一、原发性胆囊癌的早期诊断及手术治疗（论文文献综述）
魏东[1]（2014）在《Bmi-1调控人胆囊癌细胞增殖的效应及其WWOX信号通路的分子机制》文中提出[研究目的]1.探讨Bmi-1、WWOX及PUMA基因在胆囊癌组织和慢性胆囊炎伴轻-中度非典型增生组织及正常胆囊组织中的表达差异,分析Bmi-1/WWOX/PUMA表达与胆囊癌临床病理因素的关系,有望揭示其表达差异在胆囊癌发生、发展中的作用及其临床意义,为后续研究胆囊癌的发生机制奠定基础。2.通过体外RNAi干扰技术成功构建靶向shRNA-Bmi-1重组载体抑制原癌基因Bmi-1表达,观察其对胆囊癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的效应,探讨Bmi-1调控WWOX/P73/PUMA/Bax/Bcl-2/Caspase-3信号通路调节胆囊癌细胞生长的分子机制。3.通过体外成功构建pcDNA3.0-WWOX真核表达载体,探讨过表达WWOX基因对胆囊癌细胞增殖,凋亡及细胞周期的影响,进一步研究WWOX/P73/PUMA/Bax/Bcl-2通路调控胆囊癌细胞生长的分子机制,为研究Bmi-1/WWOX通路间是否存有反馈环路奠定基础。4.成功建立了人胆囊癌BALB/C裸鼠皮下移植瘤模型,通过体内试验评估靶向抑制Bmi-1对移植瘤的治疗效果,进一步探讨其对胆囊癌细胞生长的影响及调控Bmi-1/WWOX/P73/PUMA/Bax/Bcl-2通路的分子机制,验证体外实验结果。5.本课题通过临床相关研究,体外及裸鼠体内试验研究,全面系统阐述Bmi-1调控人胆囊癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的效应及其WWOX信号通路的分子机制,将有助于胆囊癌标志物的筛选及病情的预后和评估,为胆曩癌的早期诊断、分子靶向治疗提供理论依据和实验数据。[研究方法]1.临床相关研究：收集临床病理资料完整的原发性胆囊腺癌病人手术标本存档石蜡块55例,收集同期慢性胆囊炎伴轻-中度非典型增生组织标本30例及正常胆囊组织标本22例（均来自于肝内胆管结石或肝脏肿瘤行右半肝切除患者,胆囊内无结石及肿瘤侵袭）作对照,其中每组病例包括新鲜组织各5例。应用IHC-Max Vision法、RT-PCR及Real-time PCR等技术检测上述标本中Bmi-1/WWOX/PUMA mRNA及蛋白的表达差异,分析三者表达与胆囊癌临床病理因素的关系及意义。2.体外研究,以原癌基因Bmi-1mRNA为靶点：通过体外RNAi干扰技术成功构建shRNA-Bmi-1重组载体转染胆囊癌GBC-SD细胞,应用倒置荧光显微镜及流式细胞技术评价其转染效率,以RT-PCR及Westernblot检测转染后胆囊癌细胞转录和翻译水平的变化,筛选出最佳干扰作用的Bmi-1靶序列重组质粒为后续实验组。通过倒置显微镜观察、Brdu实验、Annexin V/7-AAD单染和双染实验、透射电镜及细胞周期检测技术分析靶向shRNA抑制Bmi-1对胆囊癌细胞增殖活性、凋亡进程及细胞周期的影响机制及其生物学效应与时间梯度的关系,进一步通过Real-time PCR, Western Blot,免疫荧光染色及流式细胞检测等技术探讨靶向shRNA抑制Bmi-1表达对WWOX/P73/PUMA/Bax/Bcl-2/Caspase-3通路影响的分子机制。3.体外研究,以抑癌基因WWOXmRNA为靶点：提取GBC-SD细胞总RNA,采用RT-PCR扩增WWOX全序列,将其克隆到真核表达载体pCDNA3.0中,通过限制性内切酶酶切及DNA测序鉴定,成功构建pcDNA3.0-WWOX重组真核表达载体。按脂质体介导转染GBC-SD细胞,同时转染空载体、脂质体为阴性对照及GBC-SD细胞为空白对照。以RT-PCR、Westemblot及免疫荧光技术检测转染后胆囊癌细胞转录和翻译水平的变化,以MTT法、AnnexinV/7-AAD双染、TUNNEL法、细胞周期检测技术、透射电镜技术、线粒体跨膜电位检测技术分析过表达WWOX对胆囊癌细胞增殖活性、凋亡及细胞周期的影响机制及其生物学效应与时间梯度的关系,进一步通过Real-time PCR, Western Blot,免疫荧光染色及流式细胞检测等技术探讨pcDNA3.0-WWOX真核表达载体对WWOX/P73/PUMA/Bax/Bcl-2通路调控的分子机制。4.体内试验研究：以体外实验结果为基础,通过建立人胆囊癌BALB/C裸鼠皮下移植瘤模型,应用shRNA-Bmi-1重组质粒在移植瘤周围及瘤内多点注射,实验终止绘制移植瘤生长曲线,计算瘤体抑制率,通过标本解剖和组织病理检测手段探讨靶向shRNA抑制Bmi-1表达对裸鼠皮F移植瘤的抗瘤效果,通过Max Vision去、TUNEL法、透射电镜、RT-PCR及Western Blot等检测技术进一步探讨Bmi-1对胆囊癌细胞生长的影响及调控WWOX通路关键基因表达的分子机制。[研究结果11.