一、猕猴寄生猪囊尾蚴的研究(论文文献综述)
陈贝妮[1](2013)在《猪囊尾蚴不同生长阶段半胱氨酸蛋白酶表达活性研究》文中研究表明猪囊尾蚴是猪带绦虫的幼虫,是重要的人畜共患寄生虫。人类由于误食猪囊尾蚴或痘猪肉,导致囊尾蚴在人体内繁殖,引起恶心、呕吐等不适的症状。猪囊尾蚴病潜伏期长,广泛存在于世界各个角落,发病率较高,给人类带来健康隐患的同时对畜牧业的发展也造成很大影响。寻找猪囊尾蚴发育过程中的关键酶-半胱氨酸蛋白酶,对半胱氨酸蛋白酶在猪体内不同时期的表达情况进行研究,为阐明猪囊尾蚴的代谢规律奠定理论基础。本研究的基本内容、成果如下:本实验建立了猪囊尾蚴实验动物模型,实验前,用醋酸地塞米松免疫抑制实验小鼠,通过口服激活、未激活囊尾蚴和尾静脉注射激活的囊尾蚴三种方式感染昆明小鼠、BALB/c小鼠、SD大鼠、豚鼠、金黄地鼠、沙鼠,对各种鼠体内的绦虫的感染、发育和生长部位等特性进行研究。在感染45天的3只金黄地鼠体内检出可见虫体,虫体多数吸附在小肠上。结果成功的构建了猪带绦虫金黄地鼠实验动物模型,从本质上解决实验材料的问题,同时为猪带绦虫病的研究打下了良好的基础。通过猪体内繁殖猪囊尾蚴的方法,分别取感染了40天、60天、90天的猪囊尾蚴,Trizol法分别提取三个不同时期猪囊尾蚴总RNA,用Primer Premier5.0软件设计引物,RT-PCR扩增猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶基因,产物纯化后与pMD18-T载体的连接转化,质粒测序,利用重组质粒制作荧光定量PCR标准曲线,进行荧光定量PCR反应。猪在感染猪带绦虫孕节片40d,取出的囊尾蚴中已经有半胱氨酸蛋白酶产生,随着感染时间的增加,猪囊尾蚴CP表达量也有所增加,在感染60d时,猪囊尾蚴基本成熟,到了感染90d时,半胱氨酸蛋白酶的表达量趋于平稳状态。本实验对猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶不同时期表达量进行研究,这仅仅是猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶研究的开始,需要后续大量的研究才能揭示囊尾蚴关键酶-半胱氨酸蛋白酶在寄生虫感染过程中的变化规律,为进一步阐明囊尾蚴致病机理奠定基础。
黄海滨,盛晓枫,李芬,刘毅[2](2011)在《犬泡状带绦虫潜在前期研究与PCR鉴定》文中研究说明为查明猪细颈囊尾蚴在犬体内发育为成虫后节片的最早排出时间(潜在前期),将新鲜的猪细颈囊尾蚴经口感染6只无绦虫犬后,采用反复水洗沉淀法检测感染犬粪中排出的第1个绦虫节片,并用特异PCR方法鉴定其种属。结果显示,6只感染犬的潜在前期分别为60、63、65、69、72、73 d。同时,特异性PCR结果显示其序列与Genbank收录的泡状带绦虫序列的相似性为99%,确认犬排出的节片为泡状带绦虫。本研究为建立泡状带绦虫在宿主体内的发育模型提供了一定的基础资料。
许琳,李树荣,张红花,段纲,杨林富,张琼芬[3](2005)在《槟榔对猪细颈囊尾蚴的离体杀灭试验》文中认为我们采用槟榔种子提取液对猪细颈囊尾蚴虫体进行离体杀灭试验,结果表明在高浓度下槟榔的种子提取液对猪细颈囊尾蚴虫体有一定杀灭作用:1.18%~2.16%的槟榔液对猪细颈囊尾蚴有一定的灭活作用;3.71%的槟榔液对猪细颈囊尾蚴有一定的麻痹作用。
武梅[4](2002)在《成华猪白细胞介素—4基因克隆及表达效应研究》文中进行了进一步梳理增强动物抗病防御和免疫应答能力,提高疫苗保护率是当前防治传染性疾病最可靠的简便途径。鉴于传统的药物治疗和常规疫苗接种已不能保障现代畜牧业的健康高效发展,动物免疫抑制和疫苗免疫应答及保护水平下降已严重制约对传染性疾病的防治。因此,研制和应用新型高效动物免疫增强剂对防治动物的传染性疾病具有十分重要的现实意义。近年来,随着分子生物学和免疫学的进展,表明细胞因子基因免疫增强剂不仅安全,而且可调节体液免疫和细胞免疫应答,适于多种抗原疫苗,具有广阔的前景。细胞因子DNA已被初步证实能够显着增强病毒和细菌以及寄生虫抗原基因的免疫应答。细胞因子作为疫苗的高效免疫增强剂已成为免疫佐剂研究的新方向。 鉴于白细胞介素-4是动物免疫应答调节中十分重要的细胞因子,国内外对猪淋巴细胞白细胞介素-4基因的研究甚少,还未见到对其在体内外转基因表达及其对动物免疫系统和免疫应答反应的深入研究;尤其是国内外还没有猪白细胞介素-4真核表达质粒作为分子免疫佐剂与其它分子免疫增强剂协同作用对猪常规疫苗免疫应答水平影响的研究报道。