一、牛颗粒冷冻精液的使用效果（论文文献综述）
王璐[1]（2021）在《新疆驴精液保存技术的研究》文中提出
李佳轩[2]（2019）在《驴精液低温和冷冻保存研究》文中研究说明多种哺乳动物精液保存的研究已达到较高水平并得到广泛推广,驴精液保存技术还不够成熟处于试验阶段,实际生产繁殖仍采用本交或按比例稀释鲜精后进行人工输精的方式。本研究试图采用氧化石墨烯（graphene oxide GO）作为精液保护物质进行驴的精液保存,以便探索驴精液保存的方法。GO是石墨烯经过氧化之后的产物,具有两亲性。根据GO特有的碳骨架结构,发现GO不但能有效地抑制重结晶和冰晶生长,并且能够修饰冰晶的形貌,在GO间冰晶形成曲面,通过Gibbs-Thompson效应抑制冰晶生长。本研究采用基础液（Tris30.4 g/L、柠檬酸17.0 g/L、葡萄糖15.0 g/L、果糖15.0 g/L、青霉素0.6 g/L、链霉素1.0 g/L）+15%卵黄作为稀释液,通过低温保存测定相对最适的氧化石墨烯添加量,后续进行不同预处理效果比较、不同冷冻程序效果比较、液氮蒸汽熏蒸法熏蒸高度和熏蒸时间比较以及不同解冻方法的效果比较,希望得到一个经济、简便、有效的冷冻方法。结果表明:基础液+15%卵黄+10%氧化石墨烯所得精子活率、质膜完整率、顶体完整率均极显着高于其他各组（p<0.01）,畸形率极显着低于其他组（p<0.01）。冷冻保存前,两种预处理方法:直接离心和稀释五倍离心后进行冷冻,解冻后精子活率、畸形率、质膜完整率、顶体完整率均无显着差异（p>0.05）,但比较精子质量指数发现直接离心法（0.52）优于稀释五倍离心法（0.50）;程序冷冻法冻融后P1组精子活率极显着高于其他两组（p<0.01）,其他指标均无显着差异（p>0.05）;当采用蒸汽熏蒸法冷冻时,分别测得距液氮面高度4cm时精子活率极显着高于另外两组（p<0.01）,距液氮面4cm熏蒸10min后精子活率极显着高于另外两组（p<0.01）;比较37℃30s解冻和60℃6s解冻两种方法,60℃6s解冻法精子解冻后活率极显着高于37℃30s解冻法（p<0.01）,其他指标均无显着差异（p>0.05）;通过qRT-PCR检测RPL31、PLP1和PAPSS2三个基因在鲜精和冻融精液中的表达量,冻精和鲜精相比RPL31和PLP1基因极显着下调（p<0.01）,PAPSS2基因极显着上调（p<0.01）。为解释冷冻保存过程中精子冷冻损伤的机制提供了一些可能性参考。
吴汝梓[3]（2019）在《蓝狐精液冷冻及冷冻前后精子超微结构变化》文中认为引进芬兰优质种蓝狐,通过使用人工授精技术扩繁及改良,使我国蓝狐养殖业近20多年来得到了快速发展。目前,蓝狐使用鲜精输精受孕率超过80%。但由于缺乏相应的育种手段,种质呈现逐年退化趋势,不得不重复引进。精液冷冻技术理论上可以无限期的保存蓝狐精液,实现精液远距离的交流,同时对于生产蓝霜狐（银狐♂×蓝狐♀）具有巨大的应用意义。然而,目前蓝狐精液冷冻技术在世界范围内尚未成熟,因精子冻融后存活率低下,显着影响母狐的受孕率。为进一步了解超低温冷冻对蓝狐精子运动性及内部结构造成的损伤,从而选择更优质的冷冻保护剂和完整的蓝狐精液冷冻工艺系统,进行了本试验研究。试验（一）:试验共分4组,法国卡苏精液冷冻稀释液（Ⅰ）、东林Ⅱ号—卵黄冷冻稀释液（Ⅱ）、Tris—卵黄冷冻稀释液（Ⅲ）及对照组常温稀释液东林Ⅱ号（Ⅳ）。冻融后检测三种冷冻稀释液冷冻效果,分别使用伊红—苯胺黑染色法、低渗肿胀法、考马斯亮蓝染色法检测精子存活率、精子质膜完整率、精子顶体完整率,同时检测37℃精子的存活时间及生存指数并通过与鲜精对比综合选定最佳的冷冻稀释液;试验（二）:将原精分为A、B两组,A组常温稀释,B组选用Ⅲ稀释液分3批分别为B1、B2、B3组对蓝狐精液冷冻,通过IVOS精子运动检测系统检测4组精子运动情况,并通过透射电子显微镜观察A、B,两组精子内部结构;试验（三）:选取解冻后精子活率高于0.3的精液对15只母蓝狐进行输精试验。结果显示:超低温冷冻对蓝狐精子的损伤很大,与Ⅳ组相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组精子冻融后存活率平均下降48.3%,精子质膜完整率平均下降48%,顶体完整率平均下降37.4%;37℃时的冻融后精子平均存活时间（13h）及平均生存指数（2.25）远低于Ⅳ组的存活时间（37h）和生存指数（7.85）,精子在解冻后由于复苏温度高激发精子运动,但精子存活时间较短;在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组中,Ⅲ组精子存活率、质膜完整率、顶体完整率均高于Ⅰ、Ⅱ组;三种蓝狐精液冷冻稀释液对蓝狐精子保护的效果依次为:Ⅲ>Ⅰ>Ⅱ;A、B组精子运动性差异极显着（P<0.01）,B组快速运动的精子平均占25.1%,中速运动的精子平均占39.8%,慢速运动的精子占平均4.2%,不运动的精子平均占30.9%;B1、B2、B3组精子存活率及快速运动的精子差异显着（P<0.05）。冷冻工艺存在人工操作因素影响,建议使用自动冷冻机冷冻;使用透射电子显微镜观察,B:组损伤最严重的是精子头部膜结构,顶体完整率仅占25%,冷冻对精子赤道段、颈部、尾部、线粒体及微管损伤较小;虽然蓝狐精液冻融后精子活力达0.3以上,符合常规冻精输精标准,但由于蓝狐精子冻融后在37℃条件下精子存活时间及生存指数过低,导致试验15只蓝狐只有1只产崽,冻精输精受孕率只有6.7%。
