其中对阿米卡星、头孢拉啶、头孢噻肟高敏株均占86.36%,对头孢唑啉高敏株占81.82%,对氟苯尼考高敏株占77.27%。但枣庄市辖区内大肠杆菌耐药性和敏感株存在差异。3、枣庄地区鸡大肠杆菌病防治研究从本地区分离的8个血清型大肠杆菌中选择3个主要致病血清型(O78、O（35）、O88)菌株制成三价油乳剂灭活疫苗,经田间免疫试验保护率达到了98%。选用阿米卡星与利巴韦林、地塞米松、VC配成复方制剂,通过对攻毒鸡进行治疗试验,保护率为97.5%,较单方阿米卡星（保护率为90.0%）更有效,且复方制剂采用注射方法临床效果最佳。本研究结果为有效防治鸡大肠杆菌病提供了科学依据和技术支持。
二、鸡大肠杆菌多价油乳剂灭活苗的研制（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、鸡大肠杆菌多价油乳剂灭活苗的研制（论文提纲范文）
（1）豫南地区鸡大肠杆菌病病原学调查与防控研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 鸡大肠杆菌病研究进展 |
| 1 研究背景 |
| 2 国内外研究进展 |
| 2.1 鸡大肠杆菌病病原学 |
| 2.2 大肠杆菌耐药性 |
| 2.3 中药抑菌作用及机制 |
| 2.4 鸡大肠杆菌疫苗 |
| 2.5 鸡大肠杆菌病防治 |
| 3 研究内容 |
| 3.1 豫南地区鸡大肠杆菌发病状况分析 |
| 3.2 分离菌株药物敏感性测定 |
| 3.3 中药活性成分联合抗菌药物增效作用研究 |
| 3.4 鸡大肠杆菌分离菌株致病性和免疫原性分析 |
| 3.5 鸡大肠杆菌氢氧化铝多价灭活苗研究 |
| 第二章 豫南地区鸡致病性大肠杆菌分离与鉴定 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 细菌分离 |
| 2.2 分离培养 |
| 2.3 生化鉴定 |
| 2.4 PCR鉴定 |
| 2.5 血清型鉴定 |
| 2.6 致病性试验 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 鸡致病性大肠杆菌对常用抗菌药物耐药性分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 细菌的最佳生长时期 |
| 2.2 β-内酰胺类药物体外抑菌活性 |
| 2.3 氨基糖苷类药物体外抑菌活性 |
| 2.4 酚胺醇类药物体外抑菌活性 |
| 2.5 喹诺酮类药物体外抑菌活性 |
| 2.6 其他药物体外抑菌活性 |
| 2.7 鸡大肠杆菌耐药谱分析 |
| 2.8 大肠杆菌中I型整合酶基因扩增 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 中药活性成分与氨基糖苷类药物体外联合抗菌作用 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 穿心莲内酯联合抗菌药物体外联合抑菌活性 |
| 2.2 黄芩苷联合抗菌药物体外联合抑菌活性 |
| 2.3 小檗碱联合抗菌药物体外联合抑菌活性 |
| 2.4 蒲公英提取物联合抗菌药物体外联合抑菌活性 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第五章 鸡大肠杆菌多价灭活苗优势菌株筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 毒力试验 |
| 2.2 免疫原性试验 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第六章 鸡大肠杆菌多价灭活苗制备与评价 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 无菌检验 |
| 2.2 安全检验 |
| 2.3 效力检验 |
| 2.4 免疫持续期试验 |
| 2.5 免疫反应 |
| 2.6 免疫效果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读博士学位期间研究成果 |
（2）鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗佐剂的筛选及免疫持续期的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一篇 文献综述 |
| 综述一禽致病性大肠杆菌的研究进展 |
| 1 病原学 |
| 2 毒力因子 |
| 3 流行病学 |
| 4 临床症状及病理变化 |
| 5 防治 |
| 综述二 禽致病性大肠杆菌疫苗的研究进展 |
| 1 灭活疫苗 |
| 2 亚单位疫苗 |
| 3 弱毒疫苗 |
| 4 小结 |
| 第二篇 实验研究 |
| 第一章 鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗佐剂的筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二章 鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗的免疫持续期 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（3）禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与O1、O2、O78菌株lpxL、lpxM基因缺失灭活疫苗的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 综述一 禽致病性大肠杆菌的研究进展 |
