一、硫酸镍对微量元素在大鼠体内分布的影响（论文文献综述）
王彩霞,张蕊,王爽,李瑞芬,谭心悦,古雪岩,马剑华,张莉,苏莉[1]（2021）在《纳米硒对硫酸镍诱导大鼠肾细胞凋亡的干预作用研究》文中研究说明目的探讨纳米硒（Nano-Se）对硫酸镍（NiSO4）诱导大鼠肾细胞凋亡的保护作用及机制。方法 56只清洁级8周龄雄性SD大鼠,随机分为空白对照组,NiSO4组（5.0 mg/kg·bw）,低、中、高剂量Nano-Se干预组（0.5、1.0、2.0 mg/kg·bw Nano-Se+5.0 mg/kg·bw NiSO4）,和中、高剂量Nano-Se对照组,以灌胃Nano-Se同时腹腔注射NiSO4相结合的方式连续干预14 d。苏木素-伊红（HE）染色和TUNEL染色来观察肾细胞病理和凋亡情况,Western blot检测大鼠肾GRP78、Caspase-12、Bak、Cytochrome c、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平。结果 NiSO4组肾小球出现严重淤血。与对照组比较,NiSO4组凋亡阳性细胞数量、GRP78、Caspase-12、Bak、Bcl-2、Cytochrome c、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平上调,Bcl-2蛋白表达水平下调,差异均有统计学意义（P<0.05）。与NiSO4组比较,各剂量Nano-Se干预组肾病理损伤明显减轻,高剂量干预组凋亡细胞数量明显减少;Nano-Se干预组后GRP78、Caspase-12、Bak、Cytochrome c、Caspase-3和Caspase-9的蛋白表达水平下调,Bcl-2蛋白表达上调,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论灌胃Nano-Se联合腹腔注射NiSO4同时处理14 d,可拮抗NiSO4所致的大鼠肾损伤,其机制可能与抑制内质网应激和线粒体途径的细胞凋亡有关。
赵霞[2]（2021）在《硒蛋白S调控溶酶体稳态在鸡缺硒性小脑神经元凋亡中作用机理的研究》文中提出硒（Selenium,Se）是人和动物所必需的微量元素,广泛参与到机体的众多生物学过程中,发挥多种重要的生物学功能,研究表明缺硒可引起脑组织损伤。硒蛋白S（SELS）作为内质网定位硒蛋白之一,在保护脑损伤中发挥重要作用,高表达SELS可通过减轻内质网应激和炎症损伤来减轻脑损伤,抑制SELS表达则会加重脑损伤。溶酶体作为细胞“消化中心”在维持细胞内稳态发挥关键作用,许多退行性神经疾病都存在溶酶体功能紊乱。研究发现缺硒可引起溶酶体稳定性和SELS表达降低。然而溶酶体稳态失衡是否参与缺硒性脑损伤,SELS是否调控溶酶体功能及稳态尚不清楚。基于此,提出缺硒通过降低SELS表达调控溶酶体稳态失衡引起小脑细胞凋亡的科学假设。为阐明这一假设,本研究在建立鸡缺硒性小脑损伤模型、缺硒鸡胚脑神经元模型、SELS敲低鸡胚脑神经元模型及氧化应激抑制剂N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）、CTSB抑制剂E-64及CTSD抑制剂Pepstatin A处理SELS敲低鸡胚脑神经元模型基础上,应用ICP-MS法、病理组织学观察、免疫荧光、Tunel、转录组学、RT-PCR、Western Blot及流式细胞术等方法,对金属离子稳态、病理形态学、mRNA转录组、抗氧化水平（CAT、GSH-Px、SOD、T-AOC、ROS、H2O2、LPO及MDA）、内质网应激相关指标（GRP78、IRE1、XBP1、PERK、ATF4和ATF6）、溶酶体相关指标（pH、ATP6V1A、ATP6V1B2、ATP6V1D、CTSB、CTSD及MCOLN1）及自噬相关指标（LC3-2、P62）、凋亡、凋亡相关指标（BCL2、BAX、CAS9及CAS3）等进行检测,结果表明:（1）病理组织学观察显示缺硒导致小脑颗粒层变薄,小脑白质增多,浦肯野细胞减少甚至消失、嗜酸性浦肯野细胞增多,浦肯野细胞层中神经纤维堆积缠结,颗粒层神经纤维杂乱稀少,尼氏体数量减少。免疫荧光及Tunel结果显示,缺硒导致小脑α-syn聚集及细胞凋亡。（2）金属离子检测结果显示,缺硒导致鸡小脑组织中K、Fe、Zn、B、Ni、Hg和Sb含量降低,Ca、Cr、Mo、V和Cd含量增加,揭示缺硒影响鸡小脑组织中金属离子稳态。（3）mRNA转录组分析显示,缺硒导致小脑组织中421个基因差异表达,其中171个表达上调,250个表达下调,GO及KEGG富集分析发现差异变化基因与神经功能、抗氧化、金属离子、溶酶体及凋亡等密切相关。（4）缺硒引起小脑及脑神经元SELS mRNA和蛋白表达水平降低,内质网应激相关基因GRP78、XBP1、ATF4和ATF6 mRNA表达水平,GRP78、IRE1、XBP1、PERK、ATF4和ATF6的蛋白表达水平升高,敲低SELS导致鸡胚脑神经元内质网硒蛋白SELN和DIO2的mRNA水平升高,SELT和SEP15的mRNA水平降低,同时升高GRP78、IRE1、XBP1、PERK、ATF4和ATF6的蛋白表达水平,表明SELS表达降低可引起脑神经元内质网应激。（5）缺硒导致小脑及脑神经元抗氧化酶CAT、GSH-Px和T-AOC活性减弱,ROS、H2O2、LPO及MDA含量增加,敲低SELS降低了脑神经元抗氧化酶活性,自由基及脂质过氧化产物含量增加,表明SELS表达降低导致脑神经元氧化应激。（6）缺硒抑制小脑和脑神经元溶酶体V-ATPase、CTSB及CTSD蛋白表达,MCOLN1和胞浆中CTSB及CTSD蛋白表达水平升高,SELS敲低同样引起脑神经元上述指标发生相似变化,NAC有效缓解SELS表达降低引起的溶酶体变化,表明SELS表达降低通过氧化应激引起溶酶体酸化受阻、酶活性降低、钙离子释放及溶酶体膜通透化,导致溶酶体稳态失衡。（7）缺硒引起小脑和脑神经元自噬标记物LC3-2和P62蛋白表达水平升高,SELS敲低同样诱导LC3-2和P62蛋白表达水平升高,NAC有效恢复溶酶体稳态的同时,缓解了SELS敲低引起的LC3-2和P62蛋白表达升高,表明SELS表达降低通过溶酶体功能障碍抑制自噬底物降解,引起自噬小体蓄积,自噬流抑制。（8）缺硒抑制小脑和脑神经元BCL2 mRNA及蛋白表达水平,BAX、CAS9及CAS3mRNA和蛋白表达增加,SELS敲低同样引起上述指标相似变化,流式细胞术结果显示缺硒及SELS敲低引起脑神经元凋亡细胞增多,ROS抑制剂NAC、CTSB抑制剂E-64及CTSD抑制剂Pepstatin A能缓解SELS敲低引起的细胞凋亡,表明SELS表达降低通过自噬流抑制、CTSB和CTSD泄露,引起细胞线粒体途径凋亡。综上所述,缺硒导致鸡小脑金属离子稳态失衡,细胞发生线粒体途径凋亡,诱导171个mRNA表达上调,250个mRNA表达下调,并与神经功能、抗氧化、金属离子、溶酶体及凋亡等相关。缺硒导致SELS表达水平降低,进一步研究表明,SELS表达降低引起内质网应激,促进ROS积累,导致氧化应激,引起溶酶体稳态失衡,引发自噬流抑制,最终导致细胞凋亡。上述结果表明SELS调控溶酶体稳态诱导鸡缺硒性小脑神经元凋亡,这一结果丰富了缺硒性小脑损伤的分子机制,为进一步研究提供参考。
任雨萌[3]（2021）在《超声辅助离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿中镍》文中研究说明目的镍是人体的必需微量元素,但过量镍进入人体,能抑制体内某些酶的活性而产生中毒作用,可引起迟发性变态反应、过敏性皮炎、肺癌、鼻咽癌和鼻窦癌等。镍被广泛地应用于化工、冶金、建筑等行业,易导致镍职业接触人员的身体损害。镍以粉尘,烟尘及羰基镍蒸气等形式经人体呼吸道摄入和吸收,由呼吸道进入的镍约90%经粪便排出,10%由尿液排出,因此尿镍浓度可以作为镍职业接触者的生物监测指标。我国暂未制定职业接触尿镍的生物接触限值,德国的生物参考值（Biologischer Referenzwert,BAR）为3.00μg/L。我国WS/T 44-1996《尿中镍的石墨炉原子吸收光谱测定方法》规定了尿中镍的测定方法,其最低检测浓度为1.43μg/L,检出限较高,容易受到尿液的基体成分影响,不适用于测定低浓度的尿镍,且检测方法20余年没有更新。近年来,分散液-液微萃取具有萃取效率高、操作简便、快速、重现性好等优势,成为一种环境友好的样品预处理技术。镍倾向于水合而非与离子液体结合,因此,镍离子需首先与螯合剂形成不溶于水的螯合物,在分散剂的作用下,在水相中可均匀分散且不溶解,能快速完成对目标物质的萃取。本研究旨在建立超声辅助离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿中镍的方法,实现对低浓度尿镍的测定。方法采用超声辅助离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿中镍的方法,运用单因素轮换实验确定试验的螯合剂、分散剂和萃取剂的种类和用量、萃取时间、p H的选择等条件。（1）以甲醇为分散剂,吡咯烷二硫代甲酸铵盐（APDC）为螯合剂,离子液体1-己基-3-甲基-咪唑六氟磷酸盐（[Hmim][PF6]）为萃取剂,萃取尿中镍。加入p H 9的缓冲溶液600μL,再加入560μL[Hmim][PF6]-APDC-无水甲醇混合体系溶液,用超纯水定容至10 m L后,转移至玻璃离心管中,以30℃水浴温度超声10 min后,4000 r/min离心3 min,弃去上清。由于离子液体及配合物沉淀在管底,加无水甲醇150μl以及50μl 30 g/L的维生素C基体改进剂涡旋3 min充分溶解后,取15μL直接进样,用GFAAS7000原子吸收分光光度计测定。以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制工作曲线。（2）通过单因素轮换法对分散剂、螯合剂、萃取剂的种类及用量,萃取p H,水浴温度及超声时间,石墨管种类,石墨炉程序升温条件等试验条件进行优化,确定超声辅助离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿中镍的最佳测定条件。（3）对方法学性能指标,如检出限、精密度、准确度和样品稳定性等进行实验研究与探讨。（4）将建立的方法应用于大学生志愿者尿样的测定,并使用浓度为500μg/L的镍溶液喂养SD大鼠,代谢笼收集大鼠尿液,观察大鼠尿液中镍的含量,进一步验证方法的准确度、精密度和实用性。（5）对实验过程中引入的不确定度进行评定,以判断影响结果的关键环节。结果（1）探索最佳条件,将石墨炉原子吸收分光光度仪调至最佳测定状态:波长232 nm,光谱宽度0.2 nm,灯电流12 m A,氘灯背景校正,进样量15μL,灰化温度800℃,原子化温度2500℃。（2）萃取条件:分散剂为无水甲醇,螯合剂为APDC,萃取剂为离子液体[Hmim][PF6],其用量分别为无水甲醇500μL,APDC 10 mg,离子液体60μL,p H=9,基体改进剂30g/L维生素C 50μl,30℃水浴温度超声10 min,复溶时间3 min。（3）尿镍浓度在0～10μg/L范围内与其吸光度线性关系好,线性回归方程为Y=0.0466x+0.0214,r=0.996。经前处理后,按照连续测定20次工作曲线空白管吸光度值,以其吸光度值3倍标准差对应的浓度为检出限,得到检出限为0.43μg/L。相对标准偏差在2.53%～4.82%之间,加标回收率在95.60%～103.70%之间。（4）按照研制的方法测定50份大学生志愿者的尿镍浓度范围为0.50μg/L～6.34μg/L,试验大鼠尿镍浓度范围为3.49μg/L～17.51μg/L。结论（1）建立了以甲醇为分散剂,APDC为螯合剂,离子液体[Hmim][PF6]为萃取剂的超声辅助离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿中镍的新方法,结果准确可靠,绿色环保、富集效率高、检出限低、灵敏度高。（2）建立的新方法检出限低,实现了对尿中低浓度镍的测定,该法可适用于职业接触镍人群及非职业人群尿中镍的测定。（3）研制方法的各项检测性能指标符合《职业卫生标准制定指南第5部分:生物材料中化学物质测定方法》的标准要求。（4）通过对大鼠代谢尿样和大学生志愿者尿样镍的检测,验证了方法的可行性,具有实用价值。