何贝贝[4]（2019）在《冷冻解冻温度和褪黑素对鸡精液冷冻保存效果的影响》文中进行了进一步梳理精液冷冻保存能够有效保障种质资源,提高良种公禽的利用率。目前,鸡精液冷冻技术的研究还未完全成熟,由于冷冻解冻温度、平衡时间、稀释剂和防冻剂浓度等因素的影响,导致冷冻和解冻后精子活力降低,引起氧化损伤等。褪黑素作为机体可自身合成分泌的物质,具有良好的抗氧化作用。以往对其在精液冷冻上的作用集中于人和鼠等哺乳动物,但其在禽类冷冻精液中的作用鲜有研究。本研究着力于鸡精液冷冻解冻温度以及褪黑素对公鸡冷冻精液冷冻效果的影响。采用光学显微镜观察法、精子尾部低渗肿胀法和姬母萨染色技术测定冷冻和解冻后精子活力、质膜完整率和顶体完整率;利用ELISA技术分别检测精液解冻后超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）含量、丙二醛（MDA）及活性氧（ROS）水平。研究结果如下:1.比较距液氮表面1、2、3、4、5、6 cm处进行鸡精液颗粒冷冻及在36、37、38、39、40、41℃水浴进行颗粒解冻,通过显微镜观察法检测精子活力,结果表明距液氮表面3cm处进行鸡精液颗粒冷冻,在38℃水浴解冻活力最高。2.分别向鸡的冷冻稀释液中添加0、0.125、0.25、0.5 mg/ml褪黑素,冷冻解冻后,用显微镜观察法、精子尾部低渗肿胀法和姬母萨染色法检测精子活力、质膜完整率和顶体完整率,通过ELISA技术检测解冻后精液SOD、CAT、GPx、MDA及ROS水平。结果表明,添加0.25 mg/ml褪黑素可显着提高解冻后鸡精子活力、质膜完整率和顶体完整率（P<0.05）,显着提高解冻后精液SOD、CAT和GPx含量（P<0.05）,显着降低解冻后精液MDA和ROS水平（P<0.05）。本研究结果表明,距液氮表面3cm处进行鸡精液冷冻、在38℃水浴解冻,精子活力最高;添加0.25 mg/ml的褪黑素可以显着提高冷冻解冻后精子活力、质膜完整率和顶体完整率,并伴随着解冻后精液抗氧化酶SOD、CAT和GPx含量上升及精液MDA和ROS水平的降低。
康孟阳[5]（2016）在《四种抗氧化剂在关中驴精液冷冻保存中的应用效果研究》文中指出关中驴是我国陕西的特有品种,目前数量已经越来越少,其保种工作十分重要。精液冷冻技术的应用为关中驴的育种保种工作提供了技术支持。目前在关中驴精液的冷冻保存方面,寻找最优的冷冻保护剂仍是最主要问题之一。维生素C、维生素E、谷胱甘肽和海带多糖是家畜精液保存常用的抗氧化剂。本试验以关中驴为研究对象,在精液冷冻稀释液中添加不同浓度的维生素C、维生素E、谷胱甘肽和海带多糖。利用碘化丙啶和罗丹明123联合染色的方法检测了精子的活力和线粒体的活性、低渗肿胀试验检测了精子的质膜完整性、以及异硫氰酸连接的花生凝集素检测了精子的顶体完整情况。经过观测,得到了如下结果:1.采用试验组II和试验组III的稀释液配方对关中驴冷冻精液进行处理,在解冻后的指标表现上,使用上述两种稀释液后关中驴的精子活率、精子顶体的完整情况、质膜完整精子所占比例以及线粒体活性等指标上均与其他3组相比差异显着（P<0.05）。2.在精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度的维生素C以及维生素E,与对照组比较冷冻-解冻后精子的活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活率均显着提高（P<0.05）,其最适的添加浓度为400 mg/L的维生素C和600 mg/L的维生素E。3.联合添加上述两种维生素可提高冷冻-解冻后精子成活的比例、质膜完整情况以及顶体完整率和精子细胞内线粒体活率,与对照组比较差异显着（P<0.05）,二者的最佳配伍浓度为200 mg/L维生素C和200 mg/L维生素E。4.在精液冷冻稀释液中添加不同浓度的谷胱甘肽和海带多糖,与对照组比较后发现冷冻-解冻后精子的活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活率均显着提高（P<0.05）,其最佳浓度分别为1000 mg/L以及1500 mg/L。5.在稀释液中联合添加谷胱甘肽和海带多糖可提高冷冻后精子存活的比例、顶体完整情况、线粒体活率和质膜完整率,二者最适配伍的添加浓度分别为添加谷胱甘肽500mg/L和添加海带多糖1500 mg/L,其效果优于单独添加,与对照组相比差异显着（P<0.05）。
孙腾飞[6]（2014）在《一种马细管冻精制作方法研究》文中提出细管冻精技术在牛的人工授精繁育中已经运用广泛，但目前马的细管冻精技术尚处于试验阶段，离推广运用还有很大一段距离。为获取一种适合大中型马场人工授精应用的细管冻精方法。本文进行了马细管冻精稀释液和制作方法优化的探讨。实验获得的细管冻精方法简单，成本较低，便于长期储存和长途运输。实验从改进采精方法做起，采用开放式采精方法，采取公马射精中段富含精子的精液，提高了冻精制作的效率。在筛选稀释液方面，实验参考动物精液稀释液配方，设计10种基础稀释液配方和添加4%，5%，6%，7%，8%甘油浓度的冷冻稀释液配方，依据保存精子的活率和顶体完整率对配方进行筛选，最终得到添加脱脂奶，乳糖等的配方1的基础稀释液配方和甘油添加浓度为5%冷冻稀释液配方精液保存效果较好。在冻精制作方面，实验采用逐步降温的方法，最后对细管精液进行液氮冻存。制作过程中对离心和平衡方案进行优化，筛选标准也是以精子的活率和顶体完整率为准。筛选离心速度为1500r/min,平衡方案20℃平衡10min后离心，第二次稀释在20℃进行并4℃平衡2h的效果较优最后用获得的细管冻精解冻后精子的活率达到43%。
段洪云,张翔,孙玉玲,邓亮,韩国才[7]（2013）在《不同解冻方法对马细管、颗粒冻精质量的影响》文中提出实验在37℃（30 s）和75℃（7 s）下解冻马颗粒、细管冷冻精液,并检测解冻后精子的多项生理指标。结果表明:使用CASA检测精子运动参数,37℃和75℃解冻后颗粒、细管冻精的TM、VCL、VAP运动参数差异均不显着,但是75℃颗粒和细管冻精解冻后PM差异显着（P<0.05）,且75℃颗粒具有最高的PM（47.8%）;HOST检测结果表明2种解冻方法下,细管法和颗粒法冷冻的精子尾部质膜完整率差异不显着;AO染色DNA后,37℃颗粒、75℃细管解冻后DNA的完整率差异显着（P<0.05）;流式细胞仪检测精子质膜的完整率发现,37℃颗粒解冻后质膜完整率和37℃细管、75℃颗粒差异显着（P<0.05）。结果提示,细管37℃、颗粒75℃解冻可以获得较好的解冻后精子生理指标。
