一、米糠多糖与环磷酰胺联合抗肿瘤作用的免疫药理学机制研究（论文文献综述）
刘玉辉[1]（2020）在《益生菌固态发酵对米糠抗氧化活性的影响研究》文中指出本试验以米糠为研究对象,麸皮为辅料,进行复合菌（酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌）固态发酵,研究固态发酵对米糠抗氧化能力的影响,分析发酵米糠提取物（FRBE）的活性成分,并基于斑马鱼氧化应激模型探究了 FRBE抗氧化活性。为米糠的高附加值开发提供参考。论文主要包括以下三个部分。（1）固态发酵对米糠抗氧化活性影响以DPPH自由基清除率为指标,研究了发酵时间、含水率、腐植酸钠添加量、酶种类及酶添加量对米糠抗氧化活性的影响。结果表明,发酵时间为72 h,含水率为50%,腐植酸钠添加量0.5%,葡聚糖酶添加量为500 U时,复合菌发酵米糠的抗氧化活性最高,DPPH自由基清除率达85.55%。（2）发酵前后米糠提取物活性成分分析采用传统的水提法提取发酵米糠产物中的活性成分,以发酵米糠提取物的DPPH自由基清除率为指标,依次研究了提取时间,提取温度,料水比对其影响。结果发现提取时间为60 min,提取温度为85℃,料水比为1:20（g/mL）显着提高发酵米糠提取物的DPPH自由基清除率。水提物活性成分结果表明,与米糠提取物（RBE）相比较,FRBE中多酚、黄酮和蛋白含量显着提高（P<0.05）,分别提高了 68.17%、80.29%和28.93%;多糖含量有明显下降（P<0.05）,但FRBE的甘露糖比例显着提高。米糠酚酸主要由阿魏酸、咖啡酸和儿茶素组成,FRBE中含量阿魏酸、咖啡酸和儿茶素分别达718.75mg/kg、6.42 mg/kg和9.96 mg/kg,显着高于RBE。由此可见,发酵可以提高米糠多酚、黄酮等抗氧活性成分的可溶性,改变其单糖组成以及释放出更多游离酚酸。（3）发酵前后米糠提取物体内抗氧化活性评价研究不同浓度FRBE和RBE对偶氮二异丁脒盐酸盐（AAPH）诱导的斑马鱼活性氧（ROS）含量、脂质过氧化程度和细胞死亡率的影响,并测定斑马鱼胚胎过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）的活力。结果表明,FRBE对AAPH诱导产生的ROS、脂质过氧化和细胞死亡均有降低作用,且均高于RBE组。此外,FRBE可提高斑马鱼胚胎的抗氧化酶活性。说明米糠水提物对AAPH诱导的斑马鱼氧化应激具有缓解作用,且发酵提高了米糠的抗氧化活性。综上,菌酶协同发酵可以提高米糠的抗氧化能力,释放出更多游离的多酚、黄酮等活性成分,可以有效缓解AAPH诱导的斑马鱼氧化应激。
范汝薇[2]（2017）在《米糠多糖和膳食纤维的质量标准研究》文中提出米糠由种皮、外胚乳和胚加工而成的,是碾米工艺过程中的副产物,主要存于稻谷颖果皮层细胞壁中,其营养成分现阶段还未被综合研发利用。而近年来,人们以米糠深入研究和开发,其主要的生理活性及以米糠为原材料生产的各种米糠保健产品已逐步为人所了解。但目前并没有完善的米糠多糖和膳食纤维质量标准控制产业化的质量,本论文根据中华人民共和国国家标准对米糠多糖及米糠膳食纤维中的水份、灰分、脂肪、蛋白质、重金属含量及pH等各个参数进行检测分析。研究内容为（1）建立米糠多糖质量标准;（2）建立米糠膳食纤维质量标准;（3）米糠多糖指纹特征谱。分析与讨论实验结果,得到准确方便的方法,建立能够较全面地控制米糠多糖的质量标准。（1）建立米糠多糖质量标准选用苯酚-硫酸法作为米糠多糖质量标准中米糠多糖含量检测的依据,苯酚-硫酸的原理为米糠多糖在酸性条件下被分解成单糖,又快速脱水产生糖醛衍生物,接着反应生成橘黄色物质,最后测其吸光度并计算含量。依据中华人民共和国国家标准测定米糠多糖pH、水份、灰分、脂肪、蛋白质、重金属等参数,确保其结果在规定范围内。（2）建立米糠膳食纤维质量标准依照GBT 5009.88-2008中规定的方法,选用酶-重量法检测米糠总膳食纤维、不可溶膳食纤维、可溶性膳食纤维作为米糠膳食纤维质量标准中含量检测的依据。依据中华人民共和国国家标准测定米糠膳食纤维pH、水份、灰分、脂肪、蛋白质、重金属等参数,确保其结果在规定范围内。（3）米糠多糖指纹特征谱a水解条件的确定和水解产物的检测通过试验,确定多糖水解的影响因素,明确使多糖产生水解的最佳条件,包括多糖的全部水解和部分水解。水解后的产物可以直接检测或者将其衍生化后再进行检测。b指纹图谱的获得建立米糠多糖的指纹图谱特征谱,通过实验,明确多糖水解的最佳条件,以合适的方法检测水解多糖的产物获得相应的指纹特征图谱。c指纹图谱的评价和应用以不同批次提取的米糠多糖,并依照已明确的方法获得相应的色谱图,以相似度分析软件等方式对所得特征图谱进行分析比较,确认共有指纹峰和特征峰,考虑具体情况,建立具体的指纹图谱应用方法。
张秀媛,何扩,王丽霞,赵瑞平,陈一[3]（2016）在《张杂谷米糠多糖微波提取及其对肥胖大鼠肝脏自由基代谢的影响》文中研究表明以张杂谷米糠为原料,研究了微波辅助提取张杂谷米糠多糖的工艺优化以及提取的米糠多糖对SD肥胖大鼠肝脏自由基代谢的影响。选用三因素三水平的中心组合设计,以料液比、微波处理时间、微波处理功率为影响因素,以米糠多糖得率为响应值,建立了回归模型。结果表明微波辅助提取张杂谷米糠多糖的最佳工艺条件为:料液比为1∶13;微波处理时间为95 s;微波处理功率为310 W。在此条件下张杂谷米糠多糖得率预测值为2.85%,验证试验得率为2.83%,预测值和验证试验值基本一致。提取后的张杂谷米糠多糖能提高肥胖大鼠肝脏内的T-AOC能力;降低MDA含量和INOS活性,表明张杂谷米糠多糖提高了营养性肥胖大鼠肝脏的抗氧化能力,对其肝脏有一定的保护作用。
马玉芳[4]（2015）在《金线莲多糖免疫调节作用及机制研究》文中指出目的:1.通过体外研究金线莲多糖（AnoectochilusroxburghiiPolysaccharide,ARP）对小鼠脾淋巴细胞增殖、细胞周期、免疫相关细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-α分泌及其mRNA表达的影响,探讨ARP对脾淋巴细胞的免疫调节作用及其机制。2.通过体外研究ARP对RAW264.7巨噬细胞增殖、吞噬活性、分泌NO、细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10含量及其mRNA表达的影响,以及对IκB p65、NF-κB蛋白表达的影响,探讨ARP对RAW264.7细胞的免疫调节作用及其机制。3.通过体内研究ARP对环磷酰胺（CTX）所致免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖、单核巨噬细胞吞噬活性、血清细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ含量及脾脏中上述细胞因子mRNA表达的影响、以及对外周血T淋巴细胞CD4+/CD8+的影响,探讨ARP对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。