而白细胞介素-4在猪的免疫防御和免疫应答调节中发挥着非常重要的作用,因此,我们进行了猪白细胞介素-4基因的克隆及其在体内外转基因表达、对免疫系统和对猪瘟、猪肺疫和猪丹毒三联疫苗以及猪副伤寒疫苗的免疫应答的作用及机理进行了较系统的研究。 首先,我们将猪外周血淋巴细胞在Con A的刺激下培养48h后,应用RT-PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素-4基因,首次克隆报导了成华猪淋巴细胞白细胞介素-4基因(PIL-4),并在GenBank数据库中登记(登记号:AF493991)。序列分析表明PIL-4的cDNA长度为413bp,开放阅读框为402bp,由134个氨基酸残基构成,分子量15.0KDa,等电点8.24。将得到的序列在CenBank和EMBL数据库中进行了同源比较,结果表明它与来源于长白猪肠粘膜固有层淋巴细胞的白细胞介素-4有99%同源,与来源于杂交猪T细胞的白介素-4有96%同源,说明猪种及组织细胞来源的不同可能使基因有一定的差 成华槽自匆血介刁卜4吞旧义险及 纪 异。证明本实验克隆到了猪白细胞介素一的全基因。 第二,将克隆到的成华猪淋巴细胞白细胞介素叶基因亚克隆到真核表达 型载体 VR 020上,通过菌落 PCR的方法在转化子中筛选阳性克隆,用 B3m H I酶切初步鉴定重组子,用 BgllP PmaCI双酶切确定基因插入相位正确的 重组子。得到的重组真核表达质粒转染C朋7细胞株,RTqCR检测PIL-4 的转录表达:用猪淋巴母细胞增殖实验检测*几4在真核细胞中表达产物对 猪淋巴细胞的刺激活性;用小鼠脾淋巴母细胞增殖实验检测PIL4真核表达 产物对小鼠淋巴细胞的刺激活性;并通过吸附实验检测PIL-4在真核细胞中 表达产物与小鼠脾淋巴细胞上相应受体的吸附情况。结果表明:通过菌落 PCR和酶切分析,得到PIL*基因以正确插人方向的重组真核表达质粒,命 名为 VPIL-4:重组质粒转染 COS7细胞株后,RTPCR结果显示转染细胞总 RNA中含有PIL-4对应的InRNA:猪淋巴母细胞增殖实验证明VPIL4在转 染C。s7细胞株后,能够表达出有生物活性的猪PIL4蛋白质,对猪淋巴细胞 具有增殖作用;小鼠脾淋巴细胞母细胞增殖实验首次证实猪白细胞介素4能 够刺激小鼠脾淋巴细胞增殖,受体吸附检测表明P兀4在真核细胞中表达产 物能与小鼠脾淋巴细胞上的相应受体结合,为研究以小鼠作为实验动物探讨 PIL4的兔疫调节作用提供了可靠依据。这些结果表明已成功构建了能正确 表达PIL斗的真核表达质粒,其表达产物具有正常的生物学活性。 第三,探讨白细胞介素.4基因的真核质粒在动物体内转基因表达对动物 体液和细胞免疫的影响,增强白细胞介素-4基因真核质粒诱导动物体液和细 胞免疫应答的方法,是本项研究的重要目的之一。我们制备了阳离子脂质体 和纳米颗粒0LG);把VPL*质粒分别用脂质体和聚丙交酯乙交酯(PLG) 纳米颗粒包装,本实验还人工合成了80hp的兔疫刺激序列CpG短序,构建 了含有CpG基序的pUC18(pG质粒,与猪瘟猪肺疫猪丹毒三联茵和猪副伤 寒疫苗联合免疫小鼠,首次系统地研究了猪白细胞介素4基因的真核质粒在 不同免疫佐剂的协同作用下对小鼠细胞免疫和体液兔疫的影响情况;比较了 不同的免疫刺激分子影响小鼠对疫苗的体液和细胞免疫应答情况。实验结果 首次发现:在猪VPIL斗质粒作为免疫增强剂时,小鼠的总IgG和特异性抗 体水平比对照组显着升高;同时,兔疫细胞数量、淋巴细胞增殖活性和白细 胞介素.2的诱生活性明显增加;与阳离子脂质体及PLG纳米颗粒联合使用。 在减少质粒剂量的情况下,同样可以显着提高实验动物的IgG含量、免疫细 胞数量、淋巴细胞增殖活性及几-2诱生活性,
常正山,张永年,何显成,张永红,裘丽姝,方莹,朱显因,於永和,朱慧芬,陈平芳,林荣泉[5](1998)在《猕猴寄生猪囊尾蚴的研究》文中指出 猪囊尾蚴病目前仍是危害人体健康的重要寄生虫病。本实验探讨猕猴能否寄生猪囊尾蚴及其在猴体内的寄生数量、分布部位及临床表现,为临床诊治囊虫患者提供参考,为人畜囊虫免疫学、分子生物学的研究提供极宝贵的活体材料。分别给6只雄性猕猴人工定量(镜下计卵)接种猪带绦虫孕卵节片。生前用皮试酶标法检查,死后解剖,统计囊虫在不同解剖部位的寄生数目,并对部分猴用 MRI 对照检查脑部囊虫寄生部位与数目。人工感染猪带绦虫孕节的6只猕猴在相同的饲养管理条件下存活期有所不同(79~1299d).
