一、镉致兔肾损害时血清和尿液中胍类化合物的变化（论文文献综述）
宁洁[1]（2020）在《杜仲颗粒对妊娠期高血压疾病患者早期肾损害的干预研究》文中进行了进一步梳理背景妊娠期高血压疾病（hypertensive disorder complicating pregnancy,HDCP）是妊娠期特有的疾病。患者因全身小血管痉挛造成体内多个靶器官的损害,这其中肾脏是最容易受累积且受损最重的器官。早期肾功能损害时发病较隐匿,如果能在早期肾损害时,选择有效的药物进行干预,就可以改善肾损害,减少此病造成的母婴危害。杜仲药理作用丰富,有降血压、降血糖血脂、安胎、抗菌消炎和抗氧化等作用。本研究是探讨杜仲颗粒在治疗HDCP患者的同时,对患者出现早期肾损害的干预效果及干预机制。目的1.观察分析杜仲颗粒对于HDCP患者血压的影响。2.分析两组患者在不同治疗方法下,体内血清胱抑素C（CysC）、尿肾损伤分子-1（KIM-1）、血肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）、血尿酸（UA）的变化水平。探讨杜仲颗粒对HDCP患者早期肾损害的干预治疗效果。3.分析两组患者在不同治疗方法下,体内血清中白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和丙二醛（MDA）水平,探讨杜仲颗粒对HDCP患者早期肾损害的干预机制。方法研究对象主要选取于2018年09月至2019年09月,在郑州大学第三附院确诊患有妊娠期高血压且随机蛋白尿（-）,尿微量白蛋白/尿肌酐（UACR）≥30mg/g的患者60例。采取随机双盲对照法,将患者分为常规组和杜仲组各30例。常规组给予妊娠期高血压疾病的常规治疗方案,杜仲组选用杜仲颗粒联合常规治疗方案,治疗疗程为一个月。按要求收集所有患者的空腹血、晨尿检查样本。测定患者肾功能相关指标SCr、BUN、UA、CysC和KIM-1以及血清IL-6、TNF-α和MDA治疗前后变化水平。结果1.两组患者基线资料比较两组患者治疗前的年龄、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、体重指数（BMI）没有显着差异（P>0.05）。2.两组患者治疗后血压比较经不同治疗方案治疗后,两组患者的SBP和DBP水平,较治疗前均降低（P<0.05）。组间比较,杜仲组患者血压水平下降更显着（P<0.05）。3.两组患者肾功能相关指标比较治疗前,两组患者CysC、KIM-1、SCr、BUN和UA各项指标没有显着差异（P>0.05）。经不同治疗方案治疗后,杜仲组患者的CysC、KIM-1、SCr、BUN和UA的水平与治疗前相比较均明显下降（P<0.05）。常规组患者CysC、BUN和UA较治疗前下降（P<0.05）,但KIM-1和SCr下降不明显（P>0.05）。组间比较,杜仲组患者治疗后各指标下降更为明显,组间差异显着（P<0.05）。4.两组患者血清IL-6、TNF-α和MDA水平比较杜仲组和常规组患者治疗后血清IL-6、TNF-α和MDA指标水平,较治疗前均下降（P<0.05）。组间比较,杜仲组各指标下降更为明显（P<0.05）。结论1.杜仲颗粒联合常规治疗较单纯常规治疗相比,能有效降低妊娠期高血压疾病患者血压。2.杜仲颗粒联合常规治疗可以改善妊娠期高血压疾病患者出现的早期肾损害,其药理作用机制可能与杜仲颗粒可以干预机体炎症反应,增强机体细胞抗氧化能力有关。
邓诺[2]（2018）在《大黄及其总蒽醌肝肾毒性研究》文中提出大黄（Rhei Radix et Rhizoma）是一味常用中药,是蓼科植物唐古特大黄Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.、药用大黄Rheum offcinale Baill.以及掌叶大黄Rheum palmatum L.的干燥根茎及根,具有泻下攻积、清热泻火、凉血解毒、逐瘀通经及利湿退黄等作用,临床用于实热积滞便秘,血热吐衄,目赤咽肿,痈肿疔疮,肠痈腹痛,瘀血经闭,产后瘀阻,跌打损伤,湿热痢疾,黄疸尿赤,淋证,水肿,外治烧烫伤[1]。大黄主要成分为蒽醌类,包括大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚等,除此之外还有苯丁酮苷类、鞣质、挥发油、多糖、脂肪酸、蛋白质等[2]成分。大黄性味苦寒,泻下之力迅猛,若使用不当,可能造成不良反应[3]。以往关于大黄及其主要成分蒽醌类的毒性研究已有报告,结论有一定差异,在多认为蒽醌类在一定剂量下可能造成肝肾毒性。但是以往对大黄及蒽醌的肝肾毒性机制研究较少。本研究拟在重复大黄及其总蒽醌的毒理学研究的基础上,重点通过大黄对肝脏与肾脏转运子表达的影响,初步探讨其毒性机制。根据以往研究,大黄提取物的毒性剂量范围在10～12 g/kg,大黄总蒽醌的毒性剂量范围在135 mg/kg～4500mg/kg。本研究第一部分将参考此毒性剂量范围设计实验剂量,重复大黄提取物及总蒽醌的肝肾毒性研究。肝脏和肾脏分别是人体的代谢及排泄器官,在体内内源性物质以及外源性物质包括药物的代谢和转运过程中起着非常重要的作用。本研究第二部分将主要观察大黄及其总蒽醌对肝肾相关转运子表达的影响,以初步探讨其肝肾毒性机制。目的:观察不同剂量下大黄提取物及总蒽醌的肝肾毒性,了解毒性剂量范围;通过对肝肾相关转运子mRNA的分析,探讨大黄提取物及总蒽醌肝肾毒性机制。方法:健康SPF级SD大鼠80只,雌雄各半。按体重随机分为对照组A、大黄提取物不同剂量组（2、8、16 g生药/kg,分别相当于临床剂量的1.25、5、10倍）;对照组B、大黄总蒽醌不同剂量组（0.5、2.5、5 g药粉/kg）。每组10只动物,雌雄各5只。大黄提取物不同剂量组均采用灌胃给药,每日一次,连续给药1个月。对照组A与大黄不同剂量组平行进行试验,给予等体积的纯净水。大黄总蒽醌不同剂量组灌胃给药10天,每日一次,连续给药10天。对照组B与大黄总蒽醌平行进行试验,给予等体积的纯净水。末次给药结束后,采用代谢笼收集16h尿液,测量尿量,采用尿液分析仪进行尿定性指标检测（尿蛋白、尿糖、尿胆原、红细胞、白细胞等）;采用ELISA方法测定尿液NGAL（Neutrophil gelatinase-associated lipocalin）、KIM-1（Kidney injure molecule-1）含量。将动物麻醉后经腹主动脉取血,分离血清,分析ALT、AST、BUN、CRE等血清生化指标及血象指标。摘取肝脏和肾脏,将部分肝、肾组织常规用甲醛固定、取材、脱水、石蜡包埋、切片、苏木素-伊红染色,显微镜下进行病理检查。另外部分的肾脏组织分装入去RNA酶的试管中,放入液氮速冻后放入-80℃C留存,用于后续RT-PCR试验,分析肾脏的肾脏有机阴离子转运体（OAT1、OAT3）、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、丛集素（Clusterin）mRNA表达水平。另取动物分成对照组和大黄总蒽醌5 g/kg剂量组,进行对氨基马尿酸（PAH）清除率检测实验。大鼠灌胃给予大黄总蒽醌5 g/kg 10天后,腹腔注射10%水合氯醛麻醉（350 mg/kg大鼠）。在无菌条件下行颈总静脉插管和股静脉插管术。将手术成功的大鼠放入IVC笼具单笼饲养,术后恢复。禁食12-16h（自由饮水）后,从颈静脉推注浓度为6 g/L PAH溶液30 mg/kg后,静脉滴注浓度为3 g/L PAH溶液6mg/h/100g45min,然后开始计时,在大鼠清醒状态下,分别在1,5,10,15,20,25,30,40,50,60 min时间点采集血液样品。