一、黄芪注射液对心肌梗塞后大鼠左室胶原改建影响的研究（论文文献综述）
李鹤[1]（2021）在《基于IL-10/STAT3通路探讨益气温阳方对压力负荷心衰大鼠心脏功能的影响》文中提出目的:心力衰竭（heartfailure,HF）是一个全球性的健康问题,心脏重构是心力衰竭重要的病理生理改变。本研究旨在探讨益气温阳方对压力负荷诱导的心力衰竭大鼠心脏功能的影响,并从炎症、纤维化及细胞凋亡等方面探讨其改善心脏重构的可能机制。方法:我们选择30只雄性wistar大鼠,适应性饲养1周,随机选取5只雄性wistar大鼠作为假手术组（n=5）,手术时只分离动脉不造成动脉狭窄,术后给予普通饲料喂养;其余大鼠采用微创主动脉弓缩窄法（MTAC）制备压力负荷诱导的心力衰竭witar大鼠模型,4周后通过心脏超声检测相关参数,确认造模成功后将大鼠随机分为模型组（MTAC）（n=5）、益气温阳方低剂量组（n=5）、益气温阳方高剂量组（n=5）。益气温阳方中的药物经过浸泡、煮沸、煎煮,最后运用中药旋蒸仪进行浓缩而制备完成。益气温阳方低剂量组给予益气温阳方3.6g/Kg/d灌胃给药,益气温阳方高剂量组给予益气温阳方18g/Kg/d灌胃给药,各组均干预16周,16周后应用超声心动图测定左室射血分数（LVEF）和左室缩短率（LVFS）,以评价益气温阳方对心功能的影响。在第16周采取wistar大鼠腹主动脉血液后,处死大鼠并留取心肌组织。通过Masson染色、Sirius染色、免疫组化测定心肌组织Collagen I、TGF-β、CTGF 的表达,运用 Western blot 检测 Collagen I、TGF-β、CTGF 蛋白表达水平,以评价益气温阳方对心肌纤维化的影响。通过TUNEL染色、Western blot检测心肌组织Bax、Bcl-2、Caspase-3、PARP蛋白表达水平,以评价益气温阳对心肌细胞凋亡的影响。通过ELISA法测定血清及心肌组织中IL-10、TNF-α表达水平,以评价益气温阳方对炎症因子的影响。通过免疫组化检测心肌组织CD68表达、Western blot检测IL-10、TNF-α、STAT3（P-STAT3）、P65（P-P65）表达水平,以评价益气温阳方对相关信号通路的影响。结果:（1）经过MTAC制备压力负荷诱导的心力衰竭大鼠模型后,心脏超声检查发现,与造模前相比,造模后的wistar大鼠心肌收缩功能较造模前明显减弱,左室射血分数明显下降,差异有统计学差异（p<0.05）,提示造模成功。（2）与假手术组比较,MTAC组LVEF、LVFS显着下降,差异具有统计学意义（p<0.01）;益气温阳方干预16周后,与MTAC组比较,益气温阳方低剂量组和高剂组LVEF显着升高,差异具有统计学意义（P<0.01）;益气温阳方低剂量组LVFS明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）,益气温阳方高剂量组LVFS显着升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。（3）经过Masson染色和Sirius染色,与假手术组相比,MTAC组心肌纤维化占比显着增高,且差异具有统计学意义（P<0.01）。经益气温阳方干预后,益气温阳方低剂量组、高剂量组心肌纤维化面积占比明显减少,差异具有统计学意义（P<0.05）。免疫组化检测心肌组织显示,与假手术组比较,MTAC组中Collagen I、TGF-β、CTGF表达增加,而经益气温阳方干预后,低剂量组和高剂量组中Collagen I、TGF-β、CTGF表达明显减少。Western blot检测心肌组织,MTAC组中Collagen I、TGF-β、CTGF的蛋白表达高于假手术组,而经益气温阳方干预后,低剂量组和高剂量组明显下调CollagenI、TGF-β、CTGF蛋白表达。（4）经TUNEL染色,MTAC组心肌细胞凋亡明显,而益气温阳方低剂量组、高剂量组均抑制心肌细胞凋亡。Western blot检测后,益气温阳方可降低MTAC大鼠心肌组织凋亡信号蛋白Bax、Caspase-3和PARP的表达,升高Bcl-2的表达。（5）ELISA法测定血清IL-10、TNF-α表达水平后,与假手术组比较,MTAC组中IL-10的水平显着下降,TNF-α显着升高,差异具有统计学意义（P<0.01）;与MTAC组比较,益气温阳方低剂量组TNF-α明显下降,差异具有统计学意义（P<0.05）;与MTAC组比较,益气温阳方高剂量组IL-10水平显着增加,TNF-α显着下降,差异具有统计学意义（P<0.01）。心肌组织中IL-10、TNF-α的检测结果显示:与假手术组比较,MTAC组中IL-10表达水平显着下降,TNF-α水平显着升高,差异具有统计学意义（P<0.01）;与MTAC组比较,益气温阳方高剂量组IL-10表达水平显着上升,差异具有统计学意义（P<0.01）;TNF-α表达水平明显下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。（6）心肌组织检测CD68表达,与假手术组比较,MTAC组心肌组织中CD68表达显着增加,与MTAC组比较,益气温阳方低剂量组和高剂量组CD68的表达明显减少。Western blot检测心肌组织相关炎症通路,与假手术组相比,MTAC组大鼠心肌组织中IL-10、STAT3蛋白表达明显降低,P65、TNF-α蛋白表达明显升高;与MTAC组相比,益气温阳方低剂量组、高剂量组IL-10、STAT3蛋白表达明显升高,P65、TNF-α蛋白表达明显降低。结论:益气温阳方能减轻压力负荷诱导的心力衰竭大鼠心肌炎症、纤维化、细胞凋亡,抑制心室重塑,保护心脏功能。其机制可能与激活IL-10/STAT3信号通路,改善心肌重塑有关。
周袁申[2]（2020）在《基于调节ACE轴和ACE2轴探讨益气活血法改善心梗后心室重构的机制研究》文中提出目的:心肌梗死是严重危害人类健康的重要疾病,心梗后心肌纤维化是心梗后心室重构的关键。前期研究发现,益气活血中药通冠胶囊具有抑制心梗后心肌纤维化,改善心梗后心功能和左室重构的作用,但其机制尚未明确。新近研究发现心脏RAS系统的ACE-AngⅡ-AT1R轴促进而ACE2-Ang（1-7）-Mas轴抑制心梗后心肌纤维化;正由于心梗后RAS系统的ACE-AngⅡ-AT1R轴和ACE2-Ang（1-7）-Mas轴发生失衡,心脏发生纤维化和心室重构。因此,恢复RAS系统的平衡对改善心梗后心肌纤维化和心室重构意义重大。由此,我们设想通冠胶囊通过恢复ACE-AngⅡ-AT1R轴和ACE2-Ang（1-7）-Mas轴的平衡,进而抑制NOX2-ROS-Rock2信号通路,减少心肌成纤维细胞胶原的合成,最终抑制心梗后心室重构;为心梗后心室重构“气虚血瘀”理论提供依据;为心梗后心室重构的防治提供新思路和药物作用新靶点。方法:采用SD大鼠建立结扎冠状动脉左前降支的急性心肌梗死后心室重构模型,分为5组:对照组、模型组、手术组、手术+通冠胶囊组、手术+通冠胶囊+A779组、手术+ACEI（卡托普利）组;运用小动物超声检测和评估大鼠心脏形态及功能变化;检测大鼠全心重/体重指数、羟脯氨酸含量了解心脏纤维化情况;HE染色观察心脏病理,Masson染色观察心肌纤维化的程度;免疫组化及免疫印迹检测胶原蛋白（collagen）的表达情况,评估大鼠心肌纤维化和心室重构情况。通过放射免疫分析法或ELISA法检测各实验组血清和心脏组织中AngⅡ和Ang（1-7）的含量,免疫印迹检测ACE、AT1R、ACE2、Mas的含量,免疫组化检测ACE和ACE2的表达水平。免疫印迹检测NOX2、Rock2蛋白的表达;检测ROS（H202）的表达水平。体外细胞实验首先利用AngⅡ联合通路分子抑制剂干预细胞;观察AngⅡ是否通过激活NOX2-ROS-Rock2通路促进成纤维细胞合成胶原,Ang（1-7）能否抑制AngⅡ的上述作用;阐明NOX2-ROS-Rock2通路为RAS系统调节心肌成纤维细胞合成胶原的下游信号通路;免疫印迹检测ACE、AT1R、ACE2、Mas的含量,同时检测NOX2-ROS-Rock2信号通路各分子及胶原的表达情况。结果:相比于对照组,通冠胶囊能够使心肌梗死大鼠心脏心肌梗死面积减小,心脏心肌纤维化降低,使心脏收缩和舒张功能都有较明显的改善。同时还能使心肌细胞凋亡减少,证实RAS系统参与了心肌梗死的途径,而通冠胶囊能够改善心肌细胞凋亡的情况。手术+通冠胶囊组能够有效降低冠状动脉左前降支结扎后的collagen1蛋白表达量,说明了通冠胶囊与ACEI的作用相仿,能够使心肌纤维化的表达降低,同时还能使心肌梗死大鼠的血清和心肌细胞AngⅡ蛋白水平下调同时Ang（1-7）蛋白水平发生明显上调,差异具有统计学意义（P<0.05）,说明通冠胶囊能够产生双向调节的作用。在细胞水平上,通冠胶囊还能够有效降低冠状动脉左前降支结扎后的NOX2、Rock2蛋白的表达量,还能使心肌细胞ROS（H202）含量降低。通过免疫印迹实验发现:AngⅡ+通冠胶囊组、AngⅡ+丹参酮ⅡA组的Collagenl蛋白表达量发生显着下调。同时与AngⅡ组相比,AngⅡ+DPI组、AngⅡ+NAC 组、AngⅡ+Y27632 会使 AT1R 的表达下调,AngⅡ+Ang（1-7）组以及AngⅡ+通冠胶囊组的AT1R蛋白表达量也会发生显着下调。这个情况进一步说明了当氧化应激通路被抑制后,AngⅡ有进一步加重心肌纤维化的情况,而通冠胶囊能够对ACE与ACE2轴进行双向调节,改善心肌梗死后心肌纤维化及心室重构的进程。结论:通冠胶囊通过RAS信号通路的调节作用,其中对ACE-AngⅡ-AT1R轴具有抑制作用和同时ACE2-Ang（1-7）-Mas轴具有促进作用。从而起到缓解急性心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响。针对该机制,本研究通过观察通冠胶囊在延缓或改善心肌梗死后心室重构的影响,探讨出益气活血中药通冠胶囊能够双向调节RAS信号通路,使氧化应激减缓,从而改善胶原蛋白的合成。这些发现为进一步深入探索通冠胶囊作为一种治疗心室重构的有效药物提供了理论基础,也对动脉系统疾病的影响是未来有意义的研究方向。