张育军[8]（2010）在《安徽白山羊精液冷冻保存技术研究》文中研究说明安徽白山羊是我省地方山羊品种,属于黄淮山羊的地方类群,具有繁殖力高,适应性强,板质质量优良等特点。用其优秀公羊精液进行冷冻保存应用可以加速该品种保种速度。本实验的目的是研究出适合安徽白山羊精液冷冻保存的稀释液配方和冷冻程序,为安徽白山羊冷冻精液的实际应用奠定基础。本实验分为五个部分,分别为精液冷冻程序的优化、冷冻稀释液缓冲剂的优化选择、抗冻剂N, N-二甲基甲酰胺（DMF）的添加效果研究、十二烷基磺酸钠的添加效果研究和冷冻精液输精试验。结果表明:1.选取影响精液冷冻-解冻程序效果的四个因素作为研究对象:稀释比例、平衡时间、解冻液种类和解冻温度。每个因素选取3个水平（种类）:A稀释比例（原精液:稀释液）:1︰2（A1）、1︰3（A2）和1︰4（A3）;B平衡时间:2h（B1）、3h（B2）和4h（B3）;C解冻液种类:葡3—3液（C1）,维生素B12（C2）、2.9%柠檬酸钠（C3）;D解冻温度:40℃（D1）、50℃（D2）、60℃（D3）,以活率、生存指数、顶体完整率和膜完整性作为评判标准,进行L9（34）正交试验,筛选出最佳的精液冷冻-解冻程序。经极差分析结果显示:1)三种稀释比例间各评判标准的极差分析值差异均不显着（P>0.05）,但A3的极差值均大于其他两组;2)B2精液活率优于B3（P<0.05）,顶体完整率优于B1（P<0.05）,膜完整率比B3差（P<0.05）;3)C1活率优于C2（P<0.05）,膜完整性优于C2、C3（P<0.05）,顶体完整率优于C3（P<0.05）;4)D1活率优于其他D2、D3（P<0.05）,膜完整率和顶体完整率各组差异不显着。综上结果表明,最优的冷冻-解冻程序是A3B2C1D1,即1:4稀释,在4℃冰箱平衡3h,以B12作为解冻液,解冻温度为40℃。2.对缓冲剂进行三步筛选。初步筛选,挑选四种缓冲剂:柠檬酸钠（E）、Tris（F）、pipes（G）、hepes（H）,分别设计3个水平（E:0.2%、1.6%、3.0%;F:0.02%、2.42%、4.36%;G:0.1%、0.5%、1.0%;H :0.1%、0.5%、1.0%）,进行L9（34）的正交试验,以解冻后精液的直观活率检测结果为参数进行正交设计极差分析,筛选出最佳的缓冲剂组合:E1F2G2H2。再次筛选,依据初步筛选结果,再细分四种缓冲剂的添加量,即E:0.1g%、0.2%、0.3%;F:1.8%、2.4%、3.0%;G:0.2%、0.5%、0.8%;H :0.2%、0.5%、0.8%,以精液品质综合指数作为正交设计的评判参数进行分析,结果显示各因素影响显着性顺序是E>H>G>F,其中E（柠檬酸钠）和H（hepes）对精液综合指数影响显着（P<0.05）。最终筛选,剔除再次筛选中差异不显着的F（Tris）和G（pipes）,重新设计E（柠檬酸钠）和H（hepes）的两因素三水平的正交试验（E:0.2g%、1.6%、3.0%;H :0.2%、0.8%、1.6%）。结果显示1.6%的E和1.6%的H组合添加效果最好（P < 0.05）.3.在稀释液中添加N, N-二甲基甲酰胺（DMF）和甘油不同组合的冷冻保护剂,研究其对安徽白山羊精液冷冻效果的影响。结果表明,单一的DMF冷冻效果差（P<0.05）,以甘油5%和DMF1%的组合抗冻剂效果最佳,效果优于其他组和单一的甘油使用（P<0.05）。4.在冷冻精液稀释液中添加十二烷基磺酸钠（SDS）:0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%、0.30%.结果发现,当十二烷基磺酸钠添加量为0.1%时,解冻后精子活率达到65.9%,显着高于其他实验组（P<0.05）,精膜完整率达到54.13%,显着高于其他实验组（P<0.05）;十二烷基磺酸钠添加量为0.2%时,精子顶体完整率最高,达58.46%,但与0.1%添加量相比,差异不显着。综合表明,0.1%的SDS添加组最优。5.为了进一步检验新配方制作的冻精的冷冻保存效果,对55只同期发情安徽白山羊进行了人工授精试验,在30天42只母羊不返情,计为妊娠,受胎率为76.4%。综上所述,本实验通过筛选安徽白山羊精液冷冻-解冻程序和缓冲剂组合,添加DMF和SDS,取得了较好的冷冻效果,使安徽白山羊颗粒冷冻精液解冻后的活率提高到0.65,受胎率达到了76.4%。
江中良[9]（2010）在《LDL和多糖在猪精液冷冻保存中的作用研究》文中研究说明尽管人工授精和精液冷冻保存技术已经广泛应用于养牛业,但是用冷冻保存后的猪精液进行人工授精,其受胎率和产仔数都比较低,导致利用冷冻精液进行人工授精还不能应用于养猪生产。由于猪精液具有一次射精量大但精子密度小、猪精子头部的脂肪含量高和对冷冻解冻过程中的温度变化特别敏感等特点,导致猪精子易受到冷冻解冻损伤。研究证实,由冷冻解冻导致的损伤可以通过添加冷冻保护剂来控制。尽管甘油已经被广泛应用于各种细胞的冷冻保存,但在猪精液冷冻保存上,甘油在提高猪精子活率的同时也降低了精子的顶体完整性,所以不能大量使用。因此,寻找合适的冷冻保护剂是目前猪精液冷冻保存的主要研究内容之一。本试验通过在猪精液冷冻稀释液中添加不同的多糖和低密度脂蛋白（LDL）,研究多糖和LDL对猪精液冻后参数的影响,取得如下结果:1、在猪精液冷冻稀释液中添加不同浓度的绞股蓝多糖（GP）、红景天多糖（RPP）、枸杞多糖（LBP）和LDL进行试验,结果显示:3%的GP和4%的RPP可以使猪精子的冻后活率达到37.82%和42.66%（P<0.05）;高浓度的GP（4%,5%,6%）和RPP（6%,8%,10%）对精子细胞膜有较好的保护作用（P<0.05）;6%,8%和10%的RPP可以保护猪精子的顶体完整率（P<0.05）;精子冻后获能样变化随着RPP浓度的增加而逐渐上升（P<0.05）。