每个时间点采血后,均静脉输入同体积的生理盐水。在20,40,60 min收集大鼠尿液,并测量各时间段的尿液体积。采用HPLC分别分析血液和尿液中的PAH含量,计算PAH清除率。结果:1.大黄提取物和大黄总蒽醌剂量过高时可导致肾脏轻度损伤,但中、低剂量时无明显肝肾毒性大鼠灌胃给予大黄提取物高剂量组（16 g生药/kg,相当于临床剂量的10倍）于给药后出现软便、被毛不干净、无光泽、尿液颜色加深等现象;血清肌酐（CRE）水平较对照组升高（p<0.001）;雄性大鼠的肾脏重量显着性降低（p<0.05）。高剂量组其他生化指标和低、中剂量组生化指标未见有明显毒理学意义的变化。病理检查可见,高剂量组（16 g生药/kg）肝脏出现轻微小灶状炎症细胞浸润,但与对照组比较差异不明显,故不认为有毒理学意义。高剂量组雌、雄大鼠的肾脏可见轻度或中度肾小管细胞肿胀、变性,少量炎症细胞浸润,其中雄性大鼠的肾脏病变较雌性大鼠稍重,有2只雄性大鼠可见片状炎症细胞浸润伴有成纤维细胞增生。中、低剂量组未见肝、肾病理损伤。大黄总蒽醌高剂量组（5 g/kg）给药后,大鼠体重明显下降,可能与饲料摄入减少有关。给药后大便稀软,被毛不干净,耸毛,无光泽。高剂量组给药后第4天可见大鼠行动迟缓,精神萎靡厌动;第7天雄性大鼠死亡一只。故于给药后第10天将各剂量组动物处死检查分析。高剂量组（5 g/kg）的血液肌酐增高（p<0.01）,与对照组相比升高162.5%。与对照组相比,高剂量组肾脏重量及肾脏指数显着性降低（p<0.001）。病理形态学检查结果显示。高剂量组肝脏可见少数肝细胞嗜酸性增强,核浓染,但对照组也可见此现象,故毒理学意义不明显。高剂量组可见肾小管轻度肿胀、炎症细胞浸润;但低、中剂量组肝脏和肾脏未见明显病理改变。2.大黄提取物和大黄总蒽醌对大鼠尿液NGAL、KIM-1水平的影响大鼠灌胃给予大黄提取物1个月后,高、低剂量组雄性动物的尿液NGAL水平可见增高,其中高剂量组与正常组比较有显着差异（P<0.05）,但雌性大鼠尿液NGAL未见明显影响。雌雄合并的数据显示,低剂量组和高剂量组尿中NGAL水平分别较正常组提高22.78%和51.53%。其中,二个剂量水平对雄性动物尿液NGAL升高作用较雌性动物强。大黄高剂量组雌、雄大鼠的尿液KIM-1水平均显着降低（与正常组比较p<0.01）,但认为无毒理学意义。大鼠灌胃给予大黄总蒽醌10天后,各剂量组雌、雄动物的尿液NGAL水平均可见增高,可能与各剂量组的总蒽醌用药剂量均较大有关。KIM-1水平未见有毒理学意义的变化。3.大黄提取物和大黄总蒽醌对肾脏Clusterin、OAT1、OAT2mRNA表达的影响大黄提取物灌胃给药1个月,高剂量组肾脏组织的Clusterin mRNA表达较正常组明显下降（p<0.01）,其中雄性、雌性动物分别较正常组下降33%和19%。低剂量组肾脏组织的Clusterin mRNA表达无明显变化。大黄低剂量组雄性动物肾脏组织的OAT1 mRNA和OAT3 mRNA表达较正常组分别上调47%和62%。高剂量组雄性动物的OAT3 mRNA较正常组上调38%。大黄各剂量组给药后,雌性动物肾脏组织OATl mRNA、OAT3 mRNA表达无明显变化。大黄总蒽醌灌胃给药10天,中、高剂量组雌性大鼠的肾脏ClusterinmRNA表达较正常组下降290%和26%。中、高剂量组雌性和雄性动物肾脏组织的OAT1 mRNA分别较对照组下调21%、42%、43%、70%。高剂量组雌性动物肾脏OAT3 mRNA表达较正常组下调44%。4.大黄总蒽醌对对氨基马尿酸清除率的影响大黄总蒽醌5g/kg灌胃给药10天后,进行PAH清除实验。结果显示,给药组雌、雄动物各时间点血浆中PAH浓度均较对照组有所降低。雄性动物尿液中的PAH含量在给予PAH后前20min较对照组降低;雌性动物20～40 min和40-60min尿中PAH含量较对照组偏高。大黄葱醌组20-40min和40-60min PAH清除率均较对照组降低。结果提示,大黄蒽醌5 g/kg灌胃给药10天后对大鼠肾脏阴离子转运体产生抑制作用,从而使PAH清除率下降,可能造成阴离子物质在肾脏中蓄积。结论:大黄以及大黄总蒽醌低、中剂量组未见明显肝、肾毒性。大黄提取物高剂量组（16 g/kg）及大黄总蒽醌高剂量组（5 g/kg）可造成肾脏轻度损伤。二者在本实验条件下对肝脏均未见明显的毒性作用。传统的肾脏功能检测指标BUN和CRE未能反应大黄和大黄蒽醌高剂量引起的肾脏损伤,增加尿液NGAL分析可能提高其检出的客观性。丛集素（Clusterin）是近年来新发现的抗细胞凋亡因子,对肾细胞起到保护作用。大黄和大黄蒽醌高剂量均可下调肾脏组织的ClusterinmRNA表达,有可能抑制机体的抗凋亡能力和降低对肾脏的保护作用,从而使得肾脏损伤风险增大。大黄蒽醌高剂量可降低肾脏组织的OAT1和OAT3 mRNA表达,降低PAH的清除率,提示大黄蒽醌剂量过高时引起的肾脏毒性可能与其抑制有机阴离子转运子的功能,导致有害的物质在肾脏中蓄积有关。
陈嘉兴[3]（2017）在《镉对内质网应激和Nrf2信号通路的影响及其调控机制研究》文中提出研究背景及目的镉作为重要的生产性毒物和环境污染物,主要引起慢性肾损伤,而氧化应激被认为是镉致肾氧化损伤的重要机制。不少研究表明,镉可诱导机体产生过量ROS,使氧化/抗氧化系统失衡,最终导致各系统氧化损伤。镉可通过以下途径对肾脏产生氧化损伤:（1）降低机体抗氧化能力。镉可以与超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽还原酶（GSSG-R）的巯基结合,与谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）中的硒（Se）形成Cd-Se复合物,并能降低内源性抗氧化物谷胱甘肽（GSH）的水平,从而使这些酶的抗氧化活力降低或丧失。（2）诱导机体产生过量自由基,使细胞氧化/抗氧化水平失衡。在细胞呼吸过程中,镉可以损伤线粒体,协同铜和铁离子产生氧自由基;2价镉离子与DNA结合蛋白“锌指”结构中的锌离子发生置换,产生自由基;镉也可以通过活化血红素氧化酶、黄嘌呤氧化酶使机体产生过量的超氧自由基。（3）镉可以引起炎症反应,活化的炎症细胞可以释放多种细胞因子,从而对机体产生氧化损伤。镉通过上述途径产生的氧自由基,可引起细胞DNA氧化损伤,进而导致细胞凋亡。内质网是细胞内重要亚细胞器之一,其主要功能是使蛋白质合成和被修饰与加工后,正确折叠、组装和运输。当细胞受到体内外氧化应激后,内质网将产生未折叠蛋白/错误折叠蛋白积聚,诱发内质网发生不同程度的内质网应激（Endoplasmic reticulum stress,ERS）。最近有报道认为,镉诱导细胞ROS的生成可触发ERS反应。但镉是如何通过ROS诱导肾细胞发生内质网应激,其机制仍需深入探讨。转录因子NF-E2相关因子2（Nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2）信号通路是细胞抗氧化应激的中枢调节者,可以有效清除自由基、对抗致癌中间物、参与抗氧化蛋白酶的表达与调控,在细胞介导的抗氧化应激防御反应中具有重要的作用。在镉诱导机体产生过量自由基而导致氧化损伤的过程中,过量自由基可触发细胞Nrf2信号通路介导的抗氧化机制以及抑制细胞的炎症通路的启动,可以有效清除自由基、促进DNA损伤修复、对抗致癌中间物、参与抗氧化蛋白酶及Ⅱ相代谢酶基因的表达与调控,在镉暴露导致的肾脏损伤中具有重要的拮抗作用。可是,在镉毒性作用下,Nrf2信号通路的具体调控机制仍需进一步研究。