益肺康六饮对癌细胞凝集素受体表达的影响

益肺康六饮对癌细胞凝集素受体表达的影响

一、益肺抗瘤饮对癌细胞凝集素受体表达的影响(论文文献综述)

王郝嘉,吴嘉瑞,巫志姗,倪梦蔚,郭思宇,贾珊珊,张景媛,刘莹莹,李佳霖[1](2021)在《基于Meta分析的金复康口服液辅助化疗治疗肺癌临床评价研究》文中进行了进一步梳理目的:系统评价金复康口服液联合化疗治疗肺癌的临床疗效和安全性。方法:计算机检索PubMed、Embase、the Cochrane Library、CNKI、WanFang Data、VIP、SinoMed数据库,搜集关于金复康口服液联合化疗治疗肺癌的随机对照试验,检索时限均为从建库至2020年7月14日,由两名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,通过RevMan 5.3、Stata 12.0软件进行Meta分析和敏感性分析。结果:共纳入8项研究,累计818例患者。Meta分析结果显示,对比单纯化疗,加用金复康口服液不仅可以提高临床总有效率[RR=1.20,95%CI(1.11,1.29),P<0.000 01],改善生存质量[RR=3.40,95%CI(1.37,8.44),P=0.008],而且有助于缓解化疗导致的不良反应,改善机体免疫功能。结论:临床证据显示,在化疗基础上加用金复康口服液对肺癌有一定辅助治疗作用。但本研究结论尚需更多设计合理、严格执行的大样本随机双盲对照试验加以证实。

慕晓艳,徐蔚杰,周蕾,姚逸临,李和根[2](2018)在《金复康治疗肺癌相关机制研究进展》文中进行了进一步梳理肺癌的形成发展与气阴两虚密切相关,气阴两虚是肺癌主要病因病机之一。金复康以益气养阴、补肾培本等扶正药物为主,佐以清热解毒药物,可以通过抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制癌基因蛋白表达,抑制癌细胞黏附、浸润转移能力,调节免疫系统功能等作用,稳定和缩小非小细胞肺癌,达到治疗肺癌的作用。

李思运[3](2013)在《中医补益法在肺癌化疗不良反应治疗中的运用》文中提出目的:通过研究中医补益法在肺癌化疗不良反应治疗中的运用,探讨肺癌化疗中如何正确使用补益法扶助机体正气,在明确应用原则和基本要点的基础上,初步揭示其运用的一般规律,以期达到减少不良反应、提高治疗效果、改善患者生活质量的目的,并为临床中西医结合治疗肺癌提供有益的理论指导。方法:本课题采用文献研究和临床回顾性病例分析的方法,从中西医对肺癌及化疗不良反应的认识、临床补益法如何辨证使用、常用治法及用药等三方面进行研究。论文内容分为三部分:第一部分,通过检索大量最新的国内外文献,探讨肺癌的中西医概念、病因病机、临床表现、诊断治疗及化疗不良反应的中医辨治概况;第二部分,对202例江苏省中医院肿瘤科收取的肺癌化疗中患者病历资料进行研究,以统计学处理为手段,探讨中医辨证分型的基本规律,并通过药物使用频次分析,总结其用药特点。第三部分,在文献和临床研究的基础上,阐明肺癌化疗中中医补益法运用的原则及要点。结果:中医学认为肺癌大都存在正气亏损、阴阳两虚的基础,加之化疗药物进一步损伤脾胃,脾胃虚衰以致气血生化乏源,更使正气亏虚、气血瘀滞,病症经久不愈。化疗药物损伤机体的机理可归纳为以下几点:①直接损伤机体正气,耗伤气血,损及阴阳,败坏精血,致使正气亏虚;②中伤脾胃,影响脾胃运化功能,导致气血生化乏源;同时,也可因脾失运化,而使痰湿内生;③损及肾脏,影响骨髓,致使肾精不足,骨髓空虚,影响气血精髓之生化;也可导致水液代谢紊乱,产生痰湿之证;④损伤肝脏致使肝阴不足,疏泄失调,导致肝郁气滞,血瘀内阻。本文研究结果表明,从统计数据显示肺癌化疗时中医治疗以补虚为方向,酌情辅以清热化痰、止咳平喘、活血化瘀、软坚散结等干预手段。因而提示:对肺癌化疗中的患者,中医总体的治疗原则为“扶正祛邪”。依据202例收纳病例的统计资料,大致辨证分为12个证型,其治疗方法以“益气养阴、补肺健脾”为基础,再根据患者证型的不同,予以清热、化痰、祛湿、活血化瘀、软坚散结等治法,合理配伍,多法联用,以达到增强化疗疗效、减轻化疗不良反应、提高生存质量、延长生存期等作用。临床运用补益法的原则是辨证施补、灵活变化、补而不滞,并应注意健脾助运、养阴生津、补肺益肾、养中寓调、缓补消积等要点。结论:中医补益法是肺癌化疗中的重要治法,在辨证基础上灵活选用恰当的补法,对肺癌化疗患者具有重要意义。临床以益气养阴、补肺健脾法最为常用,可酌情配合清热、化痰、祛湿、软坚等治法共同使用。

张丽云[4](2011)在《柴胡、苦参、大黄、黄柏对人宫颈癌细胞抑制效果的研究》文中指出宫颈癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一,目前采用的化学合成药物治疗宫颈癌的同时对机体也产生毒害作用。因此,筛选和寻求更为有效、低毒的天然药物成为研究热点。据报道,柴胡、苦参、大黄、黄柏的有效成分对某些肿瘤的预防和治疗具有一定作用,但对宫颈癌的治疗作用鲜有文献报道。本研究选取柴胡、苦参、大黄、黄柏的水提取物,旨在评估四种中药提取物对人源宫颈癌Hela细胞的作用,为探讨其作用机制、开发抗宫颈癌新药提供理论依据。本研究以体外培养的人宫颈癌Hela细胞为研究对象,用不同浓度的柴胡、苦参、大黄和黄柏水煎剂分别处理Hela细胞24h、48h后,采用光学倒置显微镜对Hela细胞的形态学变化进行观察;通过噻唑蓝法(MTT法)检测四种中药对Hela细胞生长的影响;并通过DNA琼脂糖凝胶电泳分析Hela细胞DNA分段变化,对四种中药水煎剂对Hela细胞作用的机制进行初步探讨。MTT检测发现,四种中药水煎剂对Hela细胞均有明显的抑制效果,且具有时间-浓度依赖性,其中柴胡水煎剂作用Hela细胞48h后抑制效果明显高于24h,80ml/L浓度组抑制率为52.90%;5ml/L苦参水煎剂48h抑制率即达到23.17%,最高抑制率为57.19%;80ml/L大黄水煎剂作用时间为48h时抑制率达55.06%;黄柏水煎剂对Hela细胞抑制效果明显,抑制率为8.43-62.85%。Hela细胞分别经浓度为5、10、20、40、80ml/L(生药浓度)的四种中药水煎剂处理24h和48h后的形态学观察可见:对照组细胞呈多边形或不规则状,细胞贴壁良好且链接紧密;柴胡组细胞变圆,生长稀疏,细胞体积增大;大黄组高浓度(80ml/L)组细胞贴壁率差,且48h破碎细胞明显增多;苦参、黄柏组细胞呈圆形,体积变小,细胞核浓缩,多数细胞脱落悬浮于培养基中,随着作用时间的延长,悬浮细胞增多。DNA琼脂糖凝胶电泳分析显示:苦参水煎剂10ml/L及以上浓度组均呈现明显的DNA梯形(ladder);黄柏水煎剂40ml/L、80ml/L两个高浓度作用Hela细胞48h有明显的DNA梯形条带出现;大黄水煎剂作用Hela细胞48h后80ml/L浓度组出现较弱DNA梯形;柴胡水煎剂处理Hela细胞48h后各组呈现DNA断裂,但梯级格局不明显。试验结果证明:苦参、黄柏、大黄水煎剂具有抑制Hela细胞生长并诱导其凋亡的作用。其中苦参和黄柏水煎剂对人宫颈癌Hela细胞有明显的抑制效果,最高抑制率达到55%以上,且凝胶电泳有典型的梯形条带,充分说明苦参和黄柏对Hela细胞有诱导凋亡作用,且在本研究采用的浓度范围内效果优于大黄和柴胡。本研究为四种中药抗肿瘤的进一步研究奠定了基础,同时也为开发和利用四种中药提供了有益的借鉴。