4.通过体内研究ARP对脾细胞凋亡形态学变化、脾细胞周期及脾脏BcL-2、Bax、Fas、FasL mRNA表达水平的影响,探讨ARP对免疫抑制小鼠的免疫调节机理。方法:1.体外培养的小鼠脾淋巴细胞经不同浓度ARP处理。MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖水平;流式细胞仪检测细胞周期;Griess法检测NO分泌水平;ELISA 法检测细胞因子 IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ 的含量;RT-PCR 检测 IL-2、IL-4、IL-6、TFN-γ、THF-α-mRNA表达水平。2.体外培养的RAW264.7细胞经不同浓度ARP处理。MTT法检测RAW264.7细胞的增殖;流式细胞仪检测凋亡;中性红法检测吞噬功能;Griess法检测NO产生量;ELISA法检测细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10 的含量:qRT-PCR 检测 TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、iNOS mRNA表达水平;Western blot法检测RAW264.7细胞胞浆中IκB p65及胞核NF-κB蛋白表达。3.150只雄性昆明小鼠适应性饲养1周后,随机分为5组,分别为空白对照组、模型组及ARP低、中、高剂量组,每组30只;第13d,除空白对照组注射生理盐水外,其他各组腹腔注射环磷酰胺（CTX）80mg/kg,连续3d;第410d,空白组和模型组灌服蒸馏水,其他组分别灌服100mg/kg、200mg/kg、400mg/kgBW的ARP。末次给药24h后,称小鼠体重及胸腺、脾脏的重量,计算小鼠免疫器官指数;碳粒廓清法检测单核巨噬细胞吞噬活性;MTT法测定脾淋巴细胞增殖指数;全自动血液生化分析仪检测白细胞总数;ELISA法检测小鼠血清中细胞因子的含量;Real-time PCR技术检测小鼠脾脏中细胞因子及转录因子的表达情况;流式细胞术检测小鼠外周血中CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞百分比,以及CD4+/CD8+的比值。4.试验动物分组与处理同3。小鼠颈椎脱臼法处死后,取脾脏。HE染色法观察脾脏组织形态学变化,原位末端标记法观察脾脏细胞凋亡形态学变化,AnnexinV-FITC/PI双染法检测脾淋巴细胞凋亡情况,流式细胞仪检测脾淋巴细胞DNA周期变化,Real-time PCR法检测脾脏BcL-2、Bax、Fas、FasLmRNA 表达水平。结果:1.与脾淋巴细胞空白对照组比较,ARP组OD值升高（PP<0.05）,并呈一定的量-效关系,当ARP浓度为400μg/mL时,OD值最高;ARP与ConA或LPS共同作用小鼠脾淋巴细胞时,其OD值高于ConA、LPS单独刺激组（P<0.05）;ARP组Go/G1期小鼠脾淋巴细胞百分率降低（P<0.01）,S期、G2/M期小鼠脾淋巴细胞百分率升高（P<0.01）;ARP可促进小鼠脾淋巴细胞产生NO,当ARP浓度达到 50μg/mL 时,差异极显着（P<0.01）;ARP 协同 ConA 诱导 IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ分泌量明显高于ConA单独刺激组（P<0.01）;ARP可提高ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞 IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-α、T-bet、GATA-3mRNA 表达水平（P<0.01）。2.与RAW264.7巨噬细胞空白对照组比较,ARP组OD值明显升高,当ARP浓度达到25μg/mL时,差异显着（P<0.05）;ARP可降低RAW264.7细胞凋亡比率;ARP可显着提高RAW264.7细胞吞噬活性,当ARP浓度达到25μg/mL时,与细胞空白对照组比较,差异显着（P<0.05）;ARP可促进RAW264.7细胞产生NO,当ARP浓度为25μg/mL时,差异极显着（P<0.01）;ARP可促进RAW264.7 细胞分泌细胞因子 TNF-α、IL-lβ、IL-6、IL-l0（P<0.01）,促进 TNF-α、IL-1(3、IL-6、IL-10、iNOSmRNA 表达（P<0.01）;下调胞浆中 IκBp65 蛋白表达,上调胞核中NF-κB蛋白表达。3.与模型组相比,ARP高剂量组小鼠的体重增加（P<0.05）;ARP组脾脏指数降低（P<0.05）,胸腺指数升高（P<0.05）;ARP低、中剂量组吞噬指数增加（P<0.05）;ARP高剂量组T淋巴细胞增殖刺激指数（SI）增加（P<0.05）;ARP高剂量组小鼠白细胞总数降低（P<0.05）;ARP低、高剂量组小鼠血清中IL-2含量增加（P<0.05）,高剂量组IL-6含量增加（P<0.05）;ARP高剂量组小鼠IL-4mRNA相对表达量降低（P<0.05）,中、高剂量组IL-6、IFN-γ相对表达量降低（P<0.05）;ARP组小鼠转录因子T-bet的相对表达量降低（P<0.05）,高剂量组GATA-3的相对表达量升高（P<0.05）;ARP组CD4+、CD8+T淋巴细胞百分比升高（P<0.05）,CD4+/CD8+降低（P<0.05）。4.CTX模型组小鼠脾小结显着缩小,生发中心不明显,淋巴细胞数量减少且结构模糊,脾白髓萎缩,红髓与边缘区界限不明显;ARP脾脏边缘区细胞数量显着增多,脾小结增大且淋巴细胞数量增多,红白髓界限明显;模型组小鼠脾细胞凋亡率为37.3%,显着高于空白对照组（P<0.05）;ARP低、中、高组平均凋亡率分别为22.9%、15.7%、18.7%;模型组早期凋亡细胞比例显着高于空白对照组,ARP试验组早期凋亡细胞比例显着低于模型组,并且随着ARP浓度增加,其早期凋亡细胞比例逐渐减少;模型组脾淋巴细胞G1期细胞比例显着高于空白对照组,s期细胞比例显着低于空白对照组,经ARP处理的小鼠脾淋巴细胞sub-G1亚峰细胞比例显着降低,S期、G2细胞比例显着增高,但无剂量依赖性;与模型组相比,随着剂量增加,ARP各试验组Bax mRNA表达量逐渐减少,BcL-2 mRNA表达量逐渐增加,其Fas与FasL mRNA的表达量逐渐减少。结论:1.ARP可提高小鼠脾淋巴细胞体外免疫活性,其作用机制可能与调控细胞增殖周期,促进小鼠脾淋巴细胞体外增殖以及通过上调转录因子T-bet、GATA-3 mRNA表达水平从而促进Thl细胞因子（IFN-γ、TNF-α、IL-2）和Th2细胞因子（IL-4、IL-6）的分泌表达有关。2.ARP可提高RAW264.7细胞体外免疫活性,其作用机制可能与促进RAW264.7细胞增殖,降低其细胞凋亡比率,提高RAW264.7细胞吞噬活性,促进RAW264.7细胞产生NO,提高细胞因子TNF-α、11-6、IL-lβ、IL-10 的分泌水平,TNF-α IL-6、IL-lβ、IL-10、iNOS mRNA 表达水平以及促进胞浆IκBp65蛋白降解,提高胞核NF-kB蛋白的表达水平有关。3.ARP能纠正CTX引起的免疫抑制小鼠的脾脏肿大及胸腺萎缩,增强单核巨噬细胞的吞噬功能、刺激T淋巴细胞增殖、调控细胞因子的表达与分泌等,在一定程度上提高CTX引起的免疫抑制小鼠的免疫功能,并且与调节T淋巴细胞的分化有关。4.ARP能修复环磷酰胺所致小鼠脾组织病变,降低小鼠脾细胞凋亡率,促进淋巴细胞DNA复制和有丝分裂的过程,同时可以上调BcL-2/Bax的比值,下调FasmRNA表达,发挥其抑制细胞凋亡的作用。