近年来,有研究提出,Nrf2信号通路可被未折叠蛋白反应（Unfolded protein response,UPR）激活,Nrf2作为蛋白激酶样内质网激酶（PKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK）的底物可被PERK磷酸化,从而实现跨核膜转运并与抗氧化反应元件（Antioxidant response element,ARE）结合,启动Nrf2-ARE信号通路。但研究在镉致人肾细胞毒性作用中ERS和Nrf2之间的相互调控机制却报道甚少。目前,关于镉对ERS和Nrf2信号通路的影响及其调控作用研究基本上都是基于动物和细胞的研究,而通过工人的研究来探讨镉对职业作业工人ERS和Nrf2信号通路的影响,国内外尚未见报道。因此,本研究先选择职业镉暴露工人,观察镉对工人肾功能损伤、氧化应激、ERS和Nrf2的影响;再通过建立HEK细胞镉中毒模型,检测细胞存活率、氧化应激、ERS和Nrf2相关基因与蛋白表达的变化,以揭示镉对氧化损伤、ERS与Nrf2影响的分子毒理学机制;最后应用ERS、Nrf2的诱导剂与抑制剂,从正反两方面来探讨镉毒作用过程中ERS和Nrf2信号通路的相互调控机制,从而为深入研究镉毒作用机制以及镉中毒的防治提供实验证据。方法1实验方法1.1人群实验方法1.1.1样品的采集与处理选择34名职业镉作业工人,按《工作场所有害物质监测方法》对工人进行尿、血样的采集,样品收集后,贴上受检人员姓名、编号、日期等标签,放置于4℃的冰箱内立即送检,-20℃冰箱保存待检。1.1.2指标的测定应用石墨炉原子吸收法对尿、血镉进行检测;采用羟胺法、酶促反应法和硫代巴比妥酸比色法测定氧化应激指标;采用胶乳增强免疫比浊法和可见分光光度计比色法检测尿β2-微球蛋白（β2-MG）含量和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）活力、尿肌酐;采用全自动生化鉴定仪对尿白蛋白（ALB）含量、血尿酸和血尿素氮指标进行检测;采用酶联免疫吸附法对8-OHd G、PERK和Nrf2含量进行测定。1.2细胞实验方法1.2.1实验分组设计1.2.1.1对照组:加入等体积无Cd Cl2的10%DMEM培养基。1.2.1.2氯化镉（Cd Cl2）单独作用组:用浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L的Cd Cl2溶液染毒HEK细胞24h、48h和72h。。1.2.1.3 ERS增强剂杆菌肽预处理组:应用0.5 mmol/L杆菌肽预处理12h后,加入浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L的Cd Cl2溶液染毒细胞24h、48h和72h。1.2.1.4 ERS阻滞剂牛磺脱氧胆酸（TUDCA）预处理组:用50μmol/L TUDCA预处理12h后,加入浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L的Cd Cl2溶液染毒细胞24h、48h和72h。1.2.1.5 Nrf2诱导剂叔丁基对苯二酚（t BHQ）预处理组:用50μmol/L t BHQ预处理12h后,加入浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L的Cd Cl2溶液染毒细胞24h、48h和72h。1.2.1.6 Nrf2抑制剂木犀草素（Luteolin）预处理组:用10μmol/L Luteolin预处理12h后,加入浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L的Cd Cl2溶液染毒24h、48h和72h。1.2.2 HEK细胞增殖活性测定以浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L的Cd Cl2溶液染毒HEK细胞24h、48h和72h后,用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞的增殖活性情况。1.2.3 HEK细胞氧化应激水平测定以浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L的Cd Cl2溶液染毒HEK细胞24h、48h和72h后,测定HEK细胞超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、丙二醛（MDA）与8-羟基脱氧鸟苷（8-OHd G）含量反映细胞氧化应激水平。1.2.4 HEK细胞基因表达测定将细胞接种于6cm培养皿中,按1.2.1实验分组处理细胞,用RNAiso Plus试剂提取细胞总RNA,采用q RT-PCR法检测各组细胞内ERS与Nrf2信号通路相关基因的表达。1.2.5 HEK细胞蛋白翻译测定将细胞接种于10cm培养皿中,按1.2.1实验分组处理细胞,按Nuc Buster TM Protein Extraction Kit试剂盒说明书提取浆蛋白和核蛋白,蛋白定量后用Western blotting技术检测细胞内Bip、PERK和Nrf2蛋白的翻译水平。2统计分析采用SPSS 20.0软件进行统计分析。计量资料经正态性检验服从正态分布者,以（?）±s描述。满足正态性分布且方差齐的两组之间差异的比较用两组独立样本的t检验,多组均数间显着性差异检验采用单因素方差分析,组间两两比较用LSD检验法,检验水准α=0.05。结果1镉对工人氧化应激、ERS与Nrf2的影响1.1工人尿、血镉含量的分析在工人没有慢性轻度镉中毒的前提下,女工的尿镉含量水平显着高于男工（P<0.05）;随年龄的增长,3057岁年龄阶段的工人血镉含量水平有逐渐下降趋势;工龄超过10年的工人尿镉含量有所增高,说明暴露在镉作业环境的时间越长,镉在体内蓄积得越多,因此尿液中镉含量较高。年龄、工龄两因素分别与尿镉、血镉之间均不存在相关性,差异均无统计学意义（P>0.05）。1.2镉对工人肾功能损伤的影响在各尿、血镉水平条件下,工人尿β2-MG、ALB含量、NAG活力与血尿酸、尿素氮含量均无统计学意义的改变（P>0.05）,表明在各尿、血镉水平条件下,镉没有引起工人肾功能损伤的改变。1.3镉对工人氧化应激的影响较小于3μg/L和大于5μg/L血镉水平,在35μg/L血镉水平条件下,工人体内抗氧化酶SOD与GSH-Px活性显着地增高（P<0.05）,而脂质过氧化产物MDA与DNA氧化修饰产物8-OHd G的含量明显地降低（P<0.05）。1.4镉对工人ERS和Nrf2的影响与小于3μg/L和大于5μg/L血镉水平比较,在35μg/L血镉水平条件下,PERK和Nrf2蛋白含量显着地升高（P<0.05）。说明在35μg/L血镉水平条件下,镉可诱导工人ERS反应与Nrf2转录因子的表达。1.5不同性别对工人肾功能损伤的影响与男工比较,女工尿β2-MG、ALB、NAG以及血尿酸、尿素氮均无统计学意义的改变（P>0.05）。说明性别的差异对肾功能损伤没有影响。1.6不同性别对工人氧化应激的影响男女工人体内抗氧化酶SOD和GSH-Px活力水平无统计学意义的变化（P>0.05）。体内脂质过氧化产物MDA与DNA氧化修饰产物8-OHd G含量,男女之间也无差异（P>0.05）。表明镉在男女工人体内蓄积虽有不同,但并没有引起氧化应激反应。1.7不同性别对工人ERS和Nrf2的影响工人体内PERK蛋白与Nrf2蛋白含量在不同性别之间没有统计学意义的改变（P>0.05）。表明性别对ERS反应与Nrf2没有影响。