一、丹参对四氯化碳肝损害大鼠肝脏白细胞三烯的影响（论文文献综述）
吴雄健[1]（2018）在《黄芩苷通过上调miR-3595靶向ACSL4表达抑制大鼠肝纤维化的机制研究》文中提出目的:研究miRNA在黄芩苷调节HSC-T6细胞功能过程中的作用,筛选出可能与黄芩苷抗肝纤维化作用相关的miRNA分子及其靶基因,并阐明其作用机制,为黄芩苷应用于临床提供科学依据。方法:第一部分:1.显微镜下观察黄芩苷对HSC-T6细胞形态的影响;2.QPCR和western blot法检测黄芩苷对HSC-T6细胞α-SMA表达水平的影响;3.采用Transwell和CCK-8实验,检测黄芩苷对HSC-T6细胞迁移、侵袭和增殖能力的影响;4.通过流式细胞术检测黄芩苷对HSC-T6的细胞周期分布及凋亡水平的影响;5.利用miRNA芯片检测黄芩苷对HSC-T6细胞miRNA表达谱的影响。第二部分:1.QPCR法检测黄芩苷处理后HSC-T6细胞miR-3595的表达水平;2.合成miR-3595抑制剂并转染HSC-T6细胞,检测miR-3595对黄芩苷处理后HSC-T6细胞的迁移、侵袭和增殖能力,以及细胞周期分布、凋亡水平和促大鼠肝纤维化相关蛋白表达水平的影响;3.在线数据库Targetscan等预测miR-3595的靶基因为ACSL4,双荧光素酶报告实验验证miR-3595与ACSL4的直接靶向关系;4.构建ACSL4过表达质粒并转染HSC-T6细胞,检测ACSL4对黄芩苷处理后HSC-T6细胞的迁移、侵袭和增殖能力,以及细胞周期分布、凋亡水平和促大鼠肝纤维化相关蛋白表达水平的影响。第三部分:1.以DMN建立大鼠肝纤维化模型;2.Westem blot法检测黄芩苷对大鼠肝组织α-SMA、Desmin和ACSL4蛋白表达的影响;3.QPCR法检测黄芩苷对大鼠肝组织miR-3595和TGF-β1基因表达水平的影响;4.HE和Masson染色法检测黄芩苷对大鼠肝纤维化程度的影响;5.全自动生化分析仪或ELISA试剂盒法检测黄芩苷对大鼠血清生化学指标的影响;6.ELISA试剂盒法检测黄芩苷对大鼠肝组织MDA、Hyp、SOD和GSH-Px含量的影响。结果:第一部分:1.黄芩苷能影响HSC-T6细胞的形态;2.黄芩苷能抑制HSC-T6细胞α-SMA的表达,且呈浓度依赖性;3.黄芩苷能抑制HSC-T6细胞的迁移、侵袭和增殖能力,且呈浓度依赖性;4.黄芩苷能使HSC-T6细胞在G1期受到阻滞,诱导HSC-T6细胞的凋亡,且呈浓度依赖性;5.MiRNA芯片结果分析显示,黄芩苷上述作用机制可能与上调miR-3595的表达相关。第二部分:1.黄芩苷能显着上调HSC-T6细胞miR-3595的表达;2.MiR-3595表达下调,能逆转黄芩苷抑制HSC-T6细胞的迁移、侵袭和增殖能力,以及阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡和抑制促大鼠肝纤维化相关蛋白表达水平的作用;3.双荧光素酶实验结果显示miR-3595能直接靶向ACSL4 3’UTR区;4.ACSL4过表达,能逆转黄芩苷抑制HSC-T6细胞的迁移、侵袭和增殖能力,以及阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡和抑制促大鼠肝纤维化相关蛋白表达水平的作用。第三部分:1.黄芩苷能下调大鼠肝组织α-SMA、Desmin和ACSL4蛋白的表达水平;2.黄芩苷能上调大鼠肝组织miR-3595的表达,下调TGF-β1的基因表达;3.黄芩苷能减轻大鼠的肝纤维化程度;4.黄芩苷能改善肝纤维化大鼠的血清生化学指标（ALT、AST、TBIL、DBIL、ALB、GLB、HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C等）;5.黄芩苷能降低肝纤维化大鼠肝组织MDA和Hyp的含量,升高SOD和GSH-Px的含量。结论:黄芩苷能通过上调miR-3595靶向ACSL4表达抑制大鼠肝纤维化的发生与发展。
董建[2]（2018）在《水飞蓟素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的探讨》文中提出目的 探索不同浓度水飞蓟素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用及其是否与抑制NF-κB活化有关。方法 将40只成年的健康雄性SD大鼠进行数字编号,根据随机数字法规则,每10只设定为1个小组,共4组,分为模型组（IR组）、假手术组（S组）、高浓度水飞蓟素组（H组）、低浓度水飞蓟素组（L组）。L组、H组术前分别给予水飞蓟素100 mg/（kg·d）、200 mg/（kg·d）灌胃7 d,给予各组大鼠的腹腔内缓慢注射10%水合氯醛溶液（300 mg/kg）进行麻醉术,打开腹腔各层组织,分离双侧肾动静脉,切除右侧肾脏。S组直接关闭腹腔。IR、L及H组则用动脉夹阻断左侧肾血供40 min,移去动脉夹使肾脏恢复血供,持续时间为24 h。肾功能检测:主要是对血清的尿素氮及肌酐的浓度的观察,应用仪器AU-5800型号的生化分析仪。将肾组织分块分装储存冰箱,温度恒定为-80℃。组织切片检测方法:H-E染色观察肾小管损伤程度,免疫组化检测肾脏细胞质IL-6、TNF-α及细胞核NF-κBp65表达,胞核中的NF-κB及包浆中的IL-6、TNF-α使用酶联免疫吸附方法进行检测。结果 1各组大鼠肾功能变化:IR、L及H组血清中的尿素氮及肌酐的水平出现不同程度的增高,并且明显在S组之上（P<0.05）,L及H组血清中的尿素氮及肌酐的浓度比IR组低（P<0.05）,H组血清中的尿素氮及肌酐的浓度较L组低（P<0.05）。2肾脏组织病理变化:H-E染色:S组肾小球、肾小管细胞形态结构清晰可见,无见细胞肿胀、坏死等异常改变。IR组镜下可见肾组织皮髓质交界区较多的肾小管细胞明显肿胀、坏死,刷状缘脱落,部分阻塞了肾小管,较多的中性粒细胞在肾间质中被发现。L组的肾小管细胞有轻度的肿胀,肾小管的细胞内侧的刷状缘可见少量的脱落下来,没有看到明显的破裂的肾基膜,较少的中性粒细胞在肾间质中被发现。H组的肾小管细胞有轻度的肿胀,没有发现脱落的肾小管的细胞内侧的刷状缘,没有中性粒细胞在肾间质中被发现。3免疫组织化学染色:当肾脏缺血再灌注损伤后,肾小管细胞损伤明显,IL-6、TNF-α在细胞质中表达增加,阳性细胞表现为细胞质中呈现棕黄色着色,NF-κBp65由包浆转移进胞核内,出现棕黄色颜色染色的细胞核。S组肾小管细胞细胞质及细胞核未见明显着色,表明胞质IL-6、TNF-α未见明显表达,NF-κBp65未见明显核内转移。IR组肾小管的包浆IL-6、TNF-α及胞核NF-κBp65表达程度较S组明显增强,阳性表达的细胞区域相对大,包浆中及胞核内棕黄色的颜色着色相对更强。L及H组表达较IR降低,阳性表达的细胞总数相对减少,H组更低于较L组的表达,阳性表达的细胞总数更少,但仍高于S组。4 ELISA检测结果:IR、L和H组胞质IL-6、TNF-α及胞核NF-κB浓度都大于S组（P<0.05）,其中IR组胞质IL-6、TNF-α及胞核NF-κB浓度最高（P<0.05）,H组较L组IL-6、TNF-α及NF-κB浓度明显降低（P<0.05）。结论 1水飞蓟素可以减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤,其保护用作的机制是通过抑制NF-κB进入细胞核,进而减少炎症因子IL-6与TNF-α的表达。2高浓度水飞蓟素[200mg/（kg·d）]可以增强对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。