在猪冷冻稀释液中添加8%和9%的LDL后,猪精子冻后活率分别达到42.25%和49.33%（P<0.05）;精子质膜完整率分别达到60.26%和62.68%（P<0.05）;与对照组相比,添加LDL可以明显提高猪精子的顶体完整率,但是在不同浓度的LDL处理组之间,猪精子冻后的顶体完整率没有明显差异;目前的研究还发现添加不同浓度的LDL对精子冻后获能样变化没有任何影响。2、为了更好的理解LDL对猪精子冻后特征的影响,计算机辅助分析系统被用于分析冻后猪精子的运动特征,所得结果显示:高浓度的LDL（8～10%）显着提高了猪精子冻后总运动精子比例（TMS,%）,达到42.25%、49.33%和43.21%;与对照组相比,在高浓度的LDL（8～10%）中,精子直线运动速度（VSL,um/s）分别达到40.35,44.18和36.71 um/s;精子在冻后的曲线运动速率（VCL,um/s）在稀释液中含有6%的LDL时最高,达到37.14 um/s（P<0.05）;但是各种浓度的LDL添加都不影响冻后精子头部的侧向振幅（ALH）。3、精细胞凋亡现象表现在DNA损伤、细胞内抗氧化物酶、线粒体及caspase等活性的改变。在0.25ml细管里,8%和9%的LDL显着降低了冻后猪精子的彗星比例（CR）,8～10%的LDL显着降低了尾部DNA的含量（TD）和尾距（TM,P<0.05）;不同浓度的LDL都可以提高猪精子冻后超氧化物歧化酶（SOD）活性,但是只有8～10%LDL可以提高过氧化氢酶（CAT）的活性（P<0.05）,而LDL对谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性没有明显影响;各种LDL浓度对冻后猪精子的线粒体活性均有保护作用（P<0.05）;在0.5ml的细管中,8～10%的LDL会提高猪精子冻后总运动精子比例（TMS,%）和精子直线运动速度（VSL,um/s）,降低了猪冻后精子里彗星的比例（CR）和尾部DNA的含量（TD）（P<0.05）只有SOD的活性受到8%和9%的LDL的刺激而上升（P<0.05）;添加10%LDL可以显着降低0.25和0.5ml中猪精子的caspases活性（P<0.05）。4、为了研究冷冻解冻对精子影响的分子机理,不同的RNA提取方法被用于提取冻后猪精子总RNA。结果表明,利用常温条件下和加热到45℃的Trizol试剂处理猪精子,均不能获得足够数量的RNA用于基因表达检测;如果把Trizol试剂加热到70℃,则可以获得足够数量的RNA用于基因表达检测,因此,猪精子RNA的提取与Trizol试剂的温度相关。5、利用总RNA检测冷冻解冻后的基因表达的结果表明:低密度脂蛋白受体（LDLR）存在于猪冷冻解冻后的精液中,但是LDL的添加并不能改变LDLR的表达; 9%～10%的LDL显着降低GADD45B的表达;SURVIVIN在猪冷冻解冻精液中的表达量很低,在处理组之间和处理组与对照组之间均没有差异;低浓度的LDL（6%～8%）对BCL-2基因的表达影响不明显,而9%和10%的LDL明显上调了BCL-2基因的表达;高浓度的LDL（9%～10%）明显降低了BAX的表达（P<0.05）,而低浓度的LDL（6%～8%）对BAX的表达没有显着影响。通过以上试验发现,LDL对冷冻解冻后猪精子的各种参数均有不同程度的积极影响,特别是LDL可以降低由于冷冻解冻导致的凋亡损伤和改变相关凋亡基因的表达,因此,LDL可以用于猪精液冷冻保存。
尹旭升[10]（2009）在《影响牛冻精质量的生产因素研究》文中认为为了提高种公牛冻精生产的质量,本文从公牛年龄、稀释次数、降温平衡、冷冻温度及解冻后不同保存环境等方面对冻精生产品质的影响进行了分析和研究。研究发现,种公牛的真正成熟期是5至10岁,这一年龄段公牛的各项精液品质均达高峰阶段,而5岁以前为增高期,10岁以后为下降期;二次稀释冷冻稀释液采用A配方稀释平衡后的精子活力以及冷冻后解冻活力最好;一次稀释冷冻稀释液的两种配方对平衡后的精子活力以及冷冻后解冻活力差异不显着（P>0.05）;比较国外与国内牛冷冻精液专用稀释液的冷冻效果发现Ⅰ号与Ⅲ号稀释液效果较Ⅱ号稀释液要好,且冷冻精液中A级精子百分率（Ⅰ号稀释液为35 % ,Ⅲ号稀释液为32 %）和直线性（Ⅰ号稀释液为54 % ,Ⅲ号稀释液为47 %）两项指标差异不显着（P>0.05）;本文还比较了精液容量、冻精细管数量与平衡降温时间速度的关系,降温时间从66～94min,精液稀释后适宜盛装容量为50～120mL,细管精液分装数量为100～300支时效果最好,超过120mL或多于300支要分开盛装,低于50 mL或少于100支要做好保温工作,并且采取先灌装后降温、平衡,或先降温、平衡后灌装两种不同方法,对冷冻精液质量的影响差异不显着（P>0.05）;由于0～- 60℃是精子的有害温区,特别是- 15～- 25℃能加快冰晶的形成,因此试验表明冷冻温度控制在- 90～- 140℃,初冻温度调节在- 120℃左右,整个冷冻过程控制在8 min,冷冻的细管冻精解冻后精子活力最好;从牛冷冻精液解冻后不同保存环境分析了对精液品质的影响,发现精液保存在冰水或30℃的环境中,菌落数没有明显的变化,均在国标范围内（菌落数低于1 000个）,但温度对精液品质却具有显着的影响,0.5 h的时候,保存在冰水以及30℃的精子活力没有明显差异,精子的活力均在合格范围内,在2 h以后就出现了显着差异,在30℃环境中的精子活力明显降低了,低于0.35的国家标准,而冰水中的精子活力没有明显的变化。
二、牛颗粒冷冻精液的使用效果（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、牛颗粒冷冻精液的使用效果（论文提纲范文）
（2）驴精液低温和冷冻保存研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 国内外养驴现状及发展趋势 |
| 1.2 家畜精液冷冻保存技术研究概况 |
| 1.2.1 精液冷冻保存技术研究进展 |
| 1.2.2 精液冷冻保存的方法及意义 |