林铭堉[5](2011)在《《神农本草经》对研发抗肿瘤中药的贡献》文中指出研究目的:在现代最令人们恐惧且束手无策者,莫过于癌症了,随着人类寿命的延长,肿瘤的发病率与死亡率持续上升,2007年38个中国肿瘤登记地区恶性肿瘤发病率为276.16/10万,恶性肿瘤依然是威胁我国居民健康的重大疾病。全世界的专家学者,莫不极力寻找有效的药物。《神农本草经》乃我中华民族现存最古老的医典之一,她反映了东汉以前药物学术经验及其成就。为我国药物学的发展做出了巨大的贡献,是中医药理论体系形成的四大标志之一。她奠定了中药学基础,中药理论体系便由此发生、发展而成,为一门独立的分支学科。对中药学的发展产生深远影响,至今仍对中医各二级学科,特别是中医抗肿瘤中药的研发具有很大的实用价值。故期望透过整理《神农本草经》抗肿瘤中药的研究来抛砖引玉,以便利人们对抗肿瘤中药的研发,以减少人类的病痛,在延长人类生命及改善生存质量有所贡献。研究方法:1.选定《神农本草经》版本。目前《神农本草经》版本诸多,经再三比较其内容,本经部份是否完备及编辑方式是否正确,确定以张登本主编之《神农本草经》全注全译为本研究之主要参考本。并简单介绍中医肿瘤学的基本内容,以方便后面《神农本草经》药物分述的开展。2.本文所摘录研究之中药选定是依据:1)《神农本草经》各药原文中载有肿瘤相关病症,如症瘕、积聚、痈疽、肿瘤之中药。2)现代有关肿瘤的书籍:①周岱翰教授主编的《临床中医肿瘤学》,②刘春安、彭明主编的《抗癌中药大词典》,两书中记载与《神农本草经》共同之中药,作为本研究之素材。将选取出的中药按肿瘤常用治疗法则分为六大类。每药按《神农本草经》原文、来源、性味归经、功效、临床应用、化学成分、现代药理、临床研究八个部分,将相关文献中的资料整理归纳陈列,传统论述与现代医学对该药的相关记载,相互对照,作为临床研究治疗之参考。3.尝试归纳《神农本草经》抗肿瘤中药在常见肿瘤治疗中的运用;以及对某些常用、疗效显着的抗肿瘤中药进行深入、详细的介绍,包括详细的抗癌成分、抗癌药理、抗癌临床应用和现代剂型。结果:1.中医肿瘤学是运用中医学理论和方法,研究肿瘤疾病发生、发展及其防治规律的专门学科,其学术内容涵盖肿瘤的病因学、发病学、中医四诊在肿瘤早期诊断及判断预后中的应用等。中医肿瘤学作为中医学的重要分支,形成一门以中医特色为主的独特学术体系。中医肿瘤学有完整的中医肿瘤命名、病因、病机和辨证论治体系。2.《神农本草经》为我国最早的药物学专着,大约成书于西汉至东汉时期。文章讨论了《神农本草经》书名的来由,介绍了《神农本草经》目前各种辑本的情况。《本经》首创上、中、下三品分类法。三品分类法是基于当时人们对药物性能、功效和临床应用而得出的。此种分法对汉代及其以前按“草木虫石谷”“五药”分类法有所发展,并对后世本草学家对药分类法的形成提供了可资借鉴的经验和启发作用。随着本草分支学科的发展,后世医家发展了三品分类法,不断完善本草的分类法,如纲目分类法、或按功效治法分类法则等。本文选取目前临床较常使用且抗肿瘤功效较好之中药共115味(上品43味,中品45味,下品27味),按常见肿瘤常见治法活血化瘀法、化痰祛湿法、软坚散结法、以毒攻毒法、扶正固本法,将上述中药重新分类为:清热解毒类:干地黄、龙胆、白英、黄连、茵陈蒿、槐实、苍耳子、栝蒌根、苦参、茈胡、百合、知母、黄芩、茅根、紫草、败酱、地榆、牡丹、石苇、栀子、孽木、羚羊角、牛黄、大黄、草蒿、贯众、白头翁、羊桃、蓝实。活血化瘀类:薄黄、卷柏、丹参、徐长卿、王不留行、牡桂、麝香、木香、川芎、芍药、紫葳、桃核仁。化痰祛湿类:滑石、菖蒲、车前子、干姜、瞿麦、贝母、白芷、紫苑、橘柚、白鲜皮、枳实、厚朴、猪苓、五加皮、杏仁、白僵蚕、半夏、桔梗、旋复花、射干、泽漆、皂荚。软坚散结类:牡蛎、海藻、鳖甲、泽兰、乌贼骨、夏枯草、连翘、蜚虻。以毒攻毒类:雄黄、露蜂房、附子、莨菪子、芫花、鬼臼、巴豆、瓜蒂、斑猫、水蛭、虾蟆、(?)虫、甘遂、商陆。扶正固本类:人参、天门冬、甘草、菟丝子、女萎、麦门冬、薯蓣、薏苡仁、石斛、巴戟天、赤芝、黄芪、肉苁蓉、续断、五味子、枸杞、茯苓、杜仲、桑上寄生、女贞实、大枣、阿胶、龟甲、当归、元参、淫羊藿、狗脊、山茱萸、龙眼、鹿茸。每味中药按“本经内容、来源、性味归经、功效、临床应、化学成分、现代药理、临床研究”详细论述。3.详细介绍了《神农本草经》所载中药在肺癌、鼻咽癌、乳腺癌、食管癌、胃癌、大肠癌、原发性肝癌、子宫颈癌、卵巢癌、恶性淋巴瘤常见肿瘤中的临床应用;特别介绍了《神农本草经》里当前常用抗癌中药:苦参、青黛(蓝实)、雄黄、赤芝、黄芪、人参、斑蝥、蟾蜍的抗癌成分、抗癌药理、临床应用和现代新剂型。

周英雄[6](2011)在《健脾除痰法在非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及与顺铂联合增效减毒的机理研究》文中研究说明研究背景:肺癌是目前全世界最常见的恶性肿瘤,其中80%是非小细胞肺癌,其发病率和死亡率在城市列第一位,其中老年晚期肺癌患者约占2/3。铂类(顺铂等)被公认为治疗肺癌的一线药物,但顺铂作为一种细胞毒物,临床用药产生的副作用较多且严重。且老年晚期患者往往不能耐受铂类化疗。健脾除痰法以扶正治疗为主,且在临床中应用广泛,探讨其对铂类药物的增效减毒疗效及机制,可拓宽铂类药物的临床应用范围,具有重要的临床意义。研究目的:以“健脾除痰方”为工具药,以小鼠Lewis肺癌细胞LL/2为研究对象,从细胞实验和动物实验两水平,观察中药“健脾除痰方”罩独治疗,西药顺铂(Cisplatin)单独治疗,及顺铂与中药“健脾除痰方”联合治疗抗肿瘤的疗效,包括抑瘤率,小鼠存活率等,以明确中药“健脾除痰方”的抗癌疗效及与顺铂(Cisplatin)联合使用时之增效减毒作用,并初步探讨其作用机制。为临床上制定中西医联合治疗非小细胞肺癌(NSCLC)合理规范的治疗方案提供参考依据。研究方法:细胞实验:以MTT法确定最适当的LL/2细胞数,后分别测定不同浓度的TCM健脾除痰方及顺铂(Cisplatin)对LL/2细胞活力的影响。动物实验:首先做顺铂(Cisplatin)剂量的确定实验,确定最佳的顺铂使用剂量后,再做中药健脾除痰方和顺铂的综合实验。前者以12只LL/2荷瘤C57BL/6J小鼠为对象,分为对照组,5mg,6mg,7mg每组3只,用药后每3-4天测定小鼠肿瘤体积第15天处死。后者以24只LL/2荷瘤C57BL/6J小鼠为对象,分为对照组、TCM po组、Cisplatin ip组、TCM po+Cisplatin ip组、每组六只,用药后每一天测定小鼠的体重及肿瘤体积,21天后处死,取出心、肝、脾、肺、肾及肿瘤组织,称取瘤重,对各组织做成切片后行HE染色观察变化。研究结果:细胞实验:LL/2细胞做MTT实验时最佳的细胞数为3000/孔(96孔板)。小于200μg/ml的健脾除痰方对LL/2的细胞活力无影响;大于10μM的顺铂可明显抑制LL/2细胞增殖,促进肿瘤细胞调亡。动物实验:顺铂的最佳使用剂量为5 mg/kg。TCM与顺铂的联合实验结果如下:1.一般情况:瘤细胞接种后5天,于小鼠右后腿外侧接种部位可触及半颗米粒大小的瘤结节,之后逐渐长大。单纯化疗组及健脾除痰方各治疗组小鼠肿瘤生长的势头均不及荷瘤对照组。单纯化疗组及各治疗组小鼠在腹腔注射顺铂后,状况明显不及荷瘤对照组。与对照组比较,其余各组小鼠体重的增长速度和增长幅度均小于对照组。2.抑瘤作用:瘤体体积:Control组(3757.64±2222.95)>TCM po组(2622.18±1567.18)> TCM po+Cisplatin ip组(2170.40±871.60)> Cisplatin ip组(1311.81±655.55)。瘤重:Control组(3.4392±1.4857)> TCM po组(2.4205±1.3809)> TCM po+ Cisplatin ip组(2.3716±0.9884)> Cisplatin ip组(1.4295±1.1208)。抑瘤率:Cisplatin ip组(58.43%)> TCM po+Cisplatin ip组(31.04%)>TCM po组(29.62%)3.生存率:26天生存率:TCM po+Cisplatin ip组(83.30%)>TCM po组(66.67%)>Cisplatin ip组(50.00%)=Control组(50.00%)。4.病理切片观察:在显微镜下观察各组的心、肝、脾、肺、肾及肿瘤的切片,祗发现脾脏及肿瘤变化明显.其他器官变化不明显。a)脾脏切片检查:脾脏中T cell≥B cell rate:TCM po组75%> TCM po+ Cisplatin ip组60%> Control组33.3%> Cisplatin ip组0%。b)肿瘤坏死率(Tumor Necrosis rate):Cisplatin ip组100%> TCM po+ Cisplatin ip组80%> TCM po组25%> Control组0%。研究结论:健脾除痰方对LL/2肺癌具有抑制作用,且能提高存活率,其机制可能与促进T细胞增长,提高机体免疫力相关。健脾除痰方与顺铂同时使用无提高顺铂抑瘤疗效的作用,但二者联合应用比两药单用能明显提高存活率,其机制可能与中药健脾除痰方可减轻顺铂抑制免疫功能的副作用有关。

