一、通肾汤治疗大鼠慢性肾功能衰竭的实验研究（论文文献综述）
覃姣玉[1]（2021）在《壮医莲花针拔罐逐瘀疗法联合车前玉苇通肾汤治疗AGA的临床研究》文中指出
黄赫[2]（2021）在《基于网络药理学的大黄-水蛭药对防治慢性肾脏病的机制研究》文中指出目的:慢性肾脏病在人群中的发病率呈逐年增加之势,已成为危害人类健康的严重公共卫生问题。高继宁教授从事中医肾病工作多年,有着丰富的临床经验,常用大黄、水蛭配伍治疗慢性肾脏病。本文通过网络药理学研究方法构建“药物-化合物-靶点-疾病”的复杂网络关系,预测大黄-水蛭药对防治慢性肾脏病的可能活性成分和潜在作用靶点,研究其防治慢性肾脏病的作用机制。方法:首先,运用中药系统药理学数据库与分析平台及文献检索收集大黄、水蛭的活性化合物,将其导入PubChem数据库获得其标准化合物名称及SMILES格式,并通过SwissADME平台筛选满足口服生物利用度及类药性特征要求的有效活性化合物,在SwissTargetPrediction平台及TCMSP数据库获取有效活性化合物的作用靶点,使用Uniprot数据库将上述作用靶点统一转换为基因名称,去重整理。随后,将TTD、DrugBank、DisGeNET、OMIM数据库收集到的与慢性肾脏病相关靶点蛋白相合并,得到与慢性肾脏病相关的靶点蛋白。利用jvenn平台获取大黄、水蛭防治慢性肾脏病的潜在关键靶点。通过Cytoscape3.7.2软件构建“药物-化合物-靶点-疾病”网络,并通过STRING平台进一步明确关键靶点蛋白的互相之间作用关系。最后,将筛选出的关键靶点导入DAVIDv6.8数据库,对关键靶点进行基因本体功能富集分析和代谢通路富集分析。从而系统分析“大黄-水蛭”药对防治慢性肾脏病的网络药理学作用机制。结果:1.“大黄-水蛭”药对的有效活性化合物及作用靶点:通过SwissADME平台共筛选得到符合口服生物利用度及类药性特征要求的有效活性化合物28个,包括了大黄26个,水蜂2个,在SwissTargetPrediction平台及TCMSP数据库共获得“大黄-水蛭”药对的675个有效活性化合物作用靶点。2.慢性肾脏病相关的疾病靶点蛋白:通过TTD、DrugBank、DisGeNET、OMIM数据库共筛选得到1329个与慢性肾脏病相关的靶点蛋白。3.“大黄-水蛭”药对防治慢性肾脏病的潜在关键靶点:通过jvenn平台获得67个“大黄-水蛭”药对与慢性肾脏病共有的靶点靶点,即为“大黄-水蛭”药对防治慢性肾脏病的潜在关键靶点。4.“大黄-水蛭”药对防治慢性肾脏病的“药物-化合物-靶点-疾病”网络构建:基于Cytoscape3.7.2软件构建“大黄-水蛭”药对防治慢性肾脏病的“药物-化合物-靶点-疾病”网络。该网络共含有98个节点和255条边,包含1个疾病节点,2个药物节点,28个活性化合物节点,67个靶点节点。对其进行网络拓扑学分析,化合物的介度中心性、紧密度中心性、度值中位数分别为0.00564757、0.38039216、5.5,共有10个活性化合物符合核心活性化合物的筛选条件,分别为泽兰黄醇、白皮杉醇、丹叶大黄素、大黄酚、大黄素、10 β-羟基-6β-异丁酰喃佛术烷、大黄素甲醚、大黄素蒽酮、大黄酸、决明内酯。靶点的介度中心性、紧密度中心性、度值中位数分别为 0.00236264、0.43891403、2,位于其上的靶点有 PPARG、MMP3、MMP9、CYP2C19、EGFR、ALPL、ABCG2、ABCB1、ADHIC、MPO、LDHA、MMP2、HDAC8、ADAM17、ACE、RET、FLT1、AHR、EGLN1、TP53、APP、MAPT、ECE1、MME、CYP1A2、SHBG、SLC13A5、FADS1,而符合条件度值排名前五的分别为EGFR、MMP9、MMP2、LDHA、ABCB1。5.交集靶点蛋白的相互作用网络:通过STRING平台获得关键靶点蛋白的互相之间作用关系,利用Cytoscape3.7.2软件对其进行可视化,介度中心性、紧密度中心性、度值中位数分别为0.00374192、0.7173913、40,则在该网络中发挥关键作用的靶点有 SIRT1、MMP2、CCL2、PDGFRB、IL1B、STAT3、TP53、REN、EGFR、FLT1、APP、PPARG、ACE、NOS3、CXCL8、PSEN1、CTNNB1、DPP4、MMP9、TLR4、SPP1、TNF、HIF1A、ITGB3、VEGFA、MMP3。由上述数据对比发现可知,EGFR、MMP9、MMP2于“药物-化合物-靶点-疾病”网络及蛋白相互作用网络中均处于核心地位,推测其为“大黄-水蛭”药对防治慢性肾脏病的核心作用靶点。6.富集分析结果:通过David数据库获得271条生物过程条目、44条细胞组成条目、59条分子功能条目,主要涉及RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、质膜、蛋白质结合等,绝大多数靶点富集集中在HIF-1信号通路、NOD样受体通路、Toll样受体信号通路、TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、NF-κB信号通路、MAPK信号通路等56条信号通路。结论:本研究利用网络药理学技术初步探讨了“大黄-水蛭”药对通过多成分、多靶点、多层次整体调控多条信号通路,发挥抗炎、抗纤维化、抗氧化、抗癌、调节免疫等多种机制协同作用于慢性肾脏病的复杂网络过程。为“大黄-水蛭”药对防治慢性肾脏病提供了重要的科学依据,具有一定的指导意义。
王巧花[3]（2021）在《基于Wnt/β-catenin信号通路研究桃核承气汤对慢性肾衰竭大鼠的作用机制》文中指出目的:通过研究桃核承气汤对5/6肾切除所致慢性肾功能衰竭（Chronic renal failure,CRF）模型大鼠的贫血指标、肾功能、病理形态以及Wnt/β-catenin信号通路中的APC、β-catenin及TCF4的影响,探讨该方减轻肾纤维化,延缓CRF的作用机理,为临床上运用桃核承气汤治疗CRF提供客观实验依据,指导临床用药。方法:（1）分组与模型制备:将125只7周龄雄性Wistar大鼠予普通饲料、超纯水喂养一周,使其适应性实验环境,先以随机的方式抽取50只大鼠分为空白组和假手术组各25只,其中空白组不行手术干预,假手术组仅行手术剥离双肾被膜;余下的75只大鼠依据文献方法行5/6肾切除术制备慢性肾衰竭模型,即先切除左侧2/3肾脏,一周后再切除右侧肾脏;术后3天予注射青霉素预防感染,确认造模成功后再随机分成模型组、尿毒清组以及桃核承气汤组各25只大鼠。（2）药物灌胃干预:在大鼠造模成功后第四周始,每天上午8时定时给药灌胃:除尿毒清组与桃核承气汤组大鼠分别予尿毒清颗粒溶液和桃核承气汤药液灌胃外,余下3组大鼠则予生理盐水灌胃;大鼠给药剂量为临床成人每公斤体重用药量的6倍计算,灌胃用量根据大鼠每周体重变化进行调整,每天灌胃前先观察并记录大鼠的一般情况,灌胃时间为56天。（3）标本检测:在第57天麻醉大鼠,取血液及残余肾组织标本后处死,血液标本用于检测大鼠RBC、HB、Scr、BUN;肾组织标本分别用实时荧光定量PCR法和Western Blot法检测左肾组织APC、β-catenin及TCF4的m RNA及蛋白含量表达情况;各组随机留取3只大鼠,在未取血的情况下,于肾脏皮质部分取1mm×1mm×1mm的组织若干块,迅速投入预冷的固定液中进行固定,用于透射电子显微镜观察肾组织病理形态。结果:（1）空白组和假手术组大鼠的血常规、肾功能、m RNA和蛋白表达含量及病理形态正常且无明显差别（P>0.05）。（2）桃核承气汤组大鼠的RBC、Hb水平相对模型组显着升高（P<0.05）。（3）桃核承气汤组大鼠的Scr、BUN水平相对模型组显着降低（P<0.05）,且亦低于尿毒清组（P<0.05）。（4）桃核承气汤组大鼠相对于模型组和尿毒清组大鼠,APC的m RNA及蛋白表达含量显着升高（P<0.05）,而β-catenin、TCF4表达含量则显着降低（P<0.05）。（5）电镜观察显示:空白组及假手术组大鼠肾小球与肾小管细胞超微结构形态正常。模型组大鼠肾组织在电镜下无法清晰辨认肾小球及肾小管超微结构;毛细血管内可见大量炎细胞浸润,系膜细胞增生明显,足突融合,足细胞变性;肾小管坏死,上皮细胞水肿明显,核膜多处破损;线粒体模糊、空泡样改变;刷状缘脱失。尿毒清组和桃核承气汤组大鼠病变程度明显轻于模型组大鼠,且桃核承气汤组大鼠肾小球及肾小管组织完整性优于尿毒清组大鼠。结论:（1）桃核承气汤对CRF模型大鼠的贫血状态、肾功能及肾脏病理损伤有明显的改善作用。（2）桃核承气汤可减轻CRF模型大鼠的肾纤维化程度,延缓CRF进程,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路传导,上调APC的表达,下调β-catenin、TCF4的表达有关。