临床相关研究结果（1）IHC-MaxVision检测结果显示：Bmi-1、WWOX及PUMA蛋白在胆囊癌组织中的阳性表达分别为83.6%（46/55）、38.2%（21/55）和34.5%（19/55）,其中Bmi-1蛋白在胆囊癌组织中的阳性表达明显高于慢性胆囊炎伴非典型增生组织及正常胆囊组织,而WWOX及PUMA蛋白在胆囊癌组织中的阳性表达明显低于慢性胆囊炎伴非典型增生组织及正常胆囊组织（P<0.05）。（2）Bmi-1、WWOX及PUMA表达差异与临床病理因素的关系结果：Bmi-1、WWOX蛋白表达水平与胆囊癌的病理分期、分化程度及淋巴结转移有关（P<0.05）,与胆囊癌患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、是否伴有肝硬化及胆囊结石无相关性（p>0.05）。PUMA蛋白表达水平与胆囊癌分化程度及淋巴结转移有关（P<0.05）,而与患者性别、年龄、肿瘤大小、临床病理分期、肿瘤部位、是否伴有肝硬化及胆囊结石均无相关性（p>0.05）。（3） Realtime PCR和RT-PCR检测结果：Bmi-1mRNA表达为胆囊癌组织>慢性胆囊炎伴非典型增生组织>正常胆囊组织；而WWOX及PUMAmRNA表达为胆囊癌组织<慢性胆囊炎伴非典型增生组织<正常胆囊组织（P<0.05）。实验表明Bmi-1、WWOX及PUMA基因可能参与胆囊癌发生、发展过程,慢性胆囊炎伴非典型增生组织中Bmi-1持续高表达或WWOX/PUMA持续低表达警示胆囊癌发生的可能。2.以原癌基因Bmi-1mRNA为靶点的体外研究结果（1） shRNA-Bmi-1重组载体的构建及筛选结果：shRNA-Bmi-1重组载体构建后经基因测序证明所获得的4组Bmi-1基因扩增序列正确。应用倒置荧光显微镜及流式细胞技术检测细胞转染效率70%左右；将4组质粒分别转染胆囊癌GBC-SD细胞48h后,通过RT-PCR及Westernblot检测筛选出第四组序列在转录和翻译水平抑制显着,为后续实验组（即为shRNA-Bmi-1组）。（2）靶向shRNA干扰Bmi-1表达对胆囊癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响结果：通过RT-PCR及Westernblot检测显示靶向抑制Bmi-1,其mRNA及蛋白表达水平均明显低于对照组（p<0.05）；而对照组间表达量无显着差异（p>0.05）。倒置显微镜观察发现shRNA-Bmi-1对胆囊癌细胞的影响随时间的推移,增殖抑制率较对照组明显,其中以转染后72h抑制效果最显着,细胞死亡最多。Brdu检测显示shRNA-Bmi-1组细胞增殖活性较对照组降低,细胞增殖力呈时间依存性,随时间推移增殖力明显减弱,于转染72h细胞增殖抑制最强（p<0.05）。AnnexinV/7-AAD单染和双染检测显示转染shRNA-Bmi-1重组质粒24h-48h-72h后,shRNA-Bmi-1组细胞凋亡率均随时间推移明显增加（24h<48h<72h）,且与晚期凋亡增加为主（p<0.05）。透射电镜检测发现shRNA-Bmi-1转染组胆囊癌细胞浓缩、核固缩形成凋亡小体。细胞周期检测显示shRNA-Bmi-1转染组G0/G1期细胞增多,G2/M和S期细胞减少,细胞阻滞于G0/G1,细胞凋亡率明显增高,增殖指数降低（p<0.05）。（3）靶向shRNA干扰Bmi-1表达调控WWOX通路的分子机制研究结果：通过Real-time PCR、Western Blot及免疫荧光染色技术检测显示shRNA-Bmi-1转染组胆囊癌细胞Bmi-1mRNA及蛋白表达量及蛋白荧光强度较对照组减少,而WWOX、P73、PUMAmRNA及蛋白表达量较对照组均明显增加,蛋白荧光表达强度明显增强（p<0.05）；流式细胞仪技术检测显示shRNA-Bmi-1转染组胆囊癌细胞Bax及Caspase-3蛋白表达较对照组增加,而Bcl-2蛋白表达较对照组减少（p<0.05）。3.以抑癌基因WWOX mRNA为靶点的体外实验研究结果（1）WWOX基因真核表达载体的构建：pcDNA3.0-WWOX重组质粒经双酶切鉴定及基因测序证明所获得的WWOX基因扩增序列正确。（2）pcDNA3.0-WWOX重组质粒对胆囊癌细胞增殖、凋亡及细胞周期影响结果：RT-PCR及Westernblot检测显示pcDNA3.0-WWOX转染48小时后WWOXmRNA及蛋白表达水平均明显高于对照组（p<0.05）；对照组间mRNA及蛋白表达量无显着差异（p>0.05）。免疫荧光检测结果显示pcDNA3.0-WWOX组细胞WWOX蛋白荧光强度在细胞核周围明显强于各对照组,而对照组间细胞WWOX蛋白荧光强度变化不明显。倒置显微镜观察发现pcDNA3.0-WWOX组贴壁的GBC-SD细胞数量明显减少,悬浮细胞及细胞碎片增加,而对照组细胞呈正常增殖状态,贴壁生长良好。MTT法检测显示pcDNA3.0-WWOX组细胞增殖活性明显降低,且随时间推移细胞增殖抑制效果更为显着,对照组细胞增殖抑制不明显（P<0.05）。BrdU检测显示pcDNA3.0-WWOX组细胞增殖率较对照组降低（P<0.05）。