华玥[3]（2017）在《补阳还五汤抑制TGFBR1防治心梗后心肌纤维化的机制和物质基础研究》文中研究表明心肌纤维化（Cardiac Fibrosis）是心室重构的主要特征,是指由于心脏组织中心肌成纤维细胞产生的细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）过度沉积,胶原蛋白的浓度和体积分数显着增加,各种类型的胶原比例失衡,排列秩序紊乱,降低心脏组织的顺应性,加速心室重构的进展,最终引发心力衰竭、猝死,是远期发生心源性死亡的最重要的危险因素之一。补阳还五汤出自清代王清任的《医林改错》,是益气活血法的代表方,但其抗心肌纤维化的作用机制尚未明确。方法:采用结扎大鼠冠状动脉制作心肌梗死后心肌纤维化模型,探索补阳还五汤及其拆方抗大鼠心梗后心肌纤维化模型的作用。进一步探讨补阳还五汤及其拆方对纤维化关系最为密切的转化生长因子TGF-β信号通路的影响,阐明补阳还五汤抗心肌纤维化的作用靶点,从信号转导方面阐述补阳还五汤防治心肌纤维化的机制。在课题组前期研究中采用差异基因表达分析发掘TGFBR1作为补阳还五汤抗心肌纤维化靶点后,采用虚拟筛选技术从补阳还五汤有效成分中筛选出20个能与TGFBR1结合的候选化合物,再使用机器学习对筛选结果进行优化,应用同位素标记法检测筛选成分对心肌成纤维细胞胶原合成的作用,应用免疫共沉淀WB法检测检测筛选成分对靶点蛋白水平影响,应用实时定量PCR法检测筛选成分对关键基因表达的影响。结果:补阳还五汤可明显改善心肌梗死后大鼠远期生存率、心脏形态和功能,抑制心肌组织间质胶原沉积,该作用可能通过拮抗TGF-β1/Samd信号通路从而抑制心肌纤维化的作用。补气组对心梗后心肌纤维化改善作用与补阳还五汤作用相似,而活血组作用较差,提示补阳还五汤中补气药和活血药之间通过协同作用而发挥功效。通过虚拟筛选技术和机器学习最终确定补阳还五汤组分中的黄芪皂苷Ⅳ为TGFBR1有效作用成分。与TGF-β1刺激模型组相比,同位素标记脯氨酸渗入实验结果显示黄芪皂苷Ⅳ能呈剂量依赖性抑制TGF-β1诱导的乳鼠心肌成纤维细胞的胶原合成（P<0.0001）,WB结果显示黄芪皂苷Ⅳ能显着抑制TGFBR1的表达,以及下游信号分子Smad2、Smad3的磷酸化（P<0.0001）,实时定量PCR结果显示黄芪皂苷Ⅳ能显着抑制TGFBR1下游心肌纤维化相关基因CTGF、TIMP1和MMP9的表达水平。结论:补阳还五汤在补气药和活血药的协同作用下,通过抑制TGF-β1/Samd信号通路,有效缓解甚至逆转心肌梗死后心肌纤维化的进程,且在组方中君药黄芪之补气组抗心肌纤维化作用明显。基于TGFBR1这一靶点,通过计算机辅助虚拟筛选和机器学习筛选,并在心肌成纤维细胞中体外验证了黄芪皂苷Ⅳ作为补阳还五汤抗心梗后心肌纤维化的有效成分,是潜在的TGFBR1抑制剂。
李彬,王永霞,谢世阳,朱明军[4]（2014）在《心肌梗死后心室重构的中医药治疗实验研究进展》文中研究指明急性心肌梗死（AMI）是临床上常见的急危重症,AMI后所造成的心血管事件发生率和病死率持续升高,心室重构成为AMI后心力衰竭的治疗靶点[1]。心肌梗死后心室重构是指AMI后发生的左心室进行性扩张和外形改变,包括心室容积、形状、室壁厚度、心肌结构和超微结构等方面的改变[2]。AMI后心室重构是一种复杂的多因素参与调节的动态过程,包括血流动力学负荷改变,神经内分泌激素的激活,氧化应激与自由基生成、醛固酮、炎性细胞因子、基质金属蛋白酶等多方面的作用[3]。中医药治疗心肌梗死为多靶点、多途径的综合干预,并且
黄建春[5]（2014）在《17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮逆转压力超负荷大鼠心血管重构的作用及机制研究》文中指出背景：对于高血压，不单是血压升高造成心血管病危险，而应看作是多种病理生理异常构成的症候群，包括左心室重构、尿蛋白和内皮功能紊乱等，其主要病理生理学特征表现为压力超负荷（pressure overload）和心血管重构（cardiovascular remodeling），包括血管重构（vascular remodeling）和心脏重构（cardiac remodeling）。这些功能和结构改变如果不能及时有效地控制和治疗，后果将会更加复杂，甚至导致心源性猝死和心衰死亡。因此，是否能够和如何逆转高血压所致的心血管重构，已成为高血压治疗的关键，开发新的抗高血压和抗心血管重构的药物是心血管研究领域的热点之一。玉郎伞系蝶形花科植物疏叶崖豆Millettia pulchra （Benth.） Kurz var. Laxior （Dunn）Z.Wei的块根，是广西壮族的特色药材之一，具有广泛的心血管药理活性，17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮（17-methoxyl-7-hydroxy-benzene-furanchalcone，简称MHBFC）是从玉郎伞中提取的黄酮化合物，课题组前期研究证实，MHBFC在体外具有较强的清除自由基、抗凝血能力，对H2O2和缺氧/复氧所致的心肌细胞损伤有明显的保护作用，在体内具有抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用，该显着的心脏保护作用，让我们想到其对压力超负荷心血管重构是否亦有逆转作用。为此，本实验采用压力超负荷大鼠模型，研究MHBFC逆转压力超负荷大鼠心血管重构的作用及机制，为进一步的新药研发提供理论和实验依据。目的：研究MHBFC逆转压力超负荷大鼠心血管重构的作用及机制，为进一步的新药研发提供理论和实验依据。方法：雄性SD大鼠，体重130-160g。麻醉后于左肋弓下缘行纵切口，游离腹主动脉，将外径为0.7mm的小圆棒和腹主动脉平行放置，用丝线将其一起结扎，然后迅速抽出小圆棒，致使腹主动脉被缩窄到外径约0.7mm，形成腹主动脉缩窄模型，诱导心肌肥大和重构。假手术组大鼠只行手术通路，不缩窄腹主动脉，其余手术操作均和模型组相同。第一部分MHBFC对压力超负荷大鼠心血管重构的作用术后，大鼠随机分为5组，每组6只：（1）假手术组；（2）模型组；（3）Lisinopril15mg/kg组；（4）MHBFC6mg/kg组；（5）MHBFC12mg/kg组。于手术后第4天开始灌胃给药，给药容积为0.2ml/l00g体重，每天给药1次，连续6周，假手术组和模型组仅给予等量溶媒。实验最后一天，采用多通道生物信号分析系统检测血流动力学和心功能的变化，Masson’s染色和HE染色观察心血管组织病理学改变，透射电子显微镜下观察心肌超微结构变化。RT-PCR检测心肌肥大的Marker基因-心房利钠肽（atrial natriureticpeptide，ANP）的表达。第二部分：MHBFC逆转压力超负荷大鼠心血管重构的内皮机制研究实验一基于内皮素系统的作用机制研究本部分实验标本来自于实验的第一部分，分为4组：（1）假手术组；（2）模型组；（3）MHBFC6mg/kg组；（4）MHBFC12mg/kg组。收集到相关标本后，采用ELISA法测定血浆中内皮素-1（endothelin-1，ET-1）的含量，RT-PCR观察心肌组织ET-1和内皮素转化酶（endothelin converting enzyme，ECE）的表达，免疫组化法检测心肌组织内皮素A型受体（endothelin-1receptor A type，ETA）和内皮素B型受体（endothelin-1receptor B type，ETB）的表达。实验二基于eNOS-NO信号通路的作用机制研究术后，大鼠随机分为5组，每组6只：（1）假手术组；（2）模型组；（3）MHBFC12mg/kg组；（4）左旋硝基精氨酸甲酯（NG-nitro-L-argininemethyl ester, L-NAME）50mg/kg（L-NAME50）组；（5）MHBFC12mg/kg+L-NAME50mg/kg （MHBFC12+L-NAME50）组。其中第（1）-（3）组同第一部分。实验最后一天，采用多通道生物信号分析系统检测大鼠血流动力学和心功能的变化，Masson’s染色和HE染色观察心肌组织的病理学改变，免疫组化法检测心肌组织内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitricoxide synthase，eNOS）的蛋白表达，生化法检测血浆中一氧化氮（nitricoxide，NO）含量的变化。实验三基于前列环素（prostacyclin, PGI2）的作用机制研究术后，大鼠随机分为5组，每组6只：（1）假手术组；（2）模型组；（3）MHBFC12mg/kg组；（4）吲哚美辛（indomethacin）2mg/kg（Indo2）组；（5）MHBFC12mg/kg+Indo2mg/kg（MHBFC12+Indo2）组。其中第（1）-（3）组同第一部分。实验最后一天，采用多通道生物信号分析系统观察血流动力学和心脏功能的变化，Masson’s染色和HE染色观察心肌组织病理学改变，ELISA法检测血浆中PGI2含量的变化。结果：第一部分MHBFC对压力超负荷大鼠心血管重构的作用1.血压的变化：实验期间，假手术组大鼠尾动脉收缩压（systolic bloodpressure，SBP）基本保持稳定，模型组大鼠尾动脉SBP呈时间依赖性增加。经MHBFC6，12mg/kg治疗后，自试验第4周起，大鼠尾动脉SBP明显降低（P＜0.05或P＜0.01vs model group）。缩窄腹主动脉6周后，与假手术组相比，模型组大鼠颈动脉收缩压（aorta systolic blood pressure，ASBP）、颈动脉舒张压（aorta diastolic blood pressure，ADBP）和颈动脉平均动脉压（aorta mean blood pressure，AMBP）均明显增高（P＜0.01）。经MHBFC6，12mg/kg治疗后，大鼠颈动脉ASBP、ADBP和AMBP呈剂量相关性降低（P＜0.05或P＜0.01vs model group）。2.心功能的改变：缩窄腹主动脉6周后，模型组大鼠的左室收缩压（leftventricular systolic pressure, LVSP）、左室压力最大上升速率（maximal rate ofleft ventricular systolicpressure，+dp/dtmax）和左室压力最大下降速率（maximalrate of left ventriculardiastolic pressure，-dp/dtmax）均明显增加（P＜0.01vssham group），而左室舒张末期压（left ventricular end diastolic pressure，LVEDP）明显降低（P＜0.01vs sham group）。