2镉对HEK细胞ERS与Nrf2信号通路的影响2.1镉对HEK细胞增殖活性的影响在2.520.0μmol/L剂量条件下作用24、48与72h,随着染镉浓度的增高与作用时间的延长,HEK细胞相对存活率逐渐降低。表明HEK细胞的增殖活性受镉的抑制。2.2镉对HEK细胞氧化应激的影响镉在2.520.0μmol/L剂量条件下作用24、48与72h,随着染镉浓度的增加与作用时间的延长,HEK细胞脂质过氧化产物MDA与DNA氧化修饰产物8-OHd G含量有逐渐升高趋势,但抗氧化酶SOD和GSH-Px活性呈逐渐降低趋势。说明镉诱导HEK细胞氧化损伤产物的形成,同时也抑制抗氧化酶活性,导致氧化损伤的加重,这可能与其抑制HEK细胞增殖活性有关。2.3镉对HEK细胞ERS的影响在镉毒性作用下,HEK细胞Bip、PERK m RNA与蛋白、ATF4 m RNA表达有不同程度的变化,且镉在10.0、20μmol/L剂量条件下作用72h,可显着上调Bip、PERK m RNA与蛋白、ATF4 m RNA的表达（P<0.05）。2.4镉对HEK细胞Nrf2信号通路的影响镉在2.520.0μmol/L条件下作用48h与72h,Nrf2 m RNA与蛋白表达随染毒剂量增加而逐渐上升。故随剂量增高,镉触发ERS反应增强的同时,也诱导了Nrf2 m RNA与蛋白表达的上调。此外,镉在20.0μmol/L条件下作用48h,可显着上调Nrf2 m RNA与蛋白及其介导的下游Ⅱ相解毒酶基因的表达,说明镉可诱导Nrf2信号通路介导的Ⅱ相解毒酶基因表达的上调。3 ERS与Nrf2信号通路在镉致HEK细胞氧化损伤中的相互调控作用3.1镉诱导HEK细胞ERS对Nrf2信号通路的调控作用3.1.1 ERS增强对染镉HEK细胞ERS和Nrf2相关基因和蛋白表达影响经杆菌肽预处理后,镉在2.520.0μmol/L剂量条件下作用24h、48h与72h,随染毒剂量增加与作用时间延长,Nrf2表达随ERS相关分子表达总体上有逐渐上升趋势,其中,与同组对照组比较,杆菌肽+各剂量Cd Cl2组相关基因和蛋白表达水平多上调;与相同剂量单染镉组比较,杆菌肽+各剂量Cd Cl2组Bip、PERK、Nrf2 m RNA和蛋白表达均显着升高（P<0.05）。故ERS的增强可诱导Nrf2表达上调。3.1.2 ERS阻滞对染镉HEK细胞ERS和Nrf2相关基因和蛋白表达影响经TUDCA预处理后,镉在2.520.0μmol/L剂量条件下作用24h、48h与72h,随染毒剂量增加与作用时间延长,Nrf2表达随ERS相关分子表达总体上有逐渐升高趋势,其中,与同组对照组比较,TUDCA+各剂量Cd Cl2组相关基因和蛋白表达水平均升高;与相同剂量单染镉组比较,TUDCA+各剂量Cd Cl2组Bip、PERK、Nrf2 m RNA和蛋白表达均显着下调（P<0.05）。故ERS的抑制可诱导Nrf2表达下调。3.2 Nrf2对镉诱导HEK细胞ERS的反馈调节作用3.2.1 Nrf2诱导对染镉HEK细胞ERS和Nrf2相关基因和蛋白表达影响经t BHQ预处理后,镉在2.520.0μmol/L剂量条件下作用24h、48h与72h,随染毒剂量增加与作用时间延长,Nrf2表达和ERS相关分子表达总体上有逐渐上升趋势,其中,与同组对照组比较,t BHQ+各剂量Cd Cl2组相关基因和蛋白表达水平均有不同程度的升高;与相同剂量单染镉组比较,t BHQ+镉在2.520.0μmol/L剂量条件下作用24h,Nrf2浆蛋白表达明显上调（P<0.05）,浆核比无显着改变,但Bip、PERK m RNA和蛋白表达水平有所上升。说明t BHQ可上调Nrf2 m RNA和蛋白表达,而下调Bip、PERK m RNA和蛋白表达。故在一定程度上,经PERK-Nrf2信号途径介导的Nrf2信号通路的激活可缓解ERS反应。3.2.2 Nrf2抑制对染镉HEK细胞ERS和Nrf2相关基因和蛋白表达影响经Luteolin预处理后,镉在2.520.0μmol/L剂量条件下作用24h、48h与72h,随染毒剂量增加与作用时间延长,Nrf2表达和ERS相关分子表达总体上有逐渐上升趋势。其中,与同组对照组比较,Luteolin+各剂量Cd Cl2组Nrf2、Bip、PERK基因和蛋白表达水平均有不同程度的升高,而Luteolin+镉在2.520.0μmol/L剂量条件下作用48h与72h,浆核比显着上升（P<0.05）;与相同剂量单染镉组比较,Luteolin+各剂量Cd Cl2组Nrf2、PERK基因和蛋白表达水平有所下降,但Bip基因和蛋白表达有所上升。表明Luteolin抑制PERK介导的Nrf2后,可引起ERS标志性分子Bip的过表达。结论1在没有慢性轻度镉中毒的前提下,镉未引起工人肾功能损伤的改变,但较小于3μg/L和大于5μg/L的血镉浓度,在35μg/L血镉水平条件下,镉触发了工人内质网应激反应,并通过激活PERK介导的Nrf2转录因子,诱导其下游抗氧化酶活性的升高,从而抑制了氧化损伤产物的生成,最终起到抗氧化作用;虽然镉在女工体内蓄积水平较高,但未引起肾功能、氧化应激、ERS与Nrf2的改变。2镉在一定剂量条件下作用一定时间,可诱导HEK细胞氧化损伤产物的生成,并抑制抗氧化酶活性,两者共同作用导致细胞氧化损伤的加重,这可能与其抑制HEK细胞增殖活性有关;在镉毒作用过程中,HEK细胞可通过PERK-Nrf2信号途径激活Nrf2,上调其下游Ⅱ相解毒酶基因的表达;在应用杆菌肽、TUDCA使ERS增强与阻滞后,ERS可正向调节Nrf2的表达;而在应用t BHQ、Luteolin诱导与抑制Nrf2表达后,Nrf2可反馈性地调节ERS反应的强度。3本研究通过开展镉暴露的分子流行病学和分子毒理学研究,揭示了镉引起作业工人和HEK细胞氧化应激时,对ERS和Nrf2信号通路的作用及其调控机制,不仅丰富了镉的毒理学机制,而且为镉职业中毒的防治提供了学术依据。
汤柳英[4]（2014）在《环境镉暴露人群尿液中小分子代谢产物表征差异研究》文中进行了进一步梳理环境镉污染对机体健康损害研究一直是近几十年来公共卫生领域研究的热点问题。资料显示，镉为已知的最易在体内蓄积的毒物之一，长期镉暴露与肾脏损伤、骨骼损害、心血管疾病等存在正相关关系，镉暴露是众多损害的危险因素，其导致患者死亡率增加，尤以女性更甚，肾损害是镉暴露引起的最早期关键效应。在镉的健康损害效应研究中，国际上将尿镉作为公认的内暴露指标以反映体内镉负荷水平，尿β2-MG、NAG等效应性生物标志物作为早期肾损伤监测指标，被广泛应用，是镉中毒人群临床诊断和治疗的重要参考依据。人们对于镉的生理代谢过程仍知之甚少，对镉的健康危害的机理仍有许多未明之处。本研究拟采用代谢组学法，探索环境镉长期暴露人群尿中显着变化的小分子代谢产物，从代谢途径角度寻找环境镉暴露对机体健康损害的证据，为进一步寻找环境镉暴露健康损害相关的生物标志物提供线索。研究目的探索环境镉长期暴露人群尿中显着变化的小分子代谢产物，为寻找环境镉暴露健康损害相关的生物标志物提供线索。研究方法1.流行病学调查1.1调查对象根据历史资料和研究目的，选择某环境高镉矿区作为环境镉暴露区，选择无明确重金属污染史，与暴露区经济水平相当、居民生活条件和生活习惯相似的地区作为对照区进行现场调查。选择本地居住时间15年以上，以居民家中自产大米和蔬菜为主要食物来源的45-70岁女性为调查对象，排除肝肾疾病及慢性代谢性等疾病。1.2样本的采集、运输及保存大米和蔬菜的采集、运输及保存采集调查对象当季家中自种自食大米和叶类蔬菜各一份，统一编号并记录；统一将收集的大米和新鲜蔬菜迅速送至实验室，分析前储存于-4℃冷库。尿样的收集、运输及保存收集调查对象空腹晨尿贮存于冷藏箱中，迅速送至实验室，分装至冻存管用于相关分析；尿镉、肌酐、β2-MG和NAG检测工作在样品收集后8h内完成；进行HPLC-Q/TOF检测的尿样储存于-80℃低温冰箱中。