Annexin V/7-AAD双染检测发现pcDNA3.0-WWOX组胆囊癌细胞早、晚期凋亡率较对照组增高（p<0.05）；而对照组间早、晚期凋亡率未见显着差异（P>0.05）。TUNNEL法检测显示转染pcDNA3.0-WWOX重组质粒24h/48h/72h后,胆囊癌细胞凋亡比率较对照组增加,以转染48h后更为明显（p<0.05）。细胞周期检测发现pcDNA3.0-WWOX组G0/G1期细胞增多,G2/M和S期细胞减少,细胞凋亡率增高,增殖指数降低（p<0.05）；而对照组间未见显着性差异（p>0.05）。JC-1染色检测细胞线粒体跨膜电位（△Ψm）显示过表达WWOX基因胆囊癌细胞线粒体内绿色荧光信号显着高于空载体、脂质体及空白对照组,提示WWOX诱导胆囊癌细胞早期凋亡为主（p<0.05）。透射电镜观察pcDNA3.0-WWOX组细胞典型的凋亡形态学改变,出现核固缩、碎裂形成凋亡小体。（3）pcDNA-WWOX重组质粒对WWOX通路关键基因的影响结果：通过Real-time PCR,Western Blot及免疫荧光染色检测显示特异性上调WWOX表达,胆囊癌细胞中P73、PUMA在转录及翻译水平的表达量均较对照组增加（p<0.05）；流式细胞仪检测发现特异性上调WWOX表达,胆囊癌细胞中Bax蛋白表达水平较对照组明显增加,而Bcl-2蛋白表达水平较对照组减少（p<0.05）。4.移植瘤体内试验研究结果裸鼠皮下接种GBC-SD细胞株5-7天后成瘤率为100%。shRNA-Bmi-1组移植瘤生长速度较对照组减慢,治疗6周实验终止时各实验组体积较治疗前增大,但shRNA-Bmi-1组移植瘤体积明显小于各对照组（shRNA-Scramble组、Lipofectamine组、GBC-SD组）,其瘤体抑制率为60.6%（p<0.05）,对照组间体积无明显差异（P>0.05）。HE染色显示shRNA-Bmi-1组细胞坏死明显,细胞形态模糊,见炎性细胞浸润,组织结构不清晰,而各对照组细胞异型性明显,炎性细胞较少,组织结构清晰。MaxVision染色发现shRNA-Bmi-1组移植瘤组织中Ki67及VEGF蛋白表达较对照组减弱,提示shRNA-Bmi-1组肿瘤新生血管生成减少、细胞增殖抑制明显。TUNEL及透射电镜检测显示靶向shRNA抑制Bmi-1体内可诱导胆囊癌细胞凋亡,与体外实验相符合。通过Real-time PCR、Western Blot及免疫组织化学检测发现靶向shRNA干扰Bmi-1表达可特异性促进Bmi-1mRNA的降解及抑制其蛋白的表达,同时促进下游通路中关键基因WWOX/P73/PUMA/Bax表达,抑制Bcl-2的表达水平。[研究结论]1. Bmi-1、WWOX及PUMA的表达参与胆囊癌的发生发展过程,Bmi-1阳性表达率越高,或WWOX、PUMA阳性表达越低或表达缺失,提示肿瘤恶性程度增加、转移增快,Bmi-1、WWOX及PUMA的表达差异可能参与肿瘤的侵袭及演进。应用免疫组化联合检测胆囊癌组织中的Bmi-1、WWOX及PUMA的表达将有利于协助胆囊癌的早期诊断,有助于对其预后进行合理评估。2.体外成功构建了shRNA-Bmi-1重组载体。靶向沉默Bmi-1表达能有效促进胆囊癌细胞Bmi-1mRNA降解及抑制其蛋白表达,能特异性抑制胆囊癌细胞增殖,诱导其凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而引起细胞DNA合成受阻,研究提示Bmi-1参与调控胆囊癌细胞的增殖和凋亡,维持细胞周期的运行,是抑制细胞凋亡和促进细胞异常增殖的重要因素。同时靶向沉默Bmi-1表达能有效促进WWOX通路中的关键基因WWOX/P73/PUMA/Bax/Caspase-3的表达,抑制Bcl-2蛋白表达,其作用可能与调控胆囊癌细胞生长效应的机制相关,Bmi-1及其Bmi-1/WWOX通路参与线粒体依赖的凋亡途径调控胆囊癌细胞的生长。3.体外成功构建了pcDNA3.0-WWOX真核表达载体。过表达WWOX可有效抑制胆囊癌细胞WWOXmRNA降解、促进其蛋白表达,能有效抑制胆囊癌细胞的增殖活性、诱导其凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期。同时上调并促进P73蛋白在胆囊癌细胞质中螯合积累,促进PUMA、Bax及抑制Bcl-2的转录和翻译过程,其作用可能是调控胆囊癌细胞生长的重要机制之一。WWOX/P73/PUMA通路通过调控线粒体依赖的凋亡途径来调节胆囊癌细胞的增殖、凋亡及细胞周期的变化,进一步证实了WWOX通路调控胆囊癌细胞的分子机制。4.成功建立胆囊癌裸鼠皮下移植瘤动物模型。靶向沉默Bmi-1表达能诱导胆囊癌移植瘤细胞凋亡,显着抑制肿瘤的生长及新生血管的形成,影响裸鼠皮下移植瘤Bmi-1/WWOX/P73/PUMA/Bax/Bcl-2通路关键基因的表达,与体外实验相符合。体内实验进一步验证了Bmi-1/WWOX通路参与线粒体依赖的凋亡途径调控胆囊癌细胞的生长。5.Bmi-1及WWOX可能为胆囊癌基因靶向治疗提供潜在的分子靶标,通过靶向沉默Bmi-1表达和特异性性上调WWOX的表达可能是胆囊癌联合基因治疗的潜在治疗手段之一,阻断Bmi-1/WWOX通路对胆囊癌靶向性治疗策略具有重要意义,同时也为探索胆囊癌早期诊断及多分子联合靶向治疗提供了新的实验依据。