而经MHBFC6，12mg/kg治疗后，大鼠的心室舒缩功能明显改善（P＜0.05或P＜0.01vs model group）。3.心血管重构的程度：缩窄腹主动脉6周后，与假手术组相比，模型组大鼠的全心指数（heart weight/body weight，HW/BW）、左心指数（leftventricular weight/body weight，LVW/BW）、右心指数（right ventricularweight/body weight，RVW/BW）和肺指数（lung weight/body weight，LW/BW）均明显增加（P＜0.01），表明模型大鼠的心脏发生了大体上的重构。模型组大鼠心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数（collagen volume fraction，CVF）、心肌血管周围胶原面积（perivscular collagen area，PVCA）和心肌组织羟脯氨酸（hydroxyproline）的含量均明显增加（P＜0.01vs sham group）。血管HE染色检测结果发现，模型组大鼠腹主动脉的管腔总面积（lumenarea，LA）、血管总面积（total aorta area，TAA）、血管管壁横截面积（aortacross-section area，ACSA）、ACSA/TAA、血管平均直径（aorta diameter，AD）、血管管壁平均厚度（Media）、血管腔平均直径（Lumen）以及Media/Lumen等均明显增加（P＜0.01vs sham group），表明模型组大鼠的主动脉发生了明显的重构。另外，模型组大鼠心肌组织ANP mRNA的表达明显上调（P＜0.01vs sham group）。经MHBFC6，12mg/kg治疗后，心脏指数和肺指数明显降低，可明显抑制心肌细胞横截面积的增加，抑制CVF、PVCA和羟脯氨酸含量的升高（P＜0.05或P＜0.01vs model group），下调大鼠心肌组织ANP mRNA的表达（P＜0.05或P＜0.01vs modelgroup）。心肌超微结构检测发现，模型组大鼠心肌细胞发生了亚细胞结构的重构，表现为线粒体数量和体积的增加，经过MHBFC12mg/kg治疗后，大鼠心肌纤维呈有序地平行排列，肌小节由Z线均匀分隔，线粒体的形状呈较规则的卵圆形，且呈列分布在肌纤维之间，提示MHBFC可一定程度改善这种亚细胞结构的重构。第二部分MHBFC逆转大鼠心血管重构的内皮机制研究实验一基于内皮素系统的作用机制研究缩窄腹主动脉6周后，与比假手术组相比，模型组大鼠血浆ET-1的含量明显升高（P＜0.01），心肌组织ET-1mRNA、ECE mRNA、ETA和ETB的表达均明显上调（P＜0.05或P＜0.01）。MHBFC6，12mg/kg治疗6周后，可明显抑制大鼠血浆ET-1的升高，下调大鼠心肌组织ET-1mRNA、ECE mRNA、ETA和ETB的表达（P＜0.05或P＜0.01vs model group）。血浆NO含量检测发现，模型组大鼠血浆NO含量明显低于假手术组（P＜0.01）。MHBFC6，12mg/kg可明显提高血浆中NO含量（P＜0.05或P＜0.01vs model group），并且血浆中NO的含量与RVW/BW、心肌羟脯氨酸含量、尾动脉SBP均呈现明显的负相关。实验二基于eNOS-NO信号通路的作用机制研究1.血压的变化：实验期间，L-NAME组大鼠尾动脉SBP随时间逐渐升高，与同期模型组的SBP相比有显着性差异（P＜0.05或P＜0.01）。与L-NAME组相比，合用MHBFC12mg/kg后，在第2、4、6周均能降低大鼠尾动脉SBP（P＜0.05或P＜0.01）。2.心功能的改变：L-NAME组大鼠心室的收缩功能明显增强，而心室的舒张功能和顺应性明显降低（P＜0.01vs sham group）。合用MHBFC12mg/kg后，能明显降低ASBP和LVSP （P＜0.01vs L-NAME group），改善心肌的顺应性。3.心脏重构的程度：缩窄腹主动脉6周后，L-NAME组大鼠的LVW/BW和RVW/BW明显增加，心肌细胞横截面积亦明显增加（P＜0.05或P＜0.01vs sham group），合用MHBFC12mg/kg后能明显改善心肌细胞的肥大（P＜0.01vs L-NAME group）。另外，L-NAME组大鼠心肌纤维化程度、心肌组织羟脯氨酸的含量明显增加（P＜0.01vs sham group），提示L-NAME诱发了比模型组更严重的胶原沉积，合用MHBFC12mg/kg可明显改善L-NAME导致的心肌纤维化，明显抑制心肌组织羟脯氨酸含量的增加（P＜0.01vs L-NAME group）。4. eNOS-NO的改变：缩窄腹主动脉6周后，模型组大鼠心肌组织的eNOS蛋白表达水平与假手术组相比明显下调（P＜0.01），经过MHBFC12mg/kg治疗后，eNOS蛋白表达水平明显增加（P＜0.01vs model group）。L-NAME组大鼠心肌组织的eNOS蛋白表达被明显抑制，合用MHBFC12mg/kg后能明显提高被抑制的eNOS蛋白的表达（P＜0.01vs L-NAMEgroup）。L-NAME组大鼠血浆中的NO含量明显下降，合用MHBFC12mg/kg治疗后能明显增加血浆中NO的含量（P＜0.01vs L-NAME group）。实验三基于前列环素（prostacyclin，PGI2）的作用机制研究1.血压的变化：缩窄腹主动脉6周后，Indo2组大鼠的尾动脉SBP呈时间依赖性升高，ASBP也明显增加，合用MHBFC12mg/kg后能明显改善Indo诱导的高血流动力学状态（P＜0.05或P＜0.01vs Indo2group）。2.心功能的改变：缩窄腹主动脉6周后，Indo2组大鼠的心脏收缩功能明显增加，心肌的顺应性明显下降，合用MHBFC12mg/kg后能明显抑制Indo引起的心肌收缩力的提高，改善心肌的顺应性。3.心脏重构的程度：缩窄腹主动脉6周后，Indo2组大鼠的HW/BW、LVW/BW和RVW/BW明显增加（P＜0.01vs sham group），心肌细胞横截面积亦明显增加，合用MHBFC12mg/kg后能明显改善心肌细胞的肥大（P＜0.01vs Indo2group）。Indo2组大鼠心肌组织的CVF、PVCA和羟脯氨酸含量明显增加（P＜0.01vs sham group），合用MHBFC12mg/kg后能明显抑制CVF和PVCA的恶化（P＜0.05或P＜0.01vs Indo2group），明显抑制心肌组织羟脯氨酸含量的增高（P＜0.01vs Indo2group）。4. PGI2含量的变化：缩窄腹主动脉6周后，模型组大鼠血浆中PGI2含量明显降低（P＜0.01vs sham group），经MHBFC12mg/kg治疗后能明显提高血浆中PGI2的含量（P＜0.01vs model group）。Indo2组大鼠血浆PGI2的含量亦明显降低，合用MHBFC12mg/kg后能明显提高血浆中PGI2的含量（P＜0.01vs Indo2group）。结论：1. MHBFC6，12mg/kg可明显逆转压力超负荷大鼠的心血管重构，并且这种逆转作用呈一定的剂量依赖性；2. MHBFC逆转心血管重构的作用机制可能与其恢复内皮细胞的分泌功能密切相关，表现为增加NO和PGI2的分泌，抑制ET-1的合成与分泌，抑制内皮素系统的活化。
黄小芳[6]（2014）在《补阳还五汤对心肌梗死后心肌细胞凋亡及5-LOX表达的影响》文中提出背景心梗后心室重构（Ventricular remodeling,VR）是指急性心肌梗塞（Acute myocardial infarction,AMI）后心脏在受到损伤或超负荷状态下,出现复杂的分子信号的改变和胚胎基因及蛋白的再表达,从而造成心肌细胞适应不良性肥大、心肌细胞凋亡和心肌细胞外基质纤维化,引起心室大小、形态、组织结构及功能形态等发生一系列的改变,在临床上表现为心室肥厚,心室容量的增加和心室结构的改变。心梗后心室重构进一步发展可导致心衰、猝死,是并发室性心律失常及充血性心衰甚至心源性死亡的最重要的危险因素之一。心肌细胞凋亡在心室重构中起着重要的作用,抑制凋亡可延缓心力衰竭的发展。过去认为,梗死区心肌细胞的死亡形式主要是坏死,而最近研究结果证实,有更多的心肌细胞是凋亡。研究发现细胞凋亡广泛存在于梗死区、非梗死区,其发生机制与机械应力、神经激素系统、炎症细胞因子、氧化物、一氧化氮等多种诱导凋亡刺激物密切相关,心肌凋亡的意义不仅在于扩大心肌梗死范围,亦触发启动心室重构。梗死区大量心肌细胞凋亡,心肌细胞数量急剧减少,心肌细胞间失去正常的紧密连接,局部室壁变薄,在内压作用下引起心肌细胞束间的侧向滑移,从而导致梗死区膨出,之后,各种因素导致非梗死区心肌细胞持续凋亡,心肌细胞产生侧滑移,导致左心室进行性离心性肥厚、扩张,非梗死区心肌细胞凋亡与晚期重塑互为因果,促进心功能不断恶化。5-LOX是催化花生四烯酸（Arachidonic acid,AA）代谢的关键酶,能催化AA转化为白三烯。白三烯是许多炎症和过敏性疾病的重要介质,也被认为与心血管疾病密切相关[1]。局部缺血病人的白三烯合成增加,白三烯能导致粒细胞和单核细胞在血管内皮积聚和活化,损伤血管内皮细胞,增加血管渗透性,进一步加重组织缺血缺氧,促进细胞凋亡。目前对5-LOX途径的功能研究发现其在哮喘、动脉粥样硬化型心脏病及心肌缺血再灌注损伤等病理过程中发挥重要的作用。在动脉粥样硬化疾病中,人及ApoE-/-小鼠的动脉粥样斑块中均检测到5-LOX表达升高,敲除ApoE-/-小鼠5-LOX基因后可以显着降低粥样斑块的形成[2-4]。5-LOX基因多态性被认为与动脉粥样硬化高度相关,是动脉粥样硬化的发生的危险因素[5]。在心肌再灌注损伤中,RNA干扰5-LOX能抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞坏死[6]。此外,抑制5-LOX还能抑制肾脏及脑的缺血再灌注损伤[7,8]。可见,5-LOX在缺血性疾病诱导的细胞损伤中起了重要作用。