1.3检测指标及方法外暴露指标以大米和蔬菜镉含量作为外暴露指标，采用ICP-MS进行检测。内暴露指标以尿镉作为内暴露指标，采用ICP-MS进行检测。肾损伤生物标志物以尿肌酐、NAG和β2-MG作为镉暴露相关的肾损伤生物标志物，采用苦味酸法测定尿中肌酐含量，采用免疫比浊法检测尿中β2-MG和NAG的含量。2.尿液代谢组学分析2.1代谢组学分析技术平台样本前处理尿样室温下解冻后涡旋2min，移取100μL加入配置内标溶液，充分混合后离心10min，移取上清液后再次离心，将二次离心获得的上清液上机分析。液相色谱条件采用C18反相色谱柱，柱温保持在50℃，一次进样量为5μL；流动相A：纯水+0.1%甲酸，B：甲醇+0.1%甲酸，流速0.4mL/min，执行梯度洗脱程序。质谱条件电离源：ESI，毛细管电压：3500V，干燥气温度：350℃，流速：10.0L/min-1，雾化压力：30psi，质荷比（m/z）检测范围：501000。2.2代谢组学数据处理平台采用SPSS13.0进行秩和检验和ROC曲线绘制等；采用MPP12.1进行色谱峰的识别和前处理；运用SIMCA-P13.0进行PCA和OPLS-DA分析，筛选VIP值较大的小分子代谢产物；通过数据库，对筛选的代谢产物进行鉴定。3.质量控制现场调查人员经过统一培训，严格按照纳入排除标准选择调查对象；尿样、大米和蔬菜在运输过程中保持冷链；各项指标检测均由实验室相关专业人员承担，测定前调试仪器稳定性，样品进样顺序随机，样品间穿插空白样和质控样，要求质控样中内标物丰度及保留时间RSD小于10%。结果1.流行病学资料1.1人口学资料根据研究目的和纳入排除标准，本研究以60名女性为调查对象，暴露组与对照组各30人，年龄分别为55.3±6.99岁和59.7±7.52岁。1.2调查对象外暴露水平分析暴露组和对照组人群食用自产大米各30份，蔬菜各30份，与对照组相比，暴露组米镉和菜镉含量增高，差异均具有统计学意义（P <0.001）。1.3调查对象内暴露水平对照组和暴露组人群尿镉含量中位数分别为1.95μg/g.Cr和8.33μg/g.Cr，分析发现，暴露组人群尿镉含量高于对照组，差异具有统计学意义（P <0.001）。1.4调查对象肾损伤相关生物标志物水平对照组与暴露组人群尿肌酐中位数分别为84.38mg/dL和85.25mg/dL，其差异无统计学意义（P>0.05）；对照组与暴露组人群尿NAG含量中位数分别为5.50U/g.Cr和6.18U/g.Cr，其差别无统计学意义（P>0.05）；对照组与暴露组人群尿β2-MG含量中位数分别为0.04mg/g.Cr和0.07mg/g.Cr，其差别无统计学意义（P>0.05）。提示与对照组人群相比，本研究中环境镉暴露组人群未见肾损害。2.代谢组学分析2.1检测系统的稳定性和精密度正离子模式（ESI+）下，QC样中内标物丰度值和保留时间的RSD分别为5.13%和0.06%，负离子模式（ESI-）下分别为2.00%和0.06%。提示该检测系统的稳定性和精密度符合代谢组学分析要求。2.2模式识别通过HPLC-Q/TOF检测出两组人群尿液中有效代谢物共2351个；经非参数检验，与对照组相比，暴露组人群尿液中有139个代谢物发生变化（P<0.05）；将这139个代谢物用于模式识别分析，建立PCA和OPLS-DA模型，发现暴露组和对照组人群尿液呈现不同的代谢轮廓，建立的OPLS-DA模型能够解释两组人群尿液中全部变异的96.7%，模型对未知样本的判别准确率为95.3%，说明建立模型效果良好。结果表明暴露组人群尿液中存在的某些小分子代谢产物，表现出与对照组不同的特征。2.3镉暴露引起变化的代谢产物分析采用VIP值、z值等方法筛选了9个具有显着性差异的小分子代谢产物，它们在暴露组人群尿液中均呈现上调趋势，其AUC值为0.658-0.714，表明通过观察这些代谢产物的变化能够较好地将环境镉暴露组与对照组人群区分开来。它们可望作为环境镉暴露相关的特征性代谢物提供重要线索。这9个代谢产物主要为核苷类化合物、脂类化合物和氨基酸类化合物等。结论1、通过HPLC-Q/TOF技术对环境镉暴露人群尿液代谢产物进行分析，鉴定出9个有显着变化的小分子代谢产物，它们在暴露组人群尿液中均呈现上调趋势。这9个代谢物主要与氨基酸代谢、脂类代谢、核苷酸代谢有关；2、与经典的镉暴露肾损伤早期生物标志物相比，代谢组学分析能够更早的发现环境镉暴露对机体作用的微观变化和生理生化作用，本研究结果对深入探讨镉损害机制及进一步确认其作为生物标志物提供了重要线索。
王文娟[5]（2006）在《当归拈痛丸抗痛风的实验研究》文中研究指明目的：考察当归拈痛丸对高尿酸血症模型动物的影响及其抗炎、镇痛、利尿的作用。 方法：通过采用腹腔注射300mg／kg氧嗪酸钾盐造成小鼠高尿酸血症。灌胃腺嘌呤（200mg／kg）和乙胺丁醇（250mg／kg）造成大鼠高尿酸血症。测定该药对血清尿酸、黄嘌呤氧化酶、尿素氮、肌酐的影响。通过采用尿酸盐结晶（MSU）致家兔急性关节炎模型，测定该药对急性痛风性关节炎关节液中IL-1β、IL-8和TNF-α的含量；以及关节组织中6-K-PGF1α的含量的影响。同时采用MSU诱导的大鼠急性足肿胀模型考察该药对炎性反应的影响。另外采用扭体法、热痛阈测定法分别测定给药后小鼠的扭体次数和热痛阈潜伏，观察当归拈痛丸对小鼠痛反应的影响。采用排尿实验，测定尿量及尿pH值，考察当归拈痛丸的利尿作用。 结果：当归拈痛丸能降低血尿酸、尿素氮、肌酐的及黄嘌呤氧化酶的活性：能减轻肾组织病理变化。当归拈痛丸能降低关节液中IL-1β、IL-8和TNF-α的含量；以及关节组织中6-K-PGF1α的含量；当归拈痛丸能较为显着的减轻大鼠足肿胀程度；减少扭体次数，同时对小鼠痛阈潜伏期亦有一定的影响。当归拈痛丸能显着的增加尿量，但尿pH值变化不大。 结论：当归拈痛丸在降低血尿酸，控制急性痛风性关节炎发作，预防痛风肾有较好的作用，同时具有抗炎、镇痛、利尿等作用。
张德芹[6]（2005）在《芪蓝糖脂宁胶囊治疗实验性糖尿病合并高脂血症的药效学研究及机理探讨》文中研究表明芪蓝糖脂宁胶囊是针对糖尿病合并高脂血症的病因病机创制的科研处方。本课题以研究探索治疗糖尿病合并高脂血症的有效中药复方制剂为目的,从文献研究、理论研究、实验研究三方面对芪蓝糖脂宁胶囊治疗糖尿病合并高脂血症进行了全面系统的研究,从而为研发安全、有效治疗糖尿病合并高脂血症的中成药新药奠定良好的工作基础。 1.文献研究:全面查阅整理了近 10 年来国内外糖尿病、高脂血症的相关研究文献资料,对目前西医、中医对于糖尿病、高脂血症发病机理、治疗用药研究概况进行了系统的总结和综述,掌握了相关项目科研前沿动态。 2.理论研究:在中医基础理论指导下,紧密结合目前临床糖尿病合并高脂血症治疗现状,首次较系统地论述了“糖尿病合并高脂血症从虚、痰、瘀、毒论治”的治疗理论,认为糖尿病合并高脂血症的发生,主要由于气阴不足,痰浊瘀血胶结,蕴积日久成毒所致,其中气阴不足为本,痰瘀毒蕴积为标,故以扶正祛邪为基本治疗原则,以益气养阴,化痰降浊,祛瘀解毒为治疗大法,对于阐发糖尿病合并高脂血症中医病因病机,寻找积极有效的治疗方法具有重要意义。 3.实验研究 3.1 基础药效:成功地复制了实验性糖尿病合并高脂血症大鼠模型,在此基础上,观察了芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠糖、脂代谢以及胰腺、肝脏病理形态学改变的影响。 