边红萍[4]（2021）在《基于“肾主水”理论探讨金匮肾气丸治疗慢性肾功能衰竭的实验研究》文中认为研究目的本研究工作以2.5%腺嘌呤混悬液灌胃与单侧输尿管结扎两种方法复制CRF大鼠模型,以金匮肾气丸“补益肾气”为治法,研究肺、肾、膀胱上APQ1-4的表达,探讨机体水液代谢的调控与机理,评价中医“肾主水”理论的科学性,为金匮肾气丸在中医慢性肾脏病的治疗与干预水液代谢调控提供实验依据。研究方法1金匮肾气丸治疗腺嘌呤慢性肾功能衰竭大鼠实验研究将60只健康雄性SD大鼠,随机分正常组（n=20只）和腺嘌呤造模组（n=40只）,适应性喂养1周后,用2.5%的腺嘌呤悬浊液剂量为250mg/（kg·d）灌胃复制CRF模型4周,两组中各取10只大鼠进行血、尿肾组织病理检测,评估腺嘌呤CRF大鼠模型。剩余40只大鼠分为正常组、CRF模型组、金匮肾气丸中剂量、金匮肾气丸高剂量4组,每组10只。金匮肾气丸中、高剂量组分别给予对应浓度剂量金匮肾气丸溶液灌胃,正常组、CRF模型组大鼠予以等量蒸馏水灌胃,治疗4周,比较各组大鼠24h-UTP,血常规、血生化与肾脏病理指标。2金匮肾气丸治疗UUO慢性肾功能衰竭大鼠实验研究50只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（n=10只）和UUO造模组（n=40只）。采用UUO手术法复制CRF模型,将大鼠10%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉,在左肾下极临近肾门处及输尿管的上1/3处用0#丝线结扎并剪断,缝合肌肉皮肤组织。假手术组大鼠给予等量10%水合氯醛腹腔麻醉开腹,仅钝性分离左侧输尿管并不予以结扎;正常组不做任何手术处理。UUO术后2周随机抽取10只大鼠评估UUO法CRF大鼠模型。剩余40只大鼠再分为假手术组、UUO模型组、金匮肾气丸中剂量组、金匮肾气丸高剂量组,每组10只。假手术组、UUO模型组采用蒸馏水灌胃;金匮肾气丸中、高剂量治疗组分别给予对应浓度剂量的金匮肾气溶液灌胃,疗程4周,比较各组大鼠的24h-UTP,血常规与生化、肾脏病理指标。（正常组同实验第一部分）3.慢性肾功能衰竭大鼠水通道蛋白表达的实验研究金匮肾气丸治疗4周,腺嘌呤灌胃与UUO法CRF各组大鼠获取肾脏、肺脏、膀胱组织,用Western blotting检测对应的水通道蛋白AQP1、AQP2、AQP3、AQP4,将不同蛋白条带图像用Image J软件进行灰度值分析,对应DAPDH蛋白条带作进行数据矫正。4.采用SPSS18.0软件对实验结果进行分析,计量资料用均数±标准差（x±s）表示,多组间均数的比较采用两独立样本t检验和单因素方差分析,双侧检验,检验水准α=0.05,P<0.05定义为统计差异性显着。研究结果1.腺嘌呤造模组4周大鼠24h U-TP、BUN、Scr与正常组比较均增高,统计有显着性差异（P<0.05）,大鼠肾脏病理损伤与CRF病理表现一致。金匮肾气丸治疗各组与腺嘌呤模型组24h U-TP、BUN、Scr水平比较降低,有显着统计学差异（P<0.05）,金匮肾气治疗组各组大鼠肾脏病理损伤与腺嘌呤模型组相比,有不同程度减轻。2.UUO术后2周大鼠24h U-TP、BUN、Scr水平与正常组比较均升高,统计有显着性差异（P<0.05）,UUO大鼠肾脏病理损伤与CRF病理表现一致。金匮肾气丸各治疗组与UUO模型组24h U-TP、BUN、Scr水平比较降低,有显着统计学差异（P<0.05）。金匮肾气治疗组各组大鼠肾脏病理损伤与UUO模型组相比,有不同程度减轻。3.各组大鼠肾脏、肺脏、膀胱AQP蛋白检测中（1）腺嘌呤模型组大鼠肾脏AQP1-4与膀胱AQP3表达上调,与正常组比较有显着性差异（P<0.05）。肺脏AQP1与膀胱AQP1表达下调,与正常组比较有显着性差异（P<0.05）。（2）UUO模型组大鼠肾脏AQP1与AQP4、肺脏AQP1、膀胱AQP4表达下调,与正常组比较统计有显着性差异（P<0.05）;膀胱AQP3表达上调,与正常组比较统计有显着性差异（P<0.05）。（3）腺嘌呤CRF金匮肾气丸中高剂量治疗组肾脏AQP1-4均有下调,与腺嘌呤模型组比较统计有差异显着性（P<0.05）。膀胱AQP1水平上调,与腺嘌呤模型组比较统计有差异显着性（P<0.05）。（4）UUO金匮肾气丸高剂量治疗组膀胱AQP4蛋白明显上调,与UUO模型组比较有显着性差异（P<0.05）。研究结论1、金匮肾气丸可以改善腺嘌呤与UUO慢性肾功能衰竭大鼠的生存质量,改善肾功能,减少24h尿蛋白定量,减轻大鼠肾脏的病理损害,可不同程度改善肾脏纤维化损伤程度。2、金匮肾气丸治疗UUO与腺嘌呤CRF大鼠,通过调节不同种类与部位AQP表达发挥作用。两者侧重有不同,金匮肾气丸治疗腺嘌呤CRF主要下调肾脏AQP1-4和上调膀胱AQP1表达。金匮肾气丸治疗UUO大鼠,其肾脏与肺脏AQP2、AQP3、AQP4表达上调不显着,而以膀胱AQP4蛋白表达上调突出。
麦文顶[5]（2021）在《三七注射液对慢性肾衰竭大鼠肠道菌群多样性结构变化的研究》文中研究表明目的:观察三七注射液对慢性肾衰竭大鼠肠道菌群多样性结构变化的影响。方法:将60只SD大鼠随机分成正常组、模型组、低剂量治疗组、中剂量治疗组、高剂量治疗组和贝那普利组共6组,每组10只。除正常组大鼠以外各组大鼠均采用5/6肾切除的方法建立慢性肾衰竭大鼠模型。造模成功后,对正常组、模型组予以生理盐水（10m L/kg·d）腹腔注射给药;低、中、高剂量治疗组,分别予以三七注射液1、2、3g/kg·d腹腔注射给药,贝那普利组予盐酸贝那普利5mg/kg·d药液灌胃,每天一次,共干预8周。6组大鼠均采用全自动生化仪检测肾功能;采用ELISA检测硫酸吲哚酚（IS）和D-乳酸（D-LA）水平;采用鲎试验法定量检测内毒素;采用宏基因组测序菌群鉴定肠道内容物:应用Alpha多样性分析的4个指标:Ace、Chao1、Shannon、Simpson检测物种丰度及物种多样性;使用基于Beta多样性分析进行的主坐标分析法（PCo A）研究样本群落组成的相似性或差异性;在门、属水平上采用OTU分析进行物种注释及分类学分析。结果:（1）代谢毒素指标:模型组大鼠BUN、SCr和IS水平较正常组上升（P<0.01）,而经三七注射液及盐酸贝那普利干预后,BUN、SCr和IS水平呈下降趋势,其中中、高剂量治疗组及贝那普利组较模型组下降,有统计学意义（P<0.01）。（2）模型组内毒素和D-LA水平较正常组上调（P<0.01）,而经三七注射液和盐酸盐酸贝那普利干预后,各用药组与模型组相比均有下降趋势,其中中、高剂量治疗组及贝那普利组较模型组下降,有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。（3）Ace、Chao1两个丰度指数分析显示:模型组Ace、Chao1丰度指数下降,与正常组比较有统计学意义（P<0.01）,三七注射液及贝那普利治疗后各治疗组的Ace、Chao1指数有升高趋势,低中高剂量治疗组、贝那普利组与模型组比较均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;Shannon多样性指数分析显示:模型组Shannon指数下降,与正常组比较无统计学意义（P>0.05）,三七注射液及贝那普利治疗后各治疗组的Shannon指数有升高趋势,低中高剂量治疗组与模型组比较均无统计学意义（P>0.05）,贝那普利组与模型组比较有统计学意义（P<0.01）;Simpson多样性指数分析显示:模型组Simpson指数上升,与正常组比较无统计学意义（P>0.05）,三七注射液及贝那普利治疗后各治疗组的Simpson指数有下降趋势,但低中高剂量治疗组与模型组比较均无统计学意义（P>0.05）,贝那普利组与模型组比较有统计学意义（P<0.05）。（4）PCo A分析结果提示各组组内相似性好,高剂量治疗组和贝那普利组与模型组及低剂量治疗组有显着差异,中剂量治疗组与模型组及低剂量治疗组也有显着差异,差异小于模型组和高剂量治疗组,正常组与模型组也有显着差异,但与低剂量治疗组差异不大。（5）各组样本菌群在门水平上,厚壁菌门所占比例最高,平均超过75%,其次为拟杆菌门和变形菌门,各组菌群在门水平上无明显差异。（6）各组在属水平上,相对于模型组和低剂量治疗组,在贝那普利组,中、高剂量治疗组中,肠杆菌科-志贺菌属丰度下降显着,乳杆菌属、毛螺菌属、瘤胃菌属、瘤胃球菌属等丰度显着上升。结论:三七注射液可以显着改善慢性肾衰竭大鼠肾功能,对肠道粘膜屏障有明显保护作用,可改善肠道菌群物种丰度及多样性。