细胞凋亡是由细胞内凋亡相关基因直接控制,受细胞外信号影响的有着复杂的分子调控机制的一种细胞死亡形式。近年的研究认为,急性心肌梗死（AMI）心肌细胞的死亡不但有坏死,还有凋亡的参与[9]。凋亡受多种基因调控,其中Bax和Bcl-2分别是促进抑制凋亡的基因[10]。关于Bax和Bcl-2蛋白在细胞凋亡中的相互作用,目前认为两者是一对正负调节因子[11],Bcl-2基因通过其表达产物Bcl-2蛋白和Bax蛋白形成二聚体来终止细胞凋亡的发生。少量Bax蛋白与低水平的Bcl-2蛋白即可形成Bcl-2/Bax异源二聚体,从而终止细胞凋亡的发生,反之若Bax蛋白水平较高,则形成较多Bax同源二聚体,从而加速细胞凋亡的发生,Bax/Bcl-2蛋白比值增高促进细胞凋亡的发生,比值下降抑制细胞凋亡[12]。补阳还五汤出自清代王清任的《医林改错》是益气活血法的代表方,其重用黄芪为君,补元气使气旺血行,周流全身;川芎、赤芍、归尾为臣,养血行血;桃仁、红花为佐,破结散瘀;地龙为使,通利经络。广泛用于心脑血管病治疗[13]。我们以往的研究结果表明,补阳还五汤能显着改善左室结构及功能,抑制间质区胶原沉积,抑制心肌细胞凋亡,减少心肌纤维化。而心肌细胞凋亡在心梗后心室重构的发生发展中起到重要的作用。近期本课题组采用数字基因表达谱分析（Digital Gene Expression analysis,DGE）对结扎冠状动脉模型大鼠基因表达的变化进行研究。我们的前期研究发现:白三烯途径的重要调控分子5-脂氧合酶（5-lipoxygenase,5-LOX）、白三稀 C4 合酶（Leukotriene C4 synthase,LTC4S）、半胱氨酰白三烯受体 2（Cysteinyl leukotriene receptor 2,CysLT2R）表达显着升高。我们还采用DGE分析对补阳还五汤抗心梗后心室重构的作用靶点进行研究。发现补阳还五汤能抑制心梗后大鼠心肌5-LOX、LTC4S、CysLT2R的表达。因此我们推测5-LOX/CysLT2R途径可能是补阳还五汤的作用靶点。补阳还五汤抗心梗后心室重构、抑制心肌细胞凋亡的机制值得我们进一步研究。目的本研究旨在探讨补阳还五汤对心肌梗死后心室重构心肌细胞凋亡及5-LOX表达的影响。从而为心梗后心室重构的发病机制提供新的思路,为补阳还五汤防治心梗后心室重构提供新的作用靶点。方法1.大鼠心肌梗死模型制作与分组选用SPF级雄性Wistar大鼠,结扎左冠状动脉主干造成心肌梗塞模型。造模后1周将心梗模型大鼠随机分成3组:补阳还五汤组:补阳还五汤水煎液18.5 g/（kg·d）（生物等效剂量）灌胃;模型对照组、假手术组。假手术组和模型对照组予正常饮水。连续给药12周。于第12周末,水合氯醛麻醉大鼠,经腹主动脉注射10%KCl注射液处死,4%中性甲醛固定心肌。2.大鼠心肌组织TUNEL染色TUNEL染色:将切片脱蜡、水化,洗涤后吸去水分,加入反应液（TdT酶和-dUTP）反应,再次洗涤,用FITC反应液标记,经过PI复染后封片。镜下观察,凋亡细胞呈现出黄棕色。3.Western blot法检测心肌组织中相关蛋白表达在各组蛋白样品中加入上样缓冲液,10%SDS-PAGE电泳,转膜,脱脂奶粉封闭 60min,加入 5-LOX、Bax、Bcl-2、β-actin 多克隆抗体,4℃孵育过夜,1×TBST液洗涤3次,5min/次,加入二抗,37℃孵育90min,1×TBST液洗涤3次,5min/次。ECL化学发光试剂盒显色,Kodak全光谱多功能活体成像系统曝光。Image tool V3.0图像分析软件读取条带灰度值。实验重复3次。4.乳鼠原代心肌细胞培养及分组原代乳鼠心肌细胞经分离、纯化,用完全培养基（10%FBS的高糖IMDM）培养于孵箱中。心肌细胞培养的第3天,吸去原有培养基,改用2%FBS的IMDM高糖培养基配制药物分为以下5组:对照组（Control）:2%血清心肌细胞培养液培养24h后换液;H2O2组:2%血清心肌细胞培养液培养24h后添加终浓度l00μmol/L 的 H2O2 作用 30min;低剂量（1mg/ml）、中剂量（2mg/ml）、高剂量（4mg/ml）补阳还五汤组:2%血清心肌细胞培养液预先添加上述剂量补阳还五汤培养24h后加入终浓度100μmol/L的H2O2作用30min。5.MTT法检测细胞活力MTT法检测不同浓度H2O2对心肌细胞活力的影响及补阳还五汤预处理对H202诱导的心肌细胞活力的影响。按照5×103/ml浓度将细胞接种于96孔板,按实验分组给予相应处理因素。细胞处理完后,弃去培养液,加入IMDM培养液（100μL）和含0.5%MTT的培养液（10μL）孵育4h后,弃培养液,每孔加入DMSO 150μL,微孔振荡器上振荡10min使蓝紫色结晶甲瓒充分溶解,用酶标仪检测波长550nm处吸光度（OD值）。心肌细胞活力=干预组OD/对照组OD值×100%。活细胞数与OD值成正比。每组设5个复孔,取其平均值。实验重复3次。6.Annexin V-FITC/PI染色法检测补阳还五汤对H2O2诱导的心肌细胞凋亡心肌细胞按照实验分组处理后,用胰酶将贴壁细胞消化,收集悬浮液,250g离心5min,弃培养基;用冷PBS洗涤细胞两次;用400ul 1×Binding Buffer悬浮细胞,浓度大约为1×105 cells/ml;在细胞悬浮液中加入5ul Annexin V-FITC;轻轻混匀后于2-8℃避光条件下孵育15min。加入10ul PI后轻轻混匀于2-8℃避光条件下孵育5min;在1h内用荧光显微镜检测,Annexin V-FITC荧光信号呈绿色,PI荧光信号呈红色。7.流式细胞术检测心肌细胞调亡心肌细胞按照实验分组处理后,用不含EDTA的胰酶消化收集,然后用PBS洗涤细胞 2 次（250g 离心 5min）,收集细胞,以 Annexin V-FITC/Propidium Iodide进行染色,室温、避光、反应15min,加入500μL的Binding Buffer悬浮细胞,再加入5μL Annexin V-FITC于细胞悬液中,用移液器轻轻混匀,再加入5μL Propidium Iodide,轻轻混匀;室温、避光、反应5-15min,上流式细胞仪（激发波长488nm,发射波长530nm）进行检测。Annexin V-FITC的绿色荧光通过FTTC通道（FL1）检测;PI红色荧光通过PI通道。使用未经调亡诱导处理的正常细胞,作为对照进行荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。分别计算调亡细胞及坏死细胞占总细胞的比率,实验重复3次。8.Western blot检测原代心肌细胞5-LOX、Bax、Bcl-2、GAPDH蛋白的表达心肌细胞按照实验分组处理后,RIPA裂解液提取心肌细胞中的蛋白,离心。BCA法测定提取上清液中的蛋白质浓度,在各组蛋白样品中加入上样缓冲液,其他步骤同前。9.统计方法采用SPSS 20.0统计软件进行分析,所有数据均采用均数±标准差（x±S）表示,各组均数比较使用one-way ANOVA。方差齐时,组间比较用Bonferroni;方差不齐时,用Welch稳健估计,再用T3方法两两比较。P<0.05表示差异具有统计学意义。结果1.TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡结果镜下观察补阳还五汤组黄棕色凋亡细胞数量较模型组明显减少;补阳还五汤组细胞凋亡指数与模型组比较显着降低（P<0.01）。2.Western blot法检测心肌组织中相关蛋白表达结果模型对照组中5-LOX蛋白表达明显比假手术组升高。补阳还五汤治疗组与模型对照组相比,均可明显降低心肌梗死后心肌组织中5-LOX蛋白表达,且各组之间差异具有统计学意义。同样,Bax蛋白在心肌组织中表达与5-LOX呈现同样趋势。相反,补阳还五汤治疗组Bcl-2蛋白表达则较模型对照组升高。总的来说,补阳还五汤治疗后可以降低5-LOX蛋白表达;还可降低Bax蛋白表达,提高Bcl-2蛋白表达,从而提高Bcl-2/Bax比率。3.MTT法检测细胞活力MTT法检测不同浓度H2O2对心肌细胞活力的影响结果显示:各H2O2组的心肌细胞存活率较正常对照组明显下降;相同的作用时间下,随着H2O2浓度的上升,细胞的存活率呈下降的趋势;100μmol/L的H2O2刺激30min后心肌细胞的存活率降低程度适中,与正常对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）。MTT法检测补阳还五汤预处理对H2O2诱导的心肌细胞活力的影响结果显示:模型组细胞活性低于正常对照组;补阳还五汤低剂量组预处理后与模型组相比无差异（P>0.05）,中剂量组和高剂量组与模型组均有差异（P<0.01）。中、高剂量补阳还五汤能显着抑制H2O2诱导的心肌细胞活力降低,以高剂量组效果最佳,与H2O2组比较差异有统计学意义（P<0.01）。4.Annexin V-FITC/PI 染色实验结果显示,正常对照组中未见明显红、绿色荧光,H202组中绿色和红色荧光明显增多,不同浓度补阳还五汤治疗组中均出现不同程度的红、绿色荧光,程度较H2O2组减轻,且随着补阳还五汤浓度的增高,红、绿色荧光程度逐渐减轻,以补阳还五汤高剂量组程度最轻,提示补阳还五汤可以减轻H2O2诱导的心肌细胞凋亡,以补阳还五汤高剂量组效果最好。5.流式细胞术检测心肌细胞凋亡结果采用流式细胞术分析心肌细胞的凋亡分布改变,结果发现,H2O2组心肌细胞凋亡率高于正常对照组;与H2O2组比较,补阳还五汤各剂量组心肌细胞凋亡率显着降低,呈一定的剂量相关性。6.Western blot检测心肌细胞蛋白表达H202组中5-LOX蛋白表达明显高于正常对照组,补阳还五汤各剂量组均能抑制H2O2诱导的心肌细胞5-LOX表达增加,具有剂量依赖性,与H202组比较差异有统计学意义（P<0.01）。H2O2组中检测心肌细胞Bax蛋白表达明显高于正常对照组,Bcl-2蛋白表达低于正常对照组。补阳还五汤各剂量组心肌细胞中Bax蛋白表达明显低于H2O2组,且Bax蛋白表达与补阳还五汤浓度呈反比,随着补阳还五汤浓度升高,Bax蛋白表达逐渐下降;补阳还五汤各剂量组Bcl-2蛋白表达明显高于H202组,（P<0.01）,且Bcl-2蛋白表达与补阳还五汤浓度成正比,随着补阳还五汤浓度升高,Bcl-2蛋白表达逐渐上升。结论补阳还五汤可抑制5-LOX的表达,并能下调促凋亡蛋白Bax的表达,上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,提高Bcl-2/Bax比率,抑制心肌梗死后心肌细胞凋亡。因此,我们认为,补阳还五汤可以保护心肌细胞,减轻心肌细胞凋亡,从整体—细胞—蛋白质不同层次干预心肌梗死后心室重构的病理过程,延缓心室重构的进展。