石景森,孙学军[2]（2007）在《原发性胆囊癌诊治的历史、现状及展望》文中进行了进一步梳理原发性胆囊癌是胆道系统最常见的恶性肿瘤,其发病率在我国逐年增高。由于原发性胆囊癌无特异性的临床表现,临床发现的胆囊癌多属中晚期,根治性切除率低,预后差。本文就原发性胆囊癌诊治的有关文献,结合本单位50年来945例原发性胆囊癌诊治的临床资料,在胆囊癌发病的高危因素、影像学诊断、分子生物学研究、治疗进展以及存在的问题进行了分析,提出:目前对原发性胆囊癌的早期诊断依然困难,继续深入开展对胆囊癌致病高危因素的基础与临床研究、对胆囊癌的二级预防具有重要的临床意义。以手术为主的综合治疗仍然是原发性胆囊癌治疗的主要手段,肿瘤的基因治疗正逐渐发展成为治疗原发性胆囊癌的一种新方法,已显示出良好的应用前景。
刘学青[3]（2012）在《80例胆囊癌诊疗分析》文中研究说明目的：原发性胆囊癌（primary carcinoma of gallbladder）是胆道系统恶性肿瘤中最常见的恶性肿瘤，约占胆道肿瘤的2/3左右。胆囊癌早期缺乏特征性的症状及体征,早期诊断困难,易与胆囊结石,胆囊息肉样病变,胆囊炎等良性胆囊病变相混淆，当出现上腹痛、纳差、黄疸等临床表现时多属中晚期。其手术切除率低,术后5年生存率低。早期胆囊癌手术预后较好,5年生存率可达到100%。本文重在分析原发性胆囊癌（PCG）的临床特点，探讨与胆囊癌早期临床诊断相关的指标，提高胆囊癌的早期诊断率，改善预后以及探讨胆囊癌的病理分期、手术方式选择与预后的关系。方法：本文收集2002年1月～2011年1月间，在河北医科大学第二医院肝胆外科进行治疗的胆囊癌患者，排除重复入院，合并其他重大疾病的，随访资料不完整的病人后共有80例。以2010年1月～2011年5月在本院治疗的胆囊结石及胆囊息肉患者随机抽取90例作为对照组。对两组病例进行组间比较及单、多因素Logistic回归分析。结果：胆囊癌组80例，其中男性45例占56.3％，女性35例占43.8％，最大年龄81岁，最小年龄30岁，大于50的75例占93.75％，平均年龄为64.5岁；对照组90例，其中男性39例占43.33％，女性51例占56.67％，最大年龄85岁，最小年龄19岁，大于50的有51例占56.67％，平均年龄为56岁。两组之间在患病年龄上存在差异（P<0.001）；80例胆囊癌患者中手术参与治疗的有72例，其中单纯胆囊切除术2例，胆囊癌根治术19例，扩大根治术14例，姑息或减黄术27例，因术中探查广泛转移行开关术10例，8例患者放弃治疗；术后病理回报有68例，腺癌56例，占82.4%；鳞癌6例，占8.8%；腺鳞癌2例占2.9%；类癌2例占2.9%；未分化癌2例，占2.9%。病理分期（TNM分期）：0期0例，I期2例，Ⅱ期9例，III期23例，Ⅳ期46例；胆囊癌组腹胀纳差的有59例（59/80），对照组有23例（23/90），两组之间存在差异（P<0.001）；在是否存在胆囊占位方面，胆囊癌组66例（66/80），对照组2例（2/90），两组之间存在差异（P<0.001）；胆囊壁厚方面，胆囊癌组74例（74/80），对照组8例（8/90），两组之间存在差异（P<0.001）；是否存在肿大淋巴结，胆囊癌组65例（65/80），对照组1例（1/90）两组之间存在差异（P<0.001）；是否存在肝内外胆管扩张，胆囊癌组37例（37/80），对照组2例（2/90），两组之间存在差异（P<0.001）；胆囊癌组CA199高于正常值的占65例，CA125高于正常值的有37例，两者与对照组相比均存在差异（P<0.001）；在实验室化验检查方面，胆囊癌组与对照组之间存在差异的有：HGB、TBIL、DBIL、IBIL、ALT、AST、ALP、rGGT、TBA；在影像学检查方面，B超检查诊断符合率为61．29%（38／62），78例行CT检查，68例术前明确诊断，其诊断准确率为87.18％；46例患者得到了随访，其随访率为57.5％（46／80），I期患者中2例获得随访，其中1例已存活3年，1例已经存活5年。II期患者中得到随访5例，2例已存活1年，2例存活2年，1例存活5年。Ⅲ期患者中11例患者获得随访，3例存活1年，1例存活2年，1例存活3年，6例1年内死亡。Ⅳ期患者中得到随访的28例，2例存活1年，26例在1年内死亡。结论：1原发性胆囊癌的起病隐匿，大多与慢性胆囊炎、胆囊结石、胆囊息肉样病变等疾病有关。2原发性胆囊癌的临床表现无特异性，综合腹部超声、CT、实验室检查及肿瘤标志物联合检测可提高胆囊癌术前诊断率。3原发性胆囊癌的首选治疗方式是手术治疗，进展期胆囊癌行根治性手术有助于患者生存率的提高。4原发性胆囊癌的预后差，控制胆囊癌的高危因素能有效的预防胆囊癌的发生，从而改善预后。对于胆囊癌高危人群的早期筛查是胆囊癌临床治疗的关键。5胆囊癌的临床分期对胆囊癌的预后影响大。提高胆囊癌早诊率是提高胆囊癌诊治水平的关键。