糖代谢指标血清生化学检测结果表明,芪蓝糖脂宁胶囊中、低剂量组能明显降低空腹血糖水平,其降糖作用虽较阳性药二甲双胍对照组显效稍慢,但随着用药周期的延长,血糖水平呈稳定的下降趋势,且在保持大鼠体重及调整大鼠活动状态上均较二甲双胍组为优。 脂代谢指标血清生化学检测结果显示,芪蓝糖脂宁胶囊高、中、低剂量组均具有明显降低血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白-胆固醇含量,升高高密度脂蛋白-胆固醇含量的作用,其调脂总体疗效与阳性药脂必妥胶囊对照组相比无显着性差异。 大鼠胰腺、肝脏组织 HE 染色结果显示,芪蓝糖脂宁胶囊具有改善胰腺、肝脏病理损害的作用。以上初步药效学研究结果证明,芪蓝糖脂宁胶囊治疗糖尿病合并高脂血症有效,组方合理。 3.2 机理探讨:在基础药效实验基础上,进行了芪蓝糖脂宁胶囊作用机理探讨。 3.2.1 采用比色法分析了芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠糖化血红蛋白含量的影响。结果显示,芪蓝糖脂宁胶囊高、中、低剂量组能显着降低4芪蓝糖脂宁胶囊治疗实验性糖尿病合并高脂血症的药效学研究及机理探讨糖化血红蛋白含量,且各组大鼠糖化血红蛋白含量与空腹血糖水平成正相关,表明空腹血糖水平越高,血红蛋白发生糖化的程度越重。3.2.2 采用放射免疫法分析了芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠血清胰岛素、C 肽、血浆胰高血糖素含量的影响。结果显示,芪蓝糖脂宁胶囊可使血清胰岛素、C 肽含量明显降低,提示芪蓝糖脂宁胶囊改善糖代谢并不通过促进胰岛素的释放,其作用机制有待进一步研究。另一方面,研究结果显示芪蓝糖脂宁胶囊中、低剂量组血浆胰高血糖素较模型组明显降低,提示芪蓝糖脂宁胶囊可通过调整胰高血糖素的分泌起到改善糖代谢的作用。3.2.3 采用比色法分析了芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠血清及肝脏游离脂肪酸含量的影响。结果显示,芪蓝糖脂宁胶囊高、中、低剂量组均可使血清及肝组织中游离脂肪酸含量明显降低,提示芪蓝糖脂宁胶囊通过减低脂毒性对机体的损害,达到改善胰岛素抵抗及糖、脂代谢异常的作用。3.2.4 采用放射免疫法分析了芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠血浆 TXB2、6-Keto-PGF1α含量的影响。结果显示,芪蓝糖脂宁胶囊能显着降低血浆 TXB2含量,升高 6-Keto-PGF1α含量,使 TXB2/6-Keto-PGF1α比值下降,说明芪蓝糖脂宁胶囊可通过影响 TXB2与 6-Keto-PGF1α这些参与周围循环的细胞因子,调节由TXB2/6-Keto-PGF1α平衡失调引起的血小板聚集、血管痉挛收缩、血栓形成和微循环障碍等改变,促进血液运行,改善微循环,恢复组织的正常功能状态,进而达到治疗糖尿病合并高脂血症痰瘀内阻的作用。3.2.5采用流式细胞术分析了芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠肝细胞凋亡及其相关调控基因Bax、Bcl-2的蛋白表达的影响。结果显示,芪蓝糖脂宁胶囊可使肝细胞凋亡指数明显下降,Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达上调,表明芪蓝糖脂宁胶囊主要是通过调节凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白表达,抑制肝细胞过度凋亡的产生,从而恢复肝细胞的正常功能,发挥调节糖、脂代谢的作用。3.2.6采用免疫组化法分析了芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠胰岛β细胞、α细胞病理形态的影响。结果显示,芪蓝糖脂宁胶囊可使胰岛素阳性反应β细胞数量增多,阳性反应较模型组明显增强,胰高血糖素阳性反应α细胞数量减少,阳性反应较模型组明显减弱。提示芪蓝糖脂宁胶囊可通过修复STZ造成的胰岛β细胞损伤,调节胰岛α细胞分泌激素水平来发挥降血糖作用。3.2.7 采用 RT-PCR 产物半定量技术分析了芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠肝组织胰岛素受体 mRNA 表达的影响。结果显示,芪蓝糖脂宁胶囊可使肝组
洪峰[7]（2003）在《镉、砷对肾脏的联合毒性研究》文中研究指明目的 本研究通过流行病学调查和动物实验，探讨镉、砷对环境与职业镉、 砷接触人群以及镉、砷染毒动物肾脏损伤的联合毒作用特点，进行剂量-效应关 系分析，同时对镉、砷接触人群肾功能损害的基准剂量及其可信限下限（BMD 和BMDL，以确定毒作用的阈剂量或浓度）进行估算，为制订镉、砷联合作用 卫生标准、环境质量标准以及预防其对人体健康的损害提供毒理学依据。 方法 人群研究：选择砷污染地区人群、镉污染地区人群以及职业镉、砷 接触人群为调查对象；动物研究：给大鼠饮用水染毒，根据析因实验设计染毒剂 量（用不同浓度的镉、砷进行剂量组合）。接触标志物为尿镉（UCd）、尿砷（UAs）， 效应标志物有反映肾小管损害的尿β 2-微球蛋白（Uβ 2-MG）和尿N-乙酰-β-D-氨 基葡萄糖苷酶（UNAG）；反映肾小球损害的尿白蛋白（UALB）；以及尿金属硫 蛋白（UMT），并对大鼠肾组织金属硫蛋白-1（MT-1）、金属硫蛋白-2（MT-2） 基因的表达进行了探讨。 结果 人群资料显示不同污染地区调查对象的体内镉、砷负荷与环境镉、 砷污染程度呈正相关；污染地区调查对象尿镉、尿砷水平与对照组比较差异具有 统计学意义（P<0.01）。不同污染地区调查对象的体内镉、砷负荷与肾功能异常 （尿蛋白或尿酶排泄增加）检出率间呈正相关；污染区居民Uβ 2-MG、UNAG、 UALB和UMT水平均显着高于对照区，且与镉、砷接触（尿镉、尿砷）有着明 显的剂量-效应关系。镉、无机砷（In-As，环境和职业无机砷接触）均可导致肾 小管重吸收和/或肾小球滤过功能障碍，镉主要引起肾小管的损伤，无机砷主要 引起肾小球的损伤；镉、无机砷对肾功能的联合毒性表现为相加或协同效应，具 有统计学意义（P＜0.05和P＜0.01）；镉、有机砷（Or-As，环境有机砷接触）对 肾功能的联合毒性无明显相加效应，有机砷对镉的肾毒性有一定的抑制作用。基 准剂量和敏感标志物方面，不同研究对象之间有一定差异。对于无机砷污染区接 触人群，发生肾功能损害的尿砷BMDL 值为96.12 μg/gCr，尿镉BMDL 值为 1.06μg/gCr，UALB可作为评价无机砷接触为主人群肾功能改变的敏感生物指标； 对于镉污染区接触人群，尿镉的BMDL 值为5.17μg/gCr，尿砷的BMDL 值为 175.84μg/gCr，Uβ 2-MG可作为评价镉接触为主人群肾功能改变的敏感生物指标。 镉、无机砷职业接触人群发生肾功能损害的尿镉BMDL 值为1.74μg/gCr，尿砷 I <WP=6> 复旦大学博士生毕业论文 镉、砷对肾脏的联合毒性研究 中文摘要 BMDL 值为37.45μg/gCr；UNAG 和UMT 可作为评价镉、无机砷接触职业人群 肾功能改变的敏感生物指标。动物实验表明：镉、无机砷染毒剂量与体内镉、砷 负荷（包括血液、尿液和肾组织）呈正相关，均具有统计学意义（P＜0.01），镉、 砷负荷与肾功能效应指标间有着明显的剂量-效应关系。镉、无机砷对肾功能的 联合毒性也表现为相加或协同效应，具有统计学意义（P＜0.05和P＜0.01）。尿 镉、尿砷的BMDL 值分别为1.60μg/gCr和71.63mg/gCr，尿镉BMDL 值与人群 研究的BMDL 值接近，而砷由于种属多样性和代谢多样性，大鼠尿砷的BMDL 值远远大于人群研究的BMDL 值。各剂量组大鼠肾组织MT-1、MT-2基因表达 随着染毒剂量的增加而上升，?
