小鼠移植癌的自体荧光研究

一、鼠类移植癌肿的自体荧光研究（论文文献综述）

吴叔明,罗鸿伃,萧树东,杨远龙,叶衍铭,李黎明,张素胤^[1]（1990）在《鼠类移植癌肿的自体荧光研究》文中指出 一、引言 本报道用氙离子激光作激发光源,对4只正常昆明小白鼠、5只SD大白鼠和4只正常BALB/C裸鼠以及4只移植S-180平滑肌肉瘤的昆明小白鼠,12只移植人胃癌、肝癌和肺癌的BALB/0裸鼠作了皮肤、胃粘膜,肝脏和移植瘤的自体荧光的光谱分析,发现大白鼠和小白鼠的胃粘膜在690nm/（±20nm）处有荧光峰出现,小白鼠的移植瘤在630nm（±20nm）处有荧光峰,而皮肤则无。裸鼠皮肤和胃粘膜在690nm处有荧光峰,而移植瘤在630nm和690

王自明^[2]（2006）在《DFO、5-ALA联合诱导大鼠大肠癌组织原卟啉Ⅸ聚积的实验研究》文中指出大肠癌是常见的恶性肿瘤，加强早期大肠癌的诊治，对提高生存率具有重大意义。激光诱发荧光技术为发现早期大肠癌提供了一种崭新的诊断方法，具有其它方法难以取代的优势。δ-氨基-γ-酮戊酸（5-aminolevulinic acid，5-ALA）能诱导肿瘤组织原卟啉Ⅸ积聚，因其本身不具有光敏特性，避免了直接应用卟啉光敏剂进行光动力学诊断所产生的光毒副作用，在药物荧光诊断中具有广阔的应用前景。本课题探讨去铁胺（deferoxamine，DFO）、5-ALA联合诱导大肠癌组织原卟啉Ⅸ聚积的特性，对临床应用DFO、5-ALA联合诱导荧光诊断早期大肠癌的可行性进行基础性实验研究。研究目的：（1）探讨DFO、5-ALA联合诱导大肠腺癌细胞原卟啉Ⅸ聚积的动力学变化规律及药物浓度、pH值对细胞聚积原卟啉Ⅸ的影响，为该药物诱导大肠癌组织原卟啉Ⅸ聚积实验研究提供参考；（2）为DFO、5-ALA联合诱导大肠癌组织原卟啉Ⅸ聚积实验研究建立大肠癌动物模型；（3）定量分析5-ALA及DFO、5-ALA联合诱导大肠癌大鼠大肠正常组织、早期癌和进展期癌组织原卟啉Ⅸ聚积特征，观察不同组织内原卟啉Ⅸ荧光分布及强度的差异（4）探讨5-ALA不同用药途经对大肠癌大鼠大肠组织原卟啉Ⅸ积聚的影响，为临床应用DFO、5-ALA联合诱导荧光诊断大肠早癌提供依据。实验方法：采用体外细胞培养方法以含DFO、5-ALA的培养液孵育大肠腺癌细胞株SW480细胞2小时，于不同时间点终止培养，用高效液相色谱-荧光检测法检测各时点细胞内原卟啉Ⅸ的含量，并分别对DFO、5-ALA联合作用不同时间、不同pH值及不同浓度所诱导产生的细胞原卟啉Ⅸ含量进行比较分析。