杨晶晶[4]（2021）在《NiSO4染毒大鼠甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏组织镍蓄积量的检测与组织功能、病理损伤的实验研究》文中指出目的:为了评价硫酸镍（Nickel Sulfate,NiSO4）染毒状态下,大鼠部分重要的解毒代谢和内分泌组织的损伤状态。本研究检测了大鼠甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏组织中的镍蓄积量,功能指标改变和相应组织的病理学变化,以探讨NiSO4对大鼠损伤的特征,及上述各组织中凋亡蛋白Caspase-3免疫组化变化。方法:1.选择24只健康性成熟SPF级雄性Wistar大鼠,体重范围为180-220 g,按体重分层随机分组,分为正常对照组和NiSO4染毒组,正常对照组（N组）,即生理盐水组,其中染毒组又分为低剂量（L组）、中剂量（M组）和高剂量（H组）三组,剂量分别为2.5 mg/kg、5 mg/kg和10 mg/kg。经腹腔注射,连续染毒40天,自由摄食及饮水,整个实验期间每日记录大鼠的饮食量、饮水量和体重值,并观察大鼠的活动情况。染毒结束次日将大鼠麻醉,腹主动脉取血,颈椎脱臼法处死大鼠,后取甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏等组织。2.取大鼠部分血清、甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏,加入浓酸高温溶解定容后,采用ICP-AES法测定血清、甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏中的Ni含量。3.取大鼠血清离心,ELASE法检测大鼠甲状腺功能（包含游离T3（FT3）和游离T4（FT4））;大鼠胰腺功能（包含胰岛素（INS）和C肽（C-P））;用生化分析仪检测大鼠肝脏功能（包含谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST））;大鼠肾脏功能（包含尿素氮（BUN）和肌酐（CREA））。4.取甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏组织用10%福尔马林固定24 h,取上述组织进行石蜡包埋,4μm厚度切片,HE染色,在高倍镜下观察上述组织的形态改变。5.组织学切片置于防脱载玻片上,Caspase-3凋亡蛋白进行免疫组化染色,观察上述组织中凋亡蛋白的表达情况。结果:1.NiSO4腹腔注射可使大鼠饮食、饮水和体重增加值减少:在染毒至第40天时,与N组相比,各染毒组大鼠的体重增加值、进食、水量均有不同程度的降低。2.大鼠血清和组织中镍浓度变化,（1）血液中镍浓度随着染毒剂量的升高出现升高趋势,但仅在H组中具有统计学意义（P<0.05）。（2）在胰腺组织中,镍浓度变化在M组和H组有明显升高（P<0.05）,在L组未出现明显镍蓄积。（3）在肝脏组织中,镍浓度变化在L组和M组中未出现明显改变,在H组中升高明显（P<0.05）。（4）大鼠肾脏中的镍浓度随着镍染毒剂量的升高出现升高趋势,在L组、M组、H组中染毒组中均出现镍蓄积（P<0.05）。但在甲状腺组织中未能检测到镍蓄积。3.大鼠组织功能变化,（1）大鼠甲状腺功能,与N组相比,实验组大鼠甲状腺功能指标FT4明显降低,FT4随着染毒剂量的升高而降低,在L组、M组和H组中均有统计学意义（P<0.05）,FT3虽然随着染毒剂量的升高出现降低趋势,但无统计学意义。（2）大鼠胰腺功能,与N组相比,实验组大鼠胰腺功能指标INS、C-P均出现明显降低,实验组INS水平在M组和H组出现降低（P<0.05）,在L组无统计学差异,实验组C-P水平在L组、M组和H组中均出现降低（P<0.05）。（3）大鼠肝脏功能,与N组相比,实验组大鼠肝脏功能指标ALT、AST水平未出现明显升高或者降低趋势,变化无统计学意义。（4）大鼠肾脏功能,与N组相比,实验组大鼠肾脏功能指标BUN、CREA均出现明显升高,BUN在M组和H组中都有升高趋势,有统计学差异（P<0.05）,CREA水平在染毒组中均有升高,但仅在M组和H组有统计学差异（P<0.05）。4.大鼠组织病理变化,（1）甲状腺病理改变,实验组甲状腺可见滤泡扩张,滤泡上皮增生,细胞排列不规则,部分呈高柱状,部分细胞核边集。部分间质中可见散在炎症细胞,血管增生。（2）胰腺病理改变,实验组胰腺可见部分腺体中小叶结构损伤,腺泡细胞排列松散,脱落、碎裂,细胞核固缩,间质增生,血管扩张,且间质中可见炎症细胞浸润,胰岛细胞减少。（3）肝脏病理改变,实验组可见肝脏组织破坏,炎症细胞浸润,同一肝脏组织中可见多种细胞形态,部分细胞界限不清,细胞水肿,部分肝脏细胞核固缩,部分细胞结构不完整,部分细胞胞核淡染,血管增生、充血,可见散在凋亡小体。（4）肾脏病理改变,实验组肾脏可见坏死灶,部分肾小球结构不完整,部分肾小球萎缩,体积缩小,中心静脉扩张充血,炎症细胞浸润,部分髓质中部分小管间不清,融合成片。5.组织中Caspase-3的表达,Caspase-3蛋白主要定位于细胞浆,少量定位于细胞核,以弥漫性棕黄色颗粒为阳性染色。依据阳性定量方法,Caspase-3的表达,（1）在甲状腺组织中,H组为中等阳性,M组为弱阳性,L组和N组未见明显异常。（2）在胰腺组织中,H组和M组为弱阳性表达,L组和N组未见明显异常。（3）在肝脏组织中,H组为中等阳性,M组为弱阳性,L组和N组未见明显异常。（4）在肾脏组织中,H组呈强阳性,M组为中等阳性,L组为弱阳性,N组未见明显异常。结论:1.NiSO4腹腔注射染毒大鼠,可导致NiSO4在血清、胰腺、肝脏和肾脏中蓄积,使上述组织中镍含量升高。2.NiSO4腹腔注射染毒大鼠,可影响甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏功能,并且对其组织病理造成损伤。3.NiSO4腹腔注射染毒,大鼠甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏组织中促凋亡蛋白Caspase-3上调,细胞凋亡可能是引起上述组织损伤的一个因素。
许帅[5]（2021）在《生物矿化蛋白介导磁性纳米颗粒的合成及MRI的应用》文中认为氧化铁纳米颗粒凭借其高比表面积、高磁学性能以及高生物相容性和可代谢性,已在生物医学领域特别是磁共振成像上广泛应用。磁共振成像（Magnetic resonance imaging,MRI）造影剂主要分为T1造影剂和T2造影剂,临床上普遍使用的是有明亮对比效果的T1造影剂。目前一般认为超小尺寸的氧化铁纳米颗粒是潜在的T1造影剂。然而目前制备小尺寸氧化铁磁性纳米颗粒通常涉及到有机溶剂的使用,更换亲水性配体比较复杂,合成效率低,并且具有潜在的生物毒性。因此开发制备方法简单且具有更好生物相容性和更强T1增强效果的氧化铁纳米颗粒仍然具有很大挑战。自然界中生物矿化形成的磁小体给予了重要启示。磁小体是趋磁细菌矿化的一个特殊产物,它是由磷脂双层膜包裹的氧化铁纳米晶体。相比于普通化学合成的磁性纳米颗粒,磁小体纳米颗粒几乎无晶格缺陷,在磁性能、稳定性和生物兼容性方面具有明显优势。磁小体矿化过程受到多种矿化蛋白严格控制,从而形成晶型一致与尺寸均一的纳米颗粒。这些矿化蛋白质因其独特的空间结构和序列特异性,具有良好的生物兼容性,以及水溶液的单分散性和结构稳定性,易修饰和改造,使得它们成为纳米颗粒合成理想的生物模板。因此,利用矿化蛋白为模板自下而上调控纳米颗粒合成不仅可以获得高性能的纳米材料,同时合成的纳米颗粒具有良好的生物兼容性和生物活性。值得一提的是,这类仿生合成方法简单可重复,并且是环境无害的。本论文基于以上理论,选取了两种代表性的生物矿化蛋白质,即Mms6蛋白（Magnetosome membrane specific 6,磁小体膜特异性蛋白6）和BSA蛋白（Bovine serum albumin,牛血清白蛋白）,分别通过两种不同的合成思路,进一步探索仿生合成过程,最终优化得到可用于T1造影的高性能氧化铁纳米颗粒。Mms6蛋白是富含酸性氨基酸的两亲性蛋白,对于磁小体晶体的形成起到重要作用。BSA蛋白富含大量的侧链氨基酸,可以提供丰富的羧基、羟基和巯基基团,为无机纳米颗粒提供了大量的结合位点,其合成产物具有很好的稳定性和生物相容性。在论文的第一部分,我们通过将Mms6蛋白与反相胶束系统结合,成功构建了类似于磁小体囊泡的纳米反应器来产生类磁小体磁性纳米颗粒。该纳米反应器可有效提高Mms6蛋白调节晶体形成的功能。类磁小体纳米颗粒表现出与天然磁小体相同的晶体形式和高性能的磁学性质,可对外部磁场快速响应。此外,亲水性修饰的类磁小体纳米颗粒具有优异的单分散性、良好的水溶性和水合粒径,避免了天然磁体纳米颗粒的缺点。MRI扫描中,具有磁靶向能力的类磁小体纳米颗粒在肿瘤区域大量富集,显着提高了T1造影效果。所有这些优点使得类磁小体纳米颗粒在生物医学上有很大的应用前景。在论文的第二部分,我们通过对BSA蛋白参与的合成体系的进一步优化和精细调控,成功的得到了具有很好T1成像效果的高性能氧化铁纳米颗粒。重要的是,我们还首次在实验中发现并证实了约6～7个BSA亚基自组装形成的一个球形笼状结构,并对BSA调控过程进行了简单探讨。此外,Fe2O3@BSA纳米颗粒在3.0 T磁场下表现出较高的r1值（6.8 mM-1s-1）和较低的r2/r1值（10.6）。与临床使用的Gd-DTPA相比,Fe2O3@BSA纳米颗粒具有更强的T1信号和长时间的血管造影效果,有利于体内稳定的高分辨成像。我们还对合成的纳米颗粒进行了体外和体内生物稳定性、毒性和肾代谢评估,结果显示Fe2O3@BSA具有良好的生物相容性,在合适的剂量下,可以被肾脏快速代谢,无明显的毒副作用,显示出了作为一种安全的T1造影剂的巨大潜力。这项工作为高质量磁性纳米材料的开发提供了一个重要的途径,并为理解蛋白质在生物矿化过程中有机/无机界面的作用提供了崭新思路。