潘晓丽[5]（2015）在《金线莲多糖对环磷酰胺免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响》文中研究说明目的:研究金线莲多糖（ARP）对环磷酰胺所致小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响。方法:75只18 g-22g小鼠适应性饲养7天后将其随机分为5组,每组15只,分别为空白对照组、模型组、金线连多糖低、中、高剂量组（100 mg/kgBW、200 mg/kgBW、400mg/kgBW）。空白对照组腹腔注射生理盐水,其余各组腹腔注射环磷酰胺（80 mg/kgBW）,连续3d,建立小鼠免疫抑制模型;空白对照组、模型组灌胃蒸馏水,三个多糖组分别灌服等体积金线莲多糖溶液,连续给药7d;24 h后颈椎脱臼处死,取脾脏。HE染色法观察脾脏组织形态变化,原位末端标记法观察脾脏细胞凋亡形态学变化,AnnexinV-FITC/PI双染法检测脾淋巴细胞凋亡情况,流式细胞仪检测脾淋巴细胞DNA周期变化,实时荧光定量PCR法检测BcL-2、Bax、Fas、FasLmRNA表达水平。结果:1.HE结果显示:空白对照组,组织结构正常,可见由排列紧密的淋巴细胞构成的脾小结和周围含有大量红细胞的红髓,以及富含巨噬细胞、淋巴细胞和血管的边缘区;环磷酰胺模型组,脾小结显着缩小,生发中心不明显,淋巴细胞数量减少且结构模糊,脾白髓萎缩,红髓与边缘区界限不明显;金线莲多糖试验组与模型组相比,脾脏边缘区细胞数量显着增多,脾小结增大且淋巴细胞数量增多,红白髓界限明显。2.原位末端标记法结果显示:模型组小鼠脾细胞凋亡率为37.3%,显着高于空白对照组;金线莲多糖试验组的阳性细胞率显着低于模型组,低剂量组的凋亡率为22.9%,中剂量组的凋亡率为15.7%,高剂量组的凋亡率为18.7%。3.Annexin V-FITC/PI双染法结果显示:模型组早期凋亡细胞比例显着高于空白对照组,金线莲多糖试验组早期凋亡细胞比例显着低于模型组,并且随着金线莲多糖浓度增加,其早期凋亡细胞比例逐渐减少;细胞凋亡总比例（FITC单阳性细胞与FITC/PI双阳性细胞的比例总和）各组之间差异具有显着性,试验组各组细胞凋亡总比例介于模型组和空白对照组之间,其中以中剂量组（ARP,200mg/kg）细胞凋亡总比例最低。4.脾淋巴细胞DNA周期结果显示:环磷酰胺模型组脾淋巴细胞G1期细胞比例显着高于空白对照组,S期细胞比例显着低于空白对照组,经金线莲多糖处理的小鼠脾淋巴细胞sub-G1亚峰细胞比例显着降低,S期、G2细胞比例显着增高,但无剂量依赖性。5.qRT-PCR结果显示:金线莲多糖试验组Bax mRNA表达量显着低于模型组,多糖浓度逐渐增加,其Bax mRNA表达量逐渐减少;金线莲多糖试验组BcL-2mRNA表达量显着高于模型组,多糖浓度增加,其BcL-2mRNA表达量逐渐增加,金线莲多糖在400 mg/kg时,其mRNA表达量开始降低,但显着高于模型组;金线莲多糖试验组Fas与FasL mRNA表达量显着低于模型组,多糖浓度逐渐增加,其Fas与FasL mRNA的表达量逐渐减少。结论:1.金线莲多糖可以修复环磷酰胺所致小鼠脾组织病变并降低脾细胞凋亡率;2.金线莲多糖可以降低环磷酰胺所致小鼠脾淋巴细胞凋亡率,促进其DNA复制和有丝分裂的过程;3.金线莲多糖对环磷酰胺所致小鼠脾淋巴细胞凋亡的抑制作用与上调BcL-2/Bax的比值和下调FasmRNA的表达有关。
朱丽丹[6]（2014）在《基于离子液体的米糠多糖硫酸酯化及其抗肿瘤、免疫活性研究》文中研究指明米糠活性多糖已被验证具有抗肿瘤、提高免疫活性、降血脂等功效。本研究以绿色环保的离子液体为反应介质对米糠多糖进行硫酸酯化结构修饰，并比较酯化前后米糠多糖对癌细胞抑制能力和对巨噬细胞的免疫增强活性，探索提高米糠多糖抗肿瘤活性的方法和途径。采用热水浸提法制备米糠多糖RBP，利用Sepharose Big Beads离子交换柱和Sepharose CL-6B凝胶色谱柱进一步分离纯化RBP，得到5个组分（RBP1、RBP2、RBP3、RBP2a、RBP2b）。体外细胞实验结果显示，RBP主要通过宿主介导提高抗肿瘤活性，对小鼠黑色素瘤细胞B16和人肝癌细胞HepG-2直接抑制能力效果不佳，但可以激活静息状态的巨噬细胞Raw264.7，释放NO和TNF-α等细胞因子，间接起到抗肿瘤活性。与RBP相比，分离组分RBP2a对体外B16和HepG-2的直接增殖抑制率显着提高，其中在添加浓度为1000μg/mL，对B16和HepG-2抑制率分别为44.92%、24.92%；也能增强Raw264.7的免疫活性，在浓度为250μg/mL时，NO产生量、TNF-α分泌量分别是对照组的6.36倍、465.06倍。以肿瘤细胞抑制率为评价指标，筛选了适合氯磺酸-吡啶法的酯化反应的离子液体，结果表明，在[BMIM]BF4反应介质中制备得到米糠多糖硫酸酯SRBP-B，可以抑制B16和HepG-2细胞增殖，其抑制率显着高于基于其它离子液体制备的硫酸酯。[BMIM]BF4和DMF配比、酯化温度和酯化时间的单因素和正交试验，最佳硫酸酯化反应条件为：米糠多糖溶解于[BMIM]BF4和DMF二元体系中（体积比为20:10），80°C酯化反应1h，采用该工艺制备的米糠多糖硫酸酯对B16和HepG-2的半抑制浓度（IC50）分别为124.2、741.17μg/mL。基于上述优化反应条件，对RBP2a进行硫酸酯化修饰，制得SRBP2a-B。SRBP2a-B具有良好的抗肿瘤活性，对B16和HepG-2细胞的增殖抑制能力有显着提高，其中IC50分别为97.31、482.41μg/mL。另外，SRBP2a-B通过免疫途径，增加了NO、TNF-α等细胞因子释放量，从而进一步提高抗肿瘤活性。当SRBP2a-B浓度为250μg/mL时，NO产生量、TNF-α分泌量分别是对照组的4.67、324.0倍。但高浓度SRBP2a-B会抑制Raw264.7的增殖，当浓度500μg/mL时，Raw264.7存活率为79.78%。采用倒置显微镜、激光共聚焦显微镜、扫描电镜、流式细胞仪初步研究SRBP2a-B诱导B16细胞凋亡的机理。随着SRBP2a-B添加浓度的增加，细胞数目逐步减少，细胞皱缩逐步严重，细胞核逐渐浓缩、盘绕、凝聚，细胞表面的绒毛体逐渐消失，凋亡小体逐渐增多，呈现典型的凋亡细胞形态。通过细胞周期分布可知，低浓度SRBP2a-B对B16细胞的S期有阻滞作用，而中高浓度的SRBP2a-B对B16细胞有G1阻滞作用。采用AnnexinⅤ-Fluos/PI双染法研究B16细胞分布情况，随着SRBP2a-B的浓度的增加，凋亡早期的细胞所占比例随之升高，从对照组的0.35%增加到4.16%，11.61%，18.98%。通过线粒体膜电位的测定，随着SRBP2a-B浓度的增加，橘红色和绿色荧光比值呈下降的趋势，当浓度为500μg/mL，荧光比值从对照组的21.89降为6.04，说明SRBP2a-B可以诱导B16细胞凋亡，且凋亡途径可能是线粒体凋亡通道。