耿芳[6]（2021）在《益气活血、软坚散结法干预PHD-HIF-hepcidin信号轴防治肾性贫血的作用机制研究》文中研究表明目的:通过观察益气活血、软坚散结法对肾性贫血大鼠的肾功能、血常规、铁代谢、相关炎症因子的指标变化情况,并比较肾组织中PHD-HIF信号通路的相关蛋白的表达,初步探讨益气活血、软坚散结法防治肾性贫血的作用机制。方法:将32只雄性SPF级大鼠,体重170-180g/只,随机分为对照组、模型组、中药组与罗沙司他组4组,每组8只。适应性喂养1周后对除对照组以外的各组大鼠进行单侧肾切除手术法造模。术后恢复性饲养2周后,模型组及各治疗组开始腺嘌呤灌胃,灌胃剂量按照1ml/100g进行给药,对照组大鼠予以同等剂量的去离子水进行灌胃,各治疗组大鼠在手术后3周开始进行药物治疗,中药组按照18.2g/kg/d剂量灌胃,罗沙司他组按照27mg/kg/d剂量灌胃,给药持续12周。12周后采用股动脉取血,检测大鼠血红细胞（Red Blood Cell,RBC）、血红蛋白（Hemoglobin,Hb）、红细胞压积（Red Blood Cell Specific Volume,HCT）、尿素氮（Blood Urea Nitrogen,BUN）、血清肌酐（Serum Creatinine,Scr）、血清铁、总铁结合力、铁蛋白水平。用Elisa法检测大鼠肾组织IL-6（Interleukin-6）、TNF-α（Tumor Necrosis Factor-α）指标和铁调素;用Western Blot法检测脯氨酸羟化酶（Prolyl Hydroxylase,PHD）、低氧诱导因子（Hypoxia Inducible Factor,HIF）蛋白在肾脏中表达情况。并运用SPSS22.0软件对上述数据进行统计分析。结果:1.造模完成后,检查对照组与模型组的Scr、BUN、Hb指标,模型组的血肌酐、尿素氮水平较对照组明显升高,血红蛋白水平较对照组明显降低,差异均有统计学意义（P<0.01）,提示肾性贫血大鼠模型造模成功。2.与模型组相比,中药组RBC、Hb显着升高,差异有统计学意义（P<0.01）,HCT有所升高,但差异无统计学意义（P>0.05）;与模型组相比,罗沙司他组RBC、Hb、HCT显着升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与中药组相比,罗沙司他组Hb、HCT显着升高,差异有统计学意义（P<0.01）,RBC指标有所升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。3.与对照组相比,模型组、中药组、罗沙司他组血肌酐、尿素氮水平均明显升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,中药组血肌酐、尿素氮水平明显下降,差异有统计学意义（P<0.01）;而罗沙司他组与模型组比较未见血肌酐、尿素氮水平的明显下降（P>0.05）;与中药组相比,罗沙司他组肾功能指标明显下降,差异有统计学意义（P<0.01）。4.与模型组相比,中药组血清铁、转铁蛋白显着升高,铁调素下降,差异有统计学意义（P<0.01）,而总铁结合力虽有所升高,但差异无统计学意义（P>0.05）;与中药组相比罗沙司他组血清铁、转铁蛋白显着升高,铁调素下降,差异有统计学意义（P<0.01）,而总铁结合力虽升高,但差异并无统计学意义（P>0.05）。5.与对照组相比,模型组及各治疗组IL-6、TNF-α均显着上调,差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,中药组和罗沙司他组IL-6、TNF-α显着下降,差异有统计学意义（P<0.01）;与中药组相比,罗沙司他组IL-6下降,差异有统计学意义（P<0.05）,TNF-α显着下降,差异有统计学意义（P<0.01）。6.与对照组相比,模型组PHD-2蛋白显着上调,HIF-2α蛋白显着下降,差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,中药组HIF-2α蛋白显着上调（P<0.01）,PHD-2下调无统计学意义（P>0.05）,但存在下降趋势;与模型组相比,罗沙司他组PHD-2蛋白显着下调,HIF-2α蛋白显着升高,差异有统计学意义（p<0.01）;罗沙司他组与中药组比较,二者均有统计学差异（P<0.01）。结论:本研究表明益气活血、软坚散结法具有纠正肾性贫血并改善肾功能的疗效,其机制可能与调节HIF-铁调素信号及降低IL-6、TNF-α水平以改善微炎症状态有关。
刘淑芳[7]（2021）在《慢性肾脏病合并2型糖尿病中医证候、临床病理特点研究》文中进行了进一步梳理目的:研究慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）合并2型糖尿病（type 2 diabetes mellitu,T2DM）患者中医证候、临床特征及肾脏病理特点的相关性,分析探讨糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）和非糖尿病肾病（non-diabetic renal disease,NDRD）的临床预测因素,以期为临床更好的诊疗此类疾病提供理论依据。方法:收集2015年1月-2020年10月在天津中医药大学第一附属医院肾病科住院,明确诊断为CKD合并T2DM,且经肾穿刺活检并取得满意标本的患者106例。收集并记录患者一般资料、中医证候、实验室生化指标和肾脏病理资料。按照肾活检病理结果,将纳入患者分为DN组和NDRD组（包括DN合并NDRD）。回顾性分析两组间中医证候、临床资料、肾脏病理的差异。结果:1本研究所纳入的106例患者,其年龄主要集中在中老年（≥45岁）。且超半数的患者超重（67.4%）,并已有糖尿病史5年以上。而84.9%的患者在就诊时已存在高血压。2 DN的发生与多因素相关,两组患者的糖尿病病程、BMI分组情况、24h-PRO、Scr、BUN、UA、Cys C、HCY、K、P均存在差异。且与NDRD组相比,DN组患者糖尿病病程长,24h-PRO、Scr、BUN、UA、K、Cys C水平高,e GFR低,贫血、高同型半胱氨酸血症、高磷血症发生率高。两组性别、年龄分布、糖尿病家族遗传史、糖尿病视网膜病变、高血压病史及病程、吸烟情况、饮酒情况、镜下血尿、FBG、Hb A1c、SBP、DBP、ALB、TC、TG、HDL-C、LDL-C、VLDL-C、Ca比较差异无统计学意义。3本虚证中,DN组以肝肾阴虚证分布最多,其次是气阴两虚证。NDRD组脾肾阳虚证占比最大,气阴两虚证次之。脾肾阳虚证在NDRD组分布明显高于DN组,肝肾阴虚证在DN组分布明显高于NDRD组。标实证中,DN组以血瘀证分布最多,其次是湿热证。NDRD组湿热证占比最大,湿浊证次之。血瘀证在DN组分布明显高于NDRD组。4 NDRD病理类型有7种,包括原发和继发肾小球疾病,NDRD组患者中最常见的病理类型为MN,其次是系膜增生性肾炎和Ig A肾病。继发性肾小球疾病中病理类型最多的为良性肾小动脉硬化症。DN组肾脏病变程度比NDRD组严重,NDRD组患者球性硬化、小血管病变程度（有无硬化及炎细胞浸润）较轻,且统计学差异均显着（P<0.01）。