黄思斯[3]（2015）在《畲药山里黄根水提液抗CCl4肝损伤作用实验研究及有效部位筛选》文中进行了进一步梳理目的:研究山里黄根水提液对于小鼠CC14肝损伤细胞的作用,并筛选山里黄根水提液对CCl4体外诱导L-02肝损伤作用的有效部位。方法:通过检测小鼠CC14肝损伤血清中ALT和AST活性,和观察小鼠CC14肝损伤细胞病理形态学变化,研究其抗CC14肝损伤保护作用。选用L-02人正常肝细胞为受试细胞,使用CC14体外诱导L-02肝细胞损伤,进行山里黄根水提液四个不同极性萃取部位对CC14体外诱导L-02肝细胞损伤模型作用实验研究,采用MTT法测定细胞存活率,确定抗CCl4肝损伤保护作用有效部位。结果:与CCl4模型组比较,山里黄根水提液低、中、高剂量组都可降低血清ALT和AST活性,有统计学意义（P<0.05）。通过小鼠CC14肝损伤细胞病理形态学观察发现CCl4模型组的肝细胞明显病变并有坏死。而山里黄根水提液低、中、高剂量组肝细胞形态基本清晰,轻度肿胀,未见坏死灶。CC14选用5mmol/L的浓度进行细胞造模,与模型组比较,山里黄根水提液正丁醇萃取部位细胞存活率存在显着性差异（P<0.05）。结论:山里黄根水提液具有明显抗CCl4肝损伤的保护作用,其有效部位为正丁醇萃取部位。
王慧娟[4]（2013）在《红花黄色素在体内的稳定性及药动学研究》文中研究表明随着现代医学和科技的进步，中药得到人们越来越广泛的重视和应用。中药资源的合理开发和综合利用，取得了明显的经济效益和社会效益，为预防疾病和增进人们健康发挥了重要的作用。丹红制剂是由中药丹参素和红花黄色素组成的中药复方制剂，常用于活血化瘀、消肿止痛。目前丹红注射液[1]已广泛用于临床，但其成分复杂，安全性低，容易产生过敏反应等症状。所以开发和研究丹红口服制剂，能提高其用药稳定性、安全性。分散片是一种新型药物制剂，特别在临床应用上具有很大的开发利用价值。分散片具有剂量准确，稳定性好，携带方便，生产成本低，不良反应少等优点[2]。在实验室前期已对丹红分散片制剂处方筛选和工艺流程进行了优化，本课题拟从丹参和红花的水溶性提取物——丹参素和红花黄色素进行研究，确保制剂的质量得到控制。由于原料药的质量关系到制剂的质量，本课题对丹参素和红花黄色素原料药的质量进行了相关研究。考察了它们的性状，鉴别方法，并对水分含量、重金属含量、砷盐含量以及炽灼残渣进行了检查，制定了原料药中丹参素和羟基红花黄色素A的含量限度，为制剂的质量控制提供了保障。口服药物在胃肠道的稳定性，将会直接影响到药物在胃肠道吸收进入血液循环的有效性。本课题运用高效液相色谱法考察了红花黄色素在人工胃液和人工肠液中的稳定性。羟基红花黄色素A（HSYA）在不同PH环境下的稳定性有所不同，主要是由HSYA的酸性强度所决定的。HSYA含有羟基，呈弱酸性，因此在碱性环境中可能发生变化。结果显示，HSYA在人工胃液中相对稳定，说明可以通过增加其在胃液中的吸收来提高其生物利用度，在碱性偏高的肠液中破坏较大，需采用适当制剂的方法来避免药物在进入血液循环之前被降解。本实验采用高效液相色谱法测定了口服灌胃给药后，红花黄色素和丹红复方片剂中HSYA的含量。血药浓度-时间数据运用DAS2.1.1药动学软件处理，参数显示，红花黄色素和丹红复方片剂在大鼠体内的血药浓度符合二室开放模型；和红花黄色素相比，复方片剂药时曲线下面积（AUC）明显增加，达峰时间（Tmax）加快，峰浓度（Cmax）提高。结果表明：丹红复方片剂中丹参素能提高HSYA的吸收，这将有利于红花黄色素更好的发挥疗效。
吴倩妮,田宏亮,张丽菡,田金徽,熊海芮,刘雅莉,杨克虎[5]（2012）在《丹参对大鼠肝再生过程影响的Meta分析》文中指出目的:评价丹参对四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）造成肝损伤的大鼠的肝脏再生能力的影响。方法:计算机检索中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、中文科技期刊全文数据库以及中华医学会数字化期刊,外文数据库PubMed,EMBASE,SCI,纳入丹参治疗四氯化碳造成大鼠肝损伤的随机对照试验（RCT）,检索时间截止至2012年5月,用Rev-Man 5.1软件进行Meta分析。应用GRADEpro软件对理论指导等级进行分级。结果:共纳入7个RCTs,214只大鼠,Meta分析结果显示丹参组与对照组对四氯化碳造成肝损伤的大鼠后的丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、透明质酸、超氧化物歧化酶、肿瘤坏死因子-α等方面的影响的差异有统计学意义。应用GRADE系统进行推荐分级,由于研究有严重的局限性及证的间接性,故证据级别为低级别证据。结论:丹参对四氯化碳造成肝损伤后的大鼠的肝再生具有一定的促进作用,但证据级别较低,需谨慎使用。
陈文骞[6]（2012）在《三甲散治疗乙肝后肝纤维化的临床观察》文中指出肝纤维化在国际疾病分类（ICD-10）中可作为一种病名（K74.001）,但主要是一种组织病理学概念。肝纤维化指肝组织内细胞外基质（ECM）成分过度增生与异常沉积,导致肝脏结构或（和）功能异常的病理变化,结构上表现为肝窦毛细血管化与肝小叶内以及汇管区纤维化；功能上可以表现为肝功能减退、门静脉高压等。多种损伤因素长期慢性刺激肝脏,使肝窦内肝星状细胞的活化,胶原等ECM成分代谢失衡,生成大于降解,促使肝脏ECM沉积与组织结构重构。肝纤维化见于大多数不同病因的慢性肝脏疾病中,进一步发展,可形成肝硬化,严重影响患者健康与生命。前瞻性研究表明,慢性乙型肝炎发展为肝硬化的估计年发生率为2.1%；另一项对HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者进行平均9年（1-18.4年）的随访研究表明,进展为肝硬化的发生率为23%。因此抗肝纤维化是慢性肝病的重要治疗措施。一、文献研究本文综述了肝纤维化的病因,发病机制,诊断标准及临床特征,西医对于肝纤维化的治疗手段。同时综述了中医对肝纤维化的认识,阐述了其病因及其病机变化过程,全国各家对肝纤维化的辩证论治情况。又阐述了三甲散的历史源流,其基础的适应病机,以及运用三甲散治疗肝纤维化的理论依据。二、临床及实验研究1.研究目的：运用温病学中的方剂“三甲散”,治疗慢性乙肝肝纤维化,并评价其临床疗效,结合现代各项实验室指标,探讨慢乙肝后肝纤维化中医证型与各项指标的相关性及对其的影响,以其提高肝纤维化的治疗效果,根据中医证型判断患者预后提供依据。2.