| 1.2.3 精液稀释液与其他添加物质 |
| 1.2.4 家畜精液冷冻保存机理 |
| 1.2.5 影响冷冻精液质量的因素 |
| 1.3 精液品质评定方法 |
| 1.3.1 精子活率及常规检查 |
| 1.3.2 精子质膜完整性检测 |
| 1.3.3 精子顶体完整性检测 |
| 1.4 氧化石墨烯的功能及其对冷冻保存的作用机制 |
| 1.4.1 氧化石墨烯 |
| 1.4.2 氧化石墨烯控制冰晶生长并应用于低温细胞保存 |
| 1.5 存在问题及应用前景 |
| 1.6 本实验的目的及意义 |
| 第二章 氧化石墨烯对驴精液保存效果的研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 精液采集及运输 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 |
| 2.1.5 所需基础液、稀释液的配制 |
| 2.2 实验内容及方法 |
| 2.2.1 不同浓度氧化石墨烯对驴精液低温保存的影响 |
| 2.2.2 不同预处理对冷冻效果的影响比较 |
| 2.2.3 不同冷冻程序对冷冻效果的影响比较 |
| 2.2.4 液氮蒸汽熏蒸法距液氮面最适高度的测定 |
| 2.2.5 液氮蒸汽熏蒸法最适熏蒸时间的测定 |
| 2.2.6 不同解冻方法对驴精液冻融效果的比较 |
| 2.3 精子质量评价 |
| 2.4 统计分析 |
| 2.5 结果 |
| 2.5.1 不同浓度氧化石墨烯对驴精液低温保存的影响 |
| 2.5.2 不同预处理对冷冻效果的影响比较 |
| 2.5.3 不同冷冻程序对冷冻效果的影响比较 |
| 2.5.4 液氮蒸汽熏蒸法距液氮面最适高度的测定 |
| 2.5.5 液氮蒸汽熏蒸法最适熏蒸时间的测定 |
| 2.5.6 不同解冻方法对驴精液冻融效果的影响 |
| 2.6 讨论 |
| 2.6.1 氧化石墨烯和卵黄对驴精液保存的影响 |
| 2.6.2 不同预处理对精液冷冻效果的影响 |
| 2.6.3 程序冷冻与蒸气熏蒸冷冻对驴精子保存的影响 |
| 2.6.4 不同解冻方法对驴精液冻融效果的影响 |
| 第三章 鲜精和冻融精液差异表达基因的分析 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验动物 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器和设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 精子细胞RNA的提取 |
| 3.2.2 精子细胞RNA的反转录 |
| 3.2.3 荧光定量PCR |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 RNA完整性鉴定 |
| 3.3.2 qRT-PCR引物特异性验证 |
| 3.3.3 qRT-PCR结果 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）蓝狐精液冷冻及冷冻前后精子超微结构变化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 精液冷冻技术研究进展 |
| 1.2.1 精液冷冻技术发展史 |
| 1.2.2 犬科动物精液冷冻技术的发展 |
| 1.2.3 狐精液冷冻技术研究进展 |
| 1.3 精液冷冻原理及冷冻工艺 |
| 1.3.1 精液冷冻原理 |
| 1.3.2 精液冷冻工艺 |
| 1.4 精子形态 |
| 1.4.1 精子头部形态 |
| 1.4.2 精子颈部形态 |
| 1.4.3 精子尾部形态 |
| 1.4.4 电镜技术在精子超微结构研究中的应用 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 试验器材及试验药品 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 精液采集 |
| 2.2.2 精液预处理 |
| 2.2.3 精液质量检测 |
| 2.2.4 精液冷冻 |
| 2.2.5 精子运动性检测 |
| 2.2.6 透射电镜样品制备 |
| 2.2.7 冷冻精液输精 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 蓝狐精液冷冻稀释液选取 |
| 3.2 冷冻前后蓝狐精子运动性检测及超微结构变化 |
| 3.2.1 精子运动性检测 |
| 3.2.2 蓝狐精子冷冻前后精子超微结构 |
| 3.3 冷冻精液输精试验 |
| 4 讨论 |
| 4.1 最佳冷冻稀释液选取 |
| 4.2 冷冻前后精子运动性与精子超微结构变化 |
| 4.3 冻精输精试验 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
| 附件 |
（4）冷冻解冻温度和褪黑素对鸡精液冷冻保存效果的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 精子生物学特性 |
| 1.1 精子结构 |
| 1.2 精子获能 |
| 1.3 顶体反应 |
| 第二章 精液冷冻保存研究进展 |
| 2.1 鸡精液冷冻研究进展 |
| 2.2 鸡精液冷冻损伤原理 |
| 2.3 鸡精液冷冻稀释液成分 |
| 2.4 影响鸡精液冷冻保存的因素 |
| 第三章 褪黑素的研究进展 |
| 3.1 褪黑素生物学特性 |
| 3.2 褪黑素的抗氧化性 |
| 3.3 褪黑素对精液冷冻保护效果 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第一章 冷冻和解冻温度对鸡精液冷冻效果的影响 |
| 1.1 试验材料与方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 褪黑素对鸡精液冷冻保存效果的影响 |
