一、辅酶Q_(10)治疗“乙脑”疗效显着——附118例疗效分析(论文文献综述)
叶静[1](2008)在《乙型脑炎重组杆状病毒疫苗的研究》文中指出日本乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)简称乙脑,是一种由乙脑病毒(Japaneseencephalitis virus,JEV)引起的人畜共患传染病。该病可引起种猪繁殖障碍,给养猪业造成了巨大的经济损失。同时,乙型脑炎还是人类中枢神经系统最常见的虫媒病之一,病死率约为25%,存活者约半数留下永久性的神经系统后遗症,对人类,尤其是对儿童和老年人危害特别严重。大规模的疫苗接种是该病的主要防制措施。但现有乙型脑炎疫苗,无论是灭活疫苗还是弱毒活疫苗都存在一定的缺陷,所以研制安全、高效、廉价的新型疫苗成为越来越多研究者关注的焦点。本研究通过适当修饰的杆状病毒表达系统介导乙脑病毒主要的免疫原性蛋白E蛋白在哺乳动物体内的表达,并对该重组杆状病毒所诱导的抗原特异性免疫反应以及对致死性乙脑病毒的保护力进行评价。具体研究内容如下:1.表达JEV E蛋白的重组杆状病毒的构建用BglⅡ和NotⅠ双酶切真核表达质粒pc-E,获得CMV-E表达框并插入到用BamHⅠ和NotⅠ双酶切的转移载体pFast-VSV-G中,构建重组转移质粒pFast-G-E。将转移质粒pFast-G-E转化DH10Bac大肠杆菌,通过蓝白斑菌落及抗性筛选,获得重组穿梭载体Bacmid-G-E。利用脂质体介导转染法,将提取的重组Bacmid-G-E DNA转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-G-E。将扩增得到的高滴度的重组病毒转导PK-15细胞,并通过间接免疫荧光实验和western blotting分析证实E基因在哺乳动物细胞中得到了表达。2.重组杆状病毒BV-G-E的免疫原性研究将重组病毒分别以不同的剂量(1010pfu/mL、109pfu/mL、108pfu/mL,100μL/只)肌肉注射免疫小鼠,分别从体液免疫反应和细胞免疫反应方面对其免疫效果进行了评价,并与常规DNA疫苗pc-E进行了比较。试验结果表明,重组杆状病毒BV-G-E各剂量组诱导小鼠产生的ELISA抗体水平和中和抗体水平均显着高于DNA疫苗pc-E组,并且重组杆状病毒的免疫剂量越高,所产生的抗体水平也就越高。细胞免疫反应水平表现出与体液免疫反应水平相似的趋势,BV-G-E 1010pfu/mL免疫组的诱导小鼠脾细胞产生的IFN-γ水平显着高于其它免疫组。3.重组杆状病毒BV-G-E对致死性乙脑强毒的免疫保护力研究利用致死性乙脑病毒对首免6周后各免疫组小鼠进行腹膜内攻毒,3周内观察各组小鼠存活率,结果表明:各免疫小组中,重组杆状病毒BV-G-E 1010 pfu/mL免疫组的存活率最高,达到80%,显着高于DNA疫苗pc-E组(50%)。另外,为了更进一步分析重组杆状病毒BV-G-E是否能够有效抑制JEV突破血脑屏障进入小鼠脑组织,我们用荧光定量PCR法检测各组存活小鼠脑组织中的JEV相对含量,结果显示,BV-G-E1010pfu/mL免疫组小鼠脑组织中JEV的含量极显着低于其他各免疫组。由此看来,不管是免疫反应水平还是免疫保护力,重组杆状病毒BV-G-E 1010pfu/mL免疫组均表现出最佳效果,有望发展成为一种新型的乙脑候选疫苗。
王函[2](2008)在《消癜汤对过敏性紫癜疗效观察及其对患者IL-2影响的研究》文中进行了进一步梳理目的:观察消癜汤治疗过敏性紫癜(Henoch-sch(o|¨)nlein purpura,HSP)的临床疗效,并通过检测HSP患者治疗前后血清白介素2(interleukin-2,IL-2)水平变化情况,探讨HSP发病机制及消癜汤的作用机理。方法:将52例HSP患者分为治疗组26例和对照组26例,治疗组服消癜汤,对照组用泼尼松,比较两组的临床疗效。并分别采集患者治疗前后的血清标本,应用酶联免疫吸附分析法(Enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)检测血清IL-2的含量变化。结果:1.