刘亚红[6]（2020）在《环境内分泌干扰物—硫酸镍诱导大鼠甲状腺和胰腺组织、细胞凋亡的机制探讨》文中研究指明背景镍（Nickel,Ni）暴露通过对水、空气、土壤的污染日渐成为威胁生态环境和人类健康的研究热点,由于其对机体内分泌代谢状态的干扰效应,已被列入环境内分泌干扰物（Environmental endocrine disrupting chemicals,EEDs）之一。内分泌腺体特别是甲状腺和胰腺通过严密反馈机制调控着机体三大物质的代谢平衡,是能量代谢的核心调控器官。Ni对机体代谢调控的干扰往往与胰腺、甲状腺组织的细胞凋亡和增殖紧密相关。目的本研究通过设计一系列不同剂量硫酸镍（Nickel sulfate,NiSO4）处理的细胞模型,探讨Ni致人甲状腺滤泡上皮细胞（Nthy-ori 3-1,Nthy）及胰腺导管上皮细胞（h TERT-HPNE,HPNE）损伤的剂量及时间效应关系,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,并通过检测线粒体膜电位,探讨Ni所致人Nthy细胞及人HPNE细胞凋亡与线粒体凋亡通路之间的相关性。然后构建不同剂量NiSO4染毒的大鼠动物模型,通过检测Ni染毒后大鼠甲状腺和胰腺的功能及组织形态学的变化,评估Ni对大鼠代谢损伤的毒性效应;并同步检测Ni暴露环境下大鼠甲状腺及胰腺组织细胞凋亡相关指标在mRNA及蛋白质水平的表达,以期阐明Ni暴露代谢损伤发生发展的可能机制,为寻找有效的预防和干预Ni代谢损伤提供科学依据。方法本研究采用人Nthy细胞及HPNE细胞系,通过CCK-8法检测不同剂量NiSO4对人Nthy及HPNE细胞活力的影响,筛选NiSO4的适宜损伤浓度及损伤时间,构建Ni损伤细胞模型。Hoechst 33258荧光染色法、Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术观察Ni对人Nthy细胞和HPNE细胞凋亡的影响。利用流式细胞术及激光共聚焦显微镜测定干预前后细胞线粒体膜电位变化,探讨Ni损伤人Nthy及HPNE细胞与线粒体凋亡的关系。将32只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为四组:对照组（N）、低剂量组（L）、中剂量组（M）、高剂量组（H）,每组8只,对照组腹腔注射5 ml/kg生理盐水,染毒组分别等体积（5 ml/kg）腹腔注射2.5、5.0、10.0 mg/kg NiSO4,1次/日,连续40日。观察亚慢性NiSO4染毒后大鼠一般情况、体重变化、甲状腺功能、胰岛功能、甲状腺及胰腺组织形态学变化,并采用实时荧光定量PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）及免疫组化法检测甲状腺及胰腺组织凋亡相关因子（Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas）mRNA和蛋白水平的表达。结果1.NiSO4对人Nthy细胞及HPNE细胞的活力有较为明显的时间依赖效应和剂量反应关系。随着NiSO4的暴露剂量升高或者暴露时间延长,细胞活力明显降低,细胞形态变圆,贴壁细胞数目减少,出现细胞凋亡,甚至死亡。2.用不同浓度的NiSO4处理人Nthy细胞和HPNE细胞24h及48h,24h-640μM、48h-480μM及48h-640μM浓度可引起人Nthy细胞细胞凋亡增加,48h-640μM浓度可引起HPNE细胞凋亡增加,而各浓度组均能降低其线粒体膜电位水平,影响人Nthy细胞及HPNE细胞能量代谢。3.连续腹腔注射NiSO4 40天后,高剂量组大鼠甲状腺组织及胰腺组织病理均出现明显改变,且NiSO4导致大鼠的甲状腺功能及胰腺功能异常。与对照组相比,各染毒组大鼠的游离T4（Free thyroxine,FT4）和促甲状腺激素（Thyroid Stimulating Hormone,TSH）均降低,差异有统计学意义（P<0.05）,但各组间游离T3（Free triiodothyronine,FT3）差异无统计学意义（P>0.05）。对胰岛功能的影响,与对照组比较,中、高剂量NiSO4染毒后,大鼠随机血糖随NiSO4剂量增高而增高,差异有统计学意义（P<0.05）,而血清胰岛素及C肽水平均下降（P<0.05）。4.NiSO4染毒后,大鼠甲状腺组织Caspase-3的mRNA表达水平较对照组升高,差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量NiSO4染毒组Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平均高于其它各组,差异有统计学意义（P<0.01）。与对照组相比,高剂量NiSO4染毒组Bcl-2的mRNA表达水平降低,差异有统计学意义（P<0.05）。对照组和各NiSO4染毒组Bax基因的表达水平无统计学差异（P>0.05）。Bcl-2/Bax mRNA比值随着NiSO4染毒剂量的增加而下降,差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,高剂量NiSO4组Fas的mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,并显着高于其他剂量组（P<0.01）。大鼠甲状腺Caspase-3、Fas和Bax蛋白表达水平与mRNA表达一致。低、中、高剂量NiSO4组的Bcl-2蛋白表达均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,但各剂量NiSO4染毒组之间差异无统计学意义（P>0.05）。5.中、高剂量NiSO4染毒组大鼠胰腺组织Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平均显着高于对照组,差异有统计学意义（P<0.01）。Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平仅在高剂量NiSO4染毒组显着高于其它各组（P<0.01）。与对照组相比,各剂量NiSO4染毒组Fas的mRNA表达水平显着增加（P<0.01）,中、高剂量NiSO4染毒组Bcl-2的mRNA表达显着降低（P<0.01）。中、高剂量NiSO4染毒组Fas蛋白表达水平均显着高于对照组（P<0.01）,各组间Bcl-2的蛋白表达水平无统计学差异（P>0.05）。Bax mRNA及蛋白表达水平与对照组相比均无统计学差异（P>0.05）。Bcl-2/Bax的mRNA比值随着暴露剂量的增加而显着降低,差异有统计学意义（P<0.01）,而仅高剂量NiSO4染毒组Bcl-2/Bax蛋白比值低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论1.NiSO4通过降低人Nthy细胞及HPNE细胞的线粒体膜电位水平致使细胞发生凋亡,且凋亡作用的产生呈现剂量依赖性,从而影响人Nthy细胞及HPNE细胞能量代谢。2.NiSO4作为内分泌干扰物可通过细胞凋亡诱导大鼠甲状腺及胰腺损伤,导致大鼠甲状腺功能和胰岛功能异常。3.NiSO4可能通过介导Caspase依赖线粒体凋亡途径和Fas信号通路诱导大鼠甲状腺组织及胰腺组织发生细胞凋亡。
吕敏[7]（2020）在《胃苏微乳缓释凝胶给药系统的研究》文中研究说明目的:胃肠道疾病多为慢性病,需要长期服药治疗,已上市的中药胃苏颗粒在治疗慢性胃炎、胃溃疡方面效果显着。为制备具有缓释效果的中药新剂型,本研究以胃苏颗粒为模型药,采用原位凝胶递药系统使其在胃内形成凝胶,粘附在胃黏膜,增加其药物滞留时间,达到缓释效果;通过微乳技术,解决有效成分挥发油和水提液在一个体系内不稳定问题,为中药制剂现代化研究提供新思路。方法:1.提取工艺包括两部分:挥发油提取工艺和水提工艺。挥发油提取工艺采用正交试验法,优化药材浸泡时间,提取时间,加水量,以挥发油提取率为评价指标。药渣与其余药材混合水煎煮,以橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷含量及干膏率作为评价指标筛选水提工艺。2.成型工艺包括凝胶基质与微乳处方的筛选及处方优化。采用单因素试验,筛选离子敏感型原位凝胶基质去乙酰结冷胶在合适条件下的成胶浓度;以其作为水相,采用水滴定法绘制伪三元相图,筛选油相、表面活性剂、助表面活性剂等辅料比例及种类;星点设计-效应面法优化胃苏微乳原位凝胶处方。3.质量评价的指标包括:微乳原位凝胶的理化性质、鉴别和载药量测定。其中,理化性质考察包括所制得微乳的粒度分布、Zeta电位、p H值、黏度及初步稳定性;采用薄层色谱法对紫苏梗、香附、陈皮、香橼、佛手、枳壳、槟榔等七味药进行鉴别;高效液相色谱法对柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷进行含量测定,确定微乳凝胶的载药量。4.对胃苏微乳缓释原位凝胶递药系统进行体内外释放行为考察,采用桨法进行体外释放试验,无膜溶出法考察制剂溶蚀及释药行为,并通过动物实验,测定胃苏微乳缓释原位凝胶在大鼠体内的释药行为,以柚皮苷、新橙皮苷含量作为测定制剂释药行为的评价指标。结果:1.紫苏梗、香附、陈皮、香橼、佛手、枳壳加10倍量水,水蒸气蒸馏法提取挥发油7小时,收集所得挥发油;药渣与槟榔、鸡内金加水煎煮二次,第一次10倍水煎煮2小时,第二次6倍水煎煮1小时,煎液浓缩至相对密度为1.26～1.29（70～80℃）。2.单因素筛选的去乙酰结冷胶溶液浓度为0.3%,伪三元相图筛选的表面活性剂与助表面活性剂分别是聚氧乙烯氢化蓖麻油与聚乙二醇400,采用星点设计-效应面试验,以溶液粒径与PDI为考察指标,优化处方工艺。最终结果表明最佳处方比为挥发油:聚氧乙烯氢化蓖麻油:聚乙二醇400=1:3:1,0.2%甜菊素,对羟基苯甲酸乙酯0.2%,上述混合物中加入浓缩液与0.3%去乙酰结冷胶溶液,混匀,制成333 g微乳凝胶。3.体外溶出度试验与无膜溶出试验结果表明药物累积溶蚀率与累计释药率有较强的线性关系;柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷代谢最符合一级动力学方程,三种有效成分的释放方式以溶蚀为主,以扩散为辅,表明胃苏微乳原位凝胶剂在人工胃液条件下能够很好的延长释放药物时间,以达到长时间的药效作用。药物在大鼠体内代谢也有明显的缓释效果。胃苏微乳原位凝胶制剂对大鼠的胃粘膜无刺激性。结论:试验结果表明,胃苏微乳原位凝胶的制备工艺合理,可行,制剂具有一定的缓释特征。