| 2.1 试验材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（5）四种抗氧化剂在关中驴精液冷冻保存中的应用效果研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 关中驴品种简介 |
| 1.1.1 关中驴产地及体态特征 |
| 1.1.2 关中驴繁殖机能和生产性能 |
| 1.1.3 关中驴保种和选育 |
| 1.2 家畜精液冷冻保存技术研究概况 |
| 1.2.1 精液冷冻保存技术及其研究进展 |
| 1.2.2 家畜精液冷冻保存机理 |
| 1.2.3 抗氧化剂在家畜精液冷冻保存上的研究进展 |
| 1.2.4 影响冷冻精液质量的因素 |
| 1.3 精液品质评定方法 |
| 1.3.1 精子活率及常规检查 |
| 1.3.2 精子质膜完整性检测 |
| 1.3.3 精子顶体完整性检测 |
| 1.3.4 精子线粒体活性检测 |
| 1.3.5 精子染色质结构完整性 |
| 1.3.6 精液中酶类的检测 |
| 1.4 本实验的目的及意义 |
| 第二章 几种不同的稀释液配方对精子冷冻保存的影响 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 主要仪器与试剂 |
| 2.1.2 所需溶液及其配置方法 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 精液的采集 |
| 2.2.2 精液的处理和分装 |
| 2.2.3 精液的冷冻 |
| 2.2.4 精液的解冻 |
| 2.3 精子质量评价 |
| 2.4 统计分析 |
| 2.5 结果与分析 |
| 2.6 讨论 |
| 2.7 小结 |
| 第三章 维生素C和维生素E关中驴精子冷冻保存效果的影响 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.2 试验设计 |
| 3.3 精子质量评价 |
| 3.4 统计分析 |
| 3.5 试验方法 |
| 3.6 结果与分析 |
| 3.6.1 不同浓度的维生素C对关中驴精液冷冻保护效果的影响 |
| 3.6.2 不同浓度的维生素E对关中驴精液冷冻保护效果的影响 |
| 3.6.3 联合添加维生素C和维生素E对关中驴精液冷冻保存效果的影响 |
| 3.7 讨论 |
| 3.8 小结 |
| 第四章 谷胱甘肽和海带多糖关中驴精子冷冻保存效果的影响 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.3 精子质量评价 |
| 4.4 统计分析 |
| 4.5 试验方法 |
| 4.6 结果与分析 |
| 4.6.1 不同浓度的谷胱甘肽对关中驴精液冷冻保护效果的影响 |
| 4.6.2 不同浓度的海带多糖对关中驴精液冷冻保护效果的影响 |
| 4.6.3 联合添加谷胱甘肽和海带多糖对关中驴精液冷冻保存效果的影响 |
| 4.7 讨论 |
| 4.8 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）一种马细管冻精制作方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 马精液保存技术研究概况 |
| 1.1 马精液的保存技术 |
| 1.2 马精液保存技术研究现状 |
| 1.2.1 采精后精液预处理 |
| 1.2.2 马精液的稀释液 |
| 1.2.3 马精液冷冻保存方法 |
| 1.2.4 马精液的稀释液 |
| 1.3 冷冻造成的精子损伤 |
| 1.3.1 精液冷冻的细胞学基础 |
| 1.3.2 冷却和冷休克 |
| 1.3.3 结冰和精子损伤 |
| 1.4 精液评定方法 |
| 1.4.1 精液评定意义 |
| 1.4.2 常规评定方法 |
| 1.4.3 新精液品质评定法 |
| 第二章 一种马细管冻精制作方法研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 实验动物的饲养管理 |
| 2.2.2 精液采集 |
| 2.2.3 精液品质检查 |
| 2.2.4 稀释液的配制及筛选 |
| 2.2.5 冷冻稀释液中甘油浓度的筛选 |
| 2.2.6 冻精制作 |
| 2.2.7 细管冻精的解冻及质量检测 |
| 2.2.8 冻精制作程序的优化 |
| 2.2.9 数据统计和分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 稀释液的配制及筛选 |
| 2.3.2 冷冻稀释液中甘油浓度的筛选 |
| 2.3.3 冻精制作过程的优化 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）不同解冻方法对马细管、颗粒冻精质量的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 精液采集 |
| 1.2 稀释液 |
| 1.3 精液处理 |
| 1.4 精液冷冻解冻过程 |
| 1.4.1 精液冷冻 |
| 1.4.2 精液解冻 |
| 1.5 精子的质量评估和检测 |
| 1.5.1 精子运动参数检测 |
| 1.5.2 低渗肿胀实验 (HOST) HOST |
| 1.5.3 精子染色体结构分析 (SCSA) |
| 1.5.4 流式细胞仪检测 (FCM) |
| 1.6 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 精子运动参数 |
| 2.2 HOST |
| 2.3 DNA完整性检测 |
| 2.4 流式细胞检测 |
| 3 讨论 |
（8）安徽白山羊精液冷冻保存技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 文献综述 |