权美平[7]（2013）在《稻谷副产品的开发利用研究》文中进行了进一步梳理结合当前稻谷深加工的基本现状,尤其是米糠多被废弃,其中的米糠多糖、米糠蛋白、米糠油等的营养价值和生理活性却有着很大开发潜力这一特点,阐述稻谷副产品的开发与利用现状,并对其作为新资源在食品领域的开发及发展前景进行展望,以期为更深层次的研究提供参考。
肖云,张迎庆,糜志远[8]（2012）在《米糠多糖提取纯化工艺的研究进展》文中研究表明米糠多糖是从稻糠中提取的一种活性多糖,具有抗肿瘤、增强免疫、降脂、降血糖等活性。本文综述了米糠多糖的提取纯化工艺,米糠多糖研究中存在的问题,以及米糠多糖的发展前景。
王莉[9]（2009）在《米糠多糖及其硫酸酯的结构、抗肿瘤活性的研究》文中进行了进一步梳理米糠是稻米加工业的主要副产品,是我国丰富而可再生的多糖资源。尽管我国米糠产量居世界之首,但由于我国米糠合理利用的基础理论研究尚处于较低水平,限制了我国米糠潜在价值的进一步精深利用。本论文在系统研究具有抗肿瘤活性米糠多糖RBPS2a提取、分离纯化、结构特征的基础上,通过硫酸酯化改性得到了抗肿瘤活性更显着的硫酸酯化米糠多糖SRBPS2a,并对其体内外抗肿瘤活性机理以及诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制进行了较为深入的研究。具有抗肿瘤活性的硫酸酯化米糠多糖国内外还鲜有报道,酯化修饰米糠多糖抑制肿瘤的作用机理和诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制国内外也尚属空白,本课题的研究,对于提高米糠多糖的生物利用率,丰富硫酸酯化修饰活性多糖基础理论,都具有非常重要的现实意义和学术价值。运用响应面（RSM）和神经网络（ANNs）分析方法,探讨了米糠多糖超声波提取优化工艺。利用响应面设计研究了超声波功率、超声时间、提取温度和料液比对米糠多糖得率的影响。结果表明,提取温度（X1）与超声功率（X2）,二次项中提取温度（X1×X1）以及提取温度与超声功率的交互作用（X1×X2）对响应值米糠多糖的得率存在显着的相关性。首次采用RBF神经网络与QPSO优化算法结合的方法,模拟与优化米糠多糖的超声波提取过程,其最优工艺条件为:提取温度82.5℃、超声波功率335W、提取时间37.5min和料液比18:1。所建立的RBF-QPSO算法对具有多变量、时变性和非线性特征的米糠多糖超声波提取过程的模拟和优化结果优于RSM。以体外抑制肿瘤细胞增殖活性为筛选导向,采用Q-Sepharose big beads离子色谱和Sepharose CL-6B凝胶色谱,分离纯化得到一种具有抗肿瘤活性的多糖组分RBPS2a。高效凝胶色谱（HPGPC）法测得其呈单一峰,重均分子量9×105 Da。RBPS2a的单糖分析、部分酸水解、甲基化分析、红外、核磁共振等分析结果表明,单糖组成为阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖,摩尔比率4:2:1:4;具有一条以β→（1,3）位键合的吡喃半乳糖主链,有两个分支残基,分别是α-D-木糖-（1→4）-α-D-阿拉伯糖-(1→残基和α-D-葡萄糖-（1→4）-a-D-阿拉伯糖-(1→残基。以肿瘤体外增殖抑制为指标,采用氯磺酸-吡啶法,研究米糠多糖的硫酸酯化,优化得到米糠多糖硫酸酯化修饰的最佳条件为:氯磺酸和吡啶的比例1:4,反应温度70℃,反应时间2 h。采用该工艺得到了取代度1.29,分子量3.5×105 Da,具有显着体外抗肿瘤活性的米糠多糖硫酸酯化衍生物SRBPS2a。通过对比傅立叶红外光谱和13C核磁共振谱图,酯化前后结构的分析结果证明,米糠多糖RBPS2a经硫酸酯化修饰后,主链结构保持β-（1→3）-D-甘露糖不变,侧链被切除,硫酸基团的取代发生在C-2和C-4位上,C-6氧化形成糖醛酸甲酯。硫酸酯化米糠多糖较酯化前的米糠多糖显示出较高的体外抗肿瘤活性,与其酯化后结构的改变有密切关系。通过建立小鼠抑制乳腺癌EMT-6模型,研究了SRBPS2a的体内抗肿瘤作用机理。结果表明,SRBPS2a在高（75 mg/kg?d）、中（50 mg/kg?d）剂量下,均具有较为显着的抑瘤作用,其抑瘤率分别达到55.95%和44.05%。与阳性对照组5-FU相比较,SRBPS2a组小鼠的状态良好且脾指数和胸腺指数均有所提高。HE染色结果显示,SRBPS2a中剂量组和高剂量组均能使EMT-6肿瘤细胞成团索状实性排列或弥散状分布,并发生肿瘤细胞大片坏死,坏死区可见凋亡细胞;免疫组化技术进一步显示,SRBPS2a能诱导肿瘤组织中Bax基因蛋白表达,同时也能显着下调Bcl-2基因蛋白的表达。SRBPS2a体外对HepG-2肿瘤细胞凋亡机制的研究表明,SRBPS2a作用后其细胞形态有明显差异。光镜下,细胞贴壁形态异常,细胞数减少;电镜观察显示,随着SRBPS2a浓度的增加,细胞表面微绒毛逐渐消失,细胞膜皱缩,外凸形成小泡;荧光电镜观察发现,高浓度样品作用下细胞核变小、皱缩,可见致密强荧光。PI单染色流式细胞仪检测发现,SRBPS2a作用后的细胞被阻滞在G2/M期,细胞出现较大的凋亡峰（23.4%）,说明SRBPS2a能有效地诱导肿瘤细胞凋亡。以荧光染料PI和Rh123双重染色样作用的细胞,PI （-）和Rh123（-）细胞显着增加,推测SRBPS2a可能在不影响细胞膜完整性的情况下,诱导HepG-2细胞线粒体膜?Ψm下降;采用流式细胞仪检测结果表明,SRBPS2a作用48 h后通过上调HepG-2细胞中促凋亡因子Bax、下调抑凋亡因子Bcl-2,以及上调线粒体依赖的Caspase-3,激活凋亡信号通路,诱导细胞凋亡,从而达到抗肿瘤的作用。
郝志英,李亚冬[10]（2008）在《环磷酰胺药理学研究进展》文中研究指明环磷酰胺作为抗肿瘤药和免疫抑制剂,在临床广泛应用.其独特的代谢活化途径成为了抗肿瘤药物药动学和药理学研究的代表药物.本文对环磷酰胺在体内的代谢特点和在抗肿瘤方面的药理学研究进展进行了阐述.