60只SD（sprague-DaWley）大鼠采用二甲肼腹腔注射诱导，纤微胆道镜动态观察大鼠大肠内变化及成瘤情况。成功诱导含各期大肠癌变的SD大鼠分组分别用生理盐水、5-ALA及DFO+5-ALA注射，4小时后解剖大鼠，取出大肠可疑癌变及正常组织标本，经病理切片确诊的大肠正常组织、早癌组织、进展期癌组织标本分别通过原卟啉Ⅸ提取，用高效液相色谱-荧光检测法检测其原卟啉Ⅸ含量，并对DFO、5-ALA联合诱导不同时间3种组织标本中原卟啉Ⅸ含量进行比较分析，采用激光共聚焦显微镜对3种组织内原卟啉Ⅸ荧光分布及强度进行检测。在DFO腹腔注射大鼠半小时后，5-ALA分别采用静脉注射、口服和保留灌肠3种给药途经诱导，通过对大肠正常组织、早癌组织及进展期癌组织原卟啉Ⅸ进行定量分析、荧光分布观察及强度检测，比较3种不同给药途经对癌变组织原卟啉Ⅸ聚积的诱导效果。实验结果：细胞学实验显示，大肠腺癌细胞内原卟啉Ⅸ含量在药物作用细胞40分钟后明显升高，在细胞培养4小时（药物终止作用后2小时）达到高峰，之后逐渐下降；在pH值为6.5～7.0、DFO浓度为10～20momL／mL、5-ALA浓度为1.5～2.0momL／mL时，癌细胞内原卟啉Ⅸ含量最高。SD大鼠大肠癌的发生主要呈炎症—萎缩—增生—癌变的发展过程，大肠癌总诱导率为85％，其中多发性肿块占94％。在不同药物诱导的3组大鼠中，各组大鼠大肠组织原卟啉Ⅸ含量由小到大依次为：大肠正常组织、早期大肠癌、进展期大肠癌；3组比较，DFO、5-ALA联合诱导组组织原卟啉Ⅸ含量最高，其早癌和进展癌组织在用药4小时组织原卟啉Ⅸ含量最大、正常组织在用药2小时组织原卟啉Ⅸ含量达到高峰，癌变组织与正常大肠组织原卟啉Ⅸ含量在用药后4小时差异最明显；组织原卟啉Ⅸ红色荧光在正常组织表达最弱，早期大肠癌荧光呈点状散布在癌变组织细胞内，进展期大肠癌病灶局部表现为大量高亮度块状荧光；荧光强度分析：正常组织＜早期大肠癌＜进展期大肠。在5-ALA不同的3种给药途经中，静脉注射癌变组织原卟啉Ⅸ含量最高；保留灌肠给药取得较好的诱导效果，且癌变组织表层荧光强度大；口服给药癌变组织原卟啉Ⅸ含量最低。结论：（1）DFO、5-ALA联合诱导大肠腺癌细胞原卟啉Ⅸ聚积的最短诱导时间不得少于40分钟，最佳检测时间为终止药作用后2小时；（2）采用二甲肼腹腔注射、内镜观察的方法诱导SD大鼠，成功建立了本研究需要的多发性包含各期癌变的大肠癌动物模型；（3）5-ALA与DFO联合应用，能显着提高5-ALA诱导癌组织原卟啉Ⅸ的积聚作用，组织原卟啉Ⅸ红色荧光主要集中聚集在癌变组织细胞内，检测最佳时间为用药后4～6小时；（4）5-ALA保留灌肠给药可取得较好的诱导效果。