| 1 病原学 |
| 2 流行病学 |
| 3 禽致病性大肠杆菌毒力因子的研究 |
| 4 发病机理 |
| 5 临床症状及病理变化 |
| 6 防治 |
| 综述二 鸡大肠杆菌疫苗的研究进展 |
| 1 灭活疫苗 |
| 2 亚单位疫苗 |
| 3 弱毒菌苗 |
| 参考文献 |
| 第二章 禽致病性大肠杆菌的分离鉴定、抗药性及致病性研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 病料来源 |
| 1.2 培养基及其配制方法 |
| 1.3 主要仪器和设备 |
| 1.4 试剂 |
| 1.5 实验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 细菌的分离培养 |
| 2.2 细菌的纯化与保存 |
| 2.3 细菌的实验室鉴定 |
| 2.4 分离株O血清型的鉴定 |
| 2.5 分离株毒力基因的检测 |
| 2.6 分离株致病性试验 |
| 2.7 药敏试验 |
| 3 结果 |
| 3.1 细菌的分离培养 |
| 3.2 细菌的形态学观察 |
| 3.3 生化试验结果 |
| 3.4 分离株O血清型鉴定 |
| 3.5 分离株毒力基因的PCR检测结果 |
| 3.6 分离株的致病性试验 |
| 3.7 分离株药物敏感性试验结果 |
| 3.8 大肠杆菌的多重耐药性 |
| 4 小结与讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 大肠杆菌多价灭活疫苗的初步研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 制苗菌株 |
| 1.2 常用培养基及其配制方法 |
| 1.3 主要仪器和设备 |
| 1.4 主要试剂 |
| 1.5 实验动物 |
| 1.6 商品疫苗 |
| 2 方法 |
| 2.1 灭活疫苗抗原的制备 |
| 2.2 油佐剂灭活苗的制备 |
| 2.3 疫苗质量检查 |
| 2.4 疫苗的接种与攻毒保护试验 |
| 2.5 间接ELISA方法检测血清中特异性抗体水平 |
| 2.6 病理切片的制备 |
| 3 结果 |
| 3.1 突变株与野生株高剂量疫苗对免疫鸡的影响 |
| 3.2 Montanide TSA 71VG佐剂疫苗两次免疫的保护效果 |
| 3.3 两种不同佐剂突变株疫苗两次免疫的免疫效果比较 |
| 3.4 突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗与商品疫苗的免疫比较 |
| 3.5 病理切片 |
| 4 小结与讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
（4）鸡致病性大肠杆菌分离鉴定及多价油佐剂灭活疫苗的研制（论文提纲范文）
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 综述一 鸡大肠杆菌病的研究进展 |
| 1 病原学 |
| 1.1 形态及染色特征 |
| 1.2 培养特性 |
| 1.3 生化反应 |
| 1.4 抵抗力 |
| 1.5 抗原特性 |
| 1.6 血清型 |
| 2 流行病学 |
| 3 发病机理 |
| 4 临床症状和病理变化 |
| 5 诊断 |
| 6 防制 |
| 综述二 鸡大肠杆菌疫苗的研究进展 |
| 1 灭活苗 |
| 2 亚单位苗 |
| 3 弱毒菌苗 |
| 第二篇 研究内容 |
| 实验一 鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 小结与讨论 |
| 实验二 鸡致病性大肠杆菌多价油佐剂灭活疫苗的研制 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 小结与讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 致谢 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 英文简历 |
（5）鸡大肠杆菌多价复合佐剂灭活苗的研制（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 致病力试验 |
| 1.2.2 攻毒菌液制备 |
| 1.2.3 菌体抗原制备 |
| 1.2.4 菌液制备 |
| 1.2.4. 1 菌种增殖 |
| 1.2.4. 2 细菌计数 |
| 1.2.4. 3 菌体破碎 |
| 1.2.4. 4 细菌灭活 |
| 1.2.5 灭活苗的制备 |
| 1.2.5. 1 油相制备 |
| 1.2.5. 3 制苗 |
| 1.2.6 灭活苗的物理性状检验 |
| 1.2.6. 1 眼观检验 |
| 1.2.6. 2 黏度检验 |
| 1.2.6. 3 乳化情况检验 |
| 1.2.7 试验组灭活苗安全试验 |
| 1.2.8 试验组灭活苗免疫剂量试验 |
| 1.2.9 试验组灭活苗免疫期及比较试验 |
| 1.2.1 0 攻毒试验 |
| 1.2.1 1 试验组灭活苗保存期试验 |
| 1.2.1 2 平板凝集试验 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 分离菌株的致病性试验 |
| 2.2 灭活苗物理性状检验 |
| 2.3 灭活苗安全检验 |
| 2.4 试验组灭活苗免疫剂量试验 |
| 2.5 试验组灭活苗免疫期及效果比较试验 |
| 2.6 攻毒结果 |
| 2.7 试验组灭活苗保存期试验 |