徐麦玲[8]（1994）在《镉与中毒性肾病的研究进展》文中提出镉与中毒性肾病的研究进展上海华山医院（２０００４０）徐麦玲慢性长期镉接触所致肾损害的转归，各家报道不一。有人认为镉致肾损害是不可逆的，即使中止接触，肾损害仍可继续发展，甚至到肾功能衰竭［１’２］。有报道中止接触镉后，肾小管蛋白尿可能不会加剧和发展到严...
赵树铭,魏明竟,黄君富,冯华芳,刘倩予,陈兆珍[9]（1992）在《镉致兔肾损害时血清和尿液中胍类化合物的变化》文中提出 胍类化合物是一类带胍基团的小分子化合物,在自然界中约有50多种,哺乳动物体内约有自然界种类的1/3。在正常情况下,哺乳动物体内胍类化合物的含量很低。50年代以来,发现在尿毒症等时可见显着增加,被认为是小分子尿毒素。其中重要的几种是,胍基丁二酸（GSA）、甲基胍
赵树铭,黄君富,刘倩予,冯华芳,陈兆珍,魏明竟[10]（1992）在《镉诱发兔肾损害时血清和尿液中胍基乙酸的变化》文中进行了进一步梳理本文采用给兔皮下注射氯化镉的方法造成肾损害模型,对照组皮下注射生理盐水,研究了血清和尿液中胍基乙酸的变化,并探讨了导致这些变化的原因及胍基乙酸作为肾小管受损的早期诊断指标的可能性。结果表明,镉处理组血清中胍基乙酸随实验时间延长有逐渐上升的趋势,4周后呈明显升高,尿液中胍基乙酸于第1周时有轻微升高,第2周后却呈非常明显的下降。
二、镉致兔肾损害时血清和尿液中胍类化合物的变化（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、镉致兔肾损害时血清和尿液中胍类化合物的变化（论文提纲范文）
（1）杜仲颗粒对妊娠期高血压疾病患者早期肾损害的干预研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述:杜仲在治疗心血管疾病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）大黄及其总蒽醌肝肾毒性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一部分 大黄提取物及总蒽醒肝肾毒性研究 |
| 1 材料 |
| 2 剂量设计 |
| 3 实验方法 |
| 4 统计分析 |
| 5 结果 |
| 6 小结与讨论 |
| 第二部分 大黄提取物及总蒽醌肝肾毒性机制初步研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 统计分析 |
| 4 结果 |
| 5 小结与讨论 |
| 结论和讨论 |
| 文献综述 |
| 1. 大黄毒性研究进展 |
| 2. 中药肾毒性研究进展 |
| 3. 中药肝毒性机制研究进展 |
| 致谢 |
| 简历 |
| 参考文献 |
（3）镉对内质网应激和Nrf2信号通路的影响及其调控机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 镉对工人氧化应激、ERS与Nrf2的作用研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 主要仪器与耗材 |
| 1.3 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 样品的采集及处理 |
| 2.2 尿、血镉的测定 |
| 2.3 尿肌酐的测定 |
| 2.4 肾功能指标的测定 |
| 2.5 氧化应激指标的测定 |
| 2.6 PERK和Nrf2蛋白含量的测定 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 工人尿、血镉含量的分析 |
| 3.2 镉对工人肾功能损伤的影响 |
| 3.3 镉对工人氧化应激的影响 |
| 3.4 镉对工人ERS和Nrf2的影响 |
| 3.5 不同性别对工人肾功能损伤的影响 |
| 3.6 不同性别对工人氧化应激的影响 |
| 3.7 不同性别对工人ERS和Nrf2的影响 |
| 第二部分 镉对HEK细胞内质网应激与Nrf2信号通路的作用研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验细胞的来源 |
| 1.2 主要仪器与耗材 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 溶液的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 人胚肾上皮细胞的传代培养 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 人胚肾上皮细胞增殖活性测定 |
| 2.4 人胚肾上皮细胞氧化应激水平的测定 |
| 2.5 8-OHdG含量的测定 |
| 2.6 qRT-PCR法测定人胚肾上皮细胞内基因的相对表达 |
| 2.7 Western blotting |
| 2.8 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 镉对HEK细胞增殖活性的影响 |
| 3.2 镉对HEK细胞氧化应激的影响 |
| 3.3 镉对HEK细胞ERS的作用研究 |
| 3.4 镉对HEK细胞Nrf2信号通路的作用研究 |
| 第三部分 内质网应激与Nrf2信号通路在镉致HEK细胞氧化损伤中的调控机制研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 主要仪器与试剂同第二部分 1.2、1.3 |
| 1.2 溶液的配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验分组 |
| 2.2 实验方法同第二部分 2.6、2.7 的qRT-PCR法、Western blotting |
| 2.3 统计分析方法同第二部分 2.8 |
| 3 结果 |
| 3.1 镉诱导HEK细胞ERS对Nrf2信号通路的调控作用研究 |
| 3.2 Nrf2信号通路对镉诱导HEK细胞ERS的反馈调节作用研究 |
| 讨论 |
| 1.镉对肾功能损伤与氧化应激的影响 |
| 2.镉对ERS的影响 |
| 3.镉对Nrf2信号通路的影响 |
| 4.在镉毒性作用下，ERS与Nrf2信号通路的调控作用 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在校期间科研成绩 |
| 附录（英文缩略词表） |
| 致谢 |
（4）环境镉暴露人群尿液中小分子代谢产物表征差异研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词汇表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 第1章 前言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 仪器和试剂 |
| 2.2 现场流行病学调查 |
| 2.3 尿液代谢组学分析 |
| 2.4 数据处理分析 |
| 2.5 质量控制及知情同意 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 流行病学资料 |