两组间肾小球数、肾小球新月体发生率、间质纤维化比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。5应用Logistic回归分析探讨NDRD的危险因素及预测因子,糖尿病病程短、高肾小球滤过率、高血红蛋白是发生NDRD预测因子。进一步通过ROC曲线进行评估分析,发现肾小球滤过率预测NDRD的敏感性和特异性分别为85.7%和70.7%;血红蛋白预测NDRD的敏感性高达93.7%,特异性仅为62.8%。肾小球滤过率预测NDRD的曲线下面积是0.831,其最佳临界点为58.9ml/min/m2;血红蛋白的曲线下面积为0.843,其最佳临界点为117g/L,即肾小球滤过率大于58.9ml/min/m2和（或）血红蛋白超过117g/L时,发展为NDRD的风险明显增加;反之,肾小球滤过率小于58.9ml/min/m2和（或）血红蛋白低于117g/L时,发展为DN的风险明显增加。结论:1本研究人群中NDRD患病率较高。2与NDRD组相比,DN组患者糖尿病病程更长,肾功能更差,贫血、高同型半胱氨酸血症、高磷血症发生率高。3中医证型中,DN组本虚证以肝肾阴虚、气阴两虚最为常见,标实证以血瘀、湿热最为常见;NDRD组本虚证以脾肾阳虚、气阴两虚最为常见,标实证以湿热、湿浊最为常见。4 NDRD最常见的病理类型为膜性肾病,其次为系膜增生性肾炎和Ig A肾病。两组患者肾脏病变程度不一,DN组肾脏病变程度比NDRD组严重,NDRD组患者球性硬化、小血管病变程度（有无硬化及炎细胞浸润）较轻。5经Logistic回归分析发现糖尿病病程、肾小球滤过率、血红蛋白是发生NDRD的独立危险因素。6应用ROC曲线进一步分析评估发现:肾小球滤过率大于58.9ml/min/m2和（或）血红蛋白超过117g/L时,发展为NDRD的风险明显增加。反之,肾小球滤过率小于58.9ml/min/m2和（或）血红蛋白低于117g/L时,发展为DN的风险明显增加。
王颖[8]（2021）在《小柴胡汤治疗肾性蛋白尿的Meta分析和网络药理学研究》文中研究说明研究一小柴胡汤治疗原发性肾性蛋白尿临床研究文献Meta分析目的系统评价小柴胡汤治疗原发性肾性蛋白尿的临床有效性和安全性。方法对中国知网（CNKI）、维普中文科技期刊全文数据库（VIP）、万方数据库（WANFANG）、PubMed等数据库进行计算机检索,再配合手工检索相关文献（均为建库以来至2020年3月31日）,查找小柴胡汤治疗蛋白尿的随机对照试验（RCT）研究,制定并按照相应的纳排标准后,由两名研究人员独立对文献进行筛选并绘制流程图,提取相关资料的数据,采用Cochrane偏倚评估工具进行文献风险评估。运用STATA 14.0软件进行Meta分析,并进行安全性评价。结果研究最终共纳入10个RCTs,累计988例患者。Meta分析结果显示,西医常规治疗的基础上联合小柴胡汤在调节24小时尿蛋白定量[WMD=-0.374,95%CI（-0.490,-0.258）,P<0.001]、血尿素氮[WMD=-1.222,95%CI（-2.111,-0.333）,P=0.007]、白介素-4[WMD=11.451,95%CI（7.349,15.553）,P<0.001]、白介素-17[WMD=-58.431,95%CI（-68.332,-48.531）,P<0.001]、干扰素-γ[WMD=-7.991,95%CI（-11.034,-4.948）,P<0.001]等指标均优于西医常规治疗,且差异均具有统计学意义。血清肌酐[WMD=-3.295,95%CI（-10.263,3.674）,P=0.354],差异未见统计学意义。结论小柴胡汤联合西医常规治疗原发性肾性蛋白尿疗效优于西医常规治疗,但基于对安全性的描述过少,故尚不能对安全性得出确切结论。然而纳入评价的文献质量偏低,故仍需要开展高质量、大样本的RCT,以提高结论的客观性和可靠性,为小柴胡汤治疗肾性蛋白尿提供临床依据。研究二基于网络药理学和分子对接技术探讨小柴胡汤治疗糖尿病肾病的作用机制目的基于网络药理学与分子对接技术探讨小柴胡汤的活性成分和治疗糖尿病肾病（DKD）的药理作用机制,为经典方剂的临床应用及药物机制研究提供依据。方法基于TCMSP数据库,获取小柴胡汤中主要活性成分及其对应的靶蛋白,利用UniProt数据库规范并获取靶蛋白的基因名,构建小柴胡汤药物-成分-靶点网络图;借助Genecard数据库获取DKD疾病靶点,通过jvenn平台获得交集靶点;在STRING数据库中导入交集靶点,进行蛋白质相互作用分析并构建PPI网络图;运用Metascape平台对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,采用Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络图;最后通过AutoDockTool软件对关键活性成分和靶点蛋白进行分子对接分析。结果小柴胡汤筛选得到195种活性成分,主要活性成分涉及豆甾醇、槲皮素、β-谷甾醇、黄芩黄素、山柰酚、木犀草素、汉黄芩素等。预测到238个相应作用靶点,与DKD的交集靶点为128个,核心靶点涉及IL6、AKT1、VEGFA、TNF、TP53、PTGS2、JUN等。GO功能富集分析得到生物过程条目2242个,细胞组成条目82个,分子功能条目166个。KEGG通路富集分析筛选得到333条（P<0.01）信号通路,主要涉及糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号通路、松弛素信号通路、NF-κB信号通路、胰岛素抵抗等。分子对接结果显示关键成分槲皮素、黄芩黄素、木犀草素、汉黄芩素与关键靶点PTGS2、AKT1均有较强的结合能力。结论小柴胡汤中的活性化合物槲皮素、黄芩黄素、木犀草素等影响PTGS2、AKT1等靶点调节多条信号通路,起到抗炎、抗氧化、调节细胞因子、改善胰岛素抵抗、保护肾功能等作用,为研究小柴胡汤治疗DKD提供了更加深入的科学依据和研究方向。
郭晓媛[9]（2021）在《滋肾丸干预糖尿病肾病肾小管上皮细胞焦亡作用及机制研究》文中研究说明[目的]探究滋肾丸（ZiShenWan,ZSW）对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）肾小管上皮细胞焦亡的干预作用及机制,通过网络药理学研究分析ZSW治疗DN的靶点及通路,为ZSW治疗DN提供科学依据。[方法]1.动物实验:采取随机对照方法,将雄性6周龄db/db小鼠分为模型组、阳性对照组、ZSW高剂量组、ZSW中剂量组、ZSW低剂量组（n=10）;非糖尿病db/m小鼠为正常对照组（n=10）。适应性喂养2周后,ZSW各剂量组给予ZSW乙醇提取物灌胃（高剂量:6.0g/kg;中剂量:3.0g/kg;低剂量:1.5 g/kg）;阳性对照组给予达格列净灌胃（1.0mg/kg）;模型组和正常对照组同时给予等体积去离子水灌胃。每天灌胃1次,持续12周。每2周检测体重、尾静脉FBG;每4周检测尿液ACR、NAG酶、NGAL和CysC;给药12周后摘眼球取血,称量右肾脏重量,固定或冻存肾组织。血清检测HbA1c、BUN和CRE。肾组织经HE染色、PAS染色、Masson染色后光镜观察组织病理学改变,透射电镜观察超微结构改变,进行病理半定量评分;免疫组化染色观察分析肾小管上皮细胞上皮—间充质转化（EMT）标志物α-SMA和E-cadherin的表达强度;TUNEL染色观察分析肾小管上皮细胞核的损伤水平;Western blot及RT-qPCR分别检测NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1以及焦亡相关炎症因子IL-1β、cleaved IL-1β和IL-18的蛋白及mRNA表达水平。2.细胞实验:正常人近端肾小管上皮细胞（HK-2）进行复苏、传代及培养。通过MTT法检测细胞增殖活力筛选细胞培养条件及药物干预剂量,以高渗葡萄糖（45μmol/L）培养HK-2细胞48 h诱导焦亡及EMT,分为高糖组、ZSW低剂量组、ZWS中剂量组、ZSW高剂量组、阳性对照组。ZSW各剂量组给予ZSW乙醇提取物干预（高剂量:15μg/ml;中剂量:7.5μg/ml;低剂量:3.75μg/ml）;阳性对照组给予达格列净干预（0.1μmol/L）。