研究方法：台湾地区合作研究门诊就诊及医院住院肝炎后肝纤维化的病人32例,同时随机抽取健康人20例作为健康对照组。32例患者,诊断符合2000年9月第十次病毒性肝炎及肝病学术会议（西安）修订的《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准。将符合纳入标准的患者,根据《肝纤维化中西医结合诊疗指南》对肝纤维化的证型分类进行分组,分为肝胆湿热组,肝郁脾虚组,肝肾阴虚组。三组均予三甲散煎汤口服,并根据证型不同有所加味。此基础上给予拉米夫定100mg,每天一次,3个月为一疗程,观察2个疗程。各组于治疗前、治疗后12周、24周检测肝脏超声,血常规、肝肾功能、HA（透明质酸）、LN（层黏蛋白）、PⅢP （Ⅲ型前胶原）、APOA-Ⅰ（血清载脂蛋白A-I）, APOB（血清载脂蛋白B）等肝纤维化指标,评价治疗效果。3.研究结果：3.1入组情况本研究共收集符合诊断、纳入标准的慢性乙型肝炎肝纤维化患者32人,其中男性19人,女性13人。最小年龄20岁,最大年龄56岁,病程5到12年。健康对照组20人,其中男性10人,女性10人。三治疗组在年龄、性别、病程、HBV-DNA定量比较,差异无统计学意义P>0.05。3.2三组治疗前后HBV-DNA （log10）量比较三治疗组治疗前,HBV-DNA定量差异无统计学意义,具有可比性。治疗3个月、6个月后,三组HBV-DNA较低于治疗前,差异有统计学意义P<0.05。6个月后,三组组间比较,差异无统计学意义P>0.05。3.3三组治疗前后ALT、AST （U/L）量比较三治疗组治疗前,ALT量比较无明显差异,具有可比性。治疗至3个月、6个月后,三组ALT、AST与治疗前比较,明显下降,差异有统计学意义P<0.05。三组治疗前后,与健康对照组比较,ALT、AST明显升高,差异有统计学意义P<0.05。3.4三组治疗前后AST/ALT比值三组患者治疗前后AST／ALT比值比较,差异无统计学意义P>0.05。三组患者治疗前后,与健康对照组比较,差异有统计学意义P<0.05。3.5三组治疗前后肝纤维化指标变化比较三组患者治疗前HA、LN、PⅢP三个指标与健康对照组比较,明显升高,差异有统计学意义P<0.05。三治疗组经治疗6个月后,HA、LN、PⅢP三个指标与治疗前比较,均有下降,差异有统计学意义P<0.05。但与健康对照组比较,仍然偏高,差异有统计学意义P<0.05。治疗前LN、PⅢP均呈肝郁脾虚<肝胆湿热<肝肾阴虚的递增趋势,并两两比较,差异有统计学意义P<0.05。治疗6个月后,LN、PⅢP两项指标与治疗前一致呈按证型逐渐递增的趋势。两两比较,差异有统计学意义P<0.05。3.6三组治疗前后APOA-Ⅰ、APOB指标变化三组患者治疗前,APOA-Ⅰ（血清载脂蛋白A-I）, APOB（血清载脂蛋白B）明显低于健康对照组,差异有统计学意义P<0.05。除肝肾阴虚组,经过6个月治疗后APOB与治疗前比较,有上升趋势,但差异无统计学意义P>0.05；其余指标治疗后均较治疗前明显升高,差异有统计学意义P<0.05。3.7各项指标与中医证型间的关系ALT、AST数值、AST/ALT比值均较正常人增高,而且证型不同,升高的幅度和恢复的程度不一致。HA, LN值在肝郁脾虚型为最低,肝胆湿热型次之；在肝肾阴虚型为最高。血清载脂蛋白APOA-Ⅰ、APOB与HA等指标相类似,存在依次递减趋势。4.研究结论：4.1根据温病理论,本研究认为导致肝纤维化的病机为：素有内伤,复感疫毒,或疫病日久不解,气钝血滞而疫毒不得外泄,深入厥阴,络脉凝滞。4.2选用温病方“三甲散”能有效降低肝纤维化指标,提高血清载脂蛋白APOA-Ⅰ、APOB的合成率,有降低AST/ALT比值的趋势。说明三甲散治疗肝纤维化有积极的作用。4.3根据AST/ALT比值、肝纤维化指标的升高幅度和HA、LN、PⅢP等肝纤指标的降低幅度的变化。发现肝纤维化早、中期多以肝胆湿热、肝郁脾虚为主；肝纤维化中、后期则以肝肾阴虚为主,可考虑将上述指标作为肝硬化中医辨证分型诊断的客观指标之一。
高丽[7]（2012）在《HCV复制子用于抗丙肝中药的筛选及组方》文中研究说明丙型肝炎是全世界流行的传染病。据世界卫生组织（World HealthOrganization，WHO）报道，全球流行率约3%。我国流行率为3.2%，感染者约为4000万。丙型肝炎易于慢性化，病情隐匿性进展，至出现临床症状时，常已出现了肝纤维化、肝硬化甚至肝癌。丙型肝炎的治疗目的是清除病毒，目前干扰素联合利巴韦林是抗丙型肝炎病毒（hepatitis Cvirus,HCV）治疗的最佳方案，但其治愈率仅约50%，且副作用大，临床上约50-60%的丙型肝炎患者无法从中获益。新近上市和目前正在研究的多种蛋白酶抑制剂均需与干扰素联用，单独应用短期内即出现耐药，因而临床迫切需要探索新的治疗手段。现代医学发现一些中药具有抗病毒作用，但针对抗HCV中药筛选的报道极少，且前期研究多采用裸鼠接种实验，成本高，工作强度大，难以做到高通量筛选。本研究采用同时表达新霉素磷酸转移酶和海肾荧光素酶的HCV复制子细胞系sH7（H7-HCV-L7）为实验系统，利用血浆药理学的实验方法，筛选抗HCV中药。由于动物血浆超过一定浓度会对细胞产生毒性作用，所以我们在第一部分首先探讨了在细胞培养条件下动物血浆对细胞的影响，确定了最适血浆来源动物种属及血浆的最佳作用时间和添加浓度；在此基础上，第二部分对16种可能有较高抗HCV作用的中药进行筛选，组方并验证。第一部分细胞培养条件下动物血浆对细胞的影响目的：将H7-HCV-L7细胞接种于裸鼠皮下，制备裸鼠体内适应性细胞系mH7-HCV-L7，使其能承受较高浓度的小鼠血浆；选取适宜的动物血浆，确定血浆的最佳作用时间和添加浓度。方法：1制备裸鼠体内适应性细胞系mH7-HCV-L7并验证：将肿瘤细胞H7-HCV-L7接种于裸鼠皮下，形成肿瘤后荷瘤继续饲养2月；无菌条件下取瘤体，制备裸鼠体内适应性细胞系mH7-HCV-L7并培养；应用CCK-8法对不同浓度（10%、20%、30%、40%）小鼠血浆作用于H7-HCV-L7及mH7-HCV-L7细胞24h、48h、72h的细胞毒性进行比较；2清洁级KM小鼠、Wistar大鼠、新西兰兔血浆，分别以不同浓度（10%、20%、30%、40%）作用于H7-HCV-L7细胞不同时间（24h、48h、72h）后，应用CCK-8法对其细胞毒性进行分析，确定最适血浆来源动物种属及血浆的最佳作用时间和添加浓度。结果：1小鼠血浆作用于H7-HCV-L7及mH7-HCV-L7细胞的细胞毒性比较：1.1随着所添加小鼠血浆浓度的升高，作用时间的延长，H7-HCV-L7及mH7-HCV-L7细胞组的光密度（Optical Density,OD）值均降低，所表现的毒性均增加；1.210%的小鼠血浆作用于mH7-HCV-L7细胞24h及48h后的OD值略高于相应的作用于H7-HCV-L7细胞，其他浓度及时间点则无明显统计学差异；1.310%的小鼠血浆对mH7-HCV-L7细胞仍有较高的毒性（24h、48h、72h细胞存活率分别为75.30%、57.29%、21.12%）2小鼠、大鼠、兔血浆作用于H7-HCV-L7细胞的细胞毒性比较：2.1相应时间点相同浓度的动物血浆比较，均以小鼠血浆的OD值最低，兔血浆的最高，大鼠血浆的居中；2.2相应各组48h的OD值与24h的OD值比较，P＞0.05，统计学无明显差异；相应各组72h的与24h的比较，30%、40%兔血浆组、DMEM对照组，P＜0.05，差异有显着性；2.310%、20%、30%兔血浆组与DMEM对照组48h的OD值比较，P＞0.05，统计学无明显差异，既有血浆本身对细胞的毒性作用，又有其作为营养物质对细胞生长的促进作用；40%兔血浆组与DMEM对照组48h的OD值比较，P＜0.05，则主要表现为抑制H7-HCV-L7细胞生长的作用。