二、米糠多糖与环磷酰胺联合抗肿瘤作用的免疫药理学机制研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、米糠多糖与环磷酰胺联合抗肿瘤作用的免疫药理学机制研究（论文提纲范文）
（1）益生菌固态发酵对米糠抗氧化活性的影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 1 引言 |
| 1.1 米糠简介 |
| 1.1.1 米糠的来源及组成 |
| 1.1.2 米糠中活性物质 |
| 1.1.3 米糠的应用现状 |
| 1.2 抗氧化研究概况 |
| 1.2.1 氧化自由基 |
| 1.2.2 抗氧化活性物质研究进展 |
| 1.2.3 抗氧化评价方法 |
| 1.3 本试验研究目的、意义及内容 |
| 1.3.1 本试验研究目的及意义 |
| 1.3.2 技术路线图 |
| 2 固态发酵对米糠抗氧化活性的影响 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料 |
| 2.2.1 菌种 |
| 2.2.2 原料 |
| 2.2.3 试剂 |
| 2.2.4 主要仪器和设备 |
| 2.3 试验设计与方法 |
| 2.3.1 不同发酵时间米糠的抗氧化活性 |
| 2.3.2 含水率不同发酵米糠的抗氧化活性 |
| 2.3.3 腐植酸钠对米糠抗氧化活性的影响 |
| 2.3.4 酶种类对发酵米糠抗氧化活性的影响 |
| 2.3.5 酶添加量对发酵米糠抗氧化活性的影响 |
| 2.3.6 DPPH自由基清除率测定 |
| 2.3.7 数据统计分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 发酵时间对米糠抗氧化活性的影响 |
| 2.4.2 不同含水率条件对米糠抗氧化活性的影响 |
| 2.4.3 腐植酸钠添加量对米糠抗氧化活性的影响 |
| 2.4.4 不同酶对米糠抗氧化活性的影响 |
| 2.4.5 不同葡聚糖酶添加量对米糠抗氧化活性的影响 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 小结 |
| 3 发酵前后米糠提取物活性成分分析 |
| 3.1 提取条件对米糠抗氧化活性的影响 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 试验设计与方法 |
| 3.1.3 结果与分析 |
| 3.1.4 讨论 |
| 3.2 发酵米糠提取物的活性成分分析 |
| 3.2.1 材料 |
| 3.2.2 方法 |
| 3.2.3 结果与分析 |
| 3.2.4 讨论 |
| 3.2.5 小结 |
| 4 发酵前后米糠提取物体内抗氧化活性评价 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料 |
| 4.2.1 斑马鱼 |
| 4.2.2 米糠提取物 |
| 4.2.3 试剂 |
| 4.2.4 实验仪器和设备 |
| 4.3 方法 |
| 4.3.1 斑马鱼饲养管理 |
| 4.3.2 斑马鱼胚胎收集 |
| 4.3.3 斑马鱼胚胎AAPH诱导处理 |
| 4.3.4 斑马鱼ROS产生量荧光测定 |
| 4.3.5 斑马鱼细胞死亡率荧光测定 |
| 4.3.6 斑马鱼脂质过氧化率荧光测定 |
| 4.3.7 蛋白含量测定 |
| 4.3.8 过氧化氢酶(CAT)活力测定 |
| 4.3.9 超氧化物歧化酶(SOD)活力测定 |
| 4.3.10 数据统计分析 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 FRBE对AAPH诱导的斑马鱼ROS产生量影响 |
| 4.4.2 FRBE对AAPH诱导的斑马鱼细胞死亡率的影响 |
| 4.4.3 FRBE对AAPH诱导的斑马鱼脂质过氧化的影响 |
| 4.4.4 FRBE对AAPH诱导的斑马鱼胚胎CAT活力的影响 |
| 4.4.5 FRBE对AAPH诱导的斑马鱼胚胎SOD活力的影响 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 小结 |
| 5 全文结论 |
| 5.1 固态发酵对米糠抗氧化活性影响研究 |
| 5.2 米糠提取物的制备及其活性成分研究 |
| 5.3 固态发酵米糠提取物体内抗氧化活性研究 |
| 6 创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（2）米糠多糖和膳食纤维的质量标准研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号缩写说明 |
| 1 绪论 |
| 1.0 立题依据及思路 |
| 1.1 文献综述 |
| 1.1.1 多糖的研究应用进展 |
| 1.1.2 米糠多糖的提取方法 |
| 1.1.3 多糖生理功效的研究应用 |
| 1.2 国内外米糠及米糠多糖的研究应用现状 |
| 1.2.1 国内外米糠资源的研究应用现状 |
| 1.2.2 国内外米糠多糖的研究应用现状 |
| 1.3 米糠膳食纤维的概述 |
| 1.3.1 米糠膳食纤维的定义 |
| 1.3.2 米糠膳食纤维的分类 |
| 1.3.3 米糠膳食纤维的测定方法 |
| 2 米糠多糖的提取工艺研究 |
| 2.1 米糠多糖的提取工艺流程 |
| 2.2 米糠多糖提取中试工艺 |
| 2.3 米糠多糖的总糖含量的测定 |
| 2.3.1 材料 |
| 2.3.2 实验步骤 |
| 2.3.3 米糠多糖含量测定结果 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 米糠多糖的质量标准研究 |
| 3.1 米糠多糖的性状、规格 |
| 3.2 检测项目 |
| 3.2.1 水份检测 |
| 3.2.2 灰分的测定 |
| 3.2.3 蛋白质的测定 |
| 3.2.4 脂肪的测定 |
| 3.2.5 pH值的测定 |
| 3.2.6 重金属的测定 |
| 3.2.7 微生物检查 |
| 3.2.8 米糠多糖方法学考察 |
| 3.3 本章小结 |
| 4 米糠多糖中的多糖分子量及其分布 |
| 4.1 实验材料、设备与试剂 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 设备与试剂 |
| 4.2 实验操作 |
| 4.2.1 色谱条件的选择 |
| 4.2.2 米糠多糖产品溶液的配制 |
| 4.2.3 分子量的测定 |
| 4.3 米糠多糖分子量及分布测定结果 |
| 4.3.1 米糠多糖的分布结果 |
| 4.3.2 米糠多糖的分子量结果 |
| 5 米糠多糖成分的HPLC指纹特征图谱 |
| 5.1 实验材料、设备与试剂 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 设备与试剂 |
| 5.2 实验操作 |
| 5.2.1 色谱条件的选择 |
| 5.2.2 米糠多糖产品溶液和标准品溶液配制 |
| 5.3 实验结果与分析 |
| 5.3.1 标准对照品衍生物的HPLC图 |
| 5.3.2 米糠多糖产品部分水解PMP衍生物的HPLC图 |
| 5.3.3 米糠多糖HPLC指纹图谱分析方法的方法学考察 |
| 5.3.4 不同批次的米糠多糖指纹图谱的建立和评价 |
| 5.4 本章小结 |
| 6 米糠膳食纤维质量标准研究 |
| 6.1 性状、规格 |
| 6.2 检查项目 |
| 6.3 米糠膳食纤维含量的测定 |
| 6.3.1 实验材料、设备与试剂 |
| 6.3.2 米糠膳食纤维总膳食纤维含量测定 |
| 6.3.3 米糠膳食纤维不溶性膳食纤维含量测定 |
| 6.3.4 米糠膳食纤维可溶性膳食纤维含量测定 |
| 6.3.5 测定结果 |
| 6.4 精密度实验 |
| 6.5 本章小结 |