朱林平,李侠,曹旭焱,刘长玉,杜武勋[7]（2012）在《心室重构的中药治疗研究》文中研究表明目前认为心室重构是多种疾病发生心力衰竭的主要病理基础,众多研究显示中药可在多方面干预或逆转心室重构,其独特优势在心室重构的综合防治方面将起到越来越重要的作用,文章将就临床常用中药单药及中药制剂在心室重构的防治研究方面做一概述。
林色奇,韩晶岩,刘红宁[8]（2011）在《芪参益气滴丸及其组成中药抗缺血再灌注损伤的研究进展》文中研究表明目的:了解芪参益气滴丸临床和实验研究概况,为深入研究该方作用机制提供借鉴。方法:检索芪参益气滴丸的临床和实验文献,以及芪参益气滴丸组成中药对心肌缺血再灌注损伤作用的文献,归纳总结芪参益气滴丸主要临床作用及可能的药理机制与配伍规律。结果:芪参益气滴丸临床主要应用于多种心血管疾病的治疗,并获得较好的临床疗效,少量报道应用于特发性肺纤维化、慢性乙型肝炎等治疗;药理机制的研究主要集中在以急性心肌缺血为动物模型进行研究;芪参益气滴丸4味配伍中药单独应用对心肌缺血再灌注损伤模型均有一定影响,并有一些相似的分子生物学机制。结论:芪参益气滴丸临床对多种心血管疾病确有疗效,其作用机制研究也取得了一定进展,但仍有很多不确定的地方需要深入研究。
尹慧秋[9]（2009）在《舒脉胶囊对缺血心肌大鼠促血管新生及改善左室重构作用的实验研究》文中认为第一部分舒脉胶囊对心肌缺血大鼠促血管新生的研究背景目前,缺血性心脏病使全世界数百万人经受着病痛的折磨。改善心肌缺血在缺血性心脏病的防治研究中具有重要意义。治疗性血管新生可促进缺血组织周边侧支循环的建立,心脏冠脉侧支循环的形成和开放能改善心肌缺血、坏死,延缓缺血性心肌病的形成,改善患者的临床症状和预后,已成为心血管研究领域的热点之一。冠心病的中西医结合防治研究也已从单纯改善病变血管供血转向同时促进侧支循环的建立。中医药益气化瘀的治疗法则及其临床有效性,为中西医结合促血管新生的研究提供了理论和临床依据。特异性内皮细胞丝裂原血管内皮生长因子（VEGF）家族在血管新生过程中起关键作用。但是,通过单一促血管生成因子诱导产生的新生血管结构以内皮细胞（EC）为主,没有血管平滑肌细胞（VSMC）和周细胞包被形成完整的动脉中膜结构,因此血管容易出血渗出,亦无法输送血流,最终会导致新生血管退化。而血小板衍生生长因子（PDGF）家族成员尤其是PDGF-BB是作用很强的促动脉生成因子,主要作用于血管壁细胞包括周细胞和VSMC。PDGF-BB与细胞表面的酪氨酸蛋白激酶受体结合,募集周细胞和VSMC包绕新生血管网络形成完整的血管结构从而发挥稳定血管的作用。血管生成（angiogenesis）和动脉生成（arteriogenesis）都有助于心脏的血管新生,但对于改善心肌血流量,动脉生成是最重要的过程。PI3K/Akt信号通路激活在介导生长因子促血管新生的作用已引起重视。PI3K/Akt通过诱导VEGF的表达达到促血管新生的作用。抑制PI3K/Akt信号通路活性可降低VEGF、PDGF受体VEGFR2及PDGFR活性及其作用底物的磷酸化。随着中西医结合的发展,中药在心血管疾病的防治中的作用越来越受到重视。既往研究表明中药单体成分及复方制剂可不同程度的促进VEGF、bFGF等mRNA及蛋白的表达,从而促进血管新生。但中药对信号通路介导促血管新生的分子机制的研究及对促动脉生成因子的研究仍属崭新的研究领域。舒脉胶囊是导师根据多年的临床经验研制而成,是大量应用于临床治疗缺血性心脏病的中药复方制剂。本研究通过对心肌缺血（Myocardial ischemia,MI）大鼠缺血心肌组织学、形态学改变的观察,通过超声心动图分析左室心功能,通过实时定量RT-PCR技术检测缺血心肌VEGF、PDGF-BB mRNA的表达,以及通过Western blot检测缺血心肌磷酸化PI3K/Akt、VEGF、PDGF-BB的蛋白表达的改变,通过免疫组化检测缺血心肌微血管密度,探讨舒脉胶囊在缺血心肌中促血管新生的作用,并探讨其信号调控机制,为其临床防治缺血性心血管疾病提供更为可靠的科学依据。目的1.通过观察舒脉胶囊对实验性大鼠缺血心肌组织学、形态学及心功能改变,及对毛细血管与微动脉的新生的影响,探讨舒脉胶囊促血管新生的疗效。2.观察舒脉胶囊对大鼠缺血心肌磷酸化PI3K、Akt蛋白表达,及VEGF、PDGF-BB的蛋白及mRNA表达影响,探讨舒脉胶囊促进稳定而有功能的血管新生的信号调控机制。方法1.研究对象建立大鼠心肌缺血实验模型Wistar大鼠结扎左冠状动脉前降支建立心肌缺血模型。造模成功的大鼠随机分为舒脉大剂量/LY294002组（SMCH/LY）、舒脉小剂量组（SMCL）、舒脉大剂量组（SMCH）、贝复济组（bFGF）、模型组（MIR）;另设假手术组（Sham）。每组24只,2周、4周每个时间段各12只。SMCH组灌胃给予舒脉胶囊1.71g/（kg.d）（相当于临床用量的30倍）,SMCL组灌胃给予舒脉胶囊342mg/（kg.d）（相当于临床用量的6倍）,SMCH/LY组灌胃给予舒脉胶囊1.71g/（kg.d）（相当于临床用量的30倍）,腹腔注射给予PI3K抑制剂LY294002（0.3mg/kg,溶解于双蒸水中,每3天给药一次）,bFGF组给予贝复剂（bFGF）,于开胸结扎冠脉后立即在结扎处周围予bFGF心肌注射1次（125IU）,术后始皮下注射肝素1250U/kg,每日1次,连续5天。MIR组和Sham组分别灌胃给予等量蒸馏水。灌胃给药大鼠,均为每日1次,连续给药2周和4周。末次给药后禁食24 h,不禁水。10%水合氯醛,300mg/kg,腹腔注射麻醉后进行后续实验。2.研究内容（1）心功能检测;（2）Western blot检测缺血心肌VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达;（3）实时定量RT-PCR（Real-time Quantitative RT-PCR）检测缺血心肌VEGF、PDGF-BB mRNA表达;（4）检测缺血心肌微血管密度（小静脉:vWF免疫组化染色法,小动脉:αSMA免疫荧光染色法）;（5）Masson染色检测缺血心肌胶原含量的变化。结果1.心功能检测治疗第2周后,SMCH、SMCL、bFGF组的左室射血分数（LVEF）较MIR组显着增高（P＜0.05）;SMCH与SMCL、bFGF组比较差异无显着性意义（P＞0.05）。SMCH、SMCL、bFGF组左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室舒张末期内径（LVEDD）较MIR组显着降低（P＜0.05）。应用SMCH+LY294002（SMCH/LY）较MIR组LVEF、LVESD、LVEDD无显着性差别（P＞0.05）。进一步组间两两比较发现,应用大剂量舒脉胶囊组（SMCH）明显高于SMCH/LY组（P＜0.05）以及Sham组（P＜0.05）、MIR组（P＜0.05）。SMCH组较bFGF组或应用小剂量舒脉胶囊组（SMCL）LVEF、LVESD、LVEDD无显着性差异（P＞0.05）。治疗第4周后,SMCH、SMCL、bFGF组的LVEF较MIR组显着增高（P＜0.05）;LVESD、LVEDD较MIR组显着降低（P＜0.05）。但应用SMCH+LY（LY294002）较MIR组LVESD、LVEDD无显着性差异（P＞0.05）;但LVEF较MIR组升高。进一步两两比较分析,SMCH组与bFGF组差别无统计学意义,SMCH治疗组较SMCL或SMCH/LY的LVEF、LVEDD显着增高（P＜0.05）。SMCH组较SMCL组LVESD无显着性差别（P＞0.05）。2.Western blot检测分析治疗第2周后,SMCH、SMCL、bFGF组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达较MIR组显着升高（P＜0.05）。SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达与MIR组差异无显着性意义（P＞0.05）。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组与bFGF组或SMCL组之间差别无统计学意义（P＞0.05）。SMCH组较SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达明显增高。治疗第4周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达较MIR组显着升高（P＜0.005）。SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达与MIR组差异无显着性意义（P＞0.05）。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组较bFGF组或SMCL组或SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白增高。与治疗2周后比较,SMCH组、SMCL组、bFGF组治疗4周后VEGF、PDGF-BB、PI3K、p-Akt蛋白表达降低。3.实时定量RT-PCR（Real-time Quantitative RT-PCR）检测治疗第2周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组VEGF、PDGF-BB mRNA表达较MIR组显着升高（P＜0.05）。SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB mRNA表达与MIR组差异无显着性意义（P＞0.05）。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组与bFGF组或SMCL组之间差别无统计学意义（P＞0.05）。SMCH组较SMCH/LY组VEGF、PDGF-BBmRNA明显增高（P＜0.05）。