结论：1裸鼠体内适应性细胞系mH7-HCV-L7仍然难以容忍较低浓度的小鼠血浆；2以兔血浆最适合H7-HCV-L7的生长，最佳作用时间为48h，考虑血浆中药物成分本身可能对细胞生长产生促进或抑制作用，故为留有余地，确定后续筛选抗HCV中药时兔血浆的添加浓度为20%。第二部分应用血浆药理学方法及HCV复制子筛选抗丙肝中药及组方目的：筛选出对HCV抑制率较高的中药，组方并验证。方法：1应用含有HCV复制子的H7-HCV-L7细胞系及中药血浆药理学实验方法，对16种可能有较高抗HCV作用的中药（黑蕊虎耳草、大血藤、五爪金龙、白雪花、云南美登木、栀子、滇丹参、苦参、鸡爪大黄、山豆根、苦味叶下珠、红腺忍冬、龙胆草、黄芩、肉桂、女贞子）进行筛选：1.1制备含药兔血浆及空白兔血浆；1.2应用CCK-8法及48孔板做H7-HCV-L7的标准曲线；1.3接种细胞于48孔板中，贴壁培养24小时；换液加20%含药兔血浆及20%空白兔血浆，持续作用48小时；1.4应用CCK-8法测定各孔光密度（Optical Density，OD）值，计算细胞存活率及各孔细胞数；1.5应用海肾荧光素酶发光试剂盒及Glomax20/20发光检测仪测定各孔荧光值，计算各孔单个细胞荧光值；1.6计算各中药抗HCV抑制率，从高到低进行排名比较2选取抑制率较高的中药组方并验证2.1根据细胞毒性、抑制率排名、各中药性味功效及临床常用治疗肝病中药方剂，选取中药组方如下：方一：大血藤12g、五爪金龙8g、云南美登木45g、黄芩6g方二：女贞子10g、五味子5g、黄芪20g、党参10g方三：大血藤12g、五爪金龙8g、云南美登木45g、黄芩6g、女贞子10g、五味子5g、黄芪20g、党参10g2.2测定各中药组方抗HCV抑制率并进行排名比较：同方法1。3进一步验证抑制率较高的中药及中药组方：3.1用Promaga公司的SV Total Isolation System，提取中药组方及方一中各中药血浆作用于H7-HCV-L748小时后细胞内的核糖核酸（Ribonucleicacid，RNA）；3.2荧光定量聚合酶链式反应（Ploymerase chain reaction,PCR）检测各组样品HCV RNA拷贝数（copies/mL）；3.3用核酸蛋白分析仪定量各样品中的总RNA浓度（μg/mL），计算平均每微克总RNA所含HCV RNA拷贝数；计算抑制率，进行排名比较；结果：1利用单个细胞荧光值所计算的抑制率中，20%含大血藤、五爪金龙、云南美登木、黄芩的兔血浆抑制率较高，分别为51.73%、43.46%、32.62%、23.68%，且无明显细胞毒性；中药组方中方三对HCV抑制率最高，方二最低，方一略低于方三。2利用每微克总RNA中HCV RNA拷贝数所计算的抑制率中，以单味中药抑制率高，排名仍为大血藤、五爪金龙、云南美登木、黄芩，而组方抑制率较低；组方间抑制率从高到低排名仍为方三、方一、方二。结论：应用血浆药理学实验方法及HCV复制子筛选抗丙肝中药并组方，验证方一及方三均具有抗HCV的作用，但因方一多为寒凉之品，不宜长期服用，以方三最适宜慢性丙肝的治疗。
侯聪敏[8]（2011）在《双黄连对犬肝细胞对乙酰氨基酚损伤的保护作用》文中提出双黄连由金银花、黄芩、连翘3味中药组成,具有清热解毒、辛凉解表等功效。药物进入动物机体后,要在酶的参与下进行分解、代谢。参与药物代谢的酶主要是细胞色素P450酶系,它主要存在于肝脏的微粒体中。目的:建立分离及培养犬原代肝细胞的方法,并通过体外实验探讨双黄连及各单味药物相互作用的分子机理以及其对肝损伤的保护作用,为临床合理用药提供理论依据。方法:通过胶原酶两步灌流法获取犬肝细胞,用含多种辅助因子的Williams’E培养基进行培养,每天观察肝细胞的生长情况,并进行图像采集。同时用对乙酰氨基酚（AP）来制备肝细胞损伤模型,收集不同时段细胞培养上清液,MTT法测定肝细胞的存活率,分光光度法测定细胞培养液中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、丙二醛（MDA）及乳酸脱氢酶（LDH）的含量,用不同浓度的双黄连及各单味药处理损伤的犬肝细胞24-48h,Westen-blot法检测犬肝细胞中CYP450的表达。结果:通过胶原酶两步灌流法,每只犬可获得肝细胞7.2×109个,用台盼蓝排除法检测到6.81×109个活细胞,成活率高达94.6%。培养的肝细胞形态完整、生长良好,可用于药物代谢的研究。16mM AP是致体外培养肝细胞损伤的最适浓度。不同浓度的双黄连处理损伤的犬肝细胞后,作用24h时CYP450的表达呈升高趋势,但在药物浓度达到25mM的时候CYP450的表达呈降低趋势;48h时CYP450的表达随双黄连浓度的增加而呈降低趋势,1mM、2mM与5mM组对CYP450的保护作用明显增强。由此可知,1-5mM的双黄连为最佳作用剂量。将不同浓度的金银花、黄芩、连翘分别作用于犬肝损伤细胞,结果发现,CYP450的表达不理想,不如双黄连作用后所表达的有规律。结论:双黄连能明显减轻AP所致犬急性肝细胞损伤,对肝损伤具有一定的保护作用。
冯健[9]（2011）在《齐墩果酸对大鼠血管平滑肌细胞中血红素氧合酶1表达的影响及其作用机制的研究》文中认为研究背景冠心病是当今全世界危害人们身体健康最常见的心脏病,位列我国心脏病住院率和死亡率之首。动脉粥样硬化是冠心病的主要病理生理变化,动脉粥样硬化的进展程度,特别是易损斑块的破裂是急性冠状动脉综合征（ACS）、冠心病猝死等急性冠心病事件的主要“导火线”。血管平滑肌细胞（VSMCs）是构成血管壁的主要细胞,其不正常地增殖、迁移及凋亡贯穿动脉粥样硬化的全过程。因此,如何有效地调节VSMCs的生理功能,已成为目前关心的热点问题。齐墩果酸（Oleanolic acid, OA）是从天然产物中提取出来的五环三萜类化合物,在我国,齐墩果酸主要用于急慢性肝炎的治疗。目前,国外研究表明:OA除对肝脏有保护作用外,在心血管系统也发挥着广泛的生物学效应,如保护心肌免于缺血再灌注损伤,调节血脂,抗动脉粥样硬化等作用。但是其作用的具体机制仍不甚清楚。血红素氧合酶-1（Heme oxygenase-1, HO-1）是机体最重要的抗氧化酶之一,正常情况下在组织中不或者低表达,当发生应激时,其表达会上调,从而发挥保护机体的作用。越来越多的实验表明,激活HO-1能调节心血管系统的功能,保护其免于各种不利刺激的损伤。最近国内外研究更表明,HO-1也参与了多种治疗心血管疾病药物的作用。