倪育淳[7](2009)在《清金得生片治疗老年晚期非小细胞肺癌的临床和实验研究》文中研究指明一、研究目的原发性支气管肺癌是一种严重威胁人类健康和生命的疾病。在20世纪末,肺癌已成为各种癌症死亡的首要原因。肺癌的发病随年龄增长呈上升趋势,在40岁后开始迅速升高,直到约70岁时达到高峰,而非小细胞肺癌占绝大多数。随着人口的平均寿命延长,社会老年化日益严重,老年肺癌的发病率逐年增加,对晚期老年NSCLC患者的研究逐步引起重视。目前西医学认为,对于老年非小细胞肺癌的治疗,单纯年龄因素不是肿瘤三大治疗手段——手术、化疗、放疗的禁忌症。但老年人由于脏器储备功能低下,常规的三大治疗手段受到限制,效果并不理想。老年人对治疗的耐受性以及维持较好的生活质量是治疗中必须重视的首要问题。在中国,中医药是治疗老年肺癌的一个重要手段,在肺癌的综合治疗中发挥了独特的作用,已被认为是肺癌综合治疗的五大治疗手段之一。中医中药在稳定瘤灶、调节机体功能、增加免疫力、改善临床症状、增加食欲、减轻放、化疗毒副作用、提高生活质量、延长带瘤生存期等方面有独特疗效。老年非小细胞肺癌患者是中医药治疗的优势人群,本研究拟观察益气除痰法的代表方药清金得生片治疗老年晚期非小细胞肺癌的各项指标,为评价中医药治疗老年非小细胞肺癌的临床疗效,规范、合理地治疗老年肺癌探索道路。转移是恶性肿瘤的基本生物学特征之一,是导致肿瘤治疗失败和患者死亡的最重要因素。随着肿瘤细胞生物学及分子生物学的研究进展,新的肿瘤治疗途径和靶点被发现,为中医药抗癌转移研究提供了新的思路和方法。中医药抗癌转移的研究仍处于起步阶段,尤其是对中药诱导失巢凋亡的研究。在实验方面,本论文拟研究清金得生片含药血清对人A549肺腺癌细胞失巢状态的影响,并探讨其对失巢凋亡密切相关的P-akt表达的调节作用。二、研究方法(一)临床研究:共完成合格病例48例,其中治疗组(清金得生片组)24例,对照组(安康欣胶囊组)24例,治疗前两组患者性别、年龄、病理类型、分化程度、临床分期、纳入前体重、卡氏评分和接受治疗情况相比较,经统计学处理,P>0.05,差异无显着性,具有可比性。治疗组采用清金得生片治疗,对照组采用安康欣胶囊治疗,疗程2个月。观察两组瘤体、症状评分及体重等变化情况,检测两组治疗前后的CEA和ESR的变化,并进行药物毒性分析。(二)实验研究:采用多聚-HEMA悬浮培养A549腺癌细胞,模拟体内癌细胞失巢状态,以高中低含药血清、空白血清、顺铂分别作用于A549腺癌细胞,用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,Western-blot免疫印迹法检测各组细胞P-akt的表达。三、研究结果1、临床研究:(1)治疗后,两组患者瘤体变化情况比较,均未有病例达到CR和PR,但治疗组和对照组的瘤体稳定率分别达到79.17%和75%,经统计学处理,差异无显着性,但说明中药在稳定瘤体方面有一定优势。(2)两组患者临床症状的改善情况比较,治疗组在症状改善方面,有效率为54.17%,稳定率为29.17%,无效为16.67%,对照组在症状改善方面,有效率为50.00%,稳定率为33.33%,无效为16.67%,经χ2检验,P>0.05,差异无显着性。治疗组在改善口干、缓解胸痛方面,疗效较对照组明显(P<0.05)。(3)两组患者体力状况的比较,在改善患者体力方面,治疗组和对照组的显效率和无效率相同,分别为4.17%和12.5%,治疗组有效率为33.33%,稳定率为50.00%;对照组有效率为20.83%,稳定率为62.50%,两组比较,经统计学处理,P>0.05,差异无显着性。(4)两组体重均无恶化病例,治疗组和对照组患者的体重稳定率分别为83.33%和87.50%,经统计学处理,P>0.05,两组比较差异无显着性;两组体重好转率分别为16.67%和12.5%;经统计学处理,P>0.05,两组比较差异无显着性。(5)两组患者肿瘤指标CEA和ESR的比较,经统计处理,治疗组和对照组治疗前CEA、ESR相比,差异无统计学意义;治疗组和对照组CEA治疗后都有下降趋势,但P>0.05,无统计学意义,治疗组治疗前后和对照组治疗前后的ESR相比较,P<0.01,有统计学意义。说明治疗后,两组患者的血沉有明显的下降,病情趋于稳定。(6)对清金得生片药物不良反应的观察发现,清金得生片治疗前后患者血分析(WBC、NEU、HGB、PLT)、肝功能(AST、ALT)、肾功能(BUN、Cr)相比,经t检验,P>0.05,差异无显着性,说明清金得生片治疗后未见明显的血液毒性和肝肾功能损害。(7)临床研究未发生严重不良事件和严重不良反应。综合本临床研究的结果,我们可以看出无论清金得生片还是安康欣胶囊对晚期老年非小细胞肺癌患者具有稳定瘤体作用、改善临床症状及评分,降低肿瘤指标CEA和ESR,稳定病情,而且无明显毒副反应,较好反映了中医药治疗癌症稳定病情,改善生活质量的优势。清金得生片组在改善口干、缓解胸痛方面,疗效较安康欣胶囊组明显。2、实验研究:(1)流式细胞仪检测结果:各中药含药血清组A549细胞的凋亡率均高于空白血清组,中药含药血清组随着剂量的增加,凋亡率也逐渐增加,说明中药清金得生片具有诱A549细胞凋亡的作用,而化疗药顺铂组的凋亡率最高。(2)Western-blot免疫印迹法检测结果:顺铂组的P-akt表达最低,为32,与空白血清组和低剂量组比较,均显着性降低;高剂量(30%)含药血清组P-akt表达为59,与空白血清组和低剂量组比较,均显着性降低(p<0.05);中剂量组(20%)的P-akt表达为69,低剂量(10%)含药血清组的最高,为127,空白血清组的蛋白相对表达为122;在中药含药血清组中,随着浓度的逐渐降低,P-akt表达呈逐渐增高趋势。结合既往研究,分析认为清金得生片有诱导A549人腺癌细胞失巢凋亡的作用,其机制可能为中药含药血清通过抑制P-akt的活化,降低了下游端粒酶活性,下调了抗凋亡基因bcl-2的表达,从而诱导癌细胞的凋亡。