另设空白组为正常对照、甘露醇组为高渗对照。光镜观察细胞形态改变;Transwell试验检测细胞迁移能力;TUNEL染色评估细胞核的损伤、LDH试验评估细胞膜的损伤、Annexin V/PI双染检测细胞焦亡水平;ELISA检测细胞上清液IL-1β、IL-18水平;Western blot 及 RT-qPCR 分别检测细胞 NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、cleaved IL-1 β、IL-18的蛋白及mRNA表达水平。3.网络药理学:通过检索数据库筛选ZSW的药物活性成分和DN的疾病靶点,获得ZSW治疗DN的作用靶点;应用Cytoscape软件构建ZSW治疗DN的“药物—成分—靶点”网络,应用STRING数据库构建ZSW治疗DN的关键靶点的PPI网络,筛选ZSW治疗DN的核心关键靶点;应用Cytoscape软件和DAVID数据库进行基因功能和通路分析。[结果]1.动物实验:（1）药效学:与正常对照组相比,模型组FBG、HbAlc、BUN、血CRE及尿ACR、NAG酶、NGAL、CysC显着升高（P<0.01）。经ZSW干预后上述指标均显着降低（P<0.01）。（2）肾组织病理学:模型组肾小球出现体积增大、基底膜不均匀增厚、系膜基质增生;肾小管出现上皮细胞空泡变性、炎性细胞浸润;胶原纤维染色面积、基底膜厚度、肾小管损伤指数显着升高（P<0.01）。ZSW不同程度减轻上述病理改变,显着降低病理半定量评分（P<0.01）。（3）肾小管上皮细胞EMT:与正常对照组相比,模型组肾小管上皮细胞α-SMA表达强度、肾组织α-SMA蛋白及mRNA表达显着升高;肾小管上皮细胞E-cadherin表达强度、肾组织E-cadherin蛋白及mRNA表达显着降低（P<0.01）。ZSW显着改变肾小管上皮细胞α-SMA和E-cadherin表达强度,不同程度降低肾组织α-SMA蛋白及mRNA表达、升高肾组织E-cadherin的蛋白及mRNA表达（P<0.05或P<0.01）。（4）肾小管上皮细胞焦亡:与正常对照组相比,模型组肾小管上皮细胞核碎裂增多,TUNEL染色阳性率显着升高,肾组织IL-1β、cleaved IL-1β和IL-18蛋白及mRNA表达显着升高（P<0.01）。ZSW减轻肾小管上皮细胞核碎裂,显着降低细胞TUNEL染色阳性率,显着降低肾组织IL-1β、cleaved IL-1β和IL-18蛋白及mRNA表达（P<0.01）。（5）肾组织NLRP3炎症小体活化:与正常对照组相比,模型组肾组织NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白及mRNA表达显着升高（P<0.01）,ZSW不同程度降低上述指标的蛋白表达（P<0.05或P<0.01）,显着降低NLRP3、ASC mRNA表达（P<0.01）,高剂量ZSW显着降低Caspase-1 mRNA表达（P<0.01）。2.细胞实验:（1）EMT:高糖培养使HK-2细胞形态发生间质细胞样改变,迁移能力显着增强,α-SMA蛋白及mRNA表达显着升高,E-cadherin蛋白及mRNA表达显着降低（P<0.01）;ZSW抑制高糖诱导的HK-2细胞的间质样改变,显着降低细胞迁移能力,显着降低α-SMA蛋白及mRNA表达,不同程度升高E-cadherin蛋白及mRNA表达（P<0.05或P<0.01）。（2）焦亡:高糖培养使HK-2细胞的细胞核及细胞膜损伤加重,焦亡水平升高,IL-1β、IL-18释放增加,IL-1β、cleaved IL-1β和IL-18蛋白及mRNA表达显着升高（P<0.01）;ZSW明显减轻细胞核及细胞膜损伤,显着降低焦亡水平,显着减少IL-1β、IL-18释放以及 IL-1β、cleaved IL-1β 和 IL-18 蛋白及 mRNA 表达（P<0.01）。（3）NLRP3炎症小体活化:高糖培养使HK-2细胞NLRP3、ASC和Caspase-1蛋白及mRNA表达显着升高（P<0.01）;ZSW不同程度降低上述指标的蛋白及mRNA表达（P<0.05 或 P<0.01）。3.网络药理学:经筛选获得ZSW的56个有效活性成分,与数据库中DN的疾病靶点映射获得166个ZSW治疗DN的靶点,与51个ZSW的有效活性成分共同构建“药物—成分—靶点”网络,通过PPI网络筛选获得154个关键核心靶点,诸多靶点涉及炎症反应相关,主要富集在钙通道复合体、膜区、突触和细胞质等细胞组分;G蛋白偶联受体活性、神经递质结合等分子功能;脂多糖介导的信号通路、氧化还原、突触传递等生物学过程;包含NOD样受体（NLR）信号通路在内的炎症反应、晚期糖基化终末产物、细胞增殖分化、内分泌抵抗、神经组织传导等相关信号通路。[结论]1.ZSW有效降低db/db小鼠血糖,减少尿蛋白,改善肾小管早期损伤指标及肾功能,减轻肾组织病理损伤,抑制肾小管上皮EMT及焦亡,可能是通过抑制NLRP3炎症小体活化实现的。2.ZSW有效抑制高糖诱导的HK-2细胞EMT及焦亡,可能是通过抑制NLRP3炎症小体活化实现的。3.ZSW中的多种有效成分多靶点、多通路治疗DN,干预炎症反应是ZSW治疗DN的重要作用机制。
张磊[10]（2021）在《基于P-selectin/PSGL-1/MAPK信号通路研究清肾颗粒对炎症介导的内皮细胞损伤及纤维化的干预作用》文中认为1.目的:通过在体实验观察清肾颗粒对内皮细胞间充质转分化及肾纤维化的干预作用;通过体外实验明确P-selectin/PSGL-1/MAPK信号通路在炎症介导内皮细胞损及内皮细胞间充质转分化中的作用;研究清肾颗粒含药血清对P-selectin/PSGL-1/MAPK信号通路和炎症介导的内皮细胞损伤及纤维化的干预作用。2.方法:2.1以5/6肾切除大鼠作为肾小球内皮细胞损伤及纤维化模型,大鼠分为清肾颗粒组、假手术组、模型组干预12周。检测各组大鼠血清Scr、BUN水平;HE及Masson染色评估各组大鼠肾脏病理损伤水平;Western blot检测各组大鼠肾脏组织NLRP3及IL-18蛋白水平;免疫组化检测各组大鼠肾脏组织α-SMA蛋白表达水平;免疫荧光检测各组大鼠肾脏组织CD31、FSP-1、MCP-1表达水平。2.2以LPS诱导的HUVEC损伤为炎症介导的内皮细损伤及纤维化模型,细胞分为正常对照组、LPS组、LPS+P-selectin抑制剂组。流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;Western blot法检测各组细胞中p-selectin、PSGL-1、ERK1/2和p-ERK1/2、JNK和p-JNK、p38和p-p38、ERK5和p-ERK5的蛋白含量;q RT-PCR法检测各组细胞中NLRP3、IL-18 m RNA水平;免疫荧光法检测各组细胞中ɑ-SMA、e NOS水平。2.3以LPS诱导的HUVEC损伤为炎症介导的内皮细损伤及纤维化模型,细胞分为正常对照组;LPS组;LPS+p-selectin阻断组;LPS+清肾颗粒低剂量组;LPS+清肾颗粒中剂量组;LPS+清肾颗粒高剂量组。Western blot法检测各组细胞中p-selectin、PSGL-1、ERK1/2和p-ERK1/2、JNK和p-JNK、p38和p-p38、ERK5和p-ERK5的蛋白含量;q RT-PCR法检测各组细胞中p-selectin、PSGL-1、e NOS、ET-1、FSP-1、α-SMA m RNA水平;免疫荧光法检测各组细胞中p-selectin、PSGL-1、IL-18、MCP-1、e NOS、ET-1、FSP-1、α-SMA蛋白表达。2.4使用超高效液相色谱分析清肾颗粒中活性成分。3结果:3.1.1模型组大鼠Scr、BUN水平高于假手术组（P<0.05）,清肾颗粒组大鼠Scr、BUN水平低于模型组（P<0.05）。3.1.2各组大鼠肾脏组织HE及Masson染色结果显示,假手术组大鼠肾小球及肾小管结构清晰,无粘连、增生、纤维化及炎性细胞浸润。模型组大鼠可见显着的病理损伤,镜下可见肾小球内皮细胞浸润、肾小球硬化及纤维化、肾小管萎缩坏死,清肾颗粒组大鼠肾小球内皮细胞浸润、肾小球硬化及纤维化、肾小管萎缩坏死均较模型组减轻。