| 结论与创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）张杂谷米糠多糖微波提取及其对肥胖大鼠肝脏自由基代谢的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 微波辅助提取张杂谷米糠多糖方法 |
| 1.2.2 Box-Behnken设计 |
| 1.2.3 动物分组 |
| 1.2.4 大鼠处死及自由基匀浆液制备 |
| 1.2.5 测试指标 |
| 1.2.6 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 单因素 |
| 2.1.1 料液比对张杂谷米糠多糖得率的影响 |
| 2.1.2 微波处理时间对张杂谷米糠多糖得率的影响 |
| 2.1.3 微波处理功率对张杂谷米糠多糖得率的影响 |
| 2.2 响应面分析法优化工艺条件 |
| 2.3 张杂谷米糠多糖对肥胖大鼠肝脏自由基代谢的影响 |
| 2.3.1 张杂谷米糠多糖对大鼠肝脏细胞总抗氧化能力的影响 |
| 2.3.2 张杂谷米糠多糖肥胖大鼠肝脏细胞氧自由基代谢的影响 |
| 2.3.3 张杂谷米糠多糖对肥胖大鼠肝脏细胞氮自由基代谢的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
（4）金线莲多糖免疫调节作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1 中药多糖的免疫调节作用研究 |
| 1.1 中药多糖对免疫器官发育的影响 |
| 1.2 中药多糖对T淋巴细胞和B淋巴细胞的影响 |
| 1.3 中药多糖对巨噬细胞的影响 |
| 1.4 中药多糖对NK细胞的影响 |
| 1.5 中药多糖对NO的影响 |
| 1.6 中药多糖对细胞因子的影响 |
| 1.7 中药多糖对细胞因子基因表达的影响 |
| 2 金线莲的化学成分及药理活性研究 |
| 2.1 金线莲的化学成分 |
| 2.2 金线莲药理作用 |
| 3 金线莲多糖的研究概况 |
| 4 课题选题依据、目的和意义 |
| 第二章 金线莲多糖对小鼠脾淋巴细胞体外活性及机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 ARP对小鼠脾淋巴细胞安全浓度的筛选 |
| 2.2 ARP协同ConA对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 |
| 2.3 ARP协同LPS对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 |
| 2.4 ARP对小鼠脾淋巴细胞周期的影响 |
| 2.5 ARP对小鼠脾淋巴细胞NO产生量的影响 |
| 2.6 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞分泌细胞因子的影响 |
| 2.7 ARP对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞因子mRNA表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 ARP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 |
| 3.2 ARP对小鼠脾淋巴细胞周期的的影响 |
| 3.3 ARP对小鼠脾淋巴细胞分泌NO的的影响 |
| 3.4 ARP对小鼠脾淋巴细胞分泌细胞因子及mRNA的影响 |
| 4 结论 |
| 第三章 金线莲多糖对RAW264.7细胞体外免疫活性及机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 ARP对RAW264.7细胞安全浓度的筛选 |
| 2.2 ARP对RAW264.7细胞凋亡的影响 |
| 2.3 ARP对RAW264.7细胞吞噬功能的影响 |
| 2.4 ARP对RAW264.7细胞NO产生量的影响 |
| 2.5 ARP对RAW264.7细胞分泌细胞因子影响 |
| 2.6 细胞中TNF-α、IL-6、I1-1β、IL-10和iNOS mRNA表达水平 |
| 2.7 ARP对RAW264.7细胞IκB p65蛋白表达的影响 |
| 2.8 ARP对RAW264.7细胞NF-κB蛋白表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 ARP对RAW264.7细胞增殖的影响 |
| 3.2 ARP对RAW264.7细胞吞噬活性的影响 |
| 3.3 ARP对RAW264.7细胞分泌NO及iNOS mRNA表达的影响 |
| 3.4 ARP对RAW264.7细胞分泌细胞因子及mRNA表达的影响 |
| 3.5 ARP对RAW264.7细胞胞浆IκB p65及胞核NF-κB表达的影响 |
| 4 结论 |
| 第四章 金线莲多糖对免疫抑制小鼠免疫调节作用及机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 试验小鼠体重变化 |
| 2.2 试验小鼠小鼠免疫器官指数的变化 |
| 2.3 试验小鼠巨噬细胞吞噬功能的变化 |
| 2.4 试验小鼠脾T、B淋巴细胞增殖的变化 |
| 2.5 试验小鼠白细胞总数的变化 |
| 2.6 试验小鼠血清细胞因子含量的变化 |
| 2.7 试验小鼠细胞因子与转录因子mRNA表达水平变化 |
| 2.8 试验小鼠外周血CD4~+、CD8~+T细胞比例及CD4~+/CD8~+比值的变化 813 讨论 |
| 3 讨论 |
| 3.1 小鼠免疫抑制模型的建立 |
| 3.2 ARP对免疫抑制小鼠免疫器官指数的影响 |
| 3.3 ARP对免疫抑制小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响 |
| 3.4 ARP对免疫抑制小鼠脾T、B淋巴细胞增殖的影响 |
| 3.5 ARP对免疫抑制小鼠白细胞总数的影响 |
| 3.6 ARP对免疫抑制小鼠血清中细胞因子含量的影响 |
| 3.7 ARP对免疫抑制小鼠细胞因子与转录因子mRNA水平表达的影响 |
| 3.8 ARP对免疫抑制小鼠外周血CD4~+、CD8~+T细胞以及CD4~+/CD8~+比值的影响 |
| 4 结论 |
| 第五章 金线莲多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡的机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 小鼠脾脏组织形态学变化 |
| 2.2 小鼠脾细胞凋亡 |
| 2.3 Annexin V-FITC/PI双染法检测小鼠脾淋巴细胞凋亡 |
| 2.4 DNA周期检测小鼠脾淋巴细胞凋亡 |
| 2.5 凋亡基因Bax、BcL-2、FAS、FasL mRNA表达量的变化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 ARP对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡的形态学影响 |
| 3.2 ARP对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响 |
| 3.3 ARP对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞周期的影响 |
| 3.4 ARP对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡基因的影响 |
| 4 结论 |
| 第六章 结论与展望 |
| 1 本研究的主要结论 |
| 2 本研究创新点 |
| 3 本研究尚需进一步深入研究内容 |
| 参考文献 |
| 主要缩略词和中英文对照表(ABBREVIATIONINDEX) |
| 致谢 |