李晶[8](2008)在《启膈方抗胃癌转移机制的研究》文中研究表明胃癌是常见的恶性肿瘤,是消化系发病率最高的肿瘤,约占消化道肿瘤的62%。我国是胃癌高发国家,发病率远高于欧美西方国家。我国每年约有17万人死于胃癌,占消化系统肿瘤死亡人数50%以上。尽管随着医疗水平的提高,综合治疗的运用,胃癌的5年生存率有所提高,但总的来说疗效仍不尽人意。究其原因胃癌早期无典型表现,患者就诊时多为进展期胃癌,手术治疗后多出现转移而导致治疗失败。据报道约40%—60%的患者发生胃癌复发和转移,寻求防治胃癌转移的可靠方法和药物是我们面对的迫切问题。胃癌转移的主要途径为血道转移、淋巴道转移、腹膜种植转移。其中血道转移的危害最大,通过血液循环系统胃癌细胞可在其他脏器形成转移灶,破坏脏器功能最终导致死亡。肝、肺是胃癌血道转移最易发生的器官,文献报道胃癌肝转移的发生率为40-50%,肺转移的发生率为40%左右。肝、肺转移后多以全身化疗为主,尽管结合中药、手术、放疗、免疫治疗,其中位生存时间也仅为6-9月。由此可见,防止转移的发生是治疗胃癌的重要课题,对延长胃癌生存期有重要意义。肿瘤转移的机制及抗肿瘤转移药物的研究是肿瘤研究的热点,肿瘤转移的基本过程已大概清楚,抗肿瘤转移药物集中在抗新生血管、抗血小板聚集、抗血小板活化、抑制转移基因表达、提高免疫等方面,多数处于实验研究阶段,而且这些药物作用途径、作用靶点单一,对于多步骤、多环节、多因素的胃癌转移过程,其抑制转移的作用显得杯水车薪。中药复方是在辩证论治的基础上的合理组合,它含有多种复杂成分,有多种治疗作用。由此,我们从转移的基本过程及相关因素,研究中药复方启膈方的抗转移作用。启膈方是根据《医学心悟》中治疗噎嗝的启膈散化裁而成,临床用于治疗胃癌、食管癌患者。发现启膈方用于晚期胃癌患者可延长生存时间,防止、延缓转移灶的出现;用于胃癌术后患者可防止转移,延长无病生存时间。于是我们考虑该方有抗胃癌转移的作用,本研究从胃癌血道转移的过程入手,探讨启膈方抑制转移的作用环节及作用靶点。本课题从体外实验、体内实验两个方面研究启膈方的抗转移作用。体外培养高侵袭胃癌、食管癌瘤株,启膈方干预后,观察对肿瘤细胞转移能力的影响。体内动物实验,用高肺转移小鼠胃癌瘤株FC接种615小鼠后灌服启膈方,观察肺转移抑制率及对相关转移因子的影响。本课题分为四部分完成:第一部分启膈方对人胃癌细胞MGC、人食管癌细胞EC109黏附的影响目的:观察启膈方对人胃癌细胞株MGC与人胃癌细胞株MGC之间、人食管癌细胞株EC109与人食管癌细胞株EC109之间同质黏附的影响。用不同方法检测比较启膈方组、5FU组、空白对照组的黏附率、聚集体形成率及E-钙黏蛋白表达的差别。方法:复苏人胃癌细胞株MGC、人食管癌细胞株EC109,待细胞呈对数生长期时,随机分为5组。启膈组加入启膈方,使其终浓度为15mg/ml、30mg/ml、60mg/ml,定为启膈方小、中、大剂量组。5FU组加入5FU,使其终浓度为50ug/ml,对照组加入PBS。用机械法检测各组细胞20、40、60分钟黏附情况,计算黏附率。用3-H-Tdr标记的放射性核素法检测各组细胞30、60分钟时液闪仪测定的放射强度,计算黏附率。用机械法检测各组细胞2、4、6、12小时聚集体形成情况,计算聚集体形成率,并测量各组细胞聚集体的最大面积。流式细胞术测定各组E-钙黏连蛋白的相对表达量。结果:机械法检测MGC胃癌细胞,EC109食管癌细胞在20min、40min、60min的黏附率。启膈方各剂量组的黏附率均高于5FU组、空白对照组。启膈方各剂量组与空白对照组、5FU组之间差异有显着性(P<0.01),空白对照组、5FU组之间差异无显着性(P>0.05),启膈方各剂量组之间差异无显着性(P>0.05)。放射核素法检测MGC胃癌细胞、EC109食管癌细胞30分钟、60分钟黏附率,启膈方各剂量组均高于5FU组、空白对照组,启膈方各剂量组与空白对照组、5Fu组之间差异有显着性(P<0.05),空白对照组、5FU组之间差异无显着性(P>0.05),启膈方各剂量组之间差异无显着性(P>0.05)。MGC细胞、EC109细胞启膈方各剂量组的各时间点聚集体形成率、聚集体面积均大于空白对照组、5FU组(P<0.05),5FU组小于空白对照组(P<0.05),启膈方各剂量组之间差异无显着性(P>0.05)。流式细胞仪检测E-钙黏蛋白含量启膈方各剂量组均高于空白对照组、5FU组(P<0.05),空白对照组与5FU组之间差异无显着性(P>0.05),启膈方各剂量组之间差异无显着性(P>0.05)。结论:启膈方可提高MGC人胃癌细胞、EC109人食管癌细胞的黏附率、聚集体形成率、提高了同质黏附能力,5FU对同质黏附率无明显影响,长时间作用于肿瘤细胞后影响聚集体的形成。启膈方可提高MGC人胃癌细胞、EC109人食管癌细胞E-Cadherin蛋白的表达。第二部分启膈方对人胃癌细胞MGC、人食管癌细胞EC109增殖、运动、分泌MMP-2、MMP-9的影响目的:观察启膈方对MGC、EC109细胞增殖能力、运动能力、分泌MMP-2、MMP-9的抑制作用,比较5FU组MGC、EC109细胞增殖抑制率,运动速度、MMP-2、MMP-9活性的不同。方法:MTT法检测肿瘤细胞的增殖。在96孔板上每孔加入细胞悬液100ul,细胞数为2×103,分为启膈方、5FU和空白对照组,启膈方组分别加入启膈方,使其终浓度为15mg/ml、30mg/ml、60mg/ml定为小、中、大剂量组,5FU组加入5FU注射液,使其终浓度为50ug/ml,在空白对照组加入PBS。培养箱中孵育24、48、72h,培养结束前4小时加入MTT,检测各时间点的OD值,计算增殖抑制率。琼脂滴法检测肿瘤细胞运动能力。制作MGC、EC109细胞琼脂悬液,每孔100ul加入24孔板,4℃冷却凝固,测基础半径。分为启膈方小、中、大剂量组、5FU和空白对照组,各组浓度同MTT法。测量各组细胞的运动半径,计算各组细胞的运动速度。明胶酶谱法检测肿瘤细胞分泌MMP-2、MMP-9活性。分组同上,培养24小时后取上清,走聚丙烯酰胺电泳,根据各组条带灰度分析MMP-2、MMP-9活性。结果:启膈方对MGC、EC109细胞体外增殖有明显的抑制作用,并随着药物浓度增加其抑制作用更加明显。启膈方大剂量组对肿瘤抑制作用最强,加药培养MGC细胞24小时,抑制率为60.0%,72小时抑制率最高为77.1%。启膈方各剂量组、5FU组与对照组之间差异均有显着性(P<0.05)。启膈方大剂量组与5FU组差异无显着性(P>0.05)。培养12小时检测各组细胞运动活性均较弱,各组间差异无显着性。培养24小时后,对照组运动能力明显增强,运动速度明显较启膈方各组快,表现出较强的运动活性。5Fu组细胞运动活性较启膈方组增强,差异有显着性(P<0.05)。启膈方各组之间差异无显着性(P>0.05)。空白对照组细胞分泌MMP-2、MMP-9活性明显较启膈方各组、5FU组增强(P<0.05),其中MMP-2活性增强更明显(P<0.01),启膈方大剂量组活性均较5FU组减弱,差别有显着性(P<0.05),中药各剂量组之间差异无显着性(P>0.05)。结论:启膈方可抑制MGC、EC109肿瘤细胞的增殖,启膈方大剂量与5FU对肿瘤细胞增殖MMP-2、MMP-9的抑制作用无差异。启膈方可抑制MGC、EC109肿瘤细胞的运动能力,减慢其运动速度。5FU组细胞运动活性较中药组增强。启膈方可抑制MGC、EC109肿瘤细胞分泌MMP-2,MMP-9的活性。第三部分启膈方对胃癌荷瘤小鼠肺转移的抑制作用目的:观察启膈方对胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,通过计算肺转移结节,观察启膈方对胃癌荷瘤小鼠肺转移的抑制作用。并比较5FU对胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长及肺转移的抑制作用。方法:取小鼠胃癌FC细胞悬液分别接种在30只615小鼠右腋皮下,每只0.1ml(1×106个细胞)。接种后随机分为,启膈方、5FU、空白对照三组,每组各10只。接种3天后中药组每天灌服启膈方口服液0.2ml(0.3g),化疗组每天腹腔注射5FU0.2ml(200ug),对照组每天灌服生理盐水0.2ml。16天后处死小鼠,剥离肿瘤组织,称瘤重,测肿瘤直径,计算肿瘤体积。取出肺组织用10%中性福尔马林固定,24-48小时后观察,肺组织表面的转移结节,比较各组转移结节数量,计算肺转移抑制率。石蜡包埋切片(厚度4um),常规HE染色,比较各组肺内转移程度。结果:启膈方组、5FU组瘤重、瘤体积、肿瘤直径明显低于对照组(P<0.01),启膈方组、5FU组之间差异无显着性(P>0.05)。直接计数肺组织表面白色的转移结节,对照组小鼠100%发生肺转移。启膈方组肺转移结节数少于对照组(P<0.01)其中有4例未见转移结节,转移程度明显较对照组轻(P<0.01)。与5FU组比较,启膈方组肺转移结节数、肺转移抑制率也优于5FU组(P<0.05),5FU组中有1例未见转移结节,5FU组与对照组的肺转移结节数、肺内转移程度、肺转移抑制率比较差异均有显着性(P<0.05)。结论:启膈方可抑制胃癌荷瘤小鼠肿瘤的生长,减少肺转移的发生,减轻肺转移的程度。5FU也可减少肺转移的发生,减轻肺转移的程度,但转移抑制作用不如启膈方。第四部分启膈方对胃癌转移相关因子的影响目的:观察启膈方对小鼠胃癌移植瘤的黏附分子E-Cad、蛋白水解酶MMP-2、MMP-9、血管内皮生长因子VEGF、微血管密度MVD表达的影响。检测小鼠血浆GMP-140、TXB2水平,比较各组差别。方法:分组、造模、灌药同第三部分实验。摘除眼球取血,获得血浆备用,处死小鼠,剥离肿瘤组织。常规用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋切片(厚度4um)。用SP免疫组化法检测各组肿瘤组织E-Cad、MMP-2、MMP-9、VEGF、CD34的表达,用放射免疫法检测各组小鼠血浆TXB2水平,用酶联免疫法检测小鼠血浆GMP-140水平。结果:各组瘤组织均有E-钙粘蛋白不同程度的表达,启膈方组E-cadherin的表达强于空白对照组、5FU组,差异有显着性(P<0.01),5FU组E-cadherin的表达强于空白对照组,差异有显着性(P<0.05)。对照组MVD明显高于启膈方组(P<0.01)和5FU组(P<0.05),启膈方组低于5FU组,差异有显着性(P<0.05)。启膈方组、5FU组的VEGF表达低于对照组,有显着性差异(P<0.05),5FU组与启膈方组比较无显着性差异(P>0.05)。各组瘤组织均有MMP-2、MMP-9不同程度的表达,启膈方组的MMP-2、MMP-9表达弱于空白对照组,有显着性差异(P<0.05),5FU组的表达弱于对照组有显着性差异(P<0.01),与启膈方组比较无显着性差异(P>0.05)。各组小鼠血浆启膈方组、5FU组GMP-140与TXB2含量均明显低于对照组,尤其是血浆GMP-140含量,启膈方组、5FU组与对照组之间有非常显着性差异(P<0.01),启膈方组、5FU组之间差异无显着性。血浆TXB2水平,启膈方组低于5Fu组,差异有显着性(P<0.05)。结论:启膈方可通过提高黏附分子E-Cad的表达,降低蛋白水解酶MMP-2、MMP-9的表达,降低血管内皮生长因子VEGF表达、降低微血管密度MVD,降低小鼠血浆GMP-140、TXB2水平,而起到抑制转移的作用。