王云峰[4]（2014）在《肿瘤标志物联合检测在胆囊癌诊断和预后的价值》文中指出[研究背景和目的]胆囊癌（Gallbladder cancer, GBC）是胆囊最常见和侵袭性强的恶性肿瘤之一。由于早期胆囊癌缺乏典型的临床表现,其5年生存率低,预后差。大多数患者在诊断时已属于晚期,从而失去了根治性手术的机会。因此,GBC的早期诊断是很重要的。目前,胆囊癌的诊断主要依靠非侵入性的辅助影像学检查和创伤性检查,如腹腔镜检查和活检。然而,尚缺乏理想的肿瘤标志物用于GBC的诊断和预后的评价。肿瘤标志物如癌胚抗原（CEA）,糖类抗原125（CA125）,糖类抗原242（CA242）和糖类抗原199（CA199）已被广泛地应用于各种不同类型的癌症诊断,如肝癌,胃癌,大肠癌和胰腺癌。然而,当这些标志物用于胆囊癌的诊断时,诊断结果却不一致。最近的一项研究报道,鞘氨醇1-磷酸受体1（S1P1）过表达或内质网蛋白29（ERp29）缺失与肿瘤的发生、发展密切相关,并可能成为早期检测胆囊腺癌的潜在生物标志物。因此,我们推测肿瘤标志物联合检测使用能否避免不一致,从而提高对胆囊癌诊断的敏感性。胆囊癌患者术后死亡的主要原因是术后肿瘤复发和转移。为了实现全面和准确认识胆囊癌术后复发和转移的情况,人们已经进行了巨大的努力,来探索更有效的临床预测方法。但是,由于经济与技术条件的限制,不能对所有个体的肿瘤相关指标系统全面地检测,因此,特异性肿瘤标志物的联合检测就具有非常重要的临床研究价值。本研究的主要目的是探讨肿瘤标志物CA199、CA242、CA125和CEA联合检测是否可以增加GBC诊断的敏感性并分析影响胆囊癌患者生存和复发的临床预后因素。[研究方法]通过第二军医大学附属东方肝胆外科医院检验中心,采用电化学免疫仪对234例入选本研究受试者血清CA199、CA242、CA125和CEA水平进行检测。其中包括2010年1月至2012年9月之间就诊于上海市同济大学附属杨浦医院和第二军医大学附属东方肝胆外科医院的GBC患者78例（其中男性30例,女性48例）和78例良性胆囊疾病患者（胆囊炎,胆囊息肉和胆囊结石）,以及78例在同一医院接受体检的健康正常对照人群。正常参考值如下：CEA≤10μg/l, CA125≤35U/ml, CA242≤15U/ml和CA199≤39U/ml。并在术前和术后对CA199、 CA242、CA125和CEA血清检测水平和阳性率进行了分析和评估。所有患者的肿瘤大小、血清CA199、CA242、CA125和CEA的检测值、术后生存时间均输入数据库。组间计量资料用t检验进行比较,计数资料用χ2检验。ROC曲线用于上述指标对于GBC诊断的敏感性和特异性的评估。并对随访患者进行生存分析,包括生存时间曲线和Cox比例风险模型多因素生存分析来评估影响胆囊癌患者术后预后的独立因素。[研究结果]1.健康对照组与胆囊良性疾病组之间在CA199、CA242、CA125和CEA四种标志物平均血清水平和检测阳性率方面差异无统计学意义（P>0.05）,但GBC组与其他两组之间在CA199、CA242、CA125和CEA四种标志物平均血清水平和检测阳性率方面存在显着差异,并具有统计学意义（P<0.01）。在胆囊癌组患者中血清CA199、CA242、CA125和CEA水平在年龄和性别方面不存在显着差异（P>0.05）。胆囊癌组患者血清CA199、CA242、CA125和CEA水平在GBC位于胆囊颈部者明显高于胆囊癌位于胆囊底部者。此外,胆囊癌组患者血清CA199、CA242和CA125水平在GBC的不同临床病理分期,肿瘤大小和分化方面也存在显着差异。2.根据GBC患者的不同临床分期阶段对四个血清肿瘤标志物的敏感性分析表明,CA199、CA242和CA125的敏感性随着胆囊癌临床分期的进展逐渐升高。胆囊癌组患者血清中CA199、CA242和CA125水平在病理分期ⅣA,IVB期与Ⅱ期之间存在差异,并具有统计学显着意义（P<0.05）。单个肿瘤标志物诊断胆囊癌时,CA199的敏感性最高（72.7%）,而CA242的特异性最高（98.7%）。CA242可被视为GBC在早期阶段浸润的肿瘤标志物之一。联合检测CA199、CA242和CA125时诊断准确率最高（69.2%）。联合检测可以提高GBC诊断的特异性,但不能改善诊断的敏感性。CA199和CA242诊断敏感性随GBC生长阶段的进展和淋巴结远处转移而增高（P<0.05）。3.78例GBC患者术后随访6～12个月（平均8个月）。30例患者术后完整随访1年,其中6例患者出现复发,24例没有出现复发。在术后6个月时,胆囊癌复发组患者血清CA199、CA242和CA125水平明显高于非复发组（P<0.01）。非复发组患者血清CA199、CA242和CA125水平较术前胆囊癌组患者明显降低,并具有临床上的统计学差异（P<0.01）。使用Cox比例风险模型进行多因素生存分析表明,胆囊颈部胆囊癌和血清CA199表达水平是影响胆囊癌患者预后的独立预后因素。[研究结论]1.血清CA199、CA242和CA125的表达水平对于评估胆囊癌患者的淋巴结转移,监测复发和评价肿瘤临床分期具有重要的临床应用价值。2.联合检测血清肿瘤标志物CA199、CA242和CA125表达水平对GBC的诊断、疗效评估及预后预测具有非常重要的应用价值。3.CA242可作为诊断GBC早期阶段浸润的肿瘤标志物。4.胆囊颈部胆囊癌和血清CA199表达水平是影响胆囊癌患者术后生存时间的独立预后因素。