治疗组和对照组的总有效率分别为92.0%和88.0%,两组比较无显着差异性(P>0.05)。2.治疗组在缓解皮肤损害及因肾脏损害而出现的血尿、蛋白尿等方面疗效显着,优于泼尼松对照组(P<0.05)。3.HSP患者治疗前血清IL-2水平明显低于正常,疗后治疗组及对照组血清IL-2水平均有明显的升高(P<0.05),但仍低于正常组(P<0.05)。结论:1.消癜汤与泼尼松治疗HSP的疗效相当,但在消除HSP的临床症状,降低肾脏损害方面优于泼尼松,提示消癜汤是治疗HSP的有效方剂。2.HSP患者血清IL-2水平降低,服用消癜汤后可明显升高,提示消癜汤可纠正HSP患者免疫功能紊乱状态,减轻免疫损伤,使症状得以缓解。
胡炜彦[3](2007)在《茄呢醇提取工艺研究和益妙保尔金米胶囊抗肿瘤活性评价》文中进行了进一步梳理【目的】1.建立茄呢醇的含量测定方法,对从烟叶中提取茄呢醇的工艺进行研究;2.评价益妙保尔金米胶囊的抗肿瘤活性及急性毒性。【方法】1.应用高效液相色谱法,采用DIKma C18色谱柱(150 mm×4.6mm,5μm),甲醇-异丙醇(52:48)作为流动相,流速:0.8 mL/min-1,检测波长为210 nm,进样量20μL,用标准曲线法测定茄呢醇的含量。2.以游离茄尼醇为指标,采用正交试验及比较试验,考虑提取溶剂、方法、时间等因素,对提取工序进行考察;以游离茄尼醇为指标,采用正交试验,考虑皂化物、溶剂、时间、浓度、温度、皂化溶液体积等因素,对皂化工序进行考察。3.采用改良MTT法,测定益妙保尔金米胶囊对小鼠结肠癌细胞株(CT-26)和胃癌细胞株(MFC)体外生长的抑制率,计算半数抑制浓度IC50;将40只CT-26结肠癌皮下接种模型小鼠和40只MFC胃癌皮下接种模型小鼠分别随机分成4组:阴性对照组(等体积生理盐水)、阳性对照组(香菇菌多糖片,0.5 mg/20g/日或康力欣胶囊,0.075g/20g/日)、低剂量组(益妙保尔金米胶囊粉末,0.0834g/20g/日)、高剂量组(益妙保尔金米胶囊粉末,0.2501 g/20g/日)。均采用接种5天后灌胃给药法,持续给药8天,停药24小时后,处死动物。剥离肿瘤,称重并计算抑瘤率;取出脾脏及胸腺,称重并计算脾指数及胸腺指数。【结果】1.方法学考察结果表明,茄呢醇的线性范围为0.56-2.80μg,相关系数r=0.9995,平均加样回收率100.2%(n=9),精密度RSD=1.19%;烟叶提取物中游离茄呢醇的含量在8%-12%之间。2.从烟叶中提取茄呢醇的提取、皂化工序工艺参数不同,茄呢醇收率相差极大,本实验所得较好的提取工艺为:10倍量的95%乙醇,50℃回流提取120分钟或超声波连续提取30分钟,较好的皂化条件为:在乙醇溶液中,以3倍量2.0 mol/L的NaOH为皂化试剂,60℃皂化4小时。3.益妙保尔金米胶囊无明显的抑制小鼠结肠癌细胞株(CT-26)和胃癌细胞株(MFC)体外生长的活性,对小鼠结肠癌细胞株(CT-26)和胃癌细胞株(MFC)体内生长显示出了明显的抑制作用,与生理盐水组比较,对小鼠结肠癌细胞株(CT-26)高剂量组的抑瘤率为30.26%,低剂量组的抑瘤率为25.74%,对小鼠胃癌细胞株(MFC)高剂量组的抑瘤率为29.35%,低剂量组的抑瘤率为20.53%。【结论】1.实验用茄呢醇含量测定方法具有良好的精密度、准确度和灵敏度,以此法测定游离茄呢醇的含量可行。2.益妙保尔金米胶囊粉末对小鼠结肠癌细胞株(CT-26)和胃癌细胞株(MFC)体内生长有一定的抑制作用,且无明显的量效关系。3.采取超声波提取可以大大提高原料的提取效率,从烟叶中提取茄呢醇,提取皂化工序工艺参数选择十分重要,应该进行深入研究。
张同霞,孙灵娅,曹丽梅[4](1998)在《辅酶Q10的临床应用》文中提出
韩存年,冯宗明,韩全党,杨薇,王炳文,牛清梅,杨建军,魏中银,王新伟[5](1991)在《辅酶Q10治疗“乙脑”疗效显着——附118例疗效分析》文中研究表明我们自一九八五年七月至一九九0年九月对118例住院流行性乙型脑炎患者应用辅酶Q10治疗(下称治疗组),疗效满意,并与非辅酶Q10治疗组(下称对照组)作回顾性对比.现将临床治疗观察结果报告如下.一、临床资料两组病例均发生在七、八、九三个月,治疗组118例中,男性68例,女性50例,年龄均在6个月至22岁之间,平均年龄5.5岁.其中12岁以内110例,13至22岁8例.初期患者98例、极期患