郝晓娜[9](2007)在《复方木鸡冲剂对肿瘤细胞诱导凋亡和分化作用的分析》文中研究指明目的:癌症是威胁人类生命的头等杀手。目前恶性肿瘤的药物治疗中是以化学药品为主,但化学药品的开发费用昂贵,毒副作用大,多有不同程度的致突变毒性。因此,人们把目光转向中药,试图从天然成分中寻找毒副作用小,作用独特的抗肿瘤药物。中药抗肿瘤作用具有多靶点、多环节、多效应的特点,可作用于肿瘤发生、发展的多个环节,同时其毒副作用低,能提高机体免疫力,不易产生耐药性,为近年来研究的热点。我国是世界上肝癌的高发区,而且高发的趋势十分严峻,近20年来我国肝癌的死亡率增加了41.7%。我国肝癌主要集中在东南沿海一带,如江苏、福建、广东、广西等省份。全世界每年大约有125万人死于肝癌,其中有近一半发生在我国。据20世纪90年代的统计,中国肝癌的世界人口调查死亡率在男性为33.7/万,分别是日本的2.2倍,意大利的4.6倍;在女性为12.3/万,分别为日本的3.1倍,意大利的5.1倍[1]。我国白血病发病率为2.76/10万,且白血病是儿童期最常见的恶性肿瘤,可发生于儿童的各年龄段,严重威胁着患儿生命[2]。目前对白血病的治疗仍以化疗为主,但仍有部分患者诱导治疗未获完全缓解率(CR)或缓解后复发,大多数患者很难达到长期无病生存,导致临床治疗的最终失败[3]。因而如何进一步提高诱导缓解率和持续完全缓解率(CCR),是目前急性白血病研究领域中的难点和热点。HepG2是来源于人肝癌的细胞株,形态类似于正常肝实质细胞,所含有的生物转化酶系与人正常肝实质细胞的生物转化酶系具有同源性。但生物学特性比正常肝实质细胞活跃,可以大量分泌肝胚胎期的蛋白,如甲胎蛋白(AFP),也可少量分泌正常肝实质细胞的蛋白,比用来源于啮齿类动物的活化系统具有更高的可靠性。HL-60细胞是人早幼粒白血病细胞株,是诱导细胞分化比较理想的实验模型,在诱导分化过程中除了有明确的形态改变外,也有可靠的反映细胞功能的细胞化学指标,特别是反映细胞吞噬功能的NBT(硝基四氮唑蓝)还原能力的增强是公认的粒系细胞分化的标志。实验通过对复方木鸡冲剂作用于人肝癌细胞HepG2、人白血病细胞HL-60等细胞后,观察肿瘤细胞在生长、凋亡和分化方面的变化,旨在分析复方木鸡冲剂对肿瘤细胞的杀伤作用及其机制,为中药在临床上的广泛应用提供有关的实验和理论依据。方法:1.对肿瘤细胞的生长抑制作用:1.1细胞培养:HepG2、Hela和A549为贴壁生长的细胞,HL-60、K562和Raji为悬浮细胞,HepG2细胞接种在DMEM全培养基中,23天换液一次;其余细胞接种在RPMI-1640全培养基中,37℃,5%CO2,饱和湿度孵箱中孵育,每2天换液一次,取对数生长期细胞进行实验。1.2 MTT比色法检测细胞增殖活性:取对数生长期细胞进行实验,实验设空白对照组,阳性药物对照组(β-榄香烯)及木鸡冲剂组,每组设4个平行孔。各种细胞分别培养24h,48h,72h后进行检测,在自动酶标仪上以570nm波长测定各孔OD值,计算药物对肿瘤细胞的生长抑制率:抑制率(fa)=(1-实验组平均OD值/空白对照组平均OD值)×100% 2.诱导凋亡的检测: 2.1细胞形态学观察:取对数生长期的细胞,木鸡冲剂作用后,光镜下观察用药前后细胞形态的变化。2.2 DNA琼脂糖凝胶电泳:取对数生长期HL-60细胞进行实验,实验设空白对照组,阳性药物对照组及木鸡冲剂组,分别在培养24h和48h后,收集细胞,提取基因组DNA,在1.5%琼脂糖凝胶上进行电泳,紫外灯下观察结果。2.3流式细胞仪(Annexin V/PI双染法)检测细胞凋亡:收集药物作用后的细胞,PBS冲洗两次,然后用1×Binding Buffer悬浮细胞,加入Annexin V-EGFP和PI,在室温下避光反应15min后上机检测凋亡发生情况。2.4流式细胞仪分析细胞周期:收集药物作用后的细胞,PBS冲洗两次,用70%乙醇4℃固定过夜,与含RNase的Tris-HCl缓冲液(pH7.4)孵育30min,PI染色30min,流式细胞仪分析DNA含量及细胞周期。2.5应用免疫细胞化学的方法检测Bcl-2和Caspase-3表达情况:收集药物作用24h、48h和96h后的HL-60细胞,按照免疫细胞化学试剂盒说明书进行操作,显微镜下观察药物作用后蛋白的表达情况。3.诱导HL-60细胞分化的检测:3.1形态学观察:收集药物作用48h后的细胞,涂片,瑞氏-姬姆萨染色,显微镜下观察药物作用后细胞的形态变化,常规培养细胞作为空白对照。3.2硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验:收集药物作用48h后的细胞,加入NBT溶液和佛波酯(TPA)溶液作用后,取细胞悬液涂片,瑞氏-姬姆萨染色,油镜下随机计数200个细胞,其中含有蓝紫色斑的为阳性细胞,计算阳性细胞所占百分比,实验重复三次,计算平均值。3.3过氧化物酶(POX)染色:收集药物作用后48h后的细胞,做过氧化物酶染色,观察胞浆中过氧化物酶的变化情况,常规培养细胞作为空白对照。3.4流式细胞仪检测细胞表面分化抗原CD11b、CD14:收集药物作用后的HL-60细胞,离心弃上清,加人荧光标记的CD14、CD11b抗体进行标记,用流式细胞仪检测,常规培养细胞作为空白对照。3.5免疫细胞化学方法检测细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子P21WAF1的表达:用免疫细胞化学方法检测经复方木鸡冲剂作用24h、48h和96h后和空白对照组的HL-60细胞P21WAF1的表达情况。4.诱导HepG2细胞分化的检测:4.1形态学观察:收集药物作用48h后的细胞,涂片,瑞氏-姬姆萨染色,显微镜下观察药物作用后细胞的形态变化,常规培养细胞作为空白对照。4.2全自动生化分析仪检测GGT(γ-谷氨酰转氨酶)、ALP(碱性磷酸酶):收集药物作用48h后的细胞上清液,全自动生化分析仪检测GGT、ALP的变化,实验重复三次,计算平均值。4.3 AFP(甲胎蛋白)分泌量的测定:收集药物作用48h后的细胞上清液,放射免疫测定法检测AFP的含量,实验重复三次,计算平均值。4.4免疫细胞化学方法检测细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子P21WAF1的表达:对数生长期的HepG2细胞经复方木鸡冲剂作用24h、48h和96h后,收集药物作用组和空白对照组的细胞,按照免疫细胞化学试剂盒说明书进行操作,显微镜下观察药物作用后P21WAF1的表达情况。结果:1.复方木鸡冲剂对肿瘤细胞生长抑制的影响:复方木鸡冲剂对K562、Hela和A549细胞的生长抑制有明显的时间依懒性,随药物作用时间的延长抑制率升高,药物作用24h,48h和96h后,对K562细胞的生长抑制率分别为74.3%,85.6%和91.7%, Hela细胞为54.5%,81.8%和87.6%, A549细胞为33.3%,60.6%和74.3%;而对HL-60、HepG2和Raji细胞的影响随时间的变化抑制率变化不明显,对HL-60细胞的抑制率为64.3%,61.2%和68.5% ; HepG2细胞为63.0%,49.6%和46.6%,Raji细胞为80.5%,72.9%和76.9%,这些结果均显示木鸡冲剂组与对照组相比有显着性差异(p<0.01);除HL-60细胞外,木鸡冲剂组对其他三种细胞三个时间点的生长抑制率也明显高于阳性药物对照组(β-榄香稀)(p<0.01)。2.诱导凋亡的检测:2.1细胞形态的变化:复方木鸡冲剂作用于HL-60细胞48h后,倒置显微镜下观察可见空白对照组细胞数量较多,形态规则,近似圆形,透亮;而药物组细胞数量明显减少,细胞体积固缩,边缘不规则,胞膜有小泡形成,胞浆内出现黑色颗粒,胞核固缩,核质比减小。2.2复方木鸡冲剂作用HL-60细胞后的DNA变化:HL-60细胞经复方木鸡冲剂和β-榄香烯作用24h后出现DNA“梯形带”(DNA ladder),空白对照组DNA无“梯形带”出现。2.3细胞凋亡率的检测:流式细胞仪检测显示,复方木鸡冲剂作用HL-60细胞后,细胞发生凋亡,以木鸡冲剂作用24h的凋亡率增加最明显,达到42.31%,且以细胞早期凋亡(Annexin V+/PI-)为主,与空白对照组比较凋亡率增高,有显着性差异(p<0.05)。复方木鸡冲剂作用HepG2细胞24 h和72 h后,细胞都出现了较为明显的凋亡现象,凋亡率分别为47.07%和48.47%,与空白对照组比较凋亡率增高,有显着性差异(p<0.05)。其中,处理24 h后早期凋亡率和晚期凋亡率差别不大,继续作用72 h后以晚期凋亡细胞为主。2.4复方木鸡冲剂处理HL-60细胞后,细胞周期的变化:流式细胞仪检测可见复方木鸡冲剂作用48h后,有特征性的凋亡峰即亚二倍体峰形成,比例为5.4%,空白对照组为2.5%。同时显示G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,呈现明显的G0/G1期阻滞现象。2.5复方木鸡冲剂处理HL-60细胞后,Bcl-2和Caspase-3的表达情况: Bcl-2的表达在空白对照组呈深棕黄色,而在实验组随着时间延长,颜色逐渐变淡,48h呈浅黄色;Caspase-3的表达在空白对照组呈浅黄色,而在实验组随着时间延长,颜色逐渐变深,48h呈棕黄色。3.复方木鸡冲剂诱导HL-60细胞分化的检测:3.1复方木鸡冲剂作用后HL-60细胞形态学的变化:未作处理的HL-60细胞主要是幼稚的未分化的早幼粒细胞,而经复方木鸡冲剂作用后,中幼粒,晚幼粒细胞增多,并出现杆状核、分叶核粒细胞,表明复方木鸡冲剂促进了HL-60细胞向成熟方向分化。3.2复方木鸡冲剂对HL-60细胞NBT还原能力的影响:复方木鸡冲剂作用后,HL-60细胞中,具有NBT还原能力的细胞明显增多。3.3过氧化物酶(POX)染色:未作处理的HL-60细胞胞浆中无蓝黑色颗粒,而经复方木鸡冲剂作用后,细胞中布满蓝黑色颗粒,表明细胞趋向成熟。3.4复方木鸡冲剂对HL-60细胞表面CD分子的影响:HL-60细胞经复方木鸡冲剂作用72h后,CD11b表达明显增加,CD14变化不大,说明复方木鸡冲剂有诱导HL-60向粒细胞系成熟阶段分化功能。3.5复方木鸡冲剂对HL-60细胞P21 WAF1蛋白表达的影响:HL-60细胞经复方木鸡冲剂作用后,P21 WAF1蛋白定位于HL-60细胞胞浆或胞核中,呈粗大的棕黄色颗粒状。空白对照组HL-60细胞P21 WAF1蛋白表达为阴性。4.复方木鸡冲剂诱导HepG2细胞分化的检测:4.1光镜下观察发现经复方木鸡冲剂处理48h的HepG2细胞形态由原来的卵圆形、多边形为主转变为以长梭形或树枝状,有突起伸出为主,细胞核变小,固缩而深染,染色质凝集,核仁数目变少,胞浆浓缩而深染,核质比例降低。4.2复方木鸡冲剂作用HepG2细胞48h后,上清液中GGT浓度降低,但p>0.05,无统计学差异;ALP浓度由作用前的6.34±0.24U/L升高为12.03±0.18U/L,作用后较作用前有明显升高(p<0.05)。4.3复方木鸡冲剂作用HepG2细胞48h后,上清液中AFP含量降低。4.4复方木鸡冲剂对HepG2细胞P21 WAF1蛋白表达的影响:P21 WAF1蛋白定位于HepG2细胞胞浆或胞核中,呈粗大的棕黄色颗粒状。空白对照组P21 WAF1蛋白表达为阴性。结论:1.复方木鸡冲剂对HepG2、K562、A549、HL-60、Raji以及Hela细胞的增殖有明显的抑制作用,且对K562、Hela和A549细胞的生长抑制有明显的时间依赖性。提示复方木鸡冲剂有较广泛的杀瘤活性。2.复方木鸡冲剂对HepG2细胞、HL-60细胞有明显的诱导凋亡作用,诱导凋亡的机制与Bcl-2表达下调和caspase-3表达上调有关。3.复方木鸡冲剂对HepG2细胞、HL-60细胞有诱导分化的作用,诱导分化的机制与p21WAFI表达上调有关。