因此,本课题以VSMCs为研究对象,运用现代分子生物学技术,探讨OA是否通过调节HO-1的表达来实现保护血管的作用,并探讨其可能的机制。研究方法第一部分齐墩果酸对血管平滑肌细胞中血红素氧合酶1表达的影响及与PI3K、MAPK通路的关系。取SD雄性大鼠,经手术取其胸主动脉,采用贴块法培养血管平滑肌细胞,采用α-SM-actin特异性抗体行细胞鉴定为平滑肌细胞,4-8代细胞用于实验。将VSMCs分为:①正常对照组,②OA（10μM）组,③OA（25μM）组,④OA（50μM）组;然后放入孵箱中培养12小时,后取出采用RT-PCR及Western blot检测细胞中HO-1 mRNA及蛋白表达情况,分光光度法测定HO-1活性。然后取OA最佳浓度加入VSMCs中,放入孵箱中培养指定时间后取出,采用Western blot检测细胞中HO-1的表达。将VSMCs分为:正常对照组和OA不同时间作用组,提取细胞蛋白,采用Western blot法检测细胞中磷酸化Akt及磷酸化MAPKs的表达情况。通过上一步实验确定能被OA激活的激酶,在下一步实验中采用相应的阻断剂与OA作用于细胞,分为:①正常对照组,②OA组,③OA+相应阻断剂组。干预后放入孵箱中培养指定时间后,取出提取蛋白,行Western blot法检测HO-1的表达。第二部分转录因子Nrf2在齐墩果酸调控血管平滑肌细胞血红素氧合酶1表达中的作用。将VSMCs分为:①正常对照组,②OA（10μM）组,③OA（25μM）组,④OA（50μM）组;在孵箱中培养4小时候后取出,提取细胞核蛋白,Western blot检测细胞核中Nf2的表达变化。确定OA能激活Nrf2后,加入相应阻断剂,实验分为:①正常对照组,②OA组,③OA +相应阻断剂组。在孵箱中培养指定时间后,取出提取细胞核蛋白,行EMSA检测Nrf2结合活性。将构建好的Nrf2干扰慢病毒载体转染细胞,Western blot测定Nrf2的表达,确定是否干扰成功。将VSMCs分为:①对照载体转染组,②OA +对照载体转染组,③Nrf2干扰慢病毒载体转染组,④OA + Nrf2干扰慢病毒载体转染组。采用Western blot法检测细胞中HO-1的表达变化。第三部分齐墩果酸对血管平滑肌细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制实验先采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT）确定过氧化氢（H2O2）诱导血管平滑肌细胞损伤的最佳浓度,然后实验分为:①正常对照组,②H2O2组,③OA + H2O2组,④OA + H2O2 + ZnPP组,⑤OA + H2O2 +相应阻断剂组。采用MTT、Hoechst 33342法或流式细胞仪检测细胞凋亡及坏死情况。然后将实验分为:①正常对照组,②过氧化氢（H2O2）组,③OA（10μM）+ H2O2组,④OA（25μM）+ H2O2组,⑤OA（50μM）+ H2O2组。采用相应试剂盒测定细胞中谷胱甘肽（GSH）、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）及超氧化物歧化酶（SOD）的变化。研究结果（1）OA在10、25、50μM浓度范围内都能上调VSMCs中HO-1的活性、mRNA及蛋白水平,呈现浓度依赖性,并且在50μM浓度时,OA诱导VSMCs中HO-1表达的作用最强,故此以后实验均采用50μM浓度进行细胞干预。（2）OA作用于VSMCs不同时间后,HO-1蛋白表达呈现不同程度地上调,6小时时HO-1表达最强,随后,HO-1蛋白表达逐渐减弱。（3）OA作用于VSMCs后,能使细胞中磷酸化的Akt、ERK及p38激酶表达增强。细胞分别经PI3K抑制剂wortmannin,ERK抑制剂PD98059及p38抑制剂SB203850预处理后,Western blot显示wortmannin及PD98059预处理组较单纯OA组的HO-1表达显着下调;SB203850预处理组的HO-1表达与单纯OA组比无显着变化。（4）不同浓度的OA作用于VSMCs 4小时,能激活细胞中Nrf2的核转录,且呈现浓度依赖性。细胞分别经wortmannin及PD98059预处理后,与单纯OA组比较,细胞中Nrf2结合活性显着减弱。（5）Nrf2干扰慢病毒成功瞬时转染VSMCs,Nrf2 siRNA转染组与control siRNA组比较,细胞核Nrf2表达显着减弱;OA + Nrf2 siRNA组与OA + control siRNA组比较,HO-1蛋白表达显着下调。（6）不同浓度的H2O2作用于VSMCs 24小时,能导致细胞不同程度的死亡,并呈现浓度依赖性,当浓度达到400μM时开始出现显着的细胞毒性作用,故此以后实验采用400μM H2O2作用于细胞。与H2O2组比较,OA各剂量组细胞GSH、NADPH及SOD含量均有不同程度的上升,其中25、50μM组具有统计学意义。与OA+ H2O2组相比,经ZnPP（HO-1活性抑制剂）、wortmannin及PD98059预处理组,细胞活性显着降低。结论（1）OA能上调大鼠血管平滑肌细胞中HO-1的mRNA及蛋白表达,伴有HO-1活性的增强。（2）OA通过激活大鼠血管平滑肌细胞Akt、ERK通路诱导HO-1的表达。（3）OA能激活大鼠血管平滑肌细胞中Nrf2转录因子,Akt及ERK通路参与其中。（4）Nrf2转录因子参与了OA诱导的HO-1表达。（5）OA能减轻H2O2导致的大鼠血管平滑肌细胞氧化损伤,可能是通过增加HO-1等抗氧化酶的活性来实现的。由此可见,OA通过激活大鼠血管平滑肌细胞中Akt及ERK信号通路,导致Nrf2的核转录增加,Nrf2的激活促进了HO-1的表达增加,从而减轻H2O2导致的VSMCs氧化损伤。
冯璇[10]（2010）在《复方归芪颗粒治疗肝纤维化的实验研究》文中指出目的：研究中药复方归芪颗粒治疗大鼠肝纤维化的药效学作用及作用机理。内容与方法：1.不同制备工艺的药效学筛选：采用四氯化碳（CCl4）致大鼠肝纤维化模型进行复方归芪颗粒不同制备工艺优化的药效学筛选。灌胃给予雄性大鼠15%CCl4食用油溶液每1kg体重10mL,2次/周,连续10周,建立大鼠肝纤维化模型。模型大鼠随机分为模型对照组、阳性药对照组及归芪颗粒样品1、2和3组,另设正常大鼠对照组,第9周起按相同的剂量（22.4g/kg）灌胃给予不同工艺制备的归芪颗粒样品进行治疗,连续8周,阳性对照组灌胃给予扶正化瘀胶囊0.825g/kg,正常及模型对照组灌胃等容积的消毒饮用水。末次给药次日取血,观察各组大鼠血清学指标（ALT、AST、HA、PⅢNP）及肝组织中羟脯氨酸（Hyp）的变化,并解剖大鼠取肝脏做病理组织学检查,观察肝脏纤维化程度。2.复方归芪颗粒对CCl4致肝纤维化模型大鼠的治疗作用：灌胃给予雄性大鼠15%CCl4食用油溶液10mL/kg,2次/周,连续16周,建立大鼠肝纤维化模型。模型大鼠随机分为模型对照组、阳性药对照组及归芪颗粒高、中、低剂量组,另设正常大鼠对照组,第9周起按22.4、11.2和5.6g/kg的剂量灌胃给予归芪颗粒进行治疗,连续8周,阳性对照组灌胃给予扶正化瘀胶囊0.825g/kg,正常及模型对照组灌胃给予等容积的消毒饮用水。