王一蓉[8]（2020）在《补肾益元中药提取物复方对运动性低血睾酮的影响及其机制研究》文中认为目的:通过创新剂型,采用补肾益元中药提取物复方对运动性低血睾酮大鼠和男性运动员进行干预,并以淫羊藿提取物为阳性对照,观察大鼠睾酮合成相关酶及HPG轴相关激素变化,并且观察田径和游泳项目运动员睾酮代谢相关因子的变化,从睾酮的合成、分泌和代谢三大方面来探讨该方对防治运动性低血睾酮的有效性和可能分子机制,并比较中药提取物复方和单味中药提取物的干预效果,为临床开发新的运动营养补剂提供可能理论依据。同时,对补肾益元中药提取物复方中的有效成分进行检测。方法:采用高效液相色谱法（HPLC）双波长、梯度洗脱测定方中人参皂苷和淫羊藿苷的含量,采用紫外光谱检测法（UV法）测定该方中总多糖的含量。将40只SD大鼠（雄性、2月龄）随机分为空白生理盐水（CS）组、模型生理盐水（MS）组、模型淫羊藿干预（ME）组、模型低剂量复方中药干预（MLC）组、模型高剂量复方中药干预（MHC）组。经6周递增负荷跑台运动,构建大鼠运动性低血睾酮模型,采用Elisa方法检测血清CORT、T的含量;采用透射电镜观察大鼠睾丸Leydig细胞超微结构;采用RT-qPCR、western-blot检测大鼠脑组织中GnRH和FSH、LH,睾丸Leydig细胞中胆固醇合成限速酶（HMG-CoA还原酶、LDL-R和SR-BI）、睾酮合成限速酶（CYP11A1和StAR）以及LH/CG受体的mRNA和蛋白表达水平。将32位田径项目和游泳项目男性运动员按照双盲原则,随机分为运动安慰剂（MS）组、运动淫羊藿（ME）组、运动低剂量复方中药干预（MLC）组、运动高剂量复方中药干预（MHC）组,采用UV法测定运动员血、尿标本中睾酮代谢产物17-KS的含量。结果:（1）人参皂苷类、淫羊藿苷等11个成分得到有效分离,根据外标法计算得到复方含人参总皂苷、淫羊藿苷分别为43.57mg/粒、5.03mg/粒;并根据标准曲线法得到复方含多糖0.268g/粒。（2）大强度运动后,MS组大鼠血清T、T/C比值和Hb显着下降（P<0.01）,其中T值较CS组下降了38%;BLA、CK却显着上升（P<0.01）,BUN明显增加（P<0.05）,C无明显变化（P>0.05）;而三个给药组T、T/C比值和Hb有不同程度上升,BLA、CK、BUN却有不同程度下降。表明大鼠运动性低血睾酮模型建立成功。（3）透镜下可见MS组出现睾丸Leydig细胞水肿,染色质边集、细胞核固缩,内质网扩张,部分线粒体空泡变;给药组在透镜下可见Leydig细胞个别线粒体轻度肿胀,内质网扩张不明显。（4）ME、MLC和MHC组中睾丸Leydig细胞HMG-Co A还原酶,St AR和CYP11A1mRNA和蛋白表达水平均显着高于MS组（P<0.01）,但LDL-R和SR-BI的mRNA和蛋白表达水平与MS组相比无显着差异（P>0.05）。（5）MS组大鼠HPG轴中GnRH、FSH、LH和LH/CG的mRNA和蛋白表达水平较CS组显着降低（P<0.01）;而ME、MLC和MHC组组以上4个指标的mRNA和蛋白表达水平显着高于MS组（P<0.01）。（6）24h尿17-KS含量试验后ME、MLC和MHC组与MS组比较,无显着变化（P>0.05）,但仍有上升的趋势;而血17-KS含量试验后与MS组比较,ME、MLC和MHC组明显依次升高,但仍然低于试验前。结论:1.利用HPLC法能够使补肾益元方中人参皂苷、淫羊藿苷等11个成分得到有效分离,通过方法学考察说明此方法可行,精密度、回收率高,准确性、重复性良好,能够很好地控制补肾益元方的内在质量。2.采用逐级递增负荷跑台的方案能够成功建立大鼠运动性低血睾酮模型。从对大鼠一般情况观察、血清学指标检测及睾丸间质细胞形态学观察,证明补肾益元中药提取物复方对防治大鼠运动性低血睾酮症有药效。3.通过构建运动性低血睾酮大鼠模型,补肾益元中药提取物复方抗大鼠运动性低血睾酮的作用机制主要集中在对睾酮合成和分泌的影响上,包括:（1）可通过睾丸Leydig细胞内胆固醇内源性合成以及睾酮合成两个关键步骤来影响血睾酮浓度,但对于由LDL-R转录和/或SR-BI介导的逆转运影响胆固醇合成的分子机制还需要进一步探讨。（2）对HPG轴各环节具有促进作用,从影响睾酮分泌的角度影响血睾酮浓度。
陈栋[9]（2020）在《基于过冷水动态制冰的冷冻法电镀废水处理技术研究》文中指出电镀废水中含有的大量重金属对环境和人体有害。现有的电镀废水处理技术,主要处理方法是传统的化学沉淀法,在处理过程中投入化学药剂,产生大量的污泥,二次污染严重,实质是污染物的增加和转移,不符合清洁生产的要求。对电镀水洗废水进行浓缩后回用于电镀槽,可达到清洁生产的目的。目前国内外电镀水洗废水浓缩处理常用的方法主要是反渗透和蒸发浓缩。常用的电镀工艺中,酸铜工艺、氧化镍工艺、镀铬工艺水洗废水为pH值小于2的强酸性,碱铜工艺、锌酸盐镀锌工艺水洗废水为pH值大于12的强碱性,均超出了现有反渗透膜的容许pH值范围,使反渗透法在电镀废水处理领域适用范围很小。而蒸发浓缩法,能耗大,成本高。因此,急需研发一种适用性广、能耗低、符合清洁生产要求的电镀水洗废水处理新技术。本研究探讨采用冷冻法进行电镀水洗废水的处理,并采用了过冷水动态制冰技术,利用冷冻结晶提纯中水回用于电镀水洗槽或者电镀前处理,冷冻浓缩水洗废水形成电镀液回用于电镀槽,变废为宝。新研发的过冷水动态制冰冷冻法,相比现有的冷冻法水处理技术,具有溶质去除率高、能耗低、产水率高的特点。主要内容包括:（1）通过界面渐进静态冷冻法试验,证明了冷冻法能够处理各种不同工艺的电镀水洗废水。找出常规的界面渐进冷冻法处理电镀水洗废水在实际应用中主要问题,探索工程应用中可行的冷冻制冰新方法。（2）通过对过冷水成冰机理研究,寻找出更高冰晶纯度和更低能耗的制冰新方法。结合经典成核理论,通过过冷水冰晶生长试验和过冷水雾化试验,提出了“氢键角壁垒”技术观点,解释水不能在0℃结冰而是形成过冷水的原因。进而得出人为促冰的方法是:减少液体束缚,加大水体的流动,形成水力冲击,减少“氢键角壁垒”。并由此设计出最高温度能在-0.5℃就产生细小冰晶的新制冰方式用于冷冻法水处理。（3）通过冰晶尺寸与溶质去除率关系试验,寻找最合适的冰晶尺寸:厚度1 mm左右的冰粉状冰和冰絮状冰,是过冷水动态制冰法进行水处理的最优选择。且形成此形态冰的能耗,仅为界面渐进式间接冷冻法的62%。通过冰水分离方式研究试验,选择最合适的冰水分离方式:在处理电镀水洗废水的工程应用中,采用过冷水动态制冰同时进行重力过滤分离,再进行离心分离的冰水分离方式,是综合考虑杂质去除率、能耗、耗时的最优选择。产淡水率可达到59%,远高于常规的界面渐进间接冷冻法的25%。（4）通过过冷水动态制冰冷冻法处理3种有代表性的电镀水洗废水的试验,确定了最合适的冷冻法电镀水洗废水处理总流程。并计算得出整个处理流程的总能耗不到采用纯蒸发浓缩法能耗的1/10。（5）为解决了试验研究和工程应用之间的衔接问题,进行了过冷水动态制冰冷冻法处理电镀水洗废水工艺流程设计、核心处理器设计、整体处理系统设计。研究确定了可以在一个处理设备中,同时完成动态制冰、重力过滤分离、离心脱水、融冰四个步骤的核心处理器。以酸铜电镀工艺为例的经济分析显示,该系统的计算运行利润率可达到1.5倍。过冷水动态制冰冷冻法处理电镀水洗废水,有着可观的运行经济效益,为电镀厂家采用此系统进行电镀水洗废水处理提供了理论依据。
张昌[10]（2020）在《黑龙江主产区土壤-水稻系统重金属转移建模及风险评估》文中认为重金属进入土壤后会长期积累在土壤中无法被降解,并且会通过物质转换和能量循环,间接或者直接转移到农作物中,危害农作物的生长,甚至会通过食物链进入人体进行富集,对人体机能造成损伤,甚至引发癌症,农作物中重金属污染问题成为了目前人们最关心的问题,也是近年来广泛研究的热点。为了明确我国黑龙江优质稻米产区,稻米中重金属背景资料,采集查哈阳、五常、方正、响水、建三江五个黑龙江省水稻主产区的土壤和水稻样品进行检测,测定其中As、Cr、Cd、Pb四种重金属元素,并对重金属从土壤到水稻中的转移进行初步建模,最后对精米中重金属元素进行风险评估。研究结果如下:1.测定的229份样品中,土壤中Cr、As、Cd、Pb含量平均值分别为78.126 mg/kg、248.504 mg/kg、0.122 mg/kg、24.287 mg/kg,除砷元素外其他元素均未超标。糙米和精米中Cr、As、Cd、Pb四种元素含量平均值总计分别为0.122、0.203、0.007、0.023 mg/kg和0.107、0.114、0.004、0.0085mg/kg,其中响水地区糙米中Cr元素超标,超标率为8.1%。2.本试验拟合模型的R2值在0.325到0.433之间,精米中Cr、As、Cd三种元素含量均与土壤中对应元素含量存在显着正相关,Pb与土壤pH值呈负相关,其中Cr元素含量与土壤Cr含量相关性极显着。土壤中Cr、As、Cd元素含量可以很好的预测Cr、As、Cd含量,而铅元素含量与土壤pH有关。土壤中常见营养元素元素Na、Cu、Al、Fe会对精米中的Cr、Cd、Pb元素的吸收产生极大地影响,其含量严重的影响了模型的拟合度,这种因素也是影响大田条件下土壤—水稻系统模型建模的重要因素之一。3.研究区域中砷元素、铅元素在成人和儿童中均不存在暴露风险;37.9%的成人和0.6%的成人存在铬元素和镉元素暴露风险,儿童不存在Cr、Cd暴露风险。其中Cr元素暴露风险最高。本文对黑龙江主产区的水稻中As、Cr、Cd、Pb四种元素含量进行研究,对重金属在土壤—水稻系统中的转移建立了初步的回归模型,并对当地的居民摄食大米途径的重金属暴露量进行风险评估,研究结果为黑龙江省的粮食安全和环境保护提供理论指导和决策依据。
二、硫酸镍对微量元素在大鼠体内分布的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、硫酸镍对微量元素在大鼠体内分布的影响（论文提纲范文）
（1）纳米硒对硫酸镍诱导大鼠肾细胞凋亡的干预作用研究（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 主要试剂 |
| 1.2 纳米硒的制备和表征测定 |
| 1.3 动物分组 |
| 1.4 肾组织病理学观察 |
| 1.5 肾组织凋亡细胞检测 |
| 1.6 Western blot检测内质网应激和线粒体凋亡相关蛋白表达 |