| 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.1 试验动物 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 主要仪器 |
| 1.1.4 试验试剂配制 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 精液的采集 |
| 1.2.2 精液的冷冻与解冻 |
| 1.2.3 精液品质的检测 |
| 1.3 试验设计 |
| 1.3.1 精液冷冻-解冻程序优化试验 |
| 1.3.2 精液稀释液缓冲剂组合的优化试验 |
| 1.3.3 N,N-二甲基甲酰胺与甘油不同组合添加效果的研究 |
| 1.3.4 十二烷基磺酸钠添加效果的研究 |
| 1.3.5 冷冻精液人工授精试验 |
| 1.4 统计分析 |
| 2 结果和分析 |
| 2.1 不同冷冻-解冻程序的山羊冻精品质 |
| 2.1.1 解冻精液品质 |
| 2.1.2 结果分析 |
| 2.1.3 三种解冻液渗透压和 PH 值测定 |
| 2.2 不同稀释液缓冲剂配方对山羊冷冻精液品质的影响 |
| 2.2.1 四种缓冲剂不同剂量组合对山羊冻精品质的影响 |
| 2.2.2 缓冲剂组合的最终筛选 |
| 2.2.3 测定缓冲剂初步筛选、再次筛选中各组的渗透压 |
| 2.3 N,N-二甲基甲酰胺与甘油不同组合添加效果 |
| 2.3.1 DMF 对冻后精子活率和生存指数的影响 |
| 2.3.2 DMF 对冻后精子顶体完整率的影响 |
| 2.3.3 DMF 对冻后精子畸形率的影响 |
| 2.3.4 DMF 对冻后精子膜完整率的影响 |
| 2.3.5 DMF 各试验组渗透压的影响 |
| 2.4 十二烷基磺酸钠的添加效果 |
| 2.4.1 SDS 对冻后精子运动参数的影响 |
| 2.4.2 SDS 对冻后精子顶体完整率的影响 |
| 2.4.3 SDS 对冻后精膜完整率的影响 |
| 2.5 冷冻精液人工授精试验 |
| 3 讨论 |
| 3.1 精液冷冻-解冻程序 |
| 3.2 冷冻精液稀释液的筛选 |
| 3.3 渗透压与冷冻稀释液和解冻液 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（9）LDL和多糖在猪精液冷冻保存中的作用研究（论文提纲范文）
| 第一章 文献综述 |
| 猪精液冷冻保存研究进展 |
| 1.1 猪精细胞的特殊性 |
| 1.2 精液冷冻保存原理 |
| 1.3 精液冷冻保存的重要性 |
| 1.4 猪精液冷冻保存研究进展 |
| 1.4.1 人工授精的发展历史 |
| 1.4.2 猪精液冷冻保存的必然性 |
| 1.4.3 猪精液冷冻保存的相关国际会议 |
| 1.4.4 猪精液冷冻包装类型 |
| 1.4.5 精液冷冻稀释液 |
| 1.4.6 冷冻保护剂 |
| 1.4.7 降温与平衡时间 |
| 1.4.8 冷冻方法 |
| 1.4.9 渗透压的变化 |
| 1.4.10 解冻温度与时间 |
| 1.4.11 冻前离心对猪精子的影响 |
| 1.4.12 冻后精子获能 |
| 1.4.13 受精与体外试验 |
| 1.5 冷冻过程对精细胞的损伤 |
| 1.5.1 精子活力的改变 |
| 1.5.2 细胞溶质浓度改变导致精子损伤 |
| 1.5.3 冰晶造成的机械性损伤 |
| 1.5.4 细胞膜的损伤 |
| 1.5.5 DNA 的损伤 |
| 1.5.6 活性氧（ROS）对精子的损伤 |
| 1.5.7 线粒体损伤 |
| 1.6 猪精液冷冻保存的国内研究进展 |
| 1.7 猪精液冷冻保存研究方向 |
| 试验研究 |
| 第二章 精液冷冻稀释液的筛选 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 主要仪器设备与试剂 |
| 2.2.2 多糖与LDL 提取 |
| 2.2.3 精液采集 |
| 2.2.4 精液稀释液配制 |
| 2.2.5 精液冷冻与解冻 |
| 2.2.6 精子质量评价 |
| 2.2.7 统计分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 不同多糖与LDL 对猪精子冻后活率的影响 |
| 2.3.2 不同多糖与LDL 对猪精子冻后质膜完整率的影响 |
| 2.3.3 不同多糖与LDL 对猪精子冻后顶体完整率的影响 |
| 2.3.4 不同多糖与LDL 对猪精子冻后获能样变化的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 LDL 与猪精子冻后凋亡样变化研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 仪器设备与试剂 |
| 3.2.2 精液采集、冷冻与解冻 |
| 3.2.3 冻后精子运动特征评价 |
| 3.2.4 冻后精子DNA 完整性检测 |
| 3.2.5 冻后精子酶活性检测 |
| 3.2.6 冻后猪精子线粒体完整性测定 |
| 3.2.7 Caspases 活性检测 |
| 3.2.8 数据统计 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 LDL 对猪精子冻后运动特征的影响 |
| 3.3.2 LDL 对猪精子冻后DNA 完整性的影响 |
| 3.3.3 LDL 对猪精子冻后SOD、CAT 和GSH-Px 活性的影响 |
| 3.3.4 LDL 对主精子冻后线粒体活性的影响 |
| 3.3.5 LDL 对猪精子Caspases 活性的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 LDL 在猪精液冷冻保存中分子机理的初步研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 仪器设备与试剂 |