二、猕猴寄生猪囊尾蚴的研究(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、猕猴寄生猪囊尾蚴的研究(论文提纲范文)
(1)猪囊尾蚴不同生长阶段半胱氨酸蛋白酶表达活性研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
目录 |
前言 |
第一篇 文献综述 |
第一章 猪囊尾蚴病总述 |
1.1 病原 |
1.2 流行病学 |
1.3 生活史 |
1.4 临床症状和病变 |
1.5 诊断和预防 |
第二章 动物模型的研究进展 |
2.1 猪带绦虫和猪囊尾蚴动物模型 |
2.2 其他动物模型 |
第三章 半胱氨酸蛋白酶概述 |
3.1 半胱氨酸蛋白酶 |
3.2 家族分类 |
3.3 CP生物学特性 |
3.4 CP在寄生虫领域的应用 |
第四章 实时荧光定量PCR技术 |
4.1 荧光定量PCR技术原理 |
4.2 影响荧光定量PCR反应的因素 |
4.3 研究目的和意义 |
第二篇 研究内容 |
第一章 猪带绦虫实验动物模型的建立 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
1.3 结果 |
1.4 讨论 |
1.5 小结 |
第二章 荧光定量PCR方法检测不同时期猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶表达变化 |
2.1 材料 |
2.2 方法 |
2.3 结果 |
2.4 讨论 |
2.5 小结 |
结论 |
参考文献 |
作者简介 |
致谢 |
(2)犬泡状带绦虫潜在前期研究与PCR鉴定(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 试验动物 |
1.1.2 感染样品 |
1.1.3 PCR样品 |
1.1.4 PCR试剂 |
1.2 方法 |
1.2.1 试验犬的人工感染 |
1.2.2 试验犬的临床观察 |
1.2.3 节片中的虫卵计数 |
1.2.4 成虫的种属鉴定 |
1.2.4.1 DNA的提取 |
1.2.4.2 特异PCR扩增 |
2 结果 |
2.1 犬泡状带绦虫的潜在前期 |
2.2 犬排出泡状带绦虫的节片计数 |
2.3 节片中的虫卵数 |
2.4 临床观察结果 |
2.5 特异性扩增结果 |
2.6 测序结果 |
3 讨论 |
(3)槟榔对猪细颈囊尾蚴的离体杀灭试验(论文提纲范文)
1 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 试验药物 |
1.1.2 细颈囊尾蚴虫体: |
1.1.3 器材 |
1.2 方法 |
2 试验结果 |
3 讨论和小结 |
(4)成华猪白细胞介素—4基因克隆及表达效应研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
英文摘要 |
前言 |
第一章 成华猪白细胞介素-4基因的克隆 |
摘要 |
引言 |
材料和方法 |
结果 |
讨论 |
照片和图表 |
第二章 成华猪IL-4基因真核表达的研究 |
摘要 |
引言 |
材料和方法 |
结果 |
讨论 |
照片和图表 |
第三章 PIL-4调节小鼠免疫及其对疫苗免疫应答的研究 |
摘要 |
引言 |
材料和方法 |
结果 |
讨论 |
照片和图表 |
第四章 PIL-4调节猪疫苗免疫应答的研究 |
摘要 |
引言 |
材料和方法 |
结果 |
讨论 |
总结 |
参考文献 |
综述 白细胞介素-4研究进展 |
综述 增强免疫效应的免疫策略研究 |
参考文献 |
在读期间发表论文 |
四、猕猴寄生猪囊尾蚴的研究(论文参考文献)
- [1]猪囊尾蚴不同生长阶段半胱氨酸蛋白酶表达活性研究[D]. 陈贝妮. 吉林农业大学, 2013(S2)
- [2]犬泡状带绦虫潜在前期研究与PCR鉴定[J]. 黄海滨,盛晓枫,李芬,刘毅. 中国动物传染病学报, 2011(06)
- [3]槟榔对猪细颈囊尾蚴的离体杀灭试验[J]. 许琳,李树荣,张红花,段纲,杨林富,张琼芬. 中兽医学杂志, 2005(03)
- [4]成华猪白细胞介素—4基因克隆及表达效应研究[D]. 武梅. 四川大学, 2002(02)
- [5]猕猴寄生猪囊尾蚴的研究[J]. 常正山,张永年,何显成,张永红,裘丽姝,方莹,朱显因,於永和,朱慧芬,陈平芳,林荣泉. 中国农业大学学报, 1998(S2)