| 1.7 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 Nano-Se的表征 |
| 2.2 Nano-Se对镍染毒大鼠肾病理改变的影响 |
| 2.3 Nano-Se对镍染毒大鼠肾凋亡的影响 |
| 2.4 Nano-Se对镍染毒大鼠肾组织内质网应激相关蛋白的影响 |
| 2.5 Nano-Se对镍染毒大鼠肾组织线粒体凋亡相关蛋白的影响 |
| 3 讨论 |
（2）硒蛋白S调控溶酶体稳态在鸡缺硒性小脑神经元凋亡中作用机理的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 硒与神经系统的研究进展 |
| 1.1.1 脑中硒分布 |
| 1.1.2 硒及硒蛋白研究进展 |
| 1.1.3 硒对神经系统的保护作用 |
| 1.1.4 缺硒对神经系统的影响 |
| 1.2 硒蛋白S(SELS)与神经系统损伤研究进展 |
| 1.2.1 SELS的结构和组织分布 |
| 1.2.2 SELS的功能 |
| 1.2.3 SELS在神经系统中的作用 |
| 1.3 溶酶体与神经系统疾病关系的研究进展 |
| 1.3.1 溶酶体功能障碍与自噬流抑制 |
| 1.3.2 溶酶体膜通透化与细胞凋亡 |
| 1.3.3 硒与溶酶体稳态研究进展 |
| 1.3.4 溶酶体稳态与神经系统疾病 |
| 1.4 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 主要仪器与试剂 |
| 2.1.1 主要仪器 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 动物模型的建立及样本采集 |
| 2.2.2 鸡胚脑神经元的分离纯化及鉴定 |
| 2.2.3 鸡胚脑神经元缺硒模型的建立 |
| 2.2.4 鸡胚脑神经元SELS敲低模型的建立及处理 |
| 2.2.5 鸡小脑组织病理组织学观察 |
| 2.2.6 鸡小脑组织凋亡的TUNEL法检测 |
| 2.2.7 鸡胚脑神经元凋亡的流式细胞术检测 |
| 2.2.8 鸡小脑组织中金属离子水平检测 |
| 2.2.9 鸡小脑组织mRNA转录组的检测 |
| 2.2.10 鸡胚脑神经元ROS水平的检测 |
| 2.2.11 鸡胚小脑组织及脑神经元抗氧化水平的检测 |
| 2.2.12 鸡胚脑神经元溶酶体pH检测 |
| 2.2.13 鸡小脑组织及鸡胚脑神经元中溶酶体的提取 |
| 2.2.14 鸡小脑组织中溶酶体标志酶活性的检测 |
| 2.2.15 鸡小脑组织及脑神经元免疫荧光检测 |
| 2.2.16 鸡小脑组织及鸡胚脑神经元中RNA提取及RT-PCR检测 |
| 2.2.17 鸡小脑组织及鸡胚脑神经元总蛋白提取及Western Blot检测 |
| 2.2.18 鸡小脑组织及鸡胚脑神经元硒蛋白S(SELS)及内质网应激的检测 |
| 2.2.19 鸡小脑组织及鸡胚脑神经元中溶酶体相关基因的检测 |
| 2.2.20 鸡小脑组织及鸡胚脑神经元中自噬流基因检测 |
| 2.2.21 鸡小脑组织及鸡脑神经元中凋亡基因检测 |
| 2.3 试验数据的统计与分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 缺硒鸡小脑组织相关指标检测结果 |
| 3.1.1 缺硒鸡小脑组织病理结构观察结果 |
| 3.1.2 缺硒鸡小脑组织凋亡 TUNEL 法检测结果 |
| 3.1.3 缺硒鸡小脑组织金属离子水平检测结果 |
| 3.1.4 缺硒鸡小脑组织mRNA转录组检测结果 |
| 3.1.5 缺硒鸡小脑组织SELS表达及内质网应激指标检测结果 |
| 3.1.6 缺硒鸡小脑组织抗氧化水平检测结果 |
| 3.1.7 缺硒鸡小脑组织溶酶体稳态检测结果 |
| 3.1.8 缺硒鸡小脑组织自噬流检测结果 |
| 3.1.9 缺硒鸡小脑组织凋亡检测结果 |
| 3.2 缺硒鸡胚神经元相关指标检测结果 |
| 3.2.1 鸡胚脑神经元形态学观察结果 |
| 3.2.2 鸡胚脑神经元的鉴定 |
| 3.2.3 缺硒鸡胚脑神经元细胞形态观察结果 |
| 3.2.4 缺硒鸡胚脑神经元硒蛋白表达检测结果 |
| 3.2.5 缺硒鸡胚脑神经元SELS及内质网应激检测结果 |
| 3.2.6 缺硒鸡胚脑神经元ROS水平及抗氧化能力检测结果 |
| 3.2.7 缺硒鸡胚脑神经元溶酶体稳态检测结果 |
| 3.2.8 缺硒鸡胚脑神经元自噬流检测结果 |
| 3.2.9 缺硒鸡胚脑神经元凋亡检测结果 |
| 3.3 SELS敲低鸡胚脑神经元相关指标检测结果 |
| 3.3.1 鸡胚脑神经元SELS敲低模型的建立 |
| 3.3.2 SELS敲低鸡胚脑神经元细胞形态观察结果 |
| 3.3.3 SELS敲低鸡胚脑神经元内质网定位硒蛋白及内质网应激检测结果 |
| 3.3.4 SELS敲低鸡胚脑神经元ROS水平及抗氧化能力检测结果 |
| 3.3.5 SELS敲低鸡胚脑神经元溶酶体稳态检测结果 |
| 3.3.6 SELS敲低鸡胚脑神经元自噬流检测结果 |
| 3.3.7 SELS敲低鸡胚脑神经元凋亡检测结果 |
| 3.4 NAC处理SELS敲低鸡胚脑神经元相关指标检测结果 |
| 3.4.1 NAC处理SELS敲低鸡胚脑神经元ROS检测结果 |
| 3.4.2 NAC处理SELS敲低鸡胚脑神经元溶酶体稳检测结果 |
| 3.4.3 NAC处理SELS敲低鸡胚脑神经元自噬流检测结果 |
| 3.4.4 NAC处理SELS敲低鸡胚脑神经元凋亡检测结果 |
| 3.5 E-64处理SELS敲低鸡胚脑神经元相关指标检测结果 |
| 3.5.1 E-64处理SELS敲低鸡胚脑神经元胞浆CTSB检测结果 |
| 3.5.2 E-64处理SELS敲低鸡胚脑神经元凋亡检测结果 |
| 3.6 Pepstatin A处理SELS敲低鸡胚脑神经元相关指标检测结果 |
| 3.6.1 Pepstatin A处理SELS敲低鸡胚脑神经元胞浆CTSD检测结果 |
| 3.6.2 Pepstatin A处理SELS敲低鸡胚脑神经元凋亡检测结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 鸡缺硒性小脑损伤、鸡胚脑神经元缺硒及SELS敲低模型的建立 |
| 4.1.1 鸡缺硒性小脑损伤模型的建立 |
| 4.1.2 鸡胚脑神经元培养条件优化及缺硒模型建立 |
| 4.1.3 硒对SELS表达的影响及SELS敲低鸡胚脑神经元模型的建立 |
| 4.2 缺硒对鸡小脑金属离子稳态的影响 |
| 4.3 缺硒对鸡小脑mRNA转录组学的影响 |
| 4.4 SELS对脑神经元内质网应激的影响 |
| 4.5 SELS对脑神经元抗氧化能力的影响 |
| 4.6 SELS对脑神经元溶酶体稳态的影响 |
| 4.7 SELS对脑神经元自噬流的影响 |
| 4.8 SELS对脑神经元细胞凋亡的影响 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
（3）超声辅助离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿中镍（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 仪器与试剂 |
| 1.1.1 仪器 |
| 1.1.2 试剂 |
| 1.1.3 溶液配制 |
| 1.2 样品的采集和保存 |
| 1.3 分析方法 |
| 1.3.1 实验条件 |
| 1.3.2 工作曲线绘制 |
| 1.3.3 尿样的采集与检测 |
| 1.3.4 实验条件优化 |
| 1.3.5 质量控制 |
| 2 结果 |
| 2.1 试验条件优化 |
| 2.1.1 仪器条件优化 |
| 2.1.2 萃取条件优化 |
| 2.2 工作曲线 |
| 2.3 方法检出限与定量下限 |
| 2.4 精密度和准确度 |
| 2.5 样品稳定性实验 |
| 2.6 干扰试验 |
| 2.7 两种方法比较 |
| 2.8 实际应用 |
| 3 讨论 |
| 3.1 试验条件的优化 |
| 3.2 方法学性能指标 |
| 3.3 实际应用 |
| 3.4 测量不确定度分析 |
| 3.4.1 标准物质纯度引入的不确定度 |
| 3.4.2 称重引入的不确定度 |
| 3.4.3 体积引入的不确定度 |
| 3.4.4 拟合标准曲线引入的不确定度 |
| 3.4.5 样品前处理引入的不确定度 |
| 3.4.6 合成标准不确定度 |
| 3.4.7 扩展不确定度 |
| 4 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 综述:尿中镍的检测及前处理方法进展 |
| 参考文献 |
| 附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 |
（4）NiSO4染毒大鼠甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏组织镍蓄积量的检测与组织功能、病理损伤的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 镍的一般毒性作用及机制 |
| 1.1.1 镍的一般特点及其来源、含量和应用 |
| 1.1.2 镍对人体的生理作用 |
| 1.1.3 镍的毒性作用 |
| 1.2 镍在动物体内蓄积 |
| 1.2.1 镍在动物体内的分布 |
| 1.2.2 镍在体内的代谢 |
| 1.3 镍对器官损伤 |
| 1.3.1 镍对器官产生损伤的机制 |
| 1.3.2 凋亡蛋白Caspase-3 |
| 1.4 研究的目的与意义 |
| 第二章 实验材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验器材及试剂 |
| 2.2.1 主要试验仪器 |
| 2.2.2 主要试验试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 实验动物模型制备 |
| 2.3.2 大鼠的一般情况及体重、饮食、饮水量检测 |
| 2.3.3 大鼠血液、肝脏、肾脏、甲状腺和胰腺组织中镍蓄积量检测 |
| 2.3.4 大鼠肝脏、肾脏、甲状腺和胰腺组织功能改变 |
| 2.3.5 大鼠肝脏、肾脏、甲状腺和胰腺HE染色 |
| 2.3.6 免疫组化法检测大鼠肝脏、肾脏、甲状腺和胰腺组织中Caspase-3蛋白的表达 |
| 2.3.7 统计分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 镍对大鼠的行为、体重、饮食、饮水和镍蓄积量的影响 |
| 3.1.1 镍对大鼠的行为、体重、饮食、饮水量的影响 |