于志远,孙岩[5]（2019）在《胆囊癌的诊断与治疗进展》文中研究表明目的阐述当前胆囊癌诊断和治疗方面的最新研究进展。方法复习近年国内外胆囊癌诊治方面的有关文献,就胆囊癌的诊断、分期方法和治疗进展进行系统综述。结果诊断胆囊癌的方法众多,主要为影像学方法,与胆囊癌相关的肿瘤标志物和基因也能提供一定的帮助。外科手术切除仍是可能治愈胆囊癌的唯一方法,但手术切除范围和时机仍存在争议;放化疗和基因治疗也在胆囊癌的治疗中占有重要地位。结论胆囊癌的诊断仍以影像学检查为首选,肿瘤标志物和基因诊断具有广阔的前景。胆囊癌应采取以手术治疗为主的综合治疗方式,基因干预和精确靶向治疗是未来的发展方向。
李守帅,孙学军[6]（2010）在《原发性胆囊癌的早期诊断进展》文中研究表明目的介绍原发性胆囊癌早期诊断的各种方法及进展,以期提高原发性胆囊癌的早期诊断率。方法复习相关文献资料并作一综述。结果原发性胆囊癌早期诊断困难,预后差。通过详细了解病史及详细查体,再辅以现代多种影像学检查方法及分子生物学技术,可以提高原发性胆囊癌的早期诊断率。结论了解和掌握各种原发性胆囊癌早期诊断方法对提高原发性胆囊癌的早期诊断率和选择合理的临床诊治方法有积极的意义。
石景森,刘刚,于跃利,卢云,焦兴元,杨毅军,李国才,韩玥[7]（2000）在《原发性胆囊癌的早期诊断》文中研究指明目的 为进一步提高原发性胆囊癌的早期诊断水平 ,加强对本病的发病、病理分期及转归的认识。方法 对我院 195 6～ 1998年间收治的 6 79例胆囊癌病人的病例资料进行了回顾性研究。结果 胆囊癌的发病近年来有增高趋势而外科治疗仍不尽如人意 ,多数病人一经诊断已属晚期 ;胆囊癌多发于高龄女性病人 ,女性与男性之比约为 3∶1;胆囊结石与胆囊癌的发病之间有着密切的关系 ,6 0 %的胆囊癌合并胆囊结石 ;胆囊癌的手术前诊断与手术中发现的符合率过低 ,不少病人是以诊断胆结石病或急性胆囊炎而手术 ,意外地发现胆囊癌 ;更有不少病人因为只注意胆囊结石的诊断而延误了对胆囊癌的诊断和治疗 ;胆囊癌的病理分型以腺癌居多 （84 4% ） ;影像医学的发展可望发现早期病例 ,改善预后。结论 加强对本病的发病 ,病理分期及转归的认识以及各种检查手段的合理运用是获得早期诊断及改善预后的基本途径
田佳[8]（2018）在《原发性胆囊癌外科诊治与预后分析（附93例临床报告）》文中指出目的:分析探讨原发性胆囊癌（Primary gallbladder cancer,PGBC）的临床特点、诊断、外科治疗以及预后相关性因素。方法:回顾性分析我院普外科自2010年1月至2015年12月收治的93例原发性胆囊癌病人资料。分析患者人口特点、临床表现、影像学及实验室检查结果、病理学诊断结果、随访及生存情况。采用Kaplan-Meier法对人口学因素（年龄、性别、血型）及临床病理因素（肿瘤标志物、术前黄疸、胆囊结石、肿瘤病理学类型、肿瘤病理学分级、肝脏侵犯、淋巴结转移、T分期、N分期、M分期、TNM分期、手术方式、意外胆囊癌）进行生存分析,Cox法进行多因素分析,Student’s test法验证变量间的相互关系。结果:93例患者中,男30例,女63例,平均年龄为（65.0±11.3）岁。平均住院时间位（18.2±8.7）天。主要临床表现为右上腹不适或疼痛76例（81.7%）,乏力、纳差37例（39.8%）,黄疸26例（28.0%）,体重明显减轻25例（26.9%）,恶心、呕吐11例（11.8%）,腹胀9例（9.7%）,腹部包块5例（5.4%）,发热5例（5.4%）,无明显症状者9例（9.7%）;伴有胆囊结石者67例（72.0%）。实验室检验结果:AFP升高者6例,检出率6.5%;CEA升高者20例,检出率21.2%;CA125升高者26例,检出率28.0%;CA199升高者37例,检出率39.8%;两种及以上肿瘤标志物的联合检出率为55.9%。影像学检查结果:腹部彩B超检查,检出率为78.5%;腹部CT（平扫或增强）检查,检出率为87.0%;腹部MRI或MRCP（平扫或增强）检查,检出率为83.8%。手术结果:93例患者行R0根治性切除手术者有64例（68.8%）,姑息性手术者有29例（31.2%）,其中意外胆囊癌有16例（17.2%）。病理学类型以腺癌（90.3%）为主,其余为印戒细胞癌（4.3%）;肉瘤样癌（3.2%）;粘液腺癌（3.2%）;肝样腺癌（2.2%）;腺鳞癌（2.2%）;恶性纤维组织细胞癌（1.1%）;鳞癌（1.1%）;神经内分泌癌（1.1%）;透明细胞癌（1.1%）。