崔海兰[10](2006)在《平肺口服液调节晚期非小细胞肺癌患者营养代谢的研究》文中指出目的:肺癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤之一,在世界许多发达国家常见恶性肿瘤中肺癌患者男性居首位,女性居第二位,并且发病率有逐年上升的趋势。第一届中国国际肺癌研讨会的资料表明,中国肺癌发病人数已居世界第一。目前,在我国全部恶性肿瘤中肺癌发病率由1970年的世界第四位跃居第一位,一些环境污染重的大城市已成为“肺癌大户”令世界瞩目。约80%的肺癌病人在诊断后一年内死亡,中位生存期一般在6个月左右,总的5年生存率只有5-10%。在肺癌各类型中,非小细胞肺癌(NSCLC)所占比例高达80%以上,且其发病率持续升高,目前备受关注。早期肺癌手术治疗疗效较佳,但是临床上大约有70-80%的肺癌患者在确诊时已属晚期,能手术的病例很少。目前治疗多以放疗和化疗为主,放化疗虽有一定的近期疗效,但常因伴有明显的毒副作用,且缓解期短,对机体免疫功能及抗病能力常带来损伤,影响生存质量,不能明显延长患者生存期,尤其对晚期肿瘤营养不良患者缺乏有效方法。近年来强调早期发现、早期治疗,中晚期则主张多学科多方法的综合治疗,以提高疗效,延长生存期,提高生存质量。其中,探索研究中医药及中西医结合治疗肺癌是一条重要的途径。近20年来,我国许多医院开展了中西医结合治疗肿瘤的临床研究,根据患者的全身及局部具体情况,把中医扶正祛邪的方法,与西医的手术、放疗、化疗等方法进行有机结合,综合治疗,取长补短,在延长患者生存时间和维护、改善癌症患者的生活质量方面都取得一定进展,显示了中医药在肿瘤治疗中的特色与优势。平肺口服液是导师李佩文教授总结多年治疗肺癌的临床经验而组方的具有益气养阴、清肺化痰、解毒散结功效的纯中药制剂。临床观察初步证实具有提高患者生活质量、增加体重、稳定肿瘤等作用。实验研究初步证明平肺口服液可抑制肿瘤组织中血管密度,抑制血管内皮生长因子的表达,上调肺癌患者的免疫状态,延长荷瘤小鼠的生存期。本课题在以往研究的基础上,重点观察平肺口服液对晚期非小细胞肺癌营养代谢方面的影响,为晚期肺癌营养不良患者提供新的治疗药物,也为平肺口服液的进一步开发提供临床和实验依据。方法:本课题分临床观察和动物实验两部分探讨其疗效和作用机理。在临床研究部分,非随机对照研究单纯放化疗组33例病人和放化疗加平肺口服液组35例病人的营养代谢和免疫功能。主要检测病人治疗前后体重变化、血清总蛋白(TP)、总胆固醇(CHO)、T淋巴细胞活性(CD3+)、T辅助杀伤细胞(CD3+CD8+)、T辅助诱导细胞(CD4+)/T辅助杀伤细胞(CD8+)比值。在此基础上,对入组68例病人进行随访调查,利用COX风险模型,对入组病人进行生存期分析。在动物实验部分,重点观察平肺口服液对肺癌恶病质小鼠营养代谢和免疫功能的影响。利用荷瘤小鼠肺癌恶病质模型,以甲羟孕酮为对照药物,观察平肺口服液治疗后,小鼠治疗