3.1.3模型组大鼠NLRP3及IL-18蛋白相对表达量高于假手术组（P<0.05）,清肾颗粒组NLRP3及IL-18蛋白相对表达量低于模型组（P<0.05）。3.1.4模型组大鼠α-SMA蛋白相对表达量高于假手术组（P<0.05）,清肾颗粒组α-SMA蛋白相对表达量低于模型组（P<0.05）。3.1.5假手术组大鼠CD31表达呈强阳性（绿色荧光强亮）,FSP-1和MCP-1表达微弱;模型组大鼠CD31表达微弱,FSP-1和MCP-1呈强阳性表达;清肾颗粒组大鼠CD31表达较模型组增强,FSP-1和MCP-1表达较模型组减弱。3.2.1与正常对照组比较,LPS组细胞早期及晚期凋亡率均增高（P<0.05）;LPS+P-selectin抑制剂组与LPS组比较早期及晚期凋亡率降低（P<0.05）。3.2.2与正常对照组比较,LPS组p-selectin、PSGL-1、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK和p-JNK、p38和p-p38、ERK5、p-ERK5的蛋白水平升高（P<0.05）;LPS+P-selectin抑制剂组与LPS组比较p-selectin（P<0.05）、PSGL-1、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK（P<0.05）、p38（P<0.05）、p-p38（P<0.05）、ERK5、p-ERK5的蛋白水平呈不同程度下降。3.2.3与正常对照组比较,LPS组NLRP3、IL-18 m RNA水平升高（P<0.05）;LPS+P-selectin抑制剂组与LPS组比较NLRP3、IL-18 m RNA水平下降（P<0.05）。3.2.4与正常对照组比较,LPS组ɑ-SMA呈强阳性表达（红色荧光强亮）,LPS+P-selectin抑制剂组与LPS组比较ɑ-SMA红色荧光表达减弱。e NOS的表达趋势与之相反,在正常对照组e NOS呈强阳性红色荧光表达,LPS组e NOS的表达最弱,e NOS在LPS+P-selectin抑制剂组的表达介于两组之间。3.3.1与LPS组比较,清肾颗粒各剂量组的p-selectin、PSGL-1蛋白表达下降,且呈剂量依耐性,清肾颗粒高剂量组的p-selectin、PSGL-1蛋白表达水平最低（P<0.05）。与LPS组比较,清肾颗粒各剂量组的JNK和p-JNK、p38和p-p38蛋白表达量均下降,清肾颗粒高剂量组的降低程度更为显着（P<0.05）。3.3.2与LPS组比较,清肾颗粒高、中、低剂量组细胞的p-selectin、PSGL-1、ET-1、FSP-1、α-SMA m RNA表达量均显着下降（P<0.05）,且清肾颗粒高剂量组的降低程度与中、低剂量组比较有显着差异（P<0.05）。与LPS组比较,清肾颗粒高、中、低剂量组的e NOS表达量显着升高（P<0.05）,清肾颗粒高剂量组与中、低剂量组比较亦有显着差异（P<0.05）。3.3.3在正常对照组中p-selectin、PSGL-1、IL-18、MCP-1、ET-1、FSP-1、α-SMA表达较少。LPS组p-selectin、PSGL-1、IL-18、MCP-1、ET-1、FSP-1、α-SMA均呈阳性表达（红色荧光）。清肾颗粒各剂量组中,p-selectin、PSGL-1、IL-18、MCP-1、ET-1、FSP-1、α-SMA的表达与LPS组相比较明显减少,其中清肾颗粒高剂量组表达最弱。在正常对照组中e NOS表达较多,LPS组中e NOS表达较少,在清肾颗粒各剂量组中e NOS表达不同程度增加,其中清肾颗粒高剂量组表达最强。3.4基于超高效液相色谱法明确了清肾颗粒中的11个活性成分（绿原酸、盐酸小檗碱、大车前苷、滨蒿内酯6,7-二甲氧基香豆素、表小檗碱、黄连碱、丹酚酸B、巴马汀、益母草碱、大黄酸、丹参酮IIA）,并且这已知的11个成分对于炎症、MAPK信号通路、细胞转分化、纤维化等均有不同程度的干预和调节作用。4结论:4.1 P-selectin/PSGL-1通过介导MAPK信号通路活化,启动炎症效应,导致内皮细胞炎性损伤和功能障碍,进而引起End MT病理改变,促进纤维化。4.2中药清肾颗粒能够通过抑制P-selectin/PSGL-1介导的MAPK信号通路活化（p38和JNK通路）,进而减轻内皮细胞炎性损伤,逆转End MT,延缓纤维化进程,且效果呈量效关系。4.3基于超高效液相色谱法明确了清肾颗粒中的11个活性成分,且这11个活性成分对于炎症、MAPK等信号通路、End MT、纤维化均有不同程度的干预和调节作用;进一步支持了本次研究结果的科学性。
二、通肾汤治疗大鼠慢性肾功能衰竭的实验研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、通肾汤治疗大鼠慢性肾功能衰竭的实验研究（论文提纲范文）
（2）基于网络药理学的大黄-水蛭药对防治慢性肾脏病的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3. 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 大黄治疗慢性肾脏病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（3）基于Wnt/β-catenin信号通路研究桃核承气汤对慢性肾衰竭大鼠的作用机制（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 实验部分 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品 |
| 1.3 主要实验设备 |
| 1.4 主要实验试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 分组与造模 |
| 2.2 药物配制 |
| 2.3 灌胃给药 |
| 2.4 标本采集 |
| 2.5 观测指标 |
| 2.6 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 一般情况观察 |
| 3.2 肾脏的肉眼观察 |
| 3.3 贫血指标、肾功能检测结果 |
| 3.4 实时荧光定量PCR检测结果 |
| 3.5 Western Blot检测结果 |
| 3.6 左肾组织透射电镜观察（×10000） |
| 第二部分 理论研究 |
| 1 现代医学对CRF的认识 |
| 1.1 CRF发病原因及机制 |
| 1.2 肾纤维化的形成与慢性肾衰竭 |
| 1.3 慢性肾衰竭的西医防治措施 |
| 2 从中医角度探讨CRF |
| 2.1 关于CRF的中医病名探究 |
| 2.2 CRF病因病机 |
| 2.3 当代中医名家对CRF的辨治 |
| 2.4 逐瘀泄浊法论治CRF |
| 2.5 桃核承气汤治疗CRF分析 |
| 2.6 桃核承气汤临证加减 |
| 2.7 桃核承气汤前期研究成果总结 |
| 第三部分 分析与讨论 |
| 1 5/6 肾切除法建立CRF造模方法选择依据 |
| 2 假手术组和实验药物对照组设立的意义 |
| 3 Wnt信号通路与肾纤维化 |
| 4 桃核承气汤对CRF大鼠的干预作用 |
| 4.1 改善大鼠一般情况 |
| 4.2 改善大鼠贫血和肾功能 |
| 4.3 改善大鼠肾组织病理形态 |
| 4.4 影响大鼠肾组织APC、β-catenin、TCF4 的表达 |
| 5 本实验的不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述 活血化瘀法治疗慢性肾衰竭研究近况 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（4）基于“肾主水”理论探讨金匮肾气丸治疗慢性肾功能衰竭的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Absract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 金匮肾气丸治疗腺嘌呤慢性肾功能衰竭大鼠实验研究 |