病理学分级:高分化7例（7.5%）;中分化46例（49.5%）;中低分化28例（30.1%）;低分化12例（12.9%）。TNM分期:Ⅰ期22例（23.7%）,Ⅱ期15例（16.1%）,Ⅲ期29例（31.2%）,Ⅳ期27例（29.0%）。肝脏侵犯54例（58.1%）;淋巴结转移46例（49.5%）,大多转移至肝十二指肠韧带淋巴结、肝总动脉周围淋巴结、胰头后淋巴结。术后随访时间为1.087.0个月,24例患者仍存活,69例死亡,中位随访时间为13.0个月,中位生存时间为13.0个月,平均生存时间为（30.0±3.4）个月,1、3、5年累计生存率分别为50.5%、31.4%、20.7%。结论:1.原发性胆囊癌老年人好发,女性多见,缺乏特异性临床表现,多种辅助检查方法相结合,可以提高胆囊癌诊断率,根治性手术切除能够有效地延长患者生命期限。2.单因素分析结果表示:术前血清CA125、CA199水平、术前黄疸、肿瘤病理学分级、肝脏侵犯、淋巴结转移、T分期、N分期、M分期、TNM分期、手术方式、意外胆囊癌均是影响原发性胆囊癌患者预后的危险因素。年龄、性别、血型、术前血清AFP、CEA水平、胆囊结石、肿瘤病理学类型与原发性胆囊癌预后无明显相关性。3.多因素分析结果表示:术前血清CA199、肿瘤病理学分级、淋巴结转移、TNM分期、意外胆囊癌是影响胆囊癌预后的独立危险因素,与原发性胆囊癌预后显着相关。4.对于晚期及高龄原发性胆囊癌患者,相比姑息性手术,根治性手术可取得更好的预后,且并未延长住院时间。
曾磊,涂兵[9]（2017）在《原发性胆囊癌诊疗现状》文中研究表明胆囊癌是指发生于胆囊底、体、颈部及胆囊管的恶性肿瘤,发病率约占胆道肿瘤的2/3,胆道手术的1.53%,居消化系统恶性肿瘤的第56位,是最常见的胆道系统恶性肿瘤。由于转移早、侵袭性强、疗效及预后差,患者5年生存率为5.00%[1-2]。确诊胆囊癌时患者多处于较晚阶段,导致接受根治性切除手术治疗的机会
黄年开[10]（2013）在《原发性胆囊癌的治疗及预后影响因素分析》文中进行了进一步梳理目的探讨原发性胆囊癌的治疗以及影响预后的因素。方法回顾性分析41例原发性胆囊癌患者的临床资料。结果胆囊癌组影像学检查结果与对照组比较差异显着;随着患者Nevin分期的增加,中位生存时间缩短、1及3年生存率下降;经Logistic多因素回归分析,Nevin分期、淋巴结转移、肿瘤浸润程度是影响原发性胆囊癌患者预后的因素。结论对原发性胆囊癌应早发现、早诊断、早治疗,以根治性切除术为主的综合治疗。
二、原发性胆囊癌的早期诊断及手术治疗（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、原发性胆囊癌的早期诊断及手术治疗（论文提纲范文）
（1）Bmi-1调控人胆囊癌细胞增殖的效应及其WWOX信号通路的分子机制（论文提纲范文）
| 英文缩写一览表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 技术路线 |
| 参考文献 |
| 第一部分：Bmi-1、WWOX、PUMA在人胆囊癌组织中的表达状态、相关性及临床意义研究 |
| 前言 |
| 实验材料和方法 |
| 实验结果及分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分：靶向shRNA干扰Bmi-1表达对GBC-SD细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响及其调控WWOX通路的分子机制 |
| 前言 |
| 实验材料和方法 |
| 实验结果及分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分：WWOX真核表达载体的构建及对人胆囊癌细胞生长的影响及其下游通路调控机制的研究 |
| 前言 |
| 实验材料和方法 |
| 实验结果及分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第四部分：靶向沉默Bmi-1表达对胆囊癌裸鼠移植瘤生长的影响及其机制的研究 |
| 前言 |
| 实验材料和方法 |
| 实验结果及分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 本课题的创新点 |
| 附录 |
| 文献综述一 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 |
| 参考文献 |
| 博士研究生期间主要发表论文 |
| 博士研究生期间的主要研究课题 |
| 傅士研究生期间主要获奖情况 |
| 博士研究生期间主要学习经历 |
| 博士研究生期间主要学术活动 |
| 基金资助项目 |
| 致谢 |
| 查新咨询报告书 |
（2）原发性胆囊癌诊治的历史、现状及展望（论文提纲范文）
| 1 胆囊癌发病的高危因素研究 |
| 2 胆囊癌影像学诊断的研究 |
| 3 胆囊癌的分子生物学研究 |