| 3.2 代谢组学分析 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 流行病学调查 |
| 4.2 代谢组学分析 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 附件 |
| 附件1 广东省居民营养与健康状况调查知情同意书 |
| 附件2 代谢组学研究中生物样品的影响因素分析与应用进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间参与科研工作情况 |
| 致谢 |
（5）当归拈痛丸抗痛风的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 理论研究 |
| 实验研究 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法与结果 |
| (一) 降低血尿酸及对痛风肾的预防和治疗 |
| 1、当归拈痛丸对高尿酸血症小鼠动物模型的影响 |
| 2、当归拈痛丸对高尿酸血症大鼠动物模型的影响 |
| (二) 对急性痛风性关节炎的影响 |
| 当归拈痛丸对尿酸盐结晶致家兔急性关节炎模型的影响 |
| (三) 对尿酸盐诱导的急性炎症的影响 |
| 当归拈痛丸对 MSU诱导的大鼠急性足肿胀模型的影响 |
| (四) 非特异性药效学研究 |
| 1、当归拈痛丸对醋酸致小鼠炎性疼痛的镇痛作用 |
| 2、当归拈痛丸对热痛反应潜伏期的影响 |
| 3、当归拈痛丸对正常大鼠的排尿的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（6）芪蓝糖脂宁胶囊治疗实验性糖尿病合并高脂血症的药效学研究及机理探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 第一部分 文献研究 |
| 综述一 糖尿病合并高脂血症现代医学研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 糖尿病合并高脂血症中医药研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述三 实验性糖尿病动物模型研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述四 实验性高脂血症动物模型研究进展 |
| 参考文献 |
| 第二部分 理论研究 糖尿病合并高脂血症从虚痰瘀毒论治理论探讨 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠糖代谢和胰腺病理形态学的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠脂代谢和肝脏病理形态学的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠血清、肝脏游离脂肪酸的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠血浆 TXB_2、6-Keto-PGF_(1α)含量的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验五 芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠肝细胞凋亡及Bax 、Bcl-2蛋白表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验六 芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠胰岛β细胞、α细胞病理形态的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验七 芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠肝组织胰岛素受体 mRNA表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验八 芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠骨骼肌胰岛素受体 mRNA表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验九 芪蓝糖脂宁胶囊对实验性糖尿病合并高脂血症大鼠骨骼肌 GluT4 mRNA 表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 附录照片 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）镉、砷对肾脏的联合毒性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 石墨炉原子吸收法直接测定尿中总砷方法的建立 |
| 1. 实验部分 |
| 2. 结果与讨论 |
| 第二部分 人群研究 |
| 第一节 砷污染地区环境流行病学研究 |
| 1. 对象与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第二节 镉污染地区环境流行病学研究 |
| 1. 对象与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三节 职业性镉、砷接触研究 |
| 1. 对象与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三部分 动物实验研究 |
| 第一节 镉、砷对大鼠肾功能联合毒性研究 |
| 1. 对象与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第二节 镉、砷联合染毒大鼠肾脏金属硫蛋白基因的表达 |
| 1. 对象与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在校期间发表文章 |
| 综述 镉、砷联合毒性研究现状 |
| 综述 无机砷的肾脏损伤作用研究进展 |
四、镉致兔肾损害时血清和尿液中胍类化合物的变化（论文参考文献）
- [1]杜仲颗粒对妊娠期高血压疾病患者早期肾损害的干预研究[D]. 宁洁. 新乡医学院, 2020(12)
- [2]大黄及其总蒽醌肝肾毒性研究[D]. 邓诺. 中国中医科学院, 2018(01)
- [3]镉对内质网应激和Nrf2信号通路的影响及其调控机制研究[D]. 陈嘉兴. 广东药科大学, 2017(02)
- [4]环境镉暴露人群尿液中小分子代谢产物表征差异研究[D]. 汤柳英. 暨南大学, 2014(03)
- [5]当归拈痛丸抗痛风的实验研究[D]. 王文娟. 陕西中医学院, 2006(02)
- [6]芪蓝糖脂宁胶囊治疗实验性糖尿病合并高脂血症的药效学研究及机理探讨[D]. 张德芹. 北京中医药大学, 2005(04)
- [7]镉、砷对肾脏的联合毒性研究[D]. 洪峰. 复旦大学, 2003(03)
- [8]镉与中毒性肾病的研究进展[J]. 徐麦玲. 中国工业医学杂志, 1994(04)
- [9]镉致兔肾损害时血清和尿液中胍类化合物的变化[J]. 赵树铭,魏明竟,黄君富,冯华芳,刘倩予,陈兆珍. 卫生毒理学杂志, 1992(04)
- [10]镉诱发兔肾损害时血清和尿液中胍基乙酸的变化[J]. 赵树铭,黄君富,刘倩予,冯华芳,陈兆珍,魏明竟. 第三军医大学学报, 1992(02)