| 1 实验材料和方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品与试剂 |
| 1.3 实验仪器与设备 |
| 1.4 实验动物分组 |
| 1.5 给药方法 |
| 1.6 观察指标 |
| 1.7 统计学方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 各组大鼠一般情况 |
| 2.2 各组大鼠体重变化 |
| 2.3 各组大鼠血常规与生化指标 |
| 2.4 各组大鼠24hU-TP |
| 2.5 腺嘌呤复制CRF大鼠模型 |
| 2.6 金匮肾气丸治疗后各组大鼠肾脏形态 |
| 2.7 金匮肾气丸治疗后各组大鼠肾脏病理 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 金匮肾气丸治疗UUO慢性肾功能衰竭大鼠实验研究 |
| 1 实验材料和方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药品与试剂 |
| 1.3 实验仪器与设备 |
| 1.4 实验动物分组 |
| 1.5 UUO法复制CRF大鼠模型 |
| 1.6 给药方法 |
| 1.7 观察指标 |
| 1.8 统计学方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 各组大鼠一般情况 |
| 2.2 各组大鼠体重变化 |
| 2.3 各组大鼠血常规与生化指标 |
| 2.4 各组大鼠24hU-TP |
| 2.5 UUO法复制CRF大鼠模型 |
| 2.6 金匮肾气丸治疗后各组大鼠肾脏外形 |
| 2.7 金匮肾气丸治疗后各组大鼠肾脏病理 |
| 3、讨论 |
| 4、小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 慢性肾功能衰竭大鼠水通道蛋白表达的实验研究 |
| 1 实验材料和方法 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验仪器设备 |
| 1.4 实验AQP检测 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 各组大鼠肾脏AQP蛋白检测结果 |
| 2.2 各组大鼠肺脏AQP蛋白检测结果 |
| 2.3 各组大鼠膀胱AQP蛋白检测结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结语 |
| 附录 文献综述 |
| 文献综述一 慢性肾功能衰竭研究进展 |
| 文献综述二 慢性肾功能衰竭中医药研究进展 |
| 文献综述三 水通道蛋白(AQPs)的相关研究进展 |
| 参考文献 |
| 读博期间发表的文章及参与的科研 |
| 致谢 |
（5）三七注射液对慢性肾衰竭大鼠肠道菌群多样性结构变化的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1 CRF的概念与分期 |
| 1.1 CRF的概念 |
| 1.2 CRF的分期 |
| 1.3 CRF的治疗 |
| 2 现代医学对肠-肾轴理论的研究 |
| 2.1 肠-肾轴理论的概述 |
| 2.2 肠-肾轴理论与肾脏病 |
| 3 现代医学对肠道菌群的研究 |
| 3.1 肠道菌群的种类及功能 |
| 3.2 GM对各种疾病的影响 |
| 4 CRF与肠道的关系 |
| 5 中医学论治 CRF |
| 5.1 古时医家论治 |
| 5.2 当代医家论治 |
| 5.3 中医药对 CRF 的治疗 |
| 5.3.1 中药内服 |
| 5.3.2 中医外治 |
| 6 小结 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 分组 |
| 2.2 造模 |
| 2.3 模型检测 |
| 2.4 药物干预 |
| 2.5 标本采集、处理 |
| 2.6 实验指标检测 |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 结论 |
| 存在的不足与展望 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 综述 中医药防治慢性肾衰竭的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
（6）益气活血、软坚散结法干预PHD-HIF-hepcidin信号轴防治肾性贫血的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物 |
| 1.3 主要材料和药品 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 分组 |
| 2.2 肾性贫血大鼠模型建立 |
| 2.3 药物治疗 |
| 2.4 血液样本采集 |
| 2.5 肾组织样本采集 |
| 2.6 ELISA法检测大鼠血清铁调素、炎症因子 |
| 2.7 WESTERN-BLOT测定PHD、HIF蛋白表达 |
| 3 统计学方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 造模验证 |
| 4.2 各组血常规指标检测结果 |
| 4.3 各组肾功能检测结果 |
| 4.4 各组铁代谢及铁调素指标检测结果 |
| 4.5 各组炎症指标检测结果 |
| 4.6 各组PHD-2、HIF-2α蛋白比较 |
| 讨论 |
| 1 肾性贫血发生的机制 |
| 2 肾性贫血的治疗 |
| 3 PHD-HIF-hepcidin信号轴与肾性贫血 |
| 4 中医对“肾性贫血”的认识 |
| 5 益气活血、软坚散结法理论探讨 |
| 6 本研究结果探讨 |
| 7 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述一 中医药治疗肾性贫血的研究进展 |
| 1 单味中药对肾性贫血的相关研究 |
| 2 中药药对对肾性贫血的相关研究 |
| 3 中药经方对肾性贫血的相关研究 |
| 4 中医理疗对肾性贫血的相关研究 |
| 综述二 肾性贫血的现代医学研究进展 |
| 1 肾性贫血的概念和机制 |
| 2 肾性贫血的危害 |
| 3 肾性贫血的治疗现状 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）慢性肾脏病合并2型糖尿病中医证候、临床病理特点研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 临床研究 |
| 资料与方法 |
| 1 研究目的 |
| 2 研究资料 |
| 3 研究方案 |
| 研究结果 |
| 1 纳入人群的一般特征 |
| 2 研究分组及各组特点 |
| 2.1 性别 |
| 2.2 年龄 |
| 2.3 BMI |
| 2.4 首次肾活检时糖尿病病程 |
| 2.5 糖尿病家族史、糖尿病视网膜病变 |
| 2.6 收缩压、舒张压及高血压病史、高血压病程 |
| 2.7 原发病(慢性肾小球肾炎)及吸烟、饮酒情况 |
| 2.8 CKD分期 |
| 2.9 实验室资料分析 |
| 3 中医辨证分型情况 |
| 3.1 本虚证 |
| 3.2 标实证 |
| 4 病理资料 |
| 4.1 NDRD组病理诊断情况 |
| 4.2 DN组与NDRD组光镜下肾脏病理特征 |
| 5 NDRD预测因子分析 |
| 5.1 Logistic回归分析 |
| 5.2 ROC曲线 |
| 讨论 |
| 1 DN和NDRD的临床特点 |
| 2 DN和NDRD的中医证候 |
| 3 DN和NDRD的病理特点 |
| 4 DN和NDRD的预测因素分析 |
| 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 糖尿病肾病的中医研究进展 |
| 1 慢性肾脏病合并2型糖尿病的流行病学 |