治疗第4周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组VEGF、PDGF-BB mRNA表达较MIR组显着升高（P＜0.05）。SMCH/LY组VEGF、PDGF-BBmRNA表达与MIR组差异无显着性意义（P＞0.05）。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组较SMCL组或SMCH/LY组VEGF、PDGF-BB mRNA增高。与治疗2周后比较,SMCH组、SMCL组、bFGF组治疗4周后VEGF、PDGF-BB mRNA表达降低。4.缺血心肌微血管密度（小静脉、小动脉）的测定治疗2周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组的毛细血管密度均较MIR组明显增高。SMCH/LY组毛细血管密度与MIR组差异无显着性意义（P＞0.05）。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组与bFGF组之间差别无统计学意义。SMCH组（36.93±5.49）较SMCH/LY组毛细血管密度明显增高。SMCH组、SMCL组、bFGF组的小动脉密度均较MIR组（17.76±5.19）明显增高。SMCH/LY组小动脉密度与MIR组差异无显着性意义。组间两两比较分析表明,SMCH组的小动脉密度显着高于SMCL（P＜0.05）或SMCH/LY（P＜0.05）组以及Sham组（9.44±2.68）（P＜0.05）。SMCH组与bFGF组之间差别无统计学意义（P＞0.05）。治疗4周后,SMCH组、SMCL组、bFGF组的毛细血管密度均较MIR组明显增高（P＜0.05）。SMCH/LY组毛细血管密度与MIR组差异无显着性意义。进一步组间两两比较分析表明,SMCH组毛细血管密度较SMCH/LY组、SMCL组、bFGF组明显增高（P＜0.05）。SMCH组、SMCL组、bFGF组的小动脉密度均较MIR组明显增高（P＜0.05）。组间两两比较分析表明,SMCH组的小动脉密度显着高于SMCL（P＜0.05）或SMCH/LY（P＜0.05）组以及Sham组（P＜0.05）。PI3K抑制剂LY294002显着抑制了舒脉胶囊所致的毛细血管和微动脉的新生,说明PI3K信号通路介导舒脉胶囊促血管新生。5.Masson染色检测缺血心肌胶原含量的变化光镜下Masson染色显示,心肌细胞染色呈黄色,间质胶原呈蓝绿色。治疗2周后,MIR组大鼠缺血心肌肌原纤维间隙明显增宽,排列紊乱,心肌细胞肥大,可见局灶性肌丝溶解。心肌梗死区及非梗死区均可见大量胶原纤维沉积。粗大胶原纤维相互连接成网状,排列紊乱,分布不匀;Sham组大鼠心肌组织未见胶原纤维增生,心肌细胞排列整齐,明暗带清晰,形态结构正常。SMCH、SMCL、bFGF组大鼠心肌肌原纤维和肌丝排列有序,形态较为正常,胶原纤维分布比较均匀、纤细,心肌间质纤维化较MIR组明显减少,但并不能完全阻止其发生。进一步两两比较分析,SMCH组较SMCL组和bFGF组心肌间质胶原含量差异无显着性意义。SMCH/LY组心肌间质纤维化面积与SMCH组比较组明显增加。结论1.本研究首次证明舒脉胶囊对心肌缺血（MI）大鼠具有显着的促血管新生疗效,改善MI大鼠心功能。表现为微血管密度（小动脉、小静脉）的增加,心功能指标LVEF的提高,LVESD、LVEDD降低。且舒脉胶囊的疗效具有剂量依赖性。证实了舒脉胶囊通过对缺血心肌促血管新生作用达到了改善心功能的终极目标。2.与MIR组比较,舒脉胶囊单独治疗显着提高了缺血心肌VEGF、PDGF-BB的表达水平,及磷酸化PI3K、Akt蛋白的表达水平。证实舒脉胶囊促毛细血管与微动脉新生的作用是通过促进VEGF、PDGF-BB、及磷酸化PI3K、Akt蛋白的表达实现的。3.与舒脉胶囊单独治疗比较,PI3K抑制剂（LY294002）和舒脉胶囊联合治疗显着抑制PI3K/Akt信号通路的活性,同时明显抑制舒脉胶囊促VEGF、PDGF-BB的高表达,及降低舒脉胶囊促毛细血管与微动脉新生的作用。证实舒脉胶囊促血管新生的分子机制是通过激活PI3K/Akt信号通路介导VEGF、PDGF-BB的表达、促进VEGF、PDGF-BB介导的毛细血管以及稳定的侧支循环的建立。第二部分舒脉胶囊改善心肌缺血大鼠左室重构的研究背景左室重构（left ventricular remodeling,LVR）是心脏功能由代偿向失代偿转变阶段所发生的心脏结构与形态的改变。左室重构不仅使心肌梗死患者左室功能严重受损,并发症增多,而且死亡率亦明显增加,因此抗心室重构已成为当前心血管领域中最为重要的研究内容之一。而心肌纤维化是左室重构发展的重要因素。血浆与心肌中致炎细胞因子与心肌纤维化和左室重构的病情发展密切相关。在AMI急性期存在炎症反应增强,早期即可发生心室重构,抗炎治疗可以减轻心室重构。肿瘤坏死因子-alpha（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）被认为是致炎细胞因子中最为重要的导致基质纤维化的细胞因子。TNF受体（TNFR）基因敲除小鼠与组织基质金属蛋白酶抑制因子-1（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1）的上调相关,并通过TIMP-1抑制胶原降解,促进纤维化的发展。TNF-α与CFs的增殖也有密切联系。因此抑制TNF-α的分泌对改善左室重构至关重要。炎性刺激激活细胞内许多信号转导通路,包括核因子-κB信号通路和三个通过ERK、JNK、p38MAPK调控的信号通路。p38 MAPK被认为是调控炎症的重要信号通路。体内外研究证实在缺血与其它病理条件下,心肌内p38 MAPK被激活。激活的p38 MAPK促进心肌内分泌足够的TNF-α,从而促进心肌纤维化和心室重构。选择性的应用p38MAPK抑制剂SB203580可抑制p38 MAPK活性,降低TNFα的分泌,并且通过逆转MMPs和TIMP-1的表达比例,降低心肌纤维化,改善心室重构。由此可以推断p38 MAPK信号通路介导的TNFα的分泌是促进心肌纤维化和左室重构的潜在的信号调控机制。有些中药已经被证实具有明显的抗炎疗效。但是,很少有中药复方对炎症因子介导的心肌纤维化和左室重构影响及其作用机制的研究。舒脉胶囊是根据中药组方原则合成的复方制剂,在临床已经多年被用于治疗缺血性心脏病。本研究通过观察心肌缺血大鼠缺血心肌组织学、形态学的病理改变及超微结构改变,通过实时定量RT-PCR,免疫组化检测缺血心肌心肌胶原Ⅰ（collagenⅠ）mRNA及蛋白的表达,免疫组化检测缺血心肌α-SMA蛋白的表达,通过Western blot检测缺血心肌p38 MAPK、TNF-α、及TIMP-1的蛋白表达,通过放免法检测血浆TNF-α的水平,并通过超声心动图检测大鼠整体与局部心功能,探讨舒脉胶囊抑制心肌缺血大鼠炎症因子TNFα介导的心肌成纤维细胞增殖、心肌纤维化和左室重构的疗效及信号调控机制。目的1.通过观察舒脉胶囊对实验性大鼠缺血心肌组织学、形态学及超微结构的改变、整体与局部心功能、α-SMA蛋白表达、及collagenⅠmRNA与蛋白表达的影响,探讨舒脉胶囊减少心肌成纤维细胞增殖、降低心肌纤维化、及改善左室重构的疗效。2.观察舒脉胶囊对实验性大鼠缺血心肌磷酸化应激激活细胞丝裂原活化蛋白激酶（p-p38 MAPK）、TNF-α、金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）-1蛋白表达的影响,探讨舒脉胶囊改善左室重构的机制。方法1.研究对象建立大鼠心肌梗死实验模型Wistar大鼠结扎左冠状动脉前降支建立心肌缺血模型。造模方法同第一部分。造模成功的大鼠随机分为舒脉大剂量组（SMCH）、舒脉小剂量组（SMCL）、p38MAPK抑制剂SB203580（SB）、模型组（MIR）;另设假手术组（Sham）。每组24只,1、6周每个时间段各12只。2.研究内容（1）超声心动检测;（2）放射免疫法检测血浆TNF-α含量;（3）Western blot检测缺血心肌磷酸化p38 MAPK（p-p38 MAPK）、TNF-α、TIMP-1蛋白表达;（4）实时定量RT-PCR检测缺血心肌collagenⅠmRNA表达;（5）免疫组化染色检测缺血心肌collagenⅠ、α-SMA蛋白表达;（6）HE染色;（7）天狼猩红染色检测胶原含量的变化;（8）透射电镜观测心肌超微结构变化。结果1.左心室整体与局部功能超声心动图分析在治疗后第1、6周时进行了超声检查。左室射血分数（LVEF）是目前临床上评价左心室整体功能最常用的指标。治疗第1周后,SMCH组、SMCL组、SB组的LVEF、BW较MIR组显着增高（P＜0.05）,而LVESD、LVEDD、LVW/BW较MIR组显着降低。局部室壁增厚率（WT）可用来反应心肌局部功能。治疗第1周后,SMCH组、SMCL组、SB组的WT较MIR组显着增高（P＜0.05）。进一步组间两两比较发现,应用大剂量舒脉胶囊组（SMCH）较小剂量舒脉胶囊组（SMCL）或SB组WT无显着性差异（P＞0.05）。治疗第6周后,SMCH组、SMCL、SB组的LVEF、BW、WT较MIR组显着增高（P＜0.05）,LVESD、LVEDD、HW/BW较MIR组显着降低（P＜0.05）。进一步两两比较分析,SMCH较SMCL组LVEF、WT增高,SMCH组LVESD、LVEDD、HW/BW较SMCL组降低（P＜0.05）。SMCH组较SB组各指标差异差别无统计学意义（P＞0.05）。2.血浆TNF-α水平的测定通过放免法检测SMC的抗炎症的作用。治疗1周后,MIR组、SMCH组、SMCL组血浆TNF-α水平较Sham组明显升高。但是,SMCH组、SMCL组（剂量依赖性）、SB组血浆TNF-α水平较MIR组明显降低（P＜0.05）。治疗6周后SMCH组、SMCL组、SB组血浆TNF-α水平较MIR组降低（P＜0.05）,且较1周时血浆TNF-α水平降低。3.Western blot检测分析治疗1周后,MIR组大鼠心肌组织p-p38MAPK、TNF-α、TIMP-1蛋白的表达较Sham组明显增加。SMCH、SMCL、SB组心肌组织p-p38MAPK、TNF-α、TIMP-1蛋白表达较MIR组明显减少。