| 3.1.2 镍对大鼠组织镍蓄积量的影响 |
| 3.1.3 镍染毒量与大鼠组织镍蓄积量的相关性 |
| 3.2 镍对大鼠肝脏和肾脏的功能、病理及其Caspase-3 免疫组化蛋白表达影响 |
| 3.2.1 NiSO_4对大鼠肝脏和肾脏功能的影响 |
| 3.2.2 NiSO_4对大鼠肝脏和肾脏的病理HE染色结果的影响 |
| 3.2.3 NiSO_4对大鼠肝脏和肾脏的Caspase-3 免疫组化蛋白表达情况影响 |
| 3.3 镍对大鼠甲状腺的功能、病理及其Caspase-3 免疫组化蛋白表达情况影响 |
| 3.3.1 NiSO_4对大鼠甲状腺的功能的影响 |
| 3.3.2 NiSO_4对大鼠甲状腺的病理HE染色结果的影响 |
| 3.3.3 NiSO_4对大鼠甲状腺的Caspase-3 免疫组化蛋白表达情况影响 |
| 3.4 镍对大鼠胰腺的功能、病理及其Caspase-3 免疫组化蛋白表达情况影响 |
| 3.4.1 NiSO_4对大鼠胰腺的功能的影响 |
| 3.4.2 NiSO_4对大鼠胰腺的病理HE染色结果的影响 |
| 3.4.3 NiSO_4对大鼠胰腺的Caspase-3 免疫组化蛋白表达情况影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 镍对大鼠的行为、体重、饮食、饮水和镍蓄积量的影响 |
| 4.2 镍对大鼠肝脏和肾脏的功能、病理及其Caspase-3 免疫组化蛋白表达影响 |
| 4.3 镍对大鼠甲状腺的功能、病理及其Caspase-3 免疫组化蛋白表达情况影响 |
| 4.4 镍对大鼠胰腺的功能、病理及其Caspase-3 免疫组化蛋白表达情况影响 |
| 结论与展望 |
| 结论 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 不同染毒方式构建镍损伤模型的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 附录 |
| 附录1 英文缩略词对照表 |
| 致谢 |
（5）生物矿化蛋白介导磁性纳米颗粒的合成及MRI的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 氧化铁纳米颗粒 |
| 1.2.1 氧化铁纳米颗粒的生命科学研究 |
| 1.2.1.1 生物分离 |
| 1.2.1.2 纳米酶 |
| 1.2.1.3 抑菌能力 |
| 1.2.1.4 磁感应热疗 |
| 1.2.1.5 药物递送 |
| 1.2.1.6 磁共振成像 |
| 1.2.2 氧化铁纳米颗粒在MRI的应用 |
| 1.2.2.1 磁共振成像原理 |
| 1.2.2.2 造影剂的作用机制 |
| 1.2.2.3 MRI造影效果的影响因素 |
| 1.2.3 氧化铁纳米颗粒的化学合成 |
| 1.2.3.1 共沉淀法 |
| 1.2.3.2 热分解法 |
| 1.2.3.3 水热法 |
| 1.2.3.4 微乳液法 |
| 1.2.3.5 化学合成方法总结 |
| 1.3 生物仿生合成 |
| 1.3.1 生物仿生合成和生物矿化 |
| 1.3.2 趋磁细菌的生物矿化 |
| 1.3.3 铁蛋白介导氧化铁纳米颗粒的合成 |
| 1.3.4 BSA介导氧化铁纳米颗粒的合成 |
| 1.3.5 生物仿生合成的优势和挑战 |
| 1.4 选题思路和研究内容 |
| 1.4.1 Mms6蛋白介导的仿生合成及在MRI的应用 |
| 1.4.2 BSA蛋白介导的仿生合成及在MRI的应用 |
| 第二章 Mms6介导的仿生合成及在MRI的应用 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与设备 |
| 2.2.1 主要设备与器材 |
| 2.2.2 实验试剂及耗材 |
| 2.2.3 实验溶液配制 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 Mms6蛋白的表达与纯化 |
| 2.3.2 趋磁细菌的培养 |
| 2.3.3 天然无膜磁小体的获取 |
| 2.3.4 类磁小体纳米颗粒的合成 |
| 2.3.5 水溶性类磁小体纳米颗粒的制备 |
| 2.3.6 不同合成阶段Mms6的表征 |
| 2.3.7 ~1H,~(15)N-HSQC实验 |
| 2.3.8 细胞毒性试验 |
| 2.3.9 体外磁共振成像 |
| 2.3.10 异种移植瘤模型的建立 |
| 2.3.11 体内磁共振成像 |
| 2.3.12 肿瘤区域铁富集量分析 |
| 2.3.13 组织病理学检查 |
| 2.4 实验结果与讨论 |
| 2.4.1 类磁小体氧化铁纳米颗粒的合成 |
| 2.4.2 Mms6蛋白参与构建的反相胶束纳米反应器 |
| 2.4.3 类磁小体纳米颗粒的晶体学分析 |
| 2.4.4 类磁小体纳米颗粒的磁性 |
| 2.4.5 体内磁靶向磁共振成像研究 |
| 2.5 实验结论 |
| 第三章 BSA介导的仿生合成及在MRI的应用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与设备 |
| 3.2.1 主要设备与器材 |
| 3.2.2 实验试剂及耗材 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 Fe_2O_3@BSA纳米颗粒合成 |
| 3.3.2 BSA纳米笼的表征 |
| 3.3.3 体外磁共振成像 |
| 3.3.4 活体MRI性能研究 |
| 3.3.5 体外稳定性评价 |
| 3.3.6 体外细胞活力测定 |
| 3.3.7 溶血试验 |
| 3.3.8 给药后体内Fe的生物分布 |
| 3.3.9 组织病理学和血液生化检查 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.3.1 Fe_2O_3@BSA纳米颗粒的合成与表征 |
| 3.3.2 BSA蛋白纳米笼结构的形成及初步探究 |
| 3.3.3 Fe_2O_3@BSA纳米颗粒的磁学性质 |
| 3.3.4 Fe_2O_3@BSA的体外MRI评估 |
| 3.3.5 体内磁共振血管成像研究 |
| 3.3.6 稳定性评价 |
| 3.3.7 生物毒性评价 |
| 3.3.8 肾脏清除能力分析 |
| 3.5 实验结论 |
| 第四章 讨论与展望 |
| 参考文献 |
| 缩略语 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 |
| 攻读博士期间参加的学术会议 |
（6）环境内分泌干扰物—硫酸镍诱导大鼠甲状腺和胰腺组织、细胞凋亡的机制探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第一章 前言 |
| 1.镍储量及应用现状 |
| 2.镍对生态环境的污染 |
| 2.1 空气、水、土壤的镍污染 |
| 2.2 镍污染对植被及微生物的影响 |
| 2.3 镍对动物的影响 |
| 2.4 镍暴露对人类的影响 |
| 3.镍与代谢 |
| 4.镍暴露损伤的机制 |
| 第二章 不同浓度NiSO_4 诱导人Nthy细胞凋亡及机制 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 Nthy-ori3-1 细胞株的复苏、培养、传代 |
| 2.2 构建人Nthy细胞镍损伤模型 |
| 2.3 Hoechst33258 荧光染色观察NiSO_4 诱导的Nthy细胞凋亡 |
| 2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡率 |
| 2.5 人Nthy细胞线粒体膜电位检测 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 CCK-8细胞活力检测结果 |
| 3.2 普通光镜下人Nthy细胞形态改变 |
| 3.3 Hoechst33258 荧光染色法检测Nthy细胞凋亡情况 |
| 3.4 NiSO_4 对人Nthy细胞凋亡的处理作用 |
| 3.5 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化 |
| 3.6 激光共聚焦显微镜测定线粒体膜电位 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 第三章 不同浓度NiSO_4 诱导人HPNE细胞凋亡及机制 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 人HPNE细胞株的复苏、培养、传代 |
| 2.2 构建人HPNE细胞镍损伤模型 |
| 2.3 Hoechst33258 荧光染色观察NiSO_4 诱导的人HPNE细胞凋亡 |
| 2.4 流式细胞仪检测人HPNE细胞凋亡率 |
| 2.5 人HPNE细胞线粒体膜电位检测 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 CCK-8细胞活力检测结果 |
| 3.2 普通光镜下人HPNE细胞形态改变 |
| 3.3 Hoechst33258 荧光染色法检测人HPNE细胞凋亡情况 |
| 3.4 NiSO_4 对人HPNE细胞凋亡的处理作用 |
| 3.5 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化 |
| 3.6 激光共聚焦显微镜测定线粒体膜电位 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 第四章 NiSO_4对大鼠甲状腺功能、形态及凋亡增殖的影响 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 主要试验仪器 |
| 1.2 主要试验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 染毒动物模型建立 |
| 2.2 大鼠甲状腺组织病理切片制备 |
| 2.3 大鼠甲状腺功能测定 |
| 2.4 RT-PCR法测定大鼠甲状腺组织中Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的 m RNA表达水平 |
| 2.5 免疫组化法检测大鼠甲状腺组织中Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas蛋白表达水平 |
| 2.6 统计分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 NiSO_4染毒后大鼠一般情况 |