| 2 现代医家对糖尿病肾病病因病机的认识 |
| 3 中医药治疗进展 |
| 3.1 单味中药及其提取物 |
| 3.2 经典方剂 |
| 3.3 经验方 |
| 3.4 中成药 |
| 3.5 其他疗法 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）小柴胡汤治疗肾性蛋白尿的Meta分析和网络药理学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 小柴胡汤的药理作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 蛋白尿的中西医认识与治疗现状 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一章 小柴胡汤治疗原发性肾性蛋白尿临床研究文献Meta分析 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 文献纳排标准 |
| 1.2 文献检索及筛选 |
| 1.3 数据提取 |
| 1.4 纳入研究风险评估 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 文献检索结果 |
| 2.2 纳入文献基本信息 |
| 2.3 纳入研究偏倚风险评估 |
| 2.4 Meta分析结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 研究结果 |
| 3.2 研究的局限性 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第二章 基于网络药理学和分子对接技术探讨小柴胡汤治疗糖尿病肾病的作用机制 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 数据库及平台介绍 |
| 1.2 小柴胡汤的活性成分和靶蛋白筛选 |
| 1.3 靶蛋白基因名的确定及药物-成分-靶点网络的构建 |
| 1.4 糖尿病肾病靶点筛选 |
| 1.5 蛋白质相互作用网络的构建 |
| 1.6 功能富集分析与通路富集分析 |
| 1.7 成分-靶点-通路网络构建 |
| 1.8 分子对接 |
| 2 技术路线 |
| 3 结果 |
| 3.1 小柴胡汤的活性成分 |
| 3.2 药物活性成分靶点及药物-成分-靶点网络图 |
| 3.3 糖尿病肾病相关靶点 |
| 3.4 PPI网络图 |
| 3.5 GO功能富集和KEGG通路富集分析 |
| 3.6 成分-靶点-通路网络图 |
| 3.7 活性成分与潜在靶点分子对接 |
| 4 讨论 |
| 4.1 小柴胡汤治疗DKD的有效活性成分探讨 |
| 4.2 小柴胡汤治疗DKD的有效靶点探讨 |
| 4.3 小柴胡汤治疗DKD的信号通路探讨 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（9）滋肾丸干预糖尿病肾病肾小管上皮细胞焦亡作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 糖尿病肾病炎症机制及中医药干预研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 糖尿病肾病炎症反应的主要参与成分 |
| 3 糖尿病肾病炎症反应的主要信号转导通路 |
| 4 糖尿病肾病炎症反应的中医病机与辨证 |
| 5 中医药干预糖尿病肾病炎症反应的作用及机制 |
| 6 中医药防治糖尿病肾病炎症反应的现代研究方法 |
| 参考文献 |
| 综述二 滋肾丸临床应用及相关研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 滋肾丸的源流与命名 |
| 3 滋肾丸的方证与方义 |
| 4 滋肾丸的制方与化裁 |
| 5 滋肾丸的名家应用经验 |
| 6 滋肾丸的临床应用研究 |
| 7 滋肾丸的现代研究 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 滋肾丸干预糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞焦亡作用研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验二 滋肾丸干预高糖培养的人近端肾小管上皮细胞焦亡作用研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 实验三 滋肾丸治疗糖尿病肾病网络药理学研究 |
| 1 资料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
（10）基于P-selectin/PSGL-1/MAPK信号通路研究清肾颗粒对炎症介导的内皮细胞损伤及纤维化的干预作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 第一部分 清肾颗粒对5/6 肾切除大鼠肾小球内皮细胞损伤及纤维化的影响 |
| 1.前言 |
| 2.材料与方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 P-selectin/PSGL-1/MAPK信号通路在LPS诱导的内皮细胞损伤及纤维化中的作用 |
| 1.前言 |
| 2.材料与方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 清肾颗粒含药血清对LPS诱导的内皮细胞损伤和纤维化的干预及P-selectin/PSGL-1/MAPK信号通路的调节 |
| 1.前言 |
| 2.材料与方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 基于超高效液相色谱法分析清肾颗粒有效成分 |
| 1.前言 |
| 2.仪器与试药 |
| 3.实验方法 |
| 4.质量评估 |
| 5.UPLC 指纹图谱的建立 |
| 6.讨论 |
| 参考文献 |
| 结论与创新 |
| 不足与展望 |
| 综述一:中医药防治慢性肾衰进展 |
| 参考文献 |
| 综述二:JNK信号通路与肾纤维化 |
| 参考文献 |
| 综述三:p38 MAPK信号通路与肾纤维化 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 |
四、通肾汤治疗大鼠慢性肾功能衰竭的实验研究（论文参考文献）
- [1]壮医莲花针拔罐逐瘀疗法联合车前玉苇通肾汤治疗AGA的临床研究[D]. 覃姣玉. 广西中医药大学, 2021
- [2]基于网络药理学的大黄-水蛭药对防治慢性肾脏病的机制研究[D]. 黄赫. 山西中医药大学, 2021(09)
- [3]基于Wnt/β-catenin信号通路研究桃核承气汤对慢性肾衰竭大鼠的作用机制[D]. 王巧花. 福建中医药大学, 2021(01)
- [4]基于“肾主水”理论探讨金匮肾气丸治疗慢性肾功能衰竭的实验研究[D]. 边红萍. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [5]三七注射液对慢性肾衰竭大鼠肠道菌群多样性结构变化的研究[D]. 麦文顶. 广西中医药大学, 2021
- [6]益气活血、软坚散结法干预PHD-HIF-hepcidin信号轴防治肾性贫血的作用机制研究[D]. 耿芳. 天津中医药大学, 2021(01)
- [7]慢性肾脏病合并2型糖尿病中医证候、临床病理特点研究[D]. 刘淑芳. 天津中医药大学, 2021(01)
- [8]小柴胡汤治疗肾性蛋白尿的Meta分析和网络药理学研究[D]. 王颖. 北京中医药大学, 2021(08)
- [9]滋肾丸干预糖尿病肾病肾小管上皮细胞焦亡作用及机制研究[D]. 郭晓媛. 北京中医药大学, 2021(01)
- [10]基于P-selectin/PSGL-1/MAPK信号通路研究清肾颗粒对炎症介导的内皮细胞损伤及纤维化的干预作用[D]. 张磊. 安徽中医药大学, 2021(01)