末次给药的次日取血,检测各组大鼠血清学指标（ALT、AST、T-BIL、ALP、TP、ALB、GLB、HA、CⅣ和PⅢNP）及肝组织中Hyp的含量,并解剖大鼠取肝脏做病理组织学检查,观察肝脏纤维化等病理学改变,并采用免疫组织化学的方法观察用药后肝组织中TGF-β1表达的变化情况。3.复方归芪颗粒对猪血清致大鼠肝纤维化模型的治疗作用：腹腔注射给予大鼠猪血清0.5mL/只,2次/周,连续16周,建立大鼠肝纤维化模型。模型大鼠随机分为模型对照组、阳性药对照组及归芪颗粒高、中、低剂量组,另设正常大鼠对照组,第9周起按22.4、11.2和5.6g/kg的剂量灌胃给予归芪颗粒进行治疗,连续8周,阳性对照组灌胃给予扶正化瘀胶囊0.825g/kg,正常及模型对照组灌胃等容积的消毒饮用水。末次给药的次日取血,观察各组大鼠血清学指标（ALT、AST、T-BIL、ALP、TP、ALB、GLB、HA、CIV和PIIINP）的改变及肝组织中Hyp的变化,并解剖大鼠取肝脏做病理组织学检查,观察肝脏纤维化程度。4.利胆试验：麻醉大鼠行胆汁引流术,观察归芪颗粒对正常大鼠的胆汁分泌量及胆汁中总胆红素（T-BIL）含量的影响情况。结果：1.归芪颗粒样品1能显着降低血清中AST、ALT、HA、PⅢNP及肝组织中Hyp的水平,明显减轻肝脏细胞的病理损伤,其药效作用优于样品2和样品3。2.复方归芪颗粒能明显降低化学性肝损伤大鼠血清中AST、ALP、HA、CⅣ、T-BIL、PⅢNP及肝组织中Hyp的水平,明显减轻肝脏细胞的病理损伤。归芪颗粒也能在一定程度上减少模型大鼠肝组织中TGF-β1的含量。3.复方归芪颗粒能明显降低免疫性肝损伤大鼠血清中AST、ALP、HA及肝组织中Hyp的水平,明显减轻肝脏细胞的病理损伤。4.复方归芪颗粒有促进胆汁分泌和排泄的作用,能有效增加正常大鼠胆汁中总胆红素的含量,有较强的疏肝利胆解毒作用。结论：复方归芪颗粒具有治疗肝纤维化,保肝利胆的药效学作用,其作用机理可能与减少肝组织中TGF-β1的含量相关。
二、丹参对四氯化碳肝损害大鼠肝脏白细胞三烯的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、丹参对四氯化碳肝损害大鼠肝脏白细胞三烯的影响（论文提纲范文）
（1）黄芩苷通过上调miR-3595靶向ACSL4表达抑制大鼠肝纤维化的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 黄芩苷对HSC-T6细胞的影响以及miRNA芯片分析 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料与方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 黄芩苷通过上调miR-3595抑制ACSL4表达来干预HSC-T6细胞的功能 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 黄芩苷对大鼠肝纤维化的治疗作用 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料与方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 黄芩苷在肝纤维化治疗中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 全文小结和结论 |
| 英文缩略词表 |
| 攻读博士学位期间取得的成果 |
| 致谢 |
（2）水飞蓟素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的探讨（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略表 |
| 引言 |
| 第1章 实验研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 主要仪器 |
| 1.1.3 试剂与药品 |
| 1.1.4 溶液的配制 |
| 1.2 实验动物分组及处理 |
| 1.2.1 假手术组 |
| 1.2.2 缺血再灌注模型组 |
| 1.2.3 低浓度水飞蓟素苏组 |
| 1.2.4 高浓度水飞蓟素组 |
| 1.3 术后大鼠状态 |
| 1.4 标本采集 |
| 1.4.1 血液采集 |
| 1.4.2 肾脏组织的留取 |
| 1.4.3 实验动物处理 |
| 1.5 检测指标及方法 |
| 1.5.1 大鼠肾功能检测 |
| 1.5.2 肾脏脏组织的包埋及切片 |
| 1.5.3 肾组织病理光镜检查 |
| 1.5.4 酶联免疫吸附测定 |
| 1.6 统计方法 |
| 1.7 结果 |
| 1.7.1 肾功能检测结果 |
| 1.7.2 H-E染色镜下观察肾脏病理 |
| 1.7.3 免疫组化观察结果 |
| 1.7.4 ELISA检测结果 |
| 1.8 讨论 |
| 1.8.1 肾移植与缺血再灌注损伤 |
| 1.8.2 炎症与缺血再灌注损伤 |
| 1.8.3 目前治疗与展望 |
| 参考文献 |
| 第2章 综述 |
| 2.1 抗炎作用 |
| 2.1.1 水飞蓟素可以抑制炎症信号的表达 |
| 2.1.2 水飞蓟素在细胞水平上的抗炎作用 |
| 2.2 抗氧化作用 |
| 2.2.1 水飞蓟素可以减少氧自由基的生成 |
| 2.2.2 水飞蓟素可以加快氧自由基的排出 |
| 2.2.3 水飞蓟素能够加快抗氧化酶在体内的生成 |
| 2.3 降脂作用 |
| 2.4 降糖作用 |
| 2.5 保肝作用 |
| 2.6 抗癌作用 |
| 2.7 免疫调节作用 |
| 2.8 对不同器官IRI的保护作用 |
| 2.8.1 心脏 |
| 2.8.2 脑 |
| 2.8.3 肝 |
| 2.8.4 胃 |
| 2.8.5 肠 |
| 2.8.6 肾 |
| 2.9 结语 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 学位论文数据集 |
（3）畲药山里黄根水提液抗CCl4肝损伤作用实验研究及有效部位筛选（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 山里黄根水提液抗小鼠CCl_4肝损伤作用实验研究 |
| 一、实验材料和方法 |
| (一) 实验材料 |
| 1. 实验动物 |
| 2. 药物及主要试剂、仪器 |
| 3. 主要药物的提取、配制 |
| (二) 实验方法 |
| 1. 小鼠CCl_4造模方法 |
| 2. 样本采集与指标测定 |
| 3. 肝组织病理形态学观察 |
| 4. 统计学处理 |
| 二、实验结果 |
| 1. 山里黄根水提液抗小鼠CCl_4肝损伤作用的研究 |
| 2. 山里黄根水提液抗CCl_4肝损伤小鼠肝组织病理形态学的观察 |
| 三、分析与讨论 |
| 1. CCl_4诱导肝损伤动物造模的建立 |