黄秋林^[3]（2004）在《大鼠大肠粘膜不典型增生及各期大肠癌组织自体荧光光谱特征分析及机制研究》文中研究指明目的：（1）建立大鼠大肠癌动物模型；（2）分析激光诱导大鼠大肠正常组织、不典型增生组织、早期及进展期大肠癌组织自体荧光光谱特征差异，探讨其区分方法；（3）探讨大鼠大肠正常组织、不典型增生组织、早期大肠癌和进展期癌组织中Ⅳ胶原和组织蛋白酶B的表达差异和相关性。 方法：6～7周龄Sprague-Dawley（SD）大鼠60只，采用二甲肼（DMH）腹腔注射，25 mg/kg，每周1次，共18周。分别于第4周、8周、12周、16周各解剖3只大鼠结肠和直肠，用370nm激发波长的调Q式钛宝石激光器激发大肠正常组织、可疑病变组织和肿块组织产生自体荧光，收集在体和离体组织的自体荧光光谱。留取部分组织置入液氮中保存，剩余组织行病理切片检查。余下大鼠在第20周后行相同处理。根据病理诊断分为正常组、不典型增生组、早期癌组和进展期癌组，比较分析各组组织自体荧光光谱特征和差异。用免疫组化染色的方法检测正常组、不典型增生组、早期癌组和进展期癌组各25例组织标本中Ⅳ胶原和组织蛋白酶B的表达，比较各组间差异，并进行相关性分析。用β-actin基因作为参照，半定量的RT-PCR法检测各组中组织蛋白酶B mRNA的表达，比较各组间的表达差异。中甫大学博士学位论文 结果:20周后成功诱导了大肠癌动物模型，大肠癌总诱导率为82%（49/60），多发性大肠肿块大鼠占92%（45/49）。对283标本进行了在体和离体组织自体荧光检测，正常组64例，不典型增生组57例，早期癌组78例，进展期癌组84例。各组组织自体荧光光谱在460nm左右、505nm左右处大多有荧光峰;73%的进展期癌组织、69%的早期癌组织和54%的不典型增生组织的荧光光谱在 635nm附近有荧光峰。正常组在460nm左右波峰对应的波长与不典型增生组、早期癌组和进展期组对应波长比较发生紫移，波长紫移均值分别为4.3nm、10.Znm和10.gnm。离体组织在46Onm左右处波峰位置比较在体组织该处波峰位置有差异（p<0.05）;早期癌组和进展期癌组自体荧光在460nm处的荧光强度比在正常组和不典型增生组要弱。早期癌组和进展期癌组工635/I;6。值、工635/160。值分别较正常组、不典型增生组的1635/I;6。值、1635/16。。值大（p（0.05），早期癌组和进展期癌组的1635/I;6。值、1635/16。。值比较差异不显着性（p）0.05），不典型增生组的1635/146。、1635/160。值分别较正常组1635/I;6。、1635/16。。值大(p（0.05）。正常组（或不典型增生组）的特定工635/工。6。值、1635/工60。值作为闭值区分正常组织和不典型增生组织、大肠癌组织（或正常组织、不典型增生组织与大肠癌组织）的总正确率约为80%。免疫组化染色显示正常组、不典型增生组、早期癌组、进展期癌组中的基底膜均有W胶原表达，正常大肠组织与不典型增生组织之间比较表达差异无显着性（p>0 .05）;早期癌、进展期癌组织中表达减少，与正常大肠组织、不典型增生组比较，差异有显着性（p<0.05）。组织蛋白酶B在早期癌、进展期癌组否中南大学博d二学亡立论文织中表达较正常大肠组织和不典型增生组织表达增加，差异有显着性（p<0.05）。大肠癌组织中组织蛋白酶B表达与W胶原表达成负相关（相关系数二一0.721，p<0 .05）。组织蛋白酶B mRNA表达在癌组织中表达水平较正常组织、不典型增生组织中表达水平增加，早期癌组中组织蛋白酶B mRNA表达水平高于进展期癌组。 结论:（1）利用二甲腆腹腔注射法成功建立了大肠癌动物模型。 （2）激光诱导的大鼠大肠正常组织、不典型增生组织、大肠癌组织 （包括早期和进展期大肠癌）的自体荧光光谱之间及在体组织和离体组织自体荧光光谱之间部分特征存在差异。（3）根据大鼠大肠组织特定荧光强度比值（1635瓜6。、1635/Ie0。）建立的区分标准有一定判别价值。（4）大鼠大肠癌组织中W胶原表达较正常组织和不典型增生组织中表达减少。（5）大鼠大肠癌组织中组织蛋白酶B表达较正常组织和不典型增生组织中表达增加。（6）大鼠大肠癌组织中组织蛋白酶B表达与W胶原表达成负相关，大肠癌组织中IV胶原减少可能与组织蛋白酶B增加有关。（7）早期大鼠大肠癌组织出现组织蛋白酶B基因表达上调可能是导致癌细胞分泌组织蛋白酶B并向基底膜侵犯降解IV胶原的重要原因。

二、鼠类移植癌肿的自体荧光研究（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、鼠类移植癌肿的自体荧光研究（论文提纲范文）

（2）DFO、5-ALA联合诱导大鼠大肠癌组织原卟啉Ⅸ聚积的实验研究（论文提纲范文）

（3）大鼠大肠粘膜不典型增生及各期大肠癌组织自体荧光光谱特征分析及机制研究（论文提纲范文）

四、鼠类移植癌肿的自体荧光研究（论文参考文献）

• [1]鼠类移植癌肿的自体荧光研究[J]. 吴叔明,罗鸿伃,萧树东,杨远龙,叶衍铭,李黎明,张素胤. 中国激光, 1990(01)
• [2]DFO、5-ALA联合诱导大鼠大肠癌组织原卟啉Ⅸ聚积的实验研究[D]. 王自明. 中南大学, 2006(01)
• [3]大鼠大肠粘膜不典型增生及各期大肠癌组织自体荧光光谱特征分析及机制研究[D]. 黄秋林. 中南大学, 2004(04)

标签：大肠;  细胞癌变;  荧光材料;  荧光检测;  荧光强度;