| 4 胆囊癌的治疗进展 |
| 4.1 手术治疗 |
| 4.2 胆囊癌的辅助治疗 |
| 5 问题与展望 |
（3）80例胆囊癌诊疗分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 原发性胆囊癌的早期诊断治疗与治疗进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）肿瘤标志物联合检测在胆囊癌诊断和预后的价值（论文提纲范文）
| 中文目录 |
| CONTENTS |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 引言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 附录、附图表 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文与研究成果 |
| 学位论文评阅及答辩情况表1 |
| 英文论文1 |
| 英文论文2 |
| 学位论文评阅及答辩情况表2 |
（6）原发性胆囊癌的早期诊断进展（论文提纲范文）
| 1 原发性胆囊癌的影像学诊断 |
| 1.1 超声 |
| 1.2 CT |
| 1.3 核磁共振成像 (MRI) |
| 1.4 经皮经肝穿刺胆道造影 (PTC) |
| 1.5 内镜逆行胰胆管造影 (ERCP) |
| 1.6 血管造影 |
| 1.7 胆管内镜 |
| 1.8 红外光谱 |
| 2 原发性胆囊癌的分子生物学诊断 |
| 2.1 肿瘤标志物诊断 |
| 2.2 基因诊断 |
| 3 原发性胆囊癌的细胞学检查 |
| 4 原发性胆囊癌的病理学检查 |
| 5 结语 |
（7）原发性胆囊癌的早期诊断（论文提纲范文）
| 临床资料 |
| 讨 论 |
（8）原发性胆囊癌外科诊治与预后分析（附93例临床报告）（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 临床资料及预后分析结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（9）原发性胆囊癌诊疗现状（论文提纲范文）
| 1 发病危险因素及临床表现 |
| 2 临床分型及分期 |
| 2.1 NEVIN分期 |
| 2.2 TNM分期 |
| 3 原发性胆囊癌的诊断 |
| 3.1 影像学检查 |
| 3.1.1 超声 |
| 3.1.2 CT |
| 3.1.3 MRI |
| 3.1.4 PET |
| 3.1.5 其他 |
| 3.2 实验室检查 |
| 4 原发性胆囊癌的治疗 |
| 4.1 手术治疗 |
| 4.2 药物化疗 |
| 4.3 放疗 |
| 4.4中医治疗 |
| 4.5 靶向治疗 |
| 4.6 其他辅助治疗 |
| 5 小结 |
（10）原发性胆囊癌的治疗及预后影响因素分析（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 辅助检查 |
| 1.3 治疗方法 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 影像学检查结果 |
| 2.2 胆囊癌患者生存情况 |
| 2.3 单因素分析 |
| 2.4 影响因素统计学赋值 |
| 2.5 Logistic回归分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 原发性胆囊癌现状 |
| 3.2 原发性胆囊癌影像学特点 |
| 3.3 原发性胆囊癌的治疗 |
| 3.4 影像生存期的因素 |
四、原发性胆囊癌的早期诊断及手术治疗（论文参考文献）
- [1]Bmi-1调控人胆囊癌细胞增殖的效应及其WWOX信号通路的分子机制[D]. 魏东. 昆明医科大学, 2014(11)
- [2]原发性胆囊癌诊治的历史、现状及展望[J]. 石景森,孙学军. 西安交通大学学报(医学版), 2007(05)
- [3]80例胆囊癌诊疗分析[D]. 刘学青. 河北医科大学, 2012(11)
- [4]肿瘤标志物联合检测在胆囊癌诊断和预后的价值[D]. 王云峰. 山东大学, 2014(04)
- [5]胆囊癌的诊断与治疗进展[J]. 于志远,孙岩. 中国普外基础与临床杂志, 2019(03)
- [6]原发性胆囊癌的早期诊断进展[J]. 李守帅,孙学军. 中国普外基础与临床杂志, 2010(04)
- [7]原发性胆囊癌的早期诊断[J]. 石景森,刘刚,于跃利,卢云,焦兴元,杨毅军,李国才,韩玥. 中华肝胆外科杂志, 2000(06)
- [8]原发性胆囊癌外科诊治与预后分析（附93例临床报告）[D]. 田佳. 南京医科大学, 2018(01)
- [9]原发性胆囊癌诊疗现状[J]. 曾磊,涂兵. 现代医药卫生, 2017(03)
- [10]原发性胆囊癌的治疗及预后影响因素分析[J]. 黄年开. 实用癌症杂志, 2013(05)