| 2. 实验动物的选择 |
| 3. 药物剂量及阳性药的选择 |
| 4. 山里黄根水提液对CCl_4诱导肝损伤作用的结果分析 |
| 四、小结 |
| 第二部分 山里黄根水提液对CCl_4体外诱导L-02肝损伤作用有效部位筛选 |
| 一、实验材料和方法 |
| (一) 实验材料 |
| 1. 实验细胞及培养条件 |
| 2. 药物及主要试剂、仪器 |
| 3. 主要试剂的配制 |
| (二) 实验方法 |
| 1. 山里黄根水提液的四个不同极性部位的提取 |
| 2. L-02肝细胞的培养 |
| 3. CCl_4损伤模型的建立 |
| 4. MTT检测 |
| 5. 计算公式 |
| 6. 分组 |
| 7. 统计学处理 |
| 二、实验结果 |
| 1. 山里黄根水提液不同萃取部位干膏得率 |
| 2. 山里黄根水提液不同萃取部位对CCl_4造模细胞增殖的影响 |
| 三、分析与讨论 |
| 1. L-02肝细胞损伤模型的建立 |
| 2. 实验方法的选择 |
| 3. 山里黄根水提液不同萃取部位对CCl_4体外诱导L-02肝损伤作用的结果分析 |
| 四、小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 文献综述 中药治疗肝损伤及栀子根研究进展 |
| 参考文献 |
（4）红花黄色素在体内的稳定性及药动学研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分：丹红原料药质量标准研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 2 方法与结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 红花黄色素在人工胃肠液中的稳定性 |
| 1 材料和试药 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果与分析 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 羟基红花黄色素 A 在大鼠体内的药动学研究 |
| 1 仪器与试药 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果和分析 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）丹参对大鼠肝再生过程影响的Meta分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 纳入排除标准 |
| 1.2 检索策略 |
| 1.3 文献筛选和资料提取 |
| 1.4 质量评价 |
| 1.5 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 检索结果 |
| 2.2 纳入研究的质量评价 |
| 2.3 Meta分析结果 |
| 3 讨论 |
（6）三甲散治疗乙肝后肝纤维化的临床观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 引言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 第一章 概述 |
| 第二章 现代医学对肝纤维化的认识 |
| 1 肝纤维化的概念与病因 |
| 2 肝纤维化的发病机制 |
| 3 肝纤维化的诊断标准与临床特征 |
| 4 肝纤维化的西医治疗 |
| 5. 肝纤维化的预防与保健 |
| 第三章 中医学对肝纤维化的认识 |
| 1 肝纤维化的中医学概念 |
| 2 肝纤维化中医病因机理的认识 |
| 3 三甲散与肝纤维化 |
| 第二部分 临床研究 |
| 第一章 病例选择及研究方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 诊断标准 |
| 3 病例纳入标准 |
| 4 排除标准 |
| 5 剔除、脱落及中止试验的标准 |
| 6 研究方法 |
| 7 观察指标 |
| 8 疗效评定标准 |
| 9 数据分析方法 |
| 第二章 结果 |
| 1 一般资料 |
| 2 疗效观察 |
| 第三部分 结语 |
| 结论与讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）HCV复制子用于抗丙肝中药的筛选及组方（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 细胞培养条件下动物血浆对细胞的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 应用血浆药理学方法及 HCV 复制子筛选抗丙肝中药及组方 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 中药血浆(血清)药理学实验方法 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）双黄连对犬肝细胞对乙酰氨基酚损伤的保护作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 兽用双黄连的研究现状 |
| 1.1.1 金银花 |
| 1.1.2 黄芩 |
| 1.1.3 连翘 |
| 1.2 对乙酰氨基酚致急性肝损伤 |
| 1.3 评价肝损伤的指标 |
| 1.4 原代肝细胞培养 |
| 1.5 犬肝细胞体外培养的应用 |
| 1.6 药物代谢与细胞色素P450 酶的关系 |
| 1.7 联合用药与细胞色素P450 酶的关系 |
| 1.8 研究目的及意义 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂及药品 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 犬肝细胞的分离及原代培养 |
| 2.2.2 犬肝细胞损伤模型的建立 |
| 2.2.3 Western Blot 检测双黄连、金银花、黄芩、连翘对损伤的犬肝细胞CYP450 的影响 |
| 3 结果 |
| 3.1 犬肝细胞形态观察 |
| 3.2 犬肝细胞的生长曲线 |
| 3.3 犬肝细胞培养液中ALT 和AST 活性变化 |
| 3.4 肝细胞损伤模型实验 |
| 3.4.1 肝细胞损伤后的形态学观察 |
| 3.4.2 对乙酰氨基酚对肝细胞存活率的影响 |
| 3.4.3 对乙酰氨基酚对培养液ALT 的影响 |
| 3.4.4 对乙酰氨基酚对培养液AST 的影响 |
| 3.4.5 对乙酰氨基酚对培养液LDH 的影响 |
| 3.4.6 对乙酰氨基酚对肝细胞MDA 的影响 |
| 3.5 双黄连对AP 损伤肝细胞的保护作用 |
| 3.5.1 对培养液ALT 的影响 |
| 3.5.2 对培养液AST 的影响 |
| 3.5.3 对培养液LDH 的影响 |
| 3.5.4 对培养液MDA 的影响 |