进一步两两比较分析,SMCH组较SMCL组或SB组心肌组织p-p38MAPK、TNF-α、TIMP-1蛋白表达差异无显着性意义（P＞0.05）。治疗6周后,SMCH、SMCL、SB组心肌组织p-p38MAPK、TNFα、TIMP-1蛋白表达较MIR组明显减少（P＜0.05）。进一步两两比较分析,SMCH组较SMCL组心肌组织p-p38MAPK、TNF-α、TIMP-1蛋白表达减少（P＜0.05）。SMCH组较SB组心肌组织p-p38MAPK、TNF-α、TIMP-1蛋白表达差异无显着性意义（P＞0.05）。除外Sham组,各组心肌组织p-p38MAPK、TNF-α、TIMP-1蛋白的表达较1周时明显降低。4.实时定量RT-PCR通过实时定量RT-PCR检测大鼠心肌组织collagenⅠmRNA的表达。治疗1周后,MIR组大鼠心肌组织collagenⅠmRNA的表达较Sham组明显增加（P＜0.05）。SMCH、SMCL、SB组心肌组织collagenⅠmRNA表达较MIR组明显减少（P＜0.05）。进一步两两比较分析,SMCH组较SMCL组或SB组心肌组织collagenⅠmRNA表达差异无显着性意义。治疗6周后,SMCH、SMCL、SB组心肌组织collagenⅠmRNA表达较MIR组明显减少。进一步两两比较分析,SMCH组较SMCL组心肌组织collagenⅠmRNA表达减少。SMCH组较SB组心肌组织collagenⅠmRNA表达差异无显着性意义。5.免疫组化染色分析5.1α-SMA表达α-平滑肌激动蛋白（α-SMA）是检测CFs增殖的可靠指标。通过免疫组化染色法可使阳性指标呈棕色或棕黄色染色。α-SMA主要表达于VSMC与CFs中。结果表明,Sham组大鼠只在心肌VSMC中有表达。而在MIR组,α-SMA广泛表达,并见有密集的阳性表达的CFs核聚集。舒脉胶囊与SB203580均明显降低α-SMA在心肌组织的广泛表达,表明其具有抑制CFs增殖的作用。6周时,除了Sham组,各组α-SMA表达较1周时增加。5.2 CollagenⅠ表达治疗1周后,通过免疫组化检测到MIR组心肌间质中较Sham组明显增多的棕褐色阳性表达。SMCH、SMCL、SB治疗组的Ⅰ型胶原（collagenⅠ）的阳性表达较MIR组显着降低。进一步两两比较分析,SMCH组较SMCL组或SB组心肌间质collagenⅠ的表达无显着性差异。治疗6周后,SMCH、SMCL、SB治疗组的Ⅰ型胶原（collagenⅠ）的阳性表达较MIR组显着降低。进一步两两比较分析,SMCH组较SMCL组心肌间质collagenⅠ的表达减少。SMCH组较SB组心肌间质collagenⅠ的表达无显着性差异。6.HE染色Sham组大鼠心肌细胞细长,细胞分界较清楚,胞核大小均一,染色正常。肌纤维排列紧密整齐,壁内小动脉管壁及管腔正常,管周纤维组织少;MIR组大鼠心肌细胞减少,细胞核大小不甚规则,心肌细胞肥大,分界不清楚。肌纤维排列较紊乱,壁内小动脉管壁厚,管腔狭小,管周纤维组织增多。CFs大量增殖、聚集。SMCH、SMCL、SB组大鼠心肌细胞肥大减轻,肌纤维排列较稀疏,间质纤维化减轻,心内膜下纤维组织减少。各组心肌内有一些散在小血管断面。7.天狼猩红染色胶原含量的变化6周时,各组大鼠心肌纤维化面积均有不同程度的提高。MIR组大鼠心肌存在广泛的心肌纤维化,且心肌纤维化面积明显高于1周组（P＜0.05）。SMC的治疗明显改善了大鼠的心肌纤维化,且呈剂量依赖性,大剂量组优于小剂量组。应用p38MAPK抑制剂（SB组）明显降低心肌纤维化的面积,与SMC治疗组比较差异无显着性（P＞0.05）。与MIR组比较,SMC+LY组大鼠心肌纤维化程度也有降低,但降低水平明显小于舒脉胶囊治疗组与SB组。8.透射电镜观测心肌超微结构变化Sham组大鼠心肌肌原纤维排列整齐、紧密,无断裂,肌丝清晰,细胞核发育良好,线粒体体积大数量多,嵴丰富排列紧密呈Z字型,肌浆网体积大,数量多,胞浆丰富。MIR组大鼠心肌细胞肿胀、肌原纤维排列紊乱,核异形、呈分叶状,核膜已染色质边聚,常染色质呈团块状,Z线消失,核周细胞器呈点状、碎片状等变化;多数线粒体呈多形性,大小不等、嵴断裂溶解呈现絮状、空泡样变。SMCH与SB203580组心肌肌原纤维大都排列整齐,未见肌丝溶解,肌浆网扩张减少;线粒体无明显肿胀;细胞核轻度肿胀。SMCL组与SMC+LY组局部心肌细胞核异型;线粒体形状不规则;核周有点状、碎片状改变。结论1.舒脉胶囊对MI大鼠左室重构有明显的逆转作用,其具体表现为:改善MI大鼠心肌组织形态学指标,降低心肌CFs增殖与ECM胶原含量,即降低心肌α-SMA与collagenⅠ的表达,降低心肌纤维化,改善心肌超微结构的病理改变。2.舒脉胶囊改善左室重构的分子机制为舒脉胶囊抑制p38MAPK信号通路,从而抑制心肌TNFα的蛋白表达。进而下调TIMP-1及αSMA的蛋白表达,抑制CFs的增殖与胶原的沉积。3.舒脉胶囊改善左室整体与局部心功能。表现为左室射血分数（LVEF）的提高,左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室舒张末期内径（LVEDD）的降低,左室缺血区室壁厚度分数（WT%）的提高。心功能改善是舒脉胶囊对缺血心肌保护作用的终极指标。
余锟,尚孝堂,王大英[10]（2008）在《中药改善心肌重塑的研究进展》文中进行了进一步梳理通过对国内外中药改善心肌重塑的机制文献总结,归纳中药单药及有效成分、中医复方通过对神经内分泌系统影响、血流动力学改变、细胞因子的影响和心肌胶原的改建等机制。
二、黄芪注射液对心肌梗塞后大鼠左室胶原改建影响的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、黄芪注射液对心肌梗塞后大鼠左室胶原改建影响的研究（论文提纲范文）
（1）基于IL-10/STAT3通路探讨益气温阳方对压力负荷心衰大鼠心脏功能的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1. 心力衰竭的现代医学研究进展 |
| 1.1 心力衰竭的流行病学研究 |
| 1.2 心力衰竭的机制研究 |
| 1.3 西医治疗 |
| 2. 心力衰竭的中医药研究进展 |
| 2.1 从中医病名的沿革认识心力衰竭 |
| 2.2 中医辨证论治心力衰竭 |
| 2.3 中医名家论治心力衰竭 |
| 2.4 中医药治疗心力衰竭的现代研究 |
| 3. 益气温阳方前期研究结果 |
| 3.1 益气温阳方LC-MS/MS分析 |
| 3.2 基础研究 |
| 3.3 临床研究 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验1: 制备压力负荷诱导的wistar大鼠心力衰竭模型 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 实验2: 益气温阳方对压力负荷诱导的心衰大鼠心功能的影响 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 实验3: 益气温阳方对压力负荷诱导的心衰大鼠心肌纤维化的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 实验4: 益气温阳方对压力负荷诱导的心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 实验5: 益气温阳方对压力负荷诱导的心衰大鼠IL-10、TNF-α的影响 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 实验6: 益气温阳方对压力负荷诱导的心衰大鼠IL-10/STAT3信号通路的影响 |
| 6.1 实验材料 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.3 结果 |
| 6.4 讨论 |
| 7 总结 |
| 7.1 结论 |
| 7.2 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 攻读博士学位期间申请的课题和成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）基于调节ACE轴和ACE2轴探讨益气活血法改善心梗后心室重构的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 急性心肌梗死后心室重构的中西医诊疗进展 |
| 1. 急性心肌梗死的西医治疗进展 |
| 2. 急性心肌梗死后心力衰竭的研究进展 |
| 3. 急性心肌梗死后心室重构的研究进 展 |
| 3.1 心室重构的分期 |
| 3.2 基质金属蛋白酶和心室重构 |
| 3.3 心室重构过程中的RASS系统和转化生长因子β |
| 3.4 胶原纤维与心室重构 |
| 3.5 弹性纤维与心室重构 |
| 3.6 心肌成纤维细胞和心室重构 |
| 4. 心肌梗死后心室重构心力衰竭的中医探讨 |
| 4.1 病名溯源 |
| 4.2 病因病机分析 |
| 4.3 气虚血瘀是心室重构的基本病机 |
| 4.4 益气活血类中药在心肌梗死心力衰竭治疗中的临床研究 |
| 4.5 益气活血类中药在心室重构治疗中的机制研究 |
| 5. 基于RAAS系统调节探讨益气活血法改善心梗后心室重构的机制研究 |
| 5.1 研究的意义 |
| 5.2 国内外研究进展 |
| 第二章 实验研究 |
| 1. 研究内容 |
| 1.1 通冠胶囊对大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响及可能的机制 |
| 1.2 通冠胶囊对AngⅡ刺激的大鼠心肌成纤维细胞胶原合成的影响及机制 |
| 2. 研究目标及方向 |
| 2.1 研究目标 |
| 2.2 研究方向 |
| 3. 材料及方法 |
| 3.1 通冠胶囊对大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响及可能的机制 |
| 3.2 探究通冠胶囊是否会影响AngⅡ刺激的大鼠心肌成纤维细胞胶原合成及作用机制 |
| 3.3 统计方法 |
| 4. 结果 |
| 4.1 通冠胶囊对大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化和心室重构的影响 |