| 4.2.2 精液采集、冷冻与解冻 |
| 4.2.3 RNA 分离与cDNA 合成 |
| 4.2.4 实时定量PCR 检测 |
| 4.2.5 数据统计 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 RNA 提取 |
| 4.3.2 LDL 对猪精液冻后LDLR 基因表达的影响 |
| 4.3.3 LDL 对猪精液冻后GADD458 基因表达的影响 |
| 4.3.4 LDL 对猪精液冻后SURVIVIN 基因表达的影响 |
| 4.3.5 LDL 对猪精液冻后BCL-2 基因表达的影响 |
| 4.3.6 LDL 对猪精液冻后BAX 基因表达的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 进一步研究的方向 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（10）影响牛冻精质量的生产因素研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 引言 |
| 1.1 种公牛的饲养管理 |
| 1.1.1 饲养管理的基本要求 |
| 1.1.2 种公牛的饲养 |
| 1.1.2.1 合理调配日粮 |
| 1.1.2.2 加强育成公牛饲养 |
| 1.1.3 种公牛的管理要点 |
| 1.2 种公牛性机能的调节 |
| 1.3 精液质量影响因素 |
| 1.3.1 遗传因素 |
| 1.3.1.1 遗传性能 |
| 1.3.1.2 种间差异 |
| 1.3.1.3 个体差异 |
| 1.3.2 环境因素 |
| 1.3.3 营养因素 |
| 1.3.4 激素 |
| 1.3.5 年龄 |
| 1.3.6 疾病 |
| 1.3.7 公牛的性准备与采精 |
| 1.3.7.1 性准备 |
| 1.3.7.2 采精器械以及采精技术 |
| 1.3.7.3 采精频率 |
| 1.4 牛精液冷冻的研究 |
| 1.4.1 冷冻精液稀释液配方的研究 |
| 1.4.1.1 稀释液的研究 |
| 1.4.1.2 精液稀释倍数及稀释方法的研究 |
| 1.4.2 精液的分装 |
| 1.4.3 精液的降温和平衡 |
| 1.4.4 精液的冻结及保存 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验地点 |
| 2.2 试验仪器 |
| 2.3 试验药品 |
| 2.4 试验动物及其饲养管理 |
| 2.4.1 试验动物 |
| 2.4.2 种公牛的饲养管理 |
| 2.5 试验设计 |
| 2.5.1 年龄对种公牛精液品质影响的研究 |
| 2.5.2 二次稀释冷冻稀释液冷冻效果的的研究 |
| 2.5.3 一次稀释冷冻稀释液冷冻效果的的研究 |
| 2.5.4 国外与国内牛冷冻精液专用稀释液冷冻效果的研究 |
| 2.5.5 降温平衡对牛冷冻精液质量的影响 |
| 2.5.6 不同冷冻温度对牛精液品质的影响 |
| 2.5.7 牛冷冻精液解冻后不同保存环境对精液品质的影响 |
| 2.6 数据统计与分析 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 年龄对种公牛精液品质影响的研究 |
| 3.2 二次稀释冷冻稀释液冷冻效果的的研究 |
| 3.3 一次稀释冷冻稀释液冷冻效果的的研究 |
| 3.4 国外与国内牛冷冻精液专用稀释液冷冻效果的研究 |
| 3.5 降温平衡对牛冷冻精液质量的影响 |
| 3.6 不同冷冻温度对牛冷冻精液品质的影响 |
| 3.7 牛冷冻精液解冻后不同保存环境对精液品质的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 年龄对种公牛的精液品质影响的研究 |
| 4.2 冷冻稀释液对牛精液冷冻效果的的研究 |
| 4.3 降温平衡对牛冷冻精液质量的影响 |
| 4.4 不同冷冻温度对牛冷冻精液品质的影响 |
| 4.5 牛冷冻精液解冻后不同保存环境对精液品质的影响 |
| 5 结论 |
| 5.1 年龄对种公牛的精液品质影响的研究 |
| 5.2 不同冷冻稀释液对牛精液冷冻效果的的研究 |
| 5.3 降温平衡对牛冷冻精液质量的影响 |
| 5.4 不同冷冻温度对牛冷冻精液品质的影响 |
| 5.5 牛冷冻精液解冻后不同保存环境对精液品质的影响 |
| 6 参考文献 |
| 7 附件 |
| 8 致谢 |
| 9 攻读学位期间发表论文情况 |
四、牛颗粒冷冻精液的使用效果（论文参考文献）
- [1]新疆驴精液保存技术的研究[D]. 王璐. 石河子大学, 2021
- [2]驴精液低温和冷冻保存研究[D]. 李佳轩. 天津农学院, 2019(08)
- [3]蓝狐精液冷冻及冷冻前后精子超微结构变化[D]. 吴汝梓. 东北林业大学, 2019(01)
- [4]冷冻解冻温度和褪黑素对鸡精液冷冻保存效果的影响[D]. 何贝贝. 吉林农业大学, 2019(03)
- [5]四种抗氧化剂在关中驴精液冷冻保存中的应用效果研究[D]. 康孟阳. 西北农林科技大学, 2016(11)
- [6]一种马细管冻精制作方法研究[D]. 孙腾飞. 西北农林科技大学, 2014(02)
- [7]不同解冻方法对马细管、颗粒冻精质量的影响[J]. 段洪云,张翔,孙玉玲,邓亮,韩国才. 中国畜牧杂志, 2013(13)
- [8]安徽白山羊精液冷冻保存技术研究[D]. 张育军. 安徽农业大学, 2010(04)
- [9]LDL和多糖在猪精液冷冻保存中的作用研究[D]. 江中良. 西北农林科技大学, 2010(10)
- [10]影响牛冻精质量的生产因素研究[D]. 尹旭升. 山东农业大学, 2009(02)