| 3.6 金银花对AP 损伤肝细胞的保护作用 |
| 3.6.1 对培养液ALT 的影响 |
| 3.6.2 对培养液AST 的影响 |
| 3.6.3 对培养液LDH 的影响 |
| 3.6.4 对培养液MDA 的影响 |
| 3.7 黄芩对AP 损伤肝细胞的保护作用 |
| 3.7.1 对培养液ALT 的影响 |
| 3.7.2 对培养液AST 的影响 |
| 3.7.3 对培养液LDH 的影响 |
| 3.7.4 对培养液MDA 的影响 |
| 3.8 连翘对AP 损伤肝细胞的保护作用 |
| 3.8.1 对培养液ALT 的影响 |
| 3.8.2 对培养液AST 的影响 |
| 3.8.3 对培养液LDH 的影响 |
| 3.8.4 对培养液MDA 的影响 |
| 3.9 双黄连对损伤的犬肝细胞CYP450 的影响 |
| 3.9.1 双黄连对损伤的犬肝细胞CYP450 表达的影响 |
| 3.9.2 金银花对损伤的犬肝细胞CYP450 表达的影响 |
| 3.9.3 黄芩对犬损伤的肝细胞CYP450 表达的影响 |
| 3.9.4 连翘对损伤的犬肝细胞CYP450 表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 犬肝细胞的原代培养 |
| 4.1.1 犬原代肝细胞的生长特点 |
| 4.1.2 细胞生长曲线的测定 |
| 4.1.3 培养条件对肝细胞的影响 |
| 4.2 AP 诱导犬肝细胞损伤 |
| 4.3 肝损伤的指标测定 |
| 4.3.1 ALT、AST 的测定 |
| 4.3.2 LDH 的测定 |
| 4.3.3 MDA 的测定 |
| 4.4 双黄连对AP 所致肝损伤的保护作用 |
| 4.5 金银花对AP 所致肝损伤的保护作用 |
| 4.6 黄芩对AP 所致肝损伤的保护作用 |
| 4.7 连翘对AP 所致肝损伤的保护作用 |
| 4.8 双黄连制剂对犬肝病治疗效果的研究 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在读期间发表的学术论文 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
（9）齐墩果酸对大鼠血管平滑肌细胞中血红素氧合酶1表达的影响及其作用机制的研究（论文提纲范文）
| 中英文缩写一览表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 齐墩果酸对血管平滑肌细胞中血红素氧合酶1 表达的影响及与 P13K、MAPK 通路的关系 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 转录因子Nrf2 在齐墩果酸调控血管平滑肌细胞血红素氧合酶1 表达中的作用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 齐墩果酸对血管平滑肌细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 全文结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的文章 |
（10）复方归芪颗粒治疗肝纤维化的实验研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 肝纤维化的研究进展 |
| 1.1 肝纤维化的病因 |
| 1.2 肝纤维化的主要发病机制 |
| 1.2.1 肝细胞与肝纤维化 |
| 1.2.2 细胞因子与肝纤维化 |
| 1.2.3 细胞外基质与肝纤维化 |
| 1.3 肝纤维化动物模型的建立和选择 |
| 第二节 西医药对肝纤维化的治疗进展 |
| 1.4 肝纤维化的治疗药物 |
| 第三节 中医药治疗肝纤维化研究进展 |
| 1.5 中医学对肝纤维化的认识 |
| 1.6 中药治疗肝纤维化 |
| 1.7 中药复方抗肝纤维化的研究 |
| 参考文献 |
| 第二章 复方归芪颗粒不同制备工艺的药效学比较 |
| 2.1 主要实验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.3 观察及检测指标 |
| 2.4 结果 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 复方归芪颗粒治疗大鼠化学中毒性肝纤维化 |
| 3.1 主要实验材料 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.3 观察及检测指标 |
| 3.4 结果 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 复方归芪颗粒治疗大鼠免疫性肝纤维化的实验研究 |
| 4.1 主要实验材料 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.3 观察及检测指标 |
| 4.4 结果 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 归芪颗粒对大鼠利胆作用的实验研究 |
| 5.1 主要实验材料 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 总结与展望 |
| 6.1 主要结论 |
| 6.2 展望 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
四、丹参对四氯化碳肝损害大鼠肝脏白细胞三烯的影响（论文参考文献）
- [1]黄芩苷通过上调miR-3595靶向ACSL4表达抑制大鼠肝纤维化的机制研究[D]. 吴雄健. 南方医科大学, 2018(09)
- [2]水飞蓟素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的探讨[D]. 董建. 华北理工大学, 2018(01)
- [3]畲药山里黄根水提液抗CCl4肝损伤作用实验研究及有效部位筛选[D]. 黄思斯. 浙江中医药大学, 2015(05)
- [4]红花黄色素在体内的稳定性及药动学研究[D]. 王慧娟. 华中科技大学, 2013(06)
- [5]丹参对大鼠肝再生过程影响的Meta分析[J]. 吴倩妮,田宏亮,张丽菡,田金徽,熊海芮,刘雅莉,杨克虎. 中国中药杂志, 2012(17)
- [6]三甲散治疗乙肝后肝纤维化的临床观察[D]. 陈文骞. 广州中医药大学, 2012(10)
- [7]HCV复制子用于抗丙肝中药的筛选及组方[D]. 高丽. 河北医科大学, 2012(12)
- [8]双黄连对犬肝细胞对乙酰氨基酚损伤的保护作用[D]. 侯聪敏. 河北农业大学, 2011(08)
- [9]齐墩果酸对大鼠血管平滑肌细胞中血红素氧合酶1表达的影响及其作用机制的研究[D]. 冯健. 第三军医大学, 2011(12)
- [10]复方归芪颗粒治疗肝纤维化的实验研究[D]. 冯璇. 南京中医药大学, 2010(04)