二、辅酶Q_(10)治疗“乙脑”疗效显着——附118例疗效分析(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、辅酶Q_(10)治疗“乙脑”疗效显着——附118例疗效分析(论文提纲范文)
(1)乙型脑炎重组杆状病毒疫苗的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略语表(Abbreviation) |
第一章 文献综述 |
1.1 乙脑的历史及流行病学 |
1.1.1 乙脑的历史 |
1.1.2 乙脑的流行病学 |
1.2 乙脑的病原学特性 |
1.2.1 病毒的分类及理化特性 |
1.2.2 乙脑的生物学特性 |
1.2.3 致病机制 |
1.3 乙脑病毒的分子生物学特性 |
1.3.1 基因结构与功能 |
1.3.2 蛋白质 |
1.3.2 非结构蛋白 |
1.4 乙脑的诊断方法 |
1.4.1 病原学诊断 |
1.4.2 血清学诊断 |
1.4.3 其他诊断方法 |
1.5 乙脑的防治 |
1.6 乙脑疫苗研究进展 |
1.6.1 乙脑传统疫苗 |
1.6.2 乙脑新型疫苗 |
1.7 杆状病毒表达载体研究进展 |
1.7.1 杆状病毒表达系统简介 |
1.7.2 杆状病毒作为哺乳动物细胞表达载体的研究 |
1.7.3 杆状病毒作为哺乳动物细胞表达载体在疫苗研究中的应用 |
第二章 研究目的和意义 |
第三章 材料与方法 |
3.1 实验材料 |
3.1.1 毒株、细胞与菌种 |
3.1.2 载体与质粒 |
3.1.3 主要药品及试剂 |
3.1.4 本研究中所用的寡核苷酸引物 |
3.1.5 主要培养基及其配制 |
3.1.6 缓冲液 |
3.1.7 实验动物 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 限制性内切酶酶切反应 |
3.2.2 PCR产物或酶切产物的电泳检测 |
3.2.3 PCR或酶切产物的回收与纯化 |
3.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) |
3.2.5 连接产物的转化 |
3.2.6 质粒的小量制备(改良的碱裂解法) |
3.2.7 质粒的大量制备(碱裂解法) |
3.2.8 脂质体介导转化法(Lipfectin2000,Invitrogen Corp.) |
3.2.9 构建重组杆状病毒的操作流程 |
3.2.10 重组穿梭载体(Bacmid)的构建 |
3.2.11 重组穿梭载体(Bacmid)的提取 |
3.2.12 重组杆状病毒获得 |
3.2.13 重组杆状病毒转导PK-15细胞 |
3.2.14 间接免疫荧光试验(IFA)检测目的蛋白的体外表达 |
3.2.15 Western blot检测目的蛋白的体外表达 |
3.2.16 杆状病毒介导的表达JEVE的重组毒疫苗动物试验 |
3.2.17 E-ELISA方法的建立 |
3.2.18 微量中和试验 |
3.2.19 小鼠脾淋巴细胞的分离 |
3.2.20 实时荧光定量PCR检测免疫小鼠脾细胞中的IFN-γ相对表水平 |
3.2.21 IFN-γ的定量检测(双抗体夹心ELISA) |
3.2.22 实时荧光定量PCR检测攻毒小鼠脑组织内JEV相对含量 |
3.2.23 统计学方法 |
第四章 结果与分析 |
4.1 表达JEV E基因的DNA疫苗pc-E的构建 |
4.1.1 真核表达质粒pc-E的构建 |
4.1.2 pc-E介导E基因在哺乳动物细胞中的表达 |
4.2 表达JEV E蛋白的重组杆状病毒BV-G-E的构建 |
4.2.1 转移载体pFast-G-E的构建 |
4.2.2 重组穿梭载体(bacmid-G-E)的构建 |
4.2.3 重组杆状病毒BV-G-E的获得 |
4.2.4 重组杆状病毒BV-G-E介导E蛋白在哺乳动物中的表达情况 |
4.2.5 重组杆状病毒BV-G-E的纯化与毒价的测定 |