（5）金线莲多糖对环磷酰胺免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 环磷酰胺免疫抑制模型研究进展 |
| 1.1 环磷酰胺免疫抑制表现 |
| 1.2 环磷酰胺免疫抑制模型建立 |
| 2 植物多糖的细胞凋亡抑制作用研究进展 |
| 3 金线莲多糖药理作用的研究进展 |
| 3.1 降血糖作用 |
| 3.2 抗氧化作用 |
| 3.3 抗肿瘤作用 |
| 3.4 免疫调节作用 |
| 4 细胞凋亡研究进展 |
| 4.1 细胞凋亡的生物学特征 |
| 4.2 细胞凋亡的相关蛋白 |
| 4.3 细胞凋亡的发生机制 |
| 4.4 细胞凋亡的检测方法 |
| 5 本研究的目的与意义 |
| 第二章 金线莲多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡的形态学影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 小鼠脾脏组织形态学变化 |
| 2.2 小鼠脾脏细胞凋亡 |
| 3 讨论 |
| 第三章 金线莲多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡及细胞凋亡率的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 Annexin V-FITC/PI双染法检测小鼠脾淋巴细胞凋亡 |
| 2.2 DNA周期检测小鼠脾淋巴细胞凋亡 |
| 3 讨论 |
| 3.1 金线莲多糖对小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响 |
| 3.2 金线莲多糖对小鼠脾淋巴细胞细胞周期的影响 |
| 第四章 金线莲多糖对免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡Bax、BcL-2、Fas、FasLmRNA表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 Bax、BcL-2 mRNA表达量的影响 |
| 2.2 Fas、FasL mRNA表达量的影响 |
| 3 讨论 |
| 全文总结 |
| 本研究创新点 |
| 尚需进一步深入研究内容 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）基于离子液体的米糠多糖硫酸酯化及其抗肿瘤、免疫活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 1 引言 |
| 1.1 米糠多糖概述 |
| 1.1.1 米糠及米糠多糖 |
| 1.1.2 米糠多糖活性研究进展 |
| 1.1.3 多糖硫酸酯的研究进展 |
| 1.2 天然活性多糖抗肿瘤途径 |
| 1.2.1 多糖对免疫细胞的调节作用 |
| 1.2.2 多糖诱导癌细胞凋亡 |
| 1.3 离子液体概述 |
| 1.3.1 离子液体的基本性质 |
| 1.3.2 离子液体在纤维素和淀粉中应用 |
| 1.4 立题背景与意义 |
| 1.5 研究内容 |
| 2 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料与试剂 |
| 2.2 主要仪器和设备 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 米糠粗多糖的制备 |
| 2.3.2 米糠粗多糖的分离纯化 |
| 2.3.3 脱脂米糠及米糠多糖的成分分析 |
| 2.3.4 N-甲基咪唑类离子液体和功能性离子液体的制备 |
| 2.3.5 N-甲基咪唑类离子液体和功能性离子液体物理性质分析 |
| 2.3.6 基于离子液体的米糠多糖硫酸酯制备条件的优化 |
| 2.3.7 米糠多糖及其硫酸酯对细胞增殖的影响 |
| 2.3.8 米糠多糖及其硫酸酯的细胞免疫的活性的表征 |
| 2.3.9 米糠多糖硫酸酯刺激 B_(16)细胞凋亡的表征 |
| 2.3.10 多糖的傅里叶红外光谱分析 |
| 2.3.11 数据处理 |
| 3 实验结果与讨论 |
| 3.1 米糠粗多糖的制备及抗肿瘤活性 |
| 3.1.1 脱脂米糠及米糠粗多糖的成分分析 |
| 3.1.2 米糠粗多糖的抗肿瘤活性的测定 |
| 3.2 分离组分的免疫活性和对肿瘤细胞抑制能力的测定 |
| 3.2.1 离子交换色谱柱和凝胶色谱柱分离纯化 |
| 3.2.2 分离组分对肿瘤细胞抑制能力研究 |
| 3.2.3 米糠粗多糖及分离组分的免疫活性研究 |
| 3.3 N-甲基咪唑类离子液体和功能性离子液体的物理性质分析 |
| 3.3.1 离子液体红外图谱的表征 |
| 3.3.2 离子液体粘度分析 |
| 3.4 基于离子液体米糠多糖硫酸酯化条件的修饰 |
| 3.4.1 不同离子液体对制备米糠多糖硫酸酯的影响 |
| 3.4.2 反应体系的配比对制备米糠多糖硫酸酯的影响 |
| 3.4.3 酯化温度对制备米糠多糖硫酸酯的影响 |
| 3.4.4 酯化时间对制备米糠多糖硫酸酯的影响 |
| 3.4.5 正交试验 |
| 3.5 SRBP2a-B 的免疫活性和对肿瘤细胞抑制能力的研究 |
| 3.5.1 SRBP2a-B 的免疫活性 |
| 3.5.2 SRBP2a-B 的抗肿瘤活性 |
| 3.6 SRBP2a-B 诱导 B_(16)细胞凋亡的研究 |
| 3.6.1 倒置显微镜观察 SRBP2a-B 对 B_(16)细胞形态的影响 |
| 3.6.2 激光共聚焦显微镜观察 SRBP2a-B 对 B_(16)细胞核的影响 |
| 3.6.3 扫描电镜观察 SRBP2a-B 对 B_(16)细胞形态的影响 |
| 3.6.4 SRBP2a-B 对 B_(16)细胞周期的影响 |
| 3.6.5 SRBP2a-B 对 B_(16)细胞膜的影响 |
| 3.6.6 SRBP2a-B 对 B_(16)线粒体膜的影响 |
| 主要结论与展望 |
| 主要结论 |
| 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 |
（7）稻谷副产品的开发利用研究（论文提纲范文）
| 1 大米淀粉产品的研究现状 |
| 2 米胚的研究现状 |
| 3 米糠资源的开发与利用 |
| 3.1 米糠蛋白 |
| 3.2 米糠多糖 |
| 3.3 米糠油 |
| 4 稻壳的开发与利用 |
（8）米糠多糖提取纯化工艺的研究进展（论文提纲范文）
| 1 米糠多糖的生理功效 |
| 1.1 抗肿瘤 |
| 1.2 增强免疫调节 |
| 1.3 降脂 |
| 1.4 降血糖 |
| 2 米糠多糖提取工艺的研究 |
| 2.1 热水浸提法 |
| 2.2 超声波法 |
| 2.3 高压电脉冲提取法 |
| 2.4 微波辅助浸提法 |
| 2.5 各种提取方法对比 |
| 2.5.1 超声波法、高压脉冲法与传统热水法对比 |
| 2.5.2 微波辅助法与传统热水法的对比 |
| 3 米糠多糖的纯化工艺研究 |
| 3.1 蛋白质去除法 |
| 3.2 淀粉去除法 |
| 3.3 色素植酸去除法 |
| 3.4 不同多糖成分的分离方法 |
| 4 RBS的研究展望 |
（9）米糠多糖及其硫酸酯的结构、抗肿瘤活性的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 植物多糖的研究进展 |
| 1.1.1 植物多糖的分离提取 |
| 1.1.2 植物多糖的分离纯化 |
| 1.1.3 植物多糖的结构测定 |
| 1.1.4 植物多糖的生物活性 |
| 1.1.5 多糖的结构修饰 |
| 1.2 米糠多糖研究进展 |
| 1.3 立题背景和意义 |
| 1.4 本课题的主要研究内容 |
| 参考文献 |
| 第二章 米糠多糖超声波提取工艺的研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 仪器和设备 |