| 4.2 通冠胶囊对AngⅡ刺激的大鼠心肌成纤维细胞胶原合成的影响及机制 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 益气活血法与心梗后心室重构 |
| 5.2 益气活血中药通冠胶囊的中医理论指导与临床疗效 |
| 5.3 基于调节ACE轴和ACE2轴探讨益气活血中药通冠胶囊改善心梗后心室重构机制 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（3）补阳还五汤抑制TGFBR1防治心梗后心肌纤维化的机制和物质基础研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 拆方研究探索补阳还五汤中抑制心梗后心肌纤维化及TGFBR1信号通路激活的机制 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二章 虚拟筛选结合机器学习探索补阳还五汤中抑制TGFBR1的有效成分 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 研究生期间成果 |
| 致谢 |
（4）心肌梗死后心室重构的中医药治疗实验研究进展（论文提纲范文）
| 1 单味药 |
| 1.1 人参 |
| 1.2 黄芪 |
| 1.3 三七 |
| 1.4 当归 |
| 2 复方药 |
| 2.1 益气活血药 |
| 2.2 益气温阳活血药 |
| 2.3 益气养阴活血解毒药 |
| 3 中成药 |
| 3.1 芪参益气滴丸 |
| 3.2 芪苈强心胶囊 |
| 3.3 通心络胶囊 |
| 4 中药注射剂 |
| 5 结语 |
（5）17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮逆转压力超负荷大鼠心血管重构的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 本文主要缩写符号说明 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 MHBFC 对压力超负荷大鼠心血管重构的作用 |
| 材料与仪器 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 MHBFC 逆转心肌重构的内皮机制研究 |
| 实验一 基于内皮素系统的作用机制研究 |
| 材料与仪器 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 基于 eNOS-NO 信号通路的作用机制研究 |
| 材料与仪器 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 基于 PGI2的作用机制研究 |
| 材料与仪器 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 综述 治疗心血管重构的药物研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的工作成果 |
（6）补阳还五汤对心肌梗死后心肌细胞凋亡及5-LOX表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 补阳还五汤对氧化应激诱导心肌细胞凋亡的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二章 补阳还五汤对氧化应激诱导心肌细胞5-LOX表达的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三章 补阳还五汤对大鼠心肌梗死后心肌细胞凋亡的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第四章 补阳还五汤对大鼠心肌梗死后5-LOX表达的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 英文缩写词表 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（7）心室重构的中药治疗研究（论文提纲范文）
| 1 单味中药防治心室重构研究 |
| 1.1 丹参 |
| 1.2 当归 |
| 1.3 川芎 |
| 1.4 黄芪 |
| 1.5 姜黄 |
| 1.6 其他 |
| 2 中成药防治心室重构研究 |
| 2.1 强心合剂 |
| 2.2 复方丹参滴丸 |
| 2.3 其他中成药 |
| 3 中药注射液防治心室重构研究 |
| 3.1 参芪扶正注射液 |
| 3.2 参麦注射液 |
| 3.3 黄芪注射液 |
| 3.4 其他中药制剂 |
| 4 结语与展望 |
（9）舒脉胶囊对缺血心肌大鼠促血管新生及改善左室重构作用的实验研究（论文提纲范文）
| 第一部分 舒脉胶囊对心肌缺血大鼠促血管新生的研究 |
| 中文摘要一 |
| 英文摘要一 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 仪器、设备及试剂 |
| 1.3 实验动物模型 |
| 1.4 超声心动检测 |
| 1.5 标本取材 |
| 1.6 免疫印记(Western blot)检测 |
| 1.7 实时定量反转录多聚酶链反应(RT-PCR) |
| 1.8 组织学与形态学检测 |
| 1.9 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 左心室功能超声心动图分析 |
| 2.2 Western blot检测分析 |
| 2.3 实时定量PCR(Real-time Quantitative RT-PCR)检测分析 |
| 2.4 检测缺血心肌微血管密度的测定 |
| 2.5 缺血心肌Masson染色分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 现代医学对血管新生过程的探讨 |
| 3.2 舒脉胶囊促血管新生的分子机制的探讨 |
| 3.3 冠心病的中医学病因病机分析 |
| 3.4 益气化瘀与冠心病治疗性血管新生的分析 |
| 3.5 舒脉胶囊的方药分析 |
| 3.6 心肌缺血动物模型的选择 |
| 3.7 本研究的创新点和限制性 |
| 4 结论 |
| 5 附图表 |
| 6 参考文献 |
| 第二部分 舒脉胶囊改善心肌缺血大鼠左室重构的研究 |
| 中文摘要二 |
| 英文摘要二 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 仪器、设备及试剂 |
| 1.3 实验动物模型 |
| 1.4 超声心动检测 |
| 1.5 放射免疫法测定 |
| 1.6 标本取材 |
| 1.7 免疫印记(Western blot) |
| 1.8 实时定量反转录多聚酶链反应(RT-PCR) |
| 1.9 组织学与形态学检测 |
| 1.10 透射电镜观察 |
| 1.11 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 左心室整体与局部功能超声心动图分析 |
| 2.2 放射免疫法检测分析 |
| 2.3 Western blot检测分析 |
| 2.4 实时定量PCR |
| 2.5 免疫组化染色检测分析 |
| 2.6 HE染色 |
| 2.7 天狼猩红染色观察胶原含量的变化 |
| 2.8 透射电镜观测心肌超微结构变化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 心肌缺血动物模型的选择 |
| 3.2 舒脉胶囊改善左室的分子机制 |
| 3.3 左室重构的中医病因病机分析 |
| 3.4 现代药理研究 |
| 3.5 创新点和限制性 |
| 4 结论 |
| 5 附图表 |
| 6 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文、获奖及出国经历 |
| 学位论文评阅及答辩情况 |
| 英文论文1 |
| 英文论文2 |
| 英文论文3 |
（10）中药改善心肌重塑的研究进展（论文提纲范文）
| 1 单药及有效成分的研究 |
| 1.1 红景天 |
| 1.2 丹参 |
| 1.3 川芎嗪 |
| 1.4 前胡提取物 |
| 1.5 其它 |
| 2 复方研究 |
| 2.1 益气活血方药 |
| 2.2 平肝潜阳方药 |
| 2.3 温阳活血利水方药 |
| 3 结语 |
四、黄芪注射液对心肌梗塞后大鼠左室胶原改建影响的研究（论文参考文献）
- [1]基于IL-10/STAT3通路探讨益气温阳方对压力负荷心衰大鼠心脏功能的影响[D]. 李鹤. 南京中医药大学, 2021(01)
- [2]基于调节ACE轴和ACE2轴探讨益气活血法改善心梗后心室重构的机制研究[D]. 周袁申. 广州中医药大学, 2020(06)
- [3]补阳还五汤抑制TGFBR1防治心梗后心肌纤维化的机制和物质基础研究[D]. 华玥. 南方医科大学, 2017(01)
- [4]心肌梗死后心室重构的中医药治疗实验研究进展[J]. 李彬,王永霞,谢世阳,朱明军. 中西医结合心脑血管病杂志, 2014(07)
- [5]17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮逆转压力超负荷大鼠心血管重构的作用及机制研究[D]. 黄建春. 广西医科大学, 2014(10)
- [6]补阳还五汤对心肌梗死后心肌细胞凋亡及5-LOX表达的影响[D]. 黄小芳. 南方医科大学, 2014(04)
- [7]心室重构的中药治疗研究[J]. 朱林平,李侠,曹旭焱,刘长玉,杜武勋. 时珍国医国药, 2012(03)
- [8]芪参益气滴丸及其组成中药抗缺血再灌注损伤的研究进展[J]. 林色奇,韩晶岩,刘红宁. 江西中医学院学报, 2011(03)
- [9]舒脉胶囊对缺血心肌大鼠促血管新生及改善左室重构作用的实验研究[D]. 尹慧秋. 山东大学, 2009(05)
- [10]中药改善心肌重塑的研究进展[J]. 余锟,尚孝堂,王大英. 江西中医药, 2008(09)