| 3.2 大鼠体重的变化 |
| 3.3 大鼠甲状腺组织形态学改变 |
| 3.4 大鼠甲状腺功能的改变 |
| 3.5 大鼠甲状腺组织Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达水平和含量的变化 |
| 3.6 大鼠甲状腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2和Fas蛋白表达水平 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 第五章 NiSO_4对大鼠胰腺功能、形态及凋亡增殖的影响 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 主要试验仪器 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 染毒动物模型建立 |
| 2.2 大鼠胰腺组织病理切片制备 |
| 2.3 大鼠血糖、胰岛素及C肽水平测定 |
| 2.4 RT-PCR法测定大鼠胰腺组织Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的 m RNA表达水平 |
| 2.5 免疫组化法检测大鼠胰腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas蛋白表达水平 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 大鼠胰腺组织形态学改变 |
| 3.2 大鼠随机血糖、血清胰岛素及C肽水平的变化 |
| 3.3 大鼠胰腺组织Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达水平和含量的变化 |
| 3.4 大鼠胰腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas蛋白表达水平 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 重金属甲状腺毒性及其作用机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（7）胃苏微乳缓释凝胶给药系统的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 微乳技术研究进展 |
| 1.1.1 微乳的概述 |
| 1.1.2 微乳的制备方法 |
| 1.1.3 微乳技术的应用 |
| 1.2 原位凝胶研究进展 |
| 1.2.1 原位凝胶概述 |
| 1.2.2 原位凝胶基质应用现状 |
| 1.2.3 原位凝胶与新技术结合应用 |
| 1.2.4 微乳原位凝胶递药系统在中药中的应用 |
| 1.3 处方研究 |
| 1.3.1 处方来源 |
| 1.3.2 处方组成 |
| 1.3.3 功能与主治 |
| 1.3.4 处方药物的现代研究 |
| 1.4 研究目的及意义 |
| 1.4.1 研究目的 |
| 1.4.2 研究意义 |
| 第2章 胃苏微乳原位凝胶制剂工艺研究 |
| 2.1 概述 |
| 2.1.1 原制备工艺 |
| 2.1.2 现工艺创新性 |
| 2.1.3 工艺路线设计流程 |
| 2.2 挥发油提取工艺研究 |
| 2.2.1 试验仪器与材料 |
| 2.2.2 吸水率考察 |
| 2.2.3 单因素试验 |
| 2.2.4 正交试验设计 |
| 2.2.5 水提工艺研究 |
| 2.2.6 浓缩与纯化 |
| 2.2.7 讨论 |
| 2.2.8 小结 |
| 2.3 微乳离子敏感凝胶的处方筛选 |
| 2.3.1 试验仪器与材料 |
| 2.3.2 凝胶基质的选择 |
| 2.3.3 微乳处方的筛选 |
| 2.3.4 星点设计-效应面法处方优化 |
| 2.3.5 防腐剂 |
| 2.3.6 矫味剂 |
| 2.3.7 讨论 |
| 2.3.8 小结 |
| 第3章 胃苏微乳原位凝胶制剂质量评价 |
| 3.1 试验仪器与材料 |
| 3.1.1 试验仪器 |
| 3.1.2 试验材料 |
| 3.2 理化性质 |
| 3.2.1 性状 |
| 3.2.2 粒径分布 |
| 3.2.3 Zeta电位测定 |
| 3.2.4 初步稳定性考察 |
| 3.2.5 黏度的测定 |
| 3.2.6 pH检查 |
| 3.2.7 稀释倍数的影响 |
| 3.3 鉴别 |
| 3.3.1 紫苏梗的TLC鉴别 |
| 3.3.2 香橼的TLC鉴别 |
| 3.3.3 佛手的TLC鉴别 |
| 3.3.4 枳壳、陈皮的TLC鉴别 |
| 3.3.5 香附的TLC鉴别 |
| 3.3.6 槟榔的TLC鉴别 |
| 3.4 含量测定 |
| 3.4.1 溶液的制备 |
| 3.4.2 色谱条件优化 |
| 3.4.3 提取方法优化 |
| 3.4.4 方法学考察 |
| 3.4.5 三批样品含量测定 |
| 3.4.6 小结与讨论 |
| 第4章 胃苏微乳原位凝胶制剂释药行为与刺激性评价 |
| 4.1 试验仪器与材料 |
| 4.1.1 试验仪器 |
| 4.1.2 试验材料 |
| 4.2 释药行为考察 |
| 4.2.1 体外释放考察 |
| 4.2.2 无膜溶出试验 |
| 4.2.3 体内释药行为考察 |
| 4.3 大鼠胃黏膜刺激性试验 |
| 4.3.1 试验方法 |
| 4.3.2 小结与讨论 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
（8）补肾益元中药提取物复方对运动性低血睾酮的影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 综述 —中药抗运动性低血睾酮的研究进展 |
| 1 睾酮简介 |
| 1.1 睾酮的结构与功能 |
| 1.2 睾酮的发生发展 |
| 1.3 睾酮在运动项目中的发生发展 |
| 1.4 睾酮的化学合成 |
| 2 运动性低血睾酮的产生机制 |
| 2.1 睾丸本身的功能障碍导致运动性低血睾酮 |
| 2.2 对睾酮分泌作用的影响导致运动性低血睾酮 |
| 2.3 影响睾酮以及睾酮前体胆固醇合成或分泌的限速酶 |
| 3 中医对运动性低血睾酮的认识 |
| 4 中药抗运动性低血睾酮的作用机理 |
| 4.1 调节下丘脑-垂体-性腺轴(HPG轴) |
| 4.2 调节下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴) |
| 4.3 调节胆固醇合成限速酶 |
| 4.4 调节睾酮合成限速酶 |
| 5 运动性低血睾酮与运动性疲劳的区别和联系 |
| 6 运动性低血睾酮模型及其判断标准 |
| 7 中药提取物复方的发展趋势 |
| 8 存在的问题 |
| 9 展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 研究一 补肾益元中药提取物复方有效成分检测 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试剂与对照品 |
| 2.2 主要仪器 |
| 2.3 淫羊藿苷提纯 |
| 2.4 人参总皂苷提纯 |
| 2.5 枸杞多糖提取 |
| 2.6 其它提取物 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 双波长HPLC法测定补肾益元中药提取物复方淫羊藿苷及人参皂苷类成分 |
| 3.2 UV法测定补肾益元中药提取物复方中多糖的含量 |
| 4 结果 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 研究二 大鼠运动性低血睾酮模型的构建及补肾益元中药提取物复方的药效观察 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验对象与分组 |
| 2.2 主要试剂与仪器 |
| 2.3 给药方案 |
| 2.4 运动方案 |
| 2.5 质量控制 |
| 2.6 血清测试样品采集与制备 |
| 2.7 透射电镜样品采集与制备 |
| 2.8 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 大鼠行为学及体重变化情况 |
| 3.2 大鼠血清指标变化情况 |
| 3.3 大鼠睾丸间质细胞超微结构变化情况 |
| 4 讨论 |
| 4.1 中药提取物复方对大鼠血清学指标的影响 |
| 4.2 中药提取物复方对大鼠睾丸间质细胞超微结构的影响 |
| 4.3 大鼠运动性低血睾酮模型的构建 |
| 5 小结 |
| 研究三 补肾益元中药提取物复方对大鼠睾酮合成相关指标的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 样品采集与标本制备 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验试剂 |
| 2.4 指标检测 |
| 2.5 实验方法 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 大鼠血清中TC、HDL-CE、LDL-CE含量 |
| 3.2 大鼠睾丸Leydig细胞中HMG-COA、LDL-R、SR-BI、St AR、CYP11A1的m RNA表达水平 |
| 3.3 大鼠睾丸Leydig细胞中HMG-COA、LDL-R、SR-BI、St AR、CYP11A1的蛋白表达水平 |
| 4 讨论 |
| 4.1 中药提取物复方对大鼠睾丸Leydig细胞胆固醇合成限速酶HMG-Co A、LDL-R和 SR-BI的 m RNA和蛋白表达的影响 |
| 4.2 中药提取物复方对大鼠睾丸Leydig细胞睾酮合成限速CYP11A1和St AR的 m RNA和蛋白表达的影响 |
| 5 小结 |
| 研究四 补肾益元中药提取物复方对大鼠睾酮分泌相关指标的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 样品采集与标本制备 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验试剂 |
| 2.4 指标检测 |
| 2.5 实验方法 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 大鼠脑组织中Gn RH、FSH、LH及睾丸组织中LH/CG受体的mRNA表达 |