| 2.8 扩大试验 |
| 3 小结与讨论 |
（6）鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活苗安全性、最适抗原含量、免疫持续期及交叉免疫保护研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 综述一 禽致病性大肠杆菌的研究进展 |
| 1 病原学 |
| 2 流行病学 |
| 3 临床症状和病理变化 |
| 4 防治 |
| 综述二 禽致病性大肠杆菌疫苗研究进展 |
| 1 弱毒疫苗 |
| 2 灭活疫苗 |
| 3 亚单位疫苗 |
| 4 菌影疫苗 |
| 参考文献 |
| 第一章 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗的免疫安全性和最适抗原含量研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 疫苗菌株 |
| 1.2 检验菌株 |
| 1.3 试验动物 |
| 1.4 培养基的配方和配制 |
| 1.5 主要仪器和设备 |
| 1.6 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 灭活疫苗抗原制备 |
| 2.2 疫苗的制备 |
| 2.3 成品疫苗疫苗质量检查 |
| 2.4 鸡大肠杆菌病亲本株和脂多糖缺失多价灭活疫苗的安全性试验 |
| 2.5 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗最适抗原含量免疫保护试验 |
| 2.6 间接血凝试验测定血清抗体水平 |
| 2.7 病理切片的制备 |
| 3 结果 |
| 3.1 鸡大肠杆菌病亲本株和脂多糖缺失多价灭活疫苗的安全性比较 |
| 3.2 鸡致病性大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗最适抗原含量确定 |
| 4 讨论 |
| 第二章 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫持续期、疫苗候选株与流行株交叉免疫保护研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 疫苗 |
| 1.2 检验菌株 |
| 1.3 试验动物 |
| 1.4 主要仪器和设备 |
| 1.5 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫持续期试验 |
| 2.2 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗交叉保护试验 |
| 3 结果 |
| 3.1 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫持续期 |
| 3.2 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫保护 |
| 3.3 病理切片 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
（7）禽大肠杆菌病疫苗（论文提纲范文）
| 1 灭活菌苗 |
| 1.1 灭活蜂胶苗 |
| 1.2 灭活油乳剂苗 |
| 1.3 灭活铝胶苗 |
| 1.4 灭活菌苗的免疫途径 |
| 2 亚单位疫苗 |
| 2.1 菌毛亚单位疫苗 |
| 2.2 荚膜亚单位疫苗 |
| 3 弱毒菌苗 |
| 4 展望 |
（8）吉林城区鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定及灭活疫苗研制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一部分 文献综述 |
| 引言 |
| 第一章 鸡大肠杆菌病研究进展 |
| 1.1 病原学 |
| 1.1.1 形态及结构 |
| 1.1.2 培养特性 |
| 1.1.3 抵抗力 |
| 1.1.4 生化反应 |
| 1.1.5 抗原结构 |
| 1.1.6 血清学特性 |
| 1.1.7 血凝性和盐凝性 |
| 1.2 流行病学 |
| 1.2.1 流行性 |
| 1.2.2 易感性 |
| 1.2.3 传染源 |
| 1.2.4 传染途径 |
| 1.3 发病机制 |
| 1.4 临床症状和病理变化 |
| 1.4.1 肠炎型 |
| 1.4.2 卵黄性腹膜炎和输卵管炎 |
| 1.4.3 神经型（脑炎型） |
| 1.4.4 急性败血型 |
| 1.4.5 眼球炎型 |
| 1.4.6 气囊炎型 |
| 1.4.7 大肠杆菌性肉芽肿 |
| 1.4.8 关节炎及滑膜炎型 |
| 1.4.9 心包炎 |
| 1.4.10 肿头综合症 |
| 1.4.11 胚胎与幼雏早期死亡型 |
| 1.5 诊断 |
| 1.5.1 病原学诊断 |
| 1.5.2 血清学诊断 |
| 1.5.3 分子生物学方法 |
| 1.6 防制 |
| 1.6.1 一般性预防措施 |
| 1.6.2 药物防治 |
| 1.6.3 使用微生态制剂 |
| 1.6.4 疫苗免疫 |
| 第二章 鸡大肠杆菌疫苗的研究进展 |
| 2.1 灭活苗 |
| 2.2 亚单位苗 |
| 2.3 弱毒菌苗 |
| 第二部分 研究内容 |
| 第一章 吉林城区鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 材料 |
| 1.1.2 方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 病原菌分离培养 |