二、益肺抗瘤饮对癌细胞凝集素受体表达的影响(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、益肺抗瘤饮对癌细胞凝集素受体表达的影响(论文提纲范文)

(1)基于Meta分析的金复康口服液辅助化疗治疗肺癌临床评价研究(论文提纲范文)

1 资料与方法
    1.1 纳入与排除标准
        1.1.1 研究类型
        1.1.2 研究对象
        1.1.3 干预措施
        1.1.4 结局指标
        1.1.5 排除标准
    1.2 文献检索策略
    1.3 文献筛选与资料提取
    1.4 纳入研究的偏倚风险评价
    1.5 统计分析
2 结果
    2.1 文献筛选流程及结果
    2.2 纳入研究的基本特征
    2.3 纳入研究的偏倚风险评价结果
    2.4 Meta分析结果
        2.4.1 临床总有效率
        2.4.2 生存质量改善
        2.4.3 药品不良反应发生率
        ①胃肠道反应:
        ②白细胞降低:
        2.4.4 免疫功能
        ①NK细胞:
        ②CD3+水平:
        ③CD4+水平:
        ④CD8+水平:
    2.5 发表偏倚
    2.6 敏感性分析
3 讨论

(2)金复康治疗肺癌相关机制研究进展(论文提纲范文)

1 气阴两虚是肺癌的主要病因病机之一
2 金复康治疗肺癌的机制研究
    2.1 抑制肿瘤细胞增殖, 诱导肿瘤细胞凋亡
    2.2 抑制癌基因蛋白表达
    2.3 抑制癌细胞黏附、浸润转移能力
    2.4 调节免疫系统功能
        2.4.1 调节T细胞、NK细胞活性及其他相关指标水平
        2.4.2 延缓免疫衰老, 调节神经内分泌免疫网络
    2.5 逆转多药耐药, 干预循环肿瘤细胞
3 总结

(3)中医补益法在肺癌化疗不良反应治疗中的运用(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 中西医对肺癌诊治的理论阐述
    第一节 现代医学对肺癌及化疗不良反应的认识
        一、肺癌的概念
        二、肺癌的流行病学
        三、肺癌的病因和发生机理
        四、肺癌的治疗
        五、化疗常见的不良反应与防护
    第二节 中医学对肺癌的认识
        一、病名与症状特点
        二、病因病机
        三、治法方药
    第三节 中医药治疗肺癌化疗不良反应的研究进展
        一、临床辨治方法研究
        二、中药作用机理研究
第二部分 肺癌化疗中运用补益法的临床研究
    第一节 基本资料
        一、病例选择
        二、纳入标准
        三、排除标准
        四、诊断标准
        五、肺癌的分期标准(UICC,2002)
        六、统计学处理
    第二节 研究结果
        一、基本资料统计结果
        二、药物使用频次统计结果
        三、分型用药统计结果
    第三节 结果分析
    一、性别和年龄与肺癌发生的关系
        二、肺癌化疗中中医证型及用药分析
        三、高频用药药理作用分析
第三部分 肺癌化疗中运用补益法的原则及要点
    第一节 肺癌化疗中运用补益法的基本原则
        一、明辨证型,辨证施补
        二、多法联用,灵活变化
        三、顾护脾胃,补而不滞
    第二节 肺癌化疗中补益法的应用要点
        一、健脾助运,培固后天之本
        二、养阴生津,润养清虚之脏
        三、补肺益肾,冀其金水相生
        四、补中寓调,注重气血流通
        五、认证准确,组方选药精当
        六、施补宜缓,立足养正消积
问题与展望
结语
参考文献
致谢
作者简介

(4)柴胡、苦参、大黄、黄柏对人宫颈癌细胞抑制效果的研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 国内外研究现状
        1.1.1 中药对肿瘤细胞的直接杀伤作用
        1.1.2 中药对肿瘤的免疫学抑制作用
        1.1.3 中药对肿瘤转移的抑制作用
        1.1.4 中药对肿瘤血管形成的抑制作用
        1.1.5 逆转多药耐药、抗恶液质及协同增强作用
    1.2 四种中药的药理学活性
        1.2.1 柴胡的药理学活性
        1.2.2 苦参的药理学活性
        1.2.3 大黄的药理学活性
        1.2.4 黄柏的药理学活性
    1.3 研究的目的及意义
    1.4 解决的问题及研究方法
第二章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 药品
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 细胞株
    2.2 方法
        2.2.1 受试中药水煎剂的制备
        2.2.2 试验用品的清洗与消毒
        2.2.3 试剂配制
        2.2.4 细胞培养
        2.2.5 细胞生长抑制率的测定(MTT法)
        2.2.6 细胞的形态学观察
        2.2.7 DNA琼脂糖凝胶电泳
        2.2.8 统计学处理
第三章 结果
    3.1 MTT试验结果
        3.1.1 柴胡水煎剂对Hela细胞的生长抑制作用
        3.1.2 苦参水煎剂对Hela细胞的生长抑制作用
        3.1.3 大黄水煎剂对Hela细胞的生长抑制作用
        3.1.4 黄柏水煎剂对Hela细胞的生长抑制作用
    3.2 细胞形态学观察
        3.2.1 柴胡水煎剂对Hela细胞形态的影响
        3.2.2 苦参水煎剂对Hela细胞形态的影响
        3.2.3 大黄水煎剂对Hela细胞形态的影响
        3.2.4 黄柏水煎剂对Hela细胞形态的影响
    3.3 DNA琼脂糖凝胶电泳结果
        3.3.1 柴胡水煎剂作用Hela细胞电泳结果
        3.3.2 苦参水煎剂作用Hela细胞电泳结果
        3.3.3 大黄水煎剂作用Hela细胞电泳结果
        3.3.4 黄柏水煎剂作用Hela细胞电泳结果
第四章 讨论
    4.1 四种中药对人宫颈癌细胞生长及凋亡的作用
        4.1.1 柴胡水煎剂对人宫颈癌细胞生长及凋亡的作用
        4.1.2 苦参水煎剂对人宫颈癌细胞生长及凋亡的作用
        4.1.3 大黄水煎剂对人宫颈癌细胞生长及凋亡的作用
        4.1.4 黄柏水煎剂对人宫颈癌细胞生长及凋亡的作用
    4.2 四种中药对宫颈癌细胞作用的应用前景及存在的问题
        4.2.1 中医理论对本试验结果的分析
        4.2.2 存在的问题与展望
第五章 结论
参考文献
致谢
作者简历

(5)《神农本草经》对研发抗肿瘤中药的贡献(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
引言
第一部分 中医肿瘤学的概述
    1.1 中医学对肿瘤相关病名的认识
    1.2 中医对肿瘤病因病机的认识
    1.3 中医对肿瘤的辨证论治大法
        1.3.1 辨证
        1.3.2 论治及治法
第二部分 《神农本草经》的沿革
    2.1 书名的来由
        2.1.1 "本草"的来源
        2.1.2 神农氏与本草之关系
    2.2 各种辑录本简介
        2.2.1 几个重要的辑录本
        2.2.2 其它几种辑录本
        2.2.3 《神农本草经》的现代研究本
第三部分 依中医抗肿瘤功效、治法对《神农本草经》有关药物的分类
    3.1 摘录抗肿瘤中药统计
    3.2 六大类中药分述
        3.2.1 清热解毒类29味
        干地黄
        龙胆
        白英
        黄连
        茵陈蒿
        槐实
        蓝实
        葈耳实
        栝楼根
        苦参
        茈胡
        百合
        知母
        黄芩
        茅根
        紫草
        败酱
        地榆
        牡丹
        石韦
        栀子
        蘖木
        羚羊角
        牛黄
        大黄
        草蒿
        贯众
        白头翁
        羊桃
        3.2.2 活血化瘀类12味
        蒲黄
        卷柏
        丹参
        徐长卿
        王不留行
        牡桂
        麝香
        木香
        芎藭
        芍药
        紫葳
        桃核仁
        3.2.3 化痰祛湿类22味
        滑石
        菖蒲
        车前子
        橘柚
        干姜
        瞿麦
        贝母
        白芷
        紫苑
        白鲜
        枳实
        厚朴
        猪苓
        五加皮
        杏核仁
        白殭蚕
        半夏
        桔梗
        旋覆花
        射干
        泽漆
        皂荚
        3.2.4 软坚散结类8味
        牡蛎
        海藻
        鳖甲
        泽兰
        乌贼鱼骨
        连翘
        夏枯草
        蜚虻
        3.2.5 以毒攻毒类14味
        雄黄
        露蜂房
        附子
        莨菪子
        荛花
        鬼臼
        巴豆
        瓜蒂
        斑蝥
        水蛭
        虾蟆
        (?)虫
        甘遂
        商陆
        3.2.6 扶正固本类30味
        人参
        天门冬
        甘草
        菟丝子
        女萎
        麦门冬
        薯蓣
        薏苡仁
        石斛
        巴戟天
        赤芝
        黄芪
        肉苁蓉
        续断
        五味子
        枸杞
        茯苓
        杜仲
        桑上寄生
        女贞实
        大枣
        阿胶
        龟甲
        当归
        元参
        淫羊藿
        狗脊
        山茱萸
        龙眼
        鹿茸
第四部分 《神农本草经》所载抗中药在常见肿瘤治疗中的应用
    4.1 肺癌
    4.2 鼻咽癌
    4.3 乳腺癌
    4.4 食管癌
    4.5 胃癌
    4.6 大肠癌
    4.7 原发性肝癌(简称肝癌)
    4.8 子宫颈癌
    4.9 卵巢癌
    4.10 恶性淋巴瘤
第五部分 《神农本草经》所载、现代抗癌常用的中药介绍
    5.1 人参
    5.2 赤芝
    5.3 黄芪
    5.4 苦参
    5.5 雄黄
    5.6 斑蝥
    5.7 蟾蜍
    5.8 青黛(蓝实)
结语
参考文献
致谢