| 3.2 大鼠脑组织中Gn RH、FSH、LH及睾丸组织LH/CG受体的蛋白表达 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 研究五 补肾益元中药提取物复方对男运动员睾酮代谢相关指标的影响 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验对象与分组 |
| 2.2 主要试剂与仪器 |
| 2.3 样品收集 |
| 2.4 指标检测 |
| 2.5 试验方法 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 精神状态和运动状态描述 |
| 3.2 血清睾酮、皮质醇、肌酸激酶和尿素氮含量 |
| 3.3 尿、血液中睾酮代谢产物17-KS含量 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 全文结果及结论 |
| 创新与不足 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附图 |
| 附表 |
| 附伦理学审批件 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 攻读学位期间主持或参与的课题或项目 |
| 攻读学位期间参编的教材 |
| 攻读学位期间参与的论文报告会 |
| 致谢 |
（9）基于过冷水动态制冰的冷冻法电镀废水处理技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 电镀废水 |
| 1.1.1 电镀简介 |
| 1.1.2 电镀废水的来源 |
| 1.1.3 电镀废水的危害性 |
| 1.2 现有主要的电镀废水处理方法 |
| 1.2.1 化学沉淀法 |
| 1.2.2 离子交换法 |
| 1.2.3 吸附法 |
| 1.2.4 蒸发浓缩法 |
| 1.2.5 膜分离法 |
| 1.3 现有电镀废水处理面临的主要问题和解决思路 |
| 1.3.1 电镀工业园废水处理面临的主要问题 |
| 1.3.2 大型PCB板生产厂电镀废水处理面临的主要问题 |
| 1.3.3 现行电镀废水处理方法的主要问题 |
| 1.3.4 电镀废水处理战略成本管理分析 |
| 1.4 冷冻法水处理技术 |
| 1.4.1 冷冻法水处理技术的优势 |
| 1.4.2 国内外现有的冷冻法水处理技术现状 |
| 1.5 研究目的和研究内容及技术路线 |
| 1.5.1 研究目的 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 1.5.3 技术路线 |
| 第二章 试验材料和仪器设备 |
| 2.1 试验用水 |
| 2.1.1 实际电镀液和电镀水洗废水 |
| 2.1.2 模拟电镀水洗废水 |
| 2.1.3 试验用NaCl溶液 |
| 2.2 试验设备 |
| 2.2.1 界面渐进静态冷冻法试验设备 |
| 2.2.2 过冷水动态制冰冷冻法试验设备 |
| 2.3 分析仪器设备 |
| 2.3.1 主要检测内容和分析方法 |
| 2.3.2 主要分析仪器型号 |
| 2.3.3 主要分析仪器使用方法 |
| 第三章 界面渐进静态冷冻法初步试验 |
| 3.1 试验方案 |
| 3.2 实际电镀水洗废水界面渐进静态冷冻法试验 |
| 3.2.1 酸铜工艺电镀水洗废水界面渐进静态冷冻法试验 |
| 3.2.2 镀铬工艺电镀水洗废水界面渐进静态冷冻法试验 |
| 3.2.3 镀镍工艺电镀水洗废水界面渐进静态冷冻法试验 |
| 3.2.4 锌酸盐镀锌工艺电镀水洗废水界面渐进静态冷冻法试验 |
| 3.2.5 实际电镀水洗废水界面渐进静态冷冻法试验结果讨论 |
| 3.3 各种条件下冷冻法对硫酸铜去除率的影响 |
| 3.3.1 溶液浓度与溶质去除率的关系 |
| 3.3.2 冰冻率与溶质去除率间的关系 |
| 3.3.3 溶液成分与溶质去除率间的关系 |
| 3.3.4 pH值与溶质去除率间的关系 |
| 3.3.5 冷冻温度与溶质去除率的关系 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 过冷水成冰机理研究 |
| 4.1 过冷水成冰机理 |
| 4.1.1 过冷水成冰和经典成核理论 |
| 4.1.2 光学显微镜成相试验 |
| 4.2 由“临界冰核”推导最小冰晶尺寸 |
| 4.2.1 临界冰核 |
| 4.2.2 计算最小冰晶尺寸 |
| 4.2.3 绘制最小冰晶结构 |
| 4.3 过冷水冰晶生长过程演示试验 |
| 4.4 过冷水雾化试验 |
| 4.5 “氢键角壁垒”的提出 |
| 4.6 本章小结 |
| 第五章 过冷水动态制冰冷冻法主要技术参数研究 |
| 5.1 冰晶尺寸与溶质去除率关系研究 |
| 5.1.1 试验方案 |
| 5.1.2 试验结果与讨论 |
| 5.2 过冷水动态制冰冷冻法能耗分析 |
| 5.2.1 卡诺循环和逆卡诺循环 |
| 5.2.2 计算界面渐进式间接冷冻法的能效比 |
| 5.2.3 计算过冷水动态制冰冷冻法的能效比 |
| 5.3 冰水分离方式研究 |
| 5.3.1 主要的冰水分离方法 |
| 5.3.2 试验方案 |
| 5.3.3 重力过滤分离时间与溶质去除率的关系 |
| 5.3.4 离心脱水时间与溶质去除率的关系 |
| 5.4 产淡水率计算 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 过冷水动态制冰冷冻法处理电镀废水流程研究 |
| 6.1 试验方案 |
| 6.2 试验结果和讨论 |
| 6.2.1 实际电镀液和电镀水洗废水水质 |
| 6.2.2 过冷水动态制冰处理效果和重力分离时间对去除率的影响 |
| 6.2.3 离心固液分离试验 |
| 6.2.4 浓缩比计算 |
| 6.2.5 二次冷冻处理试验 |
| 6.3 处理流程总述 |
| 6.4 处理流程总能耗计算 |
| 6.5 本章小结 |
| 第七章 过冷水动态制冰冷冻法处理电镀废水设备及系统设计 |
| 7.1 处理设备废水处理量的确定 |
| 7.1.1 理论废水量 |
| 7.1.2 实测废水量 |
| 7.1.3 处理设备设计废水量 |
| 7.2 冷冻法处理电镀废水工艺流程设计 |
| 7.3 过冷水动态制冰冷冻法电镀废水处理设备设计 |
| 7.3.1 处理设备基本原理 |
| 7.3.2 核心处理器设计 |
| 7.3.3 整体处理系统设计 |
| 7.3.4 处理系统和主处理器工作流程 |
| 7.4 过冷水动态制冰冷冻法处理电镀废水经济分析 |
| 7.4.1 以酸铜电镀工艺为例经济分析 |
| 7.4.2 以镀镍电镀工艺为例经济分析 |
| 7.5 本章小结 |
| 第八章 结论与展望 |
| 8.1 结论 |
| 8.2 创新点 |
| 8.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 攻读博士学位期间发表研究成果情况 |
| 致谢 |
（10）黑龙江主产区土壤-水稻系统重金属转移建模及风险评估（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 重金属概述 |
| 1.1.1 重金属 |
| 1.1.2 重金属来源 |
| 1.1.3 重金属危害 |
| 1.1.4 重金属的检测方法 |
| 1.2 国内外水稻研究现状 |
| 1.3 风险评估 |
| 1.3.1 危害识别 |
| 1.3.2 暴露评估 |
| 1.3.3 危害特征描述 |
| 1.3.4 风险特征描述 |
| 1.3.5 国内外食品风险评估发展现状 |
| 1.4 研究的目的和意义 |
| 1.5 课题研究的主要内容 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料与设备 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验试剂 |
| 2.1.3 试验仪器 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 水稻及土壤样本的重金属测定 |
| 2.2.2 土壤—水稻转移模型建立 |
| 2.2.3 水稻籽粒风险评估 |
| 2.2.4 数据统计分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 不同地区水稻籽粒中重金属含量分析 |
| 3.1.1 不同地区土壤中重金属元素含量分析 |
| 3.1.2 不同地区水稻中重金属元素含量分析 |
| 3.1.3 精米中重金属元素含量相关性分析 |
| 3.1.4 不同品种精米元素含量相关性分析 |
| 3.2 土壤—水稻中4种重金属元素转移模型的建立 |
| 3.2.1 土壤—水稻系统重金属转移模型的建立 |
| 3.2.2 转移模型的验证与分析 |
| 3.3 水稻籽粒中四种重金属的风险评估 |
| 3.3.1 危害识别 |
| 3.3.2 暴露评估 |
| 3.3.3 危害特征描述 |
| 3.3.4 风险特征描述 |
| 3.3.5 敏感性分析 |
| 4 讨论 |
| 5 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、硫酸镍对微量元素在大鼠体内分布的影响（论文参考文献）
- [1]纳米硒对硫酸镍诱导大鼠肾细胞凋亡的干预作用研究[J]. 王彩霞,张蕊,王爽,李瑞芬,谭心悦,古雪岩,马剑华,张莉,苏莉. 毒理学杂志, 2021(03)
- [2]硒蛋白S调控溶酶体稳态在鸡缺硒性小脑神经元凋亡中作用机理的研究[D]. 赵霞. 东北农业大学, 2021
- [3]超声辅助离子液体微萃取-石墨炉原子吸收光谱法测定尿中镍[D]. 任雨萌. 武汉科技大学, 2021(01)
- [4]NiSO4染毒大鼠甲状腺、胰腺、肝脏和肾脏组织镍蓄积量的检测与组织功能、病理损伤的实验研究[D]. 杨晶晶. 兰州大学, 2021(12)
- [5]生物矿化蛋白介导磁性纳米颗粒的合成及MRI的应用[D]. 许帅. 中国科学技术大学, 2021(06)
- [6]环境内分泌干扰物—硫酸镍诱导大鼠甲状腺和胰腺组织、细胞凋亡的机制探讨[D]. 刘亚红. 兰州大学, 2020(04)
- [7]胃苏微乳缓释凝胶给药系统的研究[D]. 吕敏. 西南交通大学, 2020(07)
- [8]补肾益元中药提取物复方对运动性低血睾酮的影响及其机制研究[D]. 王一蓉. 湖南师范大学, 2020(01)
- [9]基于过冷水动态制冰的冷冻法电镀废水处理技术研究[D]. 陈栋. 广州大学, 2020
- [10]黑龙江主产区土壤-水稻系统重金属转移建模及风险评估[D]. 张昌. 黑龙江八一农垦大学, 2020(09)