4.3 重组杆状病毒BV-G-E的小鼠免疫试验 |
4.3.1 免疫小鼠的ELISA抗体水平 |
4.3.2 免疫小鼠的中和抗体水平 |
4.3.3 实时荧光定量PCR检测免疫小鼠脾细胞中IFN-γ mRNA表达 |
4.3.4 ELISA法检测免疫小鼠脾细胞分泌的IFN-γ水平 |
4.3.5 杆状病毒BV-G-E对致死性JEV的保护率 |
4.3.6 实时荧光定量PCR检测攻毒小鼠脑组织中JEV含量 |
第五章 讨论与结论 |
5.1 讨论 |
5.1.1 VSV-G对杆状病毒载体的修饰 |
5.1.2 杆状病毒转导哺乳动物细胞的方法 |
5.1.3 重组杆状病毒诱导的免疫反应 |
5.1.4 重组杆状病毒对致死性乙脑强毒的保护力 |
5.2 结论 |
参考文献 |
致谢 |
附录 |
(2)消癜汤对过敏性紫癜疗效观察及其对患者IL-2影响的研究(论文提纲范文)
缩略语表 |
中文摘要 |
英文摘要 |
前言 |
文献综述 |
一.祖国医学对过敏性紫癜的研究进展 |
1.病名溯源及证候表现 |
2.病因病机 |
3.治疗的研究 |
二.现代医学对过敏性紫癜的研究进展 |
1.病因学研究进展 |
2.发病机制研究进展 |
3.现代医学对过敏性紫癜的治疗进展 |
临床研究 |
试验研究 |
讨论 |
1.立方依据 |
2.消癜汤的组方原则及方药分析 |
3.IL-2与HSP |
4.消癜汤与激素治疗HSP结果分析 |
5.消癜汤对HSP患者血清IL-2水平的影响 |
结论 |
致谢 |
参考文献 |
个人简历 |
(3)茄呢醇提取工艺研究和益妙保尔金米胶囊抗肿瘤活性评价(论文提纲范文)
中文摘要 |
英文摘要 |
第一章 茄呢醇含量测定方法研究 |
1.1 引言 |
1.2 仪器和试剂 |
1.3 方法和结果 |
1.3.1 色谱条件 |
1.3.2 对照品溶液的制备 |
1.3.3 供试品溶液的制备 |
1.3.4 对照品含量测定 |
1.3.5 方法学考察 |
1.3.6 样品含量测定 |
1.4 小结与讨论 |
参考文献 |
第二章 从烟叶中提取茄呢醇的工艺研究 |
2.1 引言 |
2.2 仪器和试剂 |
2.3 方法和结果 |
2.3.1 指标成分茄呢醇含量测定方法的建立 |
2.3.2 提取工艺考察 |
2.3.3 皂化工艺考察 |
2.4 小结与讨论 |
参考文献 |
第三章 益妙保尔金米胶囊抗肿瘤的活性评价 |
3.1 引言 |
3.2 试剂与材料 |
3.2.1 供试品 |
3.2.2 受试细胞株 |
3.2.3 实验动物 |
3.2.4 实验材料 |
3.3 方法和结果 |
3.3.1 方法 |
3.3.2 结果 |
3.4 急性毒性实验 |
3.4.1 供试品和材料 |
3.4.2 方法和结果 |
3.5 讨论与小结 |
参考文献 |
第四章 单甲基斑蝥素提取分离 |
4.1 引言 |
4.2 化合物结构图 |
4.3 实验研究 |
4.3.1 仪器和材料 |
4.3.2 提取和分离 |
4.3.3 化合物结构鉴定 |
4.3.4 化合物的物理常数和波谱数据 |
4.4 小结与讨论 |
参考文献 |
辅酶Q_(10)的应用及前景展望(综述) |
前言 |
1.药理作用 |
2.应用 |
3.辅酶Q_(10)的制备方法及目前生产状况 |
4.市场前景及存在的问题 |
参考文献 |
致谢 |
已发表和接受发表的文章 |
四、辅酶Q_(10)治疗“乙脑”疗效显着——附118例疗效分析(论文参考文献)
- [1]乙型脑炎重组杆状病毒疫苗的研究[D]. 叶静. 华中农业大学, 2008(02)
- [2]消癜汤对过敏性紫癜疗效观察及其对患者IL-2影响的研究[D]. 王函. 黑龙江中医药大学, 2008(01)
- [3]茄呢醇提取工艺研究和益妙保尔金米胶囊抗肿瘤活性评价[D]. 胡炜彦. 昆明医学院, 2007(06)
- [4]辅酶Q10的临床应用[J]. 张同霞,孙灵娅,曹丽梅. 中国农村医学, 1998(06)
- [5]辅酶Q10治疗“乙脑”疗效显着——附118例疗效分析[J]. 韩存年,冯宗明,韩全党,杨薇,王炳文,牛清梅,杨建军,魏中银,王新伟. 临床荟萃, 1991(02)