(6)健脾除痰法在非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及与顺铂联合增效减毒的机理研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
引言
第一部份 文献研究
    1 扶正疗法治疗肺癌的历代医家认识
    2 健脾除痰方的机理作用
    3 健脾除痰方成分的现代药理研究分析
第二部份 实验研究
    1 体外细胞实验(IN-VITRO)
        1.1 Trypan Blue染色及LL/2细胞计数
        1.2 LL/2细胞种殖
        1.3 MTT检测(+LL/2)
        1.4 MTT检测(LL/2细胞用TCM健脾除痰方处理)
        1.5 MTT检测(LL/2细胞用顺铂Cisplatin处理)
        1.6 体外细胞实验(in-vitro)总结论
    2. 动物体内实验(IN-VIVO)
        2.1 顺铂(Cisplatin)剂量实验
        2.2 中药健脾除痰方与顺铂(Cisplatin)综合实验
第三部份 讨论
    1 研究结果分析
    2 研究结论及创新之处
    3 问题及展望
结语
参考文献
附录1
致谢

(7)清金得生片治疗老年晚期非小细胞肺癌的临床和实验研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
引言
第一部分 文献研究
    一、中医对肺癌病因病机和治法的研究
    二、中西医药治疗老年非小细胞肺癌的研究进展
    三、中西医抗肺癌转移的研究
    四、清金得生片的研究进展
    五、立题依据
第二部分 临床研究
    一、研究对象
        (一) 病例来源
        (二) 诊断标准
        (三) 病例选择标准
    二、研究方法
        (一) 临床分组
        (二) 药物和治疗方案
        (三) 观察指标
        (四) 指标评价标准
    三、一般资料
    四、研究结果
        (一) 临床疗效的观察
        (二) 清金得生片药物不良反应的观察
        (三) 不良事件
    五、讨论
        (一) 老年非小细胞肺癌的临床特点、治疗目标
        (二) 中医药治疗老年非小细胞肺癌的优势和特色
        (三) 中医对晚期老年非小细胞肺癌的认识
        (四) 老年非小细胞肺癌益气除痰法的确立
        (五) 清金得生片方义的分析和现代药理学研究
        (六) 清金得生片治疗老年非小细胞肺癌的临床评价
    六、小结
第三部分 实验研究
    一、材料
    二、方法
    三、结果
    四、讨论
        (一) 肿瘤转移与失巢凋亡的关系
        (二) 失巢凋亡与PI3K/Akt信号转导通路的关系
        (三) Akt与非小细胞肺癌的关系
        (四) 清金得生片含药血清对失巢状态下人腺癌A549细胞的影响
第四部分 结论
参考文献
附录
博士研究生期间发表论文情况
致谢

(8)启膈方抗胃癌转移机制的研究(论文提纲范文)

中文摘要
英文摘要
英文缩写
研究论文 启膈方抗胃癌转移机制的研究
    引言
    第一部分 启膈方对人胃癌细胞MGC、人食管癌细胞EC109 黏附的影响
        前言
        材料与方法
        结果
        附图
        附表
        讨论
        小结
        参考文献
    第二部分 启膈方对人胃癌细胞MGC、人食管癌细胞EC109 增殖、运动、分泌MMP-2、MMP-9 的影响
        前言
        材料与方法
        结果
        附图
        附表
        讨论
        小结
        参考文献
    第三部分 启膈方对胃癌荷瘤小鼠肺转移的抑制作用
        前言
        材料与方法
        结果
        附图
        附表
        讨论
        小结
        参考文献
    第四部分 启膈方对胃癌转移相关因子的影响
        前言
        材料与方法
        结果
        附图
        附表
        讨论
        小结
        参考文献
    结论
综述一 胃癌转移分子机制研究概况
综述二 中医药抗肿瘤转移研究现状
致谢
个人简历

(9)复方木鸡冲剂对肿瘤细胞诱导凋亡和分化作用的分析(论文提纲范文)

一、正文
    (一) 中文摘要
    (二) 英文摘要
    (三) 前言
    (四) 材料和方法
    (五) 结果
    (六) 讨论
    (七) 结论
    (八) 参考文献
二、文献综述
    (一) 综述
    (二) 参考文献
三、致谢

(10)平肺口服液调节晚期非小细胞肺癌患者营养代谢的研究(论文提纲范文)

中文摘要
英文摘要
英文缩略语
文献综述
    1. 中医对肺癌的认识与治疗概况
        1.1 中医学对肺癌的认识
        1.2 中医药治疗肺癌的作用机理研究
        1.3 中医药在肺癌治疗中的临床应用
        1.4 问题与展望
    2. 非小细胞肺癌的研究现状
        2.1 生存期和生存质量研究
        2.2 营养代谢研究
        2.3 细胞因子研究
        2.4 细胞因子-瘦素相关性研究
        2.5 非小细胞肺癌的预防和综合治疗
    参考文献
前言
临床研究
    1. 材料和方法
        1.1 诊断标准
        1.2 病例选择标准
        1.3 病例排除标准
        1.4 病例分组
        1.5 治疗方法
        1.6 观察指标
        1.7 统计方法
    2. 结果
        2.1 临床资料
        2.2 对营养代谢功能的影响
        2.3 对细胞免疫功能的影响
        2.4 对生存期的影响
实验研究
    1. 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 瘤株
        1.3 实验药物
        1.4 试剂
        1.5 主要仪器和设备
    2. 实验方法
        2.1 动物模型建立
        2.2 动物分组
        2.3 给药途径和方法
        2.4 观察指标
        2.5 标本采集方法
        2.6 指标测定方法
        2.7 统计方法
    3. 实验结果
        3.1 一般情况观察
        3.2 小鼠治疗前后体重变化
        3.3 小鼠瘤重
        3.4 小鼠血清 TNF-α含量分析
        3.5 小鼠血清 IL-10 含量分析
        3.6 小鼠血清 IL-12 含量分析
        3.7 小鼠血清 Leptin 含量分析
讨论
    1. 平肺口服液的中医理论基础
    2. 平肺口服液对全身营养状况的改善作用
    3. 平肺口服液对晚期 NSCLC 患者的免疫调节作用
    4. 平肺口服液对瘦素-细胞因子联合作用初探
    5. 平肺口服液防治 NSCLC 的应用思路
    6. 展望中医药治疗 NSCLC的未来
结论
参考文献
附表临床病例调查表
致谢
个人简历

四、益肺抗瘤饮对癌细胞凝集素受体表达的影响(论文参考文献)

  • [1]基于Meta分析的金复康口服液辅助化疗治疗肺癌临床评价研究[J]. 王郝嘉,吴嘉瑞,巫志姗,倪梦蔚,郭思宇,贾珊珊,张景媛,刘莹莹,李佳霖. 药物流行病学杂志, 2021(01)
  • [2]金复康治疗肺癌相关机制研究进展[J]. 慕晓艳,徐蔚杰,周蕾,姚逸临,李和根. 中医药导报, 2018(24)
  • [3]中医补益法在肺癌化疗不良反应治疗中的运用[D]. 李思运. 南京中医药大学, 2013(05)
  • [4]柴胡、苦参、大黄、黄柏对人宫颈癌细胞抑制效果的研究[D]. 张丽云. 中国农业科学院, 2011(11)
  • [5]《神农本草经》对研发抗肿瘤中药的贡献[D]. 林铭堉. 广州中医药大学, 2011(09)
  • [6]健脾除痰法在非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及与顺铂联合增效减毒的机理研究[D]. 周英雄. 广州中医药大学, 2011(10)
  • [7]清金得生片治疗老年晚期非小细胞肺癌的临床和实验研究[D]. 倪育淳. 广州中医药大学, 2009(10)
  • [8]启膈方抗胃癌转移机制的研究[D]. 李晶. 河北医科大学, 2008(01)
  • [9]复方木鸡冲剂对肿瘤细胞诱导凋亡和分化作用的分析[D]. 郝晓娜. 大连医科大学, 2007(02)
  • [10]平肺口服液调节晚期非小细胞肺癌患者营养代谢的研究[D]. 崔海兰. 北京中医药大学, 2006(12)

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益肺康六饮对癌细胞凝集素受体表达的影响
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