| 2.2.2 主要材料和试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 超声波提取米糠多糖的提取工艺 |
| 2.3.2 响应面(RSM)优化超声波提取米糠粗多糖 |
| 2.3.3 RBF-QPSO 算法优化米糠多糖过程 |
| 2.3.4 多糖含量的测定 |
| 2.3.5 米糠粗多糖的得率的计算 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 响应曲面法实验设计与试验结果 |
| 2.4.2 试验统计模型的建立 |
| 2.4.3 回归模型检验 |
| 2.4.4 回归方程的优化 |
| 2.4.5 RBF-QPSO 算法优化米糠多糖过程 |
| 2.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 米糠多糖RBPS2a 的分离纯化及结构鉴定 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 仪器和设备 |
| 3.2.2 主要材料和试剂 |
| 3.2.3 分析方法 |
| 3.2.4 数据分析 |
| 3.2.5 多糖分子量的测定和纯度鉴定(HPGPC) |
| 3.2.6 样品中多糖含量、糖醛酸含量及单糖组成分析 |
| 3.2.7 样品中蛋白含量及氨基酸组成分析 |
| 3.2.8 RBPS2a 部分酸水解 |
| 3.2.9 RBPS2a 高碘酸氧化及Smith 降解 |
| 3.2.10 RBPS2a 甲基化 |
| 3.2.11 红外光谱及核磁共振测定 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 米糠体外抗肿瘤多糖分离纯化以及活性组分的筛选 |
| 3.3.2 米糠多糖组分RBPS2a 的理化性质及其结构表征 |
| 3.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 硫酸酯化米糠多糖的制备、活性及其结构分析 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与设备 |
| 4.2.1 主要仪器和设备 |
| 4.2.2 主要试剂 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 米糠多糖RBPS2a 的制备 |
| 4.3.2 米糠多糖的硫酸酯化方法 |
| 4.3.3 酯化试剂的比例对制备硫酸酯化米糠多糖的影响 |
| 4.3.4 不同温度对制备硫酸酯化米糠多糖的影响 |
| 4.3.5 不同反应时间对制备硫酸酯化米糠多糖的影响 |
| 4.3.6 米糠多糖硫酸酯化的正交试验 |
| 4.3.7 硫酸基含量的测定 |
| 4.3.8 硫酸酯化米糠多糖各组分体外对肿瘤细胞增殖抑制作用 |
| 4.3.9 分子量的测定和纯度鉴定(HPGPC) |
| 4.3.10 红外光谱和~(13)C NMR 分析 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 硫酸酯化修饰米糠多糖的单因素试验结果 |
| 4.4.2 硫酸酯化米糠多糖正交试验结果 |
| 4.4.3 硫酸酯化米糠多糖各组分体外对肿瘤细胞增殖抑制作用 |
| 4.4.4 硫酸酯化米糠多糖SRBPS2a 的分子量测定 |
| 4.4.5 硫酸酯化米糠多糖的红外光谱 |
| 4.4.6 硫酸酯化米糠多糖的核磁共振分析 |
| 4.4.7 硫酸酯化米糠多糖的构效关系探讨 |
| 4.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 硫酸酯化米糠多糖SRBPS2a 体内抗肿瘤作用及机理的初步研究 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料与设备 |
| 5.2.1 主要材料 |
| 5.2.2 主要试剂 |
| 5.2.3 主要仪器和设备 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 动物模型建立 |
| 5.3.2 给样方式 |
| 5.3.3 疗效评价 |
| 5.3.4 数据分析 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 SRBPS2a 对EMT-6 荷瘤小鼠的抑瘤作用 |
| 5.4.2 白细胞计数 |
| 5.4.3 对荷瘤小鼠免疫器官重量的影响 |
| 5.4.4 对小鼠EMT-6 肿瘤组织病理形态学的影响 |
| 5.4.5 对小鼠EMT-6 肿瘤组织中Bax 和Bcl-2 基因蛋白表达的影响 |
| 5.5 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第六章 硫酸酯化米糠多糖SRBPS2a 诱导肿瘤细胞凋亡及相关机制研究 |
| 6.1 前言 |
| 6.2 材料与设备 |
| 6.2.1 主要材料 |
| 6.2.2 主要试剂 |
| 6.2.3 主要仪器和设备 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 样品对不同细胞的生长状况影响（光学显微镜） |
| 6.3.2 扫描电镜观察样品对不同细胞的形态影响 |
| 6.3.3 荧光显微镜观察凋亡细胞核变化 |
| 6.3.4 流式细胞术分析样品对HepG-2 细胞周期的影响 |
| 6.3.5 流式细胞仪检测线粒体膜电位 |
| 6.3.6 流式细胞仪检测肿瘤基因蛋白和Caspase-3 的表达水平 |
| 6.4 结果与讨论 |
| 6.4.1 SRBPS2a 对肿瘤细胞HepG-2 形态影响 |
| 6.4.2 扫描电镜下观察SRBPS2a 诱导HepG-2 细胞凋亡的形态学变化 |
| 6.4.3 荧光显微镜观察SRBPS2a 对HepG-2 凋亡细胞核变化 |
| 6.4.5 SRBPS2a 对HepG-2 细胞周期的影响 |
| 6.4.6 双染色法检测SRBPS2a 对HepG-2 细胞线粒体跨膜电位(?Ψm)的影响 |
| 6.4.7 流式细胞仪检测SRBPS2a 作用肿瘤相关基因蛋白和Caspase-3 的表达水平 |
| 参考文献 |
| 论文主要结论 |
| 本论文创新点 |
| 攻读博士学位期间发表论文清单 |
| 致谢 |
四、米糠多糖与环磷酰胺联合抗肿瘤作用的免疫药理学机制研究（论文参考文献）
- [1]益生菌固态发酵对米糠抗氧化活性的影响研究[D]. 刘玉辉. 内蒙古农业大学, 2020(02)
- [2]米糠多糖和膳食纤维的质量标准研究[D]. 范汝薇. 武汉轻工大学, 2017(06)
- [3]张杂谷米糠多糖微波提取及其对肥胖大鼠肝脏自由基代谢的影响[J]. 张秀媛,何扩,王丽霞,赵瑞平,陈一. 中国粮油学报, 2016(05)
- [4]金线莲多糖免疫调节作用及机制研究[D]. 马玉芳. 福建农林大学, 2015(05)
- [5]金线莲多糖对环磷酰胺免疫抑制小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响[D]. 潘晓丽. 福建农林大学, 2015(03)
- [6]基于离子液体的米糠多糖硫酸酯化及其抗肿瘤、免疫活性研究[D]. 朱丽丹. 江南大学, 2014(02)
- [7]稻谷副产品的开发利用研究[J]. 权美平. 江苏调味副食品, 2013(04)
- [8]米糠多糖提取纯化工艺的研究进展[J]. 肖云,张迎庆,糜志远. 食品与药品, 2012(11)
- [9]米糠多糖及其硫酸酯的结构、抗肿瘤活性的研究[D]. 王莉. 江南大学, 2009(04)
- [10]环磷酰胺药理学研究进展[A]. 郝志英,李亚冬. 中国药学会应用药理专业委员会第三届学术会议、中国药理学会制药工业专业委员会第十三届学术会议暨2008生物医药学术论坛论文汇编, 2008