| 1.2.2 形态学观察 |
| 1.2.3 生化鉴定结果 |
| 1.2.4 致病性试验结果 |
| 1.2.5 血清型鉴定结果 |
| 1.2.6 优势血清型菌株的免疫原性测定结果 |
| 1.3 小结与讨论 |
| 1.3.1 关于大肠杆菌的分离鉴定 |
| 1.3.2 关于致病性试验 |
| 1.3.3 关于血清型鉴定及优势血清型确定 |
| 1.3.4 关于优势血清型菌株的免疫原性测定 |
| 第二章 鸡大肠杆菌多价油佐剂灭活疫苗的研制 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 制苗用菌液的检验结果 |
| 2.2.2 疫苗检验结果 |
| 2.3 小结与讨论 |
| 2.3.1 现地株大肠杆菌灭活苗具有较好的保护效果 |
| 2.3.2 关于油乳剂灭活疫苗的制备 |
| 2.3.3 关于大肠杆菌内毒素问题 |
| 2.3.4 关于疫苗安全性试验 |
| 2.3.5 关于疫苗免疫效力和免疫持续期 |
| 2.3.6 关于大肠杆菌病与其他疾病混合发生问题 |
| 第三部分 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（10）枣庄地区鸡大肠杆菌病的防治研究（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 病原学 |
| 1.1.1 形态特征 |
| 1.1.2 抵抗力 |
| 1.1.3 分布 |
| 1.1.4 培养特性 |
| 1.1.5 生化特性 |
| 1.1.6 抗原及血清型 |
| 1.1.7 致病性 |
| 1.2 致病机理 |
| 1.3 流行病学 |
| 1.3.1 发病原因 |
| 1.3.2 发病日龄 |
| 1.3.3 发病率和死亡率 |
| 1.3.4 发病季节 |
| 1.3.5 传染途径 |
| 1.3.6 与其他疾病关系 |
| 1.4 临床症状 |
| 1.5 临诊分型与病变 |
| 1.6 防治现状 |
| 1.6.1 一般防治 |
| 1.6.2 疫苗预防 |
| 1.6.3 微生态制剂防治 |
| 1.6.4 噬菌体防治 |
| 1.6.5 免疫球蛋白疗法 |
| 1.6.6 药物防治 |
| 1.7 本研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 流行病学调查材料 |
| 2.1.2 分离鉴定与药敏试验材料 |
| 2.1.3 防治研究材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 流行病学调查方法 |
| 2.2.2 分离鉴定与药敏试验方法 |
| 2.2.3 防治研究方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 流行病学调查结果 |
| 3.1.1 枣庄地区养鸡业发展及鸡病发生现状调查结果 |
| 3.1.2 枣庄地区鸡大肠杆菌病流行特点 |
| 3.1.3 主要临床症状 |
| 3.1.4 典型病变 |
| 3.2 分离鉴定与药敏试验结果 |
| 3.2.1 细菌分离 |
| 3.2.2 细菌分离培养及纯化培养 |
| 3.2.3 革兰氏染色镜检 |
| 3.2.4 生化试验 |
| 3.2.5 动物致病性试验 |
| 3.2.6 血清型鉴定 |
| 3.2.7 药敏试验 |
| 3.3 防治研究结果 |
| 3.3.1 疫苗预防试验 |
| 3.3.2 药物治疗试验 |
| 4 讨论 |
| 4.1 流行病学调查讨论 |
| 4.2 分离鉴定与药敏试验讨论 |
| 4.3 防治研究讨论 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 7 致谢 |
四、鸡大肠杆菌多价油乳剂灭活苗的研制（论文参考文献）
- [1]豫南地区鸡大肠杆菌病病原学调查与防控研究[D]. 黄立. 南京农业大学, 2017(07)
- [2]鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗佐剂的筛选及免疫持续期的初步研究[D]. 邵启文. 扬州大学, 2019(02)
- [3]禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与O1、O2、O78菌株lpxL、lpxM基因缺失灭活疫苗的初步研究[D]. 张翠翠. 扬州大学, 2016(02)
- [4]鸡致病性大肠杆菌分离鉴定及多价油佐剂灭活疫苗的研制[D]. 于金玲. 吉林大学, 2005(04)
- [5]鸡大肠杆菌多价复合佐剂灭活苗的研制[J]. 薛俊龙,张李俊,王采先,詹丽娥,田林君,李红丽,张国权. 山西农业科学, 2009(11)
- [6]鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活苗安全性、最适抗原含量、免疫持续期及交叉免疫保护研究[D]. 潘廷云. 扬州大学, 2018(01)
- [7]禽大肠杆菌病疫苗[J]. 杨发龙. 西南民族学院学报(自然科学版), 2000(04)
- [8]吉林城区鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定及灭活疫苗研制[D]. 李沐森. 中国农业科学院, 2007(10)
- [9]鸡大肠埃希氏菌多价油乳剂灭活苗的研制[J]. 张安国,沈华,马文芝,宋桂敏,刘田生. 中国兽医科技, 1998(07)
- [10]枣庄地区鸡大肠杆菌病的防治研究[D]. 王广伟. 山东农业大学, 2010(05)